CN103484383B - 一种固体生产中国被毛孢的方法 - Google Patents
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Abstract
一种固体生产中国被毛孢的方法，涉及一种中国被毛孢的生产方法，应用于用固体培养基生产中国被毛孢菌，其特点是包括如下步骤：步骤一：将枸杞20％～90％、谷类1％～40％、豆类5％～40％混合，加同等质量的乳，按重量百分比配制后置入培养容器，培养基占培养容器体积的1/10～7/10，在115～140℃湿热灭菌30分钟，接入占培养基重量0.5％～1％的中国被毛孢菌种在15～22℃条件下培养3～9天，培养基表面长满菌丝；步骤二：将培养物干燥、粉碎、过筛即得中国被毛孢菌粉。本发明易于大规模工业化生产，可快速、高效、绿色安全的进行固体生产中国被毛孢，所得菌粉肾保健作用明显。
Description
背景技术
冬虫夏草是鳞翅目蝙蝠蛾属的虫草蝙蝠蛾(Hepialus armoricamus Oberthur)幼虫感染中国被毛孢真菌后，在体内大量繁殖后形成的虫菌复合体。中国专利CN101530042公开的中国被毛孢菌粉发酵生产工艺，CN101423799公开的一种中国被毛孢的生产方法。上述两件专利均利用中国被毛孢菌种发酵方法生产出菌粉，其缺点是操作步骤繁多，不易于大规模生产，菌粉中肾保健作用有效成分较低。
发明内容
本发明的目的是克服现有技术的不足，提供利用天然枸杞作为培养基原料之一，易于大规模工业化生产，可快速、高效、绿色安全的进行固体生产中国被毛孢。所得菌粉肾保健作用明显。
为解决上述问题，本发明的技术方案为：其特点是包括如下步骤：步骤一：将枸杞20％～90％、谷类1％～40％、豆类5％～40％混合，加同等质量的乳，按重量百分比配制后置入培养容器，培养基占培养容器体积的1/10～7/10，在115～140℃湿热灭菌30分钟，接入占培养基重量0.5％～1％的中国被毛孢菌种在15～22℃条件下培养3～9天，培养基表面长满菌丝；步骤二：将培养物干燥、粉碎、过筛即得中国被毛孢菌粉。
本发明的另一特点是步骤一中所述的枸杞为鲜果枸杞；
本发明的另一特点是步骤一中所述的枸杞为粉碎干果枸杞；
本发明的另一特点是步骤一中所述的枸杞为枸杞汁；
本发明的另一特点是步骤一中所述的乳为牛乳；
本发明的另一特点是步骤一中所述的乳为羊乳；
本发明的另一特点是步骤一中所述的乳为马乳。
本发明与现有技术相比具有以下优点：
1、本发明生产方法所得发酵产品具有显著的肾保健效果。经实验证明具有显著的益肾生物学活性，可明显降低大鼠血清肌酐和尿素氮的水平，明显提高肾组织SOD、GST的活性，降低MDA水平，明显改善庆大霉素引起的肾损伤病理改变。
益肾的生物学活性实验方法数据如下：
采用健康纯系雄性Wistar大鼠60只，体重180～220g。分为正常对照组、模型对照组、1号(普通中国被毛孢)组，2号(固体生产中国被毛孢)低、高剂量组，每组12只。每只灌胃给予相应剂量的中国被毛孢1、2号，给药第三天开始，每天给药后6小时，腹腔注射庆大霉素注射液100mg/kg/d，连续7天；模型对照组腹腔注射庆大霉素注射液100mg/kg/d，正常对照组腹腔注射与庆大霉素等体积的生理盐水，连续7天。
实验期间，观察小鼠造模前后进食及饮水、大便、活动、皮毛等状态变化。
血清生化检测：分别在用药前及第8、10天采血，测定血清肌酐，尿素氮。尾静脉取血测定血清肌酐(苦味酸法)，尿素氮(酶法)。
肾匀浆的制备及生化指标测定：第10天采血后，剖腹迅速取出肾脏，置-30℃冰箱速冻，将速冻后的肾脏取出，冰浴下切下肾皮质组织0.5g，加入4.5mLPBS液(pH7.4，0.1mM，加入前置4℃冰箱预冷)，置组织匀浆器中反复研磨，制成10％的肾皮质组织匀浆，按试剂盒方法测定SOD活性及MDA含量。
肾脏病理检查：采血后每组取大鼠4只处死，取2×2×2mm肾皮质组织块于10％福尔马林中固定，石蜡包埋，切片，HE染色，光镜下观察肾脏结构的改变。实验结果见(表一、表二)
表一、对庆大霉素致肾损伤大鼠血清肌酐和尿素氮的影响
注：与正常对照组比较，**P＜0.01；与模型对照组比较，#P＜0.05，##P＜0.01。
结论
1号普通中国被毛孢和2号固体生产中国被毛孢均明显降低大鼠血清肌酐和尿素氮的水平，明显提高肾组织SOD、GST的活性，降低MDA水平，明显改善庆大霉素引起的肾损伤病理改变。
普通中国被毛孢菌和固体生产中国被毛孢对庆大霉素引起的大鼠急性肾损伤具有保护作用，且固体生产中国被毛孢优于普通中国被毛孢菌。
2、本发明中中国被毛孢菌可直接利用枸杞中的碳水化合物，易于高效、快速、大规模工业化生产中国被毛孢菌粉；
3、本发明利用农副产品，不添加任何化工原料，是一种绿色安全的生产方法。
4、本发明利用枸杞中的碳水化合物，更有利于中国被毛孢菌的生长。
具体实施方式
实施例1
步骤一：将90g粉碎的干果枸杞、5g小米、5g绿豆分别破碎，过10目筛后与100g牛乳混合，置入培养容器，培养基占培养容器体积的7/10，在125℃下湿热灭菌30分钟，接入0.5g中国被毛孢菌种；在22℃条件下培养3天，即可在培养基表面长满白色菌丝；
步骤二：取出培养物置入干燥箱，烘干，粉碎，过120目筛即得40g中国被毛孢菌粉。
实施例2
步骤一：将20g枸杞汁、40g小麦、40g豌豆分别破碎，过10目筛后与100g羊乳混合，置入培养容器，培养基占培养容器体积的1/10，在140℃下湿热灭菌30分钟，接入1g中国被毛孢菌种；在15℃条件下培养9天，培养基表面长满菌丝；
步骤二：取出培养物置入干燥箱，烘干，粉碎，过120目筛，即得43g中国被毛孢菌粉。
实施例3
步骤一：将59g鲜果枸杞、1g大米、40g豌豆分别破碎，过10目筛后与100g马乳混合，置入培养容器，培养基占培养容器体积的3/10，在130℃下湿热灭菌30分钟，接入0.8g中国被毛孢菌种；在18℃条件下培养8天，即可在培养基表面长满白色菌丝；
步骤二：取出培养物置入干燥箱，烘干，粉碎，过120目筛，即得35g中国被毛孢菌粉。
实施例4
步骤一：将30g枸杞汁，40g青稞、30g黄豆分别破碎，过10目筛后与100g乳液混合，置入培养容器，培养基占培养容器体积的5/10，在125℃下湿热灭菌30分钟，接入0.7g中国被毛孢菌种；在17℃条件下培养5天，培养基表面长满菌丝；
步骤二：取出培养物置入干燥箱，烘干，粉碎，过120目筛，即得43g中国被毛孢菌粉。
实施例5
步骤一：将30g粉碎的干果枸杞、30g小米、40g黄豆分别破碎，过10目筛后与100g牛乳混合，置入培养容器，培养基占培养容器体积的4/10，在121℃下湿热灭菌30分钟，接入0.9g中国被毛孢菌种；在20℃条件下培养6天，即可在培养基表面长满白色菌丝；
步骤二：取出培养物置入干燥箱，烘干，粉碎，过120目筛，即得45g中国被毛孢菌粉。
实施例6
步骤一：将48g鲜果枸杞、40g大米、12g绿豆分别破碎，过10目筛后与100g乳液混合，置入培养容器，培养基占培养容器体积的6/10，在125℃下湿热灭菌30分钟，接入0.6g中国被毛孢菌种；在16℃条件下培养7天，培养基表面长满菌丝；
步骤二：取出培养物置入干燥箱，烘干，粉碎，过120目筛，即得44g中国被毛孢菌粉。
Claims (7)
1.一种固体生产中国被毛孢的方法，其特征在于包括如下步骤：
步骤一：将枸杞20％～90％、谷类1％～40％、豆类5％～40％混合，加同等质量的乳，按重量百分比配制后置入培养容器，培养基占培养容器体积的1/10～7/10，在115～140℃湿热灭菌30分钟，置入超净工作台中，至室温，接入占培养基重量0.5％～1％的中国被毛孢菌种；在15～22℃条件下培养3～9天，培养基表面长满菌丝；
步骤二：将培养物干燥、粉碎、过筛即得中国被毛孢菌粉。
2.如权利要求1所述的一种固体生产中国被毛孢的方法，其特征在于步骤一中所述的枸杞为鲜果枸杞。
3.如权利要求1所述的一种固体生产中国被毛孢的方法，其特征在于步骤一中所述的枸杞为粉碎的干果枸杞。
4.如权利要求1所述的一种固体生产中国被毛孢的方法，其特征在于步骤一中所述的枸杞为枸杞汁。
5.如权利要求1所述的一种固体生产中国被毛孢的方法，其特征在于步骤一中所述的乳为牛乳。
6.如权利要求1所述的一种固体生产中国被毛孢的方法，其特征在于步骤一中所述的乳为羊乳。
7.如权利要求1所述的一种固体生产中国被毛孢的方法，其特征在于步骤一中所述的乳为马乳。
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Legal Events
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Application publication date: 20140101 Assignee: Qinghai Jiushi worm grass biotechnology Co., Ltd. Assignor: Tu Feng Contract record no.: 2015630000008 Denomination of invention: A kind of method of solids manufacture China pilose spore Granted publication date: 20150513 License type: Exclusive License Record date: 20150915 |
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| LICC | Enforcement, change and cancellation of record of contracts on the licence for exploitation of a patent or utility model | ||
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Effective date of registration: 20170927 Address after: 810003 Qinghai Xining biological science and Technology Industrial Park, No. four, No. 26, No. 4 building, Qinghai long Cordyceps biological science and Technology Co., Ltd. Patentee after: Qinghai Jiushi worm grass biotechnology Co., Ltd. Address before: 810003 Qinghai Xining economic and Technological Development Zone biological science and Technology Industrial Park, 4 road 26 Qinghai long Cordyceps biological science and Technology Co., Ltd. Patentee before: Tu Feng |
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| TR01 | Transfer of patent right |