CN103588773B - 一种金雀花碱的提取分离方法 - Google Patents

一种金雀花碱的提取分离方法 Download PDF

Info

Publication number
CN103588773B
CN103588773B CN201310549873.3A CN201310549873A CN103588773B CN 103588773 B CN103588773 B CN 103588773B CN 201310549873 A CN201310549873 A CN 201310549873A CN 103588773 B CN103588773 B CN 103588773B
Authority
CN
China
Prior art keywords
tocosamine
extraction
macroporous resin
concentrated
column volume
Prior art date
Legal status (The legal status is an assumption and is not a legal conclusion. Google has not performed a legal analysis and makes no representation as to the accuracy of the status listed.)
Active
Application number
CN201310549873.3A
Other languages
English (en)
Other versions
CN103588773A (zh
Inventor
廖志新
叶润
纪兰菊
孙洪发
胥廉谦
施天一
Current Assignee (The listed assignees may be inaccurate. Google has not performed a legal analysis and makes no representation or warranty as to the accuracy of the list.)
Southeast University
Original Assignee
Southeast University
Priority date (The priority date is an assumption and is not a legal conclusion. Google has not performed a legal analysis and makes no representation as to the accuracy of the date listed.)
Filing date
Publication date
Application filed by Southeast University filed Critical Southeast University
Priority to CN201310549873.3A priority Critical patent/CN103588773B/zh
Publication of CN103588773A publication Critical patent/CN103588773A/zh
Application granted granted Critical
Publication of CN103588773B publication Critical patent/CN103588773B/zh
Active legal-status Critical Current
Anticipated expiration legal-status Critical

Links

Classifications

    • C—CHEMISTRY; METALLURGY
    • C07—ORGANIC CHEMISTRY
    • C07D—HETEROCYCLIC COMPOUNDS
    • C07D471/00—Heterocyclic compounds containing nitrogen atoms as the only ring hetero atoms in the condensed system, at least one ring being a six-membered ring with one nitrogen atom, not provided for by groups C07D451/00 - C07D463/00
    • C07D471/12—Heterocyclic compounds containing nitrogen atoms as the only ring hetero atoms in the condensed system, at least one ring being a six-membered ring with one nitrogen atom, not provided for by groups C07D451/00 - C07D463/00 in which the condensed system contains three hetero rings
    • C07D471/18—Bridged systems

Landscapes

  • Chemical & Material Sciences (AREA)
  • Organic Chemistry (AREA)
  • Saccharide Compounds (AREA)
  • Medicines Containing Plant Substances (AREA)

Abstract

本发明提供的一种金雀花碱的提取分离方法，包括以下步骤：提取：将牧马豆种子粉碎，加4-10倍质量的有机溶剂水溶液，回流提取1-4h，提取液浓缩至质量浓度为0.5～1.5g/ml，得到浓缩液；大孔树脂联用分离：采用孔径在130-300A°、比表面积在480-600m2/g的聚苯乙烯型非极性树脂一次分离；采用孔径在50-80A°、比表面积在800-1100m2/g的聚苯乙烯型非极性树脂二次分离；重结晶即得。该方法工艺简单、操作简便、原料来源方法、成本低廉，分离使用的材料再生简单、无毒无污染，适合工业化大生产。

Description

一种金雀花碱的提取分离方法
技术领域
本发明属于中药化学领域，特别涉及一种生物碱的提取分离方法，具体涉及一种金雀花碱的提取分离方法。
背景技术
金雀花碱，其分子式为C11H140N2，分子量为190.24。金雀花碱具有显著的生物活性，临床用金雀花碱0.15%的水溶液静脉注射，抢救因手术和各种创伤引起的反射性呼吸暂停、休克和新生儿窒息。近期研究表明，金雀花碱还具有抗心律失常、抗微生物感染、抗溃疡以及较强的抗癌活性。
现有对金雀花碱提取纯化工艺多是传统工艺。中国专利201010182690.9公开了一种金雀花碱的提取方法，包括CO2超临界提取后通过大孔树脂层析分离、丙酮重结晶、有机溶剂提取、酸化萃取、氧化铝柱或硅胶柱层析、丙酮结晶等工序，工艺复杂，操作繁琐。中国专利201110225551.4公开了披针叶黄华总生物碱和几种高纯度药用物质的分离方法，该发明以披针叶黄华为原料，通过酸水提取、离子树脂吸附、大孔树脂富集得到总生物碱，用高速逆流色谱法和制备液相色谱对总生物碱进行分离纯化，得到高纯度的金雀花碱、黄华碱、鹰爪豆碱和N-甲基金雀花碱，仅能进行实验室小试，难以扩大应用。中国专利201210315804.1公开了一种牧马豆中提取金雀花碱的方法，该发明以牧马豆为提取原料，用有机溶剂脱脂后提取，再用硅胶层析分离，最后重结晶得金雀花碱；然而硅胶层析可能带来二次污染，且纯度并不高。中国专利200910023485.5公开了一种从披针叶黄华种籽中提取金雀花碱和黄华碱的方法，该发明以披针叶黄华种籽为提取原料，将披针叶黄华种籽粉碎、提取、浓缩得浸膏，再用有机溶剂萃取浸膏，酸水溶液反萃取、净化萃取溶剂，同时得到含黄华碱的酸水溶液，此酸水溶液加入碱性试剂碱化，析晶，重结晶，可得到黄华碱产品；萃取过的浸膏碱化后用有机溶液萃取，浓缩，结晶，重结晶，可得到纯度98%以上的金雀花碱产品；该方法工艺复杂，收率不高。
发明内容
发明目的：为了解决现有技术提取分离金雀花碱纯度低、成本高、污染重、周期长的问题，本发明的目的在于提供一种成本低、纯度高、适于工业应用的金雀花碱的提取分离方法。
技术方案：本发明提供的一种金雀花碱的提取分离方法，包括以下步骤：
（1）提取：将牧马豆种子粉碎，加4-10倍质量的有机溶剂水溶液，回流提取1-4h，提取液浓缩至质量浓度为0.5～1.5g/ml，得到浓缩液；
（2）大孔树脂联用分离：
采用孔径在130-300A°、比表面积在480-600m2/g的聚苯乙烯型非极性树脂一次分离：将浓缩液调pH至8-9，加至大孔树脂柱上静置吸附；依次用5-10倍柱体积的纯化水、5-10倍柱体积的10%-40%的乙醇水溶液洗脱，乙醇洗脱液浓缩至质量浓度为0.5-1.5g/ml，得一次分离浓缩液；
采用孔径在50-80A°、比表面积在800-1100m2/g的聚苯乙烯型非极性树脂二次分离：将一次分离浓缩液调pH至8-9，加至大孔树脂柱上静置吸附；依次用4-6倍量柱体积的纯化水、4-6倍量柱体积的10%乙醇、5-10倍量柱体积的15-25%乙醇洗脱，收集15-25%乙醇洗脱液，浓缩、干燥，得固体；
（3）重结晶：将步骤（2）得到的固体在溶剂中重结晶，即得。
其中，步骤（1）中，牧马豆种子粉碎至10-60目；所述有机溶剂为乙醇或甲醇，有机溶剂水溶液的质量百分比浓度为35%-95%。
其中，步骤（2）中，一次分离所使用的聚苯乙烯型非极性树脂为X-5型大孔树脂或AB-8型大孔树脂。
其中，步骤（2）中，大孔树脂在使用前还需要进行预处理，方法为：用高于树脂层10-20厘米的乙醇浸泡3-4小时后放净乙醇洗涤液，用相同方法反复洗涤至乙醇洗涤液在试管中加3倍量水不显浑浊，再用清水洗涤至无乙醇味。
其中，步骤（2）中，一次分离条件：上样量为0.01-0.2倍柱体积，静置吸附时间为10-50分钟，洗脱速度为1-5mL/min。
其中，步骤（2）中，二次分离所使用的聚苯乙烯型非极性树脂为DM18型大孔树脂或DM2型大孔树脂。
其中，步骤（2）中，二次分离条件：上样量为0.01-0.2倍柱体积，静置吸附时间为20-40分钟，洗脱速度为1-3mL/min。
其中，步骤（3）中，溶剂为甲醇、乙醇、乙醚或丙酮；固体与溶剂的用量比为1g：（1-10）ml。
有益效果：本发明提供的金雀花碱的提取分离方法工艺简单、操作简便、原料来源方法、成本低廉，分离使用的材料再生简单、无毒无污染，适合工业化大生产。
具体而言，本发明相对于现有技术具有以下突出的优势：
1.本发明利用不同孔径大孔树脂对物质的吸附能力不同，结合大孔树脂的比表面积，经过大量试验筛选，最终选择了两种孔径和比表面积不同的大孔树脂联用；应用特定的洗脱溶剂体系和特定的洗脱方法，通过柱分离实现高纯度金雀花碱的富集和提取。
2.本方法操作简单，成本低廉，转化率高，大孔树脂可以反复利用，适合于工业化大生产。
3.本方法无毒无污染，完全做到了当今社会所提倡的绿色化学的概念，最终可得到含量在98%以上的金雀花碱。
附图说明
图1为本发明实施例1产物液相图谱。
图2为本发明实施例2产物液相图谱。
图3为本发明实施例3产物液相图谱。
具体实施方式
根据下述实施例，可以更好地理解本发明。然而，本领域的技术人员容易理解，实施例所描述的具体的物料配比、工艺条件及其结果仅用于说明本发明，而不应当也不会限制权利要求书中所详细描述的本发明。实施例1
取牧马豆原料100kg进行粉碎，将上述处理所得的原料过10目筛，用8倍质量的浓度为95%的乙醇回流提取1小时，得提取液。浓缩提取液至质量浓度为1.0g/mL，调pH至8.0，上预处理过的X-5型大孔树脂柱(315×1500mm)，上样量为0.1倍柱体积，静置30min，依次用8倍柱体积的纯水、8倍柱体积的10%的乙醇水溶液洗脱，洗脱速度为1.0mL/min，收集10%乙醇洗脱液，再浓缩至质量浓度为1.0g/mL，调pH至9.0，上预处理好的DM18型大孔树脂柱(315×1500mm)，上样量为0.1倍柱体积，静置30min，依次用5倍柱体积的纯水、5倍柱体积的10%乙醇水溶液、8倍柱体积的20%乙醇水溶液洗脱，洗脱速度为1.0mL/min，收集20%乙醇洗脱液浓缩干燥得固体，用无水乙醇溶解，固体与无水乙醇的用量比为1g：5ml，也可以用其他醇代替乙醇，例如甲醇，浓缩至金雀花碱结晶完全，得金雀花碱1.02kg，含量为99.658%，转移率为60.0%。
该实施例使用的X-5型大孔树脂性能参数如下：
材料：交联聚苯乙烯；
极性：非极性；
平均孔径A：290-300A°；
孔容：1.20-1.24mL/g；
粒径范围：0.315-1.25mm；
含水量：45-60%；
表观密度：0.44-0.487g/mL；
骨架密度1.03-1.078g/mL；
比表面积：500-600m2/g。
该实施例使用的DM18型大孔树脂性能参数如下：
材料：苯乙烯共聚体；
极性：非极性；
平均孔径A：50-60A°；
粒径范围：0.25-0.84mm；
含水量：55-75%；
比表面积：1000-1100m2/g。
产品采用HPLC检测纯度，结果见图1和表1。
表1实施例1的产品纯度
名称 保留时间(min) 峰面积 峰高 含量（%）
金雀花碱 4.078 8574199 602647 99.658
实施例2
取牧马豆原料100kg进行粉碎，将上述处理所得的原料过20目筛，用10倍量浓度为35%的甲醇回流提取3小时，得提取液。浓缩提取液至质量浓度为0.5g/mL，调pH至9.0，上预处理过的AB-8型大孔树脂柱(315×1500mm)，上样量为0.2倍柱体积，静置50min，依次用10倍柱体积的纯水、10倍柱体积的30%的乙醇水溶液洗脱，洗脱速度为3mL/min，收集30%乙醇洗脱液，再浓缩至质量浓度为0.5g/mL，调pH至8.0，上预处理好的DM18型大孔树脂柱(315×1500mm)，上样量为0.2倍柱体积，静置20min，依次用6倍柱体积的纯水、6倍柱体积的10%乙醇水溶液、10倍柱体积的25%乙醇水溶液洗脱，洗脱速度为2mL/min，收集25%乙醇洗脱液浓缩干燥得固体，用乙醚溶解，固体与乙醚的用量比为1g：10ml，浓缩至金雀花碱结晶完全，得金雀花碱1.03kg，含量为99.695%，转移率为60.4%。
该实施例使用的AB-8型大孔树脂性能参数如下：
材料：交联聚苯乙烯；
极性：非极性；
平均孔径A：130-140A°；
孔容：0.73-0.77mL/g；
粒径范围：0.315-1.25mm；
含水量：60-70%；
表观密度：1.05-1.09g/mL；
骨架密度1.13-1.17g/mL；
比表面积：480-520m2/g。
该实施例使用的DM18型大孔树脂性能参数如下：
材料：苯乙烯共聚体；
极性：非极性；
平均孔径A：50-60A°；
粒径范围：0.25-0.84mm；
含水量：55-75%；
比表面积：1000-1100m2/g。
产品采用HPLC检测纯度，结果见图2和表2。
表2实施例2的产品纯度
名称 保留时间(min) 峰面积 峰高 含量（%）
金雀花碱 4.110 8438435 603510 99.695
实施例3
取牧马豆原料100kg进行粉碎，将上述处理所得的原料过60目筛，用4倍量浓度为65%的乙醇回流提取4小时，得提取液。浓缩提取液至质量浓度为1.5g/mL，调pH至8.5，上预处理过的X-5型大孔树脂柱(315×1500mm)，上样量为0.01倍柱体积，静置10min，依次用5倍柱体积的纯水、5倍柱体积的40%的乙醇水溶液洗脱，洗脱速度为5mL/min，收集40%乙醇洗脱液，再浓缩至质量浓度为1.5g/mL，调pH至8.5，上预处理好的DM2型大孔树脂柱(315×1500mm)，上样量为0.01倍柱体积，静置40min，依次用4倍柱体积的纯水、4倍柱体积的10%乙醇水溶液、5倍柱体积的15%乙醇水溶液洗脱，洗脱速度为3mL/min，收集15%乙醇洗脱液浓缩干燥得固体，用丙酮溶解，固体与丙酮的用量比为1g：1ml，浓缩至金雀花碱结晶完全，得金雀花碱0.92kg，含量为98.330%，转移率为53.2%。
该实施例使用的X-5型大孔树脂性能参数如下：
材料：交联聚苯乙烯；
极性：非极性；
平均孔径A：290-300A°；
孔容：1.20-1.24mL/g；
粒径范围：0.315-1.25mm；
含水量：45-60%；
表观密度：0.44-0.487g/mL；
骨架密度1.03-1.078g/mL；
比表面积：500-600m2/g。
该实施例使用的DM2型大孔树脂性能参数如下：
材料：苯乙烯共聚体；
极性：非极性；
平均孔径A：70-80A°；
粒径范围：0.25-0.84mm；
含水量：55-75%；
比表面积：800-900m2/g。
产品HPLC检测纯度，结果见图3和表3。
表3实施例3的产品纯度
名称 保留时间(min) 峰面积 峰高 含量（%）
金雀花碱 4.108 7344331 534129 98.330

Claims (5)

1.一种金雀花碱的提取分离方法，其特征在于：包括以下步骤：
（1）提取：将牧马豆种子粉碎，加4-10倍质量的有机溶剂水溶液，回流提取1-4h，提取液浓缩至质量浓度为0.5～1.5g/ml，得到浓缩液；其中，所述有机溶剂水溶液为甲醇水溶液或乙醇水溶液；
（2）大孔树脂联用分离：
采用孔径在130-300A°、比表面积在480-600m2/g的聚苯乙烯型非极性树脂一次分离：将浓缩液调pH至8-9，加至大孔树脂柱上静置吸附；依次用5-10倍柱体积的纯化水、5-10倍柱体积的10%-40%的乙醇水溶液洗脱，乙醇洗脱液浓缩至质量浓度为0.5-1.5g/ml，得一次分离浓缩液；其中，一次分离所使用的聚苯乙烯型非极性树脂为X-5型大孔树脂或AB-8型大孔树脂；
采用孔径在50-80A°、比表面积在800-1100m2/g的聚苯乙烯型非极性树脂二次分离：将一次分离浓缩液调pH至8-9，加至大孔树脂柱上静置吸附；依次用4-6倍量柱体积的纯化水、4-6倍量柱体积的10%乙醇、5-10倍量柱体积的15-25%乙醇洗脱，收集15-25%乙醇洗脱液，浓缩、干燥，得固体；其中，二次分离所使用的聚苯乙烯型非极性树脂为DM18型大孔树脂或DM2型大孔树脂；
（3）重结晶：将步骤（2）得到的固体在溶剂中重结晶，所述溶剂为甲醇、乙醇、乙醚或丙酮，即得。
2.根据权利要求1所述的一种金雀花碱的提取分离方法，其特征在于：步骤（1）中，牧马豆种子粉碎至10-60目；所述有机溶剂为乙醇或甲醇，有机溶剂水溶液的质量百分比浓度为35%-95%。
3.根据权利要求1所述的一种金雀花碱的提取分离方法，其特征在于：步骤（2）中，一次分离条件：上样量为0.01-0.2倍柱体积，静置吸附时间为10-50分钟，洗脱速度为1-5mL/min。
4.根据权利要求1所述的一种金雀花碱的提取分离方法，其特征在于：步骤（2）中，二次分离条件：上样量为0.01-0.2倍柱体积，静置吸附时间为20-40分钟，洗脱速度为1-3mL/min。
5.根据权利要求1所述的一种金雀花碱的提取分离方法，其特征在于：步骤（3）中，固体与溶剂的用量比为1g：（1-10）ml。
CN201310549873.3A 2013-11-07 2013-11-07 一种金雀花碱的提取分离方法 Active CN103588773B (zh)

Priority Applications (1)

Application Number Priority Date Filing Date Title
CN201310549873.3A CN103588773B (zh) 2013-11-07 2013-11-07 一种金雀花碱的提取分离方法

Applications Claiming Priority (1)

Application Number Priority Date Filing Date Title
CN201310549873.3A CN103588773B (zh) 2013-11-07 2013-11-07 一种金雀花碱的提取分离方法

Publications (2)

Publication Number Publication Date
CN103588773A CN103588773A (zh) 2014-02-19
CN103588773B true CN103588773B (zh) 2016-01-06

Family

ID=50079125

Family Applications (1)

Application Number Title Priority Date Filing Date
CN201310549873.3A Active CN103588773B (zh) 2013-11-07 2013-11-07 一种金雀花碱的提取分离方法

Country Status (1)

Country Link
CN (1) CN103588773B (zh)

Families Citing this family (2)

* Cited by examiner, † Cited by third party
Publication number Priority date Publication date Assignee Title
GB201602145D0 (en) 2016-02-05 2016-03-23 Achieve Pharma Uk Ltd Salt
CN106749245A (zh) * 2016-12-31 2017-05-31 南宁馨艺荣生物科技有限公司 一种从山豆根中提取纯化金雀花碱的方法

Citations (9)

* Cited by examiner, † Cited by third party
Publication number Priority date Publication date Assignee Title
RO63234A2 (fr) * 1974-04-25 1978-06-15 Medicamente Terapia Intreprind Procede pour l'extraction d'alcaloide cytisine du plante"laburnum anagyroides medick"
CN101624393A (zh) * 2009-08-04 2010-01-13 王答祺 一种从披针叶黄华种籽中提取金雀花碱和黄华碱的方法
CN101830902A (zh) * 2010-05-26 2010-09-15 南京泽朗农业发展有限公司 一种金雀花碱的提取方法
CN101891740A (zh) * 2010-07-30 2010-11-24 王小银 从披针叶黄华草地上部分中提取金雀花碱的方法
CN101921272A (zh) * 2009-07-02 2010-12-22 陕西嘉禾植物化工有限责任公司 一种金雀花碱的提取分离方法
EP2292629A1 (en) * 2009-09-07 2011-03-09 Thomas Dr. Kallimopoulos Method of isolating cytisine from biomaterial
CN102219786A (zh) * 2011-06-07 2011-10-19 南京泽朗农业发展有限公司 一种金雀花碱的制备方法
CN102349940A (zh) * 2011-08-08 2012-02-15 南京泽朗医药科技有限公司 披针叶黄华总生物碱和几种高纯度药用物质的制备工艺
CN102850351A (zh) * 2012-08-30 2013-01-02 陕西力拓植物化工有限责任公司 牧马豆中提取金雀花碱的方法

Patent Citations (9)

* Cited by examiner, † Cited by third party
Publication number Priority date Publication date Assignee Title
RO63234A2 (fr) * 1974-04-25 1978-06-15 Medicamente Terapia Intreprind Procede pour l'extraction d'alcaloide cytisine du plante"laburnum anagyroides medick"
CN101921272A (zh) * 2009-07-02 2010-12-22 陕西嘉禾植物化工有限责任公司 一种金雀花碱的提取分离方法
CN101624393A (zh) * 2009-08-04 2010-01-13 王答祺 一种从披针叶黄华种籽中提取金雀花碱和黄华碱的方法
EP2292629A1 (en) * 2009-09-07 2011-03-09 Thomas Dr. Kallimopoulos Method of isolating cytisine from biomaterial
CN101830902A (zh) * 2010-05-26 2010-09-15 南京泽朗农业发展有限公司 一种金雀花碱的提取方法
CN101891740A (zh) * 2010-07-30 2010-11-24 王小银 从披针叶黄华草地上部分中提取金雀花碱的方法
CN102219786A (zh) * 2011-06-07 2011-10-19 南京泽朗农业发展有限公司 一种金雀花碱的制备方法
CN102349940A (zh) * 2011-08-08 2012-02-15 南京泽朗医药科技有限公司 披针叶黄华总生物碱和几种高纯度药用物质的制备工艺
CN102850351A (zh) * 2012-08-30 2013-01-02 陕西力拓植物化工有限责任公司 牧马豆中提取金雀花碱的方法

Non-Patent Citations (2)

* Cited by examiner, † Cited by third party
Title
吴勇 等.高纯度金雀花碱的提取方法研究.《内蒙古师范大学学报自然科学( 汉文) 版》.2004,第33卷(第2期),第186-187页. *
黎萍 等.披针叶黄华中金雀花碱类生物碱的提取工艺.《华西药学杂志》.2007,第22卷(第1期),第7-8页. *

Also Published As

Publication number Publication date
CN103588773A (zh) 2014-02-19

Similar Documents

Publication Publication Date Title
CN102924416B (zh) 从中药秦皮中分离纯化单体化合物的方法
CN103304613A (zh) 一种从瓜蒌皮中分离纯化4种核苷类化学成分的方法
CN102285982A (zh) 从中药黄连中分离纯化单体化合物的方法
CN103588773B (zh) 一种金雀花碱的提取分离方法
CN101619062B (zh) 天然黄藤素结晶物及其大孔吸附树脂制备方法
CN109879919B (zh) 一种从酸枣仁中分离制备三种黄酮苷的方法
CN103304490B (zh) 一种从瓜蒌皮中分离纯化5种嘌呤及嘧啶碱基的方法
CN105384737A (zh) 一种从吐根中提取精制生物碱的方法
TWI648253B (zh) 純化奇壬醇的方法
CN103342689B (zh) 从瓜蒌皮中分离纯化木犀草素、芹菜素和香叶木素的方法
CN103421058B (zh) 一种高效率精确分离纯化去氧土大黄苷的方法
CN102229631B (zh) 一种从葡萄皮红中分离纯化锦葵花素葡萄糖苷的方法
CN103304611A (zh) 一种从瓜蒌皮中分离纯化3种黄酮苷的方法
CN102260307A (zh) 一种特女贞苷的制备方法
CN102250183B (zh) 一种以人参花蕾为原材料制备高纯度人参皂苷Re的方法
CN104876900A (zh) 一种从木香中提取、分离纯化木香烃内酯和去氢木香内酯的方法
CN104211749A (zh) 一种无患子皂苷的生产工艺
CN104473981B (zh) 一种高纯度秋茄叶总黄酮的分离纯化方法
CN110501200B (zh) 一种可循环使用的龙葵有效成份提取和分离方法
CN104370814B (zh) 一种从捆仙绳中提取海罂粟碱的方法
CN110698532B (zh) 一种海参皂苷Cladoloside A的提取方法
CN106986904A (zh) 一种从天麻茎秆中提取的天麻素及其制备方法
CN102389456A (zh) 一种提取蓝萼香茶菜总二萜或蓝萼甲素的方法
CN102920727A (zh) 制备富含牡荆素鼠李糖苷和牡荆素葡萄糖苷提取物的方法
CN105016982A (zh) 一种从厚朴中提取、分离纯化和厚朴酚及厚朴酚的方法

Legal Events

Date Code Title Description
C06 Publication
PB01 Publication
SE01 Entry into force of request for substantive examination
SE01 Entry into force of request for substantive examination
C14 Grant of patent or utility model
GR01 Patent grant
CP02 Change in the address of a patent holder
CP02 Change in the address of a patent holder

Address after: 221700 Xinhua Lane 6, Zhongyang Avenue, Xuzhou, Jiangsu, Fengxian County

Patentee after: Southeast University

Address before: Four pailou Nanjing Xuanwu District of Jiangsu Province, No. 2 211189

Patentee before: Southeast University