CN105372346A - 橘红痰咳制剂中挥发性成分指纹图谱的构建及检测方法 - Google Patents
橘红痰咳制剂中挥发性成分指纹图谱的构建及检测方法 Download PDFInfo
- Publication number
- CN105372346A CN105372346A CN201510811340.7A CN201510811340A CN105372346A CN 105372346 A CN105372346 A CN 105372346A CN 201510811340 A CN201510811340 A CN 201510811340A CN 105372346 A CN105372346 A CN 105372346A
- Authority
- CN
- China
- Prior art keywords
- temperature
- warming
- keep
- volatile
- juhong tanke
- Prior art date
- Legal status (The legal status is an assumption and is not a legal conclusion. Google has not performed a legal analysis and makes no representation as to the accuracy of the status listed.)
- Granted
Links
Classifications
-
- G—PHYSICS
- G01—MEASURING; TESTING
- G01N—INVESTIGATING OR ANALYSING MATERIALS BY DETERMINING THEIR CHEMICAL OR PHYSICAL PROPERTIES
- G01N30/00—Investigating or analysing materials by separation into components using adsorption, absorption or similar phenomena or using ion-exchange, e.g. chromatography or field flow fractionation
- G01N30/02—Column chromatography
-
- G—PHYSICS
- G01—MEASURING; TESTING
- G01N—INVESTIGATING OR ANALYSING MATERIALS BY DETERMINING THEIR CHEMICAL OR PHYSICAL PROPERTIES
- G01N30/00—Investigating or analysing materials by separation into components using adsorption, absorption or similar phenomena or using ion-exchange, e.g. chromatography or field flow fractionation
- G01N30/02—Column chromatography
- G01N30/88—Integrated analysis systems specially adapted therefor, not covered by a single one of the groups G01N30/04 - G01N30/86
-
- G—PHYSICS
- G01—MEASURING; TESTING
- G01N—INVESTIGATING OR ANALYSING MATERIALS BY DETERMINING THEIR CHEMICAL OR PHYSICAL PROPERTIES
- G01N30/00—Investigating or analysing materials by separation into components using adsorption, absorption or similar phenomena or using ion-exchange, e.g. chromatography or field flow fractionation
- G01N30/02—Column chromatography
- G01N2030/022—Column chromatography characterised by the kind of separation mechanism
- G01N2030/025—Gas chromatography
Landscapes
- Physics & Mathematics (AREA)
- Health & Medical Sciences (AREA)
- Life Sciences & Earth Sciences (AREA)
- Chemical & Material Sciences (AREA)
- Analytical Chemistry (AREA)
- Biochemistry (AREA)
- General Health & Medical Sciences (AREA)
- General Physics & Mathematics (AREA)
- Immunology (AREA)
- Pathology (AREA)
- Other Investigation Or Analysis Of Materials By Electrical Means (AREA)
Abstract
本发明涉及一种橘红痰咳制剂中挥发性成分指纹图谱的构建及检测方法。所述指纹图谱构建方法包括如下步骤：(1)供试品溶液制备：精密称取橘红痰咳制剂，用水蒸气蒸馏法、溶剂提取法或超声提取法提取挥发性成分，以溶剂溶解稀释后，即得供试品溶液；(2)测定：精密吸取所述供试品溶液，注入气相色谱仪或气相色谱-质谱联用仪，测定，即得由10或11个共有特征峰构成的橘红痰咳制剂中挥发性成分的指纹图谱。本发明构建得到橘红痰咳制剂中挥发性成分的指纹图谱，同时也建立一种简单、可靠、实用的橘红痰咳制剂挥发性成分检测方法，填补了现行质量标准在其挥发性成分质量控制的空白，使其质量标准更加完善，保证临床用药的安全性和有效性。
Description
技术领域
本发明涉及药物分析技术领域，特别是涉及橘红痰咳制剂中挥发性成分指纹图谱的构建及检测方法。
背景技术
橘红痰咳制剂由化橘红、苦杏仁、半夏(制)或水半夏、蜜百部、白前、茯苓、五味子和甘草等8味中药，采用现代制剂工艺精制而成，是治疗寒咳的甲类非处方药物，适用于痰湿阻肺型急性气管或支气管炎、慢性支气管炎急性发作、咽喉炎、感冒等疾病的治疗。橘红痰咳方剂引经于宋代《太平惠民和剂局方》里的“二陈汤”，重用南国地道名贵中药材“化橘红”，并加以苦杏仁、白前、百部、五味子化裁而成，是温化寒痰的代表方剂。橘红痰咳制剂目前有橘红痰咳液、橘红痰咳液(无蔗糖型)、橘红痰咳煎膏、橘红痰咳颗粒、橘红痰咳泡腾片等五种产品形式，其中橘红痰咳液为广州市香雪制药股份有限公司独家品种。
研究表明，挥发油是化橘红的药效活性部位之一，化橘红挥发油能刺激呼吸道粘膜，使分泌物增多，痰液稀释，有利于痰液排出。化橘红挥发油中含量较高的成分为柠檬烯、月桂烯等，这些成分具有显著的镇咳、祛痰等作用。苦杏仁主要含苦杏仁苷和脂肪油，是苦杏仁的主要活性成分，具有止咳平喘的功效。
2010版《中国药典》(一部)收载了橘红痰咳液(有糖型)的质量标准，橘红痰咳液(无蔗糖型)执行国家食品药品监督管理局颁标准(YBZ05962006)，橘红痰咳煎膏和橘红痰咳颗粒的质量标准分别收载在部颁标准(WS3-B-3522-98，WS3-B-2819-97)中。但目前有关橘红痰咳制剂的质量标准中，还未有与其挥发性成分相关的检测方法。
发明内容
基于此，有必要提供一种橘红痰咳制剂中挥发性成分指纹图谱的构建方法及检测方法。
一种橘红痰咳制剂中挥发性成分指纹图谱的构建方法，包括如下步骤：
(1)供试品溶液制备：精密称取橘红痰咳制剂，用水蒸气蒸馏法、溶剂提取法或超声提取法提取挥发性成分，以溶剂溶解稀释后，即得供试品溶液；
(2)测定：精密吸取所述供试品溶液，注入气相色谱(GC)仪，测定，即得由10个共有特征峰构成的橘红痰咳制剂中挥发性成分的指纹图谱；或，
精密吸取所述供试品溶液，注入气相色谱-质谱联用(GC-MS)仪，测定，即得由11个共有特征峰构成的橘红痰咳制剂中挥发性成分的指纹图谱。
在其中一个实施例中，所述气相色谱仪和所述气相色谱-质谱联用仪中气相色谱的测定条件均为：
色谱柱为毛细管柱；采用分流或不分流进样方式；进样口温度为220-260℃；载气为高纯氮气，流量为0.5-5.0mL/min；采用程序升温方式：初始温度为50-80℃，于10-60min内程序升温至220-280℃，保持0-20min。
在其中一个实施例中，所述程序升温方式为：初始温度为50-60℃，保持1-5min；以8-12℃/min速度升温至140-180℃，保持1-5min；以5-10℃/min速度升温至220-240℃，保持10-20min。
在其中一个实施例中，所述气相色谱仪的测定条件为：
色谱柱：HP-INNOWAX或HP-5系列石英毛细管柱；采用分流方式进样，分流比20-100:1；载气为高纯氮气，流量1.0-2.0mL/min；进样口温度240℃；检测器为氢火焰离子化检测器，检测器温度270℃；采用程序升温方式：初始温度60℃，保持2min；以10℃/min速度升温至150℃，保持5min；以8℃/min速度升温至230℃，保持15min。
在其中一个实施例中，所述气相色谱-质谱联用仪的测定条件为：
气相色谱的测定条件：色谱柱：HP-INNOWAX或HP-5系列石英毛细管柱；采用分流方式进样，分流比20-100:1；载气为高纯氦气，流量1.0-2.0mL/min；进样口温度240℃；采用程序升温方式测定：初始温度50℃，保持2min；以10℃/min速度升温至150℃，保持2min；以8℃/min速度升温至240℃，保持15min；
质谱的测定条件：采用的离子源为EI，离子源温度230℃，电子能量-70eV；进样口温度250℃，辅助加热区温度250℃；质量扫描范围10-1000amu。
在其中一个实施例中，所述提取挥发性成分的方法为：
精密称取橘红痰咳制剂至烧瓶，加水混合后，连接挥发油收集器，自所述挥发油收集器上端加水至充满刻度部分，再加入有机溶剂；
加热至回流4.0-6.0小时后，取所述有机溶剂，即可，
其中，所述有机溶剂为乙醚、环己烷、正己烷、二氯甲烷或乙酸乙酯。
本发明还提供一种橘红痰咳制剂中挥发性成分的检测方法，包括如下步骤：
(1)供试品溶液制备：精密称取橘红痰咳制剂，用水蒸气蒸馏法、溶剂提取法或超声提取法提取挥发性成分，以溶剂溶解稀释后，即得供试品溶液；
(2)测定：精密吸取所述供试品溶液，注入气相色谱仪测定，即可；或，精密吸取所述供试品溶液，注入气相色谱-质谱联用仪测定，即可，其中，所述气相色谱仪和所述气相色谱-质谱联用仪中气相色谱的测定条件均为：
色谱柱为毛细管柱；采用分流或不分流进样方式；进样口温度为220-260℃；载气为高纯氮气，流量为0.5-5.0mL/min；采用程序升温方式：初始温度为50-80℃，于10-60min内程序升温至220-280℃，保持0-20min。
在其中一个实施例中，所述程序升温方式为：初始温度为50-60℃，保持1-5min；以8-12℃/min速度升温至140-180℃，保持1-5min；以5-10℃/min速度升温至220-240℃，保持10-20min。
在其中一个实施例中，所述气相色谱仪的测定条件为：
色谱柱：HP-INNOWAX或HP-5系列石英毛细管柱；采用分流方式进样，分流比20-100:1；载气为高纯氮气，流量1.0-2.0mL/min；进样口温度240℃；检测器为氢火焰离子化检测器，检测器温度270℃；采用程序升温方式：初始温度60℃，保持2min；以10℃/min速度升温至150℃，保持5min；以8℃/min速度升温至230℃，保持15min，或，
所述气相色谱-质谱联用仪的测定条件为：
气相色谱的测定条件：色谱柱：HP-INNOWAX或HP-5系列石英毛细管柱；采用分流方式进样，分流比20-100:1；载气为高纯氦气，流量1.0-2.0ml/min；进样口温度240℃；采用程序升温方式：初始温度50℃，保持2min；以10℃/min速度升温至150℃，保持2min；以8℃/min速度升温至240℃，保持15min；
质谱的测定条件：采用的离子源为EI，离子源温度230℃，电子能量-70eV；进样口温度250℃，辅助加热区温度250℃；质量扫描范围10-1000amu。
在其中一个实施例中，所述提取挥发性成分的方法为：
精密称取橘红痰咳制剂至烧瓶，加水混合后，连接挥发油收集器，自所述挥发油收集器上端加水至充满刻度部分，再加入有机溶剂；
加热至回流4.0-6.0小时后，取所述有机溶剂，即可，
其中，所述有机溶剂为乙醚、环己烷、正己烷、二氯甲烷或乙酸乙酯。
本发明所述橘红痰咳制剂的剂型包括合剂、煎膏剂、糖浆剂、颗粒剂、胶囊剂、丸剂、片剂、散剂或滴丸剂。
与现有技术相比，本发明具有以下有益效果：
本发明通过合理的方法提取橘红痰咳制剂中的挥发性成分，并根据橘红痰咳制剂自身特点，采用气相色谱或气质联用色谱仪构建得到橘红痰咳制剂中挥发性成分的指纹图谱，同时也建立一种简单、可靠、实用的橘红痰咳制剂挥发性成分检测方法，填补了现行质量标准在挥发性成分质量控制方面的空白，使其质量标准更加完善，从而可以更好地控制药品质量，保证临床用药的安全性和有效性。
这种方法还能够同时对药材、中间产品及橘红痰咳制剂产品中的挥发性成分进行分析，对生产中的挥发性成分的质量控制具有全程监测的作用，大大提高了质量控制水平，保证产品质量均一、稳定。
本发明还进一步对气相色谱和气质联用色谱仪的测定条件进行了优化，特别是升温程序，使获得指纹图谱构建和检测方法具有准确性高、精密度以及中间精密度好、稳定性高、重复性好的优点。
附图说明
图1为本发明一实施例所述橘红痰咳液中挥发性成分的GC标准指纹图谱；
图2为本发明一实施例所述橘红痰咳液中挥发性成分的GC-MS标准指纹图谱。
具体实施方式
以下结合具体实施例对本发明的橘红痰咳制剂中挥发性成分的指纹图谱构建方法及其检测方法作进一步详细的说明。
实施例1：橘红痰咳液中挥发性成分标准指纹图谱的构建
1仪器与试药
1.1仪器
Agilent7890AGC系统；AgilentGC/QQQ系统；色谱柱为HP-5(30m×0.32mm，0.25μm)毛细管柱。
1.2试剂
正己烷为色谱纯；水为纯化水。
1.3试药
12批橘红痰咳液均由广州市香雪制药股份有限公司旗下化州中药厂生产。
2方法与结果
2.1供试品溶液制备
取橘红痰咳液50mL于圆底烧瓶中，加超纯水500mL，混合均匀后，连接挥发油收集器，自挥发油收集器上端加入适量水使之充满收集器的刻度管部分，然后加正己烷2mL，加热，保持微沸5h，取正己烷层至10mL容量瓶中，并用正己烷定容至刻度，加入无水硫酸钠脱水后过滤，取续滤液即得供试品溶液。
2.2测定
2.2.1GC测定方法
精密吸取供试品溶液各5μL，注入气相色谱仪，测定，即得橘红痰咳液中挥发性成分的GC图谱。色谱条件：采用分流方式进样，分流比20:1；载气为高纯氮气，流量2.0mL/min；进样口温度240℃；检测器为氢火焰离子化检测器，检测器温度270℃；柱温为程序升温：初始柱温60℃，保持2min，以10℃/min速度升温至150℃，保持5min，以8℃/min速度升温至230℃，保持15min。
2.2.2GC-MS测定方法
精密吸取供试品溶液5μL，注入气相色谱-质谱联用仪，测定，即得橘红痰咳液中挥发性成分的GC-MS图谱。色谱条件：采用分流方式进样，分流比100:1；载气为高纯氦气，流量2.0mL/min；进样口温度240℃；柱温为程序升温：初始柱温50℃，保持2min，以10℃/min速度升温至150℃，保持2min，以8℃/min速度升温至240℃，保持15min。质谱条件：电离方式为EI源，离子源温度230℃，电子能量-70eV，进样口温度250℃，辅助加热区温度250℃；质量扫描范围10-1000amu。
另外，本实施例对不同的实验条件进行了考察：
1)供试品溶液提取方法的考察
考察了水蒸气蒸馏法、超声提取法、溶剂萃取法等不同提取方法。结果显示，三种提取方法的色谱峰数量相差不大，但水蒸气蒸馏法的溶剂消耗量少，故优先选用水蒸气蒸馏法。
2)供试品溶液制备提取溶剂的考察
考察了环己烷、正己烷、正戊烷、异辛烷、乙酸乙酯、二氯甲烷、甲醇、乙醚或石油醚等不同提取溶剂，结果显示乙醚、环己烷、正己烷、乙酸乙酯保留信息较丰富。3)供试品溶液制备提取时间的考察
考察了水蒸气蒸馏提取1h、2h、3h、4h、5h、6h、8h对挥发性成分提取的影响，结果显示5h基本提取完全。
4)色谱柱的考察
考察了HP-5(30m×320μm，0.25μm)、SE-30(30m×320μm，0.25μm)、DB-17(30m×320μm，0.25μm)、HP-INNOWAX(30m×320μm，0.25μm)等4种型号的色谱柱，其中HP-5柱和HP-INNOWAX柱对各色谱峰分离度较佳，峰形较好。
5)进样口温度考察
考察了220℃、240℃、260℃等不同进样口温度，结果无明显差异。
2.3指纹图谱建立
2.3.1GC标准指纹图谱
将上述测定的12批橘红痰咳液样品的GC图谱数据导入国家药典委员会编制的“中药色谱指纹图谱相似度评价系统”进行处理，并生成GC指纹图谱共有模拟，并以此共有模式作为橘红痰咳液中挥发性成分的GC标准指纹图谱，结果见图1。经分析比较，有10个共有特征峰，按出峰时间依次标定为1～10号峰，具体见表1。
表1橘红痰咳液中挥发性成分GC标准指纹图谱共有峰相对保留时间
| 峰号 | 相对保留时间 |
| 1 | 0.512 |
| 2 | 0.702 |
| 3 | 0.881 |
| 4(柠檬烯) | 1.000 |
| 5 | 1.166 |
| 6 | 1.726 |
| 7 | 2.074 |
| 8 | 2.348 |
| 9 | 2.719 |
| 10 | 3.038 |
2.3.2GC-MS标准指纹图谱
将上述测定的12批橘红痰咳液的GC-MS图谱数据导入国家药典委员会编制的“中药色谱指纹图谱相似度评价系统”进行处理，并生成GC-MS指纹图谱共有模拟，并以此共有模式作为橘红痰咳液挥发性成分的GC-MS标准指纹图谱，结果见图2。经分析比较，有11个共有特征峰，按出峰时间依次标定为1～11号峰，并利用NIST08质谱库检索对主要的共有峰进行化学成分鉴定，鉴定结果见表2。
表2橘红痰咳制剂挥发性成分GC-MS标准指纹图谱结果
2.4方法学考察
为了考察分析方法的可靠性，对以上标准指纹图谱构建方法的精密度、稳定性、重现性进行考察，结果证明，精密度、稳定性和重现性良好，满足指纹图谱的要求。
精密度试验：取同一份供试品溶液连续进样6次，依照以上方法检测指纹图谱，并采用“中药色谱指纹图谱相似度评价系统”进行相似度评价。其中，GC指纹图谱的相似度分别为0.994、0.997、0.994、0.985、0.979、0.987，RSD为0.69％；GC-MS指纹图谱的相似度分别为0.987、0.992、0.988、0.979、0.985、0.976，RSD为0.61％，均表明仪器的精密度良好。
稳定性试验：取同一份供试品溶液，分别在0、1、2、4、6、8、12小时进样，依照以上方法检测指纹图谱，并采用“中药色谱指纹图谱相似度评价系统”进行相似度评价。其中，GC指纹图谱的相似度分别为0.988、0.979、0.975、0.977、0.962、0.971、0.960，RSD为1.01％；GC-MS指纹图谱的相似度分别为0.989、0.985、0.979、0.978、0.965、0.970、0.962，RSD为1.04％，均表明供试品溶液在放置12小时内稳定。
重复性试验：取同一批橘红痰咳液供试品6份，按“供试品溶液的制备”项下方法制备，分别进样，依照以上方法检测指纹图谱，并采用“中药色谱指纹图谱相似度评价系统”进行相似度评价。其中，GC指纹图谱的相似度分别为0.972、0.968、0.969、0.987、0.990、0.974，RSD为0.97％；GC-MS指纹图谱的相似度分别为0.978、0.991、0.986、0.983、0.980、0.970，RSD为0.73％，均表明方法重复性好。
中间精密度：取同一批号的橘红痰咳液，分别在不同日期、不同分析人员等变动因素条件下，依照以上方法检测指纹图谱，并采用“中药色谱指纹图谱相似度评价系统”进行相似度评价：
(1)不同分析时间：取同一批号橘红痰咳液，分别于不同日期，依照以上方法检测指纹图谱，并采用“中药色谱指纹图谱相似度评价系统”进行相似度评价。其中，GC指纹图谱的相似度分别为0.988、0.993、0.984，RSD为0.46％；GC-MS指纹图谱的相似度分别为0.990、0.983、0.988，RSD为0.37％。
(2)不同分析人员：取同一批号橘红痰咳液，由不同人员分别依照以上方法检测指纹图谱，并采用“中药色谱指纹图谱相似度评价系统”进行相似度评价。其中，GC指纹图谱的相似度分别为0.988、0.986、0.977，RSD为0.60％；GC-MS指纹图谱的相似度分别为0.979、0.972、0.983，RSD为0.57％，均表明方法中间精密度良好。
实施例2：橘红痰咳液中挥发性成分的GC检测方法
1.1仪器
Agilent7890AGC系统；色谱柱为HP-5(30m×0.32mm，0.25μm)毛细管柱。
1.2试剂
环己烷为色谱纯；水为纯化水。
1.3试药
橘红痰咳液(批号：20141104)，由广州市香雪制药股份有限公司旗下化州中药厂生产。
2方法与结果
2.1供试品溶液制备
取橘红痰咳液20mL于圆底烧瓶中，加超纯水300mL，混合均匀后，连接挥发油收集器，自挥发油收集器上端加入适量水使之充满收集器的刻度管部分，然后加环己烷2mL，加热，保持微沸5h，取环己烷层至5ml容量瓶中，并用环己烷定容至刻度，加入无水硫酸钠脱水后过滤，取续滤液即得供试品溶液。
2.2测定
精密吸取供试品溶液各2μL，注入气相色谱仪，测定，即得橘红痰咳液挥发性成分的GC图谱。色谱条件：采用分流方式进样，分流比100:1；载气为高纯氮气，流量1.5mL/min；进样口温度240℃；检测器为氢火焰离子化检测器，检测器温度270℃；柱温为程序升温：初始柱温60℃，保持2min，以10℃/min速度升温至150℃，保持5min，以8℃/min速度升温至230℃，保持15min。
将供试样品GC图谱和实施例1所述GC标准指纹图谱数据导入“中药色谱指纹图谱相似度评价系统”进行相似度评价，结果为0.948，相似度良好，判定该批产品合格。
实施例3：无糖型橘红痰咳液挥发性成分的GC-MS检测方法
1.1仪器
AgilentGC/QQQ系统；色谱柱为HP-5(30m×0.32mm，0.25μm)毛细管柱。
1.2试剂
正己烷为色谱纯；水为纯化水。
1.3试药
无糖型橘红痰咳液(批号：20141005)，由广州市香雪制药股份有限公司旗下化州中药厂生产。
2方法与结果
2.1供试品溶液制备
取无糖型橘红痰咳液50mL于圆底烧瓶中，加超纯水500mL，混合均匀后，连接挥发油收集器，自挥发油收集器上端加入适量水使之充满收集器的刻度管部分，然后加正己烷2mL，加热，保持微沸5h，取正己烷层至10mL容量瓶中，并用正己烷定容至刻度，加入无水硫酸钠脱水后过滤，取续滤液即得供试品溶液。
2.2测定
精密吸取供试品溶液2μL，注入气相色谱-质谱联用仪，测定，即得无糖型橘红痰咳液挥发性成分的GC-MS图谱。色谱条件：采用分流方式进样，分流比100:1；载气为高纯氦气，流量1.5mL/min；进样口温度240℃；柱温为程序升温：初始柱温50℃，保持2min，以10℃/min速度升温至150℃，保持2min，以8℃/min速度升温至240℃，保持15min。质谱条件：电离方式为EI源，离子源温度230℃，电子能量-70eV，进样口温度250℃，辅助加热区温度250℃；质量扫描范围10-1000amu。
将供试样品GC-MS图谱和实施例1所述GC-MS标准指纹图谱数据导入“中药色谱指纹图谱相似度评价系统”进行相似度评价，结果为0.924，相似度良好。并利用NIST08质谱库检索对主要的共有峰进行化学成分鉴定，结果显示成分一致，判定该批产品合格。
实施例4：橘红痰咳煎膏挥发性成分的检测方法
1仪器与试药
1.1仪器
Agilent7890AGC系统；AgilentGC/QQQ系统；色谱柱为HP-INNOWAX(30m×0.32mm，0.25μm)毛细管柱。
1.2试剂
环己烷为色谱纯；水为纯化水。
1.3试药
橘红痰咳煎膏(批号：20141102)，由广州市香雪制药股份有限公司旗下化州中药厂生产。
2方法与结果
2.1供试品溶液制备
取橘红痰咳煎膏50g于圆底烧瓶中，加超纯水500mL，混合均匀后，连接挥发油收集器，自挥发油收集器上端加入适量水使之充满收集器的刻度管部分，然后加环己烷2mL，加热，保持微沸5h，取环己烷层至10mL容量瓶中，并用环己烷定容至刻度，加入无水硫酸钠脱水后过滤，取续滤液即得供试品溶液。
2.2测定
2.2.1GC测定
精密吸取供试品溶液各2μL，注入气相色谱仪，测定，即得橘红痰咳煎膏挥发性成分的GC图谱。色谱条件：采用分流方式进样，分流比20:1；载气为高纯氮气，流量2.0mL/min；进样口温度240℃；检测器为氢火焰离子化检测器，检测器温度270℃；柱温为程序升温：初始柱温50℃，保持5min，以8℃/min速度升温至180℃，保持1min，以5℃/min速度升温至240℃，保持10min。
将供试样品GC图谱和实施例1所述GC标准指纹图谱数据导入“中药色谱指纹图谱相似度评价系统”进行相似度评价，结果为0.921，相似度良好。
2.2.2GC-MS测定
精密吸取供试品溶液2μL，注入气相色谱-质谱联用仪，测定，即得橘红痰咳煎膏挥发性成分的GC-MS图谱。色谱条件：采用分流方式进样，分流比20:1；载气为高纯氦气，流量2.0mL/min；进样口温度240℃；柱温为程序升温：初始柱温60℃，保持5min，以12℃/min速度升温至140℃，保持5min，以5℃/min速度升温至220℃，保持20min。质谱条件：电离方式为EI源，离子源温度230℃，电子能量-70eV，进样口温度250℃，辅助加热区温度250℃；质量扫描范围10-1000amu。
将供试样品GC-MS图谱和实施例1所述GC-MS标准指纹图谱数据导入“中药色谱指纹图谱相似度评价系统”进行相似度评价，结果为0.938，相似度良好。并利用NIST08质谱库检索对主要的共有峰进行化学成分鉴定，结果显示成分一致，判定该批产品合格。
以上所述实施例的各技术特征可以进行任意的组合，为使描述简洁，未对上述实施例中的各个技术特征所有可能的组合都进行描述，然而，只要这些技术特征的组合不存在矛盾，都应当认为是本说明书记载的范围。
以上所述实施例仅表达了本发明的几种实施方式，其描述较为具体和详细，但并不能因此而理解为对发明专利范围的限制。应当指出的是，对于本领域的普通技术人员来说，在不脱离本发明构思的前提下，还可以做出若干变形和改进，这些都属于本发明的保护范围。因此，本发明专利的保护范围应以所附权利要求为准。
Claims (10)
1.一种橘红痰咳制剂中挥发性成分指纹图谱的构建方法，其特征在于，包括如下步骤：
(1)供试品溶液制备：精密称取橘红痰咳制剂，用水蒸气蒸馏法、溶剂提取法或超声提取法提取挥发性成分，以溶剂溶解稀释后，即得供试品溶液；
(2)测定：精密吸取所述供试品溶液，注入气相色谱仪，测定，即得由10个共有特征峰构成的橘红痰咳制剂中挥发性成分的指纹图谱；或，
精密吸取所述供试品溶液，注入气相色谱-质谱联用仪，测定，即得由11个共有特征峰构成的橘红痰咳制剂中挥发性成分的指纹图谱。
2.根据权利要求1所述的橘红痰咳制剂中挥发性成分指纹图谱的构建方法，其特征在于，所述气相色谱仪和所述气相色谱-质谱联用仪中气相色谱的测定条件均为：
色谱柱为毛细管柱；采用分流或不分流进样方式；进样口温度为220-260℃；载气为高纯氮气，流量为0.5-5.0mL/min；采用程序升温方式：初始温度为50-80℃，于10-60min内程序升温至220-280℃，保持0-20min。
3.根据权利要求2所述的橘红痰咳制剂中挥发性成分指纹图谱的构建方法，其特征在于，所述程序升温方式为：初始温度为50-60℃，保持1-5min；以8-12℃/min速度升温至140-180℃，保持1-5min；以5-10℃/min速度升温至220-240℃，保持10-20min。
4.根据权利要求1-3任一项所述的橘红痰咳制剂中挥发性成分指纹图谱的构建方法，其特征在于，所述气相色谱仪的测定条件为：
色谱柱：HP-INNOWAX或HP-5系列石英毛细管柱；采用分流方式进样，分流比20-100:1；载气为高纯氮气，流量1.0-2.0mL/min；进样口温度240℃；检测器为氢火焰离子化检测器，检测器温度270℃；采用程序升温方式：初始温度60℃，保持2min；以10℃/min速度升温至150℃，保持5min；以8℃/min速度升温至230℃，保持15min。
5.根据权利要求1-3任一项所述的橘红痰咳制剂中挥发性成分指纹图谱的构建方法，其特征在于，所述气相色谱-质谱联用仪的测定条件为：
气相色谱的测定条件：色谱柱：HP-INNOWAX或HP-5系列石英毛细管柱；采用分流方式进样，分流比20-100:1；载气为高纯氦气，流量1.0-2.0mL/min；进样口温度240℃；采用程序升温方式测定：初始温度50℃，保持2min；以10℃/min速度升温至150℃，保持2min；以8℃/min速度升温至240℃，保持15min；
质谱的测定条件：采用的离子源为EI，离子源温度230℃，电子能量-70eV；进样口温度250℃，辅助加热区温度250℃；质量扫描范围10-1000amu。
6.根据权利要求1-3任一项所述的橘红痰咳制剂中挥发性成分指纹图谱的构建方法，其特征在于，所述提取挥发性成分的方法为：
精密称取橘红痰咳制剂至烧瓶，加水混合后，连接挥发油收集器，自所述挥发油收集器上端加水至充满刻度部分，再加入有机溶剂；
加热至回流4.0-6.0小时后，取所述有机溶剂，即可，
其中，所述有机溶剂为乙醚、环己烷、正己烷、二氯甲烷或乙酸乙酯。
7.一种橘红痰咳制剂中挥发性成分的检测方法，其特征在于，包括如下步骤：
(1)供试品溶液制备：精密称取橘红痰咳制剂，用水蒸气蒸馏法、溶剂提取法或超声提取法提取挥发性成分，以溶剂溶解稀释后，即得供试品溶液；
(2)测定：精密吸取所述供试品溶液，注入气相色谱仪测定，即可；或，
精密吸取所述供试品溶液，注入气相色谱-质谱联用仪测定，即可，其中，
所述气相色谱仪和所述气相色谱-质谱联用仪中气相色谱的测定条件均为：
色谱柱为毛细管柱；采用分流或不分流进样方式；进样口温度为220-260℃；载气为高纯氮气，流量为0.5-5.0mL/min；采用程序升温方式：初始温度为50-80℃，于10-60min内程序升温至220-280℃，保持0-20min。
8.根据权利要求7所述的橘红痰咳制剂中挥发性成分的检测方法，其特征在于，所述程序升温方式为：初始温度为50-60℃，保持1-5min；以8-12℃/min速度升温至140-180℃，保持1-5min；以5-10℃/min速度升温至220-240℃，保持10-20min。
9.根据权利要求7或8所述的橘红痰咳制剂中挥发性成分的检测方法，其特征在于，所述气相色谱仪的测定条件为：
色谱柱：HP-INNOWAX或HP-5系列石英毛细管柱；采用分流方式进样，分流比20-100:1；载气为高纯氮气，流量1.0-2.0mL/min；进样口温度240℃；检测器为氢火焰离子化检测器，检测器温度270℃；采用程序升温方式：初始温度60℃，保持2min；以10℃/min速度升温至150℃，保持5min；以8℃/min速度升温至230℃，保持15min，或，
所述气相色谱-质谱联用仪的测定条件为：
气相色谱的测定条件：色谱柱：HP-INNOWAX或HP-5系列石英毛细管柱；采用分流方式进样，分流比20-100:1；载气为高纯氦气，流量1.0-2.0ml/min；进样口温度240℃；采用程序升温方式：初始温度50℃，保持2min；以10℃/min速度升温至150℃，保持2min；以8℃/min速度升温至240℃，保持15min；
质谱的测定条件：采用的离子源为EI，离子源温度230℃，电子能量-70eV；进样口温度250℃，辅助加热区温度250℃；质量扫描范围10-1000amu。
10.根据权利要求7或8所述的橘红痰咳制剂中挥发性成分的检测方法，其特征在于，所述提取挥发性成分的方法为：
精密称取橘红痰咳制剂至烧瓶，加水混合后，连接挥发油收集器，自所述挥发油收集器上端加水至充满刻度部分，再加入有机溶剂；
加热至回流4.0-6.0小时后，取所述有机溶剂，即可，
其中，所述有机溶剂为乙醚、环己烷、正己烷、二氯甲烷或乙酸乙酯。
Priority Applications (1)
| Application Number | Priority Date | Filing Date | Title |
|---|---|---|---|
| CN201510811340.7A CN105372346B (zh) | 2015-11-19 | 2015-11-19 | 橘红痰咳制剂中挥发性成分指纹图谱的构建及检测方法 |
Applications Claiming Priority (1)
| Application Number | Priority Date | Filing Date | Title |
|---|---|---|---|
| CN201510811340.7A CN105372346B (zh) | 2015-11-19 | 2015-11-19 | 橘红痰咳制剂中挥发性成分指纹图谱的构建及检测方法 |
Publications (2)
| Publication Number | Publication Date |
|---|---|
| CN105372346A true CN105372346A (zh) | 2016-03-02 |
| CN105372346B CN105372346B (zh) | 2017-08-25 |
Family
ID=55374728
Family Applications (1)
| Application Number | Title | Priority Date | Filing Date |
|---|---|---|---|
| CN201510811340.7A Active CN105372346B (zh) | 2015-11-19 | 2015-11-19 | 橘红痰咳制剂中挥发性成分指纹图谱的构建及检测方法 |
Country Status (1)
| Country | Link |
|---|---|
| CN (1) | CN105372346B (zh) |
Cited By (2)
| Publication number | Priority date | Publication date | Assignee | Title |
|---|---|---|---|---|
| CN109115911A (zh) * | 2018-09-28 | 2019-01-01 | 广东食品药品职业学院 | 化橘红挥发性成分指纹图谱的构建方法及种类的鉴别方法 |
| CN109298108A (zh) * | 2018-12-07 | 2019-02-01 | 赣南医学院 | 一种脐橙皮中挥发油和黄酮苷类成分的提取及检测方法 |
Citations (2)
| Publication number | Priority date | Publication date | Assignee | Title |
|---|---|---|---|---|
| CN103364506A (zh) * | 2013-07-24 | 2013-10-23 | 中山大学 | 一种化橘红有效部位及其制剂的质量控制方法 |
| CN104849375A (zh) * | 2015-06-09 | 2015-08-19 | 广州市香雪制药股份有限公司 | 橘红痰咳制剂的检测方法 |
-
2015
- 2015-11-19 CN CN201510811340.7A patent/CN105372346B/zh active Active
Patent Citations (2)
| Publication number | Priority date | Publication date | Assignee | Title |
|---|---|---|---|---|
| CN103364506A (zh) * | 2013-07-24 | 2013-10-23 | 中山大学 | 一种化橘红有效部位及其制剂的质量控制方法 |
| CN104849375A (zh) * | 2015-06-09 | 2015-08-19 | 广州市香雪制药股份有限公司 | 橘红痰咳制剂的检测方法 |
Non-Patent Citations (5)
| Title |
|---|
| HAN-BING HAN等: "One-step column chromatographic extraction with gradient elution followed by automatic separation of volatiles, flavonoids and polysaccharides from Citrus grandis", 《FOOD CHEMISTRY》 * |
| 伍虹: "化橘红主要功能性成分分析及其果茶的研制", 《中国优秀硕士学位论文全文数据库 工程科技I辑》 * |
| 伍虹等: "化橘红挥发油化学成分 GC- MS 分析", 《农产品加工·学刊》 * |
| 李春等: "化橘红挥发油成分分析研究", 《精细化工中间体》 * |
| 马应丹等: "化橘红香精油化学成分的研究", 《仲恺农业技术学院学报》 * |
Cited By (2)
| Publication number | Priority date | Publication date | Assignee | Title |
|---|---|---|---|---|
| CN109115911A (zh) * | 2018-09-28 | 2019-01-01 | 广东食品药品职业学院 | 化橘红挥发性成分指纹图谱的构建方法及种类的鉴别方法 |
| CN109298108A (zh) * | 2018-12-07 | 2019-02-01 | 赣南医学院 | 一种脐橙皮中挥发油和黄酮苷类成分的提取及检测方法 |
Also Published As
| Publication number | Publication date |
|---|---|
| CN105372346B (zh) | 2017-08-25 |
Similar Documents
| Publication | Publication Date | Title |
|---|---|---|
| Ye et al. | Chemical fingerprinting of Liuwei Dihuang Pill and simultaneous determination of its major bioactive constituents by HPLC coupled with multiple detections of DAD, ELSD and ESI-MS | |
| Duan et al. | Study on the destructive effect to inherent quality of Fritillaria thunbergii Miq.(Zhebeimu) by sulfur-fumigated process using chromatographic fingerprinting analysis | |
| CN105738546B (zh) | 毛郁金药材指纹图谱的建立方法及其指纹图谱 | |
| CN105467059A (zh) | 一种治疗血尿的中药组合物的质量检测方法 | |
| CN105588885A (zh) | 一种丹参多酚酸提取物指纹图谱及有关成分的含量测定方法 | |
| CN105548385A (zh) | 醒脑静注射液液相指纹图谱的测定方法及其标准指纹图谱 | |
| CN102621264A (zh) | 一种含有人参皂苷类成分药材及制剂指纹图谱的建立方法 | |
| CN104297373B (zh) | 一种草果与草豆蔻的指纹图谱鉴别方法 | |
| CN113419000B (zh) | 一种基于非靶向代谢组学鉴别25头与80头以下三七的方法 | |
| CN108872410A (zh) | 一种润肺膏指纹图谱的建立方法及其指纹图谱 | |
| CN105372346A (zh) | 橘红痰咳制剂中挥发性成分指纹图谱的构建及检测方法 | |
| CN104849375A (zh) | 橘红痰咳制剂的检测方法 | |
| CN108152427A (zh) | 一种基于液质联用的中成药快速鉴别方法 | |
| CN102133333A (zh) | 一种参麦注射液质谱指纹图谱质量控制方法 | |
| CN105548384B (zh) | 一种口鼻清喷雾剂的检测方法 | |
| CN105548411B (zh) | 一种正天丸制剂中挥发性成分的特征图谱的构建方法及正天丸制剂中挥发性成分的检测方法 | |
| CN107576739A (zh) | 一种龙牡壮骨颗粒的hplc指纹图谱检测方法 | |
| CN108918696B (zh) | 一种健脾益肺方指纹图谱的建立方法及质量控制方法 | |
| CN106124668A (zh) | 一种益心舒片的指纹图谱检测方法 | |
| CN115575551A (zh) | 白及的检测方法、白及对照提取物的制备及其应用 | |
| CN102441058B (zh) | 一种养血清脑颗粒的气相色谱指纹图谱检测方法 | |
| Pan et al. | Liquid chromatography tandem mass spectrometry combined with Fourier transform mid-infrared spectroscopy and chemometrics for comparative analysis of raw and processed Gentiana rigescens | |
| CN102023188A (zh) | 一种灯盏花乙素的质量控制方法 | |
| CN111505156B (zh) | 一种用于小蓟配方颗粒的指纹谱图质量测定方法 | |
| CN108362800A (zh) | Hplc指纹图谱的构建方法及hplc指纹图谱 |
Legal Events
| Date | Code | Title | Description |
|---|---|---|---|
| C06 | Publication | ||
| PB01 | Publication | ||
| C10 | Entry into substantive examination | ||
| SE01 | Entry into force of request for substantive examination | ||
| GR01 | Patent grant | ||
| GR01 | Patent grant |