从桑葚红中提取红色素的方法
技术领域
本发明属于色素提取技术领域,具体涉及一种从桑葚中提取红色素的方法。
背景技术
桑葚,是桑科桑属植物桑的近成熟聚花果,俗物桑枣、桑果,桑葚为多年生桑科落叶乔木桑树的成熟果穗桑葚不但滋味鲜美,而且具有许多保健功能,自古以来,桑葚就作为中药材应用。《神农本草》、《本草纲目》等书中均有记载,认为桑葚“止消渴,利五脏关节,通血气,久服不饿,令人聪明,发黑不老……” ;“捣汁饮,解中酒毒,酿酒服,利水消肿” ;“益肾脏而固精,久服黑发,明目……” 。桑葚富含葡萄糖、果糖、糅酸、苹果酸、亚油酸、多种维生素和人体必需氨基酸及锌、钾、镁、磷等微量矿质元素,具有很高的营养价值和保健功能,中医认为,桑葚味甘性寒,归心、肝、肾经,具有滋阴补血、生津止渴、润肠通便等功能,成熟桑葚营养丰富,质地油润,酸甜适口,深受人们的喜爱,桑葚已被国家卫生部认为定“既是食品又是药品”农产品这五,随着科技的发展和对桑葚色素的研究的不断深入,人们发现桑葚中的天然红色素含量大、色度高、安全无毒,另外桑葚红色素还有一定的营养的药理保健作用。
近年来,人们对桑葚的化学成分、药理作用、活性功能进行了多方面的研究,发现桑葚中含有丰富的人体必需的氨基酸、维生素、矿物质、黄酮、生物碱等多种功能成分,具有免疫促进作用,降血糖、降血脂、降血压、抗炎、抗衰老、抗肿瘤等功效。具体表现为:抗氧化作用,桑葚红色素具有良好的抗氧化作用,其主要成分花青素有较强的抗氧化及消除自由基等作用;对肝脏具有保护作用,可以降低血清蛋白脂质体的过氧化作用,并且对缺血肝脏再灌注引起的氧化性损伤具有保护作用;对心血管的保护作用,低密度脂蛋白的氧化和血小板的聚集是诱发埃及粥样硬化的主要因素,桑葚花色苷能有效的抑制这两个过程的发生。桑葚花色苷还可降低毛细血管的脆性,保持血管的通透性,同时还可以用于抗炎症、抗坏血酸等以及降低糖尿病及其并发症的发生机率。
桑葚红色素又名桑葚红,桑葚色素,主要成分为花色苷类化合物,还含有胡萝卜素、各种维生素、糖类以及脂肪油等,紫红色稠液体,易溶于水或稀醇中。桑椹红色素是很好的天然色素,属花青素类,是一种广泛存在于桑葚中的天然色素,桑葚中的红色素含量较高,性质稳定,是从自然界中提取花青素的主要来源之一。桑葚红色素其着色性好,安全性好,水溶性强可以广泛应用于饮料,冷饮,焙烧制品,口香糖,果冻,固体清凉饮料及果酒等,还可以用做酸碱指示剂。
传统的色素提取工艺多采用浸提、蒸发浓缩、溶剂提纯等旧工艺,存在能耗高、溶剂回收难度大、生产过程复杂、色素被破坏、产品纯度低等问题。
目前,主要提取桑椹红色素的方法是溶剂浸提法,常用的有:盐酸-乙醇提取法和柠檬酸-乙醇提取法,毛平生等在《中国蚕业》第26 卷4 期的文章《桑椹天然红色素提取对比试验》中,使用0.5%柠檬酸-80%乙醇(1:1,体积比) 和0.1%盐酸-50%乙醇溶液(1:1,体积比),试验温度分别为60℃和70℃,物料比分别为1:2 和1:6,提取时间为2h,以L4(23) 正交设计试验,每个实验重复1 次,筛选出最佳提取条件。试验结果表明:0.5%柠檬酸-80%乙醇体系在70℃、料液为1:6、提取时间2h、有最高的吸光度和提取率。
上述方法中的柠檬酸需要跟80%乙醇进行勾兑,且柠檬酸浓度需要0.5%,提取温度需要70℃。该方法中需采用有机溶剂乙醇,这样就带来了后续的溶剂处理工序,而且也给环境造成了负担。
CN 101531825 B公开了《一种桑椹红色素的提取工艺》,该工艺包括以下步骤:
①前加工:将桑椹粉碎;
②萃取:用重量千分比为3‰的柠檬酸水溶液在42~45℃,浸泡粉碎的桑椹120 分钟,得提取液;
③提纯:提取液经过滤、树脂吸附、洗脱、浓缩,制得桑椹红色素;
步骤③中所述过滤步骤:提取液先经过振动筛进行第一次过滤,再经过陶瓷膜过滤;
步骤③中所述吸附步骤:过滤后的提取液经吸附树脂吸附,分离出桑椹红色素;
所述洗脱步骤:用体积百分比为15%~80%的酒精洗脱树脂,得洗脱液;
所述浓缩步骤:洗脱液经纳滤膜进行第一次浓缩,然后在30℃~50℃下,利用真空离心薄膜蒸发器进行第二次浓缩,制取桑椹红色素原液;
所述桑椹红色素原液经真空干燥制得粉末状桑椹红色素。
上述方法的缺点是:上述的方法需采用各种吸附树脂,其投资大、成本较高;而且上述的方法提取时间长,工艺繁琐,实验操作耗时较长。
牛剑峰在《桑椹红色素的提取及纯化研究》一文中研究了桑椹红色素提取的最佳工艺条件,并利用大孔树脂AB-8对桑椹红色素进行了纯化。研究结果表明:在温度为80℃、pH为1.5、时间为2.5h、提取液浓度为85%时,所提取的天然桑椹红色素提取率最高,AB-8大孔树脂纯化时利用体积分数为70%的乙醇洗脱,其效果较好。
上述方法的缺点是:上述的方法提取分离得到的红色素产品,在水中溶解性能稍差,不溶于石油醚、丙酮等;日光灯照射下稳定性稍差,阳光直射时分解很快;并且上述方法其提取成本较高。
发明内容
为解决上述的技术问题,本发明提供了一种从桑葚中提取天然红色素的方法,以克服目前传统的红色素提取方法存在的缺陷,如采用有机溶剂提取红色素带来的后续回收及产生的环境问题,如采用吸附树脂提取成本高的问题,本发明的方法无须有机溶剂,而且提取成本低,但是其提取率高,最大限度保留桑葚天然生物色素成分。
一种从桑葚中提取红色素的方法,该方法包括下述的步骤:
(1)预处理:清洗桑葚果、粉碎,打浆,得桑葚果浆;
(2)冷冻破壁法制备分离液:将步骤(1)中所得的桑葚果浆置于-20~-10℃温度下冷冻30-50min/L,然后在30~50℃的温度下解冻10-20min/L,果浆分成上、下两层,上层为分离液,下层为果渣,将果渣和上层分离液分离,分别收集上层的分离液和果渣备用;
(3)蒸馏水浸提提取液:按每1kg果渣加入5-10L蒸馏水的比例在果渣中加入蒸馏水,搅拌15-30min,于3000-4500rpm的转速下离心4-6min,得提取液;
(4)酶法脱胶:将步骤(2)中收集的分离液和步骤(3)所得的提取液搅拌混匀得色素溶液,向上述的溶液中加入果胶酶,果胶酶与色素溶液的体积比为3-8mL:1L,搅拌均匀,40-55℃水浴1-2h;得脱胶后的色素溶液;
(5)蒸馏回收红色素:将步骤(4)中所得脱胶色素溶液减压浓缩至原体积的1/6-1/5,得粘稠膏状红色素。
步骤(2)冷冻破壁法制备分离液步骤中,冷冻破壁的温度为-15℃,时间为40min,解冻的温度为40℃,时间为15min。
步骤(3)中,果渣与蒸馏水的比例为1kg:6-9L,搅拌时间为20min。
上述的步骤(4)中,果胶酶与色素溶液的体积比为4mL:1L,水浴温度为50℃,时间为1.5h。
作为本发明的一种改进,步骤(2)中,冷冻破壁法制备分离液:冷冻采用分段式冷冻法,将步骤(1)中所得的桑葚果浆置于-20~-10℃温度下冷冻30-50min/L,然后在30-50℃的温度下解冻10-20min/L;继续将冷冻后的桑葚果浆置于-30~-20℃的温度下冷冻30min/L,再在30~50℃的温度下解冻10-20min/L;解冻后的果浆分成上、下两层,上层为分离液,下层为果渣,将果渣和上层分离液分离,分别收集上层的分离液和果渣备用。
采用分段式冷冻方法,先在-20~-10℃下冷冻,使桑葚果浆中的色素溶出,再在更低的温度下进一步冷冻,继续破坏桑葚的细胞壁,使桑葚果浆中的色素更进一步的溶出,有利于色素的全部溶出。
作为本发明的更进一步的改进,步骤(4)中酶法脱胶所采用的酶为果胶酶、纤维素酶和酸性蛋白酶,其比例为3:1:1,其具体的步骤是:将步骤(2)中收集的分离液和步骤(3)所得的提取液搅拌混匀得色素溶液,向上述的溶液中加入上述三种酶的复合酶,复合酶与色素溶液的体积比为3-8mL:1L,搅拌均匀,55℃水浴1.5-2h;得脱胶后的色素溶液。果渣中除含有桑葚红色素以外,还含有其它的物质,采用复合酶系对果渣进行酶解,优于单一采用果胶酶作用的效果,单一的果胶酶其作用是破壁和澄清,而采用复合酶系可以进一步的达到破壁的效果。
更优选的,一种从桑葚中提取红色素的方法,包括下述的步骤:
(1)预处理:清洗桑葚果、粉碎,打浆,得桑葚果浆;
(2)冷冻破壁法制备分离液:所述的冷冻采用分段式冷冻法,将步骤(1)中所得的桑葚果浆置于-15℃温度下冷冻40min/L,然后在40℃的温度下解冻15min/L;继续将冷冻后的桑葚果浆置于-25℃的温度下冷冻,再在40℃的温度下解冻15min/L;解冻后的果浆分成上、下两层,上层为分离液,下层为果渣,将果渣和上层分离液分离,分别收集上层的分离液和果渣备用;
(3)蒸馏水浸提提取液:按每1kg果渣加入5-10L蒸馏水的比例在果渣中加入蒸馏水,搅拌20min,于4000rpm的转速下离心5min,得提取液;
(4)酶法脱胶:将步骤(2)中收集的分离液和步骤(3)所得的提取液搅拌混匀得色素溶液,向上述的溶液中加入复合酶,复合酶为果胶酶、纤维素酶和酸性蛋白酶,其比例为3:1:1,复合酶与色素溶液的体积比为3-8mL:1L,搅拌均匀,55℃水浴1.5-2h;得脱胶后的色素溶液;
(5)蒸馏回收红色素:将步骤(4)中所得脱胶色素溶液减压浓缩至原体积的1/6,得粘稠膏状红色素。
在本发明的方法中,采用冷冻破壁的方法将果浆分成果渣和分离液,较大限度的保留了桑葚中的色素成份,因为红色素对光和热较为敏感;而且采用分段式冷冻破壁,其效果要优于采用一段式冷冻破壁的效果;
在果渣中加入蒸馏水进一步提取,使溶于水中的红色素得到进一步的回收,从而彻底的提取红色素;
酶法脱胶步骤中,采用果胶酶,使桑葚果渣中的红色素进一步的溶出,提高红色素的提取率,在上述的提取过程中,克服了传统方法采用有机溶剂的提取法,无须采用有机溶剂,从而减少了后续有机溶剂回收的步骤,而且也不会给环境带来污染和危害;而且本发明中采用复合酶系作用于桑葚果浆,其效果要优于单一的果胶酶。
另外,本发明的方法其步骤较为简单,但是提取率高。
本发明的有益效果在于,冷冻破壁法最大限度的保留了桑葚果肉中的天然生物活性色素成分;本提取方法制备得到的天然食用红色素水溶性强,颜色为紫红色,并且最大限度的保留了桑葚中的营养成分,可用于食品,饮料,化妆品等方面。
具体实施方式
下面结合具体实施例对本发明作更进一步的说明,以便本领域的技术人员更了解本发明,但并不因此限制本发明。
实施例1
(1)预处理:清洗桑葚果、粉碎,打浆,得桑葚果浆;
(2)冷冻破壁法制备分离液:将步骤(1)中所得的桑葚果浆置于-20℃温度下冷冻50min/L,然后在50℃的温度下解冻20min/L,果浆分成上、下两层,上层为分离液,下层为果渣,将果渣和上层分离液分离,分别收集上层的分离液和果渣备用;
(3)蒸馏水浸提提取液:按每1kg果渣加入5-10L蒸馏水的比例在果渣中加入蒸馏水,搅拌30min,于4500rpm的转速下离心6min,得提取液;
(4)酶法脱胶:将步骤(2)中收集的分离液和步骤(3)所得的提取液搅拌混匀得色素溶液,向上述的溶液中加入果胶酶,果胶酶与色素溶液的体积比为8mL:1L,搅拌均匀,55℃水浴2h;得脱胶后的色素溶液;
(5)蒸馏回收红色素:将步骤(4)中所得脱胶色素溶液减压浓缩至原体积的1/5,得粘稠膏状红色素。
经真空干燥后,称取红色素的质量,计算其提取率。
称取一定质量的红色素成品用甲醇溶解,利用HPLC技术进行分析,以检测样品纯度。
对于本发明中色价的测定,可以按照中华人名共和国行业标准QB-1415-91 执行;以下实施例的计算方法均同。
提取的色素其色价为35.60,纯度为78%,提取率为13.27%。
实施例2
(1)预处理:清洗桑葚果、粉碎,打浆,得桑葚果浆;
(2)冷冻破壁法制备分离液:将步骤(1)中所得的桑葚果浆置于-10℃温度下冷冻30min/L,然后在30℃的温度下解冻10min/L,果浆分成上、下两层,上层为分离液,下层为果渣,将果渣和上层分离液分离,分别收集上层的分离液和果渣备用;
(3)蒸馏水浸提提取液:按每1kg果渣加入5-10L蒸馏水的比例在果渣中加入蒸馏水,搅拌15min,于3000rpm的转速下离心4min,得提取液;
(4)酶法脱胶:将步骤(2)中收集的分离液和步骤(3)所得的提取液搅拌混匀得色素溶液,向上述的溶液中加入果胶酶,果胶酶与色素溶液的体积比为3mL:1L,搅拌均匀,40℃水浴1h;得脱胶后的色素溶液;
(5)蒸馏回收红色素:将步骤(4)中所得脱胶色素溶液减压浓缩至原体积的1/6,得粘稠膏状红色素。
提取的色素其色价为34.65,纯度为79%,提取率为13.98%。
实施例3
(1)预处理:清洗桑葚果、粉碎,打浆,得桑葚果浆;
(2)冷冻破壁法制备分离液:将步骤(1)中所得的桑葚果浆置于-15℃温度下冷冻40min/L,然后在30-50℃的温度下解冻15min/L,果浆分成上、下两层,上层为分离液,下层为果渣,将果渣和上层分离液分离,分别收集上层的分离液和果渣备用;
(3)蒸馏水浸提提取液:按每1kg果渣加入8L蒸馏水的比例在果渣中加入蒸馏水,搅拌20min,于4000rpm的转速下离心5min,得提取液;
(4)酶法脱胶:将步骤(2)中收集的分离液和步骤(3)所得的提取液搅拌混匀得色素溶液,向上述的溶液中加入果胶酶,果胶酶与色素溶液的体积比为6mL:1L,搅拌均匀,45℃水浴1.5h;得脱胶后的色素溶液;
(5)蒸馏回收红色素:将步骤(4)中所得脱胶色素溶液减压浓缩至原体积的1/6,得粘稠膏状红色素。
提取的色素其色价为38.60,纯度为81%,提取率为12.79%。
实施例4
(1)预处理:清洗桑葚果、粉碎,打浆,得桑葚果浆;
(2)冷冻破壁法制备分离液:所述的冷冻采用分段式冷冻法,将步骤(1)中所得的桑葚果浆置于-15℃温度下冷冻40min/L,然后在40℃的温度下解冻15min/L;继续将冷冻后的桑葚果浆置于-25℃的温度下冷冻,再在40℃的温度下解冻15min/L;解冻后的果浆分成上、下两层,上层为分离液,下层为果渣,将果渣和上层分离液分离,分别收集上层的分离液和果渣备用;
(3)蒸馏水浸提提取液:按每1kg果渣加入8L蒸馏水的比例在果渣中加入蒸馏水,搅拌20min,于4000rpm的转速下离心5min,得提取液;
(4)酶法脱胶:将步骤(2)中收集的分离液和步骤(3)所得的提取液搅拌混匀得色素溶液,向上述的溶液中加入复合酶,复合酶为果胶酶、纤维素酶和酸性蛋白酶,其比例为3:1:1,复合酶与色素溶液的体积比为5mL:1L,搅拌均匀,50℃下水浴1.5h;得脱胶后的色素溶液;
(5)蒸馏回收红色素:将步骤(4)中所得脱胶色素溶液减压浓缩至原体积的1/6,得粘稠膏状红色素。
对比例1
(1)预处理:清洗桑葚果、粉碎,打浆,得桑葚果浆;
(2)冷冻破壁法制备分离液:将步骤(1)中所得的桑葚果浆置于-15℃温度下冷冻40min/L,然后在40℃的温度下解冻15min/L;解冻后的果浆分成上、下两层,上层为分离液,下层为果渣,将果渣和上层分离液分离,分别收集上层的分离液和果渣备用;
(3)蒸馏水浸提提取液:按每1kg果渣加入8L蒸馏水的比例在果渣中加入蒸馏水,搅拌20min,于4000rpm的转速下离心5min,得提取液;
(4)酶法脱胶:将步骤(2)中收集的分离液和步骤(3)所得的提取液搅拌混匀得色素溶液,向上述的溶液中加入复合酶,复合酶为果胶酶、纤维素酶和酸性蛋白酶,其比例为3:1:1,复合酶与色素溶液的体积比为5mL:1L,搅拌均匀,50℃下水浴1.5h;得脱胶后的色素溶液;
(5)蒸馏回收红色素:将步骤(4)中所得脱胶色素溶液减压浓缩至原体积的1/6,得粘稠膏状红色素。
与实施例4的不同之处在于,对比例1中的冷冻方式采用一段式冷冻,其余条件完全相同。
对比例2
(1)预处理:清洗桑葚果、粉碎,打浆,得桑葚果浆;
(2)冷冻破壁法制备分离液:所述的冷冻采用分段式冷冻法,将步骤(1)中所得的桑葚果浆置于-15℃温度下冷冻40min/L,然后在40℃的温度下解冻15min/L;继续将冷冻后的桑葚果浆置于-25℃的温度下冷冻30min/L,再在40℃的温度下解冻15min/L;解冻后的果浆分成上、下两层,上层为分离液,下层为果渣,将果渣和上层分离液分离,分别收集上层的分离液和果渣备用;
(3)蒸馏水浸提提取液:按每1kg果渣加入8L蒸馏水的比例在果渣中加入蒸馏水,搅拌20min,于4000rpm的转速下离心5min,得提取液;
(4)酶法脱胶:酶法脱胶:将步骤(2)中收集的分离液和步骤(3)所得的提取液搅拌混匀得色素溶液,向上述的溶液中加入果胶酶,果胶酶与色素溶液的体积比为3-8mL:1L,搅拌均匀,40-55℃水浴1-2h;得脱胶后的色素溶液;
(5)蒸馏回收红色素:将步骤(4)中所得脱胶色素溶液减压浓缩至原体积的1/6,得粘稠膏状红色素。
对比例2中,采用单一的果胶酶脱胶,其余条件与实施例4完全相同。
实施例4中,提取的色素其色价为65.80,纯度为89%,提取率为19.27%。
对比例1中,提取的色素其色价为48.90,纯度为83%,提取率为16.98%。
对比例2中,提取的色素其色价为42.55,纯度为82%,提取率为17.12%。
从以上的结果对比看,分段式冷冻,其提取的色素提取率更高,而且其色价要高于对比例1中的色价。
复合酶系提取色素,其提取色素的效率更高,而且其色价要高于对比例2中的色价。
实施例5
(1)预处理:清洗桑葚果、粉碎,打浆,得桑葚果浆;
(2)冷冻破壁法制备分离液:所述的冷冻采用分段式冷冻法,将步骤(1)中所得的桑葚果浆置于-10℃温度下冷冻30min/L,然后在40℃的温度下解冻10min/L;继续将冷冻后的桑葚果浆置于-20℃的温度下冷冻30min/L,再在40℃的温度下解冻10min/L;解冻后的果浆分成上、下两层,上层为分离液,下层为果渣,将果渣和上层分离液分离,分别收集上层的分离液和果渣备用;
(3)蒸馏水浸提提取液:按每1kg果渣加入6L蒸馏水的比例在果渣中加入蒸馏水,搅拌20min,于4000rpm的转速下离心5min,得提取液;
(4)酶法脱胶:将步骤(2)中收集的分离液和步骤(3)所得的提取液搅拌混匀得色素溶液,向上述的溶液中加入复合酶,复合酶为果胶酶、纤维素酶和酸性蛋白酶,其比例为3:1:1,复合酶与色素溶液的体积比为3mL:1L,搅拌均匀,45℃下水浴1.5h;得脱胶后的色素溶液;
(5)蒸馏回收红色素:将步骤(4)中所得脱胶色素溶液减压浓缩至原体积的1/5,得粘稠膏状红色素。
实施例6
(1)预处理:清洗桑葚果、粉碎,打浆,得桑葚果浆;
(2)冷冻破壁法制备分离液:所述的冷冻采用分段式冷冻法,将步骤(1)中所得的桑葚果浆置于-20℃温度下冷冻30min/L,然后在40℃的温度下解冻30min/L;继续将冷冻后的桑葚果浆置于-30℃的温度下冷冻30min/L,再在40℃的温度下解冻30min/L;解冻后的果浆分成上、下两层,上层为分离液,下层为果渣,将果渣和上层分离液分离,分别收集上层的分离液和果渣备用;
(3)蒸馏水浸提提取液:按每1kg果渣加入10L蒸馏水的比例在果渣中加入蒸馏水,搅拌20min,于4000rpm的转速下离心5min,得提取液;
(4)酶法脱胶:将步骤(2)中收集的分离液和步骤(3)所得的提取液搅拌混匀得色素溶液,向上述的溶液中加入复合酶,复合酶为果胶酶、纤维素酶和酸性蛋白酶,其比例为3:1:1,复合酶与色素溶液的体积比为5mL:1L,搅拌均匀,50℃下水浴1.5h;得脱胶后的色素溶液;
(5)蒸馏回收红色素:将步骤(4)中所得脱胶色素溶液减压浓缩至原体积的1/6,得粘稠膏状红色素。