CN103282021A - 炎症性疾病 - Google Patents

Abstract

本发明涉及炎症性疾病和尤其是Th-1介导的炎症性疾病的治疗。具体地，本发明涉及使用一系列组合物治疗Th-1介导的炎症性疾病并涉及这些组合物在治疗方法中的用途。本发明延伸至治疗广泛种类的各种医学病况中使用的佐剂。本发明还提供了包含所述佐剂的药学组合物和药物，以及所述佐剂在治疗方法中的用途以及用于引起免疫应答的用途。

Description

炎症性疾病

本发明涉及炎症性疾病，尤其是Th-1介导的炎症性疾病的治疗。具体地，本发明涉及使用一系列组合物治疗Th-1介导的炎症性疾病，并涉及这些组合物在治疗方法中的用途。本发明延伸至佐剂，并且特别地延伸至治疗广泛种类的各种医学病况中使用的佐剂。本发明还提供了包含佐剂的药学组合物和药物，以及佐剂在治疗方法中的用途和用于引起免疫应答的用途。

对疾病的防御对所有动物的存活而言是至关重要的，用于此目的的机制是动物免疫系统。免疫系统是复杂的，并包括两个主要的部分：（i）先天免疫，和（ii）获得性免疫。先天免疫系统包括以非特异性方式保护宿主免遭侵入性生物感染的细胞和机制。参与先天系统的白细胞特别地包括吞噬细胞，比如巨噬细胞、中性粒细胞和树突状细胞。先天系统在病原体进入宿主之前是全功能性的。

相比之下，获得性系统仅在病原体已进入宿主之后启动，在此时，其发展了特异性针对所述病原体的防御。获得性免疫系统的细胞被称为淋巴细胞，淋巴细胞的两个主要种类是B细胞和T细胞。B细胞参与产生中和抗体，所述中和抗体在血浆和淋巴中循环并形成体液免疫应答的一部分。T细胞在体液免疫应答和细胞-介导的免疫二者中都发挥作用。激活T细胞或效应T细胞有若干亚组，包括胞毒T细胞（CD8+）和“辅助”T细胞（CD4+），辅助T细胞有两种主要类型，称为1型辅助T细胞（Th1）和2型辅助T细胞（Th2）。

Th1细胞促进细胞-介导的获得性免疫应答，其应答于抗原而参与巨噬细胞的激活并刺激各种细胞因子的释放，比如IFNγ、TNF-α和IL-12的释放。这些细胞因子在获得性和先天免疫应答中影响其他细胞的功能，并导致微生物破坏。Th1应答通常对细胞内病原体，比如在宿主细胞内部出现的病毒和细菌更为有效。而Th2应答的特征在于释放IL-4，其导致B细胞激活以产生中和抗体，这导致体液免疫。Th2应答对细胞外病原体，比如位于宿主细胞外部的寄生虫和毒素更为有效。因此，体液和细胞-介导的应答提供了对抗侵入的病原体的相当不同的机制。

白细胞介素-10（IL-10），还被称为人细胞因子合成抑制因子（CSIF），是抗炎性细胞因子。其主要由单核细胞产生，在更小的范围上由淋巴细胞产生，并对免疫调节和炎症有多效性效应。IL-10下调巨噬细胞上的Th1细胞因子（比如IFNγ、TNF-α和IL-12）、MHC II型抗原和共刺激分子的表达。其还增强B细胞存活、增殖和抗体产生。此外，IL-10可阻断NF-κB活性，并参与JAK-STAT发信号途径的调节。小鼠中的敲除研究已表明在肠道中IL-10作为必须的免疫调节剂的功能，并且患有克罗恩疾病的患者对用细菌产生的重组IL-10的治疗有利地反应，这显示了该细胞因子用于阻碍人体过度免疫的重要性。

IL-10是炎症性疾病中的经验证的靶标，并且其已显示对于免疫耐受性和Th1免疫的控制而言是必须的（O’Garra et al.,2008,Immunol.Rev.,223:114-31）。在早期的临床试验中全身施用外源IL-10在各种疾病（包括风湿性关节炎，克罗恩疾病、牛皮癣和囊肿性纤维化）的治疗中显示出一些最初希望。但是，与这些早期试验关联的问题是：如所预测的，全身施用的外源IL-10不阻抑过大的Th1应答，这可能是因为IL-10的组织水平太低（IL-10的半衰期短），或因为IL-10不以正确的方式存在。因此，IFNγ、TNF-α和IL-12的浓度实际上增加至有害的水平。应当认识到，这些细胞因子是促炎性的。此外，施用太多的外源IL-10的显著的副作用是其实际上抑制了免疫系统，而不是正面地调控免疫系统，并因此导致了严重的免疫-相关的问题。应当认识到，IL-10、IL-4和TGF-β是抗炎性的。

因而，鉴于这些问题，本领域中清楚需要用于治疗Th1-介导的疾病，尤其是Th1-介导的炎性病症的改进的药物，其不会遭遇在先前IL-10试验中观察到的免疫-相关的问题。使用体内小鼠研究，本发明人研究了，非甾体类抗炎药（NSAID），比如布洛芬，对先前已用流感病毒挑战过的小鼠的作用。本发明人配制了组合高度亲脂性的药学上可接受的载体或佐剂的布洛芬，然后将其口服施用给挑战的测试小鼠。他们观察到，较之仅用油性载体或布洛芬（不在油中）施用的对照小鼠，在油性配方（即，佐剂）中的口服施用的布洛芬导致了对百分比存活比率的令人吃惊的正面作用。本发明人还用体内检验测定了存活的动物的肺中IL-10的浓度在用油性布洛芬组合物施用的小鼠中明显增加。

因此，在第一方面中，提供了药学组合物，其包含治疗上有效量的能增加白细胞介素-10（IL-10）产生的化合物；和包含脂质和醇的药学上可接受的载体，所述药学组合物用于治疗Th1-介导的疾病，其中IL-10是通过Th2细胞、树突状细胞和/或巨噬细胞内源产生的。

本发明的第二方面中，提供了预防、治疗和/或改善Th1-介导的疾病的方法，所述方法包括给需要此种治疗的受试者施用药学组合物，所述药学组合物包含治疗上有效量的能增加白细胞介素-10（IL-10）产生的化合物；和包含脂质和醇的药学上可接受的载体，其中IL-10是通过Th2细胞、树突状细胞和/或巨噬细胞内源产生的。

在第三个方面中，提供了用于治疗Th1-介导的疾病的药学组合物的用途，所述组合物包含治疗上有效量的能通过Th2细胞、树突状细胞和/或巨噬细胞诱导白细胞介素-10（IL-10）内源产生的化合物；和包含脂质和醇的药学上可接受的载体。

令人吃惊地，如图1中所示的，当在本发明的亲脂性的配方（例如至少30%w/w脂质）或佐剂中口服施用布洛芬时，其显示了，对小鼠的流感-诱导的呼吸衰竭的治疗是非常有效的。事实上，应用单剂量的本发明的药学组合物将80%死亡率模型转变为令人惊异的80%存活结果，并且这完全是出人意料的。尽管本发明人不希望限于任何理论，但他们认为对于该令人吃惊的观察结果的解释可能是由于NSAID（比如布洛芬）的亲脂性（即log P3.5），当NSAID在具有高脂质含量（例如至少30%（w/w）脂质）的油性配方中递送时，这导致它们通过淋巴系统被快速吸收进全身的循环。当药/脂质配方被吞咽时，脂质与胃中的含有胆汁盐的胆汁混合，并形成称为胶束或乳糜微粒的复合体，所述复合体是由甘油三酯、磷脂、胆固醇和蛋白和NSAID组成的大的脂蛋白颗粒。

所得的油/药/胆汁盐复合体（即胶束或乳糜微粒）然后可被最近的消化道吸收进入肠淋巴系统。认为，携带刺激IL-10产生的化合物的这些胶束/乳糜微粒通过消化道淋巴系统被运输至中心静脉血管，然后被快速运输至心脏，心脏将富含活性化合物的静脉血泵至肺。结果，药在氧合血中以高的浓度被直接递送至肺，增加其生物利用度。

本发明人认为，活性化合物（例如布洛芬）的淋巴吸收可起到将药直接分布至肺，使肺暴露于高浓度的化合物的被动系统的作用。本发明人认为，当使用不含有脂质或仅含有低水平的脂质的标准口服配方时，该递送机制不会发生，其代替地用肝脏-调节的静脉吸收通过肝门静脉来吸收，这相对慢地将药释放进全身循环中。因此，本发明人认为，如实施例中所述的，用于第一方面的组合物的药学载体中的高浓度的脂质是小鼠流感-诱导的呼吸衰竭检验中的口服-施用布洛芬的功效的原因。

如图2中所示的，施用本发明的药学组合物导致流感-挑战的小鼠肺中内源IL-10的产生明显增加，并且这完全是意料之外的。清楚地，较之对照小鼠（即仅用油性载体或仅用无油的布洛芬施用的动物）中产生的IL-10的浓度，用在脂质中的活性试剂施用的动物中产生的IL-10浓度比叠加高得多，这表明已发生了协同作用。

如在实施例4中所述的和在图5-7中所示的，本发明人已表明，当NSAID（比如布洛芬）配制在油和醇（例如乙醇）佐剂中时，NSAID活化从巨噬细胞的内源IL-10产生。从而，下述是优选的，将本发明的组合物改造，用来刺激从树突状细胞和/或巨噬细胞内源产生IL-10。本发明的组合物的一个优势在于，它们允许某些活性化合物（即，药）配制进脂质中并口服给药，使得它们被优先加载到巨噬细胞和树突状细胞中。许多疾病病况（condition）被认为与低水平的IL-10（即低-IL-10病症）关联或处于其中IL-10浓度增加太慢或不足的状况中，且根据本发明可治疗这些病况的任何一种。实施例5描述了本发明的组合物在抗胶原抗体诱导的关节炎（ACAIA）鼠模型中的作用。从而，可被治疗的Th1-介导的疾病可以是Th1-介导的炎症性疾病，优选地全身性炎症性疾病。本发明的组合物因而可以是抗炎性药学组合物。

待治疗的疾病可选自由下述疾病组成的Th1-介导的疾病的组：风湿性关节炎（RA）；银癣病关节炎；牛皮癣；炎性肠综合征（IBD）；克罗恩疾病；溃疡性结肠炎；多发性硬化（MS）；流感，包括普通流感；呼吸病症，例如通过病毒引起的那些，比如呼吸合胞病毒（RSV）；囊肿性纤维化（CF）；疱疹，包括生殖器疱疹；哮喘和过敏；脓毒症和败血性休克；细菌性肺炎；细菌性脑膜炎；登革出血热；I型糖尿病；子宫内膜异位；前列腺炎；葡萄膜炎；子宫成熟；斑秃；僵直性脊椎炎；乳糜泄；皮肌炎；1型糖尿病（diabetes mellitus Type1）；Goodpasture综合征；格雷夫斯病；格-巴二氏综合征；幼年特发性关节炎；桥本甲状腺炎；免疫性血小板缺乏紫斑症；红斑狼疮；混合性结缔组织病；重症肌无力；嗜眠病；骨关节炎；天疱疮；恶性贫血；多肌炎；原发性胆汁性肝硬化；复发性多软骨炎；斯耶格伦氏综合征；颞动脉炎；血管炎；维格纳肉芽肿；和年龄相关的黄斑变性。

Th1-介导的疾病可以是病毒、细菌或化学（例如环境）诱导的。例如，引起Th1-介导的疾病的病毒可引起慢性或急性感染，所述感染可引起呼吸病症。合适地，引起Th1-介导的疾病的病毒可以是流感。

优选地，可被治疗的Th1-介导的疾病是全身性炎症性疾病，例如炎性肠综合征（IBD）、风湿性关节炎（RA）或囊肿性纤维化（CF）。可被治疗的Th1-介导的疾病优选地是IBD。

本发明人对可诱导IL-10产生的许多不同的化合物进行了研究，因为他们认识到，IL-10产生是指示从Th1向Th2应答转换的特征指标，并认识到此种化合物可用来治疗Th1-介导的疾病。他们已表明了通过上调IL-10产生诱导从Th1向Th2应答转换可用来帮助治疗Th1-介导的超-炎症。事实上，图3清楚地显示了，施用本发明的组合物不仅增加IL-10产生，其还导致增加的IL-4产生，这证明，从Th1向Th2应答转换已被诱导。有优势地，通过刺激Th2应答，通过诱导Th2细胞、巨噬细胞和/或树突状细胞的IL-10的内源释放，B细胞被活化、产生中和抗体，这导致体液免疫。应当认识到，Th2应答对细胞外病原体（比如位于宿主细胞外部的寄生虫和毒素）比Th1应答有效得多。

例如，在病毒感染（例如流感，如实施例中表明的）期间发生Th1-介导的超-炎症，因此本发明人认为，给受试者施用组合物时的通过Th2细胞、巨噬细胞和/或树突状细胞内源产生的IL-10可用来治疗由病毒感染引起的呼吸衰竭。已知，一些病毒，比如单纯疱疹病毒（HSV），通过刺激Th1免疫保持它们在体内存在，并且因而，触发向Th2免疫转换会帮助治疗疱疹感染，这通过允许身体经由天然的杀伤细胞免疫攻击病毒来实现。

本发明人认为，IL-10是旁分泌细胞因子，并且因而，用于本发明的第一、第二和第三方面的化合物可以旁分泌方式有效地用来增加内源IL-10产生。应当认识到，旁分泌信号可以是如下细胞信号形式，其中靶标细胞靠近或位于释放信号的细胞。从而，IL-10可同细胞-细胞相互作用合作来控制炎症位点处的免疫应答。

能增加内源IL-10产生的化合物可被Th2细胞、树突状细胞和/或巨噬细胞识别。但是，优选地，能增加内源IL-10产生的化合物被树突状细胞和/或巨噬细胞识别。Th2细胞、树突状细胞和/或巨噬细胞可吞噬化合物（比如脂质/药乳糜微粒）、与这些细胞类型之每一种中的途径（pathway）反应并因此内源产生IL-10。优选地，因而，IL-10通过有免疫活性的Th2细胞、树突状细胞和/或巨噬细胞产生。有优势地，与非-免疫细胞产生的、引起导致感染并在一些情况下导致癌症的免疫系统失衡的IL-10相反，通过有免疫活性的Th2细胞、树突状细胞和/或巨噬细胞内源产生的IL-10确保免疫系统保持平衡，因此避免感染。

因此，免疫系统能天然地调节自身，因此降低感染和癌症风险。如图4-6中所示的，由于调节过程和反馈环而产生的IL-10水平可调控（例如减少）Th1细胞因子浓度，比如IFNγ、TNF-α和IL-12，但不完全抑制其产生。这可能是重要的，因为需要这些Th1细胞因子来保护身体免遭感染。从而，通过内源地刺激IL-10产生，克服下述显著的免疫-相关的问题是可能的，所述问题当外源添加细胞因子时，导致IFNγ、TNF-α和IL-12过量产生而被观察到。

能通过Th2细胞、树突状细胞和/或巨噬细胞诱导白细胞介素-10（IL-10）内源产生的化合物可以是非甾体类抗炎药（NSAID）。NSAID可以是丙酸衍生物、乙酸衍生物、烯醇酸衍生物、灭酸衍生物或选择性-或非-选择性环氧合酶（COX）抑制剂。NSAID可以是洛芬。

合适的丙酸NSAID衍生物的例子可包括布洛芬；萘普生；苯氧布洛芬；优洛芬；氟苯布洛芬；或奥沙普秦。合适的乙酸NSAID衍生物的例子可包括醋氯芬酸；阿西美辛；阿他利特；阿氯芬酸（Alcofenac）；氨芬酸；氯苯酰吲酸；双氯芬酸；依托度酸；联苯-4-乙酸；芬氯酸（Fenclofenac）；吲哚美辛；酮咯酸；甲嗪酸；莫非佐酸；萘普生；奥沙美辛；舒林酸；或佐美酸。合适的烯醇酸NSAID衍生物的例子可包括吡罗昔康；美洛昔康；替诺昔康；Droxicam；氯诺昔康；或伊索昔康。灭酸NSAID衍生物的例子可包括甲灭酸；甲氯灭酸；氟灭酸；或托芬那酸。

在其中NSAID是环氧合酶（COX）抑制剂的实施方式中，其可以是环氧合酶1（COX1）抑制剂或环氧合酶2（COX2）抑制剂。合适的COX抑制剂的例子可包括布洛芬；塞来昔布；依托昔布；罗美昔布；美洛昔康；罗非昔布；或伐地昔布。

NSAID可以选自由下述药物组成的组：阿明洛芬；苯恶洛芬；右酮洛芬；氟苯布洛芬；布洛芬；吲哚洛芬；优洛芬；环氧洛芬；普拉洛芬；丙替嗪酸；舒洛芬；醋氯芬酸；阿西美辛；阿他利特；阿氯芬酸；氨芬酸；氯苯酰吲酸；双氯芬酸；依托度酸；联苯-4-乙酸；芬氯酸；吲哚美辛；酮咯酸；甲嗪酸；莫非佐酸；萘普生；奥沙美辛；舒林酸；佐美酸；塞来昔布；依托昔布；罗美昔布；美洛昔康；罗非昔布；伐地昔布；阿洛普令；氨基比林；Antraphenine；阿司匹林；阿扎丙宗；贝诺酯；苄达明；布替布芬；氯西诺嗪；水杨酸胆碱；二氟尼柳；依莫法宗；依匹唑；苯氯布宗；芬布芬；格拉非宁；水杨酸羟乙酯；乳酰基非那西丁；甲灭酸；安替比林甲胺甲烷；莫非布宗；萘丁美酮；尼芬那宗；尼氟酸；非那西丁；哌布宗；异丙安替比林；普罗喹宗；水杨酰胺；双水杨酯；羟哌苯酮；替诺立定；和托芬那酸。

优选的NSAID可以是阿明洛芬、苯恶洛芬、右酮洛芬、氟苯布洛芬、布洛芬、吲哚洛芬、优洛芬、环氧洛芬、普拉洛芬、吩噻嗪丙酸或舒洛芬。优选地，NSAID是布洛芬。

NSAID可以药学上可接受的盐、溶剂化物或盐的溶剂化物（例如氢氯化物）的形式使用。

本文描述的NSAID可作为外消旋物或作为单独的对映异构体（包括R-或S-对映异构体）来提供。从而，NSAID可包含R-布洛芬或S-布洛芬或其组合。

在一种实施方式中，S-布洛芬可用于治疗免疫-介导的疾病，所述疾病包括对COX抑制剂，比如本文描述的那些（例如塞来昔布；依托昔布；罗美昔布；美洛昔康；罗非昔布；或伐地昔布）应答的疼痛。此种疾病的例子可包括关节炎、风湿性关节炎、骨关节炎、银癣病关节炎和子宫内膜异位。

在另一种实施方式中，R-布洛芬可用于治疗免疫-介导的疾病，所述疾病不包括对COX抑制剂应答的疼痛。此种疾病的例子可包括牛皮癣、炎性肠病、多发性硬化、普通流感、呼吸合胞病毒、囊肿性纤维化、生殖器疱疹、哮喘、细菌性肺炎、细菌性脑膜炎、登革出血热、I型糖尿病、前列腺炎和早产。

药学载体可包含至少约10%、20%、30%、35%、40%、45%、50%、55%、60%、65%、70%、75%、80%、85%、90%、95%或至少约99%（w/w）的脂质。载体可包含在约35%和99%（w/w）之间的脂质或在约45%和99%（w/w）之间的脂质或在约50%和99%（w/w）之间的脂质或在约60%和98%（w/w）之间的脂质或在约70%和97%（w/w）之间的脂质或在约80%和96%（w/w）之间的脂质或在约85%和95%（w/w）之间的脂质或在约85%和95%（w/w）之间的脂质或在约88%和94%（w/w）之间的脂质或在约89%和93%（w/w）之间的脂质。

药学载体可包含选自由下述物质组成的组的脂质组分：油或油基液体；脂肪；脂肪酸（例如油酸、硬脂酸或棕榈酸等等）、脂肪酸酯、脂肪醇、甘油酯（单-、二-或三-甘油酯）；磷脂；乙二醇酯；蔗糖酯；蜡；丙三醇油酸酯衍生物；中等长度链甘油三酯；或其混合物。甘油三酯是得自丙三醇和三个脂肪酸的酯，并且是植物油和动物脂肪的主要成分。

术语“油”可指在正常的室温下是液体的脂肪，并可用于不与水混合并具有油脂感觉的任何物质。术语“脂肪”可以指在正常的室温下是固体的脂肪。术语“脂质”因而是指液体或固体脂肪，以及是指其他相关的物质。

可用作药学载体中的脂质组分的合适的油，可以是天然油或植物油。合适的天然油的例子可以选自由下述油组成的组：亚麻籽油；豆油；精馏的椰子油；矿物油；三醋精；油酸乙酯；氢化的天然油；或其混合物。合适的植物油的例子可以选自由下述油组成的组：油菜籽油；橄榄油；花生油；大豆油；玉米油；红花油；落花生油；向日葵油；菜籽油；胡桃油；杏仁油；鳄梨油；海狸油；椰子油；玉米油；棉籽油；米糠油；芝麻油；和精制棕榈油；或其混合物。这些油的每一种可商购自本领域技术人员公知的许多来源。

药学载体的脂质组分可包含下述脂肪酸，所述脂肪酸包含8至24个碳原子、10至22个碳原子、14至20个原子或16至20个原子。脂质可以是饱和的或不饱和的，例如有一个、两个、三个或更多个双键。脂质可包含选自由下述脂肪酸组成的组的脂肪酸：肉豆蔻酸（C14:0）；棕榈酸（C16:0）；棕榈油酸（C16:1）；硬脂酸（C18:0）；油酸（C18:1）；亚油酸（C18:2）；亚麻酸（C18:3）和花生酸（C20:0）；或其混合物。应当认识到，括号中提供的第一个数字对应于脂肪酸中碳原子的数目且第二个数字对应于双键的数目（即不饱和）。

油的熔点是主要通过饱和/不饱和程度测定。油酸（CH₃(CH₂)₇CH=CH(CH₂)₇COOH）、亚油酸（CH₃(CH₂)₄(CH=CHCH₂)₂(CH₂)₆COOH）和亚麻酸（CH₃CH₂(CH=CHCH₂)₃(CH₂)₆COOH）的熔点分别为约16℃、-5℃和-11℃。从而，脂质的熔点可以在约-20℃和20℃之间或在约-15℃和16℃之间。

脂质可包含油菜籽油。油菜籽油得自Brassica napus，并含有以约2:1的比率存在的ω-6和ω-3脂肪酸二者。但是，在实施例中，本发明人发现，亚麻籽油特别有效，因此亚麻籽油可以是优选的。亚麻籽油，还称为亚麻种子（flax seed）油，是获得自亚麻植物（Linum usitatissimum，Linaceae）的干燥成熟的种子的透明至淡黄色的油。油是通过冷压，有时随后通过溶剂提取获得的。亚麻籽油是各种甘油三酯的混合物，所述甘油三酯按照其脂肪酸成分是不同的。对于亚麻籽油，脂肪酸成分是下述类型：（i）饱和酸棕榈酸（约7%）和硬脂酸（3.4-4.6%）；（ii）单不饱和的油酸（18.5-22.6%）；（iii）双不饱和的亚油酸（14.2-17%）；和（iii）三不饱和的ω-3脂肪酸α-亚麻酸（51.9-55.2%）。亚麻籽油还富含ω-6脂肪酸。亚麻籽油中找到的代表性甘油三酯的结构可通过式I表示：

从而，药学载体的脂质组分可包含ω3和/或ω6脂肪酸。ω-3脂肪酸是不饱和的脂肪酸家族，其共有n-3位置上的决定性的碳–碳双键，即从脂肪酸的甲基端起的第三个键，并可由式II表示。

另一方面，ω-6脂肪酸是不饱和脂肪酸家族，其在n-6位（即从与羧基相反的一端开始数的第六个键）共有决定性的碳-碳双键，并可由式III表示。

ω-3和ω-6脂肪酸是亚麻酸的衍生物，主要不同是双键的数目和确切位置。因此，ω-3和ω-6具有与亚麻酸基本上相同的熔点。

载体可包含少于约90%、80%、70%、65%、60%、55%、50%、45%、40%、35%、30%、25%、20%、15%、10%、5%、或少于约1%（w/w）的醇。载体可包含在约1%和90%（w/w）之间的醇，或在约1%和70%（w/w）之间的醇，或在约1%和60%（w/w）之间的醇，或在约1%和50%（w/w）之间的醇，或在约2%和40%（w/w）之间的醇，或在约4%和30%（w/w）之间的醇，或在约6%和20%（w/w）之间的醇，或在约8%和15%（w/w）之间的醇。醇可以是脂肪族醇。

可以是C_1-20醇、C_1-15醇、C_1-10醇、C_1-5醇或C_2-4醇。醇可以是薄荷醇或糖醇、比如丙三醇、山梨醇、赤藻糖醇、木糖醇、甘露醇、异麦芽糖醇或麦芽糖醇。

醇可以是乙醇、丙醇或丁醇。在一种优选的实施方式中，醇是乙醇。

在一种实施方式中，载体可包含在大约60%和95%（w/w）之间的脂质和在约5%和40%（w/w）之间的醇。在另一种实施方式中，载体可包含在大约80%和95%（w/w）之间的脂质和在约5%和20%（w/w）之间的醇。

在一种实施方式中，载体可包含在大约60%和95%（w/w）之间的油和在约5%和40%（w/w）之间的醇。在另一种实施方式中，载体可包含在大约80%和95%（w/w）之间的脂质和在约5%和20%（w/w）之间的醇。例如，载体可包含在大约80%和95%（w/w）之间的橄榄油、油菜籽油或亚麻籽油和在大约5%和20%（w/w）之间的乙醇。在另一种实施方式中，载体可包含在大约88%和92%（w/w）之间的脂质和在大约8%和12%（w/w）之间的醇。例如，载体可包含在大约88%和92%（w/w）之间的橄榄油、油菜籽油或亚麻籽油和在大约8%和12%（w/w）之间的乙醇。在另一种实施方式中，载体可包含大约90%（w/w）的脂质和大约10%（w/w）的醇。例如，载体可包含大约90%（w/w）的橄榄油、油菜籽油或亚麻籽油和大约10%（w/w）的乙醇和任选的水。

发明人认为水具有增加NSAID不稳定性的趋势。因此，在优选的实施方式中，载体基本上是无水的。有利地，在载体的实施方式中不存在水意味着不损害组合物中NSAID的稳定性，从而提供改进的产品。

但是，在一些实施方式中，载体可任选地包含水。载体可包含少于约70%、65%、60%、55%、50%、45%、40%、35%、30%、25%、20%、15%、10%、5%或少于约1%（w/w）的水。载体可包含在约1%和70%（w/w）之间的水或在约1%和60%（w/w）之间的水或在约1%和50%（w/w）之间的水或在约2%和40%（w/w）之间的水或在约4%和30%（w/w）之间的水或在约6%和20%（w/w）之间的水或在约8%和15%（w/w）之间的水。

应当认识到，组合物可用来以单一疗法（即仅使用组合物）治疗Th1-介导的疾病。或者，组合物可用作用于治疗Th1-介导的疾病的已知疗法的辅助物或与用于治疗Th1-介导的疾病的已知疗治组合。

组合物可具有许多不同的形式，这尤其取决于其中组合物将被使用的方式。从而，例如，组合物可以是粉末、片剂、胶囊、液体、软膏、霜、凝胶、水凝胶、气溶胶、喷雾、胶束溶液、皮肤贴、脂质体悬浮液的形式或可被施用给需要治疗的人或动物的任何其他合适的形式。应当认识到，用于根据本发明的药物的载体应当是被给药的受试者能良好忍受的载体，并且优选地所述载体能递送试剂越过血-脑屏障或肺。

包含活性化合物和脂质和醇载体（即佐剂）的组合物可以许多方式使用。例如，在化合物可以含在例如可被以片剂、胶囊或液体的形式口服摄入的组合物中的情况下，可能需要口服施用。或者，可通过注射进血流施用组合物。注射可以是静脉内（推注或灌输）的或皮下（推注或灌输）的。或者，包含活性化合物的组合物可以通过（例如，滴鼻或通过嘴）吸入施用。

还可配制组合物用于局部使用。例如，可将软膏应用至皮肤。对皮肤局部应用尤其用于治疗皮肤感染或作为经由皮肤递送至其他组织的手段。

优选地，与通过注射或吸入等等的施用相反，组合物是可口服施用的，即用于口服施用。

应当认识到，组合物中的所需的活性化合物的量根据其生物活性和生物利用度（而这又取决于施用模式）、化合物的物理化学特性以及其是用作单一疗法还是用在组合的疗法中来确定。施用的频率也将受到上面提到的因素、尤其是活性化合物在被治疗受试者中的半衰期的影响。

被施用的最优剂量可由本领域技术人员确定，并且随着使用的具体活性化合物、制剂的强度、施用模式和疾病状况的发展而变化。取决于被治疗受试者的其他因素将导致需要调整剂量，包括受试者年龄、体重、性别、饮食和施用时间。

应当认识到，根据活性化合物的药物动力学，本领域技术人员能够计算需要的剂量，和在目标组织处活性化合物的最优浓度。已知的程序，比如制药工业常规采用的那些（例如体内实验、临床试验等）可用来确定活性化合物的具体配方和精确的治疗方案（比如化合物的日剂量和施用频率）。

一般而言，取决于使用的哪种化合物，在0.001μg/kg体重和60mg/kg体重之间的日剂量的活性化合物可用于治疗Th1-介导的疾病，合适地，日常剂量是在0.01μg/kg体重和40mg/kg体重之间，更合适地，是在0.01μg/kg体重和30mg/kg体重之间或在0.1μg/kg和20mg/kg体重之间，最合适地，在大约0.1μg/kg和15mg/kg体重之间。

可以以单次施用（例如单次日常口服剂量形式）给予日常剂量的活性化合物。合适的日常剂量可以是在0.07μg和3200mg（即假定体重为70kg）之间或在0.70μg和1600mg之间或在10mg和800mg之间。

可以想到，组合物可以不止一次施用给需要治疗的受试者。一天中组合物可需要施用两次或更多次。例如，组合物可以0.07μg和32000mg之间（即假设体重为70kg）的两次（或更多次，这取决于被治疗的病毒感染的严重性）日剂量施用。接受治疗的患者可当起床时服用第一剂量并接着在傍晚服用第二剂量（如果采用两次剂量方案）或以在服用第一剂量后3-或4-小时的间隔服用，等等。可以想到，可在Th1-介导的炎症触发后每天施用（如果必要的话不止一次）组合物。

或者，缓释装置可用来给患者提供最适剂量的根据本发明的化合物，而不需要重复施用剂量。

本发明人还认为本发明的组合物可以固定在形成富含脂质的配方的支持底物或基质上或在形成富含脂质的配方的支持底物或基质中，所述支持底物或基质可用作治疗Th1-介导的病症的递送装置。

因此，本发明的第四方面，提供了包含下述的药递送装置：

（i）药学组合物，其包含治疗上有效量的能通过Th2细胞、树突状细胞和/或巨噬细胞增加内源白细胞介素-10（IL-10）产生的化合物；和包含脂质和醇的药学上可接受的载体；和

（ii）支持基质。

递送装置可以是子宫托或阴道环等等，其可被需要治疗Th1-介导的病况的受试者佩戴。例如装置可用来治疗特征为IL-10浓度降低的任何疾病。已知，IL-10的浓度在怀孕的妇女中降低，导致胎儿耐受性，并且这在胎儿出生期间启动分娩。从而，递送装置可以被怀孕的妇女用来预防或延迟早产。

支持基质可由适于支持本文中或本文上面的组合物的底物材料制成。组合物可被固定在基质上。在一种实施方式中，基质可包含能在体温下或约体温下熔化的任何材料，使得基质随着时间溶解，因此释放可被受试者吸收的组合物。

支持基质可以是合适的凝胶或蜡。例如，可使用用于阴道施用的传统材料，比如丙三醇，明胶，甘油-明胶，聚乙二醇（macrogol或polyethylene glycol），天然的、合成的或半合成的固体脂肪和精馏的棕榈仁油。

基于其发现，本文描述的组合物可用来通过Th2细胞、树突状细胞和/或巨噬细胞增加IL-10的内源产生的水平并因此降低Th1细胞因子，比如TNF-α和IL-12的水平，以触发Th1向Th2转换，本发明人认为，这些化合物的作用可被控制并用于制造临床上有用的组合物。如图4-6中所示的，本发明人假设当配制在油和醇中时，NSAID活化来自巨噬细胞的IL-10产生。

“治疗上有效量的”活性化合物是任何量，当所述量施用给受试者时，导致IL-10和IFN-γ的水平增加，优选地TNF-α和IL-12的浓度减小，并因此提供了Th1-介导的疾病的治疗。

例如，使用的治疗上有效量的活性化合物可从约0.07μg至约3200mg，优选地从约0.7μg至约1600mg。活性化合物的量从约7μg至约1200mg或从约7μg至约800mg。

“受试者”可以是脊椎动物、哺乳动物或驯养动物，并优选地是人类。因此，根据本发明的药物可用于治疗任何哺乳动物，例如人、家畜、宠物，或可用于其他兽医应用。

如本文所称的“药物上可接受的载体”可以是本领域技术人员已知用于配制药学物组合物的化合物的任何组合，但其包含脂质（例如至少30%（w/w）的脂质）和醇。

在一种实施方式中，药学上可接受的载体可以是固体，并且组合物可为粉末或片剂形式。除了脂质组分和醇，药物上可接受的固体载体可包含一种或多种也可用作下述添加剂的物质：调味剂、润滑剂、助溶剂、悬浮剂、染料、填充剂、助流剂、压制助剂、惰性粘结剂、甜味剂、防腐剂、染料、包衣或片剂崩解剂。载体也可以是形成胶囊的材料。在粉末中，载体可以为精细分开的固体，其与精细分开的活性成分（即刺激内源的IL-10产生的化合物）混合。在片剂中，活性成分可与具有必要的压缩性质的载体以合适的比例混合并压缩成期望的形状和大小。合适的固体载体可包含，例如磷酸钙、硬脂酸镁、滑石、糖、乳糖、糊精、淀粉、明胶、纤维素、聚乙烯吡咯烷、低熔点蜡和离子交换树脂。

还在优选的实施方式中，药物载体可为液体，并且药物组合物可为溶液的形式。液体载体用于制备溶液、悬浮液、乳液、糖浆、酏剂和加压的组合物。活性化合物可溶解在或悬浮在药物上可接受的液体载体诸如水、有机溶剂、二者的混合物或药物上可接受的油或脂肪中。除了脂质组分，液体载体也可包含其他合适的药物添加剂诸如助溶剂、乳化剂、缓冲液、防腐剂、甜味剂、调味剂、悬浮剂、增稠剂、着色剂、粘度调节剂、稳定剂或渗透压调节剂。口服施用的液体载体的合适例子可包括水（部分包含上述添加剂，例如纤维素衍生物，优选甲基羧酸钠纤维素溶液）、醇（包括单羟基醇和多羟基醇，例如乙二醇）和其衍生物，和油（例如精馏的椰子油和落花生油）。载体也可以是油酯，比如油酸乙酯或豆蔻酸异丙酯。

组合物优选以包含其他溶质或或悬浮剂（例如，足够的盐水或葡萄糖以使溶液等压）、胆汁盐、阿拉伯树胶、明胶、脱水山梨糖醇单油酸酯、聚山梨酯80（与环氧乙烷共聚合的山梨醇及其脱水物的油酸酯）等的无菌溶液或悬浮液的形式口服施用。

但是，组合物可包含或不包含表面活性剂。优选地，不使组合物乳化，可包含在或不包含在组合物中的表面活性剂的例子包括磷脂，诸如磷脂酰胆碱（卵磷脂）和磷脂酰乙醇胺；皂和去污剂，包括脂肪碱金属、铵和三乙醇胺盐，和去污剂，包括（a）阳离子去污剂，比如二甲基二烷基卤化铵，和烷基吡啶鎓卤化物；（b）阴离子去污剂，诸如烷基、芳基和烯烃磺酸盐、烷基、烯烃、醚和单甘油磺酸盐，和磺基丁二酸盐；（c）非离子去污剂比如脂肪氧化胺、脂肪酸链烷醇酰胺，和聚氧乙烯聚氧丙烯共聚物；和（d）两性去污剂，比如烷基-b-氨基丙酸盐，和2-烷基-咪唑啉季铵盐。去污剂的另一例子可包括十二烷基硫酸钠、二甲基亚砜。优选地，本发明的载体或佐剂不包含这些表面活性剂的任何一种。

许多表面活性剂具有某些安全性含义，即许多不是GRAS（通常认为安全的）。因而，避免使用表面活性剂克服了本发明组合物的涉及的安全性问题。另外，尽管不希望限于理论，本发明人假设去除表面活性剂导致在被治疗的受试者中活性试剂的摄入和生物利用度改进。

发明人认为药物上可接受的载体可优选包含至少30%（w/w）的脂质，可能不存在乙醇。

从而，第五方面提供了下述药学组合物，其包含治疗上有效量的能增加白细胞介素-10（IL-10）产生的化合物；和包含至少30%（w/w）脂质的药学上可接受的载体，其用于治疗Th1-介导的疾病，其中IL-10是通过Th2细胞、树突状细胞和/或巨噬细胞内源产生的。

第六个方面，提供了药递送装置，其包含：-

（i）药学组合物，其包含治疗上有效量的能通过Th2细胞、树突状细胞和/或巨噬细胞增加内源的白细胞介素-10（IL-10）产生的化合物；和包含至少30%（w/w）脂质的药学上可接受的载体；和

（ii）支持基质。

第七方面提供了预防、治疗和/或改善Th1-介导的疾病的方法，所述方法包括给需要此种治疗的受试者施用下述药学组合物，所述药学组合物包含治疗上有效量的能增加白细胞介素-10（IL-10）产生的化合物；和包含至少30%（w/w）脂质的药学上可接受的载体，其中所述IL-10是通过Th2细胞、树突状细胞和/或巨噬细胞内源产生的。

第八方面提供了药学组合物用于治疗Th1-介导的疾病的用途，所述组合物包含治疗上有效量的能通过Th2细胞、树突状细胞和/或巨噬细胞诱导白细胞介素-10（IL-10）内源产生的化合物；和包含至少30%（w/w）脂质的药学上可接受的载体。

以表明了本文描述的脂质/醇载体的令人吃惊的免疫调节作用（见图2-6）的结果为基础，本发明人认为他们已经有效地开发了新颖佐剂，所述佐剂可用来增强广范围的免疫原性化合物的免疫调节活性。

从而，根据本发明的第九方面，提供了用在包含免疫原的药学组合物中的口服佐剂，其中所述佐剂包含脂质和醇，并通过树突状细胞和/或巨噬细胞刺激免疫原的摄入，使得它们调控免疫调节细胞因子，并且其中在佐剂存在的情况下免疫原的免疫调节活性大于缺乏佐剂时的其免疫调节活性。

应当认识到，佐剂是药理学或免疫学的试剂，其改善了其他活性试剂，比如药或疫苗的作用，而当单独施用时，没有作用，或者即使有作用的话，也仅具有极小的直接的作用。佐剂通常包括在疫苗中，以增强受者对施用的抗原或免疫原的免疫应答，同时使施用的外源材料减至最少。尽管此种免疫学佐剂在传统上已被认为是帮助对抗原或免疫原免疫应答的物质，佐剂还已发展为可帮助稳定抗原配方（尤其是用于动物健康的施用的疫苗）的物质。

最常用的佐剂通过提供抗原或免疫原的长时间的储藏来起作用，其抵消了典型的游离抗原的快速清除和降解。使用何种佐剂必须考虑佐剂伴随的负面副作用，比如不期望的炎性结果。例如，许多患者在接种疫苗后遭受“感冒样”症状或在注射部位出现肿胀和压痛。减少这种全身的和局部的不想要的副作用同时仍提供对免疫应答的最大限度的增强，是尤其重要的，并继续推动对新的、改进的佐剂进行大量的研究和开发。

第九方面的佐剂可以是免疫激活的和/或免疫抑制性的。有优势地，佐剂可以能增强施用佐剂的受试者的免疫调节活性，导致刺激免疫系统，用于治疗免疫低下的病况，比如癌症和免疫-抑制；以及抑制免疫系统，用于治疗超免疫病况。在巨噬细胞和树突状细胞中负载免疫刺激药（即免疫原）会促进它们的表型，以增强其清除癌细胞、细菌和病毒的能力。

有优势地，如图中所显示的，第九方面的油性佐剂不仅展示了促进抗原或免疫原（例如布洛芬）的免疫学活性的更大功效，还展示了对抗原或免疫原的改进的赋予稳定性的特征，并且不对施用佐剂的受试者诱导负面的副作用。

术语“口服佐剂”可表示，其是可口服施用的，即用于口服施用，这与注射或吸入等的施用相反。

根据本发明的第十方面，提供了包含免疫原和根据第九方面的佐剂的药学组合物。

根据第十一方面，提供了用于疗治的根据第十方面的药学组合物。

根据第十二方面，提供了根据第十方面的药学组合物，所述组合物用于治疗Th1-介导的疾病、癌症或细菌或病毒感染。

根据第十三方面，提供了在受试者中引起有效免疫应答的方法，所述方法包括给受试者施用有效量的第十方面的药学组合物。

佐剂的脂质和醇组分可以选自本文描述的脂质（油或脂肪）或醇的任何一种，以所描述的量的任何一种的量存在。例如，佐剂可包含至少约10%、20%、30%、35%、40%、45%、50%、55%、60%、65%、70%、75%、80%、85%、90%、95%或至少约99%（w/w）的脂质。佐剂可包含在约35%和99%（w/w）之间的脂质或在约45%和99%（w/w）之间的脂质或在约50%和99%（w/w）之间的脂质或在约60%和98%（w/w）之间的脂质或在约70%和97%（w/w）之间的脂质或在约80%和96%（w/w）之间的脂质或在约85%和95%（w/w）之间的脂质或在约85%和95%（w/w）之间的脂质或在约88%和94%（w/w）之间的脂质或在约89%和93%（w/w）之间的脂质。

可用作佐剂的脂质组分的合适的油可以是天然油或植物油。合适的天然油的例子可以选自由下述组成的组：亚麻籽油；大豆油；精馏的椰子油；矿物油；三醋精；油酸乙酯；氢化的天然油；或其混合物。合适的植物油的例子可以选自由下述组成的组：油菜籽油；橄榄油；花生油；大豆油；玉米油；红花油；落花生油；向日葵油；菜籽油；胡桃油；杏仁油；鳄梨油；海狸油；椰子油；玉米油；棉籽油；米糠油；芝麻油；和精制棕榈油；或其混合物。在一种优选的实施方式中，脂质可包含亚麻籽油。

佐剂可包含小于约90%、80%、70%、65%、60%、55%、50%、45%、40%、35%、30%、25%、20%、15%、10%、5%或小于约1%（w/w）的醇。佐剂可包含在约1%和90%之间的醇（w/w）或在约1%和70%（w/w）之间的醇或在约1%和60%（w/w）之间的醇或在约1%和50%（w/w）之间的醇或在约2%和40%（w/w）之间的醇或在约4%和30%（w/w）之间的醇或在约6%和20%（w/w）之间的醇或在约8%和15%（w/w）之间的醇。

醇可以是脂肪族醇。醇可以是C_1-20醇、C_1-15醇、C_1-10醇、C_1-5醇或C_{2- 4}醇。醇可以是薄荷醇或糖醇，比如丙三醇、山梨醇、赤藻糖醇、木糖醇、甘露醇、异麦芽糖醇或麦芽糖醇。醇可以是乙醇、丙醇或丁醇。在一种优选的实施方式中，醇是乙醇。

佐剂可包含或可不包含水。优选地，佐剂是无水的。优选地，佐剂不包含亲水性表面活性剂或本文描述的表面活性剂的任何一种。

使用的佐剂能在用药学组合物治疗的受试者中刺激或诱导树突状细胞和/或巨噬细胞，以摄取免疫原，使得免疫调节细胞因子的浓度被调控。被调控的免疫调节细胞因子可选自包括下述细胞因子的细胞因子组：IL-10；IL4；TNF-α；和IFN-γ。

如图2、3、4和5所阐释的，在一种实施方式中，佐剂可在受试者中刺激树突状细胞和/或巨噬细胞以产生免疫调节细胞因子或增加免疫调节细胞因子的产生。例如，产生的或增加的细胞因子可以是IL-10和/或TNF-α和/或IL-4。

如图6所阐释的，在另一种实施方式中，佐剂可在受试者中刺激树突状细胞和/或巨噬细胞以停止或减少免疫调节细胞因子的产生。例如，产生被减少或阻止的细胞因子可以是IFN-γ。

组合物中存在的免疫原可以是具有大于2.0的log P值和/或在约

和之间的极性表面积的药学上的活性试剂。免疫原可优选地是具有分子量小于1000Da的小分子。

术语“log P值”被技术人员所已知并且可指在平衡时两种不相混溶溶剂的混合物的两个相之中的化合物（即免疫原）的浓度的比率。免疫原可具有大于3.0、4.0、5.0或6.0的log P值。免疫原可具有小于7.0、6.0、5.0、4.0或3.0的log P值。在一种实施方式中，免疫原可具有在2.0和7.0之间或在3.0和6.0之间或在3.0和5.0之间的log P值。免疫原可具有在2.0和4.0之间或在2.1和4.0之间或在2.2和4.0之间或在2.3和4.0之间的log P值。在另一种实施方式中，免疫原可具有在2.5和4.0之间或在3.0和4.0之间或在3.1和4.0之间的log P值。在另一种实施方式中，免疫原可具有在3.3和4.0之间或在3.5和4.0之间的log P值。还在另一实施方式中，免疫原可具有在2.0和3.0之间或在2.0和2.7之间或在2.0和2.5之间的log P值。在另一实施方式中，免疫原可具有在2.2和2.5之间的log P值。

术语“极性表面积”被技术人员所已知并且可指结构中所有极性原子（通常是氧和氮）还包括连接的氢的表面积总和。在一种实施方式中，免疫原可具有在

和

之间或在和

之间或在

和

之间的极性表面积。在另一种实施方式中，免疫原可具有在

和

之间或在

和

之间或在

和

之间的极性表面积。

在一种实施方式中，免疫原可包含过氧化物酶体增殖物-激活受体γ（PPAR-γ）激动剂。

术语“PPAR-γ激动剂”可表示能结合并触发来自过氧化物酶体增殖物-激活受体γ（PPAR-γ）的应答的任何分子。这种受体也被称为格列酮受体或中心受体亚家族1，C组，成员3（NR1C3）。PPAR-γ是II型中心受体，其在人中由PPAR-γ基因所编码。在人中检测到PPAR-γ的两种异构体，即PPAR-γ1，其在除了肌肉的几乎所有组织中找到；和PPAR-γ2，其大多数在脂肪组织和肠中找到。组合物中存在的PPAR-γ激动剂可以能结合PPAR-γ1或PPAR-γ2。

下表提供了可以用于本发明的组合物的优选的PPAR-γ激动剂的列表。从而，PPAR-γ激动剂可以是选自该表的化合物。

表1-PPAR-γ激动剂

药	C Log P
		吉非罗齐	3.8
苯扎贝特	3.8
		环丙贝特	3.4
氯贝特	3.3
		非诺贝特	5.2
布洛芬	3.5
		双氯芬酸	4.4
吲哚美辛	4.3
		红曲素	3.2
厄贝沙坦	4.1
		替米沙坦	6.9
霉酚酸	3.2
		白藜芦醇	3.1
δ(9)-四氢大麻酚	7.0
		大麻二酚	6.5
姜黄素	3.2
		西洛他唑	3.1
苯溴马隆	5.7
		6-姜烯酚	3.7
甘草次酸	6.4

在一种优选的实施方式中，PPAR-γ激动剂可以是贝特（fibrate）。Ogata et al.,2009,Atherosclerosis205（2）:413-419描述了PPAR-γ激动剂贝特、吉非罗齐和苯扎贝特的特性。贝特可以选自由下述贝特组成的贝特组：苯扎贝特；环丙贝特；氯贝特；吉非罗齐；和非诺贝特。

还在另一实施方式中，PPAR-γ激动剂可以选自包括下述激动剂的激动剂组：红曲素；厄贝沙坦；替米沙坦；霉酚酸；白藜芦醇；Delta(9)-四氢大麻酚；大麻二酚；姜黄素；西洛他唑；苯溴马隆；6-姜烯酚；和甘草次酸。

在另一种实施方式中，免疫原可以是非甾体类抗炎药（NSAID）。免疫原可以是本文描述的NSAID的任何一种，例如布洛芬。

本文描述的所有特征（包括任何所附的权利要求、摘要和图）和/或因此公开的任何方法或工艺的所有步骤，可以以任何组合形式（除了其中这种特征和/或步骤的至少一些相互排斥的组合）与上述方面的任何一个组合。

现参照下述实施例和所附简图仅通过例子的方式将进一步描述本发明的实施方式，其中：-

图1显示了第一方面的组合物的一种实施方式（即在脂质中的布洛芬，其在本文中表示为BC1054）对用流感A/PR/8/34致死挑战的存活的作用。将在脂质佐剂中的335μg布洛芬（BC1054佐剂，口服）施用给挑战过的小鼠。使用了两个对照，即缺乏脂质佐剂的335μg的布洛芬（BC1054，口服）和缺乏布洛芬仅有脂质佐剂（对照，口服）；

图2显示了在体内包含在脂质载体中的335μg布洛芬的配方（BC1054脂质，口服）对存活的小鼠肺中体内IL-10水平的作用。使用了两个对照，即缺乏脂质佐剂的335μg布洛芬（BC1054，口服）和仅有脂质载体（载体，口服）；

图3显示了在体内包含在脂质载体中的335μg布洛芬的配方（BC1054脂质，口服）对存活的小鼠肺中的体内IL-4水平的作用。使用了两个对照，即缺乏脂质佐剂的335μg布洛芬（BC1054，口服）和仅有脂质载体（载体，口服）；

图4是显示了BC1054配方对存活的小鼠肺中的IL-10水平的作用的图表；

图5是显示了BC1054配方对存活的小鼠肺中的TNF-α水平的作用的图表；

图6是显示了BC1054配方对存活的小鼠肺中的IFN-γ水平的作用的图表；和

图7是显示了BC1054配方在抗胶原抗体诱导的关节炎（ACAIA）鼠模型中的作用的图表。

实施例

本发明人进行了一系列体内小鼠实验，以测定布洛芬对流感-挑战的小鼠的作用。本发明人已在下述结果中令人信服地表明了，当布洛芬在油基配方（90%亚麻籽油；10%乙醇）中口服施用时，导致了内源IL-10和IL-4的浓度的令人吃惊的增加。他们观察到伴随的病毒症状减少（即存活率增加）并认为这是因为提高了IL-10浓度。

实施例1-体内小鼠存活研究

方案：

将五组（n=10）C57BLK/6雌性小鼠（6-7周大），分为五个实验组，每组含有十只动物。第1天，在氟烷-诱导的麻醉下，使动物接受鼻内的致死剂量（总共50μl，25μl鼻孔）的流感A/PR/8/34。

第3天，用病毒挑战后的动物接受下述治疗：

·A组以溶解在100μl的10%乙醇和90%亚麻籽油中的335.6μg/动物的剂量（等于20mg/kg/天；即为最大标准剂量1200mg/人/天）接受口服管饲的布洛芬；

·B组为第一对照，其中小鼠仅接受载体（管饲10%乙醇和90%亚麻籽油）；和

·C组为第二对照，其中使小鼠口服施用在10μl DMSO（没有脂质）中的335.6μg/动物的剂量。

将动物每日称重并针对感染症候监测，直至第6天挑选所有的动物。图1表示平均动物存活，并在图1中绘制出。

图1清楚地显示了，第一对照（即仅口服施用脂质载体）有80%死亡率，第二对照（即仅口服施用布洛芬）展示了60%的死亡率。但是本发明人吃惊地观察到，单剂量的BC1054（即油中的布洛芬）将第一负面对照的80%死亡率转变为80%的存活率，这完全是意料之外的。

实施例2-IL-10和IL-4浓度的测定

将实施例1中描述的体内实验阶段结束时收集的肺在4℃时匀质化并收集上清液，储存在-70℃下。将在包被液中稀释的60μL捕获抗体添加至每一个孔。将板密封并在4℃下孵育过夜。然后将孔抽吸并用300μL/孔洗涤缓冲液洗涤。最后一次洗涤之后，将平板倒转并在吸水纸上吸收，以去除任何残留的缓冲液。将平板用180μL/孔的检验稀释液洗涤并在室温下孵育1小时。添加至平板之前即刻将样品旋转30secs。通过将60μL的检验稀释液吸入每个孔中，用样品和标准物在平板内进行系列稀释。将板密封在室温下孵育2小时。然后进行IL-4和IL-10检验。对于IL-4，60μL的工作检测液（working detector）（检测的抗体+SAv-HRP试剂）添加至每一孔。将板密封并在室温下孵育1小时。对于IL-10，将60μL检测抗体在检验稀释液中稀释，添加至每一孔。

将平板洗涤并将60μL的SAv‐HRP酶在检验稀释液中稀释并添加至平板。将板密封并在室温下孵育20分钟。然后将平板洗涤十次。将60μl的底物溶液添加至每一孔并将平板在室温下黑暗中孵育30分钟。将60μl的停止溶液添加至每一孔并在450nm下读取吸光值。IL-10和IL-4浓度表示为pg/mg肺组织，然后在图2和3中绘制出。

如图2所示上的，两个对照（即仅口服施用布洛芬和仅口服施用脂质载体）分别仅导致2600pg/mg和2000pg/mg的IL-10。但是，本发明人吃惊地看到测试化合物BC1054导致了6000pg/mg的IL-10浓度。清楚地，该IL-10值比如果仅仅将脂质载体和布洛芬的活性叠加所期望的值（值仅为4600pg/mg）大得多。在BC1054-施用动物中的IL-10浓度为6000pg/mg的事实表明作用是协同（即比期望的高24%）。本发明人假定该内源IL-10产生的增加至少有助于图1所示的存活的显著增加。

至于图3，显示了来自图1的检验的存活动物中的各自IL-4浓度。IL-4是Th2细胞因子，并可看出，施用BC1054的小鼠具有比两个对照组之任一高得多的IL-4浓度。因此，本发明人已表明，已诱导了从Th1向Th2应答的转换。通过上调IL-10产生（和IL-4）诱导从Th1向Th2应答的转换可用来帮助治疗Th1-介导的超-炎症。

实施例3-子宫托

本发明人已制备了递送装置，其由支持基质制成，富含脂质的BC1054组合物被固定到其上，其可容易地用于治疗任何Th1-介导的病症。递送装置以子宫托的形状形成，具有蜡质支持基质。已使用的用于阴道施用的传统材料包括丙三醇/明胶，甘油-明胶，聚乙二醇，天然的、合成的或半合成的固体脂肪和精馏的棕榈仁油，每一种具有固定在其上的BC1054。支持基质在体温下熔化，使得组合物随着时间被释放出并被受试者吸收。

本发明人知道，孕妇由于IL-10浓度降低可引起早产。因而，子宫托可以被孕妇佩戴，使得BC1054配方被释放出，导致内源IL-10产生增加，因此预防早产。

实施例4–IL10、TNF-α和IFN-γ

本发明人进行了其他实验，以显示当施用BC1054配方时刺激了哪种细胞因子。

从致死H1N1感染的小鼠中得到的肺，并测量随后用BC1054（本发明的配方）和布洛芬（不在油/乙醇载体中）治疗的小鼠的IL-10、TNFα和IFNγ水平。数据在图4-6中示出。水平与每一治疗（即IL-10的抗炎性活性的替代品）对致死率的作用相关联。

如图4中所示的，给小鼠施用布洛芬自身或BC1054配方，导致IL-10水平增加。但是，本发明人观察到，这种IL-10增加与非常不同的药效作用关联。促炎性细胞因子减少的模式突出了IL-10来源和其与对病毒存活模型作用的相关性。重要地，如图6中所示的，较之BC1054-治疗的小鼠，IFNγ（其是得自淋巴细胞的细胞因子）水平在布洛芬-治疗的小鼠中显著降低，这与少的结果关联。

另外，如图5中所示的，TNFα（其是巨噬细胞-相关的细胞因子）未被显著抑制。但是，在BC1054-治疗的小鼠中，TNFα水平在BC1054-治疗的小鼠中显著降低，同时，IFNγ水平很大程度上未被影响。这表明，BC1054通过得自巨噬细胞的IL-10水平而不是得自淋巴细胞的IL10对H1N1致死率具有保护效应（“Immunobiology,5th edition-The Immune System in Healthand Disease”,Charles A Janeway（Jr）,Paul Travers,Mark Walport and MarkJ Shlomchik.New York:Garland Science;2001）。

实施例5–抗胶原抗体诱导的关节炎（ACAIA）鼠模型

本发明人研究了BC1054配方在ACAIA小鼠模型中的作用，所述模型为显示与系统炎症类似的模型。

材料和方法

第0天，将BALB/c小鼠用抗胶原II单克隆抗体（在200μl中为2mg）单次接种静脉内注射，随后在第3天，腹膜内注射脂多糖（LPS，在200μl内为50μg）。从第3天直到第8天每日得到爪体积（体积描记术）和关节炎得分，接着在第10天和12天，得到爪体积（体积描记术）和关节炎分数。用口服管饲的载体（1%甲基纤维素或BC1054载体）、10mg/kg的正面对照Enbrel（腹膜内）、40mg/kg布洛芬（口服）、20mg/kg BC1054或30mg/kg BC1054从第0天至第11天每日治疗该动物。整个实验（12天）过程中，每日检查动物的临床症候（动物健康的综合观察结果）和体重。使用下述等级，通过对个体爪的关节炎得分求和，测定总的关节炎得分：0=没有关节炎症候，1=轻微的但明确的踝/腕发红和肿胀或限于单独的趾的明显的发红或肿胀，不考虑感染的趾的数目，2=中度至重度踝/腕发红和肿胀，3=包括趾的整个爪的发红和肿胀，4=包括多个关节的最严重地发炎的肢体。

该实验的结果在图7中示出。可见，如所期望的，正面对照Enbrel显示了最好的结果，在第12天有约1.6mm的最低的爪厚度。两个测试配方（即20mg/kg BC1054或30mg/kg BC1054）显示了下述最好的结果：用30mg/kg BC1054产生了仅1.7mm的爪厚度，20mg/kg BC1054产生了约1.73mm的爪厚度。进行的负面对照（即PBS、40mg/kg仅仅布洛芬、仅仅载体和载体甲基纤维素）显著地比BC1054更糟糕，具有1.9mm和更大的爪厚度。因而，这些数据清楚表明了本发明的配方可用来治疗全身性炎症，比如关节炎。

总结

总之，本发明人吃惊地观察到，当布洛芬在亲脂性的赋形剂（即亚麻籽油）口服施用时显著增加了内源的IL-10产生，并从而令人吃惊地改进了流感-挑战的小鼠的存活率。体内小鼠研究的令人鼓舞的结果清楚表明了感染H1N1病毒的小鼠可通过施用单口服剂量的在油性配方中存在的布洛芬来有效地治疗。因此，当在具有高浓度的脂质的载剂中配制并口服施用时，能增加IL-10产生的任何化合物会导致高得多的肺中的生物利用度。当治疗Th1-介导的病症，例如病毒感染引起的呼吸病症时，在肺中实现高浓度的NSAID，例如布洛芬将会是有优势的。

但是，仅在BC1054-治疗的动物中，IL-10信号伴有存活改进。在相同的肺中，布洛芬-治疗的小鼠的IFN-γ（即得自T-细胞的细胞因子）更为显著地下调，这表明布洛芬小鼠中的IL-10可能来自T-细胞。但是，在BC1054-治疗的小鼠中，肺部TNF-α（即得自巨噬细胞的细胞因子）更为显著地下调，这表明BC1054-治疗的小鼠中的IL-10更可能来自巨噬细胞，其导致了观察到的抗炎性作用意义深远。

因而，总之，已经证明：如IBD和RA模型数据所表明的，在本发明的口服脂质佐剂中存在的布洛芬更优先地被巨噬细胞摄取，导致新的令人吃惊的抗炎药效。

Claims (60)

1.用于包含免疫原的药学组合物中的口服佐剂，其中所述佐剂包含脂质和醇，并且通过树突状细胞和/或巨噬细胞刺激免疫原的摄取，使得它们调控免疫调节细胞因子，并且其中在所述佐剂存在的情况下所述免疫原的免疫调节活性大于缺乏所述佐剂时的它的免疫调节活性。

2.根据权利要求1所述的佐剂，其中所述佐剂包含至少约10%、20%、30%、35%、40%、45%、50%、55%、60%、65%、70%、75%、80%、85%、90%、95%或至少约99%（w/w）的脂质。

3.根据权利要求1或2所述的佐剂，其中所述佐剂包含在约35%和99%（w/w）之间的脂质或在约45%和99%（w/w）之间的脂质或在约50%和99%（w/w）之间的脂质或在约60%和98%（w/w）之间的脂质或在约70%和97%（w/w）之间的脂质或在约80%和96%（w/w）之间的脂质或在约85%和95%（w/w）之间的脂质或在约85%和95%（w/w）之间的脂质或在约88%和94%（w/w）之间的脂质或在约89%和93%（w/w）之间的脂质。

4.根据前述权利要求任一项所述的佐剂，其中所述佐剂包含天然油或植物油。

5.根据权利要求4所述的佐剂，其中所述天然油选自由下述油组成的组：亚麻籽油；大豆油；精馏的椰子油；矿物油；三醋精；油酸乙酯；氢化的天然油；或其混合物。合适的植物油的例子可选自由下述油组成的组：油菜籽油；橄榄油；花生油；大豆油；玉米油；红花油；落花生油；向日葵油；菜籽油；胡桃油；杏仁油；鳄梨油；海狸油；椰子油；玉米油；棉籽油；米糠油；芝麻油；和精制棕榈油；或其混合物。

6.根据前述权利要求任一项所述的佐剂，其中所述脂质包含亚麻籽油。

7.根据前述权利要求任一项所述的佐剂，其中所述佐剂包含小于约90%、80%、70%、65%、60%、55%、50%、45%、40%、35%、30%、25%、20%、15%、10%、5%或小于约1%（w/w）的醇。

8.根据前述权利要求任一项所述的佐剂，其中所述佐剂包含在约1%和90%之间的醇（w/w）或在约1%和70%（w/w）之间的醇或在约1%和60%（w/w）之间的醇或在约1%和50%（w/w）之间的醇或在约2%和40%（w/w）之间的醇或在约4%和30%（w/w）之间的醇或在约6%和20%（w/w）之间的醇或在约8%和15%（w/w）之间的醇。

9.根据前述权利要求任一项所述的佐剂，其中所述醇是脂肪族的醇，例如C_1-20醇、C_1-15醇、C_1-10醇、C_1-5醇或C_2-4醇。

10.根据前述权利要求任一项所述的佐剂，其中所述醇是乙醇、丙醇或丁醇，优选地乙醇。

11.根据权利要求1-9任一项所述的佐剂，其中所述醇是薄荷醇或糖醇，比如丙三醇、山梨醇、赤藻糖醇、木糖醇、甘露醇、异麦芽糖醇或麦芽糖醇。

12.根据前述权利要求任一项所述的佐剂，其中所述佐剂是无水的。

13.根据前述权利要求任一项所述的佐剂，其中所述佐剂不包含亲水性表面活性剂。

14.根据前述权利要求任一项所述的佐剂、其中所述被调控的免疫调节细胞因子选自包括下述细胞因子的组：IL-10；IL4；TNF-α；和IFN-γ。

15.根据前述权利要求任一项所述的佐剂，其中所述佐剂刺激受试者的所述树突状细胞和/或巨噬细胞，以产生免疫学的细胞因子，例如IL-10和/或TNF-α和/或IL-4，或增加免疫学的细胞因子，例如IL-10和/或TNF-α和/或IL-4的产生。

16.根据前述权利要求任一项所述的佐剂，其中所述佐剂刺激受试者的所述树突状细胞和/或巨噬细胞，以停止或减少免疫学的细胞因子，例如IFN-γ的产生。

17.根据前述权利要求任一项所述的佐剂，其中在所述组合物中存在的所述免疫原是药学上有活性的试剂，其具有大于2.0的log P值和/或在约

和

之间的极性表面积。

18.根据前述权利要求任一项所述的佐剂，其中所述免疫原是具有小于1000Da分子量的小分子。

19.根据前述权利要求任一项所述的佐剂，其中所述免疫原具有大于3.0、4.0、5.0或6.0的log P值。

20.根据前述权利要求任一项所述的佐剂，其中所述免疫原具有在

和

之间或在

和

之间或在和

之间的极性表面积。

21.根据前述权利要求任一项所述的佐剂，其中所述免疫原包含过氧化物酶体增殖物-激活受体γ（PPAR-γ）激动剂。

22.根据权利要求21所述的佐剂，其中所述PPAR-γ激动剂是选自表1的化合物。

23.根据权利要求21或22所述的佐剂，其中所述PPAR-γ激动剂是贝特类，其选自由下述贝特组成的贝特组：苯扎贝特；环丙贝特；氯贝特；吉非罗齐；和非诺贝特。

24.根据权利要求21或22所述的佐剂，其中所述PPAR-γ激动剂选自包括下述激动剂的激动剂组：红曲素；厄贝沙坦；替米沙坦；霉酚酸；白藜芦醇；Delta(9)-四氢大麻酚；大麻二酚；姜黄素；西洛他唑；苯溴马隆；6-姜烯酚；和甘草次酸。

25.根据权利要求1-22任一项所述的佐剂，其中所述免疫原是非甾体类抗炎药（NSAID），例如布洛芬。

26.药学组合物，其包含免疫原和根据前述权利要求任一项所述的佐剂。

27.根据权利要求26所述的药学组合物，用于疗治。

28.根据权利要求26所述的药学组合物，用于治疗Th1-介导的疾病，癌症或细菌或病毒感染。

29.在受试者中引起有效免疫应答的方法，所述方法包括给受试者施用根据权利要求26所述的有效量的药学组合物。

30.药学组合物，其包含治疗上有效量的能增加白细胞介素-10（IL-10）产生的化合物；和包含脂质和醇的药学上可接受的载体，用于治疗Th1-介导的疾病，其中所述IL-10是通过Th2细胞、树突状细胞和/或巨噬细胞内源产生的。

31.根据权利要求30所述的组合物，其中能增加内源IL-10产生的所述化合物被树突状细胞和/或巨噬细胞识别。

32.根据权利要求30或31所述的组合物，其中所述Th1-介导的疾病是Th1-介导的炎症性疾病，优选地全身性炎症性疾病。

33.根据权利要求30-32任一项所述的组合物，其中所述疾病是选自由下述疾病组成的Th1-介导的疾病的组：风湿性关节炎（RA）；银癣病关节炎；牛皮癣；炎性肠综合征（IBD）；克罗恩疾病；溃疡性结肠炎；多发性硬化（MS）；流感，包括普通流感；呼吸病症，例如通过病毒引起的那些，比如呼吸合胞病毒（RSV）引起的那些；囊肿性纤维化（CF）；疱疹，包括生殖器疱疹；哮喘和过敏；脓毒症和败血性休克；细菌性肺炎；细菌性脑膜炎；登革出血热；I型糖尿病；子宫内膜异位；前列腺炎；葡萄膜炎；子宫成熟；和年龄相关的黄斑变性。

34.根据权利要求30-33任一项所述的组合物，其中所述Th1-介导的疾病是病毒、细菌或化学（例如环境）诱导的。

35.根据权利要求30-34任一项所述的组合物，其中所述Th1-介导的疾病是全身性炎症性疾病，例如炎性肠综合征（IBD）、风湿性关节炎（RA）或囊肿性纤维化（CF）。

36.根据权利要求30-35任一项所述的组合物，其中所述化合物用来以旁分泌方式增加内源的IL-10产生。

37.根据权利要求30-36任一项所述的组合物，其中所述化合物调控Th1细胞因子浓度，比如IFNγ、TNF-α和IL-12。

38.根据权利要求30-37任一项所述的组合物，其中通过Th2细胞、树突状细胞和/或巨噬细胞能诱导白细胞介素-10（IL-10）内源产生的所述化合物，是非甾体类抗炎药（NSAID）。

39.根据权利要求38所述的组合物，其中所述NSAID是丙酸衍生物、乙酸衍生物、烯醇酸衍生物、灭酸衍生物或选择性-或非-选择性环氧合酶（COX）抑制剂。

40.根据权利要求30-39任一项所述的组合物，其中所述化合物选自由下述化合物组成的组：阿明洛芬；苯恶洛芬；右酮洛芬；氟苯布洛芬；布洛芬；吲哚洛芬；优洛芬；环氧洛芬；普拉洛芬；丙替嗪酸；舒洛芬；醋氯芬酸；阿西美辛；阿他利特；阿氯芬酸；氨芬酸；氯苯酰吲酸；双氯芬酸；依托度酸；联苯-4-乙酸；芬氯酸；吲哚美辛；酮咯酸；甲嗪酸；莫非佐酸；萘普生；奥沙美辛；舒林酸；佐美酸；塞来昔布；依托昔布；罗美昔布；美洛昔康；罗非昔布；伐地昔布；阿洛普令；氨基比林；Antraphenine；阿司匹林；阿扎丙宗；贝诺酯；苄达明；布替布芬；氯西诺嗪；水杨酸胆碱；二氟尼柳；依莫法宗；依匹唑；苯氯布宗；芬布芬；格拉非宁；水杨酸羟乙酯；乳酰基非那西丁；甲灭酸；安替比林甲胺甲烷；莫非布宗；萘丁美酮；尼芬那宗；尼氟酸；非那西丁；哌布宗；异丙安替比林；普罗喹宗；水杨酰胺；双水杨酯；羟哌苯酮；替诺立定；和托芬那酸。

41.根据权利要求30-40任一项所述的组合物，其中所述化合物是阿明洛芬、苯恶洛芬、右酮洛芬、氟苯布洛芬、布洛芬、吲哚洛芬、优洛芬、环氧洛芬、普拉洛芬、吩噻嗪丙酸或舒洛芬。

42.根据权利要求30-41任一项所述的组合物，其中所述化合物是布洛芬。

43.根据权利要求38至42任一项所述的组合物，其中所述组合物包含所述NSAID的R-或S-对映异构体。

44.根据权利要求43所述的组合物，其中所述组合物包含R-布洛芬。

45.根据权利要求43所述的组合物，其中所述组合物包含S-布洛芬。

46.根据权利要求30-45任一项所述的组合物，其中所述载体的所述脂质组分是如权利要求2-6任一项所限定的脂质组分。

47.根据权利要求任一项的30-46的组合物，其中所述药学载体的所述脂质组分包括下述脂肪酸，所述脂肪酸包含8至24个碳原子，10至22个碳原子，14至20个原子或16至20个原子。

48.根据权利要求30-47任一项所述的组合物，其中所述脂质包含选自由下述脂肪酸组成的组的脂肪酸：肉豆蔻酸（C14:0）；棕榈酸（C16:0）；棕榈油酸（C16:1）；硬脂酸（C18:0）；油酸（C18:1）；亚油酸（C18:2）；亚麻酸（C18:3）和花生酸（C20:0）；或其混合物。

49.根据权利要求30-48任一项所述的组合物，其中所述载体的所述醇组分是如权利要求7-11任一项所限定的醇组分。

50.根据权利要求任一项的30-49的组合物，其中所述载体包含在大约80%和95%（w/w）之间的亚麻籽油和在大约5%和20%（w/w）之间的乙醇和任选的水。

51.根据前述权利要求任一项的组合物，其中所述组合物是能口服施用的。

52.根据前述权利要求任一项的组合物，其中所述载体不包含亲水性表面活性剂。

53.药物递送装置，其包含：

（i）药学组合物，其包含治疗上有效量的能通过Th2细胞、树突状细胞和/或巨噬细胞增加内源白细胞介素-10（IL-10）产生的化合物；和包含脂质和醇的药学上可接受的载体；和

(ii)支持基质。

54.根据权利要求53所述的药递送装置，其中所述装置包含如权利要求30至52任一项所限定的所述药学组合物。

55.根据权利要求53或权利要求54所述的药递送装置，其中所述装置是子宫托、阴道环等等。

56.根据权利要求53至55任一项所述的药递送装置，其中所述装置被需要治疗Th1-介导的病况的受试者所佩戴。

57.根据权利要求53至56任一项所述的药递送装置，其中所述递送装置是被怀孕的妇女使用来预防或延迟早产。

58.根据权利要求53至57任一项所述的药递送装置，其中所述支持基质包含在体温下或大约体温下能熔化的材料，使得所述基质随着时间溶解，因此释放被所述受试者所吸收的所述组合物。

59.根据权利要求54至58任一项所述的药递送装置，其中所述支持基质是凝胶或蜡，例如丙三醇/明胶，甘油-明胶，聚乙二醇（例如，聚乙二醇），天然的、合成的或半合成的固体脂肪或精馏的棕榈仁油。

60.预防、治疗和/或改善Th1-介导的疾病的方法，所述方法包括给需要此种治疗的受试者施用下述药学组合物，所药学组合物包含治疗上有效量的能增加白细胞介素-10（IL-10）产生的化合物和包含脂质和醇的药学上可接受的载体，其中所述IL-10是通过Th2细胞、树突状细胞和/或巨噬细胞内源产生的。

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