CN103435578A

CN103435578A - 一种从穿心莲中提取穿心莲内酯的方法

Info

Publication number: CN103435578A
Application number: CN2013104234225A
Authority: CN
Inventors: 杨存
Original assignee: Nanjing Tongze Agricultural Science and Technology Co Ltd
Current assignee: Nanjing Tongze Agricultural Science and Technology Co Ltd
Priority date: 2013-09-17
Filing date: 2013-09-17
Publication date: 2013-12-11

Abstract

本发明涉及一种从穿心莲中提取穿心莲内酯的方法，具体涉及一种采用植物组织破碎法与酶解相结合提取穿心莲内酯的方法。其处理步骤包括：用植物组织破碎提取法粉碎穿心莲全草；将粉碎后的穿心莲酶解；超声波-微波辅助提取；过滤，石油醚萃取；大孔吸附树脂纯化，减压浓缩、重结晶，得到高纯度的穿心莲内酯。本发明室温破碎、无成分破坏，省时，高效节能，操作简便，有利环保，提取率高，纯度高，适于规模化生产。

Description

一种从穿心莲中提取穿心莲内酯的方法

技术领域

本发明涉及一种从穿心莲中提取穿心莲内酯的方法，尤其涉及一种利用植物组织破碎与酶解相结合提取穿心莲内酯的方法。

背景技术

穿心莲内酯，别名穿心莲乙素，属于双环二萜类化合物，外观为类白色或微黄色长方形结晶，无臭，味苦。难溶于水，溶于甲醇、氯仿、丙酮、乙醚中，存在于穿心莲（又名一见喜、斩蛇草、苦胆草）中，有抗菌、抗病毒作用，可用于治疗肝病、肠道疾病、肾结石等。研究中发现，穿心莲内酯在不同的环境下稳定性有较明显的差异：温度越低，穿心莲内酯的稳定性越好；在碱性条件下不稳定，且随着碱性强度的增加，其不稳定性增强；在PH值为7的条件下，该药并不稳定，其最稳定的PH值为3~5。

提取穿心莲内酯的方法很多，常用的方法有水提法、醇提法、超临界萃取法等。以乙醇回流提取最为常用，但该法的缺点是，提取物中穿心莲内酯的纯度；超临界萃取法设备昂贵，不适宜规模化生产。本发明采用植物组织破碎法与酶解技术相结合，保证了提取液稳定性，提高了穿心莲内酯的浸出率，再加上大孔吸附树脂的纯化作用，得到高收率、高纯度的产品。

发明内容

本发明的目的是提供一种提取高纯度穿心莲内酯的方法，所要解决的技术问题是对现有的技术进行改进。

本发明包括以下步骤：

a.取穿心莲全草，其中加入1~2倍重量比的70~80%的乙醇溶液，用植物组织破碎法粉碎，植物组织破碎提取器转速为2000~4000r/min，提取时间1~2min；

b.向上述提取液中加入8~10倍的70~80%的乙醇，调PH值为4.5~5.5，再加入原料的0.04~0.06%的纤维素酶，控温在45~55℃，搅拌，酶解时间为2~3h；

c.将酶转化后的物料置于超声波-微波提取器中，超声波600W（常开），微波功率为200~300W，提取时间为10~20min；

d.将步骤c中的萃取液离心，取出上清液，加入石油醚萃取，去除叶绿素等脂溶性杂质，浓缩；

e.将步骤d中的浓缩物用3倍量的80%的乙醇溶解，过预处理的大孔吸附树脂，用70~80%的乙醇溶液洗脱，减压浓缩，再经乙醇重复结晶，得到穿心莲内酯产品。

步骤e中所述的预处理方法为用95%的乙醇浸泡24h，再用蒸馏水洗涤至无醇味，在用5%的盐酸浸泡2h，蒸馏水洗至中性，改用5%的氢氧化钠浸泡2h，蒸馏水洗至中性，备用。

步骤e中所述的大孔吸附树脂的型号为：AB-8、D-101、DA201-A。

本发明采用植物组织破碎法，通过闪式提取器的巧妙设计，在适当溶剂存在下，将物料高速粉碎至适当粒度，同时伴有高速搅拌、振动、负压渗透等外力，实现了这3种因素的最佳结合，达到了充分提高提取效率的目的。再结合纤维素酶来破坏植物的细胞壁，使其疏松、膨胀、崩溃，从而增大了有效成分的扩散面积，减小了阻力，提高了有效成分的得率。该方法高效节能、反应条件温和、成本低、提取率高等优点，适合工业化生产。

下面将结合具体实施方式进一步说明本发明，但本发明要求保护的范围并不局限于下列实施方式。

具体实施方式：

实施例1：

取穿心莲全草，其中加入1倍重量比的70%的乙醇溶液，用植物组织破碎法粉碎，植物组织破碎提取器转速为4000r/min，提取时间2min；向上述提取液中加入8倍的70%的乙醇，调PH值为4.5，再加入原料的0.04%的纤维素酶，控温在45℃，搅拌，酶解时间为2h；将酶转化后的物料置于超声波-微波提取器中，超声波600W（常开），微波功率为200W，提取时间为10min，将萃取液离心，取出上清液，加入石油醚萃取，去除叶绿素等脂溶性杂质，浓缩，向浓缩物中加入3倍量的80%的乙醇溶解，过预处理的AB-8大孔吸附树脂，用70%的乙醇溶液洗脱，减压浓缩，再经乙醇重复结晶2次，得到穿心莲内酯产品，经HPLC检测（紫外光谱波长223nm），纯度为96.5%。

实施例2：

取穿心莲全草，其中加入2倍重量比的80%的乙醇溶液，用植物组织破碎法粉碎，植物组织破碎提取器转速为3000r/min，提取时间1.5min；向上述提取液中加入10倍的80%的乙醇，调PH值为5.0，再加入原料的0.05%的纤维素酶，控温在50℃，搅拌，酶解时间为2.5h；将酶转化后的物料置于超声波-微波提取器中，超声波600W（常开），微波功率为300W，提取时间为15min，将萃取液离心，取出上清液，加入石油醚萃取，去除叶绿素等脂溶性杂质，浓缩，向浓缩物中加入3倍量的80%的乙醇溶解，过预处理的D-101大孔吸附树脂，用80%的乙醇溶液洗脱，减压浓缩，再经乙醇重复结晶2次，得到穿心莲内酯产品，经HPLC检测（紫外光谱波长223nm），纯度为99.5%。

实施例3：

取穿心莲全草，其中加入1.5倍重量比的75%的乙醇溶液，用植物组织破碎法粉碎，植物组织破碎提取器转速为2000r/min，提取时间1min；向上述提取液中加入9倍的75%的乙醇，调PH值为5.5，再加入原料的0.06%的纤维素酶，控温在55℃，搅拌，酶解时间为3h；将酶转化后的物料置于超声波-微波提取器中，超声波600W（常开），微波功率为250W，提取时间为20min，将萃取液离心，取出上清液，加入石油醚萃取，去除叶绿素等脂溶性杂质，浓缩，向浓缩物中加入3倍量的80%的乙醇溶解，过预处理的DA201-A大孔吸附树脂，用75%的乙醇溶液洗脱，减压浓缩，再经乙醇重复结晶2次，得到穿心莲内酯产品，经HPLC检测（紫外光谱波长223nm），纯度为98.1%。

Claims

1.一种从穿心莲中提取穿心莲内酯的方法，其特征在于，包括以下步骤：

2.根据权利要求1所述的一种从穿心莲中提取穿心莲内酯的方法，其特征在于，步骤d中所述的预处理方法为用95%的乙醇浸泡24h，再用蒸馏水洗涤至无醇味，在用5%的盐酸浸泡2h，蒸馏水洗至中性，改用5%的氢氧化钠浸泡2h，蒸馏水洗至中性，备用。

3.根据权利要求1所述的一种从穿心莲中提取穿心莲内酯的方法，其特征在于，步骤d中所述的大孔吸附树脂的型号为：AB-8、D-101、DA201-A。