CN107557018A - 一种土壤改良剂的制备方法 - Google Patents

Abstract

本发明公开了一种土壤改良剂的制备方法，属于土壤改善技术领域。该改良剂利用贝壳中含有丰富的海洋生物活性钙、角蛋白及其水解活性肽、牛磺酸，添加改性甲壳素、腐植酸、聚丙烯酰胺、沥青乳、氯化钙、硫酸镁制备而得，根据泡腾片原理，当降雨时，酸源与碱源发生反应释放CO₂以及更多活性物质，改性壳聚糖、聚丙烯酰胺和沥青乳不仅能控制活性物质的释放，还能增加土壤的保水性能。该土壤改良剂利用废弃的贝壳作为主要物质，具有资源再利用的特点，具有很好的发展前景。

Description

一种土壤改良剂的制备方法

技术领域

本发明属于土壤改良技术领域，特别涉及一种土壤改良剂的制备方法。

背景技术

目前我国面临的土壤环境安全问题日益突出。土壤环境遭到破坏或是受到污染无疑会给土壤的生态功能带来影响，甚至可能使土壤系统崩溃、功能丧失。土壤污染不仅导致土壤质量和生产力的降低，而且引起水、气环境质量的下降，严重的土壤污染将直接危及到生态安全、食品安全和人体将抗，同时也影响着投资经商、对外贸易以及一些重要国际公约的履行，不利于我国的环境外交、全社会的稳定和经济增长，从而制约区域和国家的可持续发展。目前理论上可行的修复技术有物理修复技术、化学修复技术、微生物修复技术、植物修复技术和综合修复技术等几大类；目前尽管在污染环境的物理修复、化学修复以及工程技术方面有一定的进展，并形成了一些实用技术。但是，这些修复方法往往会破会污染场地的物理性质，甚至会造成环境的二次污染，对于土壤污染的修复没有从本质上得到改善和解决。

专利申请号CN201110154187.7公开了一种改良酸化或酸性土壤的有机环保型土壤调理剂，由沼渣、贝壳粉、钙镁磷肥、草木灰、壳聚糖、沸石粉、膨润土制备而得，可提高土壤的pH值，增加土壤中钙、镁、磷、钾等营养元素，增加土壤的有机质含量，提高土壤保水保肥能力，改善土壤理化性质，提高作物抗逆（病、虫、旱）能力，降低重金属毒害，而且施用方便，不受风力影响，适合机械作业。专利申请号CN201610793169.6一种盐碱土壤改良剂及其制备方法，由作物秸秆粉、腐殖酸、壳聚糖、硅藻土、酵素菌肥、贝壳粉、固体菌种、硼砂、硫酸锌、稻壳碳微粉、石膏粉、十二烷基苯磺酸钠、松针腐叶土、仲目酸、丙酮酸、棕腐酸、硝基腐植酸、金属络合离子、适量水制备而得，多种微生物种类复合使用，优势互补，可使促生作用、肥效作用更好的结合起来，提高肥料利用效率。专利申请号CN201410367029.3一种利用镁矿石与贝壳生产的土壤调理剂及其生产方法，以镁矿石、牡蛎壳等贝壳，粉料添加腐植酸盐和植物营养调理剂，经搅拌混匀而成或混匀后经挤压而成，该调理剂最大限度的活化激活了镁矿石和牡蛎壳等贝壳中的有效养分，同时提高pH，所得土壤调理剂产品以矿质元素钙镁为主，含铁锰锌硼钼等多种微量元素、聚谷氨酸、活性腐植酸等活性有机物质，可有效改良酸性土壤，补充多种营养成分，并可根据作物需求在作物生长期内提供作物所需营养成分，提高 产量，改善作物本质，该产品即可直接施用，也可与化肥共同施用（现配现用）。

现有技术中，对贝壳的利用多集中于煅烧后制备活性钙，而贝壳中的其他有机物质如角蛋白、牛磺酸等不能被利用。

发明内容

针对现有技术中，利用煅烧贝壳的方法制备土壤改良剂不能充分利用贝壳中活性物质的缺陷，本发明提供一种高效利用贝壳活性钙、角蛋白、氨基酸等物质的土壤改良剂的制备方法。

一种土壤改良剂的制备方法，由以下步骤制备：

A.原料预处理

（1）选取优质无重大霉变的贝壳，清洗干净，烘干，将其粉碎至200~250目得到贝壳粉；

（2）取100份贝壳粉与水按照料液比1:(10~20)混合均匀，然后加入中性蛋白酶，同时通入高压脉冲电场，设置电场强度为30~35Kv/cm，脉冲数15~20，处理时间为5~10min/h，50~60℃水浴加热进行酶解12~24h，得到酶解液1；

B.活性物质的制备

（1）将酶解液1在10000rpm下离心分离10~15min，取上清液1备用，取沉淀，按质量比加入葡萄糖1.4~2.0%、玉米提取物1.6~2.0%、磷酸二氢钾0.2~0.5%、氯化钠0.5~1%，调节pH为7~8，放入发酵罐中，加水至发酵罐体积的60~70%，高压蒸汽灭菌后，接种复合菌，设置发酵参数为搅拌转数180~200r/min，无菌空气通气量1~1.5L/min，发酵温度37~40℃，发酵7~10天，得到发酵液；

所述复合菌为地衣芽孢杆菌和乳酸菌；

（2）取发酵液，用柠檬酸调节pH至6.5~7.5，在5000rpm下离心分离10~15min，取上清液2备用；取沉淀，按其质量8~10%加入SM98011蛋白酶、碱性蛋白酶、SM97010蛋白酶中一种或者一种以上组合，于50~60℃、130rpm水浴摇床中酶解5~6h，得到酶解液2；

SM98011蛋白酶、碱性蛋白酶、SM97010蛋白酶能有效分解角蛋白生成活性肽，蛋白酶SM98011的酶解产物中还含有丰富的风味氨基酸，进一步提高土壤改良剂中的活性成分，能为土壤有益菌提供更多的易吸收的营养物质。

C.土壤改良剂的制备

（1）将上清液1、上清液2、酶解液1和酶解液2混合，按其重量分数比加入改性壳聚糖溶液40~50份、腐殖酸10~15份、聚丙烯酰胺10~15份、沥青乳10~15份，无水乙醇20~25份，氯化钙粉末1~5份，硫酸镁粉末1~5份，混合均匀，然后于50~60℃鼓风干燥机中干燥4~6h，过100目筛制得药粒；

聚丙烯酰胺在水的作用下能迅速与土壤发生聚合反应，使土壤很快疏松，不仅利于营养元素和有机物质的渗透扩散，还解决了微生物菌在板结土壤中因缺氧不能繁殖的难题；另一方面，聚丙烯酰胺能提高土壤的保水能力；在本发明中，聚丙烯酰胺还作为乳化剂，降低混合液中各物质间的摩擦力，提高制粒的稳定性。

沥青乳能抑制土壤水分蒸发，用量越大抑制效果越好，但是沥青乳的渗透覆盖速率低，不能很快地渗透到深层土壤发挥作用；而聚丙烯酰胺能有效促进沥青乳的渗透扩散，提高了沥青乳的效率。

（2）在70~75℃下将聚乙二醇溶解，按聚乙二醇、无水柠檬酸粉末和巯基乙醇溶液质量比为2:1:1~4:3:2进行混合，冷却后将混合物粉碎，过80目筛得到酸源；所述巯基乙醇溶液浓度为10~15mmol/L；

巯基乙醇能打开活性钙中残余角蛋白大分子中的二硫键，促进其完全溶解，从而提高活性钙生物质含量，提高多肽含量；低浓度的巯基乙醇能促进角蛋白溶解，高浓度的巯基乙醇会抑制角蛋白的溶解。

（3）将药粒与酸源1:1混合均匀，按质量比加入5~6%的聚乙二醇6000溶液，混合均匀，烘干制粒，即可得到土壤改良剂。

作为进一步改进，所述中性蛋白酶活力为20~30万u/g，酶用量为7~10%；

作为进一步改进，所述复合菌接种方法为：先接种地衣芽孢杆菌，发酵3~4天后，接种乳酸菌，添加蔗糖，继续发酵至7~10天，得到发酵液；所述地衣芽孢杆菌接种量为7~10%，乳酸菌接种量为5~8%，蔗糖添加量为5~10%；

地衣芽孢杆菌具有很好的角蛋白降解能力，在37~40℃、pH为7.0培养条件下发酵产角蛋白酶效果最好；乳酸菌具有很强的的抗酸能力，不具备分解蛋白质的酶系统，因此不会降低贝壳的营养价值，同时，乳酸菌能利用地衣芽孢杆菌分解贝壳后的可溶性物质产生多种氨基酸、维生素，提高发酵的活性物质含量；先利用地衣芽孢杆菌发酵产生可溶性物质，再利用乳酸菌发酵特点利用这些可溶性物质，解除高浓度营养物质的反馈抑制作用，也同时提高了发酵液中的活性物质含量。

作为进一步改进，所述SM98011蛋白酶、SM97010蛋白酶制备方法如下：

将SM98011菌种和SM97010菌种分别接种于500ml三角瓶的液体发酵培养基中，在28℃，200rpm培养30h后，将发酵液于4℃，10000g下离心15min，取上清液，即为粗酶液；

所述培养基含有以下重量分数比组分：玉米粉1~3份，麸皮0.5~2份，豆粕1~3份，贝壳粉1~3份，磷酸氢二钠0.4~0.6份，磷酸二氢钾0.03~0.05份，碳酸钠0.1~0.3份，调节pH为7.5。

作为进一步改进，所述SM98011蛋白酶、碱性蛋白酶、SM97010蛋白酶添加量比值为1:2:1。

作为进一步改进，所述改性壳聚糖制备方法如下：

（1）称取50份壳聚糖，加入到600ml 95%乙醇溶液中侵泡，恒温60℃溶胀2h得到壳聚糖侵泡液；

（2）将150份香草醛溶解于400ml 95%的乙醇中，倒入壳聚糖侵泡液，得到混合液；

（3）将混合液放置于微波快速反应装置中，设定加热温度70℃，反应10min，微波功率300w，搅拌；

（4）反应完成，冷却后过滤，乙醇洗，水洗，真空干燥至恒重，即可得改性壳聚糖；

所述壳聚糖分子量为5~6万。

香草醛接枝改性后的壳聚糖具有很好的包埋能力和药物释放能力，在本发明的土壤改良剂中，能包埋更多的多肽、活性钙和蛋白质等物质，并且控制物质的释放速度，保证土壤改良剂效持续作用。

作为进一步改进，所述高压脉冲电场为流动式加料，由高压脉冲电源、示波器和处理室组成；脉冲电源的波型为三角波，高压脉冲电源产生的脉冲作用于处理室的电极，从而对流经处理室的样品进行处理；处理液流速为0~20L/min。

高压脉冲电场能使贝壳角质层软化，有利于酶解作用更快的进行。

本发明的优点：

1、利用微生物发酵提取贝壳活性钙、活性多肽制备成土壤改良剂，提高土壤中有益菌的种群和数量，有效改善土壤肥力；

2、添加聚丙烯酰胺和沥青乳，两者协同作用，能更快更有效地发挥土壤保湿作用，提高土壤的水含量；

3、利用多孔材料包埋有效成分，使土壤改良剂有效成分持续释放，提高利用率，泡腾技术还能提高多雨天气时该改良剂的作用效果。

具体实施方式

下面结合实施例对本发明进一步说明。

实施例1

A.原料预处理

（1）选取优质无重大霉变的贝壳，清洗干净，烘干，将其粉碎至200目得到贝壳粉；

（2）取100份贝壳粉与水按照料液比1:10混合均匀，然后加入中性蛋白酶，同时通入高压脉冲电场，设置电场强度为30Kv/cm，脉冲数15，处理时间为5min/h，50℃水浴加热进行酶解12h，得到酶解液1；所述中性蛋白酶活力为20万u/g，酶用量为7%；所述高压脉冲电场为流动式加料，由高压脉冲电源、示波器和处理室组成；脉冲电源的波型为三角波，高压脉冲电源产生的脉冲作用于处理室的电极，从而对流经处理室的样品进行处理；处理液流速为10L/min。

B.活性物质的制备

（1）将酶解液1在10000rpm下离心分离10min，取上清液1备用，取沉淀，按质量比加入葡萄糖1.4%、玉米提取物1.6%、磷酸二氢钾0.2%、氯化钠0.5%，调节pH为7，放入发酵罐中，加水至发酵罐体积的60%，高压蒸汽灭菌后，接种复合菌，设置发酵参数为搅拌转数200r/min，无菌空气通气量1L/min，发酵温度37℃，发酵7天，得到发酵液；

所述复合菌接种方法为：先接种地衣芽孢杆菌，发酵3天后，接种乳酸菌，添加蔗糖，继续发酵至7天，得到发酵液；所述地衣芽孢杆菌接种量为7%，乳酸菌接种量为5%，蔗糖添加量为5%；

（2）取发酵液，用柠檬酸调节pH至6.5，在5000rpm下离心分离10min，取上清液2备用，取沉淀，按其质量8%加入SM98011蛋白酶、SM97010蛋白酶1:1组合，于50℃、130rpm水浴摇床中酶解5~6h，得到酶解液2；

C.土壤改良剂的制备

（1）将上清液1、上清液2、酶解液1和酶解液2混合，按其重量份数比加入改性壳聚糖溶液40份、腐殖酸10份、聚丙烯酰胺10份、沥青乳10份，无水乙醇20份，氯化钙粉末1份，硫酸镁粉末1份，混合均匀，然后于50℃鼓风干燥机中干燥4h，过100目筛制得药粒；所述改性壳聚糖为将分子量为5万的壳聚糖进行香草醛接枝改性。

（2）在70℃下将聚乙二醇溶解，按聚乙二醇、无水柠檬酸粉末和巯基乙醇溶液质量比为2:1:1进行混合，冷却后将混合物粉碎，过80目筛得到酸源；所述巯基乙醇溶液浓度为10~15mmol/L；

（3）将药粒与酸源1:1混合均匀，按质量比加入5%的聚乙二醇6000溶液，混合均匀，烘干制粒，即可得到土壤改良剂。

将该土壤改良剂用于甘蔗地，土壤水蒸发量减少20%，有益菌数量为10⁵个/cm³，pH为6.3，全氮含量为1.2g/kg，速效磷含量为2.61mg/kg，速效钾含量为98.22mg/kg，甘蔗产量提高16.4%。

实施例2

A.原料预处理

（1）选取优质无重大霉变的贝壳，清洗干净，烘干，将其粉碎至250目得到贝壳粉；

（2）取100份贝壳粉与水按照料液比1:20混合均匀，然后加入中性蛋白酶，同时通入高压脉冲电场，设置电场强度为35Kv/cm，脉冲数20，处理时间为10min/h，60℃水浴加热进行酶解24h，得到酶解液1；所述中性蛋白酶活力为30万u/g，酶用量为10%；所述高压脉冲电场为流动式加料，由高压脉冲电源、示波器和处理室组成；脉冲电源的波型为三角波，高压脉冲电源产生的脉冲作用于处理室的电极，从而对流经处理室的样品进行处理；处理液流速为20L/min。

B.活性物质的制备

（1）将酶解液1在10000rpm下离心分离15min，取上清液1备用，取沉淀，按质量比加入葡萄糖2.0%、玉米提取物2.0%、磷酸二氢钾0.5%、氯化钠1%，调节pH为8，放入发酵罐中，加水至发酵罐体积的70%，高压蒸汽灭菌后，接种复合菌，设置发酵参数为搅拌转数200r/min，无菌空气通气量1.5L/min，发酵温度40℃，发酵10天，得到发酵液；所述复合菌为为地衣芽孢杆菌和乳酸菌，接种方法为：先接种地衣芽孢杆菌，发酵4天后，接种乳酸菌，添加蔗糖，继续发酵至10天，得到发酵液；所述地衣芽孢杆菌接种量为10%，乳酸菌接种量为8%，蔗糖添加量为10%；

（2）取发酵液，用柠檬酸调节pH至7.5，在5000rpm下离心分离15min，取上清液2备用；取沉淀，按其质量10%加入SM98011蛋白酶、碱性蛋白酶、SM97010蛋白酶1:2:1组合，于60℃、130rpm水浴摇床中酶解6h，得到酶解液2；

C.土壤改良剂的制备

（1）将上清液1、上清液2、酶解液1和酶解液2混合，按其重量分数比加入改性壳聚糖溶液50份、腐殖酸15份、聚丙烯酰胺15份、沥青乳15份，无水乙醇25份，氯化钙粉末5份，硫酸镁粉末5份，混合均匀，然后于60℃鼓风干燥机中干燥6h，过100目筛制得药粒；所述改性壳聚糖为将分子量为6万的壳聚糖进行香草醛接枝改性。

（2）在75℃下将聚乙二醇溶解，按聚乙二醇、无水柠檬酸粉末和巯基乙醇溶液质量比为4:3:2进行混合，冷却后将混合物粉碎，过80目筛得到酸源；所述巯基乙醇溶液浓度为15mmol/L；

（3）将药粒与酸源1:1混合均匀，按质量比加入6%的聚乙二醇6000溶液，混合均匀，烘干制粒，即可得到土壤改良剂。

将该土壤改良剂用于酸性小麦地，土壤水蒸发量减少22%，有益菌数量为2×10⁴个/cm³，pH为6.5，全氮含量为1.01g/kg，速效磷含量为2.56mg/kg，速效钾含量为97.04mg/kg，小麦产量提高13.5%，

实施例3

A.原料预处理

（1）选取优质无重大霉变的贝壳，清洗干净，烘干，将其粉碎至220目得到贝壳粉；

（2）取100份贝壳粉与水按照料液比1:15混合均匀，然后加入中性蛋白酶，同时通入高压脉冲电场，设置电场强度为33Kv/cm，脉冲数20，处理时间为10min/h，60℃水浴加热进行酶解24h，得到酶解液1；作为进一步改进，所述中性蛋白酶活力为30万u/g，酶用量为8%；所述高压脉冲电场为流动式加料，由高压脉冲电源、示波器和处理室组成；脉冲电源的波型为三角波，高压脉冲电源产生的脉冲作用于处理室的电极，从而对流经处理室的样品进行处理；处理液流速为15L/min。

B.活性物质的制备

（1）将酶解液1在10000rpm下离心分离12min，取上清液1备用，取沉淀，按质量比加入葡萄糖1.6%、玉米提取物1.8%、磷酸二氢钾0.4%、氯化钠0.8%，调节pH为7，放入发酵罐中，加水至发酵罐体积的65%，高压蒸汽灭菌后，接种复合菌，设置发酵参数为搅拌转数200r/min，无菌空气通气量1.3L/min，发酵温度38℃，发酵8天，得到发酵液；

所述复合菌为为地衣芽孢杆菌和乳酸菌，接种方法为：先接种地衣芽孢杆菌，发酵4天后，接种乳酸菌，添加蔗糖，继续发酵至8天，得到发酵液；所述地衣芽孢杆菌接种量为8%，乳酸菌接种量为6%，蔗糖添加量为8%；

（2）取发酵液，用柠檬酸调节pH至7，在5000rpm下离心分离15min，取上清液2备用；取沉淀，按其质量10%加入SM98011蛋白酶、碱性蛋白酶、SM97010蛋白酶1:2:1组合，于60℃、130rpm水浴摇床中酶解6h，得到酶解液2；

C.土壤改良剂的制备

（1）将上清液1、上清液2、酶解液1和酶解液2混合，按其重量分数比加入改性壳聚糖溶液45份、腐殖酸13份、聚丙烯酰胺13份、沥青乳13份，无水乙醇22份，氯化钙粉末5份，硫酸镁粉末5份，混合均匀，然后于60℃鼓风干燥机中干燥6h，过100目筛制得药粒；

（2）在70℃下将聚乙二醇溶解，按聚乙二醇、无水柠檬酸粉末和巯基乙醇溶液质量比为3:1:2进行混合，冷却后将混合物粉碎，过80目筛得到酸源；所述巯基乙醇溶液浓度为10mmol/L；

（3）将药粒与酸源1:1混合均匀，按质量比加入6%的聚乙二醇6000溶液，混合均匀，烘干制粒，即可得到土壤改良剂。

将该土壤改良剂用于酸性玉米地，土壤水蒸发量减少24%，有益菌数量为10⁵个/cm³，pH为6.8，全氮含量为1.11g/kg，速效磷含量为2.14mg/kg，速效钾含量为95.64mg/kg，玉米产量提高15.5%。

对比例

以实施例1~3制备的土壤改良剂和发明专利CN201610487844.2制备的土壤连作修复剂对三年的西红柿耕地土壤进行修复，每亩一次施用的土壤改良剂和修复剂均为50kg，分别于5月、6月施放一次，施用土壤改良剂和修复剂的第二年记录西红柿亩产。

本实施例的土壤改良剂制备方法同实施例1~3。

修复剂包括以下重量份数的原料：石灰10%、碳酸钙10%、粉煤灰4%、羟基磷灰石1.5%、磷矿粉2%、磷酸氢钙8%、磷酸二氢钾7%、聚丙烯酰胺4%、聚乙烯醇树脂6%、聚丙烯腈1%、聚丙烯醇1.5%、沸石3%、膨润土4%、海泡石3%、腐殖酸5%、泥炭7%、多聚糖6%、沥青乳剂8%、草炭5%、阿维菌素2%、多粘芽孢杆菌素1%、乳化剂1%，将上述原料均匀分散在浓度为0.1g/L的NaCl溶液中，所有原料在混合溶液中的浓度为18g/L。

利用实施例1~3的土壤改良剂和发明专利CN201610487844.2制备的土壤连作修复剂对三年的西红柿耕地土壤进行修复后，对土壤各项参数及西红柿产量的测定数据如表1。

表1 改良剂及修复剂对土壤修复后的参数及西红柿产量对比

通过表1数据可看出，通过本发明制备的土壤改良剂，能更好的对土壤进行修复，提高作物产量。

本发明上述实施例方案仅是对本发明的说明而不能限制本发明，在与本发明的权利要求书相当的含义和范围内的任何改变，都应当认为是包括在权利要求书的范围内。

Claims (7)

1.一种土壤改良剂的制备方法，其特征在于：主要由以下步骤制备：

A.原料预处理

（1）选取优质无重大霉变的贝壳，清洗干净，烘干，将其粉碎至200~250目得到贝壳粉；

（2）取100份贝壳粉与水按照料液比1:(10~20)混合均匀，然后加入中性蛋白酶，同时通入高压脉冲电场，设置电场强度为30~35Kv/cm，脉冲数15~20，处理时间为5~10min/h，50~60℃水浴加热进行酶解12~24h，得到酶解液1；

B.活性物质的制备

（1）将酶解液1在10000rpm下离心分离10~15min，取上清液1备用，取沉淀，按质量比加入葡萄糖1.4~2.0%、玉米提取物1.6~2.0%、磷酸二氢钾0.2~0.5%、氯化钠0.5~1%，调节pH为7~8，放入发酵罐中，加水至发酵罐体积的60~70%，高压蒸汽灭菌后，接种复合菌，设置发酵参数为搅拌转数180~200r/min，无菌空气通气量1~1.5L/min，发酵温度37~40℃，发酵7~10天，得到发酵液；

所述复合菌为地衣芽孢杆菌和乳酸菌；

（2）取发酵液，用柠檬酸调节pH至6.5~7.5，在5000rpm下离心分离10~15min，取上清液2备用；取沉淀，按其质量8~10%加入SM98011蛋白酶、碱性蛋白酶、SM97010蛋白酶中一种或者一种以上组合，于50~60℃、130rpm水浴摇床中酶解5~6h，得到酶解液2；

C.土壤改良剂的制备

（1）将上清液1、上清液2、酶解液1和酶解液2混合，按其重量分数比加入壳聚糖溶液40~50份、腐殖酸10~15份、聚丙烯酰胺10~15份、沥青乳10~15份，无水乙醇20~25份，氯化钙粉末1~5份，硫酸镁粉末1~5份，混合均匀，然后于50~60℃鼓风干燥机中干燥4~6h，过100目筛制得药粒；

（2）在70~75℃下将聚乙二醇溶解，按聚乙二醇、无水柠檬酸粉末和巯基乙醇溶液质量比为2:1:1~4:3:2进行混合，冷却后将混合物粉碎，过80目筛得到酸源；所述巯基乙醇溶液浓度为10~15mmol/L；

（3）将药粒与酸源1:1混合均匀，按质量比加入5~6%的聚乙二醇6000溶液，混合均匀，烘干制粒，即可得到土壤改良剂。

2.根据权利要求1所述的一种土壤改良剂的制备方法，其特征在于，所述中性蛋白酶活力为20~30万u/g，酶用量为7~10%。

3.根据权利要求1所述的一种土壤改良剂的制备方法，其特征在于，所述复合菌接种方法为：先接种地衣芽孢杆菌，发酵3~4天后，接种乳酸菌，添加蔗糖，继续发酵至7~10天，得到发酵液；所述地衣芽孢杆菌接种量为7~10%，乳酸菌接种量为5~8%，蔗糖添加量为5~10%。

4.根据权利要求1所述的一种土壤改良剂的制备方法，其特征在于，所述SM98011蛋白酶、SM97010蛋白酶制备方法如下：

将SM98011菌种和SM97010菌种分别接种于500ml三角瓶的液体发酵培养基中，在28℃，200rpm培养30h后，将发酵液于4℃，10000g下离心15min，取上清液，即为粗酶液；

所述培养基含有以下重量分数比组分：玉米粉1~3份，麸皮0.5~2份，豆粕1~3份，贝壳粉1~3份，磷酸氢二钠0.4~0.6份，磷酸二氢钾0.03~0.05份，碳酸钠0.1~0.3份，调节pH为7.5。

5.根据权利要求1所述的一种土壤改良剂的制备方法，其特征在于，所述改性壳聚糖制备方法如下：

（1）称取50份壳聚糖，加入到600ml 95%乙醇溶液中侵泡，恒温60℃溶胀2h得到壳聚糖侵泡液；

（2）将150份香草醛溶解于400ml 95%的乙醇中，倒入壳聚糖侵泡液，得到混合液；

（3）将混合液放置于微波快速反应装置中，设定加热温度70℃，反应10min，微波功率300w，搅拌；

（4）反应完成，冷却后过滤，乙醇洗，水洗，真空干燥至恒重，即可得改性壳聚糖；

所述壳聚糖分子量为5~6万。

6.根据权利要求1所述的一种土壤改良剂的制备方法，其特征在于：所述高压脉冲电场为流动式加料，由高压脉冲电源、示波器和处理室组成；脉冲电源的波型为三角波，高压脉冲电源产生的脉冲作用于处理室的电极，从而对流经处理室的样品进行处理；处理液流速为0~20L/min。

7.根据权利要求1所述的一种土壤概改良剂的制备方法，其特征在于，所述SM98011蛋白酶、碱性蛋白酶、SM97010蛋白酶添加量比值为1:2:1。