CN103364506A - 一种化橘红有效部位及其制剂的质量控制方法 - Google Patents
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Abstract
本发明公开了一种化橘红有效部位及其制剂的质量控制方法。本发明以含新北美圣草苷、樱桃苷、柚皮苷、野漆树苷、橙皮内酯水合物、7-(2’’-α-鼠李糖基-6’’-(3’’’’-羟基-3’’’’-甲基戊二酰)-β- D -葡萄糖基)柚皮素、柚皮素的混合甲醇溶液为对照品；以化橘红有效部位或其制剂的甲醇提取液为供试品；在特定的色谱条件下，采用高效液相色谱指纹图谱分析法，建立对照品的高效液相色谱、供试品的高效液相色谱指纹图谱和对照指纹图谱，通过供试品是否含有与对照品相对应的色谱峰，以及与对照指纹图谱的相似度评价结果，判断药品是否合格；采用一测多评法同时测定供试品中多种有效成分的含量，根据有效成分含量的高低，评价药品优劣。本发明可实现科学、全面、快速准确监控生产中有效部位及其制剂的质量；控制生产工艺的稳定性，保证其质量的稳定、均一、可控；还具有方法先进、稳定性和重现性好、可操作性强等优点。
Description
技术领域
本发明属于中药分析技术领域。具体涉及一种化橘红有效部位及其制剂有效成分的质量控制方法。
背景技术
化橘红是岭南特色中药，收载于2010年版《中华人民共和国药典》(一部)。化橘红为芸香科植物柚 Citrus grandis (L.) Osbeck及其栽培变种化州柚Citrus grandis ‘Tomentosa’的干燥幼果或干燥外层果皮。具有理气宽中、燥湿化痰的功效，用于治疗咳嗽痰多，食积伤酒，呕恶痞闷等症。
中国植物志记载，化州柚为柚的栽培变种。现今市场上的化橘红药材多以柚来源为主。据文献报道，化橘红活性成分分为两大类：以柚皮苷为代表的黄酮类物质及香豆素类物质。但已有研究表明，化州柚含的药用成分比柚高，药用效果更佳。目前化橘红有效部位及其制剂的质量标准缺乏全面的质量控制方法，容易被仿制或掺伪。化橘红药材原质量标准收载于2010年版《中华人民共和国药典》(一部)，【鉴别】项分别以柚皮苷对照品为对照，进行薄层鉴别；【含量测定】项采用高效液相色谱法测定化橘红中柚皮苷的含量。因此为提高临床疗效，对化橘红有效部位及其制剂的质量控制方法研究具有实用价值和重大意义。
发明内容
中药强调从整体上发挥作用，多半不是针对某个靶点，也不是若干成分的简单加合，仅靠单一成分的检测降低了鉴别的准确和专属性，不能代表中药制剂的整体功效，不能反映其内在质量，也不能解决伪品掺杂等问题。中药指纹图谱是一种综合的、可量化的化学鉴定手段，可以鉴别真伪，评价原料药材、半成品和成品质量的均一性和稳定性，体现了中药作用的整体性和模糊性。色谱指纹图谱通过图谱主要特征峰的峰位，面积或比例，反映出化学成分的种类及数量的特征性，有效地判别真伪，评价优劣。在构建的指纹图谱基础上，发明人试图通过一测多评法对有效成分进行含量测定，从量上阐明有效成分间的相互比例关系，对指纹图谱数据进一步地定量分析，为中药多指标质量评价提供了新的研究思路。色谱指纹图谱结合一测多评法定量分析成为鉴别中药真实性及全面评价质量一致性和产品稳定性的可行的模式。
据此，本发明的目的在于提供一种可同时定性定量测定化橘红有效部位及其制剂中多种有效成分含量，并构建全面评价及监控其质量的方法。
技术方案具体为：
一种化橘红有效部位及其制剂的质量控制方法，包括以下步骤：
一、建立对照品的高效液相色谱及供试品的高效液相色谱指纹图谱。
制备含待测组分新北美圣草苷、樱桃苷、柚皮苷、野漆树苷、橙皮内酯水合物、melitidin和柚皮素的混合对照品溶液，各组分的浓度优选为10~500μg。
制备化橘红有效部位或其制剂的甲醇溶液作为供试品溶液。
采用高效液相色谱法分析上述对照品溶液和供试品溶液，色谱条件为：进样量5~20μl；色谱柱为ODS C18， 250mm×4.6mm，5μm；流动相为用甲醇－甲酸或乙酸或磷酸或三氟乙酸调至pH为3.0的水溶液，梯度洗脱；检测波长：320nm；理论塔板数按柚皮苷计算建议不低于5000。所述梯度洗脱步骤优选为：0~50分钟，流动相甲醇：水由30:70渐变为60:40。
分别得到对照品的高效液相色谱图及供试品的高效液相色谱指纹图谱。
二、鉴定步骤，将上述两图谱进行比较，供试品的图谱包含与对照品图谱相同的色谱峰；供试品图谱与已建立的对照指纹图谱比较，相似度大于0.90，可判断供试品为合格产品。
所述供试品的高效液相色谱指纹图谱与已建立的对照指纹图谱比较共有17个共有特征峰，各特征峰的保留时间分别为3min、5min、9min、13min、15min、19min、20min、23min、24min、25min、28min、30min、31min、33min、35min、39min、40min，其中保留时间为15min、19min、20min、25min、30min、31min、35min的7个特征峰依次与对照品色谱图中新北美圣草苷、樱桃苷、柚皮苷、野漆树苷、橙皮内酯水合物、7-(2’’-α-鼠李糖基-6’’-(3’’’’-羟基-3’’’’-甲基戊二酰)-β- D -葡萄糖基)柚皮素和柚皮素相同。
本发明中对照指纹图谱是指经证实符合质量要求的化橘红有效部位或其制剂10批次以上的供试品的甲醇提取液在上述色谱条件下经高效液相色谱分析法，采用《中药色谱指纹图谱相似度评价系统2009版》建立的指纹图谱共有模式图谱。
三、多种有效成分含量的同步测定。
含量测定步骤，采用一测多评法具体为以柚皮苷为内标，分别计算新北美圣草苷、樱桃苷、野漆树苷、橙皮内酯水合物、7-(2’’-α-鼠李糖基-6’’-(3’’’’-羟基-3’’’’-甲基戊二酰)-β- D -葡萄糖基)柚皮素和柚皮素对于柚皮苷的校正因子；以柚皮苷为对照品，采用外标一点法计算供试品中柚皮苷的含量；再根据公式C(%)= f×AX / AS’×100%，计算供试品中其他待测组分的含量；其中，f为所述的校正因子，AX为所述其他待测组分在供试品图谱中的峰面积，AS’为柚皮苷对照品的高效液相色谱峰面积。
与现有技术相比，本发明具有以下有益效果：
本发明针对中药多成分发挥疗效的特点，对化橘红有效部位及其制剂建立科学、全面多指标质量评价监控方法。该方法结合高效液相色谱指纹图谱分析方法，采用一测多评法同时鉴定及测定化橘红有效部位及其制剂中多种有效成分的含量，有效地全面监控半成品和成品的质量，监控生产工艺的稳定性，保证其质量的稳定、均一、可控，有效的避免了产品伪造，保证该品种的正常生产、流通秩序。本发明还具有方法先进、稳定性和重现性好、可操作性强和快速等优点。
附图说明
图1是本发明的化橘红有效部位(A)及其制剂(B)对照指纹图谱，图中从左到右的箭头所指分别是特征峰1至17。
图2是本发明实施例1中供试品指纹图谱(A)与对照品对应的色谱图(B)，图中峰号1、2、3、4、5、6、7依次指示为新北美圣草苷、樱桃苷、柚皮苷、野漆树苷、橙皮内酯水合物、7-(2’’-α-鼠李糖基-6’’-(3’’’’-羟基-3’’’’-甲基戊二酰)-β- D -葡萄糖基)柚皮素和柚皮素。
图3是本发明实施例1供试品(A)与化橘红对照药材的色谱图(B)，图中从左到右的箭头所指分别是共有峰1至17。
具体实施方式
以下通过具体的实施例进一步说明本发明的技术方案。
实施例1
1 仪器与试药
1.1 仪器：高效液相色谱仪(Dionex Ultimate 3000)；色谱柱：ZORBAX Eclipse Plus C18 ，4.6 mm×250mm，5μm。
1.2 试药：
1.2.1 对照品和对照药材：柚皮苷(供含量测定用，中国药品生物制品检定所，批号110722－200309)；新北美圣草苷(Sigma-Alkrich公司，批号：1326322，纯度：98.6%)；野漆树苷(Sigma-Alkrich公司，批号：023H0743，纯度：99.0%)；橙皮内酯水合物(广州现代中药质量研究开发中心制备，经UV、IR、MS、NMR谱确证，纯度：98.5%)；樱桃苷(加拿大ChromaDex公司，纯度>98%)；7-(2’’-α-鼠李糖基-6’’-(3’’’’-羟基-3’’’’-甲基戊二酰)-β- D -葡萄糖基)柚皮素(广州现代中药质量研究开发中心制备，经UV、IR、MS、NMR谱确证，纯度：97.5%)；柚皮素(Sigma公司，货号：N5893-1g，批号：035K1316,纯度:97.5%)；化橘红对照药材（中国药品生物制品检定所提供，批号1165-200001)。
1.2.2 供试品：11批化橘红有效部位、胶囊或片剂、1批沙田柚提取物、1批梅州柚果提取物、1批蜜柚提取物作为供试品，均由广州现代中药质量研究开发中心研制生产。
实验中液相色谱所用试剂甲醇均为色谱纯，其余所用试剂均为分析纯，水为超纯水。
2．方法与结果
2.1 供试品溶液的制备：
取有效部位粉末0.25g，精密称定，置100ml量瓶中，加甲醇适量超声处理(功率360W，频率35kHz)15分钟，加甲醇稀释至刻度，摇匀。用0.45μm的微孔滤膜滤过，作为供试品溶液。
取胶囊内容物0.5g，精密称定，置50ml量瓶中，加甲醇适量超声处理(功率360W，频率35kHz)15分钟，加甲醇稀释至刻度，摇匀。用0.45μm的微孔滤膜滤过，作为供试品溶液。
取片剂粉碎后粉末0.5g，精密称定，置50ml具塞三角瓶中，加甲醇20ml超声处理(功率360W，频率35kHz)15分钟，滤过，滤纸和滤渣再加甲醇20ml重复上述操作一次，合并两次滤液置50ml量瓶中，并以少量甲醇分次洗涤容器，洗液滤入同一量瓶中，加甲醇至刻度，摇匀。用0.45μm的微孔滤膜滤过，作为供试品溶液。
对照品溶液的制备： 分别取新北美圣草苷、樱桃苷、柚皮苷、野漆树苷、橙皮内酯水合物、7-(2’’-α-鼠李糖基-6’’-(3’’’’-羟基-3’’’’-甲基戊二酰)-β- D -葡萄糖基)柚皮素和柚皮素，溶解于甲醇中作为对照品溶液。
化橘红药材供试品溶液的制备：取化橘红药材粉末2g，精密称定，置50ml具塞三角瓶中，加甲醇30ml超声处理(功率360W，频率35kHz)15分钟，滤过，滤纸和滤渣再加甲醇30ml重复上述操作一次，合并两次滤液置100ml量瓶中，并以少量甲醇分次洗涤容器，洗液滤入同一量瓶中，加甲醇至刻度，摇匀。用0.45μm的微孔滤膜滤过，作为供试品溶液。
2.2 高效液相色谱分析：精密吸取供试品溶液和对照品溶液10μl，进样；色谱条件：色谱柱为ZORBAX Eclipse Plus C18 4.6×250mm 5μm；流动相为甲醇(A)－乙酸溶液(pH 3.0)(B)，采用表2的梯度洗脱方式：
表2 梯度洗脱表
检测波长：320nm；流速：1.0 ml/min；分别得到对照品高效液相色谱图和供试品的高效液相色谱指纹图谱。
2.3 共有峰确定：如图1、图2和图3所示，将上述得到的10批合格供试品的高效液相色谱指纹图谱经《中药色谱指纹图谱相似度评价系统2009版》进行比较，共有模式(参照指纹图谱)共出现17个。其保留时间Rt值分别为3min、5min、9min、13min、15min、19min、20min、23min、24min、25min、28min、30min、31min、33min、35min、39min、40min，其中Rt值为15min、19min、20min、25min、30min、31min、35min的7个色谱峰经确证为新北美圣草苷、樱桃苷、柚皮苷、野漆树苷、橙皮内酯水合物、7-(2’’-α-鼠李糖基-6’’-(3’’’’-羟基-3’’’’-甲基戊二酰)-β- D -葡萄糖基)柚皮素和柚皮素。
即供试品的图谱包含与对照品图谱相同的色谱峰；供试品图谱与已建立的对照指纹图谱(由10批以上合格供试品建立的共有模式图谱)比较，共有峰为17个，相似度大于0.90，可判断供试品为合格产品。
采用上述一测多评法测定供试品7个待测成分的含量，根据有效成分含量的高低，可判断供试品的优劣。
2.4 精密度试验：取同一个化橘红有效部位供试品溶液连续进样6次，检测指纹图谱，采用《中药色谱指纹图谱相似度评价系统2009版》进行评价，结果表明供试品溶液相似度均等于1，仪器的精密度良好。精密度结果见表3：
表3 精密度结果
| S1 | S2 | S3 | S4 | S5 | S6 | 对照指纹图谱 | |
| S1 | 1.000 | 1.000 | 1.000 | 1.000 | 1.000 | 1.000 | 1.000 |
| S2 | 1.000 | 1.000 | 1.000 | 1.000 | 1.000 | 1.000 | 1.000 |
| S3 | 1.000 | 1.000 | 1.000 | 1.000 | 1.000 | 1.000 | 1.000 |
| S4 | 1.000 | 1.000 | 1.000 | 1.000 | 1.000 | 1.000 | 1.000 |
| S5 | 1.000 | 1.000 | 1.000 | 1.000 | 1.000 | 1.000 | 1.000 |
| S6 | 1.000 | 1.000 | 1.000 | 1.000 | 1.000 | 1.000 | 1.000 |
| 对照指纹图谱 | 1.000 | 1.000 | 1.000 | 1.000 | 1.000 | 1.000 | 1.000 |
2.5 稳定性考察：取同一个化橘红有效部位供试品溶液，分别在0、2、4、6、8、12、24、48小时进样，检测指纹图谱，采用《中药色谱指纹图谱相似度评价系统2009版》进行评价，结果表明供试品溶液相似度均等于1，供试品溶液在放置48小时内稳定。稳定性结果见表4：
表4 稳定性结果
2.6 重复性试验：取同一批化橘红有效部位供试品6份，按“供试品溶液的制备”项下方法制备，分别进样，检测指纹图谱，采用《中药色谱指纹图谱相似度评价系统2009版》进行评价，结果表明供试品溶液相似度均等于1，方法重复性好。结果见表5:
表5 重复性结果
| S1 | S2 | S3 | S4 | S5 | S6 | 对照指纹图谱 | |
| S1 | 1.000 | 1.000 | 1.000 | 1.000 | 1.000 | 1.000 | 1.000 |
| S2 | 1.000 | 1.000 | 1.000 | 1.000 | 1.000 | 1.000 | 1.000 |
| S3 | 1.000 | 1.000 | 1.000 | 1.000 | 1.000 | 1.000 | 1.000 |
| S4 | 1.000 | 1.000 | 1.000 | 1.000 | 1.000 | 1.000 | 1.000 |
| S5 | 1.000 | 1.000 | 1.000 | 1.000 | 1.000 | 1.000 | 1.000 |
| S6 | 1.000 | 1.000 | 1.000 | 1.000 | 1.000 | 1.000 | 1.000 |
| 对照指纹图谱 | 1.000 | 1.000 | 1.000 | 1.000 | 1.000 | 1.000 | 1.000 |
2.7中间精密度：精密称取同一批号的化橘红有效部位，分别在不同日期、不同分析人员等变动因素条件下，依法测定，检测指纹图谱，采用《中药色谱指纹图谱相似度评价系统2009版》进行评价。
2.7.1 不同分析时间：取同一批号化橘红有效部位，分别于不同日期按“供试品溶液的制备”项下方法制备操作，进样，检测指纹图谱，采用《中药色谱指纹图谱相似度评价系统2009版》进行评价，结果表明供试品溶液相似度均等于1。相似度结果见表6：
表6 相似度结果
| S1(日期1) | S2(日期2) | S3(日期3) | 对照指纹图谱 | |
| S1(日期1) | 1.000 | 1.000 | 1.000 | 1.000 |
| S2(日期2) | 1.000 | 1.000 | 1.000 | 1.000 |
| S3(日期3) | 1.000 | 1.000 | 1.000 | 1.000 |
| 对照指纹图谱 | 1.000 | 1.000 | 1.000 | 1.000 |
2.7.2 不同分析人员: 取同一批号化橘红有效部位，不同人员分别按“供试品溶液的制备”项下方法制备操作，进样，检测指纹图谱，采用《中药色谱指纹图谱相似度评价系统2009版》进行评价，结果表明供试品溶液相似度均等于1。相似度结果见表7：
表7 相似度结果
| S1(人员1) | S2(人员2) | 对照指纹图谱 | |
| S1(人员1) | 1.000 | 1.000 | 1.000 |
| S2(人员2) | 1.000 | 1.000 | 1.000 |
| 对照指纹图谱 | 1.000 | 1.000 | 1.000 |
结果表明：方法的中间精密度良好。
实施例2
1 仪器与试药
1.1 仪器：高效液相色谱仪(Dionex Ultimate 3000)；色谱柱：ZORBAX Eclipse Plus C18 ，4.6 mm×250mm，5μm。
1.2 试药：10批化橘红有效部位或其胶囊，由广州现代中药质量研究开发中心研制生产。实验中液相色谱所用试剂甲醇均为色谱纯，其余所用试剂均为分析纯，水为超纯水。
2．方法与结果
2.1 供试品溶液的制备：取有效部位粉末0.25g，精密称定，置100ml量瓶中，加甲醇适量超声处理(功率360W，频率35kHz)15分钟，加甲醇稀释至刻度，摇匀。用0.45μm的微孔滤膜滤过，作为供试品溶液。
2.2 对照品溶液的制备：分别取新北美圣草苷、柚皮苷、野漆树苷、橙皮内酯水合物对照品适量，加甲醇使溶解，制成每毫升各含有5μg、300 μg、8 μg和1.5μg的混合对照品溶液，备用。
2.3 线性范围：取混合对照品溶液各2、5、10、20、40 μl进样分析，以进样量对峰面积积分值进行回归处理，得新北美圣草苷、柚皮苷、野漆树苷和橙皮内酯水合物的标准曲线见表8。
表8 4种成分的线性关系和范围
2.4 精密度试验：取混合对照品溶液，同一天内连续进样6次，记录各待测峰的峰面积积分值。结果(表9)显示新北美圣草苷、柚皮苷、野漆树苷和橙皮内酯水合物的RSD%分别为0.30、0.36、0.79和1.58，表明仪器日内精密度好。
表9 精密度试验结果
2.5 稳定性试验：取同一份供试品溶液，分别在制备后的0、2、4、6、8、12、24、48小时进样分析，记录各待测峰的峰面积积分值。结果(见表10)显示新北美圣草苷、柚皮苷、野漆树苷和橙皮内酯水合物的RSD%分别为1.08、0.48、0.56和1.08，表明48小时内，供试品溶液的稳定性良好。
表10 供试品稳定性试验结果
2.6 重复性试验：取同一批化橘红有效部位胶囊，按“供试品溶液的制备”项下制备6份供试品溶液，分别进样，记录各待测峰的峰面积积分值。结果(见表11)显示新北美圣草苷、柚皮苷、野漆树苷和橙皮内酯水合物的平均含量分别为：6.310、716.819、17.211和3.116 mg·g-1，RSD%分别为1.95、0.53、0.58和1.89，表明该方法的重复性良好。
表11 重复性试验结果
2.7 中间精密度试验：取混合对照品溶液，分别在不同日期、不同分析人员等变动因素条件下，依法测定，记录各待测峰的峰面积积分值。结果显示，不同日期下，新北美圣草苷、柚皮苷、野漆树苷和橙皮内酯水合物的RSD%分别为：0.56、1.07、1.30和0.69；不同分析人员的情况下，RSD%分别为：0.25、0.01、0.13和1.40；使用不同仪器的情况下，RSD%分别为：2.91、0.47、0.59和1.57，表明该方法中间精密度良好。
2.8 校正因子的计算
以柚皮苷(YPG)为内标，计算新北美圣草苷(X)，野漆树苷(Y)，橙皮内酯水合物(C)的校正因子，结果(见表12)显示，新北美圣草苷，野漆树苷，橙皮内酯水合物相对于柚皮苷的校正因子分别为1.05、1.89和2.09，RSD%分别为1.40、0.75和2.73。
表12 3种成分的相对校正因子
2.9 校正因子的重现性考察：
取混合对照品溶液，进样2，5，10，20，30，40 μl测定，用校正因子的计算方法计算柚皮苷对新北美圣草苷、野漆树苷和橙皮内酯水合物的校正因子。实验考察了3种色谱柱：Agilent ZORBAX EclipsePlusC18(4.6 mm×250mm, 5μm)、Dionex Acclaim® C18(4.6mm×250mm，5μm)、Ultimate XB-C18(4.6 mm×250mm,5μm)。
结果显示，使用三种不同填料的色谱柱(见表13)，新北美圣草苷、野漆树苷和橙皮内酯水合物的校正因子的RSD%为1.08、0.53和1.27，使用不同的仪器(见表14)，新北美圣草苷、野漆树苷和橙皮内酯水合物的校正因子的RSD%为0.67、2.66和2.33，表明该方法RCF值重现性良好。
表13 不同色谱柱测得的相对校正因子
表14 不同仪器测得的校正因子
2.10 待测组分色谱峰的定位
本实验采用待测成分与内标物的相对保留时间比值定位，即根据内标物的保留时间和相对保留值，再结合峰形和光谱图，便可正确判断出目标峰的准确位置，结果显示，使用三种不同填料的色谱柱(见表15)，新北美圣草苷、野漆树苷和橙皮内酯水合物相对柚皮苷的相对保留时间的RSD%为1.44、1.47和3.40；结果显示，使用两种不同型号的仪器(见表16)，新北美圣草苷、野漆树苷和橙皮内酯水合物相对柚皮苷的相对保留时间的RSD%为0.48、0.39和1.27，表明该方法相对保留时间值重现性良好。利用相对保留时间进行峰的定位是可行的。
表15 采用不同色谱柱各成分色谱峰的相对保留值
表16 采用不同仪器各成分色谱峰的相对保留值
2.11 加样回收率
取同一批已知含量的样品粉末约12 mg，精密称定，平行6 份，分别精密加入一定量的混合对照品溶液，按“供试品溶液的制备”项下方法制备供试品溶液，测定并计算各成分的加样回收率及 RSD%，结果(见表17)显示，新北美圣草苷、柚皮苷、野漆树苷和橙皮内酯水合物的加样回收率分别为100.2%、99.34%、100.3%和99.23%，RSD分别为1.23、0.88、1.29和1.88%。
2.12 一测多评与外标法测定结果的比较
一测多评质量评价模式能否最终应用于生产实际，关键在于其计算结果的可靠程度。本实验采用两者之间的相对平均偏差法，分别精密吸取10批供试品溶液各10 μl注入高效液相色谱仪，测定。采用外标一点法和一测多评法分别测定和计算化橘红有效部位胶囊中新北美圣草苷、野漆树苷和橙皮内酯水合物的含量，计算两者之间偏差，结果见表18。
结果表明：QAMS 计算值和外标法实测值之间没有显著性差异，说明建立的 校正因子RCF 具有很好的重现性和可信度，在定量用对照品缺乏的情况下，可以通过一测多评法实现对化橘红有效部位胶囊多成分含量的同步测定。
表17 4种成分的加样回收率
表18 外标法和一测多评法测定3种化合物含量的比较
实施例3
样品检测: 另取以下不同来源的化橘红药材制备成有效部位或其制剂样品作为供试品检验集，分别按“供试品溶液的制备”项下方法制备操作，进样，检测指纹图谱，采用《中药色谱指纹图谱相似度评价系统2009版》进行评价，结果表明：化州柚（广东产）与对照指纹图谱相似度大于0.90；沙田柚（广西产）、梅州柚果（广东产）、蜜柚（福建产）来源的3批供试品溶液与对照指纹图谱相似度均小于0.90。相似度结果见表19：
表19 检验集样品相似度结果
Claims (3)
1.一种化橘红有效部位及其制剂的质量控制方法，包括以下步骤：
(1) 建立对照品的高效液相色谱图谱及供试品的高效液相色谱指纹图谱，色谱条件为：进样量5~20μl；色谱柱为ODS C18，5μm；流动相为用甲醇－甲酸或乙酸或磷酸或三氟乙酸调至pH为3.0的水溶液，梯度洗脱；检测波长：320nm；梯度洗脱步骤为：0~50分钟，流动相甲醇:水由30:70渐变为60:40；所述对照品为含新北美圣草苷、樱桃苷、柚皮苷、野漆树苷、橙皮内酯水合物、7-(2’’-α-鼠李糖基-6’’-(3’’’’-羟基-3’’’’-甲基戊二酰)-β- D -葡萄糖基)柚皮素和柚皮素的混合甲醇溶液；所述供试品为化橘红有效部位或其制剂的甲醇提取液；
(2)鉴定步骤，将上述两图谱进行比较，供试品的图谱包含与对照品图谱相同的色谱峰；供试品图谱与已建立的对照指纹图谱比较，相似度大于0.90，可判断供试品为合格产品。
（3）含量测定步骤，以柚皮苷为对照品，以外标一点法测定柚皮苷含量，采用一测多评法，以柚皮苷为内标，测定并计算供试品中待测组分即新北美圣草苷、樱桃苷、野漆树苷、橙皮内酯水合物、7-(2’’-α-鼠李糖基-6’’-(3’’’’-羟基-3’’’’-甲基戊二酰)-β-D -葡萄糖基)柚皮素和柚皮素的含量，根据有效成分含量的高低，判断供试品的优劣，从而达到监控化橘红有效部位及其制剂质量的目的。
2.如权利要求1所述的质量控制方法，其特征在于：所述步骤(2)中供试品的高效液相色谱指纹图谱与对照指纹图谱比较共有17个共有特征峰，各特征峰的保留时间分别为3min、5min、9min、13min、15min、19min、20min、23min、24min、25min、28min、30min、31min、33min、35min、39min、40min，其中保留时间为15min、19min、20min、25min、30min、31min、35min的7个特征峰依次与对照品色谱图中新北美圣草苷、樱桃苷、柚皮苷、野漆树苷、橙皮内酯水合物、7-(2’’-α-鼠李糖基-6’’-(3’’’’-羟基-3’’’’-甲基戊二酰)-β- D -葡萄糖基)柚皮素和柚皮素相同。
3.如权利要求1所述的质量控制方法，其特征在于：所述步骤(3)中的一测多评法具体为以柚皮苷为内标，分别计算新北美圣草苷、樱桃苷、野漆树苷、橙皮内酯水合物、7-(2’’-α-鼠李糖基-6’’-(3’’’’-羟基-3’’’’-甲基戊二酰)-β- D -葡萄糖基)柚皮素和柚皮素对于柚皮苷的校正因子；以柚皮苷为对照品，采用外标一点法计算供试品中柚皮苷的含量；再根据公式C(%)= f×AX / AS’×100%，计算供试品中其他待测组分的含量；其中，f为所述的校正因子，AX为所述其他待测组分在供试品图谱中的峰面积，AS’为柚皮苷对照品的高效液相色谱峰面积。
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Country Status (1)
| Country | Link |
|---|---|
| CN (1) | CN103364506A (zh) |
Cited By (10)
| Publication number | Priority date | Publication date | Assignee | Title |
|---|---|---|---|---|
| CN105372346A (zh) * | 2015-11-19 | 2016-03-02 | 广州市香雪制药股份有限公司 | 橘红痰咳制剂中挥发性成分指纹图谱的构建及检测方法 |
| CN108982504A (zh) * | 2018-08-14 | 2018-12-11 | 中山大学 | 一种橘红珠药材质量检测方法 |
| CN110408683A (zh) * | 2019-08-16 | 2019-11-05 | 河北农业大学 | 用于樱桃物种鉴定的特异性dna区段和引物 |
| CN110699477A (zh) * | 2019-10-21 | 2020-01-17 | 华中农业大学 | 用于区分毛橘红和光橘红原料植物的分子标记及其应用 |
| CN110967428A (zh) * | 2019-12-23 | 2020-04-07 | 深圳市药品检验研究院（深圳市医疗器械检测中心） | 一种基于高效液相指纹图谱信息建立评价中药化橘红质量的模式识别方法 |
| CN112557546A (zh) * | 2020-12-18 | 2021-03-26 | 广州市香雪制药股份有限公司 | 一种橘红梨膏uplc指纹图谱及多成分含量的检测方法 |
| CN112748193A (zh) * | 2020-12-18 | 2021-05-04 | 广州市香雪制药股份有限公司 | 一种橘红梨膏hplc指纹图谱及多成分含量的检测方法 |
| CN114689743A (zh) * | 2022-03-18 | 2022-07-01 | 广西苷亮健生物科技有限公司 | 一种木姜叶柯质量控制检测方法 |
| CN114965806A (zh) * | 2022-05-07 | 2022-08-30 | 广州科曼生物科技有限公司 | 一种化橘红柚配方颗粒对照提取物及其制备方法 |
| CN115078566A (zh) * | 2022-05-13 | 2022-09-20 | 华润三九现代中药制药有限公司 | 一种橘红配方颗粒的特征图谱检测方法及其质控方法 |
-
2013
- 2013-07-24 CN CN2013103137213A patent/CN103364506A/zh active Pending
Non-Patent Citations (5)
| Title |
|---|
| 刘群娣等: "化橘红化学成分的HPLC-DAD-MS/MS分析", 《世界科学技术(中医药现代化)》 * |
| 林励等: "两种化橘红的质量鉴别", 《广州中医药大学学报》 * |
| 林芳等: "一测多评法结合指纹图谱对杜仲质量控制的研究", 《中国实验方剂学杂志》 * |
| 肖维强等: "化橘红HPLC指纹图谱的建立", 《食品科学》 * |
| 陈志霞等: "化橘红黄酮类成分的HPLC指纹图谱研究", 《中草药》 * |
Cited By (12)
| Publication number | Priority date | Publication date | Assignee | Title |
|---|---|---|---|---|
| CN105372346A (zh) * | 2015-11-19 | 2016-03-02 | 广州市香雪制药股份有限公司 | 橘红痰咳制剂中挥发性成分指纹图谱的构建及检测方法 |
| CN108982504A (zh) * | 2018-08-14 | 2018-12-11 | 中山大学 | 一种橘红珠药材质量检测方法 |
| CN110408683A (zh) * | 2019-08-16 | 2019-11-05 | 河北农业大学 | 用于樱桃物种鉴定的特异性dna区段和引物 |
| CN110699477A (zh) * | 2019-10-21 | 2020-01-17 | 华中农业大学 | 用于区分毛橘红和光橘红原料植物的分子标记及其应用 |
| CN110967428A (zh) * | 2019-12-23 | 2020-04-07 | 深圳市药品检验研究院（深圳市医疗器械检测中心） | 一种基于高效液相指纹图谱信息建立评价中药化橘红质量的模式识别方法 |
| CN110967428B (zh) * | 2019-12-23 | 2021-11-19 | 深圳市药品检验研究院（深圳市医疗器械检测中心） | 一种基于高效液相指纹图谱信息建立评价中药化橘红质量的模式识别方法 |
| CN112557546A (zh) * | 2020-12-18 | 2021-03-26 | 广州市香雪制药股份有限公司 | 一种橘红梨膏uplc指纹图谱及多成分含量的检测方法 |
| CN112748193A (zh) * | 2020-12-18 | 2021-05-04 | 广州市香雪制药股份有限公司 | 一种橘红梨膏hplc指纹图谱及多成分含量的检测方法 |
| CN114689743A (zh) * | 2022-03-18 | 2022-07-01 | 广西苷亮健生物科技有限公司 | 一种木姜叶柯质量控制检测方法 |
| CN114965806A (zh) * | 2022-05-07 | 2022-08-30 | 广州科曼生物科技有限公司 | 一种化橘红柚配方颗粒对照提取物及其制备方法 |
| CN115078566A (zh) * | 2022-05-13 | 2022-09-20 | 华润三九现代中药制药有限公司 | 一种橘红配方颗粒的特征图谱检测方法及其质控方法 |
| CN115078566B (zh) * | 2022-05-13 | 2023-07-07 | 华润三九现代中药制药有限公司 | 一种橘红配方颗粒的特征图谱检测方法及其质控方法 |
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