CN103704133B - 一种蝴蝶兰组织培养培养基 - Google Patents

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Abstract

本发明提供一种蝴蝶兰组织培养培养基，由以下组分组成：KNO3：1900mg/L；硝酸铵：1650mg/L；磷酸二氢钾：170mg/L；七水硫酸镁：370mg/L；二水氯化钙：440mg/L；KI：0.60-0.62mg/L；硼酸：4.5-4.8mg/L；四水硫酸锰：25.0-25.3mg/L；七水硫酸锌：7.0-7.2mg/L；二水合钼酸钠：0.20-0.22mg/L；五水硫酸铜：0.025mg/L；六水氯化钴：0.025mg/L；Na2·EDTA：37.25mg/L；七水硫酸亚铁：27.85mg/L；肌醇：100mg/L；甘氨酸：2mg/L；盐酸硫胺素：0.1mg/L；盐酸吡哆醇：0.5mg/L；烟酸：0.5mg/L；蔗糖：20-22g/L；琼脂：5-5.2g/L；香蕉汁：30-35g/L；梨汁：3-5g/L；活性炭0.45-0.48g/L；溶剂为去离子水。应用本发明的培养基培养蝴蝶兰，成活率大于96%，染菌率为2.7-2.8%，培养基褐化程度较MS培养基低30-40%。

Description

一种蝴蝶兰组织培养培养基
技术领域
本发明属于植物培养技术领域，具体涉及一种蝴蝶兰组织培养培养基。
背景技术
蝴蝶兰又名蝶兰（Phalaenopsisamabilis），兰科（Orchidaceae）蝶兰属(Phalaenopsis)多年生附生草本植物，有着“洋兰皇后”之称的蝴蝶兰，由于其花形如彩蝶飞舞，色彩艳丽，体态轻盈、飘逸，在国内外花卉市场上极受欢迎，一直都是消费者的宠儿。而且蝴蝶兰除了盆栽之外，还特别适宜用作切花，是艺术插花的高档花材。
目前蝴蝶兰工厂化生产常用的方法是用组织培养无性繁殖，即所谓克隆繁殖，具有繁殖快、数量大和小苗品种纯的优点。利用蝴蝶兰花梗侧芽、叶片、茎尖等外植体，经消毒处理后接种到培养基上，可诱导出营养牙或原球茎。再进一步于培养基中进行大量增殖、分化培养，这样就可以培养出大量的植株。通过克隆繁殖的蝴蝶兰苗生长、开花比较整齐一致，可完全保存母株的花色性状。
在原球茎的诱导过程中，目前使用的培养基为MS培养基，但是其在使用过程中褐化程度严重。
发明内容
本发明提供了一种蝴蝶兰组织培养培养基，应用其进行蝴蝶兰原球茎的诱导时，褐化程度小。
本发明提供一种蝴蝶兰组织培养培养基，所述培养基由以下组分组成：
KNO3：1900mg/L；
NH4NO3：1650mg/L；
KH2PO4：170mg/L；
MgSO4·7H2O：370mg/L；
CaCl2·2H2O：440mg/L；
KI：0.60-0.62mg/L；
H3BO3：4.5-4.8mg/L；
MnSO4·4H2O：25.0-25.3mg/L；
ZnSO4·7H2O：7.0-7.2mg/L；
Na2MoO4·2H2O：0.20-0.22mg/L；
CuSO4·5H2O：0.025mg/L；
CoCl2·6H2O：0.025mg/L；
Na2·EDTA：37.25mg/L；
FeSO4·7H2O：27.85mg/L；
肌醇：100mg/L；
甘氨酸：2mg/L；
盐酸硫胺素：0.1mg/L；
盐酸吡哆醇：0.5mg/L；
烟酸：0.5mg/L；
蔗糖：20-22g/L；
琼脂：5.0-5.2g/L；
香蕉汁：30-35g/L；
梨汁：3-5g/L；
活性炭0.45-0.48g/L；
溶剂为去离子水。
优选地，所述培养基由以下组分组成：
KNO3：1900mg/L；
NH4NO3：1650mg/L；
KH2PO4：170mg/L；
MgSO4·7H2O：370mg/L；
CaCl2·2H2O：440mg/L；
KI：0.61mg/L；
H3BO3：4.6mg/L；
MnSO4·4H2O：25.2mg/L；
ZnSO4·7H2O：7.1mg/L；
Na2MoO4·2H2O：0.21mg/L；
CuSO4·5H2O：0.025mg/L；
CoCl2·6H2O：0.025mg/L；
Na2·EDTA：37.25mg/L；
FeSO4·7H2O：27.85mg/L；
肌醇：100mg/L；
甘氨酸：2mg/L；
盐酸硫胺素：0.1mg/L；
盐酸吡哆醇：0.5mg/L；
烟酸：0.5mg/L；
蔗糖：21g/L；
琼脂：5.1g/L；
香蕉汁：32g/L；
梨汁：4g/L；
活性炭0.46g/L；
溶剂为去离子水。
应用本发明的培养基培养蝴蝶兰，成活率大于96%，染菌率为2.7-2.8%，培养基褐化程度较MS培养基低30-40%。
具体实施方式
以下的实施例便于更好地理解本发明，但并不限定本发明。下述实施例中的实验方法，如无特殊说明，均为常规方法。
实施例1
本发明提供的一种蝴蝶兰组织培养培养基配方如下：
本发明的一种蝴蝶兰组织培养培养基是在MS培养基的基础上改良而成，具体配方如下：
KNO3：1900mg/L；
NH4NO3：1650mg/L；
KH2PO4：170mg/L；
MgSO4·7H2O：370mg/L；
CaCl2·2H2O：440mg/L；
KI：0.61mg/L；
H3BO3：4.6mg/L；
MnSO4·4H2O：25.2mg/L；
ZnSO4·7H2O：7.1mg/L；
Na2MoO4·2H2O：0.21mg/L；
CuSO4·5H2O：0.025mg/L；
CoCl2·6H2O：0.025mg/L；
Na2·EDTA：37.25mg/L；
FeSO4·7H2O：27.85mg/L；
肌醇：100mg/L；
甘氨酸：2mg/L；
盐酸硫胺素：0.1mg/L；
盐酸吡哆醇：0.5mg/L；
烟酸：0.5mg/L；
蔗糖：21g/L；
琼脂：5.1g/L；
香蕉汁：32g/L；
梨汁：4g/L；
活性炭0.46g/L；
溶剂为去离子水。
实施例2
本发明提供的一种蝴蝶兰组织培养培养基配方如下：
本发明的一种蝴蝶兰组织培养培养基是在MS培养基的基础上改良而成，具体配方如下：
KNO3：1900mg/L；
NH4NO3：1650mg/L；
KH2PO4：170mg/L；
MgSO4·7H2O：370mg/L；
CaCl2·2H2O：440mg/L；
KI：0.61mg/L；
H3BO3：4.6mg/L；
MnSO4·4H2O：25.0mg/L；
ZnSO4·7H2O：7.0mg/L；
Na2MoO4·2H2O：0.20mg/L；
CuSO4·5H2O：0.025mg/L；
CoCl2·6H2O：0.025mg/L；
Na2·EDTA：37.25mg/L；
FeSO4·7H2O：27.85mg/L；
肌醇：100mg/L；
甘氨酸：2mg/L；
盐酸硫胺素：0.1mg/L；
盐酸吡哆醇：0.5mg/L；
烟酸：0.5mg/L；
蔗糖：20g/L；
琼脂：5.0g/L；
香蕉汁：30g/L；
梨汁：3g/L；
活性炭0.45g/L；
溶剂为去离子水。
实施例3
本发明提供的一种蝴蝶兰组织培养培养基配方如下：
本发明的一种蝴蝶兰组织培养培养基是在MS培养基的基础上改良而成，具体配方如下：
KNO3：1900mg/L；
NH4NO3：1650mg/L；
KH2PO4：170mg/L；
MgSO4·7H2O：370mg/L；
CaCl2·2H2O：440mg/L；
KI：0.61mg/L；
H3BO3：4.6mg/L；
MnSO4·4H2O：25.3mg/L；
ZnSO4·7H2O：7.2mg/L；
Na2MoO4·2H2O：0.22mg/L；
CuSO4·5H2O：0.025mg/L；
CoCl2·6H2O：0.025mg/L；
Na2·EDTA：37.25mg/L；
FeSO4·7H2O：27.85mg/L；
肌醇：100mg/L；
甘氨酸：2mg/L；
盐酸硫胺素：0.1mg/L；
盐酸吡哆醇：0.5mg/L；
烟酸：0.5mg/L；
蔗糖：22g/L；
琼脂：5.2g/L；
香蕉汁：35g/L；
梨汁：5g/L；
活性炭0.48g/L；
溶剂为去离子水。
应用上述培养基对蝴蝶兰进行组织培养：
（1）切下蝴蝶兰带芽茎段，长约2-3cm，用自来水清洗干净，在饱和漂白粉上清液中浸泡15min；
（2）浸泡时不断搅动，浸泡后的茎段用流水冲洗干净，置于超净工作台上，先用75%的酒精消毒30s，无菌水清洗1次，再用0.1%的升汞浸泡10min；
（3）经无菌水冲洗数次，将带芽茎段接种到培养基上，调pH为4.5，在每天光照12小时，光强1600Lux，温度25℃下培养；
（4）按照35天一个周期不断进行转接，每次转接都会有平均3倍的增殖，每天光照12小时，光强1600Lux，温度25℃；
（5）将苗分成单株，将其接种至壮苗生根培养基中培养，使其长高长大，同时长出发达的根系，最终培养成为一棵有根有叶的完整植株，每天光照12小时，光强1600Lux，温度25℃。
实验结果：应用本发明的培养基培养蝴蝶兰，成活率大于96%，染菌率为2.7-2.8%，培养基褐化程度较MS培养基低30-40%。
最后应说明的是：以上所述仅为本发明的优选实施例而已，并不用于限制本发明，尽管参照前述实施例对本发明进行了详细的说明，对于本领域的技术人员来说，其依然可以对前述各实施例所记载的技术方案进行修改，或者对其中部分技术特征进行等同替换。凡在本发明的精神和原则之内，所作的任何修改、等同替换、改进等，均应包含在本发明的保护范围之内。

Claims (2)

1.一种蝴蝶兰组织培养培养基，其特征在于：所述组织培养培养基为原球茎诱导培养基，所述培养基由以下组分组成：
KNO3：1900mg/L；
NH4NO3：1650mg/L；
KH2PO4：170mg/L；
MgSO4·7H2O：370mg/L；
CaCl2·2H2O：440mg/L；
KI：0.60-0.62mg/L；
H3BO3：4.5-4.8mg/L；
MnSO4·4H2O：25.0-25.3mg/L；
ZnSO4·7H2O：7.0-7.2mg/L；
Na2MoO4·2H2O：0.20-0.22mg/L；
CuSO4·5H2O：0.025mg/L；
CoCl2·6H2O：0.025mg/L；
Na2·EDTA：37.25mg/L；
FeSO4·7H2O：27.85mg/L；
肌醇：100mg/L；
甘氨酸：2mg/L；
盐酸硫胺素：0.1mg/L；
盐酸吡哆醇：0.5mg/L；
烟酸：0.5mg/L；
蔗糖：20-22g/L；
琼脂：5.0-5.2g/L；
香蕉汁：30-35g/L；
梨汁：3-5g/L；
活性炭0.45-0.48g/L；
溶剂为去离子水。
2.根据权利要求1所述的培养基，其特征在于：所述培养基由以下组分组成：
KNO3：1900mg/L；
NH4NO3：1650mg/L；
KH2PO4：170mg/L；
MgSO4·7H2O：370mg/L；
CaCl2·2H2O：440mg/L；
KI：0.61mg/L；
H3BO3：4.6mg/L；
MnSO4·4H2O：25.2mg/L；
ZnSO4·7H2O：7.1mg/L；
Na2MoO4·2H2O：0.21mg/L；
CuSO4·5H2O：0.025mg/L；
CoCl2·6H2O：0.025mg/L；
Na2·EDTA：37.25mg/L；
FeSO4·7H2O：27.85mg/L；
肌醇：100mg/L；
甘氨酸：2mg/L；
盐酸硫胺素：0.1mg/L；
盐酸吡哆醇：0.5mg/L；
烟酸：0.5mg/L；
蔗糖：21g/L；
琼脂：5.1g/L；
香蕉汁：32g/L；
梨汁：4g/L；
活性炭0.46g/L；
溶剂为去离子水。
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