CN103463618A - 重组灵芝免疫调节蛋白在制备治疗局灶性脑缺血药物中的应用 - Google Patents

重组灵芝免疫调节蛋白在制备治疗局灶性脑缺血药物中的应用 Download PDF

Info

Publication number
CN103463618A
CN103463618A CN2013104022594A CN201310402259A CN103463618A CN 103463618 A CN103463618 A CN 103463618A CN 2013104022594 A CN2013104022594 A CN 2013104022594A CN 201310402259 A CN201310402259 A CN 201310402259A CN 103463618 A CN103463618 A CN 103463618A
Authority
CN
China
Prior art keywords
rlz
cerebral ischemia
ganoderma lucidum
application
group
Prior art date
Legal status (The legal status is an assumption and is not a legal conclusion. Google has not performed a legal analysis and makes no representation as to the accuracy of the status listed.)
Granted
Application number
CN2013104022594A
Other languages
English (en)
Other versions
CN103463618B (zh
Inventor
孙非
梁重阳
张喜田
Current Assignee (The listed assignees may be inaccurate. Google has not performed a legal analysis and makes no representation or warranty as to the accuracy of the list.)
Individual
Original Assignee
Individual
Priority date (The priority date is an assumption and is not a legal conclusion. Google has not performed a legal analysis and makes no representation as to the accuracy of the date listed.)
Filing date
Publication date
Application filed by Individual filed Critical Individual
Priority to CN201310402259.4A priority Critical patent/CN103463618B/zh
Publication of CN103463618A publication Critical patent/CN103463618A/zh
Priority to PCT/CN2014/079816 priority patent/WO2015032233A1/zh
Priority to EP14843115.8A priority patent/EP3028712B1/en
Priority to US14/912,914 priority patent/US20160199439A1/en
Application granted granted Critical
Publication of CN103463618B publication Critical patent/CN103463618B/zh
Expired - Fee Related legal-status Critical Current
Anticipated expiration legal-status Critical

Links

Images

Classifications

    • A—HUMAN NECESSITIES
    • A61—MEDICAL OR VETERINARY SCIENCE; HYGIENE
    • A61K—PREPARATIONS FOR MEDICAL, DENTAL OR TOILETRY PURPOSES
    • A61K38/00—Medicinal preparations containing peptides
    • A61K38/16—Peptides having more than 20 amino acids; Gastrins; Somatostatins; Melanotropins; Derivatives thereof
    • A61K38/168—Peptides having more than 20 amino acids; Gastrins; Somatostatins; Melanotropins; Derivatives thereof from plants
    • A—HUMAN NECESSITIES
    • A61—MEDICAL OR VETERINARY SCIENCE; HYGIENE
    • A61P—SPECIFIC THERAPEUTIC ACTIVITY OF CHEMICAL COMPOUNDS OR MEDICINAL PREPARATIONS
    • A61P25/00—Drugs for disorders of the nervous system
    • A—HUMAN NECESSITIES
    • A61—MEDICAL OR VETERINARY SCIENCE; HYGIENE
    • A61P—SPECIFIC THERAPEUTIC ACTIVITY OF CHEMICAL COMPOUNDS OR MEDICINAL PREPARATIONS
    • A61P29/00—Non-central analgesic, antipyretic or antiinflammatory agents, e.g. antirheumatic agents; Non-steroidal antiinflammatory drugs [NSAID]
    • A—HUMAN NECESSITIES
    • A61—MEDICAL OR VETERINARY SCIENCE; HYGIENE
    • A61P—SPECIFIC THERAPEUTIC ACTIVITY OF CHEMICAL COMPOUNDS OR MEDICINAL PREPARATIONS
    • A61P9/00—Drugs for disorders of the cardiovascular system
    • A61P9/10—Drugs for disorders of the cardiovascular system for treating ischaemic or atherosclerotic diseases, e.g. antianginal drugs, coronary vasodilators, drugs for myocardial infarction, retinopathy, cerebrovascula insufficiency, renal arteriosclerosis

Landscapes

  • Health & Medical Sciences (AREA)
  • Life Sciences & Earth Sciences (AREA)
  • Chemical & Material Sciences (AREA)
  • Animal Behavior & Ethology (AREA)
  • General Health & Medical Sciences (AREA)
  • Pharmacology & Pharmacy (AREA)
  • Public Health (AREA)
  • Bioinformatics & Cheminformatics (AREA)
  • Medicinal Chemistry (AREA)
  • Veterinary Medicine (AREA)
  • Engineering & Computer Science (AREA)
  • Chemical Kinetics & Catalysis (AREA)
  • General Chemical & Material Sciences (AREA)
  • Nuclear Medicine, Radiotherapy & Molecular Imaging (AREA)
  • Organic Chemistry (AREA)
  • Botany (AREA)
  • Gastroenterology & Hepatology (AREA)
  • Epidemiology (AREA)
  • Proteomics, Peptides & Aminoacids (AREA)
  • Immunology (AREA)
  • Pain & Pain Management (AREA)
  • Biomedical Technology (AREA)
  • Neurology (AREA)
  • Neurosurgery (AREA)
  • Urology & Nephrology (AREA)
  • Rheumatology (AREA)
  • Vascular Medicine (AREA)
  • Cardiology (AREA)
  • Heart & Thoracic Surgery (AREA)
  • Medicines That Contain Protein Lipid Enzymes And Other Medicines (AREA)
  • Medicines Containing Material From Animals Or Micro-Organisms (AREA)

Abstract

本发明涉及毕赤酵母（Pichiapastoris）所表达的重组灵芝免疫调节蛋白（rLZ-8）在制备治疗局灶性脑缺血药物中的应用。rLZ-8能够治疗神经功能损伤，降低脑损伤引起的神经功能评分，减少ED-1阳性细胞数，从而降低炎性反应，并可抑制细胞凋亡。

Description

重组灵芝免疫调节蛋白在制备治疗局灶性脑缺血药物中的应用
技术领域
本发明属于生物制药领域，涉及使用毕赤酵母（Pichia pastoris）表达的重组灵芝免疫调节蛋白（rLZ-8）在制备治疗局灶性脑缺血药物中的应用。
背景技术
灵芝是中医药学中一种珍贵的药用真菌，属担子菌纲多孔菌目灵芝科。灵芝免疫调节蛋白首次由Kino等从灵芝子实体提取物中分离纯化得到的真菌免疫调节蛋白，由110个氨基酸所组成，N端丝氨酸乙酰化，蛋白分子质量为12.4kD，并命名为LZ-8。很多研究表明，LZ-8具有促进细胞有丝分裂和免疫调节的作用等多种活性。重组灵芝免疫调节蛋白（Recombinant Immunoregulatory Protein of Ganoderma Lucidium，rLZ-8）是经由rLZ-8真核表达载体PichiaPinkTM菌株，筛选出稳定高效分泌表达的工程菌株中提取，并验证rLZ-8具有与LZ-8相同的免疫学活性与生物活性。
脑缺血是脑血管意外的一种，脑血管意外又称脑卒中、中风，是中老年人的常见病、多发病，严重威胁着人类的健康与生活。近些年来，随着科学技术的不断发展，研究学者对脑缺血病发病机制、脑组织细胞损伤级联反应等的深入研究，发现可通过抑制细胞凋亡、降低炎症反应与自由基等多种途径来缓解脑组织损伤。
本发明的重组灵芝免疫调节蛋白不仅可改善脑缺血损伤引起的行为功能障碍，而且可通过降低炎症反应、抑制细胞凋亡缓解脑组织损伤，对应用重组灵芝免疫调节蛋白研制治疗脑缺血损伤药物有一定的积极作用。
发明内容
本发明涉及重组灵芝免疫调节蛋白rLZ-8在制备治疗局灶性脑缺血药物中的应用，通过一系列的实验手段和结果表明rLZ-8对大鼠局灶性脑缺血具有显著的治疗作用，具体发明内容如下：
本发明以大鼠作为研究对象，采用改良的Zea Longa法制备大鼠局灶性脑缺血模型，设计了包括阴性对照组（假手术组），阳性药对照组（单唾液酸巳己糖神经节苷脂钠注射液（GM-1）），模型组， rLZ-8高剂量组（70μg·kg-1）、rLZ-8中剂量组（35μg·kg -1）、rLZ-8低剂量组（17.5μg·kg -1）在内的6个实验组。在给药程序方面设计为：腹腔注射，每天给药2次，假手术组与模型组注射等体积生理盐水，连续给药7天。首先，考察了rLZ-8对神经功能损伤的治疗作用，按改良的NSS评分标准对其进行评分（16分制），各给药组及模型组动物在造模后（当日，术后约5h）均出现不同程度神经功能障碍，rLZ-8高、低剂量组评分效果显著（p<0.01），说明rLZ-8可降低神经功能评分，改善神经功能。有力说明了，rLZ-8对局灶性脑缺血的治疗作用；通过HE染色实验，假手术组脑组织神经元及胶质细胞数量、形态分布正常，细胞膜完整，胞浆均匀，细胞核位于中央，染色质分布较均匀；模型组脑组织稀疏，可见大量坏死神经元，细胞结构消失，胞核固缩深染，细胞坏死崩解，细胞间隙增大，坏死面积较大；rLZ-8高剂量组动物脑组织较模型组有不同程度的改善，表现为胞核固缩、溶解等病理改变较轻，坏死面积较小。采用PV-6000二步法免疫组化检测试剂对实验大鼠进行ED-1阳性细胞表达的检测，结果表明与模型组比较，rLZ-8高剂量组ED-1阳性细胞数明显减少，可降低脑缺血损伤引起的炎性反应。采用TUNEL试剂盒检测细胞凋亡，按照试剂盒说明书指导步骤进行试验，实验结果表明rLZ-8剂量组凋亡细胞数明显低于模型组，并且随着rLZ-8浓度的增加，细胞凋亡数逐渐减少。进一步说明了，rLZ-8对局灶性脑缺血的治疗作用。
经过上述重组灵芝免疫调节蛋白rLZ-8在制备治疗局灶性脑缺血药物中的应用的一系列实验结果表明， rLZ-8能够治疗和缓解实验大鼠的神经损伤和生存状态，抑制脑组织细胞凋亡而治疗脑缺血损伤。
说明书附图说明
图1  各组大鼠体重变化
其中，S为假手术组，M为模型组，GM-1为阳性药对照组，H为rLZ-8高剂量组，Z为rLZ-8中剂量组，L为rLZ-8低剂量组
图2  各组大鼠脑组织形态学观察（HE染色，40×）
其中，A为假手术组，B为模型组，C为GM-1组，D为rLZ-8高剂量组，E为rLZ-8中剂量组，F为rLZ-8低剂量组
图3  造模8天后各组ED-1阳性细胞（40×）
其中，A为假手术组，B为模型组，C为GM-1组，D为rLZ-8高剂量组，E为rLZ-8中剂量组，F为rLZ-8低剂量组
图4  造模8天后各组凋亡细胞（40×）
其中，A为假手术组，B为模型组，C为GM-1组，D为rLZ-8高剂量组，E为rLZ-8中剂量组，F为rLZ-8低剂量组
具体实施方法
实施例 1：rLZ-8对神经功能损伤的治疗作用
1. 实验材料
大鼠，体重250-300g，雌雄各半，由吉林大学实验动物中心提供。单唾液酸巳己糖神经节苷脂钠注射液（GM-1），北京四环制药有限公司，手术器械。
2. 实验方法
采用改良的Zea Longa法制备大鼠局灶性脑缺血模型，术后待大鼠完全清醒后，每天按改良的NSS评分标准对其进行评分（16分制）。实验设假手术组，模型组，阳性药对照组，rLZ-8高剂量组（70μg·kg-1）、rLZ-8中剂量组（35μg·kg -1）、rLZ-8低剂量组（17.5μg·kg -1）。腹腔注射，每天给药2次，假手术组与模型组注射等体积生理盐水，连续给药7天。阳性对照药为单唾液酸巳己糖神经节苷脂钠注射液（GM-1）。
3. 实验结果
表1显示，各给药组及模型组动物在造模后（当日，术后约5h）均出现不同程度神经功能障碍，以模型组神经功能评分最高，rLZ-8高、低剂量组评分可明显改善（p<0.01），说明rLZ-8可降低神经功能评分，改善神经功能。
表1 各组大鼠NSS评分结果（x ± s，n=12）
组 别 第0天 第1天 第2天 第3天 第4天 第5天 第6天 第7天
Sham 0 0 0 0 0 0 0 0
M 6.75±1.69 4.75±1.42 3.92±0.67 3.67±0.78 3.25±0.72 3.00±0.74 2.83±0.94 2.75±0.87
GM-1 4.75±1.30▲▲ 4.33±1.30 3.92±1.38 3.58±1.24 2.75±1.09 2.50±1.00 2.58±1.08 2.41±1.00
rLZ-H 4.17±1.67▲▲ 4.00±2.00 3.67±1.78 3.17±1.53 2.58±1.11 2.50±1.09 2.25±1.06 2.17±0.94
rLZ-M 6.75±2.20 4.67±1.30 4.00±0.85 3.58±1.00 3.17±0.90 3.00±0.85 2.83±0.83 2.58±0.90
rLZ-L 4.25±1.09▲▲ 4.00±0.95 3.75±0.75 3.33±0.89 2.83±1.00 2.33±0.89 2.25±0.97 2.17±0.94
注：各给药组及模型组与假手术组比较有显著性差异p<0.01；与模型组比较， ▲ p<0.05， ▲▲ p<0.01；
实施例 2：rLZ-8对大鼠体重的影响
1. 实验方法
造模前，对大鼠进行称重，采用改良的Zea Longa法制备大鼠局灶性脑缺血模型，术后第1天称重，连续给药7天后，称重。
2. 实验结果
    表2和图1显示，造模前，各组大鼠体重无明显差异，造模后，各组大鼠体重明显降低，给药7天后，rLZ-8高剂量组大鼠体重有所增加，表明rLZ-8可降低脑缺血引起的损伤。
 
表2   各组大鼠体重变化（x± s）
组 别 造模0天 造模第1天 造模第8天
Sham 268.33±13.87 267.17±13.73 295.00±24.22
M 261.50±16.57 235.67±18.97** 230.17±26.49**
GM-1 266.17±21.21 246.17±21.99 251.17±40.31*
rLZ-H 261.67±16.23 245.00±29.17 250.50±34.23*
rLZ-M 262.50±19.64 234.50±21.49* 229.67±38.85**
rLZ-L 265.17±31.53 241.83±36.97 237.67±38.10*
注：与假手术组比较：*p<0.05，**p<0.01
实施例 3：HE染色实验
1. 实验方法
灌注固定：大鼠以水合氯醛麻醉后仰卧位固定，开胸暴露心脏，将灌注针经左心室尖部插入升主动脉，先用生理盐水快速灌注，同时剪开右心耳，止血钳夹腹主动脉，当流出液不见血色时，快速灌注固定液，身体变硬时停止灌注，断头取出脑组织。利用大鼠脑切片模具，制备冠状脑切片，福尔马林固定，选择视交叉水平脑切片（第3片），常规石蜡包埋，切片。
HE染色：（1）二甲苯Ⅰ、二甲苯Ⅱ脱蜡，各15min；（2）无水乙醇Ⅰ、无水乙醇Ⅱ、95%乙醇、90%乙醇、85%乙醇水化，各3min，蒸馏水，1min；（3）苏木素染色，5~10min；（4）流水吸取苏木素，1min；（5）1%盐酸-乙醇分化，1~3s；（6）返蓝，流水洗1~3min；（7）伊红染色，3~5min；（8）蒸馏水洗，1~3min；（9）脱水、透明，中性树胶封片；（10）光学显微镜下初步观察病理切片。
2. 实验结果
    由图2可见，假手术组脑组织神经元及胶质细胞数量、形态分布正常，细胞膜完整，胞浆均匀，细胞核位于中央，染色质分布较均匀；模型组脑组织稀疏，可见大量坏死神经元，细胞结构消失，胞核固缩深染，细胞坏死崩解，细胞间隙增大，坏死面积较大；rLZ-8高剂量组动物脑组织较模型组有不同程度的改善，表现为胞核固缩、溶解等病理改变较轻，坏死面积较小。
实施例 4：rLZ-8可降低炎性反应
1. 实验试剂
rLZ-8分别设高、中、低三个剂量组，用生理盐水配制成浓度为70μg·ml-1，35μg·ml-1，17.5μg·ml-1。ED-1抗体（武汉博士德生物工程有限公司），PV-6000二步法免疫组化检测试剂（北京中杉金桥生物技术有限公司）。
2. 实验分组
实验设假手术组，模型组，阳性药对照组，rLZ-8高剂量组（70μg·kg -1）、rLZ-8中剂量组（35μg·kg -1）、rLZ-8低剂量组（17.5μg·kg -1）。
3. 实验方法
常规石蜡包埋、切片后，采用免疫组织化学染色的方法检测ED-1阳性细胞的表达。（1）烤片：脑组织石蜡切片置于60℃烤箱中30~60min，自然凉；（2）脱蜡：脑组织切片于二甲苯Ⅰ、二甲苯Ⅱ各15min；（3）水化：脑组织切片于无水乙醇Ⅰ、无水乙醇Ⅱ、90%乙醇、70%乙醇、蒸馏水中各2min；（4）预处理：根据所应用的一抗的特殊要求，对组织切片进行预处理。0.01M枸橼酸盐缓冲液（pH6.0）热修复抗原；（5）3%H2O2去离子水孵育10min，以阻断内源性过氧化物酶，PBS清洗3次，每次5min；（6）滴加ED-1抗体，4℃ 过夜，PBS清洗3次，每次5min；（7）滴加通用型IgG抗体-HRP多聚体，室温孵育15min，PBS清洗3次，每次5min；（8）应用DAB溶液显色；（9）蒸馏水冲洗、苏木精复染、脱水、透明，中性树胶封片；（10）光学显微镜下观察。
4. 实验结果
由表3和图3可见，与模型组比较，rLZ-8高剂量组ED-1阳性细胞数明显减少，可降低脑缺血损伤引起的炎性反应。
表3  各组造模8天后ED-1阳性细胞数（x ± s）
组 别 ED-1
Sham 8.73±2.93
M 24.53±4.04**
GM-1 13.87±2.39*▲
rLZ-H 15.27±1.42*▲
rLZ-M 20.00±2.62#**
rLZ-L 19.00±2.31**
与假手术比较 * p<0.05 ， ** p<0.01；与模型组比较 ▲ p<0.05 ；与GM-1组比较 # p<0.05。
 
实施例 5：TUNEL试剂盒检测细胞凋亡
1. 实验试剂
rLZ-8分别设高、中、低三个剂量组，用生理盐水配制成浓度为70μg·ml-1，35μg·ml-1，17.5μg·ml-1，TUNEL试剂盒。
2. 实验分组
实验设假手术组，模型组，阳性药对照组，rLZ-8高剂量组（70μg·ml-1）、rLZ-8中剂量组（35μg·ml-1）、rLZ-8低剂量组（17.5μg·ml-1）。
3. 实验方法
常规石蜡包埋、切片，按TUNEL试剂盒说明书操作。（1）脑组织石蜡切片常规脱蜡、水化；（2）用胰蛋白酶处理，37℃，暗湿盒中15~60min；（3）PBS漂洗2次，每次5min；（4）加50μl TUNEL反应混合液（阴性对照组尽加50μl荧光素标记的dUTP液）于标本上，在37℃暗湿盒中反应，1h；（5）PBS漂洗3次，每次5min；（6）加50μl Converter-POD 于标本上，在37℃暗湿盒中反应，30min；（7）PBS漂洗3次，每次5min；（8）在组织处加50~100μl DAB溶液显色；（9）蒸馏水冲洗、苏木精复染、脱水、透明，中性树胶封片；（10）光学显微镜下观察。
4. 实验结果
由表4和图4可见，rLZ-8剂量组凋亡细胞数明显低于模型组，并且随着rLZ-8浓度的增加，细胞凋亡数逐渐减少。
 
表4   各组造模8天后凋亡细胞数（x ± s）
组 别 TUNEL
Sham 7.87±0.12
M 45.20±3.81**
GM-1 23.10±2.47**▲▲
rLZ-H 18.80±4.08**▲▲
rLZ-M 33.20±2.16**▲▲##
rLZ-L 39.27±4.80**##
注：与假手术比较， ** p<0.01；与模型组比较， ▲▲ p<0.01；与GM-1组比较， ## p<0.01。

Claims (6)

1.重组灵芝免疫调节蛋白在制备治疗局灶性脑缺血药物中的应用。
2.如权利要求1所述的治疗局灶性脑缺血损伤的应用，其特征在于重组灵芝免疫调节蛋白可降低由脑缺血损伤引起的神经功能评分。
3.如权利要求1所述的治疗局灶性脑缺血损伤的应用，其特征在于重组灵芝免疫调节蛋白可减少ED-1阳性细胞数，降低炎性反应，治疗脑缺血损伤。
4.如权利要求1所述的治疗局灶性脑缺血损伤的应用，其特征在于重组灵芝免疫调节蛋白可降低凋亡细胞数，抑制脑组织细胞凋亡。
5.如权利要求1所述的制备治疗局灶性脑缺血药物，其特征在于该药物制剂核心成分是由权利要求1所述的重组灵芝免疫调节蛋白（rLZ-8）和任选的药学可接受的辅剂组成。
6.如权利要求1所述的药物制剂给药途径为口服和非肠道给药，其中，口服包括口服液，片剂，丸剂和胶囊；非肠道给药包括外用药和注射剂。
CN201310402259.4A 2013-09-06 2013-09-06 重组灵芝免疫调节蛋白在制备治疗局灶性脑缺血药物中的应用 Expired - Fee Related CN103463618B (zh)

Priority Applications (4)

Application Number Priority Date Filing Date Title
CN201310402259.4A CN103463618B (zh) 2013-09-06 2013-09-06 重组灵芝免疫调节蛋白在制备治疗局灶性脑缺血药物中的应用
PCT/CN2014/079816 WO2015032233A1 (zh) 2013-09-06 2014-06-13 重组灵芝免疫调节蛋白在制备治疗局灶性脑缺血药物中的应用
EP14843115.8A EP3028712B1 (en) 2013-09-06 2014-06-13 Use of recombinant lingzhi mushroom immunomodulatory protein in preparation of drugs for treating focal cerebral ischemia
US14/912,914 US20160199439A1 (en) 2013-09-06 2014-06-13 Application of recombinant immunoregulatory protein of ganoderma lucidum in preparation of drug for treating focal cerebral ischemia

Applications Claiming Priority (1)

Application Number Priority Date Filing Date Title
CN201310402259.4A CN103463618B (zh) 2013-09-06 2013-09-06 重组灵芝免疫调节蛋白在制备治疗局灶性脑缺血药物中的应用

Publications (2)

Publication Number Publication Date
CN103463618A true CN103463618A (zh) 2013-12-25
CN103463618B CN103463618B (zh) 2014-09-03

Family

ID=49788808

Family Applications (1)

Application Number Title Priority Date Filing Date
CN201310402259.4A Expired - Fee Related CN103463618B (zh) 2013-09-06 2013-09-06 重组灵芝免疫调节蛋白在制备治疗局灶性脑缺血药物中的应用

Country Status (4)

Country Link
US (1) US20160199439A1 (zh)
EP (1) EP3028712B1 (zh)
CN (1) CN103463618B (zh)
WO (1) WO2015032233A1 (zh)

Cited By (3)

* Cited by examiner, † Cited by third party
Publication number Priority date Publication date Assignee Title
WO2015032233A1 (zh) * 2013-09-06 2015-03-12 Zhang Xitian 重组灵芝免疫调节蛋白在制备治疗局灶性脑缺血药物中的应用
WO2016062239A1 (en) * 2014-10-20 2016-04-28 Mycomagic Biotechnology Co., Ltd New use of immunomodulatory protein from ganoderma in promoting neurite outgrowth
CN110354251A (zh) * 2018-04-03 2019-10-22 蘑法生物科技股份有限公司 免疫调节蛋白在减少由细颗粒物质所导致的损伤中的新用途

Citations (9)

* Cited by examiner, † Cited by third party
Publication number Priority date Publication date Assignee Title
WO2002094302A1 (en) * 2001-05-23 2002-11-28 Gil-Ja Jhon Compositions comprising extract of ganoderma lucidum, oleamide and its structural analogue as an effective component for preventing or treating dementia
CN1863912A (zh) * 2003-09-17 2006-11-15 益生生技开发股份有限公司 利用微生物制备的真菌免疫调节蛋白及其用途
TW200726775A (en) * 2006-01-06 2007-07-16 Biosoltech Internat Company Ltd An immunomodulatory protein cloned from ganoderma microsporum
CN101475632A (zh) * 2008-01-03 2009-07-08 孙非 具有抗肿瘤作用的重组灵芝免疫调节蛋白及其药物制剂
CN101612385A (zh) * 2009-05-25 2009-12-30 张喜田 rLZ-8在治疗血小板减少症中的应用及其制剂
CN102274487A (zh) * 2008-01-03 2011-12-14 张喜田 重组灵芝免疫调节蛋白在制备治疗化疗药所致白细胞减少症药物中的应用
TW201306854A (zh) * 2011-08-03 2013-02-16 Jiunn-Liang Ko 開發金針菇免疫調節蛋白及靈芝免疫調節蛋白治療呼吸道融合病毒引起的發炎及降低病毒劑量
CN102949707A (zh) * 2011-08-23 2013-03-06 柯俊良 开发金针菇免疫调节蛋白及灵芝免疫调节蛋白治疗呼吸道融合病毒引起的发炎及降低病毒剂量
CN103417953A (zh) * 2013-08-16 2013-12-04 张喜田 重组灵芝免疫调节蛋白（rLZ-8）在制备治疗黑色素瘤药物中的应用

Family Cites Families (4)

* Cited by examiner, † Cited by third party
Publication number Priority date Publication date Assignee Title
CN101376020B (zh) * 2007-08-29 2013-05-01 益生生技开发股份有限公司 真菌免疫调节蛋白在抑制△5-去饱和酶中的应用
TWI459955B (zh) * 2008-05-16 2014-11-11 Yeastern Biotech Co Ltd 一種活化樹突狀細胞和巨噬細胞的醫藥組合物
CN103463618B (zh) * 2013-09-06 2014-09-03 张喜田 重组灵芝免疫调节蛋白在制备治疗局灶性脑缺血药物中的应用
CN103536901A (zh) * 2013-10-25 2014-01-29 张喜田 重组灵芝免疫调节蛋白在制备治疗帕金森病药物中的应用

Patent Citations (9)

* Cited by examiner, † Cited by third party
Publication number Priority date Publication date Assignee Title
WO2002094302A1 (en) * 2001-05-23 2002-11-28 Gil-Ja Jhon Compositions comprising extract of ganoderma lucidum, oleamide and its structural analogue as an effective component for preventing or treating dementia
CN1863912A (zh) * 2003-09-17 2006-11-15 益生生技开发股份有限公司 利用微生物制备的真菌免疫调节蛋白及其用途
TW200726775A (en) * 2006-01-06 2007-07-16 Biosoltech Internat Company Ltd An immunomodulatory protein cloned from ganoderma microsporum
CN101475632A (zh) * 2008-01-03 2009-07-08 孙非 具有抗肿瘤作用的重组灵芝免疫调节蛋白及其药物制剂
CN102274487A (zh) * 2008-01-03 2011-12-14 张喜田 重组灵芝免疫调节蛋白在制备治疗化疗药所致白细胞减少症药物中的应用
CN101612385A (zh) * 2009-05-25 2009-12-30 张喜田 rLZ-8在治疗血小板减少症中的应用及其制剂
TW201306854A (zh) * 2011-08-03 2013-02-16 Jiunn-Liang Ko 開發金針菇免疫調節蛋白及靈芝免疫調節蛋白治療呼吸道融合病毒引起的發炎及降低病毒劑量
CN102949707A (zh) * 2011-08-23 2013-03-06 柯俊良 开发金针菇免疫调节蛋白及灵芝免疫调节蛋白治疗呼吸道融合病毒引起的发炎及降低病毒剂量
CN103417953A (zh) * 2013-08-16 2013-12-04 张喜田 重组灵芝免疫调节蛋白（rLZ-8）在制备治疗黑色素瘤药物中的应用

Non-Patent Citations (6)

* Cited by examiner, † Cited by third party
Title
KOHSUKE KINO ET AL.: "isolation and characterization of a new immunomodulatory protein, lingz hi-8(lz-8), from ganoderma lucidium", 《THE JOURNAL OF BIOLOGICAL CHEMISTRY》, vol. 264, no. 1, 31 December 1989 (1989-12-31), pages 472 - 478 *
TZONG YUAN WU ET AL.: "Evaluation of the Immunoregulatory Activity of rFip-gts Purified from Baculovirus-infected Insect Cells", 《WORLD ACADEMY OF SCIENCE, ENGINEERING AND TECHNOLOGY》, vol. 4, 28 May 2010 (2010-05-28), pages 404 - 406 *
TZYY-RONG JINN ET AL.: "Functional Expression of FIP-gts,a Fungal Immunomodulatory Protein from Ganoderma Tsugae inSf21 Insect Cells", 《BIOSCIENCE BIOTECHNOLOGY》, 7 December 2006 (2006-12-07), pages 1 - 8 *
安敏等: "灵芝免疫调节蛋白LZ-8的制备和晶体分析", 《生物工程学报》, vol. 26, no. 11, 25 November 2010 (2010-11-25), pages 1563 - 1568 *
王爱成等主编: "《灵芝》", 31 January 2002, article "蛋白质、多肽、氨基酸", pages: 59-60 *
郭琦等: "重组灵芝免疫调节蛋白抑制HL60细胞增殖及诱导凋亡的研究", 《中国免疫学杂志》, vol. 26, 31 December 2010 (2010-12-31), pages 520 - 522 *

Cited By (5)

* Cited by examiner, † Cited by third party
Publication number Priority date Publication date Assignee Title
WO2015032233A1 (zh) * 2013-09-06 2015-03-12 Zhang Xitian 重组灵芝免疫调节蛋白在制备治疗局灶性脑缺血药物中的应用
WO2016062239A1 (en) * 2014-10-20 2016-04-28 Mycomagic Biotechnology Co., Ltd New use of immunomodulatory protein from ganoderma in promoting neurite outgrowth
TWI723000B (zh) * 2014-10-20 2021-04-01 蘑法生物科技股份有限公司 靈芝免疫調節蛋白於促進神經突生長之新用途
CN110354251A (zh) * 2018-04-03 2019-10-22 蘑法生物科技股份有限公司 免疫调节蛋白在减少由细颗粒物质所导致的损伤中的新用途
CN110354251B (zh) * 2018-04-03 2024-04-02 蘑法生物科技股份有限公司 免疫调节蛋白在减少由细颗粒物质所导致的损伤中的新用途

Also Published As

Publication number Publication date
WO2015032233A1 (zh) 2015-03-12
EP3028712A4 (en) 2016-06-08
EP3028712B1 (en) 2017-05-31
CN103463618B (zh) 2014-09-03
EP3028712A1 (en) 2016-06-08
US20160199439A1 (en) 2016-07-14

Similar Documents

Publication Publication Date Title
CN110638681B (zh) 一种贻贝抗过敏肽的制备方法及在化妆品中的应用
CN103463618B (zh) 重组灵芝免疫调节蛋白在制备治疗局灶性脑缺血药物中的应用
CN112190593B (zh) 一种抑制trpv1通路的多糖组合物及其制备方法和应用
CN109674823A (zh) 一种蜂蛹提取物及在保护顺铂诱导肾损伤中的应用
Zhao et al. Antidepressant-like effect of Ganoderma lucidum spore polysaccharide-peptide mediated by upregulation of prefrontal cortex brain-derived neurotrophic factor
Li et al. Xiangshao Granules reduce the aggressive behavior and hippocampal injury of premenstrual irritability in rats by regulating JIK/JNK/p38 signal pathway
CN115054566B (zh) 一种抗头皮衰老组合物及其制备方法
CN114767597B (zh) 一种具有舒缓抗炎抗刺激和修护作用的组合物及其制备方法和用途
CN116196333A (zh) 一种负载thc的干细胞源外泌体皮肤稳态剂及其制备方法、应用
CN102988461B (zh) 一种红景天注射液及其制备方法
US12115204B2 (en) Compound preparation for neuranagenesis, and preparation method therefor and use thereof
CN106563110A (zh) 一种治疗带状疱疹后遗神经痛的药物及制备方法
CN105343109A (zh) 环黄芪醇在制备保肝及促进肝损伤修复药物中的应用
DE602004009199T2 (de) Wirkungen von sporoderm-gebrochenen germinationsaktivierten ganoderma-sporen auf die behandlung von rückenmarksverletzungen und die proliferation und/oder differenzierung von neuralen stammzellen in verletztem rückenmark
CN107260780B (zh) 一种治疗风湿性关节炎的中药组合物
CN102600376B (zh) 天麻及天麻提取物在制备治疗外周神经损伤再修复药物中的应用
JP6712273B2 (ja) 肥満主体のためのリンパ排出用組成物
Zhang et al. Effects of ergosterone on lipopolysaccharideinduced acute lung injury and nucleo side-binding oligomerization domain, leucine-rich repeats and pyrin domain containing protein 3 inflammatory signaling pathway in mice
Adanma et al. Histomorphological Effects Of Citrus Aurantifolia (LIME) Leaf Extract On Acetaminophen-Induced Hepatotoxicity In Wistar Rats
Wang et al. Protection of Salvianolate Lyophilized Injection combined with Xueshuantong Injection (Lyophilized) against focal cerebral ischemia/reperfusion injury in rats through suppression of inflammatory response
CN1245965C (zh) 姜黄素在制备治疗肌营养不良疾病药物中的应用
CN105055507A (zh) 一种防治鸡新城疫的中药组合物及其制备方法和应用
CN106924326A (zh) 一种横根费菜提取物及其制备方法和用途
CN112220739A (zh) 一种hpv病毒灭活敷料及其制备方法
CN101194899A (zh) 百秋李醇在制备防治老年性痴呆症的药物中的用途

Legal Events

Date Code Title Description
C06 Publication
PB01 Publication
C10 Entry into substantive examination
SE01 Entry into force of request for substantive examination
C14 Grant of patent or utility model
GR01 Patent grant
CF01 Termination of patent right due to non-payment of annual fee

Granted publication date: 20140903

Termination date: 20190906

CF01 Termination of patent right due to non-payment of annual fee