CN106220357A - 一种新型培养基 - Google Patents
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Abstract
本发明公开了一种新型培养基,包括以下原料:葡萄汁、哈密瓜汁、沙梨汁、柠檬汁、茶多酚、硝酸钾、磷酸铁、硝酸铵、硝酸钙、硝酸镁、碘酸钾、硼酸钠、钼酸钾、氯化锌、硫酸亚锰、氯化铜、硝酸铁、维生素、氨基酸、吲哚丁酸、赤霉素、6‑苄基腺膘呤、异戊烯氨基嘌呤、萘乙酸、琼脂、激动素、助溶剂、分散剂、相容剂、稳定剂、抗菌剂、水。本发明的新型培养基,搭配合理,营养全面,能够快速促根生茎,提高移栽存活率,同时也能促进黄酮类化合物的积累,提高经济效益;本发明的新型培养基制备方法,操作简单,易于实现产业化、规范化和标准化生产。
Description
【技术领域】
本发明属于半枝莲种植技术领域,具体涉及一种新型培养基。
【背景技术】
半枝莲(Scutellaria barbate D.Don) 为唇形科黄芩属植物,别名并头草、狭叶韩信草、赴山鞭、牙刷草、勺把草、兰花草等,属唇形科多年生野生药用草本植物,全草入药。其性味辛、苦、寒,归肺、肝、肾经,具有清热解毒、散瘀止血、利尿消肿的功效。半枝莲中含有多种化合物,黄酮类成分是其主要的活性成分,具有抗肿瘤、抗氧化、抗菌等多种药理活性。
半枝莲是治癌的首选药物,在医学方面的用量逐年增加,是国家中医药管理局近年重点推荐发展的63种紧缺中药材之一。野生资源不断减少频临灭绝,而家种半枝莲受气候和地理条件等多种因素的影响,产量很不稳定,经常有供不应求的局面出现。鉴于半枝莲的良好疗效,为了更好地开发和利用中药半枝莲资源,可以通过组织培养技术组织培养半枝莲,可以短期内提供大量优质的半枝莲种苗,减低生产成本,提高种苗质量,从而提高种苗成活率及药材产量。
专利申请文献“一种半枝莲组培种苗工厂化生产方法(公开号:CN103518626A)”公开了一种以MS为基本培养基,添加各种植物激素的培养基,达到了快速组培半枝莲组培苗的效果,而然该专利申请未涉及促进半枝莲黄酮类化合物和多糖积累的技术。
【发明内容】
本发明提供一种新型培养基,以解决如何提高半枝莲的主要有效成分黄酮类化合物和多糖的含量,提高经济效益等问题。本发明的新型培养基,搭配合理,营养全面,能够快速促根生茎,提高移栽存活率,同时也能促进黄酮类化合物的积累,提高经济效益。
为解决以上技术问题,本发明采用以下技术方案:
一种新型培养基,以重量份为单位,包括以下原料:葡萄汁205-295份、哈密瓜汁155-245份、沙梨汁125-200份、柠檬汁105-180份、茶多酚50-80份、硝酸钾5-8份、磷酸铁4-6份、硝酸铵4-6份、硝酸钙0.8-1份、硝酸镁0.6-0.8份、碘酸钾0.3-0.5份、硼酸钠0.3-0.5份、钼酸钾0.3-0.5份、氯化锌0.2-0.4份、硫酸亚锰0.2-0.4份、氯化铜0.2-0.3份、硝酸铁0.2-0.3份、维生素0.1-0.3份、氨基酸0.1-0.3份、吲哚丁酸0.06-0.1份、赤霉素0.06-0.1份、6-苄基腺膘呤0.06-0.1份、异戊烯氨基嘌呤0.08-0.12份、萘乙酸0.04-0.08份、琼脂0.2-0.4份、激动素0.06-0.09份、助溶剂1-3份、分散剂0.8-2.5份、相容剂1.2-2份、稳定剂1-2份、抗菌剂1.5-3份、水8000-12000份;
所述分散剂以重量份为单位,包括以下原料:羧甲基纤维素钾4-6份、改性淀粉3-6份、聚丙烯酸钾2-4份、海藻酸钾1-3份;
所述新型培养基的备方法,包括以下步骤:
S1:将葡萄、哈密瓜、沙梨汁、柠檬混合用搅碎机搅碎,所得榨汁过2000-6000目筛子,制得混合汁;
S2:茶多酚的制备,包括以下步骤:
S21:将绿茶粉碎后过50-90目筛,与质量分数为36%-62%的乙醇水溶液按质量比为1:13-19混合,在温度为30-36℃,超声波功率为180-260W下,提取2-3次,每次7-15min,过滤,合并滤液,浓缩,制得茶多酚粗提取液;
S22:将步骤S21制得的茶多酚粗提取液加入到KCl溶液中,pH调节至6.2-6.7,在离心转速为3000-6000r/min下除去杂质,采用0.05-0.1μm滤膜在温度为30-37℃下对离心后的溶液进行过滤,制得过滤液;
S23:将步骤S22制得的过滤液用乙醚提取,在温度≤-12℃下冷冻浓缩,在温度为78-88℃下干燥后制得茶多酚;
S3:将步骤S1制得的混合汁、步骤S2制得的茶多酚、硝酸钾、磷酸铁、硝酸铵、硝酸钙、硝酸镁、碘酸钾、硼酸钠、钼酸钾、氯化锌、硫酸亚锰、氯化铜、硝酸铁、维生素、氨基酸、吲哚丁酸、赤霉素、6-苄基腺膘呤、异戊烯氨基嘌呤、萘乙酸、琼脂、激动素、助溶剂、分散剂、相容剂、稳定剂、抗菌剂、水按比例混合均匀,制得混合液;
S4:将步骤S3制得的混合液pH值调节至5-5.6,接着采用脉动真空压力蒸气灭菌器在温度为134-136℃,压力为210-230KPa下,灭菌1.5-2min,制得新型培养基。
进一步地,所述维生素由以下组分组成:生素A0.06-0.1份、维生素 B10.06-0.1份、维生素B20.04-0.05份、维生素D0.04-0.05份。
进一步地,所述氨基酸由以下组分组成:甘氨酸0.08-0.1份、胱氨酸0.06-0.08份、脯氨酸0.04-0.07份、丝氨酸0.02-0.05份。
进一步地,所述助溶剂为聚乙烯吡咯烷酮。
进一步地,所述相容剂为美国杜邦EEA2112AC。
进一步地,所述稳定剂为黄原胶。
进一步地,所述抗菌剂为富马酸糠醇甲酯。
本发明培养基中部分成分的作用如下:
果汁的添加有利于多糖含量的积累。
茶多酚作为一种抗氧剂,既能使细胞生长缓慢,也可以促进黄酮积累。
钾元素的营养功效可以提高光合作用的强度,促进作物体内淀粉和糖的形成,增强作物的抗逆性和抗病能力,还能提高作物对氮的吸收利用。
磷是形成细胞核蛋白、卵磷脂等不可缺少的元素。磷元素能加速细胞分裂,促使根系和地上部加快生长,促进花芽分化,提早成熟,提高果实品质。
氮是蛋白质构成的主要元素,蛋白质是细胞原生质组成中的基本物质。氮元素能促进蛋白质和叶绿素的形成,使叶色深绿,叶面积增大,促进碳的同化,有利于产量增加,品质改善。
缺少钙植物分生组织的生长变慢,缺钙和症初在生长点和幼叶,严重时,叶子变形和失绿,在叶子的边缘出现坏死斑点。
镁是叶绿素的组成成分。如果缺少镁,叶片失去了绿色,不能制造营养物质。
碘是植物生长不可缺少的元素,被誉为生命元素、智慧元素。
硼在植物体内比较集中于茎尖、根尖、叶片和花器官中,双子叶植物中的含量常常高于单子叶植物。硼可以提高豆科作物根瘤菌的固氮活性,增加固氮量,缺硼时,根留不发达,影响固氮量。硼还能增强作物抗逆性。钼是固氮微生物,特别是与豆科作物共生的根瘤菌固定大气氮素时所必需的。同时又能增进叶片光合作用强度。缺钼时植株矮小,叶片脉间失绿,叶缘枯焦,向内卷曲,成萎蔫态。
锌能促进作物进行光合作用,它是多种酶的组成成分,缺锌时作物生长发育出现停滞。植物叶绿体中含有锰,锰能促进种子发芽和幼苗时期生长,缺锰时影响作物的光合作用、呼吸作用、硝态氮在体内的积累。表现为叶片脉间失绿黄化,有褐色斑点。铜参加植物的光合作用、呼吸作用、氮代谢、增强植物的抗性。缺铜时植株生长瘦弱,新叶发黄,凋萎干枯,叶尖卷曲发白,有坏死斑点。铁是叶绿素形成不可缺少的,在植株体内很难转移,所以叶片“失绿症”是植物缺铁的表现,并且这种失绿首先表现在幼嫩叶片上。维生素对植物的生根有效应,能够促进植物生根。
氨基酸是植物生长所必需的营养物质,由于氨基酸本身的特性,对植物生长特别是光合作用具有独特的促进作用,它可以增加植物叶绿素含量,提高酶的活性,促进二氧化碳的渗透,使光合作用更加旺盛,对提高作物品质,增加Vc和糖的含量都有着重要作用。
本发明具有以下有益效果:
(1)茶多酚能促进半枝莲黄酮类化合物的积累;茶多酚作为抗氧剂,同时能抑制植物细胞的生长,然而本发明在其他培养基组分协同作用下,茶多酚的抑制半枝莲作用较小;
(2)本发明的培养基有利于提高半枝莲苗的移栽存活率,达到99%-100%;
(3)本发明的新型培养基,搭配合理,营养全面,能够快速促根生茎,提高移栽存活率,同时也能促进黄酮类化合物和多糖的积累,提高经济效益;
(4)采用本发明的新型培养基制备方法,能够缩短消毒时间,提高灭菌效果可靠性和产业化生产效率,降低生产成本;
(5)本发明的新型培养基制备方法,操作简单,易于实现产业化、规范化和标准化生产。
【具体实施方式】
为便于更好地理解本发明,通过以下实施例加以说明,这些实施例属于本发明的保护范围,但不限制本发明的保护范围。
在实施例中,所述新型培养基,以重量份为单位,包括以下原料:葡萄汁205-295份、哈密瓜汁155-245份、沙梨汁125-200份、柠檬汁105-180份、茶多酚50-80份、硝酸钾5-8份、磷酸铁4-6份、硝酸铵4-6份、硝酸钙0.8-1份、硝酸镁0.6-0.8份、碘酸钾0.3-0.5份、硼酸钠0.3-0.5份、钼酸钾0.3-0.5份、氯化锌0.2-0.4份、硫酸亚锰0.2-0.4份、氯化铜0.2-0.3份、硝酸铁0.2-0.3份、维生素0.1-0.3份、氨基酸0.1-0.3份、吲哚丁酸0.06-0.1份、赤霉素0.06-0.1份、6-苄基腺膘呤0.06-0.1份、异戊烯氨基嘌呤0.08-0.12份、萘乙酸0.04-0.08份、琼脂0.2-0.4份、激动素0.06-0.09份、助溶剂1-3份、分散剂0.8-2.5份、相容剂1.2-2份、稳定剂1-2份、抗菌剂1.5-3份、水8000-12000份;
所述维生素由以下组分组成:生素A0.06-0.1份、维生素 B10.06-0.1份、维生素B20.04-0.05份、维生素D0.04-0.05份;
所述氨基酸由以下组分组成:甘氨酸0.08-0.1份、胱氨酸0.06-0.08份、脯氨酸0.04-0.07份、丝氨酸0.02-0.05份;
所述助溶剂为聚乙烯吡咯烷酮;
所述分散剂以重量份为单位,包括以下原料:羧甲基纤维素钾4-6份、改性淀粉3-6份、聚丙烯酸钾2-4份、海藻酸钾1-3份;
所述相容剂为美国杜邦EEA2112AC;
所述稳定剂为黄原胶;
所述抗菌剂为富马酸糠醇甲酯;
所述新型培养基的备方法,包括以下步骤:
S1:将葡萄、哈密瓜、沙梨汁、柠檬混合用搅碎机搅碎,所得榨汁过2000-6000目筛子,制得混合汁;
S2:茶多酚的制备,包括以下步骤:
S21:将绿茶粉碎后过50-90目筛,与质量分数为36%-62%的乙醇水溶液按质量比为1:13-19混合,在温度为30-36℃,超声波功率为180-260W下,提取2-3次,每次7-15min,过滤,合并滤液,浓缩,制得茶多酚粗提取液;
S22:将步骤S21制得的茶多酚粗提取液加入到KCl溶液中,pH调节至6.2-6.7,在离心转速为3000-6000r/min下除去杂质,采用0.05-0.1μm滤膜在温度为30-37℃下对离心后的溶液进行过滤,制得过滤液;
S23:将步骤S22制得的过滤液用乙醚提取,在温度≤-12℃下冷冻浓缩,在温度为78-88℃下干燥后制得茶多酚;
S3:将步骤S1制得的混合汁、步骤S2制得的茶多酚、硝酸钾、磷酸铁、硝酸铵、硝酸钙、硝酸镁、碘酸钾、硼酸钠、钼酸钾、氯化锌、硫酸亚锰、氯化铜、硝酸铁、维生素、氨基酸、吲哚丁酸、赤霉素、6-苄基腺膘呤、异戊烯氨基嘌呤、萘乙酸、琼脂、激动素、助溶剂、分散剂、相容剂、稳定剂、抗菌剂、水按比例混合均匀,制得混合液;
S4:将步骤S3制得的混合液pH值调节至5-5.6,接着采用脉动真空压力蒸气灭菌器在温度为134-136℃,压力为210-230KPa下,灭菌1.5-2min,制得新型培养基。
下面通过更具体的实施例加以说明。
实施例1
一种新型培养基,以重量份为单位,包括以下原料:葡萄汁250份、哈密瓜汁200份、沙梨汁160份、柠檬汁140份、茶多酚65份、硝酸钾7份、磷酸铁5份、硝酸铵5份、硝酸钙0.9份、硝酸镁0.7份、碘酸钾0.4份、硼酸钠0.4份、钼酸钾0.4份、氯化锌0.3份、硫酸亚锰03份、氯化铜0.2份、硝酸铁0.2份、维生素0.2份、氨基酸0.2份、吲哚丁酸0.08份、赤霉素0.08份、6-苄基腺膘呤0.08份、异戊烯氨基嘌呤0.1份、萘乙酸0.06份、琼脂0.3份、激动素0.08份、助溶剂2份、分散剂1.6份、相容剂1.6份、稳定剂1.5份、抗菌剂2.2份、水10000份;
所述维生素由以下组分组成:生素A0.08份、维生素 B10.08份、维生素B20.04份、维生素D0.04份;
所述氨基酸由以下组分组成:甘氨酸0.09份、胱氨酸0.07份、脯氨酸0.06份、丝氨酸0.04份;
所述助溶剂为聚乙烯吡咯烷酮;
所述分散剂以重量份为单位,包括以下原料:羧甲基纤维素钾5份、改性淀粉5份、聚丙烯酸钾3份、海藻酸钾2份;
所述相容剂为美国杜邦EEA2112AC;
所述稳定剂为黄原胶;
所述抗菌剂为富马酸糠醇甲酯;
所述新型培养基的备方法,包括以下步骤:
S1:将葡萄、哈密瓜、沙梨汁、柠檬混合用搅碎机搅碎,所得榨汁过4000目筛子,制得混合汁;
S2:茶多酚的制备,包括以下步骤:
S21:将绿茶粉碎后过80目筛,与质量分数为50%的乙醇水溶液按质量比为1:16混合,在温度为34℃,超声波功率为220W下,提取2次,每次11min,过滤,合并滤液,浓缩,制得茶多酚粗提取液;
S22:将步骤S21制得的茶多酚粗提取液加入到KCl溶液中,pH调节至6.5,在离心转速为5000r/min下除去杂质,采用0.08μm滤膜在温度为34℃下对离心后的溶液进行过滤,制得过滤液;
S23:将步骤S22制得的过滤液用乙醚提取,在温度为-12℃下冷冻浓缩,在温度为84℃下干燥后制得茶多酚;
S3:将步骤S1制得的混合汁、步骤S2制得的茶多酚、硝酸钾、磷酸铁、硝酸铵、硝酸钙、硝酸镁、碘酸钾、硼酸钠、钼酸钾、氯化锌、硫酸亚锰、氯化铜、硝酸铁、维生素、氨基酸、吲哚丁酸、赤霉素、6-苄基腺膘呤、异戊烯氨基嘌呤、萘乙酸、琼脂、激动素、助溶剂、分散剂、相容剂、稳定剂、抗菌剂、水按比例混合均匀,制得混合液;
S4:将步骤S3制得的混合液pH值调节至5.3,接着采用脉动真空压力蒸气灭菌器在温度为135℃,压力为220KPa下,灭菌1.8min,制得新型培养基。
实施例2
一种新型培养基,以重量份为单位,包括以下原料:葡萄汁205份、哈密瓜汁155份、沙梨汁125份、柠檬汁105份、茶多酚50份、硝酸钾5份、磷酸铁4份、硝酸铵4份、硝酸钙0.8份、硝酸镁0.6份、碘酸钾0.3份、硼酸钠0.3份、钼酸钾0.3份、氯化锌0.2份、硫酸亚锰0.2份、氯化铜0.2份、硝酸铁0.2份、维生素0.1份、氨基酸0.1份、吲哚丁酸0.06份、赤霉素0.06份、6-苄基腺膘呤0.06份、异戊烯氨基嘌呤0.08份、萘乙酸0.04份、琼脂0.2份、激动素0.06份、助溶剂1份、分散剂0.8份、相容剂1.2份、稳定剂1份、抗菌剂1.5份、水8000份;
所述维生素由以下组分组成:生素A0.06份、维生素 B10.06份、维生素B20.04份、维生素D0.04份;
所述氨基酸由以下组分组成:甘氨酸0.08份、胱氨酸0.06份、脯氨酸0.04份、丝氨酸0.02份;
所述助溶剂为聚乙烯吡咯烷酮;
所述分散剂以重量份为单位,包括以下原料:羧甲基纤维素钾4份、改性淀粉3份、聚丙烯酸钾2份、海藻酸钾1份;
所述相容剂为美国杜邦EEA2112AC;
所述稳定剂为黄原胶;
所述抗菌剂为富马酸糠醇甲酯;
所述新型培养基的备方法,包括以下步骤:
S1:将葡萄、哈密瓜、沙梨汁、柠檬混合用搅碎机搅碎,所得榨汁过2000目筛子,制得混合汁;
S2:茶多酚的制备,包括以下步骤:
S21:将绿茶粉碎后过50目筛,与质量分数为36%的乙醇水溶液按质量比为1:13混合,在温度为30℃,超声波功率为180W下,提取2次,每次15min,过滤,合并滤液,浓缩,制得茶多酚粗提取液;
S22:将步骤S21制得的茶多酚粗提取液加入到KCl溶液中,pH调节至6.2,在离心转速为3000r/min下除去杂质,采用0.05μm滤膜在温度为30℃下对离心后的溶液进行过滤,制得过滤液;
S23:将步骤S22制得的过滤液用乙醚提取,在温度为-18℃下冷冻浓缩,在温度为78℃下干燥后制得茶多酚;
S3:将步骤S1制得的混合汁、步骤S2制得的茶多酚、硝酸钾、磷酸铁、硝酸铵、硝酸钙、硝酸镁、碘酸钾、硼酸钠、钼酸钾、氯化锌、硫酸亚锰、氯化铜、硝酸铁、维生素、氨基酸、吲哚丁酸、赤霉素、6-苄基腺膘呤、异戊烯氨基嘌呤、萘乙酸、琼脂、激动素、助溶剂、分散剂、相容剂、稳定剂、抗菌剂、水按比例混合均匀,制得混合液;
S4:将步骤S3制得的混合液pH值调节至5,接着采用脉动真空压力蒸气灭菌器在温度为134℃,压力为210KPa下,灭菌2min,制得新型培养基。
实施例3
一种新型培养基,以重量份为单位,包括以下原料:葡萄汁295份、哈密瓜汁245份、沙梨汁200份、柠檬汁180份、茶多酚80份、硝酸钾8份、磷酸铁6份、硝酸铵6份、硝酸钙1份、硝酸镁0.8份、碘酸钾0.5份、硼酸钠0.5份、钼酸钾0.5份、氯化锌0.4份、硫酸亚锰0.4份、氯化铜0.3份、硝酸铁0.3份、维生素0.3份、氨基酸0.3份、吲哚丁酸0.1份、赤霉素0.1份、6-苄基腺膘呤0.1份、异戊烯氨基嘌呤0.12份、萘乙酸0.08份、琼脂0.4份、激动素0.09份、助溶剂3份、分散剂2.5份、相容剂2份、稳定剂2份、抗菌剂3份、水12000份;
所述维生素由以下组分组成:生素A0.1份、维生素 B10.1份、维生素B20.05份、维生素D0.05份;
所述氨基酸由以下组分组成:甘氨酸0.1份、胱氨酸0.08份、脯氨酸0.07份、丝氨酸0.05份;
所述助溶剂为聚乙烯吡咯烷酮;
所述分散剂以重量份为单位,包括以下原料:羧甲基纤维素钾6份、改性淀粉6份、聚丙烯酸钾4份、海藻酸钾3份;
所述相容剂为美国杜邦EEA2112AC;
所述稳定剂为黄原胶;
所述抗菌剂为富马酸糠醇甲酯;
所述新型培养基的备方法,包括以下步骤:
S1:将葡萄、哈密瓜、沙梨汁、柠檬混合用搅碎机搅碎,所得榨汁过6000目筛子,制得混合汁;
S2:茶多酚的制备,包括以下步骤:
S21:将绿茶粉碎后过90目筛,与质量分数为62%的乙醇水溶液按质量比为1:19混合,在温度为36℃,超声波功率为260W下,提取3次,每次7min,过滤,合并滤液,浓缩,制得茶多酚粗提取液;
S22:将步骤S21制得的茶多酚粗提取液加入到KCl溶液中,pH调节至6.7,在离心转速为6000r/min下除去杂质,采用0.1μm滤膜在温度为37℃下对离心后的溶液进行过滤,制得过滤液;
S23:将步骤S22制得的过滤液用乙醚提取,在温度为-20℃下冷冻浓缩,在温度为88℃下干燥后制得茶多酚;
S3:将步骤S1制得的混合汁、步骤S2制得的茶多酚、硝酸钾、磷酸铁、硝酸铵、硝酸钙、硝酸镁、碘酸钾、硼酸钠、钼酸钾、氯化锌、硫酸亚锰、氯化铜、硝酸铁、维生素、氨基酸、吲哚丁酸、赤霉素、6-苄基腺膘呤、异戊烯氨基嘌呤、萘乙酸、琼脂、激动素、助溶剂、分散剂、相容剂、稳定剂、抗菌剂、水按比例混合均匀,制得混合液;
S4:将步骤S3制得的混合液pH值调节至5.6,接着采用脉动真空压力蒸气灭菌器在温度为136℃,压力为230KPa下,灭菌1.5min,制得新型培养基。
为验证本发明培养基的效果,通过以下实验验证。
每组选用规格基本一致的2-3 cm的半枝莲带芽茎段数量100,对照组1以葡萄汁、哈密瓜汁、沙梨汁、柠檬汁、硝酸钾、磷酸铁、硝酸铵、硝酸钙、硝酸镁、碘酸钾、硼酸钠、钼酸钾、氯化锌、硫酸亚锰、氯化铜、硝酸铁、维生素、氨基酸、吲哚丁酸、赤霉素、6-苄基腺膘呤、异戊烯氨基嘌呤、萘乙酸、琼脂、激动素、助溶剂、分散剂、相容剂、稳定剂、抗菌剂、水组成的培养基,对照组2单独以茶多酚为培养基,其他采用实施例1-3的培养基。培养110天后测量半枝莲苗黄酮类化合物平均得率和长度,结果见表1。
表1 培养基组培半枝莲苗黄酮类化合物平均得率和长度情况
由表1可知,实施例1-3的半枝莲苗黄酮类化合物平均得率比对照组1的半枝莲苗黄酮类化合物平均得率高19.23%-29.49%;实施例1-3的半枝莲苗长度比对照组1的半枝莲苗长度短1.34%-2.18%,对照组2半枝莲几乎不生长,说明了茶多酚的存在能大大提高半枝莲苗黄酮类化合物平均得率,但同时茶多酚作为抗氧剂,也抑制植物细胞的生长,然而在其他培养基组分伍配作用下,茶多酚的抑制作用较小。
每组选用规格基本一致的2-3cm的半枝莲带芽茎段数量100,对照组以茶多酚、硝酸钾、磷酸铁、硝酸铵、硝酸钙、硝酸镁、碘酸钾、硼酸钠、钼酸钾、氯化锌、硫酸亚锰、氯化铜、硝酸铁、维生素、氨基酸、吲哚丁酸、赤霉素、6-苄基腺膘呤、异戊烯氨基嘌呤、萘乙酸、琼脂、激动素、助溶剂、分散剂、相容剂、稳定剂、抗菌剂、水组成的培养基,其他采用实施例1-3的培养基。培养110天后测量组培苗的多糖平均得率和长度,结果见表2。
表2 培养基组培半枝莲苗多糖平均得率和长度情况
由表2可知,实施例1-3的半枝莲苗多糖平均得率比对照组的半枝莲苗多糖平均得率高25.8%-30.6%;实施例1-3的半枝莲苗长度比对照组的半枝莲苗长度短0.34%-1.2%,说明了培养基无水果汁,或水果汁与其他培养基组分伍配作用下,对半枝莲苗高度增长作用不大。
表3是实施例1-3培养基组培半枝莲苗移栽存活情况。
表3 培养基组培半枝莲苗移栽存活情况
由表3可以知道,以本发明的培养基组培半枝莲苗的平均移栽存活率为99%-100%,说明了本发明培养基有利于提高半枝莲苗的移栽存活率。
以上内容不能认定本发明的具体实施只局限于这些说明,对于本发明所属技术领域的普通技术人员来说,在不脱离本发明构思的前提下,还可以做出若干简单推演或替换,都应当视为属于本发明由所提交的权利要求书确定的专利保护范围。
Claims (7)
1.一种新型培养基,其特征在于,以重量份为单位,包括以下原料:葡萄汁205-295份、哈密瓜汁155-245份、沙梨汁125-200份、柠檬汁105-180份、茶多酚50-80份、硝酸钾5-8份、磷酸铁4-6份、硝酸铵4-6份、硝酸钙0.8-1份、硝酸镁0.6-0.8份、碘酸钾0.3-0.5份、硼酸钠0.3-0.5份、钼酸钾0.3-0.5份、氯化锌0.2-0.4份、硫酸亚锰0.2-0.4份、氯化铜0.2-0.3份、硝酸铁0.2-0.3份、维生素0.1-0.3份、氨基酸0.1-0.3份、吲哚丁酸0.06-0.1份、赤霉素0.06-0.1份、6-苄基腺膘呤0.06-0.1份、异戊烯氨基嘌呤0.08-0.12份、萘乙酸0.04-0.08份、琼脂0.2-0.4份、激动素0.06-0.09份、助溶剂1-3份、分散剂0.8-2.5份、相容剂1.2-2份、稳定剂1-2份、抗菌剂1.5-3份、水8000-12000份;
所述分散剂以重量份为单位,包括以下原料:羧甲基纤维素钾4-6份、改性淀粉3-6份、聚丙烯酸钾2-4份、海藻酸钾1-3份;
所述新型培养基的备方法,包括以下步骤:
S1:将葡萄、哈密瓜、沙梨汁、柠檬混合用搅碎机搅碎,所得榨汁过2000-6000目筛子,制得混合汁;
S2:茶多酚的制备,包括以下步骤:
S21:将绿茶粉碎后过50-90目筛,与质量分数为36%-62%的乙醇水溶液按质量比为1:13-19混合,在温度为30-36℃,超声波功率为180-260W下,提取2-3次,每次7-15min,过滤,合并滤液,浓缩,制得茶多酚粗提取液;
S22:将步骤S21制得的茶多酚粗提取液加入到KCl溶液中,pH调节至6.2-6.7,在离心转速为3000-6000r/min下除去杂质,采用0.05-0.1μm滤膜在温度为30-37℃下对离心后的溶液进行过滤,制得过滤液;
S23:将步骤S22制得的过滤液用乙醚提取,在温度≤-12℃下冷冻浓缩,在温度为78-88℃下干燥后制得茶多酚;
S3:将步骤S1制得的混合汁、步骤S2制得的茶多酚、硝酸钾、磷酸铁、硝酸铵、硝酸钙、硝酸镁、碘酸钾、硼酸钠、钼酸钾、氯化锌、硫酸亚锰、氯化铜、硝酸铁、维生素、氨基酸、吲哚丁酸、赤霉素、6-苄基腺膘呤、异戊烯氨基嘌呤、萘乙酸、琼脂、激动素、助溶剂、分散剂、相容剂、稳定剂、抗菌剂、水按比例混合均匀,制得混合液;
S4:将步骤S3制得的混合液pH值调节至5-5.6,接着采用脉动真空压力蒸气灭菌器在温度为134-136℃,压力为210-230KPa下,灭菌1.5-2min,制得新型培养基。
2.根据权利要求1所述新型培养基,其特征在于,所述维生素由以下组分组成:生素A0.06-0.1份、维生素 B10.06-0.1份、维生素B20.04-0.05份、维生素D0.04-0.05份。
3.根据权利要求1所述新型培养基,其特征在于,所述氨基酸由以下组分组成:甘氨酸0.08-0.1份、胱氨酸0.06-0.08份、脯氨酸0.04-0.07份、丝氨酸0.02-0.05份。
4.根据权利要求1所述新型培养基,其特征在于,所述助溶剂为聚乙烯吡咯烷酮。
5.根据权利要求1所述新型培养基,其特征在于,所述相容剂为美国杜邦EEA2112AC。
6.根据权利要求1所述新型培养基,其特征在于,所述稳定剂为黄原胶。
7.根据权利要求1所述新型培养基,其特征在于,所述抗菌剂为富马酸糠醇甲酯。
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