CN103285106B - 一种治疗肠黏膜损伤的中药组合物及其制备方法和用途 - Google Patents

Abstract

本发明属于中药领域，涉及一种治疗结直肠癌手术后和(或)化疗后肠黏膜损伤的中药组合物及其制备方法。本发明按中医“上工治未病”的思路，采用健脾清热解毒原则采用中药材党参10～20份，白术10～20份，茯苓10～20份，煨葛根10-20份，黄芩5-15份，黄连3-15份，黄芪10-20份制成治疗肠黏膜损伤的中药组合物，可长期用于结直肠癌手术后和(或)化疗后肠黏膜损伤的辅助治疗以及结直肠癌脾虚湿热证候的治疗，该中药组合物能明显减少手术后和(或)化疗后腹痛腹泻等临床症状，修复肠黏膜损伤的作用，从而提高患者生活质量，延长结直肠癌无病生存期；具有很强的增效减毒作用。

Description

一种治疗肠黏膜损伤的中药组合物及其制备方法和用途

技术领域：

本发明属于中药领域，涉及中药复方制剂，具体涉及一种治疗肠黏膜损伤的中药组合物及其制备方法和用途。

背景技术：

近年我国结直肠癌的发病率已位居恶性肿瘤第三位，目前手术切除为结直肠癌的根治性治疗措施，对于IIB期以上或具有高危因素的II期术后患者化疗和/或放疗是术后常规治疗，但仍有约50％的结直肠癌患者于手术根治后二年内可出现复发或转移，其中70％的结直肠癌患者可出现肝肺转移。结直肠癌的转移是临床治疗的难点，也是导致结直肠癌患者死亡的主要原因之一，结直肠癌的高转移率、高致死率严重威胁人类健康，新近制订的《中国癌症预防与控制规划纲要》已将结直肠癌列为我国现阶段重点防治的8大癌症之一。

肠屏障包括肠黏膜屏障、化学屏障、生物屏障和免疫屏障，其主要功能是抵御肠腔内细菌及毒素进入体内。黏膜屏障由肠黏膜细胞和细胞间的连接构成，肠黏膜细胞萎缩、凋亡、细胞连接的松弛可致肠道通透性增加，为肠内细菌及毒素提供通道；化学屏障(肠-肝轴)指肠上皮细胞分泌的黏液及肠内存在的消化液和消化酶等物质及其发挥的化学作用。通过在肠黏膜上形成黏液凝胶层、促进肠道运动和诱导肠上皮细胞迁移等作用增强肠道屏障的防御能力，促进肠黏膜损伤的修复；免疫屏障由黏膜和黏膜下淋巴细胞、集合淋巴小结和肠腔内的分泌型IgA(sIgA)等构成，不仅可防止有害微生物入侵，且能防止异源性抗原引起的变态反应，亦参与全身性免疫调节；生物屏障以厌氧菌为主的肠道生理性细菌与肠黏膜紧密黏附，产生定植抵抗力。总之，肠道生物屏障借助于固有的肠黏膜屏障、肠道菌群产生的抑菌物质及其肠道免疫系统共同防止病原菌的黏附和定植，维持肠道内微生态环境平衡。

手术和化疗在恶性肿瘤治疗中具有重要作用，结直肠癌患者手术后、接受反复化疗后，化疗药物对肠屏障具有破坏作用，一方面引起肠通透性增加，肠腔内菌群移位；另一方面减少肠黏膜有效吸收面积引起营养物质吸障碍和不同程度的腹泻。研究证实^[3]，化疗时肠屏障功能障碍的发生与化疗药物、剂量及化疗方式有关，亦与化疗前患者体质相关。

临床表现类似中医的“泄泻”，“腹痛”，“便血”等证候，大量文献报导显示此类患者多见脾虚湿热内蕴之证。手术或放化疗使患者正气虚，脾胃功能不健，对于水谷、水湿运化失常，湿浊内生，久而化热而致病，故脾虚为本，湿热内阻为标。

我们检索近十年有关结直肠癌转移机理研究的相关文献，总体认为结直肠癌转移受多种基因调控，主要涉及二个方面：(1)相关原癌/抑癌基因的改变、血管生成、淋巴系统与结直肠癌转移密切相关。(2)肠黏膜损伤与结直肠癌发生、发展、浸润、转移密切相关。因此，探寻有效修复肠黏膜损伤药物，进而预防结直肠癌转移的研究意义重大。

目前治疗肠黏膜损伤疾病的药物较多，其治疗作用也各有差异。而目前未见有与本发明组配相同制成的治疗结直肠癌术后和/或化疗后出现肠黏膜损伤的药物。

发明内容：

本发明要解决的技术问题是提供一种治疗肠黏膜损伤的中药组合物，尤其涉及一种治疗结直肠癌患者手术、反复化疗后出现肠黏膜损伤的中药组合物。为此，本发明还提供该中药组合物的制备方法和用途。

该中药组合物可长期用于临床结直肠癌手术后和/或反复化疗的患者，能修复肠黏膜，明显减轻肠黏膜损伤，改善患者腹痛、腹泻等肠屏障功能障碍的临床症状；该中药组合物用于结直肠癌手术后和化疗后的辅助治疗，具有很强的修复作用，能明显缓解结直肠癌患者的临床症状，提高其生活质量。

本发明为达到修复肠黏膜损伤，从而延缓结直肠癌复发转移，按中医“上工治未病”的思路，采用健脾清热祛邪原则治疗II-III期结直肠癌患者，以达到“扶正固本以驱邪”的目的。

具体而言，本发明采用中药材党参，黄芪，白术，茯苓，煨葛根，黄芩，黄连，将这些药材组合使得各药物功效产生协同作用，从而制成本发明治疗结直肠癌手术后和或化疗后出现肠黏膜损伤的中药组合物(以下简称：固肠方)。

本发明所涉及的中药材党参，黄芪，白术，茯苓，煨葛根，黄芩，黄连为《中国药典》所收载中药，并符合药典质量要求。

本发明的治疗结直肠癌手术后和或化疗后出现肠黏膜损伤的药物组合物(固肠方)，由下述重量份的原料药制成：党参10～20份，白术10～20份，茯苓10～20份，煨葛根10-20份，黄芩5-15份，黄连3-15份，黄芪10-20份。

本发明中，优选原料药的重量份是：党参12～18份，白术12～18份，茯苓12～18份，煨葛根12-18份，黄芩8-12份，黄连5-12份，黄芪12-18份

本发明中，另一优选原料药的重量份是：党参15～17份，白术15～17份，茯苓15～17份，煨葛根15-17份，黄芩7-10份，黄连6-10份，黄芪15-17份。

本发明中，最优选原料药的重量份是：党参16份，白术16份，茯苓16份，煨葛根16份，黄芩8份，黄连8份，黄芪16份。

本发明的中药组合物可以采用中药制剂的常规方法制备成任何一种中药内服制剂，所述的中药内服制剂包括水煎剂、颗粒剂、片剂、胶囊剂或口服液等。

此外，本发明还提供一种该中药组合物的制备方法，主要包括如下步骤：采用水加热回流提取法提取所述重量份的原料药材中有效成分，可加水8～15倍量，加热回流提取1～2次，每次1～2小时，过滤、合并提取液，浓缩干燥后得到干浸膏，粉碎成细粉，过80目筛后与本领域常规制剂辅料(常规制剂赋形剂)混合制粒，将颗粒装胶囊或压制成片剂或直接包装成颗粒剂。

另外，本发明还提供该中药组合物在制备治疗肠黏膜损伤药物中的用途，尤其在制备治疗结直肠癌术后和/或化疗后出现的肠黏膜损伤药物中的用途。

本发明中药组合物经动物实验，结果表明，中、高剂量药物对化疗药物氟尿嘧啶致肠黏膜屏障有显著的保护作用，其可能机制与下调TNF-α、IL-6的表达、减少化疗药物致肠道的炎症反应，从而减轻肠黏膜损伤有关。临床研究采用内毒素，尿乳果糖/甘露醇、中医证候疗效指标观察，结果显示，能明显减少腹痛腹泻的临床症状，修复肠黏膜损伤，用于化疗后的副反应的辅助治疗，具有较强的修复肠黏膜损伤，协助化疗药物的增效作用；能明显延长结直肠癌患者复发转移的无病生存期；延长患者的总生存期、提高其生活质量。

本发明中药组合物及复方制剂具有如下优势和特点：

1、经临床应用，可长期用于结直肠癌手术后和(或)化疗后肠黏膜损伤的辅助治疗以及结直肠癌脾虚湿热证候的治疗，能明显延长结直肠癌患者无病生存期，提高患者的生存质量。

2、能明显改善患者手术后和(或)化疗后腹痛腹泻等临床症状，配合西医的手术和(或)化疗治疗具有显著的减毒增效作用。

3、应用于健脾扶正中医治疗结直肠癌手术和(或)化疗后患者，能明显提高结直肠癌患者的生存质量，配合清热解毒的药物能显著减少肠黏膜损伤的临床症状。

4、适用于经手术和(或)化疗后肠黏膜损伤的治疗、临床多见脾虚湿热兼瘀毒证候的III期结直肠癌患者。

为了便于理解，以下将通过具体实施例对本发明的药物组合物及复方制剂进行详细地描述。需要特别指出的是，具体实例仅是为了说明，显然本领域的普通技术人员可以根据本文说明，在本发明的范围内对本发明做出各种各样的修正和改变，这些修正和改变也纳入本发明的范围内。

附图说明：

图1是试验例2中血浆内毒素标准曲线示意图；

图2是试验例2中正常人尿液样品的色谱图(甘露醇、乳糖以及乳果糖标准溶液色谱图)，其中，1代表甘露醇(mannitol)，2代表乳糖(lactose)，3代表乳果糖(lactulose)；

图3是试验例2中结直肠癌术后患者肠粘膜屏障损伤尿液样品的色谱图，其中，1代表甘露醇(mannitol)，2代表乳糖(lactose)，3代表乳果糖(lactulose)。

具体实施方式：

以下通过制备实施例对本发明作进一步的阐述：

实施例1颗粒剂

称取原料药：党参100g，白术200g，茯苓100g，煨葛根200g，黄芩50g，黄连150g，黄芪100g。

将上述原料药加水8倍量，加热回流提取1次，每次2小时，过滤、合并提取液，浓缩，干燥得干浸膏180g，粉碎成细粉，加入常规制剂赋形剂，混合均匀后制粒，包装成颗粒剂100包。每包含中药组合物1800mg。用法：每次1包，每日3次，每周用药7天，4周为一疗程。

实施例2片剂

称取原料药：党参200g，白术100g，茯苓200g，煨葛根100g，黄芩150g，黄连30g，黄芪200g。

将上述原料药加水15倍量，加热回流提取2次，每次1小时，过滤、合并提取液，浓缩，干燥得干浸膏182g，粉碎成细粉，加入常规制剂赋形剂，混合均匀后制粒，压制成片剂，片重600mg。每片含中药组合物440mg。用法：每次4片，每日3次，每周用药7天，4周为一疗程。

实施例3胶囊剂

称取原料药：党参160g，白术160g，茯苓160g，煨葛根160g，黄芩80g，黄连80g，黄芪160g。

将上述原料药加水10倍量，加热回流提取2次，每次1小时，过滤、合并提取液，浓缩，干燥得干浸膏185g，粉碎成细粉，加入常规制剂赋形剂，混合均匀后制粒，装0号胶囊，每粒500mg。每粒含中药组合物450mg。用法：每次4粒，每日3次，每周用药7天，4周为一疗程。

实施例4胶囊剂

称取原料药：党参120g，白术180g，茯苓120g，煨葛根180g，黄芩80g，黄连120g，黄芪120g。

将上述原料药加水12倍量，加热回流提取1次，每次2小时，过滤、合并提取液，浓缩，干燥得干浸膏176g，粉碎成细粉，加入常规制剂赋形剂，混合均匀后制粒，装0号胶囊，每粒500mg。每粒含中药组合物440mg。用法：每次4粒，每日3次，每周用药7天，4周为一疗程。

实施例5胶囊剂

称取原料药：党参180g，白术120g，茯苓180g，煨葛根120g，黄芩120g，黄连50g，黄芪180g。

将上述原料药加水13倍量，加热回流提取1次，每次2小时，过滤、合并提取液，浓缩，干燥得干浸膏187g，粉碎成细粉，加入常规制剂赋形剂，混合均匀后制粒，装0号胶囊，每粒500mg。每粒含中药组合物450mg。用法：每次4粒，每日3次，每周用药7天，4周为一疗程。

实施例6片剂

称取原料药：党参150g，白术170g，茯苓150g，煨葛根170g，黄芩70g，黄连100g，黄芪150g。

将上述原料药加水13倍量，加热回流提取1次，每次2小时，过滤、合并提取液，浓缩，干燥得干浸膏181g，粉碎成细粉，加入常规制剂赋形剂，混合均匀后制粒，压制成片剂，片重600mg。每片含中药组合物440mg。用法：每次4片，每日3次，每周用药7天，4周为一疗程。

实施例7胶囊剂

称取原料药：党参170g，白术150g，茯苓170g，煨葛根150g，黄芩100g，黄连60g，黄芪170g。

将上述原料药加水13倍量，加热回流提取1次，每次2小时，过滤、合并提取液，浓缩，干燥得干浸膏178g，粉碎成细粉，加入常规制剂赋形剂，混合均匀后制粒，装0号胶囊，每粒500mg。每粒含中药组合物450mg。用法：每次4粒，每日3次，每周用药7天，4周为一疗程。

实施例8水煎剂

称取原料药：党参16g，白术16g，茯苓16g，煨葛根16g，黄芩8g，黄连8g，黄芪16g。

将上述原料药用水煎煮提取2次，第一次煎煮加水1500ml，煎煮时间为60分钟，取剩余汁液150ml，第二次煎煮加水1000ml，煎煮时间为45分钟，取剩余汁液150ml，二次汁液混合，每日口服二次，每次150ml。

下面进一步通过试验例对本发明中药组合物的药效试验做进一步阐述：

试验例1：动物肠黏膜修复实验

药物：以黄连素为阳性对照药(上海信谊天平药业有限公司委托上海信谊九福药业有限公司生产。批号：110304。配制：用生理盐水稀释至8mg/ml)，按药效学研究有关动物剂量折算方法，将本发明中药组合物配制成三种浓度，中剂量为临床常用剂量浓度，低剂量为中剂量浓度稀释后四倍，高剂量为中剂量浓度浓缩后四倍，分别记做低、中、高剂量组(以下称为：低剂量固肠方组、中剂量固肠方组、高剂量固肠方组)，作为肠黏膜损伤小鼠试验供试品。

试验动物品系：昆明种小鼠(上海实验动物中心，动物合格证号2008001605063)，体重：23-25克，性别：雄性，每组动物数：10只。上海中医药大学试验动物房饲养。

试验方法：根据氟尿嘧啶小鼠的半数致死量和中毒剂量，确定腹腔给药剂量为5FU 75mg/kg，造模二天。

随机分组，设正常组、模型组、西药对照组、低剂量固肠方组、中剂量固肠方组、高剂量固肠方组六组。正常组10只，予腹腔注射0.9％NS 20ml/只，每日一次，造模二天。模型组、西药组、低剂量固肠方组、中剂量固肠方组、高剂量固肠方组将氟尿嘧啶按浓度5.0mg/ml，给予腹腔注射，每日一次，造模二天。六组均予正常饮食。

六组小鼠均于造模后第二天给予药物干预，正常组、模型组给予适量灌胃0.9％的生理盐水，西药对照组给予适量灌胃黄连素溶液，低剂量固肠方组、中剂量固肠方组、高剂量固肠方组给予相应浓度的固肠方药物，连续灌胃二周。

试验结果如表1-5所示。

表1肠黏膜损伤评分标准

表2各组回肠、结肠出现病理改变的样本数量、严重程度统计简表(n＝60)

表3各组回肠病理改变两两组间P值统计简表

※与正常组比较有显著性差异(P＜0.003)；★与模型组比较有显著性差异(P＜0.003)；

表4各组结肠病理改变两两组间P值统计简表

※与正常组比较有显著性差异(P＜0.003)；★与模型组比较有显著性差异(P＜0.003)；

表5各组回肠肠绒毛长度统计比较(X±SD，n＝60，单位：μm)

注：每个样本测量10根肠绒毛，测得后取均值。※与正常组比较有显著性差异(P＜0.05)；★与模型组比较有显著性差异(P＜0.05)；

以上试验结果表明，中、高剂量固肠方组对化疗药物氟尿嘧啶致肠黏膜屏障有显著的保护作用，其可能机制与下调TNF-α、IL-6的表达、减少化疗药物致肠道的炎症反应，从而减轻肠黏膜损伤有关。可见，本发明的中药组合物具有健脾扶正、清热解毒功效、可用于治疗结直肠癌术后和或化疗后肠黏膜损伤的作用，其治疗效果显著，制备方法能够保持处方的药效，产品质量的稳定。

试验例2临床试验

临床观察严格按照2003年卫生部发布的《中药新药临床研究指导原则》规定的内容，侧重观察该复方对治疗手术后和或化疗后致肠黏膜损伤的疗效及改善中医腹痛、腹泻等中医证候及生活质量的疗效，并进行如下研究和分析：

观察对象为：选择上海中医药大学附属曙光医院普外科、肿瘤科2010年1月～2011年6月期间收治的结直肠癌(均经手术病理确诊)手术后和或接受二次以上化疗患者87例，剔除脱落病例7例，实际观察患者80例，信封法分成空白对照组25例，西药对照组25例，本发明中药组合物治疗组(以下简称中药治疗组)30例，其中男46例，女34例；年龄47～80岁，中位年龄53.8±1.19岁。手术及化疗期间出现的不良反应予以对症处理。

一、诊断标准和纳入标准

1.西医诊断标准：

1.1大肠癌诊断：采用Dukes’，TNM分期(美国肿瘤联合会AJCC制定2002年版)，对大肠癌进行准确诊断和分期；

1.2肠屏障功能障碍诊断依据：目前尚缺乏较为客观的临床诊断标准与统一的治疗方案。根据中华医学会消化病学分会制定的诊断依据如下(中华医学会消化病学分会2006年9月第26卷第9期：P620)：

①患者存在可能导致肠屏障功能障碍的危重疾病。

②在原发病基础上出现腹痛、腹胀、腹泻或便秘或消化道出血，不能耐受食物等症状以及肠鸣音减弱或消失等体征(需要排除麻醉和药物引起的肠鸣音变化)。

③血浆内毒素水平增高(ELISA法＞55.34EU/L)。

④通透性增加(高效液相色谱分析L/M＞0.178)或肠低灌注(尿液24h IFABP ELISA法＞17ng)。

⑤血腹水培养细菌阳性而无其它明确的感染病灶。

①+②为诊断所必须条件；①+②+③+④或①+②+⑤项可基本确诊，具备①+②+③可作为拟诊病例。

2.中医证候诊断标准：

中医大肠癌脾虚湿热证：按照2002年国家药品监督管理局制定的(《中药新药临床研究指导原则》中国医药科技出版社2002.P218)相关诊断标准：

主症：脘腹胀闷，口渴少饮，食少纳呆，大便溏泄，体倦乏力，神疲懒言，舌质淡，舌体胖或有齿印，舌苔黄腻，脉细弱。

次症：肢体困重，身热不扬，或汗出不解，腹胀满，恶心欲呕，身目发黄，色鲜明，脉濡数。凡具备主症3项；或主症2项加次症2项以上，结合舌脉即可诊断。大肠癌中医临床症状体征评分标准表见表7；

3.纳入标准：

3.1全部病例均经纤维结肠镜检查及病理检查确诊为大肠癌患者，经手术后(无瘤)，且行四次以上化疗或放疗28次以上治疗。

3.2临床症状为腹泻、腹痛、便秘等，诊断符合肠屏障功能障碍的患者，性别不限，年龄18-75岁。

3.3患者一般情况好，karnofsky评分＞60分，预计生存期＞3个月。

3.4中医症候量表，辨证为脾虚湿热证型。

3.5所有研究对象2周内未使用过微生态活菌制剂。

3.6自愿接受本研究计划观察，能随访，依从性好。

4..排除标准和脱落标准：

4.1有用药禁忌者如：胃肠梗阻患者，患者禁食中；

4.2观察期间病情进展，危及生命。

4.3药物过敏，用药不足1个疗程者。

4.4治疗组患者合并使用有调整肠道菌群功效的药物，抗生素药物，不作有效病例统计。

4.5孕妇和哺乳妇女除外。精神异常，癫痫患者除外。

4.6诊断不明的不纳入观察范围。

4.7未曾用药，未行检测者。患者失访，自行放弃治疗；

5.病例选择：(按照结直肠癌患者手术方式、病理类型及疾病分期)

结直肠癌患者手术前发现严重心、肝、肾功能不全，合并急性肠梗阻、穿孔、出血及术中发现肿瘤腹腔广泛转移、严重浸润、无法切除者不纳入本研究，故7例在研究过程中被剔除(空白对照组、西药对照组各有2例、中药治疗组3例)。患者入院后接受常规检查，包括腹部CT、肠镜等，治疗前均经病理检查明确诊断。年龄＞60岁的患者接受心动超声、24h动态心电图、动脉血气分析及肺功能检测，确定其对手术的耐受性。

空白对照组25例，其中男14例，女11例，年龄55.3±7.8岁，直肠癌根治术13例，乙状结肠癌根治术5例，右半结肠切除术2例，左半结肠切除术4例；横结肠癌根治术1例，病理类型：管状腺癌12例，乳头状癌4例，黏液腺癌6例，未分化癌3例；Dukes分期：A期4例，B期14例，C期7例。

西药对照组25例，其中男15例，女10例，年龄53.6±9.1岁，直肠癌根治术12例，乙状结肠癌根治术4例，右半结肠切除术2例，左半结肠切除术4例，横结肠癌根治术3例；病理类型：管状腺癌13例，乳头状癌5例，黏液腺癌5例，未分化癌2例；Dukes分期：A期3例，B期15例，C期7例。

中药治疗组30例，其中男17例，女13例，年龄52.4±8.3岁，直肠癌根治术30例，乙状结肠癌根治术5例，右半结肠切除术3例，左半结肠切除术5例，横结肠癌根治术3例；病理类型：管状腺癌15例，乳头状癌6例，黏液腺癌6例，未分化癌3例；Dukes分期：A期4例，B期18例，C期8例。见表6，两组资料具有可比性。

表6：各组结直肠癌患者治疗前一般资料数据统计表

三组病例的性别、年龄、治疗前肿瘤部位、手术方式、病理类型及Dukes分期的分布比较，经统计学分析差异均无统计学意义(P＞0.05)，具有可比性。

化疗方案：

采用氟尿嘧啶(5-FU)、四氢叶酸(CF)及奥沙利铂。CF(江苏恒瑞医药股份有限公司)0.2g加入5％葡萄糖液250mL中，静脉滴注，2h内滴完，1次/d；继之再滴注5-FU(江苏南通精华制药有限公司)450mg/m2加入5％葡萄糖液500mL，6～8h内完成，1次/d；均连续5d。奥沙利铂500mg/m2加入5％葡萄糖液500mL，2～3h内滴完，仅每个化疗开始的第1天应用。每组患者均接受二次化疗。

二、疗效评价标准：

1、中医证候疗效评定(见表7)

按照治疗前后临床证候积分值的变化评定疗效。

显著改善：治疗后积分值比治疗前积分值下降≥70％。

部分改善：治疗后积分值比治疗前积分值下降≥30％。

无改善：治疗前后积分无变化或治疗后积分值比治疗前积分值下降＜30％。

表7：结直肠癌中医临床症状体征评分标准表

表8：身体状况评分

2、肠道内毒素含量评定

按治疗前后血内毒素实际数值的变化评定疗效。

3、尿乳果糖/甘露醇比值

按治疗前后尿乳果糖/甘露醇比值实际数值的变化评定疗效。

4、C反应蛋白、肿瘤标志物十一项数值

按治疗前后C反应蛋白、肿瘤指标十一项实际数值的变化评定疗效。

5、胸腹部CT，肠镜，疾病进展时间

按治疗前后CT片的病灶的大小变化评定疗效，记录疾病进展的时间。

按治疗前后肠镜下病灶的大小有无评定疗效，记录疾病进展的时间。

三、治疗用药：

1、培菲康：

空白对照组给予生理盐水、维生素C、维生素B6等对症处理；

西药对照组患者化疗当天，开始口服培菲康谷氨酰胺颗粒(上海信谊制药有限责任公司)，420mg/次，每12h一次，温开水溶解后口服，28天为一个疗程，共计二个疗程。

2、固肠方：

中药治疗组给予固肠方，每日两次，28天为一个疗程，共计二个疗程。功效：健脾益气化湿清热；固肠方方药组成：党参9黄芪15白术9茯苓9煨葛根15黄芩9黄连9以上中药由曙光医院中药房提供并按标准流程煎煮制备，每日一剂，水煎液封装为2袋，160ml/袋，分早晚二次口服，每次口服一袋，连续服用二个疗程。

3、合并用药：

治疗期间禁止使用其它影响与治疗组和对照组药物疗效相同或相近的中药和西药。

四、.检测方法：

1、血浆中细菌内毒素含量测定

1.1血浆标本采集方法

分别于治疗前d0和治疗后d60，取外周静脉血，以无内毒素、肝素钠抗凝管采血，高速离心2500转/分，离心10分钟，分离血浆，离心吸取上层血浆适量，以内毒素检查用水5倍稀释并混合，加热后得到得样本稀释去蛋白血浆溶液备用。

1.2细菌内毒素工作标准品血浆溶液

抽取内毒素血取正常人1→5稀释去蛋白血浆溶液，再以内毒素用水稀释至1→10血浆溶液作为供试品介质。以1→10血浆溶液作为溶剂，分别配制浓度为5EU/ml、0.5EU/ml、0.05EU/ml和0.005EU/ml的内毒素标准品溶液。

1.3测定方法

按中国药典2010年版二部附录XI E“细菌内毒素检查法”方法2光度测定法中动态浊度法规定进行。

2、尿乳果糖/甘露醇测定

2.1尿液采集方法

肠通透性指标，治疗前d0和治疗后d60，进行尿L/M比值测定(高压液相色谱示差检测HPLC-RID)。测试前晚10时起禁食，测试日晨8时排空膀胱后，口服50mL测试液(含10g乳果糖和5g甘露醇)，30min后可自由饮水，2h后可进食，收集6h尿液，混匀后取其中10mL，在-20℃冰箱中保存待测。

2.2样品稀释及测定方法

样品经稀释、净化、过滤后进行色谱分析，以氢氧化钠-乙酸钠梯度淋洗液为流动相，流速1.0mL/min，采用Carbopac PA1(250×4mm)阴离子交换柱分离，脉冲积分安培检测器(PAD)检测，外标法定量。

五、统计学处理

数据以均数±标准差(x±s)表示；两组间的比较以重复测量双因素方差分析，采用SPSS11.5统计软件系统处理。

六、观察结果

1、中医症候疗效变化

观察指标包括：患者临床中医证候疗效，生活质量，生存期；安全性观察。

患者治疗前的症状以腹痛、腹胀、腹泻或便秘、肛门灼热，里急后重、纳呆、倦怠乏力等症状为主，经本发明药物组合物治疗后，多项症状的频数分布较前明显下降，具有统计学意义(P＜0.05)，见表9。

表9本发明中药组合物治疗前后临床症状出现积分累积分布情况n＝80例(％)。

观察期间80例患者中治疗组55例获得随访，4例失访，对照组25例获得随访，3例失访，总失访率8.04％(7/87例)。

结果显示：

中医证候的临床疗效：30例患者经肝癌一方治疗后，显效10例，有效15例，总有效率为83.33％。

生活质量KPS评分：

患者治疗前生活质量KPS评分为(66.53±4.37)分，治疗后为(83.12±7.26)分，治疗后较治疗前有明显改善，差异具有统计学意义(P＜0.01)。

2、血浆内毒素含量变化

正常人的血浆内毒素标准曲线：Log(y)＝2.97-0.18×log(x)R²＝0.995。见图1；正常人血浆内毒素(0.001-0.004)。

结直肠癌患者治疗前后中药治疗组、西药对照组同空白对照组相比，前二组血浆内毒素水平变化明显高于空白对照组，有显著性统计学意义，P＜0.05；中药治疗组和西药对照组相比，两者内毒素水平变化相近，两者无显著性统计学差异，P＞0.05见表10。

表10各组结直肠癌患者治疗后血浆内毒素含量变化单位：EU/ml

注：与空白对照组比较，西药对照组、中药治疗组治疗前后内毒素有显著性变化，有统计学差异，P＜0.05；西药对照组与中药治疗组两组治疗疗效相近，无显著性变化，无统计学差异，P＞0.05；

3、尿乳果糖/甘露醇比值测定结果

正常人尿L/M(0.026±0.006)，甘露醇、乳果糖标准溶液色谱图；见图2：结直肠癌患者肠屏障损伤甘露醇、乳果糖标准溶液色谱图；见图3。

结直肠癌患者治疗前后中药治疗组、西药对照组同空白对照组相比，前二组尿乳果糖/甘露醇比值变化明显高于空白对照组，有显著性统计学意义，P＜0.05；中药治疗组和西药对照组相比，尿乳果糖/甘露醇比值变化，无显著性差异，P＞0.05。见表11；

表11：各组结直肠癌患者治疗后尿乳果糖/甘露醇比值变化

注：与空白对照组比较，西药对照组、中药治疗组治疗前后内毒素有显著性变化，有统计学差异，P＜0.05；西药对照组与中药治疗组两组治疗疗效相近，无显著性变化，无统计学差异，P＞0.05；

不良反应观察结果：

80例患者服用该复方，有5例出现轻度腹泻，2例出现轻度恶心，上述反应均属于正常。症状发作时，难以入睡，一旦奏效这些症状控制后，便缓缓入睡，不是药物作用，服用本制剂后，有轻度腹泻，是制剂本身具有的正常功能现象。因此，临床按规定剂量使用是安全的。

结论：本组共观察病例80例，其中空白对照组25例，西药对照组25例，中药治疗组30例，中药治疗组和西药对照组血浆中内毒素浓度接近，且都明显低于空白对照组[(0.0111±0.0051)vs(0.0133±0.0033)(P＞0.05)vs(0.0053±0.0049)]μmol/L(P＜0.05)，中药治疗组和西药对照组尿中L/M比值接近，且也明显低于空白对照组[(0.1737±0.0753)vs(0.1488±0.0613)(P＞0.05)vs(0.0426±0.0332)](P＜0.05)。

本发明中药组合物与培菲康均能够显著降低结直肠癌术后化疗患者血内毒素含量，降低尿乳果糖/甘露醇比值(L/M比值)，从而减轻化疗药物对肠黏膜损伤程度，有效维护肠黏膜屏障功能。该中药组合物与培菲康在减轻肠粘膜损伤程度方面，疗效相似。本发明临床实验结果还显示，本发明中药组合物具有修复肠黏膜损伤的作用，本发明中药组合物具有抗氧化、清除氧自由基的作用。临床用药中，没有观察到本制剂的毒副反应，说明本制剂按规定剂量用于临床是安全的。

评价肠粘膜屏障损伤程度的指标主要有血内毒素，尿乳果糖/甘露醇比值，血浆D-乳酸水平等。其中，采用口服乳果糖和甘露醇后测定其从尿中的排泄率的比值(L/M)，是最常用的测定肠黏膜通透性的方法。

本研究发现治疗前结直肠癌患者经手术、化疗后血浆内毒素含量较正常人明显增高，提示手术、化疗等治疗可导致肠黏膜屏障损害，肠通透性增加，肠道内的内毒素得以大量进入血循环。治疗前结直肠癌患者经手术、化疗血浆内毒素水平高于正常人，说明此时肠黏膜明显受损，治疗后血浆内毒素水平较治疗前明显降低，说明此时受损的肠黏膜已部分修复。至于手术创伤、化疗后血浆内毒素升高的机制，可能与下列因素有关：手术创伤、化疗等使机体处于应激状态，通过由神经-内分泌介导的适应性反应导致选择性内脏血管痉挛，肠道处于缺血缺氧状态，产生氧自由基等炎症介质，进而损伤肠黏膜；加上手术及化疗后肠道菌群失调，大肠杆菌等过度繁殖，产生大量内毒素通过受损肠黏膜进入血循环。

目前广泛应用培菲康(被称为微生态制剂生态制品或活菌制剂)调节肠道菌群失调。培菲康对肠屏障功能的保护作用机制：①定植拮抗作用，维持肠内菌群平衡，抑制致病菌繁殖；②促进肠紧密连接相关蛋白表达；③改善肠道免疫功能。④提高机体免疫功能；即通过磷壁酸与肠粘膜上皮细胞紧密结合形成天然的生物屏障，能改善肠道菌群失调。

近年来，尤其随着分子生物学技术广泛应用，中医药治疗肠粘膜损伤优势明显，中医药治疗肠粘膜损伤的相关机理研究日益增多。

众多临床文献显示以四君子汤为代表的健脾理气药物配合清热化湿之剂如葛根芩连汤类服用后能明显改善患者肠屏障功能障碍的症状如泄泻便秘交作、腹痛腹胀、便血、里急后重等。

健脾是治本之治，脾胃为后天之本，文献显示服用四君子汤、葛根芩连汤有明确修复肠粘膜作用，葛根芩连汤有明确抗菌作用。如报导益气健脾药党参、黄芪、白术等能促进小肠上皮细胞增殖，从而促进粘膜修复。四君子汤加大黄能降低脓毒症大鼠肠粘膜通透性，防止肠道细菌易位，对肠屏障功能有明显的保护作用。肠固有膜的浆细胞分泌的分泌型IgA(slgA)发挥着重要粘膜免疫作用。动物试验治疗组肠粘膜slgA含量明显高于空白组及对照组(P＜0.01)，表明黄芪，黄连具有提高肠道免疫能力，保护肠粘膜的作用。葛根素具有抗炎、抗缺血引起的脂质过氧化反应和清除自由基的效应，可改善肠道炎症，保护小肠组织免受氧自由基损伤。动物实验发现应用党参、黄芪、白术等中药可明显改善化疗引起的肠屏障功能损伤。大黄、黄连可减轻肠屏障功能受损后菌群移位引起的内毒素血症。

基于以上对手术、化疗导致肠屏障功能改变以及四君子汤、葛根芩连汤修复肠粘膜，改善肠通透性，多靶点保护肠屏障功能作用的认识。本研究应用了本发明的中药组合物固肠方进行临床研究。

本研究发现结直肠癌手术及化疗后L/M比值较正常人显著增高，血浆内毒素含量明显增高，表明化疗后肠道通透性明显增加，肠屏障功能受损害，可能与5-FU抑制正常肠道黏膜细胞胸腺嘧啶核苷酸生成、导致肠道嘌呤核苷酸代谢紊乱、减少细胞和细胞基质的交互作用、促成氧化氮过分表达而引起肠壁黏膜损伤有关。本研究治疗前，两组患者尿L/M较正常人尿L/M(0.026±0.006)增高^[2]，血内毒素水平较正常人(0.001-0.004)增高，可能与手术创伤及前3次化疗导致肠黏膜损伤，血管通透性增加，黏膜上皮水肿，上皮细胞膜及细胞间连接断裂，细胞坏死或凋亡，上皮从绒毛顶端开始脱落甚至黏膜全层脱落而形成溃疡，导致肠通透性增加。

本研究发现治疗后西药对照组和中药治疗组治疗后血浆内毒素水平较治疗前显著下降，同时尿L/M比值较化疗前明显降低，与空白对照组比较差异有统计学意义。这一结果表明，手术、化疗等损伤可导致血浆内毒素水平增高，而口服培菲康和中药固肠方能经肠道吸收，降低血浆中内毒素浓度和尿乳果糖/甘露醇比值，进而改善肠黏膜通透性，保护肠黏膜屏障功能。

中药保护肠屏障功能损伤的作用机制：1、保护肠粘膜，修复组织损伤。2、调节免疫；3、调节肠道菌群，降低内毒素水平；4、及时清除肠道致癌物；促进抗癌物质释放；诱导肿瘤细胞凋亡。

总之，临床上，本发明固肠方能降低血浆内毒素水平和尿乳果糖/甘露醇比值，降低肠道通透性，维持肠上皮细胞紧密连接。能有效地减轻结直肠癌患者术后化疗机体蛋白分解，有效地改善氮平衡，改善肠黏膜的屏障功能，从而改善患者营养状况，增强机体对手术及化疗的耐受性。

Claims (5)

1.一种治疗结直肠癌术后和/或化疗后出现的肠黏膜损伤的中药组合物，其特征在于，由下述重量份的药材制成：党参16份，白术16份，茯苓16份，煨葛根16份，黄芩8份，黄连8份，黄芪16份。

2.按权利要求1所述的中药组合物，其特征在于，所述的中药组合物制成中药内服制剂。

3.按权利要求2所述的中药组合物，其特征在于，所述中药内服制剂为水煎剂、口服液、颗粒剂、胶囊剂、或片剂。

4.一种按权利要求1-3任一项所述的治疗结直肠癌术后和/或化疗后出现的肠黏膜损伤的中药组合物的制备方法，其特征在于，包括如下步骤：

称取所述重量份的原料药，加水8～15倍量，加热回流提取1～2次，每次1～2小时，过滤、合并提取液，浓缩，干燥得干浸膏，粉碎成细粉，加入常规制剂赋形剂，混合均匀后制粒，该颗粒进一步压制成片剂、装胶囊或直接包装成颗粒剂。

5.权利要求1-3任一项所述的中药组合物在制备治疗结直肠癌术后和/或化疗后出现的肠黏膜损伤药物中的用途。