CN103461007B - 竹黄孢子的保藏方法 - Google Patents
竹黄孢子的保藏方法 Download PDFInfo
- Publication number
- CN103461007B CN103461007B CN201310467772.1A CN201310467772A CN103461007B CN 103461007 B CN103461007 B CN 103461007B CN 201310467772 A CN201310467772 A CN 201310467772A CN 103461007 B CN103461007 B CN 103461007B
- Authority
- CN
- China
- Prior art keywords
- tabasheer
- spore
- spores
- preservation
- rape oil
- Prior art date
- Legal status (The legal status is an assumption and is not a legal conclusion. Google has not performed a legal analysis and makes no representation as to the accuracy of the status listed.)
- Active
Links
Landscapes
- Micro-Organisms Or Cultivation Processes Thereof (AREA)
Abstract
本发明公开了一种竹黄孢子的保藏方法,将竹黄孢子刮取至干净的牛皮纸袋中待处理;将装有竹黄孢子的牛皮纸袋放入4℃冰箱,保存7天后取出,获得干燥的孢子块;用干净的玻璃瓶装入菜油,将装有菜油的玻璃瓶放入蒸锅蒸1小时,取出后自然冷却至室温备用;将得到的干燥孢子块放入处理好的菜油中进行保存;下一年竹黄接种时期,将保存竹黄孢子的菜油倒掉,加入凉开水洗涤孢子块1~2次,然后用凉开水浸泡2小时便可得到竹黄孢子液。本发明既可以使竹黄孢子顺利度过野外的不良环境,有效保证竹黄孢子的活力,又能克服常规菌种保藏方法不适合竹黄孢子保藏的问题,从而为竹黄人工栽培提供种源保障,解决竹黄人工栽培推广中接种体保藏的关键技术问题。
Description
技术领域
本发明涉及生物技术领域,尤其是一种竹黄孢子的保藏方法。
背景技术
竹黄(Shiraia bambusicola)又名天竹花、淡竹花、竹花、赤团子、竹赤团子、竹茧、竹赤斑菌、淡菊花、竹参、竹三七、血三七等,是长在竹子枝条上的一种药用真菌的子座。其主要成分竹红菌素是竹黄中红色色素部分,是多种苝醌(Perylenequinones; PQ)类衍生物的混合物,是一种新型的光敏剂,在我国应用于临床治疗皮肤病、胃病和风湿性关节炎。现代医学研究表明,竹红菌素的药用价值主要体现在抗炎、镇痛、抗菌、抗肿瘤等方面,尤其是近年来的研究已经体现出它在治疗肿瘤等方面的优良特性。我国已经研制的成药有:真菌竹黄胶囊、竹红菌素软膏和竹黄菌颗粒剂,在治疗妇科病、风湿性关节炎和牛皮癣等方面表现出较好的临床疗效。
竹黄的生长季节一般为4月下旬到6月。通常情况下,竹黄子座每年4月底开始出现在寄主竹子上,随后逐渐膨大,在子座膨大过程中,大量的分生孢子产生并被释放出来。
由于竹黄孢子只在自然条件下产生,不能通过实验室培养获得,且自然存活率低。通过实验室常规的甘油保存法,-20℃保存2月后竹黄孢子的萌发率为17%,-20℃保存1年后竹黄孢子的萌发率仅为3%。
竹黄菌在实验条件下很容易被分离出来并获得纯培养,但是至今还未发现该真菌在培养条件下可以产生分生孢子或子囊孢子,甚至在各种诱导条件下也未观察到孢子产生。近年来,竹黄的人工栽培已获得成功(专利受理号:201310056130.2),但是,目前的接种技术还只限于采用竹黄孢子进行接种,人工栽培竹黄的种源只能依靠野外产生的竹黄孢子。因次,竹黄孢子的收集和保藏对于竹黄人工栽培种源生产和扩大栽培具有很大的影响。竹黄人工栽培的扩大和推广亟需找到简单易行、既能保证孢子萌发率,又能常规推广的竹黄孢子保藏方法。
常见的真菌孢子保藏方法有低温干燥保存、石蜡油保存、甘油低温保存等,但这些方法都限于在实验室进行。针对竹黄人工栽培所需孢子接种材料的特点及推广需求,亟需解决竹黄孢子的保藏问题,以确保竹黄人工栽培的种源和扩大推广栽培。
微生物保藏的最终目的是保持菌株的纯度、活性、基因信息的完整性、避免菌株变异和降低退化。适用于真菌的保藏技术 方法主要分为三类:
(1)让真菌连续生长的保藏技术,特点是不断地将菌株移植在新鲜的培养基上,并在合适的条件下生长,随后至于一个低温的环境中,一般是4℃~10℃,这类保藏技术主要包括斜面移植、油管保藏和蒸馏水保藏等方法。
(2)利用干燥环境保藏菌株的休眠体,如分生孢子、厚垣孢子等,干燥选用的基质可以是空气、硅胶、土壤、沙子等。
(3)利用抑制菌株代谢活性的办法达到长期保藏,一般是通过脱水降低细胞内水分或低温冷冻,此过程关键环节是避免和降低冰晶细胞造成的伤害,这类保藏工艺包括冷冻干燥法、低温冻结和液氮保藏法等。
以上方法的保藏效果不仅存在菌株水平上的差异性,同时只适合于实验室菌种保存,尚不能针对竹黄这一真菌种类作为栽培推广过程的接种体保藏工艺技术。
发明内容
本发明的目的是:提供一种竹黄孢子的保藏方法,它能有效缩短输电线路的等效长度,实现在相同融冰电压下对更长距离的输电线路进行融冰操作,以克服现有技术的不足。
本发明是这样实现的:竹黄孢子的保藏方法,包括以下步骤:
(1)竹黄孢子的收集:在竹黄生长中期,用经过消毒处理的工具将竹黄孢子刮取至干净的牛皮纸袋中待处理;
(2)孢子预处理:将装有竹黄孢子的牛皮纸袋放入4℃冰箱,保存7天后取出,获得干燥的孢子块;
(3)菜油预处理:用干净的玻璃瓶装入菜油,将装有菜油的玻璃瓶放入蒸锅蒸1小时,取出后自然冷却至室温备用;
(4)竹黄孢子保存:将步骤(2)所得到的干燥孢子块放入步骤(3)处理好的菜油中进行保存;菜油体积为孢子块体积的5~10倍,存放竹黄孢子块的容器放到避光处常温保存;
(5)取用竹黄孢子:下一年竹黄接种时期,将保存竹黄孢子的菜油倒掉,加入凉开水洗涤孢子块1~2次,然后用凉开水浸泡2小时便可得到竹黄孢子液。
步骤(1)中所述的经过消毒处理的工具是,用质量百分比浓度为75%医用酒精浸泡消毒的镊子或竹签。
由于采用了上述技术方案,与现有技术相比,本发明将收集的竹黄孢子经过简单干燥处理后采用菜油进行保存,1年后孢子萌发率大于40%,结果既可以使竹黄孢子顺利度过野外的不良环境,有效保证竹黄孢子的活力,又能克服常规菌种保藏方法不适合竹黄孢子保藏的问题,从而为竹黄人工栽培提供种源保障,解决竹黄人工栽培推广中接种体保藏的关键技术问题。通过对2012年收集的竹黄孢子进行该方法保存,并于2013年在贵州赤水实施接种实验,已获得竹黄子座,证明了本发明的有效性。
具体实施方式
本发明的实施例: 竹黄孢子的保藏方法,包括以下步骤:
(1)竹黄孢子的收集:在竹黄生长中期,用质量百分比浓度为75%医用酒精浸泡消毒的镊子将竹黄孢子刮取至干净的牛皮纸袋中待处理;
(2)孢子预处理:将装有竹黄孢子的牛皮纸袋放入4℃冰箱,保存7天后取出,获得干燥的孢子块;
(3)菜油预处理:用干净的玻璃瓶装入菜油,将装有菜油的玻璃瓶放入蒸锅蒸1小时,取出后自然冷却至室温备用;
(4)竹黄孢子保存:将步骤(2)所得到的干燥孢子块放入步骤(3)处理好的菜油中进行保存;菜油体积为孢子块体积的5~10倍,存放竹黄孢子块的容器放到避光处常温保存;
(5)取用竹黄孢子:下一年竹黄接种时期,将保存竹黄孢子的菜油倒掉,加入凉开水洗涤孢子块1~2次,然后用凉开水浸泡2小时便可得到竹黄孢子液。
Claims (2)
1.一种竹黄孢子的保藏方法,其特征在于:包括以下步骤:
(1)竹黄孢子的收集:在竹黄生长中期,用经过消毒处理的工具将竹黄孢子刮取至干净的牛皮纸袋中待处理;
(2)孢子预处理:将装有竹黄孢子的牛皮纸袋放入4℃冰箱,保存7天后取出,获得干燥的孢子块;
(3)菜油预处理:用干净的玻璃瓶装入菜油,将装有菜油的玻璃瓶放入蒸锅蒸1小时,取出后自然冷却至室温备用;
(4)竹黄孢子保存:将步骤(2)所得到的干燥孢子块放入步骤(3)处理好的菜油中进行保存;菜油体积为孢子块体积的5~10倍,存放竹黄孢子块的容器放到避光处常温保存;
(5)取用竹黄孢子:下一年竹黄接种时期,将保存竹黄孢子的菜油倒掉,加入凉开水洗涤孢子块1~2次,然后用凉开水浸泡2小时便可得到竹黄孢子液。
2.根据权利要求1所述的竹黄孢子的保藏方法,其特征在于:步骤(1)中所述的经过消毒处理的工具是,用质量百分比浓度为75%医用酒精浸泡消毒的镊子或竹签。
Priority Applications (1)
Application Number | Priority Date | Filing Date | Title |
---|---|---|---|
CN201310467772.1A CN103461007B (zh) | 2013-10-10 | 2013-10-10 | 竹黄孢子的保藏方法 |
Applications Claiming Priority (1)
Application Number | Priority Date | Filing Date | Title |
---|---|---|---|
CN201310467772.1A CN103461007B (zh) | 2013-10-10 | 2013-10-10 | 竹黄孢子的保藏方法 |
Publications (2)
Publication Number | Publication Date |
---|---|
CN103461007A CN103461007A (zh) | 2013-12-25 |
CN103461007B true CN103461007B (zh) | 2015-05-13 |
Family
ID=49786253
Family Applications (1)
Application Number | Title | Priority Date | Filing Date |
---|---|---|---|
CN201310467772.1A Active CN103461007B (zh) | 2013-10-10 | 2013-10-10 | 竹黄孢子的保藏方法 |
Country Status (1)
Country | Link |
---|---|
CN (1) | CN103461007B (zh) |
Families Citing this family (2)
Publication number | Priority date | Publication date | Assignee | Title |
---|---|---|---|---|
CN106947728A (zh) * | 2017-05-22 | 2017-07-14 | 重庆聚立信生物工程有限公司 | 昆虫病原真菌分生孢子收集工艺 |
CN111117891A (zh) * | 2019-12-31 | 2020-05-08 | 广西仙草堂制药有限责任公司 | 一种灵芝孢子的保存和激活方法 |
Citations (4)
Publication number | Priority date | Publication date | Assignee | Title |
---|---|---|---|---|
CN1737109A (zh) * | 2004-08-12 | 2006-02-22 | 三得利株式会社 | 使用新型菌种保藏技术制造多不饱和脂肪酸的方法 |
CN101294138A (zh) * | 2008-06-13 | 2008-10-29 | 东北农业大学 | 一种南瓜白粉病菌的保存方法 |
CN102715613A (zh) * | 2012-06-29 | 2012-10-10 | 浙江农林大学 | 一种含竹黄菌的保健饮料及其制造方法 |
CN103109647A (zh) * | 2013-03-08 | 2013-05-22 | 北京农学院 | 一种采集牛肝菌孢子的方法 |
-
2013
- 2013-10-10 CN CN201310467772.1A patent/CN103461007B/zh active Active
Patent Citations (4)
Publication number | Priority date | Publication date | Assignee | Title |
---|---|---|---|---|
CN1737109A (zh) * | 2004-08-12 | 2006-02-22 | 三得利株式会社 | 使用新型菌种保藏技术制造多不饱和脂肪酸的方法 |
CN101294138A (zh) * | 2008-06-13 | 2008-10-29 | 东北农业大学 | 一种南瓜白粉病菌的保存方法 |
CN102715613A (zh) * | 2012-06-29 | 2012-10-10 | 浙江农林大学 | 一种含竹黄菌的保健饮料及其制造方法 |
CN103109647A (zh) * | 2013-03-08 | 2013-05-22 | 北京农学院 | 一种采集牛肝菌孢子的方法 |
Non-Patent Citations (4)
Title |
---|
不同保存液对堆型艾美耳球虫早熟减毒株子孢子活力的影响;秦建华等;《中国兽医寄生虫病》;19961231;第04卷(第04期);14-16 * |
海藻酸钠包埋保藏对食药用菌种活性的影响;邓百万等;《安徽农业科学》;20051231;第33卷(第03期);418-419 * |
野外药用真菌的菌种分离和保藏;殷培峰等;《滁州学院学报》;20071130;第09卷(第06期);68-71 * |
食用菌菌株的长期保藏方法;吕和平等;《中国食用菌》;20071231;第26卷(第02期);29-30 * |
Also Published As
Publication number | Publication date |
---|---|
CN103461007A (zh) | 2013-12-25 |
Similar Documents
Publication | Publication Date | Title |
---|---|---|
CN103224888B (zh) | 一种小麦白粉病菌菌株的长期保存方法 | |
CN108504594A (zh) | 一株拟无枝菌酸菌及其在制备抗三七根腐病剂中的应用 | |
CN111019838B (zh) | 一株内生真菌及其提取物与用途 | |
CN103461007B (zh) | 竹黄孢子的保藏方法 | |
CN103858676A (zh) | 一种北虫草液体菌种的制备方法 | |
CN110741877A (zh) | 一种利用金针菇无菌子实体进行超低温冷冻保存及复苏的方法 | |
CN104982225B (zh) | 雄性蚕虫草培育工艺及培养蚕虫草母种的方法 | |
CN103766039B (zh) | 一种打破青天葵球茎休眠的方法 | |
CN107858300B (zh) | 针对番茄的防病、促生、品质提升以及抗逆的解淀粉芽胞杆菌2yn11及其应用 | |
CN104450521A (zh) | 一种长期保存蛹虫草菌种的方法 | |
CN105695334B (zh) | 一种新的棘孢木霉及其用途 | |
CN107467075A (zh) | 一种短小芽孢杆菌作为水稻生长促进剂的用途 | |
CN103789210A (zh) | 一种产孢真菌菌种长期保藏的方法 | |
CN105713841A (zh) | 一种尖孢镰孢及其在苦荞麦种子萌发预处理上的应用 | |
CN101884321A (zh) | 一种新疆雪莲细胞系的超低温冷冻保存方法 | |
CN103299907B (zh) | 三叶青种质资源的离体保存及保存后恢复生长的方法 | |
CN101240241B (zh) | 大球盖菇菌种保藏方法 | |
CN113100059B (zh) | 一种金线莲长期离体保存方法 | |
CN108841752A (zh) | 巨大芽孢杆菌bm22及其芽孢液体制剂在防治仙客来黑根病中的应用 | |
CN103881912B (zh) | 一种中国被毛孢的长期保藏方法 | |
CN110894475B (zh) | 一种利用寄主基质分离沉香树皮腐病病原菌的方法 | |
CN104067936B (zh) | 一种促使青天葵球茎多长叶芽的方法 | |
CN105567571B (zh) | 一种白参菌风干子实体菌种分离方法 | |
CN111771450A (zh) | 一种南方红豆杉种子低温保存工艺 | |
CN104663251A (zh) | 一种黑牛肝菌母种长期保藏方法 |
Legal Events
Date | Code | Title | Description |
---|---|---|---|
C06 | Publication | ||
PB01 | Publication | ||
C10 | Entry into substantive examination | ||
SE01 | Entry into force of request for substantive examination | ||
C14 | Grant of patent or utility model | ||
GR01 | Patent grant |