CN108218587A - 一种高生物活性复合海藻肥及其制备方法 - Google Patents

一种高生物活性复合海藻肥及其制备方法 Download PDF

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Abstract

本发明提供了一种高生物活性复合海藻肥及其制备方法，所述复合海藻肥由如下重量份的原料组成：海藻肥50‑75份、腐殖酸10‑35份、海藻酸20‑40份、藻朊酸钠15‑30份、贝壳粉5‑60份、表面活性剂5‑15份、卡拉胶15‑30份；所述制备方法无害、无残留、绿色，使海藻所含植物激素尽可能的保留且尽可能溶出，发挥其生物活性，促进根系和茎叶的生长，提高发芽率，提高抗病、抗旱等不良环境的能力，同时复合添加腐殖酸、海藻酸、藻朊酸钠、贝壳粉、表面活性剂、卡拉胶等肥效成分，其与植物激素配伍后，不仅保留海藻植物激素原有的活性，还促进其他活性物质的生成，复合形成一种高生物活性的海藻粉，提高海藻肥的使用效益。

Description

一种高生物活性复合海藻肥及其制备方法
(一)技术领域
本发明属于藻肥技术领域，涉及一种高生物活性复合海藻肥及其制备方法，本发明通过对海带、紫菜、裙带菜等海藻进行有效充分的降解，制备一种海藻肥，再添加其他成分与之复合，促进藻肥发挥更好的、更全面的作用。
(二)背景技术
海藻是生长于海洋中的低等隐花植物，共1万多种，有褐藻门、红藻门、蓝藻门等10门。迄今为人类广泛利用的海藻主要是红藻、绿藻和褐藻三大类，约100多种，主要有：海带、裙带菜、紫菜等，可供食用的约50多种。养殖规模较大的包括紫菜、裙带菜、海带、巨藻。
海藻肥是以生长在海洋中的大型速生褐藻类为原料，通过化学的或物理的或生物的方法，提取海藻中的有效成分，制成肥料，施予植物用作养分。其肥效依赖于海藻肥中所含有的细胞激动素、植物生长素、赤霉素等主要活性物质。海藻中除含有大量的非含氮有机物，微量营养元素，稀有的锌、溴、碘等矿物元素，还含有分子量较大的蛋白质，海藻多糖和高度不饱和酸等。生长素促进细胞伸长生长、诱导维管束分化、促进侧根和不定根的发生；细胞分裂素促进细胞分裂和膨大；赤霉素促进茎节的伸长生长、调节植物幼态和成熟态之间的转换、打破休眠种子促进种子发芽。
根据土壤、环境和不同作物的需要，经过科学调配，可以添加一些成分制成营养、功能各异的海藻肥。腐殖酸在农业上主要有五个作用：改良土壤、增进肥效、刺激植物生长、增强植物抗逆性、改善产品品质。海藻酸作诱导剂刺激生长调节物质(多胺)和天然抗生素形成；作为一种螯合剂使大量的阳离子营养物质，如铜、锰、镁、钙及铁能被作物吸收利用；作为保水剂可以维持土壤中水分，保证肥效。藻朊酸钠是天然土壤调理剂，能促进土壤团粒结构的形成，改善土壤内部孔隙，协调土壤中固、液、气三者比例，恢复由于土壤负担过重和化学污染而失去的天然胶质平衡，增加土壤生物活动，加速有效养分的释放，有利于根系生长，提高作物的抗逆性。表面活性剂有保水、杀菌、对藻肥增效的功能。卡拉胶是天然辅助剂，通过吸附和渗透作用促进作物对营养成分的吸收。
现有技术如授权公告号为CN 106365911 A的中国发明专利，公开了一种功能性海藻有机质源及其制备方法，采用酶解制备海藻活性粉，再添加多种中、微量元素，主要功能是阻止作物对重金属离子的吸收。现有技术如授权公告号为CN 107043316 A的中国发明专利，公开的一种功能性海藻复合肥及其制备方法，达到提高肥料利用率和促进作物提质增产。
(三)发明内容
本发明的目的在于提供一种高生物活性复合海藻肥及其制备方法，所述制备方法无害、无残留、绿色，使海藻所含植物激素尽可能的保留且尽可能溶出，发挥其生物活性，促进根系和茎叶的生长，提高发芽率，提高抗病、抗旱等不良环境的能力。同时复合添加腐殖酸、海藻酸、藻朊酸钠、贝壳粉、表面活性剂、卡拉胶等肥效成分，其与植物激素配伍后，不仅保留海藻植物激素原有的活性，还促进其他活性物质的生成，复合形成一种高生物活性的海藻粉，提高海藻肥的使用效益。
本发明的技术方案如下：
一种高生物活性复合海藻肥，由如下重量份的原料组成：
海藻肥50-75份、腐殖酸10-35份、海藻酸20-40份、藻朊酸钠15-30份、贝壳粉5-60份、表面活性剂5-15份、卡拉胶15-30份。
优选的，所述高生物活性复合海藻肥由如下重量份的原料组成：
海藻肥50-65份、腐殖酸10～15份、海藻酸20-30份、藻朊酸钠15-25份、贝壳粉10-35份、表面活性剂5-15份、卡拉胶15-20份。
按照配方，将各原料混合均匀，装袋，即得所述高生物活性复合海藻肥。
本发明中，所述表面活性剂为硬脂酸、卵磷脂、脂肪酸山梨坦、聚山梨酯(吐温)、脂肪酸甘油酯、甜菜碱中的一种或两种以上任意比例的混合物。
本发明中，所述海藻肥按如下方法制备得到：
(1)原料预处理
将原料海藻用水浸泡、清洗，沥干后先用剪刀剪碎，再经胶体磨粉碎，得到海藻泥，于0～5℃保存备用；
所述原料海藻例如：海带、紫菜、裙带菜等；
具体的，所述用水浸泡、清洗的操作方法为：将原料海藻按料液质量比1：5～20加入清水中，浸泡2h，然后取出用清水冲洗除去泥沙；
所述沥干采用R＝32cm的漏勺，沥水后的海藻含水量为40％～70％；
(2)海藻生物发酵降解
取步骤(1)准备好的海藻泥，加入104～107cfu/mL毛霉菌种液，密封后在温度30～50℃、pH值7.5～10.5的条件下，置于转速120～200r/min的恒温摇床内发酵2～7d，接着加入104～107cfu/mL里氏木霉菌种液，密封后在温度20～28℃、pH值3.5～5.5的条件下，置于转速120～200r/min的恒温摇床内发酵2～6d，之后加入104～107cfu/mL琼氏不动杆菌菌种液，密封后在温度20～40℃、pH值6～9的条件下，置于转速120～200r/min的恒温摇床内发酵1～6d，得到海藻生物发酵液；
所述海藻泥与毛霉菌种液、里氏木霉菌种液、琼氏不动杆菌菌种液的质量比为1：3～10：3～10：3～10；
所述密封可采用保鲜膜；
所述pH值可采用质量分数3～20％的盐酸水溶液或质量分数5～25％的氢氧化钠水溶液进行调节；
(3)海藻酸降解、热降解
在步骤(2)所得海藻生物发酵液中，加入104～107cfu/mL嗜热链球菌菌种液，(无需密封)在温度25～50℃、pH值3～7的条件下，置于转速120～200r/min的恒温摇床内发酵1～6d，得到酸降解液，取所得酸降解液，(用牛皮纸)密封后，置于121～125℃、1.0～1.5Mpa下进行热处理0.5～4h，得到海藻降解物；
所述海藻生物发酵液与嗜热链球菌菌种液的质量比为1：0.05～0.2；
(4)干燥
待步骤(3)所得海藻降解物冷却至室温(20～30℃)，之后干燥至水分含量为10％～40％，粉碎，过100～250目筛，得到成品海藻肥；
所述干燥可采用干燥机，在60～95℃下进行。
所述海藻肥制备方法中，所述毛霉菌种液、里氏木霉菌种液、琼氏不动杆菌菌种液、嗜热链球菌菌种液由微生物菌种经扩大培养得到，具体方法如下：
(a)毛霉菌种液
毛霉(Actinomucor elegans)XH-22，采用固体平板基，28℃培养72h，之后用无菌生理盐水将孢子洗脱，洗脱液经高速分散机均质后，用血球计数板在显微镜下计数，最后将菌液按比例稀释至104～107cfu/mL，得到所述毛霉菌种液；
所述毛霉(Actinomucor elegans)XH-22，保藏于绍兴咸亨腐乳厂；
所述固体平板基的组成为：马铃薯浸粉6g/L、葡萄糖20g/L、琼脂20g/L，溶剂蒸馏水；pH值5.6，灭菌20min；
(b)里氏木霉菌种液
将里氏木霉(Trichoderma reesei)接种于PDA液体培养基中进行有氧培养，在温度50℃下培养24h，之后将菌液按比例稀释至104～107cfu/mL，得到所述里氏木霉菌种液；
所述里氏木霉(Trichoderma reesei)，保藏于上海阿拉丁生化科技股份有限公司，菌种保藏编号：ATCC 26921；
所述PDA液体培养基的组成为：马铃薯浸粉6g/L、葡萄糖20g/L，溶剂蒸馏水；pH值5.6，灭菌20min；
(c)琼氏不动杆菌菌种液
将琼氏不动杆菌(Acinetobacter junii)X8接种于种子培养基，然后置于恒温摇床中，在摇床转速150r/min，温度25℃，压力0.1Mpa的条件下进行培养，每24h转接一次，共转接三次，培养后将菌液按比例稀释至104～107cfu/mL，得到所述琼氏不动杆菌菌种液；
所述琼氏不动杆菌(Acinetobacter junii)X8，保藏于武汉大学，保藏编号：CCTCC209110；
所述种子培养基的组成为：海藻酸钠5g/L、(NH4)2SO4 5g/L、NaCl 20g/L、K2HPO4·3H2O2g/L、MgSO4 1.0g/L，溶剂蒸馏水；pH值7.5，灭菌20min；
(d)嗜热链球菌菌种液
将嗜热链球菌接种到M17固体培养基上，37℃培养到对数培养期，再接种到新的M17液体培养基上，于37℃、170r/min摇床中培养12h，之后降温至4℃菌液离心，去上清液，用质量分数0.85％生理盐水洗涤两次，最后将菌液稀释至104～107cfu/mL，得到所述嗜热链球菌菌种液；
所述嗜热链球菌保藏于中国普通微生物菌种保藏管理中心，编号：CGMCC 1.1855，添加80％(体积分数)甘油水溶液，置于-80℃冰箱保存；
所述M17固体培养基的组成为：大豆胨5g/L、蛋白胨2.5g/L、酪蛋白胨2.5g/L、酵母浸粉2.5g/L、牛肉粉5g/L、乳糖5g/L、抗坏血酸钠0.5g/L、β-甘油磷酸钠19g/L、硫酸镁0.25g/L，溶剂蒸馏水；pH值7.2，灭菌15min。
本发明高生物活性复合海藻肥中，各原料成分简介如下：
海藻肥：这种海藻肥充分使细胞释放出植物激素，提取出的植物激素不仅促进植物根系和茎叶的生长，增加产量，还增强了植物的抗病、抗旱等不良环境的能力。细胞分裂素促进细胞分裂和膨大。生长素促进细胞伸长生长，诱导维管束分化，促进侧根和不定根的发生，影响花及果实发育。赤霉素促进茎节的伸长生长，调节植物幼态和成熟态之间的转换，打破休眠种子促进种子发芽。甜菜碱有渗透调节作用，提高植物的抗逆性。海藻肥制备中降解海藻有效成分含量大分子物质如蛋白质、多糖为小分子量肽、氨基酸、寡糖等，易被植物所吸收，促进植物生长。此藻肥还进一步脱除了一般海藻的腥味，形成了绿色、无公害、无残留的海藻肥。
腐殖酸在农业上主要有五个作用：改良土壤、增进肥效、刺激植物生长、增强植物抗逆性、改善产品品质。
海藻酸作诱导剂刺激生长调节物质(多胺)和天然抗生素形成；作为一种螯合剂使大量的阳离子营养物质，如铜、锰、镁、钙及铁与海藻酸结合；作为保水剂可以维持土壤中水分，保证肥效。
藻朊酸钠是天然土壤调理剂，能促进土壤团粒结构的形成，改善土壤内部孔隙，协调土壤中固、液、气三者比例，恢复由于土壤负担过重和化学污染而失去的天然胶质平衡，增加土壤生物活动，加速有效养分的释放，有利于根系生长，提高作物的抗逆性。
贝壳粉：贝壳粉是贝克粉碎的粉末，含有大量的钙和多种微量元素以及少量氨基酸和多糖物质。
表面活性剂有保水、杀菌、对藻肥增效的功能。
卡拉胶是天然辅助剂，通过吸附和渗透作用促进作物对营养成分的吸收。
本发明的有益效果在于：
本发明针对海藻肥生产原料成本较高，海藻中营养物质不能完全释放，且海藻肥添加成分单一，导致海藻肥效不高、肥效单一等问题，提供一种高生物活性海藻肥及其制备方法。
先制备一种海藻肥，无害、无残留、绿色，使海藻内容物充分溶出，极大的保留了海藻天然的活性成分，集植物激素、营养成分、抗生物质于一体对植物作用效果显著，促进根系和茎叶的生长，提高发芽率，提高抗病、抗旱等不良环境的能力，脱除海藻肥的腥味。采用生物发酵降解法，在海藻中依次接入毛霉、里氏木霉和琼氏不动杆菌，其作用机理为：毛霉释放蛋白酶，把蛋白质大分子降解为易吸收的多肽和氨基酸；里氏木霉释放纤维素酶，破解海藻细胞壁，使内容物流出；琼式不动杆菌释放褐藻胶裂解酶，裂解褐藻胶大分子。上述三种菌种联合发酵在藻肥制备上使用是本领域新创；然后采用酸降解法，利用嗜热链球菌发酵产酸的功能，一方面对海藻处理液的pH进行调节，处理海藻细胞，使细胞消解或内源物质增溶；另一方面嗜热链球菌还能和腥味大分子物质结合生成无腥味的小分子物质，进而脱除海藻的腥味；最后采用热降解法，一是使细胞的内含物如生长素、细胞分裂素、赤霉素、脱落酸等从细胞内溶出来出来，溶于发酵液中；二是使细胞中的大分子如蛋白质、多糖等物质进一步充分降解为可溶的易被吸收利用的小分子物质。
再添加添加腐殖酸、海藻酸、藻朊酸钠、贝壳粉、表面活性剂、卡拉胶等肥效成分，其与植物激素配伍后，不仅保留海藻植物激素原有的活性，还促进其他活性物质的生成，复合形成一种高生物活性且海藻肥效较为全面的海藻粉，提高海藻肥的使用效益。
此方法无害、无残留、绿色，使海藻所含植物激素尽可能的保留且尽可能溶出，发挥其生物活性，促进根系和茎叶的生长，提高发芽率，提高抗病、抗旱等不良环境的能力。
(四)具体实施方式
下面通过具体实施例对本发明作进一步的说明，但本发明的保护范围并不仅限于此。
实施例1：
海带肥的制备：
1)原料处理：将100g海带置于1000g清水中浸泡两小时，取出后清洗泥沙，用R＝32cm的漏勺沥水，沥水后的海带含水量为40％，用剪刀切碎经胶体磨粉碎，粉碎后的海带置于4℃冰箱冷藏备用；
2)微生物菌种扩大培养：
a.毛霉(Actinomucor elegans)XH-22采用固体平板培养，28℃培养72h，用无菌生理盐水将孢子洗脱，洗脱液经高速分散机均质后，用血球计数板在显微镜下计数，最后将菌液按比例稀释到104cfu/mL。
b.里氏木霉(Trichoderma reesei)，菌种保藏编号：ATCC 26921，接种于PDA液体培养基中有氧培养，50℃培养24h，培养后将菌液按比例稀释到104cfu/mL。
c.琼氏不动杆菌(Acinetobacter junii)X8，保藏于武汉大学，保藏编号：CCTCC209110。琼氏不动杆菌X8接种至种子培养基。培养基：海藻酸钠，5g；(NH4)2SO4，5g；NaCl，20g；K2HPO4·3H2O，2g；MgSO4，1.0g；蒸馏水，1000ml；pH7.5；0.1Mpa，灭菌20min。置于恒温摇床中培养，摇床转速150r/min，温度25℃，每24h转接一次，共转接三次，培养后将菌液按比例稀释到105cfu/mL。
d.嗜热链球菌，保藏于中国普通微生物菌种保藏管理中心，编号：CGMCC 1.1855，添加80％甘油置于-80℃冰箱保存。嗜热链球菌接种到M17固体培养基上，37℃培养到对数培养期，再接种到M17液体培养基上，37℃，170r/min摇床培养12h，菌液离心(4℃)，去上清液，用0.85％的生理盐水洗涤两次，菌液稀释到104cfu/mL。
3)海带生物发酵降解：取步骤1)备用海带10g，装入锥形瓶中，加入50g步骤2)所得毛霉菌种液，用保鲜膜封口后在温度30℃、pH值7.5的条件下，置于转速120r/min的恒温摇床内发酵2d，接着加入30g步骤2)所得里氏木霉菌种液，用保鲜膜封口后在温度20℃、pH值3.5的条件下，置于转速120r/min的恒温摇床内发酵2d，之后加入50g步骤2)所得琼氏不动杆菌菌种液，用保鲜膜封口后在温度20℃、pH值6的条件下，置于转速120r/min的恒温摇床内发酵1d，得到海带生物发酵液。
4)海带酸降解：把13g步骤2)所得嗜热链球菌菌种液接入到海带生物发酵液中，继续震荡降解。接入嗜热链球菌处理最适温度为25℃，摇床转速120r/min，发酵时间1d。
5)海带热降解：取出摇床里的锥形瓶，用牛皮纸封口，置于121℃、1.2Mpa高压灭菌锅中，进行热降解0.5h。
6)海带降解物干燥：热降解后的海带，放置冷却，在温度65℃下干燥至水分为20％，粉碎过150目，得到海带肥。
复合海带肥的制备：
取上述制备的海带肥50kg，加入腐殖酸15kg、海藻酸20kg、藻朊酸钠15kg、贝壳粉10kg、表面活性剂5kg、卡拉胶15kg混合均匀，装袋。
实施例2：
裙带菜肥的制备：
1)原料处理：将100g裙带菜置于1000g清水中浸泡两小时，取出后清洗泥沙，用R＝32cm的漏勺沥水，沥水后的裙带菜含水量为50％，用剪刀切碎经胶体磨粉碎，粉碎后的裙带菜置于4℃冰箱冷藏备用；
2)微生物菌种扩大培养：
a.毛霉(Actinomucor elegans)XH-22采用固体平板培养，28℃培养72h，用无菌生理盐水将孢子洗脱，洗脱液经高速分散机均质后，用血球计数板在显微镜下计数，最后将菌液按比例稀释到104cfu/mL。
b.里氏木霉(Trichoderma reesei)，菌种保藏编号：ATCC 26921，接种于PDA液体培养基中有氧培养，50℃培养24h，培养后将菌液按比例稀释到104cfu/mL。
c.琼氏不动杆菌(Acinetobacter junii)X8，保藏于武汉大学，保藏编号：CCTCC209110。琼氏不动杆菌X8接种至种子培养基。培养基：海藻酸钠，5g；(NH4)2SO4，5g；NaCl，20g；K2HPO4·3H2O，2g；MgSO4，1.0g；蒸馏水，1000ml；pH7.5；0.1Mpa，灭菌20min。置于恒温摇床中培养，摇床转速150r/min，温度25℃，每24h转接一次，共转接三次，培养后将菌液按比例稀释到107cfu/mL。
d.嗜热链球菌，保藏于中国普通微生物菌种保藏管理中心，编号：CGMCC 1.1855，添加80％甘油置于-80℃冰箱保存。嗜热链球菌接种到M17固体培养基上，37℃培养到对数培养期，再接种到M17液体培养基上，37℃，170r/min摇床培养12h，菌液离心(4℃)，去上清液，用0.85％的生理盐水洗涤两次，菌液稀释到106cfu/mL。
3)裙带菜生物发酵降解：取步骤1)备用裙带菜10g，装入锥形瓶中，加入30g步骤2)所得毛霉菌种液，用保鲜膜封口后在温度35℃、pH值8.5的条件下，置于转速180r/min的恒温摇床内发酵3d，接着加入50g步骤2)所得里氏木霉菌种液，用保鲜膜封口后在温度28℃、pH值4.5的条件下，置于转速160r/min的恒温摇床内发酵2d，之后加入100g步骤2)所得琼氏不动杆菌菌种液，用保鲜膜封口后在温度20℃、pH值7的条件下，置于转速120r/min的恒温摇床内发酵3d，得到裙带菜生物发酵液。
4)裙带菜酸降解：把18g步骤2)所得嗜热链球菌菌种液接入到裙带菜生物发酵液中，继续震荡降解。接入嗜热链球菌处理最适温度为25℃，摇床转速180r/min，发酵时间4d。
5)裙带菜热降解：取出摇床里的锥形瓶，用牛皮纸封口，置于121℃、1.5Mpa高压灭菌锅中，进行热降解2.5h。
6)裙带菜降解物干燥：热降解后的裙带菜，放置冷却，在温度80℃下干燥至水分为20％，粉碎过120目，得到裙带菜肥。
复合裙带菜肥的制备：
取上述制备的裙带菜肥60kg，加入腐殖酸10kg、海藻酸20kg、藻朊酸钠25kg、贝壳粉25kg、表面活性剂15kg、卡拉胶20kg混合均匀，装袋。
实施例3：
紫菜肥的制备：
1)原料处理：将100g紫菜置于1500g清水中浸泡两小时，取出后清洗泥沙，用R＝32cm的漏勺沥水，沥水后的紫菜含水量为45％，用剪刀切碎经胶体磨粉碎，粉碎后的紫菜置于4℃冰箱冷藏备用；
2)微生物菌种扩大培养：
a.毛霉(Actinomucor elegans)XH-22采用固体平板培养，28℃培养72h，用无菌生理盐水将孢子洗脱，洗脱液经高速分散机均质后，用血球计数板在显微镜下计数，最后将菌液按比例稀释到104cfu/mL。
b.里氏木霉(Trichoderma reesei)，菌种保藏编号：ATCC 26921，接种于PDA液体培养基中有氧培养，50℃培养24h，培养后将菌液按比例稀释到104cfu/mL。
c.琼氏不动杆菌(Acinetobacter junii)X8，保藏于武汉大学，保藏编号：CCTCC209110。琼氏不动杆菌X8接种至种子培养基。培养基：海藻酸钠，5g；(NH4)2SO4，5g；NaCl，20g；K2HPO4·3H2O，2g；MgSO4，1.0g；蒸馏水，1000ml；pH7.5；0.1Mpa，灭菌20min。置于恒温摇床中培养，摇床转速150r/min，温度25℃，每24h转接一次，共转接三次，培养后将菌液按比例稀释到105cfu/mL。
d.嗜热链球菌，保藏于中国普通微生物菌种保藏管理中心，编号：CGMCC 1.1855，添加80％甘油置于-80℃冰箱保存。嗜热链球菌接种到M17固体培养基上，37℃培养到对数培养期，再接种到M17液体培养基上，37℃，170r/min摇床培养12h，菌液离心(4℃)，去上清液，用0.85％的生理盐水洗涤两次，菌液稀释到104cfu/mL。
3)紫菜生物发酵降解：取步骤1)备用紫菜10g，装入锥形瓶中，加入50g步骤2)所得毛霉菌种液，用保鲜膜封口后在温度35℃、pH值8的条件下，置于转速200r/min的恒温摇床内发酵3.5d，接着加入50g步骤2)所得里氏木霉菌种液，用保鲜膜封口后在温度20℃、pH值5的条件下，置于转速150r/min的恒温摇床内发酵2d，之后加入50g步骤2)所得琼氏不动杆菌菌种液，用保鲜膜封口后在温度28℃、pH值6.5的条件下，置于转速160r/min的恒温摇床内发酵2d，得到紫菜生物发酵液。
4)紫菜酸降解：把15g步骤2)所得嗜热链球菌菌种液接入到紫菜生物发酵液中，继续震荡降解。接入嗜热链球菌处理最适温度为25℃，摇床转速180r/min，发酵时间2.5d。
5)紫菜热降解：取出摇床里的锥形瓶，用牛皮纸封口，置于121℃、1.5Mpa高压灭菌锅中，进行热降解2.5h。
6)紫菜降解物干燥：热降解后的紫菜，放置冷却，在温度70℃下干燥至水分为20％，粉碎过120目，得到紫菜肥。
复合紫菜肥的制备：
取上述制备的紫菜肥65kg，加入腐殖酸15kg、海藻酸20kg、藻朊酸钠20kg、贝壳粉35kg、表面活性剂5kg、卡拉胶15kg混合均匀，装袋。
试验例1：
用法：以发明CN 105906389A(一种高效增产海藻肥的制备方法及产品)中的实施例4玉米的出芽情况为对比例，采用相同的施肥方法在相同的生长环境下对玉米种子施用藻肥，各种藻肥使用后玉米种子的各性状及活性成分如下表，与不加藻肥相比，实施例1、2、3处理后，玉米种子下胚轴、α-淀粉酶酶活、可溶性还原糖含量有所提高，表明本发明藻肥肥效明显，提高种子的活性，提高植物的生长特性。表1反应出实施例处理的玉米种子的根长增长量比对比例大，说明本发明的藻肥更科学，肥效更高，能够促进玉米种子根系的增长。
表1：玉米种子各性状及活性成分情况
处理 根长增长量/cm 下胚轴/cm α-淀粉酶酶活(U/g) 可溶性还原糖(mg/g)
不加藻肥 0 8.28 0.8104 17.5633
实施例1 2.76 10.47 1.5789 22.1372
实施例2 3.13 10.96 1.6233 22.7688
实施例3 3.05 10.85 1.6021 22.4090
对比例 2.15 / / /

Claims (10)

1.一种高生物活性复合海藻肥，其特征在于，由如下重量份的原料组成：
海藻肥50-75份、腐殖酸10-35份、海藻酸20-40份、藻朊酸钠15-30份、贝壳粉5-60份、表面活性剂5-15份、卡拉胶15-30份；
其中，所述表面活性剂为硬脂酸、卵磷脂、脂肪酸山梨坦、聚山梨酯(吐温)、脂肪酸甘油酯、甜菜碱中的一种或两种以上任意比例的混合物；
所述海藻肥按如下方法制备得到：
(1)原料预处理
将原料海藻用水浸泡、清洗，沥干后先用剪刀剪碎，再经胶体磨粉碎，得到海藻泥，于0～5℃保存备用；
(2)海藻生物发酵降解
取步骤(1)准备好的海藻泥，加入104～107cfu/mL毛霉菌种液，密封后在温度30～50℃、pH值7.5～10.5的条件下，置于转速120～200r/min的恒温摇床内发酵2～7d，接着加入104～107cfu/mL里氏木霉菌种液，密封后在温度20～28℃、pH值3.5～5.5的条件下，置于转速120～200r/min的恒温摇床内发酵2～6d，之后加入104～107cfu/mL琼氏不动杆菌菌种液，密封后在温度20～40℃、pH值6～9的条件下，置于转速120～200r/min的恒温摇床内发酵1～6d，得到海藻生物发酵液；
所述海藻泥与毛霉菌种液、里氏木霉菌种液、琼氏不动杆菌菌种液的质量比为1：3～10：3～10：3～10；
(3)海藻酸降解、热降解
在步骤(2)所得海藻生物发酵液中，加入104～107cfu/mL嗜热链球菌菌种液，在温度25～50℃、pH值3～7的条件下，置于转速120～200r/min的恒温摇床内发酵1～6d，得到酸降解液，取所得酸降解液，密封后，置于121～125℃、1.0～1.5Mpa下进行热处理0.5～4h，得到海藻降解物；
所述海藻生物发酵液与嗜热链球菌菌种液的质量比为1：0.05～0.2；
(4)干燥
待步骤(3)所得海藻降解物冷却至室温，之后干燥至水分含量为10％～40％，粉碎，过100～250目，得到成品海藻肥；
2.如权利要求1所述高生物活性复合海藻肥，其特征在于，所述海藻肥的制备方法步骤(1)中，所述原料海藻为：海带、紫菜或裙带菜。
3.如权利要求1所述高生物活性复合海藻肥，其特征在于，所述海藻肥的制备方法步骤(1)中，所述用水浸泡、清洗的操作方法为：将原料海藻按料液质量比1：5～20加入清水中，浸泡2h，然后取出用清水冲洗除去泥沙。
4.如权利要求1所述高生物活性复合海藻肥，其特征在于，所述海藻肥的制备方法步骤(1)中，所述沥干采用R＝32cm的漏勺，沥水后的海藻含水量为40％～70％。
5.如权利要求1所述高生物活性复合海藻肥，其特征在于，所述海藻肥的制备方法步骤(2)中，所述毛霉菌种液按如下方法获得：
毛霉XH-22，采用固体平板基，28℃培养72h，之后用无菌生理盐水将孢子洗脱，洗脱液经高速分散机均质后，用血球计数板在显微镜下计数，最后将菌液按比例稀释至104～107cfu/mL，得到所述毛霉菌种液；
所述固体平板基的组成为：马铃薯浸粉6g/L、葡萄糖20g/L、琼脂20g/L，溶剂蒸馏水；pH值5.6，灭菌20min。
6.如权利要求1所述高生物活性复合海藻肥，其特征在于，所述海藻肥的制备方法步骤(2)中，所述里氏木霉菌种液按如下方法获得：
将里氏木霉接种于PDA液体培养基中进行有氧培养，在温度50℃下培养24h，之后将菌液按比例稀释至104～107cfu/mL，得到所述里氏木霉菌种液；
所述PDA液体培养基的组成为：马铃薯浸粉6g/L、葡萄糖20g/L，溶剂蒸馏水；pH值5.6，灭菌20min。
7.如权利要求1所述高生物活性复合海藻肥，其特征在于，所述海藻肥的制备方法步骤(2)中，所述琼氏不动杆菌菌种液按如下方法获得：
将琼氏不动杆菌X8接种于种子培养基，然后置于恒温摇床中，在摇床转速150r/min，温度25℃，压力0.1Mpa的条件下进行培养，每24h转接一次，共转接三次，培养后将菌液按比例稀释至104～107cfu/mL，得到所述琼氏不动杆菌菌种液；
所述种子培养基的组成为：海藻酸钠5g/L、(NH4)2SO4 5g/L、NaCl 20g/L、K2HPO4·3H2O2g/L、MgSO4 1.0g/L，溶剂蒸馏水；pH值7.5，灭菌20min。
8.如权利要求1所述高生物活性复合海藻肥，其特征在于，所述海藻肥的制备方法步骤(3)中，所述嗜热链球菌菌种液按如下方法获得：
将嗜热链球菌接种到M17固体培养基上，37℃培养到对数培养期，再接种到新的M17液体培养基上，于37℃、170r/min摇床中培养12h，之后降温至4℃菌液离心，去上清液，用质量分数0.85％生理盐水洗涤两次，最后将菌液稀释至104～107cfu/mL，得到所述嗜热链球菌菌种液；
所述M17固体培养基的组成为：大豆胨5g/L、蛋白胨2.5g/L、酪蛋白胨2.5g/L、酵母浸粉2.5g/L、牛肉粉5g/L、乳糖5g/L、抗坏血酸钠0.5g/L、β-甘油磷酸钠19g/L、硫酸镁0.25g/L，溶剂蒸馏水；pH值7.2，灭菌15min。
9.如权利要求1所述高生物活性复合海藻肥，其特征在于，所述海藻肥的制备方法步骤(4)中，所述干燥采用干燥机，在60～95℃下进行。
10.如权利要求1所述高生物活性复合海藻肥，其特征在于，所述高生物活性复合海藻肥由如下重量份的原料组成：
海藻肥50-65份、腐殖酸10～15份、海藻酸20-30份、藻朊酸钠15-25份、贝壳粉10-35份、表面活性剂5-15份、卡拉胶15-20份。
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Cited By (3)

* Cited by examiner, † Cited by third party
Publication number Priority date Publication date Assignee Title
CN112851446A (zh) * 2021-01-28 2021-05-28 于佳骏 一种提升普洱茶树的大叶产量的叶面肥及其制备方法
CN114557403A (zh) * 2021-12-27 2022-05-31 中国海洋大学 一种可用于高脂低蛋白饲料的硫酸基多糖饲料添加剂的制备方法及其应用
CN114835526A (zh) * 2022-04-26 2022-08-02 嘉兴学院 一种适用于有机蔬菜种植的海藻肥及其生产工艺

Citations (7)

* Cited by examiner, † Cited by third party
Publication number Priority date Publication date Assignee Title
JP2004189532A (ja) * 2002-12-11 2004-07-08 Sendai Kogyo Kk 植物病害防除効果を有する安定な液体有機肥料
CN101591628A (zh) * 2009-06-11 2009-12-02 浙江工业大学 琼氏不动杆菌x8及其在制备褐藻胶裂解酶中的应用
CN102229515A (zh) * 2011-04-27 2011-11-02 北京雷力农用化学有限公司 一种有机颗粒肥及其制备方法
CN102731176A (zh) * 2012-06-28 2012-10-17 威海市世代海洋生物科技有限公司 一种海藻生物复合有机液肥的生产方法
CN102775235A (zh) * 2012-08-16 2012-11-14 北京雷力农用化学有限公司 一种藻朊高塔复混肥及其制备方法
CN105622293A (zh) * 2016-02-01 2016-06-01 青岛海大生物集团有限公司 一种酶解发酵法制备抗盐碱专用海藻生物水溶肥料的方法
CN106348887A (zh) * 2016-08-31 2017-01-25 五洲丰农业科技有限公司 海藻复合分级发酵制备氨基酸液体水溶肥的方法

Patent Citations (7)

* Cited by examiner, † Cited by third party
Publication number Priority date Publication date Assignee Title
JP2004189532A (ja) * 2002-12-11 2004-07-08 Sendai Kogyo Kk 植物病害防除効果を有する安定な液体有機肥料
CN101591628A (zh) * 2009-06-11 2009-12-02 浙江工业大学 琼氏不动杆菌x8及其在制备褐藻胶裂解酶中的应用
CN102229515A (zh) * 2011-04-27 2011-11-02 北京雷力农用化学有限公司 一种有机颗粒肥及其制备方法
CN102731176A (zh) * 2012-06-28 2012-10-17 威海市世代海洋生物科技有限公司 一种海藻生物复合有机液肥的生产方法
CN102775235A (zh) * 2012-08-16 2012-11-14 北京雷力农用化学有限公司 一种藻朊高塔复混肥及其制备方法
CN105622293A (zh) * 2016-02-01 2016-06-01 青岛海大生物集团有限公司 一种酶解发酵法制备抗盐碱专用海藻生物水溶肥料的方法
CN106348887A (zh) * 2016-08-31 2017-01-25 五洲丰农业科技有限公司 海藻复合分级发酵制备氨基酸液体水溶肥的方法

Non-Patent Citations (5)

* Cited by examiner, † Cited by third party
Title
周济铭: "《酶制剂生产及应用技术》", 30 September 2014 *
夏征农: "《辞海 生物学分册》", 31 December 1987 *
张贤艳等,: "海藻脱腥技术研究进展[J]", 《食品安全质量检测学报》 *
耿银银等: "海藻功能物质的提取工艺、理化性质以及在农业领域中的应用", 《生物学杂志》 *
韦超: "《药剂学 第2版》", 31 August 2012 *

Cited By (3)

* Cited by examiner, † Cited by third party
Publication number Priority date Publication date Assignee Title
CN112851446A (zh) * 2021-01-28 2021-05-28 于佳骏 一种提升普洱茶树的大叶产量的叶面肥及其制备方法
CN114557403A (zh) * 2021-12-27 2022-05-31 中国海洋大学 一种可用于高脂低蛋白饲料的硫酸基多糖饲料添加剂的制备方法及其应用
CN114835526A (zh) * 2022-04-26 2022-08-02 嘉兴学院 一种适用于有机蔬菜种植的海藻肥及其生产工艺

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