CN103704387B - 一种国酒香茶叶 - Google Patents
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Abstract
本发明属于食品技术领域，具体涉及一种国酒香茶叶，所述的国酒香茶叶由1-40重量份石斛或茶槲寄生、0.01-10重量份产酱香功能菌、1-50重量份茶叶组成。本发明提供了一种国酒香茶叶的制备方法，采用本发明方法得到茶叶成既具有醇厚酒香又包含茶叶中的茶多酚等生理活性物质的国酒香茶叶，该茶叶满足现代人对健康的追求，可以在饮茶的同时也满足对酒香的需要。
Description
技术领域
本发明属于食品技术领域，具体涉及一种国酒香茶叶。
背景技术
我国是世界上酿酒最早的国家之一，品种繁多，以果酒和米酒居多，而且度数偏高，人长期饮用就会中毒，轻者会出现头晕，头疼，恶心，呕吐，视力模糊等症，重者会出现呼吸困难，昏迷甚至死亡。随着社会的发展进步，人们越来越认识到长期饮用高度酒对身体的危害，于是应运而生了各种低度的果露酒，奶酒，药酒等。而茶也是我国人民生活的必需品，同时具有较好的解酒效果，现在饮用的茶叶品种繁多、花色各异，但还未见将茶叶与酒进行结合产品。
发明内容
本发明的目的是利用发酵技术提供一种国酒香茶叶及其制造方法。在本发明的工艺条件下，制成既具有醇厚酒香又包含茶叶中的茶多酚等生理活性物质的国酒香茶叶。该茶叶满足现代人对健康的追求，可以在饮茶的同时也满足对酒香的需要。
本发明通过下述技术方案实现的。
一种国酒香茶叶，由1-40重量份石斛或茶槲寄生、0.01-10重量份产酱香功能菌、1-50重量份茶叶组成。
所述的石斛是天然石斛或人工种植石斛或石斛组织培养物。
所述的茶槲寄生是天然茶槲寄生或人工种植茶槲寄生或茶槲寄生组织培养物。
所述的石斛组织培养物或茶槲寄生组织培养物由以下方法制备：
步骤1：切取石斛或茶槲寄生嫩茎节，在无菌环境下用75％的酒精浸泡1-10min，再用0.1％氯化汞溶液或2％次氯酸钠浸泡1-20min，无菌水冲洗3-5遍后切成0.1-1cm组织块，将其接种到由1/2MS培养基、1-80g/L茶叶或苔藓组成的固体培养基培养，得到无菌植株；
步骤2：切取步骤1所得的无菌植株的茎段接种到pH值为4-9的培养基上进行愈伤组织诱导培养，所述的培养基由MS培养基、0.1-10mg/L的6-BA、0.1-1mg/L的NAA、1-80g/L茶叶或苔藓、3-30g/L琼脂组成或由MS、1-80g/L茶叶或苔藓、1-200g/L马铃薯汁、3-30g/L琼脂组成；
步骤3：取步骤2中愈伤组织接种到pH4-9的培养基A及pH4-9的培养基B中在光照强度为1000-8000Lx，培养温度为10-39℃条件下交替培养直至分化出小苗，得到石斛组织培养物或茶槲寄生组织培养物；
所述的培养基A由1/2MS培养基、10-60g/L蔗糖、1-200g/L马铃薯汁、1-80g/L茶叶或苔藓、3-30g/L琼脂组成；
所述的培养基B由N6培养基、1-80g/L茶叶或苔藓、0-10g/L活性炭、30-200g/L香蕉、10-60g/L蔗糖、3-30g/L琼脂组成。
所述的酱香功能菌为从酱香型酒高温大曲中分离出的细菌。
所述的酱香功能菌包括红曲霉、地衣芽孢杆菌、枯草芽孢杆菌、嗜热芽孢杆菌、解淀粉芽孢杆菌、纳豆芽孢杆菌的一种或几种。
所述的石斛、茶槲寄生、茶叶的含水量均在5-55％之间。
所述的国酒香茶叶由以下方法制备：
步骤1：将石斛或茶槲寄生切成直径0.05-0.2cm、长1-2cm的细条或直接使用其组织培养物整株小苗，在自然萎凋后用微波杀青设备进行杀青处理，时间为10-300min，功率为1-10kW，频率为2450±50MHZ；
步骤2：将步骤1所得的石斛或茶槲寄生和茶叶混配后在温度20-35℃、相对湿度25-90％条件下揉捻5-75min制成混合物；
步骤3：将发酵营养液均匀喷洒到混合物上面，重复2-10次并不断翻动直至喷透，然后置于15-60℃，相对湿度30-90％条件下发酵10-200h，在发酵过程中可以向混合物补喷发酵营养液；所述的发酵营养液由葡萄糖、蔗糖、麸皮浸出汁、产酱香功能菌在麸皮浸出汁中的发酵萃取物、甘氨酸、脯氨酸、类胡萝卜素、产酱香功能菌重悬液、β-葡萄糖苷、高粱提取物的一种或几种组成；
步骤4：发酵完成后再向发酵混合物喷一次发酵营养液后用烘箱迅速升温至85-120℃保温1-50h进行美拉德反应；
步骤5：将混合物于15-39℃相对湿度为30-90％的恒温恒湿箱平衡1-50h；
步骤6：将经步骤5发酵平衡后混合物在温度为110-200℃的炒锅中快炒1-10min后再复揉1-10min；
步骤7：复揉后用手工焙笼或微波远红外设备干燥提香，于85-125℃下进行0.1-8h的烘焙；干燥至含水量4-8％后获得具有茅台酒一样香气的茶叶；所述的微波频率为2450±50MHz，远红外线波长为2-30μm。
所述的产酱香功能菌由以下方法制备：
步骤1：在无菌条件下取酱香型白酒生产制曲、堆积酒醅和发酵期酒醅，分别加入装有玻璃珠的90g无菌生理盐水中，在20-39℃、20-200rpm振荡培养1-15小时；
步骤2：取上清液梯度稀释涂布于分离培养基上，于20-39℃培养1-50小时；挑取单菌落，经多次平板划线纯化后，再转接2-5代后挑2环菌株于装有100ml液体分离培养基的250ml摇瓶中，在20-39℃、20-200rpm振荡培养1-50小时，即制得菌株发酵液；所述分离培养基由0.1-30g/L葡萄糖、1-50g/L胰化蛋白胨、1-30g/L酵母膏、1-90g/L黑木耳汁、0.1-20g/L氯化钠、0.1-10g/L硫酸镁，0.1-10g/L磷酸二氢钾、3-30g/L琼脂组成，经121℃灭菌20min后去掉琼脂即得液体分离培养基；
步骤3：将步骤2所得的菌株发酵液在4℃条件下，以3000r/min-10000r/min离心2min-20min，弃上清液得到湿菌体，用生理盐水清洗除去培养基后制成冻干粉保藏于4℃冰箱备用。
实施例
实施例1
一种国酒香茶叶，由40g天然石斛、10g红曲霉、50g茶叶组成。
红曲霉的制备方法：
步骤1：在无菌条件下，取10g酱香型白酒生产制曲、5g堆积酒醅和8g发酵期酒醅，分别加入装有玻璃珠的90g无菌生理盐水中，在25℃、150rpm振荡培养7小时；
步骤2：取上清液梯度稀释涂布于分离培养基上，于28℃培养20小时；挑取单菌落，经多次平板划线纯化后，再转接4代后挑2环菌株于装有100ml液体分离培养基的250ml摇瓶中，在26℃、80rpm振荡培养35小时，即制得菌株发酵液；所述分离培养基由30g/L葡萄糖、25g/L胰化蛋白胨、20g/L酵母膏、70g/L黑木耳汁、8g/L氯化钠、6g/L硫酸镁，3g/L磷酸二氢钾、10g/L琼脂组成，经121℃灭菌20min后去掉琼脂即得液体分离培养基；
步骤3：将所得的菌株发酵液在4℃条件下，以8000r/min离心12min，弃上清液得到湿菌体，用生理盐水清洗除去培养基后制成冻干粉保藏于4℃冰箱备用。
国酒香茶叶的制备方法
步骤1：将天然石斛切成直径0.05-0.2cm、长1-2cm的细条，在自然萎凋后用微波杀青设备进行杀青处理，时间为10min，功率为6kW，频率为2450±50MHZ；
步骤2：将步骤1所得的石斛和茶叶混配后在温度20-25℃、相对适度87％条件下揉捻65min制成混合物；
步骤3：将发酵营养液均匀喷洒到混合物上面，重复8次并不断翻动直至喷透，然后置于48℃，相对湿度73％条件下发酵150h，在发酵过程中可以向混合物补喷发酵营养液；所述的发酵营养液由葡萄糖、甘氨酸、脯氨酸、类胡萝卜素、红曲霉重悬液、β-葡萄糖苷、高粱提取物组成；
步骤4：发酵完成后再向发酵混合物喷一次发酵营养液后用烘箱迅速升温至110℃保温45h进行美拉德反应；
步骤5：将混合物于30℃相对湿度为78％的恒温恒湿箱平衡43h；
步骤6：将经步骤5发酵平衡后混合物在温度为190℃的炒锅中快炒3min后再复揉8min；
步骤7：用微波远红外设备干燥提香，于95℃下进行3h的烘焙干燥至含水量4-8％后获得具有茅台酒一样香气的茶叶；所述的微波频率为2450±50MHz，远红外线波长为2-30μm。
实施例2
一种国酒香茶叶，由1g人工种植石斛、0.01g地衣芽孢杆菌、1g茶叶组成。
地衣芽孢杆菌由以下方法制备：
步骤1：在无菌条件下取酱香型白酒生产制曲、堆积酒醅和发酵期酒醅，分别加入装有玻璃珠的90g无菌生理盐水中，在39℃、20rpm振荡培养5小时；
步骤2：取上清液梯度稀释涂布于分离培养基上，于29℃培养15小时；挑取单菌落，经多次平板划线纯化后，再转接2代后挑2环菌株于装有100ml液体分离培养基的250ml摇瓶中，在20℃、20rpm振荡培养10小时，即制得菌株发酵液；所述分离培养基由0.3g/L葡萄糖、15g/L胰化蛋白胨、13g/L酵母膏、18g/L黑木耳汁、10g/L氯化钠、1g/L硫酸镁，0.5g/L磷酸二氢钾、3g/L琼脂组成，经121℃灭菌20min后去掉琼脂即得液体分离培养基；
步骤3：将步骤2所得的菌株发酵液在4℃条件下，以3000r/min离心2min，弃上清液得到湿菌体，用生理盐水清洗除去培养基后制成冻干粉保藏于4℃冰箱备用。
国酒香茶叶制备方法
步骤1：将人工种植石斛切成直径0.05-0.2cm、长1-2cm的细条，在自然萎凋后用微波杀青设备进行杀青处理，时间为50min，功率为3kW，频率为2450±50MHZ：
步骤2：将步骤1所得的人工种植石斛和茶叶混配后在温度28℃、相对湿度49％条件下揉捻35min制成混合物；
步骤3：将发酵营养液均匀喷洒到混合物上面，重复4次并不断翻动直至喷透，然后置于50℃，相对湿度40％条件下发酵150h，在发酵过程中可以向混合物补喷发酵营养液；所述的发酵营养液由葡萄糖、蔗糖、麸皮浸出汁、地衣芽孢杆菌在麸皮浸出汁中的发酵萃取物、甘氨酸组成；
步骤4：发酵完成后再向发酵混合物喷一次发酵营养液后用烘箱迅速升温至85℃保温10h进行美拉德反应；
步骤5：将混合物于19℃相对湿度为50％的恒温恒湿箱平衡25h；
步骤6：将经步骤5发酵平衡后混合物在温度为120℃的炒锅中快炒4min后再复揉5min；
步骤7：复揉后用手工焙笼干燥提香，于100℃下进行1h的烘焙；干燥至含水量4-8％后获得具有茅台酒一样香气的茶叶。
实施例3
一种国酒香茶叶，由10g石斛组织培养物、1g枯草芽孢杆菌、10g茶叶组成。
石斛组织培养物由下列方法制得：
步骤1：切取石斛嫩茎节，在无菌环境下用75％的酒精浸泡1min，再用0.1％氯化汞溶液20min，无菌水冲洗5遍后切成0.1-1cm组织块，将其接种到由1/2MS培养基、1g/L茶叶组成的固体培养基培养，得到无菌植株；
步骤2：切取步骤1所得的无菌植株的茎段接种到pH值为9的培养基上进行愈伤组织诱导培养，所述的培养基由MS培养基、10mg/L的6-BA、0.1mg/L的NAA、80g/L茶叶、30g/L琼脂组成；
步骤3：取步骤2中愈伤组织接种到pH9的培养基A及pH9的培养基B中在光照强度为1000Lx，培养温度为39℃条件下交替培养直至分化出小苗，得到石斛组织培养物；
所述的培养基A由1/2MS培养基、60g/L蔗糖、1g/L马铃薯汁、1g/L茶叶、3g/L琼脂组成；
所述的培养基B由N6培养基、1g/L苔藓、200g/L香蕉、10g/L蔗糖、3g/L琼脂组成。
枯草芽孢杆菌的制备方法：
步骤1：在无菌条件下，取8g酱香型白酒生产制曲、10g堆积酒醅和7g发酵期酒醅，分别加入装有玻璃珠的90g无菌生理盐水中，在29℃、100rpm振荡培养10小时；
步骤2：取上清液梯度稀释涂布于分离培养基上，于29℃培养30小时；挑取单菌落，经多次平板划线纯化后，再转接3代后挑2环菌株于装有100ml液体分离培养基的250ml摇瓶中，在25℃、100rpm振荡培养30小时，即制得菌株发酵液；所述分离培养基由10g/L葡萄糖、10g/L胰化蛋白胨、10g/L酵母膏、20g/L黑木耳汁、2g/L氯化钠、1g/L硫酸镁，5g/L磷酸二氢钾、10g/L琼脂组成，经121℃灭菌20min后去掉琼脂即得液体分离培养基；
步骤3：将所得的菌株发酵液在4℃条件下，以5000r/min离心10min，弃上清液得到湿菌体，用生理盐水清洗除去培养基后制成冻干粉保藏于4℃冰箱备用；
国酒香茶叶的制备方法：
步骤1：直接使用石斛组织培养物整株小苗，在自然萎凋后用微波杀青设备进行杀青处理，时间为200min，功率为5kW，频率为2450±50MHZ；
步骤2：将步骤1所得的石斛组织培养物和茶叶混配后在温度20-25℃、相对适度88％条件下揉捻50min制成混合物；
步骤3：将发酵营养液均匀喷洒到混合物上面，重复4次并不断翻动直至喷透，然后置于38℃，相对湿度60％条件下发酵100h，在发酵过程中可以向混合物补喷发酵营养液；所述的发酵营养液由、枯草芽孢杆菌在麸皮浸出汁中的发酵萃取物、甘氨酸、脯氨酸、类胡萝卜素组成；
步骤4：发酵完成后再向发酵混合物喷一次发酵营养液后用烘箱迅速升温至100℃保温20h进行美拉德反应；
步骤5：将混合物于29℃相对湿度为60％的恒温恒湿箱平衡30h；
步骤6：将经步骤5发酵平衡后混合物在温度为140℃的炒锅中快炒4min后再复揉8min；
步骤7：用手工焙笼干燥提香，于100℃下进行3h的烘焙干燥至含水量4-8％后获得具有茅台酒一样香气的茶叶。
实施例4
一种国酒香茶叶，由20g石斛组织培养物、4g嗜热芽孢杆菌、3g茶叶组成。
所述石斛组织培养物由下列方法制得：
步骤1：切取石斛嫩茎节，在无菌环境下用75％的酒精浸泡10min，再用2％次氯酸钠浸泡1min，无菌水冲洗3遍后切成0.1-1cm组织块，将其接种到由1/2MS培养基、80g/L苔藓组成的固体培养基培养，得到无菌植株；
步骤2：切取步骤1所得的无菌植株的茎段接种到pH值为4的培养基上进行愈伤组织诱导培养，所述的培养基由MS培养基、0.1mg/L的6-BA、1mg/L的NAA、10g/L苔藓、3g/L琼脂组成；
步骤3：取步骤2中愈伤组织接种到pH4的培养基A及pH9的培养基B中在光照强度4000Lx，培养温度为19℃条件下交替培养直至分化出小苗，得到石斛组织培养物；
所述的培养基A由1/2MS培养基、10g/L蔗糖、10g/L马铃薯汁、10g/L苔藓、30g/L琼脂组成；
所述的培养基B由N6培养基、10g/L苔藓、10g/L活性炭、10g/L香蕉、10g/L蔗糖、30g/L琼脂组成。
嗜热芽孢杆菌由以下方法制备：
步骤1：在无菌条件下取酱香型白酒生产制曲、堆积酒醅和发酵期酒醅，分别加入装有玻璃珠的90g无菌生理盐水中，在20℃、100rpm振荡培养5小时；
步骤2：取上清液梯度稀释涂布于分离培养基上，于23℃培养20小时；挑取单菌落，经多次平板划线纯化后，再转接4代后挑2环菌株于装有100ml液体分离培养基的250ml摇瓶中，在30℃、150rpm振荡培养30小时，即制得菌株发酵液；所述分离培养基由8g/L葡萄糖、27g/L胰化蛋白胨、19g/L酵母膏、30g/L黑木耳汁、5g/L氯化钠、0.8g/L硫酸镁，1.6g/L磷酸二氢钾、5g/L琼脂组成，经121℃灭菌20min后去掉琼脂即得液体分离培养基；
步骤3：将步骤2所得的菌株发酵液在4℃条件下，以4000r/min离心15min，弃上清液得到湿菌体，用生理盐水清洗除去培养基后制成冻干粉保藏于4℃冰箱备用。
国酒香茶叶制备方法
步骤1：直接使用石斛组织培养物整株小苗，在自然萎凋后用微波杀青设备进行杀青处理，时间为300min，功率为10kW，频率为2450±50MHZ；
步骤2：将步骤1所得的石斛组织培养物和茶叶混配后在温度35℃、相对湿度90％条件下揉捻75min制成混合物；
步骤3：将发酵营养液均匀喷洒到混合物上面，重复10次并不断翻动直至喷透，然后置于60℃，相对湿度90％条件下发酵200h，在发酵过程中可以向混合物补喷发酵营养液；所述的发酵营养液由葡萄糖、蔗糖、麸皮浸出汁、嗜热芽孢杆菌在麸皮浸出汁中的发酵萃取物、甘氨酸、脯氨酸、类胡萝卜素、嗜热芽孢杆菌重悬液、β-葡萄糖苷、高粱提取物组成；
步骤4：发酵完成后再向发酵混合物喷一次发酵营养液后用烘箱迅速升温至120℃保温50h进行美拉德反应；
步骤5：将混合物于39℃相对湿度为90％的恒温恒湿箱平衡50h；
步骤6：将经步骤5发酵平衡后混合物在温度为200℃的炒锅中快炒10min后再复揉10min；
步骤7：复揉后用手工焙笼干燥提香，于125℃下进行8h的烘焙；干燥至含水量4-8％后获得具有茅台酒一样香气的茶叶。
实施例5
一种国酒香茶叶，由30g石斛组织培养物、8g解淀粉芽孢杆菌、20g茶叶组成。
所述石斛组织培养物由下列方法制得：
步骤1：切取石斛嫩茎节，在无菌环境下用75％的酒精浸泡1-10min，再用2％次氯酸钠浸泡10min，无菌水冲洗3-5遍后切成0.1-1cm组织块，将其接种到由1/2MS培养基、30g/L苔藓组成的固体培养基培养，得到无菌植株；
步骤2：切取步骤1所得的无菌植株的茎段接种到pH值为7的培养基上进行愈伤组织诱导培养，所述的培养基由MS培养基、10g/L苔藓、80g/L马铃薯汁、10g/L琼脂组成；
步骤3：取步骤2中愈伤组织接种到pH6的培养基A及pH6的培养基B中在光照强度为4000Lx，培养温度为29℃条件下交替培养直至分化出小苗，得到石斛组织培养物；
所述的培养基A由1/2MS培养基、30g/L蔗糖、70g/L马铃薯汁、40g/L茶叶、20g/L琼脂组成；
所述的培养基B由N6培养基、40g/L苔藓、5g/L活性炭、130g/L香蕉、15g/L蔗糖、14g/L琼脂组成。
解淀粉芽孢杆菌由以下方法制备：
步骤1：在无菌条件下取酱香型白酒生产制曲、堆积酒醅和发酵期酒醅，分别加入装有玻璃珠的90g无菌生理盐水中，在33℃、180rpm振荡培养3小时；
步骤2：取上清液梯度稀释涂布于分离培养基上，于29℃培养40小时；挑取单菌落，经多次平板划线纯化后，再转接5代后挑2环菌株于装有100ml液体分离培养基的250ml摇瓶中，在25℃、50rpm振荡培养40小时，即制得菌株发酵液；所述分离培养基由1g/L葡萄糖、35g/L胰化蛋白胨、23g/L酵母膏、20g/L黑木耳汁、0.5g/L氯化钠、0.7g/L硫酸镁，1.5g/L磷酸二氢钾、3.8g/L琼脂组成，经121℃灭菌20min后去掉琼脂即得液体分离培养基；
步骤3：将步骤2所得的菌株发酵液在4℃条件下，以5000r/min离心9min，弃上清液得到湿菌体，用生理盐水清洗除去培养基后制成冻干粉保藏于4℃冰箱备用。
国酒香茶叶制备方法
步骤1：直接使用石斛组织培养物整株小苗，在自然萎凋后用微波杀青设备进行杀青处理，时间为10min，功率为1kW，频率为2450±50MHZ；
步骤2：将步骤1所得的石斛组织培养物和茶叶混配后在温度20℃、相对湿度25％条件下揉捻5min制成混合物；
步骤3：将发酵营养液均匀喷洒到混合物上面，重复2次并不断翻动直至喷透，然后置于15℃，相对湿度30％条件下发酵10h，在发酵过程中可以向混合物补喷发酵营养液；所述的发酵营养液由葡萄糖、解淀粉芽孢杆菌在麸皮浸出汁中的发酵萃取物、甘氨酸、脯氨酸、类胡萝卜素组成；
步骤4：发酵完成后再向发酵混合物喷一次发酵营养液后用烘箱迅速升温至85℃保温1h进行美拉德反应；
步骤5：将混合物于15℃相对湿度为30％的恒温恒湿箱平衡1h；
步骤6：将经步骤5发酵平衡后混合物在温度为110℃的炒锅中快炒1min后再复揉1min；
步骤7：复揉后用微波远红外设备干燥提香，于85℃下进行0.1h的烘焙；干燥至含水量4-8％后获得具有茅台酒一样香气的茶叶；所述的微波频率为2450±50MHz，远红外线波长为2-30μm。
实施例6
一种国酒香茶叶，由23g天然茶槲寄生、2g纳豆芽孢杆菌、1g红曲霉、42g茶叶组成。
纳豆芽孢杆菌由以下方法制备：
步骤1：在无菌条件下取酱香型白酒生产制曲、堆积酒醅和发酵期酒醅，分别加入装有玻璃珠的90g无菌生理盐水中，在25℃、180rpm振荡培养8小时；
步骤2：取上清液梯度稀释涂布于分离培养基上，于28℃培养20小时；挑取单菌落，经多次平板划线纯化后，再转接4代后挑2环菌株于装有100ml液体分离培养基的250ml摇瓶中，在25℃、20rpm振荡培养30小时，即制得菌株发酵液；所述分离培养基由10.8g/L葡萄糖、30g/L胰化蛋白胨、10g/L酵母膏、28g/L黑木耳汁、3.2g/L氯化钠、6.5g/L硫酸镁，5.8g/L磷酸二氢钾、20g/L琼脂组成，经121℃灭菌20min后去掉琼脂即得液体分离培养基；
步骤3：将步骤2所得的菌株发酵液在4℃条件下，以8000r/min离心20min，弃上清液得到湿菌体，用生理盐水清洗除去培养基后制成冻干粉保藏于4℃冰箱备用。
国酒香茶叶制备方法
步骤1：将天然茶槲寄生切成直径0.05-0.2cm、长1-2cm的细条，在自然萎凋后用微波杀青设备进行杀青处理，时间为180min，功率为7kW，频率为2450±50MHZ：
步骤2：将步骤1所得的天然茶槲寄生和茶叶混配后在温度28℃、相对湿度75％条件下揉捻65min制成混合物；
步骤3：将发酵营养液均匀喷洒到混合物上面，重复8次并不断翻动直至喷透，然后置于35℃，相对湿度70％条件下发酵130h，在发酵过程中可以向混合物补喷发酵营养液；所述的发酵营养液由葡萄糖、蔗糖、纳豆芽孢杆菌在麸皮浸出汁中的发酵萃取物、甘氨酸、脯氨酸、β-葡萄糖苷、高粱提取物组成；
步骤4：发酵完成后再向发酵混合物喷一次发酵营养液后用烘箱迅速升温至110℃保温45h进行美拉德反应；
步骤5：将混合物于25℃相对湿度为70％的恒温恒湿箱平衡5h；
步骤6：将经步骤5发酵平衡后混合物在温度为150℃的炒锅中快炒6min后再复揉4min；
步骤7：复揉后用微波远红外设备干燥提香，于95℃下进行7h的烘焙；干燥至含水量4-8％后获得具有茅台酒一样香气的茶叶；所述的微波频率为2450±50MHz，远红外线波长为2-30μm。
实施例7
一种国酒香茶叶，由14g人工种植茶槲寄生、4g纳豆芽孢杆菌、48g茶叶组成。
纳豆芽孢杆菌制备方法：
步骤1：在无菌条件下取15g酱香型白酒生产制曲、7g堆积酒醅和9g发酵期酒醅，分别加入装有玻璃珠的90g无菌生理盐水中，在20℃、200rpm振荡培养15小时；
步骤2：取上清液梯度稀释涂布于分离培养基上，于20℃培养50小时；挑取单菌落，经多次平板划线纯化后，再转接5代后挑2环菌株于装有100ml液体分离培养基的250ml摇瓶中，在20-℃、20-200rpm振荡培养50小时，即制得菌株发酵液；所述分离培养基由0.1g/L葡萄糖、1g/L胰化蛋白胨、1g/L酵母膏、1g/L黑木耳汁、0.1g/L氯化钠、0.1g/L硫酸镁，0.1g/L磷酸二氢钾、3g/L琼脂组成，经121℃灭菌20min后去掉琼脂即得液体分离培养基；
步骤3：将所得的菌株发酵液在4℃条件下，以10000r/min离心2min，弃上清液得到湿菌体，用生理盐水清洗除去培养基后制成冻干粉保藏于4℃冰箱备用。
国酒香茶叶制备方法：
步骤1：将人工种植茶槲寄生生切成直径0.05-0.2cm、长1-2cm的细条，在自然萎凋后用微波杀青设备进行杀青处理，时间为100min，功率为10kW，频率为2450±50MHZ；
步骤2：将步骤1所得的人工种植茶槲寄生和茶叶混配后在温度20℃、相对适度90％条件下揉捻5min制成混合物；
步骤3：将发酵营养液均匀喷洒到混合物上面，重复2次并不断翻动直至喷透，然后置于15℃，相对湿度30％条件下发酵10h，在发酵过程中可以向混合物补喷发酵营养液；所述的发酵营养液由蔗糖、麸皮浸出汁、纳豆芽孢杆菌在麸皮浸出汁中的发酵萃取物、甘氨酸、脯氨酸纳豆芽孢杆菌重悬液、β-葡萄糖苷、高粱提取物组成；
步骤4：发酵完成后再向发酵混合物喷一次发酵营养液后用烘箱迅速升温至85℃保温1h进行美拉德反应；
步骤5：将混合物于15℃相对湿度为30％的恒温恒湿箱平衡50h；
步骤6：将经步骤5发酵平衡后混合物在温度为110℃的炒锅中快炒10min后再复揉1min；
步骤7：用手工焙笼干燥提香，于85℃下进行8h的烘焙，干燥至含水量4-8％后获得具有茅台酒一样香气的茶叶。
实施例8
一种国酒香茶叶，由13g茶槲寄生组织培养物、7g嗜热芽孢杆菌、30g茶叶组成。
所述茶槲寄生组织培养物由下列方法制得：
步骤1：切取茶槲寄生嫩茎节，在无菌环境下用75％的酒精浸泡6min，再用0.1％氯化汞溶液10min，无菌水冲洗3-5遍后切成0.1-1cm组织块，将其接种到由1/2MS培养基、18g/L苔藓组成的固体培养基培养，得到无菌植株；
步骤2：切取步骤1所得的无菌植株的茎段接种到pH值为8的培养基上进行愈伤组织诱导培养，所述的培养基由MS培养基、4mg/L的6-BA、6mg/L的NAA、20g/L茶叶或苔藓、8g/L琼脂组成；
步骤3：取步骤2中愈伤组织接种到pH7的培养基A及pH5的培养基B中在光照强度为3000Lx，培养温度为25℃条件下交替培养直至分化出小苗，得到茶槲寄生组织培养物；
所述的培养基A由1/2MS培养基、45g/L蔗糖、122g/L马铃薯汁、32g/L茶叶、13g/L琼脂组成；
所述的培养基B由N6培养基、44g/L茶叶或苔藓、4g/L活性炭、150g/L香蕉、30g/L蔗糖、25g/L琼脂组成。
嗜热芽孢杆菌制备方法：
步骤1：在无菌条件下取5g酱香型白酒生产制曲、12g堆积酒醅和7g发酵期酒醅，分别加入装有玻璃珠的90g无菌生理盐水中，在39℃、20rpm振荡培养15小时；
步骤2：取上清液梯度稀释涂布于分离培养基上，于39℃培养1小时；挑取单菌落，经多次平板划线纯化后，再转接2代后挑2环菌株于装有100ml液体分离培养基的250ml摇瓶中，在39℃、200rpm振荡培养1小时，即制得菌株发酵液；所述分离培养基由30g/L葡萄糖、50g/L胰化蛋白胨、30g/L酵母膏、90g/L黑木耳汁、20g/L氯化钠、10g/L硫酸镁，10g/L磷酸二氢钾、30g/L琼脂组成，经121℃灭菌20min后去掉琼脂即得液体分离培养基；
步骤3：将所得的菌株发酵液在4℃条件下，以3000r/min离心2min，弃上清液得到湿菌体，用生理盐水清洗除去培养基后制成冻干粉保藏于4℃冰箱备用。
国酒香茶叶制备方法：
步骤1：直接使用茶槲寄生组织培养物的整株小苗，在自然萎凋后用微波杀青设备进行杀青处理，时间为300min，功率为10kW，频率为2450±50MHZ；
步骤2：将步骤1所得的茶槲寄生组织培养物和茶叶混配后在温度20-25℃、相对适度90％条件下揉捻75min制成混合物；
步骤3：将发酵营养液均匀喷洒到混合物上面，重复10次并不断翻动直至喷透，然后置于60℃，相对湿度90％条件下发酵200h，在发酵过程中可以向混合物补喷发酵营养液；所述的发酵营养液由葡萄糖、蔗糖、麸皮浸出汁、嗜热芽孢杆菌在麸皮浸出汁中的发酵萃取物、嗜热芽孢杆菌重悬液、β-葡萄糖苷、高粱提取物；
步骤4：发酵完成后再向发酵混合物喷一次发酵营养液后用烘箱迅速升温至120℃保温50h进行美拉德反应；
步骤5：将混合物于39℃相对湿度为90％的恒温恒湿箱平衡50h；
步骤6：将经步骤5发酵平衡后混合物在温度为200℃的炒锅中快炒1min后再复揉1min；
步骤7：用微波远红外设备干燥提香，于125℃下进行0.1h的烘焙，干燥至含水量4-8％后获得具有茅台酒一样香气的茶叶；所述的微波频率为2450±50MHz，远红外线波长为2-30μm。
实施例9
一种国酒香茶叶，由20g茶槲寄生组织培养物、8g纳豆芽孢杆菌、30g茶叶组成。
所述茶槲寄生组织培养物由下列方法制得：
步骤1：切取茶槲寄生嫩茎节，在无菌环境下用75％的酒精浸泡1-10min，再用2％次氯酸钠浸泡18min，无菌水冲洗3-5遍后切成0.1-1cm组织块，将其接种到由1/2MS培养基、60g/L茶叶组成的固体培养基培养，得到无菌植株；
步骤2：切取步骤1所得的无菌植株的茎段接种到pH值为5的培养基上进行愈伤组织诱导培养，所述的培养基由MS培养基、70g/L苔藓、19g/L琼脂、120g/L马铃薯汁组成；
步骤3：取步骤2中愈伤组织接种到pH5的培养基A及pH7.4的培养基B中在光照强度为6000Lx，培养温度为25℃条件下交替培养直至分化出小苗，得到石斛组织培养物或茶槲寄生组织培养物；
所述的培养基A由1/2MS培养基、40g/L蔗糖、130g/L马铃薯汁、40g/L苔藓、5g/L琼脂组成；
所述的培养基B由N6培养基、80g/L苔藓、1g/L活性炭、130g/L香蕉、30g/L蔗糖、3g/L琼脂组成。
纳豆芽孢杆菌由以下方法制备：
步骤1：在无菌条件下取酱香型白酒生产制曲、堆积酒醅和发酵期酒醅，分别加入装有玻璃珠的90g无菌生理盐水中，在25℃、80rpm振荡培养9小时；
步骤2：取上清液梯度稀释涂布于分离培养基上，于25℃培养20小时；挑取单菌落，经多次平板划线纯化后，再转接2代后挑2环菌株于装有100ml液体分离培养基的250ml摇瓶中，在30℃、80rpm振荡培养35小时，即制得菌株发酵液；所述分离培养基由0.8g/L葡萄糖、45g/L胰化蛋白胨、23g/L酵母膏、70g/L黑木耳汁、1g/L氯化钠、2g/L硫酸镁，7g/L磷酸二氢钾、8g/L琼脂组成，经121℃灭菌20min后去掉琼脂即得液体分离培养基；
步骤3：将步骤2所得的菌株发酵液在4℃条件下，以10000r/min离心2min，弃上清液得到湿菌体，用生理盐水清洗除去培养基后制成冻干粉保藏于4℃冰箱备用。
国酒香茶叶制备方法
步骤1：直接使用茶槲寄生组织培养物的整株小苗，在自然萎凋后用微波杀青设备进行杀青处理，时间为130min，功率为9kW，频率为2450±50MHZ；
步骤2：将步骤1所得的茶槲寄生组织培养物和茶叶混配后在温度30℃、相对湿度30％条件下揉捻25min制成混合物；
步骤3：将发酵营养液均匀喷洒到混合物上面，重复9次并不断翻动直至喷透，然后置于55℃，相对湿度80％条件下发酵180h，在发酵过程中可以向混合物补喷发酵营养液；所述的发酵营养液由葡萄糖、蔗糖、麸皮浸出汁、纳豆芽孢杆菌在麸皮浸出汁中的发酵萃取物、纳豆芽孢杆菌重悬液、β-葡萄糖苷、高粱提取物组成；
步骤4：发酵完成后再向发酵混合物喷一次发酵营养液后用烘箱迅速升温至115℃保温49h进行美拉德反应；
步骤5：将混合物于38℃相对湿度为88％的恒温恒湿箱平衡47h；
步骤6：将经步骤5发酵平衡后混合物在温度为190℃的炒锅中快炒2min后再复揉8min；
步骤7：复揉后用微波远红外设备干燥提香，于90℃下进行0.5h的烘焙；干燥至含水量4-8％后获得具有茅台酒一样香气的茶叶；所述的微波频率为2450±50MHz，远红外线波长为2-30μm。
试验例
茶多酚检测方法：
①试剂配制：酒石酸亚铁溶液：称取1.0g硫酸亚铁(FeSO4·7H2O)和5.0g酒石酸钾钠(C14H4O6KNa·4H2O)，用水溶解并定容至1L(低温保存有效期10天)。pH7.5磷酸盐缓冲液：1/15mol/L磷酸氢二钠：称取23.9g十二水磷酸氢二钠(Na2HPO4·12H2O)，加水溶解后定容至1L；1/15mol/L磷酸二氢钾：称取经110℃烘干2h的磷酸二氢钾(KH2PO4)9.08g，加水溶解后定容至1L；取1/15mol/L的磷酸氢二钠溶液85mL和1/15mol/L的磷酸二氢钾溶液15mL混合均匀。
②具体操作：
准确吸取试液(换算成相同茶叶量)(普通茶叶用开水浸泡3次，合并茶水，检测时取相同茶叶量的茶水)，注入25mL的容量瓶中，加水4mL和酒石酸亚铁溶液5mL，充分混合，再加pH7.5磷酸盐缓冲液至刻度，用10mm比色杯，在波长540nm处，测定吸光度(A)，以试剂空白溶液作参比，测定吸光度A2。量取25ml充分混匀的样液于50ml容量瓶中，加入15ml95％乙醇，充分摇匀，放置15min，用水定容，滤纸过滤。
公式：茶多酚(mg/1)=(A-A2)×1.975×2×K×1000/V；
K：稀释倍数；
III、总酸总酯检测方法参照GB/T10345-2007，结果为总酸以乙酸达3.0g/l、总酯以乙酸乙酯达2.60g/l(取相同茶叶量的液体)。
按上述方法检测实施例1-9的茶多酚及总酸总酯含量结果如下：
由上表可知，本发明所得的国酒香茶叶不但保存了原茶中的茶多酚，即保存了茶香，还含有白酒散发香味所要求具备的酸和酯，因此其同时具备了茶香及酒香。
Claims (1)
1.一种国酒香茶叶，其特征在于由40g天然石斛、10g红曲霉、50g茶叶制备而成，
其中红曲霉的制备方法：
步骤1：在无菌条件下，取10g酱香型白酒生产制曲、5g堆积酒醅和8g发酵期酒醅，分别加入装有玻璃珠的90g无菌生理盐水中，在25℃、150rpm振荡培养7小时；
步骤2：取上清液梯度稀释涂布于分离培养基上，于28℃培养20小时；挑取单菌落，经多次平板划线纯化后，再转接4代后挑2环菌株于装有100ml液体分离培养基的250ml摇瓶中，在26℃、80rpm振荡培养35小时，即制得菌株发酵液；所述分离培养基由30g/L葡萄糖、25g/L胰化蛋白胨、20g/L酵母膏、70g/L黑木耳汁、8g/L氯化钠、6g/L硫酸镁，3g/L磷酸二氢钾、10g/L琼脂组成，经121℃灭菌20min后去掉琼脂即得液体分离培养基；
步骤3：将所得的菌株发酵液在4℃条件下，以8000r/min离心12min，弃上清液得到湿菌体，用生理盐水清洗除去培养基后制成冻干粉保藏于4℃冰箱备用；
国酒香茶叶的制备方法
步骤1：将天然石斛切成直径0.05-0.2cm、长1-2cm的细条，在自然萎凋后用微波杀青设备进行杀青处理，时间为10min，功率为6kW，频率为2450±50MHz；
步骤2：将步骤1所得的石斛和茶叶混配后在温度20-25℃、相对湿度87％条件下揉捻65min制成混合物；
步骤3：将发酵营养液均匀喷洒到混合物上面，重复8次并不断翻动直至喷透，然后置于48℃，相对湿度73％条件下发酵150h，在发酵过程中向混合物补喷发酵营养液；所述的发酵营养液由葡萄糖、甘氨酸、脯氨酸、类胡萝卜素、红曲霉重悬液、β-葡萄糖苷、高粱提取物组成；
步骤4：发酵完成后再向发酵混合物喷一次发酵营养液后用烘箱迅速升温至110℃保温45h进行美拉德反应；
步骤5：将混合物于30℃相对湿度为78％的恒温恒湿箱平衡43h；
步骤6：将经步骤5发酵平衡后混合物在温度为190℃的炒锅中快炒3min后再复揉8min；
步骤7：用微波远红外设备干燥提香，于95℃下进行3h的烘焙干燥至含水量4-8％后获得具有茅台酒一样香气的茶叶；所述的微波频率为2450±50MHz，远红外线波长为2-30μm。
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