CN103467430A - 一种从葡萄籽中提取原花青素的新方法 - Google Patents
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Abstract
本发明涉及一种从葡萄籽中提取原花青素的新方法,其处理步骤包括:超声波辅助萃取→压榨法处理→酶解→大孔树脂纯化。使用该方法制得的原花青素收率高于80%,纯度高于96%。本发明将超声波辅助提取与压榨法、酶解相结合,不仅能够较为完全的提取葡萄籽中的原花青素,保证了葡萄籽较高的利用率,而且还能够保证提取的原花青素具有较高的纯度。本发明具有反应条件温和、溶剂用量少、提取温度低、成本低廉等优点,有利于节能环保,为葡萄籽中原花青素的提取工艺提供了一种新的思路。
Description
技术领域
本发明属于生物技术天然活性物质提取领域,具体涉及一种从葡萄籽中提取原花青素的新方法。
背景技术
原花青素Proanthocyanidins,简称PC,是植物王国中广泛存在的一类多酚化合物的总称。起初统归于缩合鞣质或黄烷醇类,随着分离鉴定技术的提高和对此类物质的深入研究与认识。现已成为独树一帜的大类物质并成为原花青素。具有抗氧化、抗衰老、抗肿瘤、抗辐射、防止血小板凝结、增强血管活性等多种生物活性和药理作用。葡萄籽中原花青素含量可达5%~8%,并且目前葡萄籽提取物已被我国卫生部批准为保健品原料。我国的葡萄资源丰富,每年酿制葡萄酒后的下脚料葡萄籽月产5000t左右,而且最近几年还在大量增加葡萄的栽培面积,这为提取葡萄籽中的原花青素提供了丰富的原料。
目前关于葡萄籽提取工艺方面的专利和文献较多,主要有溶剂提取、索氏提取、超临界CO2萃取等,这些提取法均存在诸多不足:索氏提取,提取时间长,而且很难放大;溶剂浸提存在提取时间长、温度高、严重影响原花青素产品的纯度;超临界CO2萃取成本高、得率偏低而无法批量生产。
发明内容
本发明的目的是针对现有技术的不足,提供一种从葡萄籽中提取原花青素的新方法,该方法具有工艺简单、溶剂用量少、反应条件温和、对环境友好的优点,易于实现工业化生产。
本发明包括以下步骤:
a.取葡萄籽,加15~20倍重量的50~70%的乙醇,放入超声波装置中萃取40~60min,超声波功率为550~650W,温度为60~80℃;
b.将萃取后的葡萄籽连同提取溶剂一起,趁热压榨取汁,压榨压力为20~25MPa,待榨汁完全后,所得提取液和残渣备用;
c.向所得药渣中加入10倍的50~70%的乙醇,调节PH值为4.0~5.0,向其中加入0.3~0.5%的纤维素酶,于40~50℃下酶解50~70min,经离心,取上清液;
d.将步骤b和c所得的提取液和上清液合并,加50%的氢氧化钠调节PH为7,过径高比为1:12的预处理过的大孔吸附树脂柱,先用蒸馏水淋洗,至洗出液澄明,然后用50~70%的乙醇洗脱,收集洗脱液,减压浓缩乙醇洗脱液得产物,干燥得原花青素。
步骤c所述的离心的转速为4000r/min。
步骤d所述的预处理方法为大孔吸附树脂湿法装柱,先用5%的氢氧化钠溶液清洗,后用蒸馏水洗至中性,再改用5%的盐酸清洗,后用蒸馏水洗至中性,备用。
步骤d所述的大孔吸附树脂的型号为NKA-9、AB-8、D-101。
本发明将超声波辅助提取与压榨法、酶解相结合,充分利用超声振动的空穴作用与压榨法的常温操作和酶解的破壁作用,保护了原花青素的结构,提高了原花青素的提取率,再经大孔树脂的分离纯化得到天然的葡萄籽原花青素产品。本发明保证了原花青素的充分提取,并降低了生产过程中的能源消耗,可操作强,具有显著的经济效益,适合工业化生产。
下面将结合具体实施方式进一步说明本发明,但本发明要求保护的范围并不局限于下列实施方式。
具体实施方式:
实施例1:
取200g葡萄籽,加15倍重量的50%的乙醇,放入超声波装置中萃取60min,超声波功率为650W,温度为60℃;将萃取后的葡萄籽连同提取溶剂一起,趁热压榨取汁,压榨压力为20MPa,待榨汁完全后,向所得药渣中加入10倍的50%的乙醇,调节PH值为4.0,向其中加入0.3%的纤维素酶,于40℃下酶解70min,经离心,转速为4000r/min,取上清液,合并提取液和上清液,加50%的氢氧化钠调节PH为7,过径高比为1:12的预处理过的D-101大孔吸附树脂柱,先用蒸馏水淋洗,至洗出液澄明,然后用50%的乙醇洗脱,收集洗脱液,减压浓缩乙醇洗脱液得产物,干燥得原花青素产品12.86g,纯度为97.6%。
实施例2:
取200g葡萄籽,加18倍重量的70%的乙醇,放入超声波装置中萃取50min,超声波功率为600W,温度为70℃;将萃取后的葡萄籽连同提取溶剂一起,趁热压榨取汁,压榨压力为25MPa,待榨汁完全后,向所得药渣中加入10倍的70%的乙醇,调节PH值为4.5,向其中加入0.4%的纤维素酶,于45℃下酶解60min,经离心,转速为4000r/min,取上清液,合并提取液和上清液,加50%的氢氧化钠调节PH为7,过径高比为1:12的预处理过的NKA-9大孔吸附树脂柱,先用蒸馏水淋洗,至洗出液澄明,然后用60%的乙醇洗脱,收集洗脱液,减压浓缩乙醇洗脱液得产物,干燥得原花青素产品14.69g,纯度为98.3%。
实施例3:
取200g葡萄籽,加20倍重量的60%的乙醇,放入超声波装置中萃取40min,超声波功率为550W,温度为80℃;将萃取后的葡萄籽连同提取溶剂一起,趁热压榨取汁,压榨压力为22MPa,待榨汁完全后,向所得药渣中加入10倍的60%的乙醇,调节PH值为5.0,向其中加入0.5%的纤维素酶,于50℃下酶解50min,经离心,转速为4000r/min,取上清液,合并提取液和上清液,加50%的氢氧化钠调节PH为7,过径高比为1:12的预处理过的AB-8大孔吸附树脂柱,先用蒸馏水淋洗,至洗出液澄明,然后用70%的乙醇洗脱,收集洗脱液,减压浓缩乙醇洗脱液得产物,干燥得原花青素产品13.69g,纯度为96.3%。
Claims (4)
1.一种从葡萄籽中提取原花青素的新方法,其特征在于,包括以下步骤:
a.取葡萄籽,加15~20倍重量的50~70%的乙醇,放入超声波装置中萃取40~60min,超声波功率为550~650W,温度为60~80℃;
b.将萃取后的葡萄籽连同提取溶剂一起,趁热压榨取汁,压榨压力为20~25MPa,待榨汁完全后,所得提取液和残渣备用;
c.向所得药渣中加入10倍的50~70%的乙醇,调节PH值为4.0~5.0,向其中加入0.3~0.5%的纤维素酶,于40~50℃下酶解50~70min,经离心,取上清液;
d.将步骤b和c所得的提取液和上清液合并,加50%的氢氧化钠调节PH为7,过径高比为1:12的预处理过的大孔吸附树脂柱,先用蒸馏水淋洗,至洗出液澄明,然后用50~70%的乙醇洗脱,收集洗脱液,减压浓缩乙醇洗脱液得产物,干燥得原花青素。
2. 根据权利要求1所述的一种从葡萄籽中提取原花青素的新方法,其特征在于,步骤c所述的离心的转速为4000r/min。
3.根据权利要求1所述的一种从葡萄籽中提取原花青素的新方法,其特征在于,步骤d所述的预处理方法为大孔吸附树脂湿法装柱,先用5%的氢氧化钠溶液清洗,后用蒸馏水洗至中性,再改用5%的盐酸清洗,后用蒸馏水洗至中性,备用。
4.根据权利要求1所述的一种从葡萄籽中提取原花青素的新方法,其特征在于,步骤d所述的大孔吸附树脂的型号为NKA-9、AB-8、D-101。
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CN104496957A (zh) * | 2014-12-01 | 2015-04-08 | 成都红柿子科技有限公司 | 一种从葡萄皮中提取原花青素的方法 |
CN104529990A (zh) * | 2015-01-23 | 2015-04-22 | 白心亮 | 一种从葡萄籽中提取原花青素的方法 |
CN105997988A (zh) * | 2016-05-25 | 2016-10-12 | 兰州大学 | 葡萄籽中原花青素的新用途 |
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