CN103734009B - 一种红掌组织培养的方法 - Google Patents
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Abstract
一种红掌组织培养的方法，包括步骤①愈伤组织诱导、②不定芽分化、③不定芽继代增殖、末道步骤移栽后养护管理，其特征在于：步骤③当再生苗团块中苗长到株高2cm以上，根1～3条时即作为后续移栽再生苗团块；步骤④：移栽前两周将再生苗团块转移至温室大棚炼苗，移栽前3～5天，打开组织培养瓶瓶盖；步骤⑤大团块应切割成小团块并将株高3cm以上的带根试管苗切下，放入百菌清药液中浸泡30分钟；步骤⑥采用泥炭土或泥炭土、珍珠岩、河沙为栽培基质，移栽再生苗团块和试管苗，基质应距育苗筛盘口1～1.5cm；以小团块作一个移栽单位，以试管苗2～3株作一个移栽单位；步骤⑦移栽后养护管理。提高了试管苗环境适应能力，成活率提高了8％。
Description
技术领域：
本发明涉及植物组培技术，特别是一种红掌组织培养的方法。
背景技术：
红掌(Anthurium adndraeanum)为天南星科花烛属多年生常绿草本植物，可作盆花和切花使用，是当今世界最受欢迎的名贵花卉之一，具有很高的观赏价值和经济价值。
在红掌组织培养研究方面，前人采用了以下步骤：
①愈伤组织诱导。在红掌愈伤组织诱导培养中，将其消毒后的幼嫩叶片接种在含有植物生长调节剂2，4-D0.1～1.0mg/L+6-BA1.0～2.0mg/L组合的改良MS培养基上诱导脱分化形成愈伤组织；
②不定芽分化。在不定芽分化培养中，将诱导后的愈伤组织接种到含有植物生长调节剂6-BA0.2～1.0mg/L+KT0.3～1.0mg/L组合或6-BA0.5mg/L+NAA0.1mg/L组合或TDZ0.02mg/L的改良MS培养基上分化产生不定芽；
③不定芽继代增殖。在不定芽继代增殖培养中，将分化后不定芽在含有植物生长调节剂6-BA0～0.8mg/L+KT0～0.8mg/L组合或TDZ0.01～0.02mg/L的改良MS培养基上继代增殖培养可进一步形成完整再生植株组培苗再生苗团块。
④组培苗炼苗。当苗高3cm左右、且带2～3根时即可打开瓶盖直接炼苗1周。
⑤组培苗移栽。将组培苗再生团块分切成单苗后，移栽装有泥炭土与珍珠岩比例为4∶1基质的穴盘中。
末道步骤：移栽后养护管理。
a移栽完后，先浇透定根水，再用稀释800倍百菌清可湿性粉剂喷洒一次。
b移栽后2周内，保持温度18～28℃，湿度80％以上，光照强度5000LX左右。
c移栽两周后，小苗进入正常养护管理，经过3个月养护，小苗根系发达，株高8cm以上。
目前，红掌种苗繁殖方法大多采用植物组织培养方法，其依据植物细胞全能性原理，离体培养红掌植株根、茎、叶和花序等小块组织，进行红掌离体快繁的工厂化育苗技术。前人报道该工厂化育苗技术主要有两种工艺流程：(1)愈伤组织的诱导→不定芽的分化→不定芽的继代增殖→试管苗的壮苗→试管苗的生根→试管苗的驯化移栽(包括炼苗、移栽和移栽后养护管理步骤)；；(2)愈伤组织的诱导→不定芽的分化→不定芽的继代增殖→试管苗的驯化移栽(包括炼苗、移栽和移栽后养护管理步骤)。但是，第一种工艺流程存在工艺流程过长、生产成本高和种苗变异率高等缺点，而第二种工艺流程虽然是在第一种工艺流程基础上进行了精简，节省了试管苗壮苗环节和试管苗生根环节中人工费、药品费和水电费等生产成本且能降低种苗变异率，但其在试管苗驯化移栽环节，由于主要采用了红掌组培苗再生苗团块分切成单苗驯化移栽和穴盘育苗，致使分切单苗驯化移栽成本高、小苗移栽管理技术复杂和生产效率低。
发明内容：
本发明基于上述研究技术背景，比较研究了红掌组培苗再生苗团块分切单株苗驯化移栽和红掌组培苗再生苗团块直接驯化移栽，以及穴盘育苗和筛盘育苗生长状况，提供一种红掌组织培养的方法。
本发明的方案是：包括步骤①愈伤组织的诱导、②不定芽的分化、③不定芽的继代增殖、末道步骤的移栽后养护管理，其特征在于：步骤③不定芽的继代增殖中当再生苗团块中苗长到株高2cm以上，根1～3条时即作为后续驯化移栽的红掌组培苗再生苗团块；
步骤④红掌组培苗再生苗团块炼苗
移栽前两周将所述红掌组培苗再生苗团块转移至温室大棚炼苗，温室温度控制在18～28℃，湿度50％，光照强度2000～5000LX，移栽前3～5天，打开组织培养瓶瓶盖，以逐渐提高其环境适应能力；
步骤⑤红掌组培苗再生苗团块分切和消毒
从组织培养瓶中取出所述红掌组培苗再生苗团块，若团块为大团块(苗5株以上的团块称大团块)应切割成小团块(苗3～5株的团块为小团块)，并将团块中株高3cm以上的带根试管苗切下，然后，将小团块和株高3cm以上带根试管苗分别放入稀释1000倍百菌清药液中浸泡30分钟；
步骤⑥红掌组培苗再生苗团块移栽
采用泥炭土或泥炭土、珍珠岩、河沙体积比例为8∶1∶1基质为栽培基质。用育苗筛盘移栽步骤⑤所述红掌组培苗再生苗团块和试管苗，在装基质之前先在其底部铺一层薄的无纺布，装好的基质应距育苗筛盘口1～1.5cm；以步骤⑤所述再生苗小团块(苗3～5株的再生苗团块)作一个移栽单位进行移栽。移栽的试管苗以步骤⑤所述试管苗2～3株作一个移栽单位进行移栽；
步骤⑦进入末道步骤：移栽后养护管理。
本发明的优点在于：
本发明在炼苗步骤中通过两段渐进式炼苗方法，提高了试管苗环境适应能力，比直接打开瓶盖炼苗方法试管苗成活率提高了8％。
本发明驯化移栽的是红掌组培苗再生苗团块，减少了红掌组培苗再生苗团块分切成单苗后进行驯化移栽的工作量，从而可节约劳动成本，提高效率。
本发明以育苗筛盘移栽红掌再生苗团块方法可充分提供小苗生长所需的水分、养分和空间，减少浇水和施肥次数且再生苗团块移栽还可以发挥小苗的群体效应，增强对外界不良环境的抵抗能力，从而达到简化小苗移栽管理技术，提高生产效率目的。
具体实施方式：
实施例一：
步骤①组愈伤组织诱导。
将其消毒后的幼嫩叶片接种在含有植物生长调节剂2，4-D0.4mg/L+6-BA1.0mg/L组合的改良MS培养基上诱导脱分化形成愈伤组织。
步骤②不定芽分化。
将诱导后的愈伤组织接种到含有植物生长调节剂6-BA0.5mg/L+NAA0.1mg/L组合改良MS培养基上分化产生不定芽。
步骤③不定芽继代增殖。
将分化后不定芽在含有植物生长调节剂6-BA0.3mg/L+KT0.1mg/L组合改良MS培养基上继代增殖培养可进一步形成完整再生植株组培苗再生苗团块。待再生苗团块中苗长到株高2cm以上，根1～3条即可作为后续驯化移栽的红掌组培苗再生苗团块。
步骤④红掌组培苗再生苗团块炼苗
移栽前两周将所述红掌组培苗再生苗团块转移至温室大棚炼苗，温室温度控制在18～28℃，湿度50％，光照强度2000～5000LX，移栽前3～5天，打开组织培养瓶瓶盖，以逐渐提高其环境适应能力；
步骤⑤红掌组培苗再生苗团块分切和消毒。
从组织培养瓶中取出所述红掌组培苗再生苗团块，若团块为大团块(苗5株以上的团块称大团块)应切割成小团块(苗3～5株的团块为小团块)，并将团块中株高3cm以上的带根试管苗切下，然后，将小团块和株高3cm以上带根试管苗分别放入稀释1000倍百菌清药液中浸泡30分钟。
步骤⑥红掌组培苗再生苗团块移栽。
采用泥炭土或泥炭土、珍珠岩、河沙体积比例为8∶1∶1基质为栽培基质。基质要求通透性好，呈弱酸性，EC值低，水肥保持能力强，不含危害红掌生长的病原菌和杂草种子。用育苗筛盘移栽步骤⑤所述红掌组培苗再生苗团块和试管苗，在装基质之前先在其底部铺一层薄的无纺布，装好的基质应距育苗筛盘口1～1.5cm。以步骤⑤所述再生苗小团块(苗3～5株的再生苗团块)作一个移栽单位进行移栽。
末道步骤：移栽后养护管理。
a移栽完后，先浇透定根水，再用稀释800倍百菌清可湿性粉剂喷洒一次。
b移栽后两周内，保持温度18～28℃，湿度80％以上，光照强度5000LX左右。
c移栽两周后，小苗进入正常养护管理，经过三个月养护，小苗根系发达，株高可达10cm左右。
实施例二：
步骤①愈伤组织诱导。
将其消毒后的幼嫩叶片接种在含有植物生长调节剂2，4-D0.4mg/L+6-BA1.0mg/L组合的改良MS培养基上诱导脱分化形成愈伤组织。
步骤②不定芽分化。
将诱导后的愈伤组织接种到含有植物生长调节剂6-BA0.5mg/L+NAA0.1mg/L组合改良MS培养基上分化产生不定芽。
步骤③不定芽继代增殖。
将分化后不定芽在含有植物生长调节剂6-BA0.3mg/L+KT0.1mg/L组合改良MS培养基上继代增殖培养可进一步形成完整再生植株组培苗再生苗团块。待再生苗团块中苗长到株高2cm以上，根1～3条即可作为后续驯化移栽的红掌组培苗再生苗团块。
步骤④红掌组培苗再生苗团块炼苗
移栽前两周将所述红掌组培苗再生苗团块转移至温室大棚炼苗，温室温度控制在18～28℃，湿度50％，光照强度2000～5000LX，移栽前3～5天，打开组织培养瓶瓶盖，以逐渐提高其环境适应能力；
步骤⑤红掌组培苗再生苗团块分切和消毒。
从组织培养瓶中取出所述红掌组培苗再生苗团块，若团块为大团块(苗5株以上的团块称大团块)应切割成小团块(苗3～5株的团块为小团块)，并将团块中株高3cm以上的带根试管苗切下，然后，将小团块和株高3cm以上带根试管苗分别放入稀释1000倍百菌清药液中浸泡30分钟。
步骤⑥红掌试管苗移栽。
采用泥炭土或泥炭土、珍珠岩、河沙体积比例为8∶1∶1基质为栽培基质。基质要求通透性好，呈弱酸性，EC值低，水肥保持能力强，不含危害红掌生长的病原菌和杂草种子。用育苗筛盘移栽步骤⑤所述红掌组培苗再生苗团块和试管苗，在装基质之前先在其底部铺一层薄的无纺布，装好的基质应距育苗筛盘口1～1.5cm。以步骤⑤所述试管苗2～3株作一个移栽单位进行移栽。
末道步骤：移栽后养护管理。
a移栽完后，先浇透定根水，再用稀释800倍百菌清可湿性粉剂喷洒一次。
b移栽后两周内，保持温度18～28℃，湿度80％以上，光照强度5000LX左右。
c移栽两周后，小苗进入正常养护管理，经过三个月养护，小苗根系发达，株高可达12cm左右。
Claims (1)
1.一种红掌组织培养的方法，包括步骤①愈伤组织的诱导、②不定芽的分化、③不定芽的继代增殖、末道步骤的移栽后养护管理，其特征在于：步骤③不定芽的继代增殖中当再生苗团块中苗长到株高2cm以上，根1～3条时即作为后续驯化移栽的红掌组培苗再生苗团块；
步骤④红掌组培苗再生苗团块炼苗：
移栽前两周将所述红掌组培苗再生苗团块转移至温室大棚炼苗，温室温度控制在18～28℃，湿度50％，光照强度2000～5000LX，移栽前3～5天，打开组织培养瓶瓶盖，以逐渐提高其环境适应能力；
步骤⑤红掌组培苗再生苗团块分切和消毒：
从组织培养瓶中取出所述红掌组培苗再生苗团块，若团块为苗5株以上的大团块，应切割成苗3～5株的小团块，并将团块中株高3cm以上的带根试管苗切下，然后，将小团块和株高3cm以上带根试管苗分别放入稀释1000倍百菌清药液中浸泡30分钟；
步骤⑥红掌组培苗再生苗团块移栽：
采用泥炭土或泥炭土、珍珠岩、河沙体积比例为8∶1∶1基质为栽培基质，用育苗筛盘移栽步骤⑤所述红掌组培苗再生苗团块和试管苗，在装基质之前先在其底部铺一层薄的无纺布，装好的基质应距育苗筛盘口1～1.5cm；以步骤⑤苗3～5株的小团块作一个移栽单位进行移栽，移栽的试管苗以步骤⑤所述试管苗2～3株作一个移栽单位进行移栽；
步骤⑦进入末道步骤：移栽后养护管理。
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