CN103535284A - 野生松乳菇菌种分离培养基及栽培驯化方法 - Google Patents
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Abstract
本发明公开了一种野生松乳菇菌种分离培养基及栽培驯化方法，本发明将松针、马铃薯等组分进行综合配比，所获得的培养基能很好的达到分离出松乳菇菌种的目的；本发明还采用草料、棉籽皮、米糠、橡子皮、麦麸、石灰等组分作为栽培驯化培养基质，优化了现有技术中的培养基质的配方，能够使驯化培养达到良好的效果，提供了用于分离松乳菇菌种的一种培养基及栽培驯化的方法，为人工驯化野生松乳菇提供了有效可行的方法。本发明的培养基成分都为常见的原料，可以降低生产成本，且操作方法简单易行，通过本发明提供的栽培驯化方法，可以为规模化生产提供依据。
Description
技术领域
本发明涉及生物技术领域，尤其是一种野生松乳菇菌种分离培养基及栽培驯化方法。
背景技术
松乳菇(Lactarius deliciosus)属红菇科、乳菇属，又名美味松乳菇、松树蘑、松菌，是一种纯天然的珍稀名贵食用菌类，被誉为“菌中王子”，在市场上十分畅销，在国内外市场上的价格都比较高，但仅靠野生资源很难满足市场需要。松乳菇因系菌根菌，在人工培育下尚难形成子实体。现有报道的松乳菇的菌种分离培养基的配方中，大都是采用松针液、腐殖土液等作为主要的成分。
发明内容
本发明的目的是：提供一种野生松乳菇菌种分离培养基及栽培驯化方法，它能很好的达到分离出松乳菇菌种的目的，并能能够使驯化培养达到良好的效果。
本发明是这样实现的：野生松乳菇菌种分离培养基，按重量份数计算，包括松针30-40份、KH2SO4 0.3-1.0份、MgSO4 0.1-0.5份、马铃薯200份、葡萄糖20份、琼脂20份以及蛋白胨0.5份；其制备方法是：将上述各组分混合后，加水定容，然后加热至沸腾，过滤后分装到试管中，做成斜面培养基，在120-125℃、0.15MPa的条件下，灭菌25-30min，即获得成品。
野生松乳菇菌种分离培养基的栽培驯化方法： 1）选取新鲜的野生松乳菇菌菌株，在接种箱内进行组织分离操作，从菌盖与菌柄相交处取一块组织，用质量百分比浓度为75%的酒精进行表面消毒，然后用接种针挑入试管斜面、并压平；在温度为25℃的恒温箱内培养4-5天，即长出菌丝，再用上述的野生松乳菇菌种分离培养基继续纯化，10-15天后菌丝布满试管斜面；挑取菌丝在该液体培养基中继续增殖，于恒温摇床上，温度为25℃，转速为150rpm，培养5-6天,备用；2）取培养的液体菌丝150-200ml接种在装有栽培驯化培养基质的菌袋中，从菌袋封口处灌入，使菌液与培养基质充分接触，在25℃的恒温箱内培养15-20天，菌丝布满菌袋表面即可。
步骤2）中所采用的栽培驯化培养基质是，按重量份数计算，包括棉籽皮3750份，橡子皮 2500份，草料 2000份，麦麸 1500份，米糠 1000份，石灰 100份，白糖 50份以及KH2SO4 3份；将上述个组分混合均匀后，加水搅拌，用手挤压配料感觉湿润但不滴水出来即可，将混合好的物料装入菌袋，每个菌袋装200-300g培养基质，用菌袋封口密封，在121℃，0.15MPa，灭菌1.5-2.0h，栽培驯化培养基质的PH值为6-6.5。
由于采用了上述技术方案，与现有技术相比，本发明将松针、马铃薯等组分进行综合配比，所获得的培养基能很好的达到分离出松乳菇菌种的目的；本发明还采用草料、棉籽皮、米糠、橡子皮、麦麸、石灰等组分作为栽培驯化培养基质，优化了现有技术中的培养基质的配方，能够使驯化培养达到良好的效果；并提供了用于分离松乳菇菌种的一种培养基及栽培驯化的方法，为人工驯化野生松乳菇提供了有效可行的方法。本发明的培养基成分都为常见的原料，可以降低生产成本，且操作方法简单易行，通过本发明提供的栽培驯化方法，可以为规模化生产提供依据。
具体实施方式
本发明的实施例：野生松乳菇菌种分离培养基，按重量份数计算，取松针30g、KH2SO4 0.3g、MgSO4 0.1g、马铃薯200g、葡萄糖20 g、琼脂20 g以及蛋白胨0.5 g，加水定容至1000ml，然后加热至沸腾，用4层纱布过滤后，分装到试管中，做成斜面培养基，在121℃、0.15MPa的条件下，灭菌25min，即获得野生松乳菇菌种分离培养基。
野生松乳菇菌种分离培养基的栽培驯化方法： 1）选取新鲜的野生松乳菇菌菌株，形态要好，不变色；在接种箱内进行组织分离操作，从菌盖与菌柄相交处取一块组织，用质量百分比浓度为75%的酒精进行表面消毒，然后用接种针挑入试管斜面、并轻轻压平；在温度为25℃的恒温箱内培养4天，即长出菌丝，再用上述的野生松乳菇菌种分离培养基继续纯化，10天后菌丝布满试管斜面；挑取菌丝在该液体培养基中继续增殖，于恒温摇床上，温度为25℃，转速为150rpm，培养5-6天,备用；2）取棉籽皮3750g，橡子皮 2500 g，草料 2000 g，麦麸 1500 g，米糠 1000 g，石灰 100 g，白糖 50 g以及KH2SO4 3 g，将它们加水混合，并搅拌均匀，用手挤压配料感觉湿润但不滴水出来即可，将混合好的物料装入菌袋，每个菌袋装300g培养基质，用菌袋封口密封，在121℃，0.15MPa，灭菌1.5-2.0h，栽培驯化培养基质的PH值为6-6.5，备用；将培养的液体菌丝150-200ml接种在装有栽培驯化培养基质的菌袋中，从菌袋封口处灌入，使菌液与培养基质充分接触，在25℃的恒温箱内培养15天，菌丝布满菌袋表面，且菌丝粗壮洁白。
本发明的野生松乳菇菌种分离培养基的筛选，结果如表1所示
Claims (3)
1.一种野生松乳菇菌种分离培养基，其特征在于：按重量份数计算，包括松针30-40份、KH2SO4 0.3-1.0份、MgSO4 0.1-0.5份、马铃薯200份、葡萄糖20份、琼脂20份以及蛋白胨0.5份；其制备方法是：将上述各组分混合后，加水定容，然后加热至沸腾，过滤后分装到试管中，做成斜面培养基，在120-125℃、0.15MPa的条件下，灭菌25-30min，即获得成品。
2.一种采用权利要求1所述的野生松乳菇菌种分离培养基的栽培驯化方法，其特征在于：1）选取新鲜的野生松乳菇菌菌株，在接种箱内进行组织分离操作，从菌盖与菌柄相交处取一块组织，用质量百分比浓度为75%的酒精进行表面消毒，然后用接种针挑入试管斜面、并压平；在温度为25℃的恒温箱内培养4-5天，即长出菌丝，再用上述的野生松乳菇菌种分离培养基继续纯化，10-15天后菌丝布满试管斜面；挑取菌丝在该液体培养基中继续增殖，于恒温摇床上，温度为25℃，转速为150rpm，培养5-6天,备用；2）取培养的液体菌丝150-200ml接种在装有栽培驯化培养基质的菌袋中，从菌袋封口处灌入，使菌液与培养基质充分接触，在25℃的恒温箱内培养15-20天，菌丝布满菌袋表面即可。
3.根据权利要求2所述的野生松乳菇菌种分离培养基的栽培驯化方法，其特征在于：步骤2）中所采用的栽培驯化培养基质是，按重量份数计算，包括棉籽皮3750份，橡子皮 2500份，草料 2000份，麦麸 1500份，米糠 1000份，石灰 100份，白糖 50份以及KH2SO4 3份；将上述个组分混合均匀后，加水搅拌，用手挤压配料感觉湿润但不滴水出来即可，将混合好的物料装入菌袋，每个菌袋装200-300g培养基质，用菌袋封口密封，在121℃，0.15MPa，灭菌1.5-2.0h，栽培驯化培养基质的PH值为6-6.5。
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