CN103271973A

CN103271973A - 一种从山茱萸中提取总三萜类物质的方法

Info

Publication number: CN103271973A
Application number: CN2013102088366A
Authority: CN
Inventors: 徐正东
Original assignee: HUANGSHAN SHENCAO BIOLOGICAL SCIENCE AND TECHNOLOGY Co Ltd
Current assignee: HUANGSHAN SHENCAO BIOLOGICAL SCIENCE AND TECHNOLOGY Co Ltd
Priority date: 2013-05-30
Filing date: 2013-05-30
Publication date: 2013-09-04

Abstract

本发明涉及一种从山茱萸中提取总三萜类物质的方法，以山茱萸为原料，采用分步提取，结合沉降离心技术，可以快速将山茱萸中总三萜类功效成分提取纯化，总三萜类物质达到70%以上含量。本发明具有操作步骤简单、速度快等特点，克服了传统柱层析等纯化方法的制备时间长、工艺复杂及生产成本高等不足。该方法适用于工业化大规模制备山茱萸中总三萜类物质，并为其广泛应用提供了原料保障。

Description

一种从山茱萸中提取总三萜类物质的方法

技术领域

本发明属于天然产物化学领域，具体涉及采用分步提取结合沉淀离心技术快速从山茱萸中提取总三萜类物质的方法。

背景技术

山茱萸，为山茱萸科植物山茱萸的干燥成熟果肉。始载于《神农本草经》，具有补益肝肾，涩精固脱的功效，用于眩晕耳鸣、腰膝酸痛、阳痿遗精、崩漏带下、大汗虚脱、内热消渴等症，广泛用于中成药中，如六味地黄丸等。主产于河南、陕西、浙江、安徽、山西等地。

山茱萸具有抗菌、调节免疫、降血糖、降血脂、抗氧化、抗肿瘤、抗艾滋病、强心等重要的药用价值，其中以熊果酸和齐墩果酸为代表的总三萜酸是山茱萸中重要活性成分。在医疗和保健方面具有重要的应用价值。因而开发出高效的适合工业化生产的工艺分离提取山茱萸中的总三萜类成分，对于进一步开发利用山茱萸资源，具有重要意义。

现有技术关于三萜类化合物的提取分离方法主要包括传统的提取分离方法、超临界流体萃取法（SFE）、半仿生提取、超声循环技术和化学衍生法。其中，传统的三萜类成分提取分离方法，一般根据其溶解性采用不同的有机溶剂进行提取分离，例如从山茱萸中提取熊果酸的方法一般是索氏提取法，即取山茱萸药材粉碎精密称重，置索氏提取器内加适量乙醚，加热回流提取。但该方法所用的有机溶剂乙醚是一种易挥发且有毒的物质；而且由于索氏提取器的结构特征，不适应大规模工业化生产，仅限于从山茱萸中提取熊果酸的分析研究。

目前，专门针对山茱萸中总三萜物质的提取纯化工艺方面的文献报道很少，雒廷亮等（山茱萸中熊果酸提取工艺研究进展，河南化工，2005，22(2)：6-8页）采用超临界二氧化碳萃取对山茱萸中熊果酸提取方法的研究，结果表明，在熊果酸提取率基本相同的前提下，SFE可以实现清洁生产。但使用超临界二氧化碳萃取山茱萸中熊果酸时，由于熊果酸的分子量比较大，对工艺条件要求较为苛刻，目前主要靠提高压力、加入一些夹带剂来实现，且超临界二氧化碳萃取设备要求资金一次投入大，而且还要考虑夹带剂与熊果酸的分离，增加了后续提纯的难度，工业化生产还存在问题。本专利提供了一种高效的、适合工业化生产的总三萜类物质制备方法。实现了快速从山茱萸中获得高含量的总三萜类物质，为进一步开发利用山茱萸这种植物资源，具有重要的实践意义。

发明内容

本发明的目的是提供一种以山茱萸为原料，经过多次水浸提，再经过溶剂浸提，实现了高效的制备高含量山茱萸总三萜类物质的工艺方法。

本发明是通过以下方案来实现的：

一种从山茱萸中提取总三萜类物质的方法，包括以下步骤：

a)以山茱萸为原料，将山茱萸粉碎过筛，用10~20倍pH=3~6的水溶液70~100℃温度下连续提取至少两次，每次提取1小时，每次提取后将提取液冷却至60℃以下，过滤得到水提后的滤渣；

b）将步骤a）得到的滤渣用50%~90%乙醇溶液回流提取至少两次，每次回流时间为2小时，料液比为1：10~1：20，将多次的提取液过滤后合并，并减压蒸馏至无醇味；

c）将步骤b）浓缩后的提取液，用酸调至pH=3~6，降温至10℃以下，静置过夜；

d）将步骤c）静置过夜的浓缩液离心得到沉淀，沉淀用pH=3~6的低温水溶液淋洗两次，过滤得沉淀，沉淀干燥后得到山茱萸总三萜类物质提取物。

其中，所述步骤a）中用10~20倍pH=3~6的水溶液70~100℃温度下连续提取三次。

其中，所述步骤a）中山茱萸粉碎过筛至40~80目。

在一个优选的实施方案中，所述步骤a）中充分水提后的山茱萸残渣用pH=3~6的酸水淋洗1~2遍，并过滤得到水洗后的残渣。

其中，所述步骤b）中用50%~90%乙醇溶液回流提取2~3次。

其中，所述步骤d）的pH=3~6的低温水溶液为10℃以下的酸水。

其中，得到的提取物中山茱萸总三萜类物质成品含量70%以上。

其中，所述调节pH=3~6采用的酸为盐酸、磷酸、硫酸及其混合酸。

本发明的优点：1）本发明从山茱萸中提取总三萜类物质的方法采用分步提取、沉淀及离心的方法，操作方便、简单，非常适合于工厂大规模生产。2）本发明无需用到乙醚等任何有害的有机溶剂，对于最终产品的品质有很好的保障。3）本发明中采用的设备及相关工艺，实际操作中非常容易实现，成本低廉。4）本发明中最后的成品不需要再通过其他复杂的处理方法，过程简单，制备效率高。

附图说明

图1为本发明的从山茱萸中提取总三萜类物质的方法工艺流程路线图。

具体实施方式

下面结合具体的实施例对本发明做进一步展开说明，但需要指出的是，本发明的从山茱萸中提取总三萜类物质的方法并不限于这种具体的操作条件。对于本领域技术人员显然可以理解的是，以下的说明内容即使不做任何调整或修正，也可以直接适用于在此未指明的其他类似的操作。

如图1所示，本发明的从山茱萸中提取总三萜类物质的方法采用山茱萸为原料，经粉碎、过筛后，经过多次的水浸提，过滤后得到水提后的滤渣；水提的滤渣再进行第二阶段的多次乙醇溶液浸提，两次的提取液合并后通过减压蒸馏至无醇味进行浓缩，浓缩的提取液调节pH值、静置后经离心分离得到沉淀，沉淀物经淋洗、干燥得到最终含有70%总三萜类物质的提取物。

本发明以山茱萸为原料，采用分步提取，经沉降、离心、干燥后的成品经UV检测显示，可得到含量达70%的山茱萸总三萜类产品。其中，第一步采用水提的方法，充分去除山茱萸中糖类、部分色素及其他水溶性杂质。本发明采用山茱萸为原料，必要时可将山茱萸干燥处理，山茱萸粉碎过筛优选为40~80目，更优选为60~80目，但不限于此。

实施例1

原料山茱萸粉碎，过筛至60目，用20倍份量的纯水（pH=5.5）70℃提取1小时，过滤得滤渣（冷却至室温再过滤，接下来两次操作一样），再用15倍纯水（pH=5.5）70℃提取1小时，过滤得滤渣，滤渣第三次用10倍纯水（pH=5.5）70℃提取1小时，过滤得滤渣。滤渣经酸水清洗两次后第一次用20倍份量的90%乙醇回流提取2小时，滤出提取液，第二次用10倍份量90%乙醇回流提取2小时。合并两次提取液，40℃减压蒸至无醇味。浓缩液冷却至10℃以下，静置过夜，浓缩液5000转离心20分钟，得到沉淀，沉淀用10℃以下经盐酸调节pH值至6的纯水水洗两遍，过滤后得沉淀。沉淀干燥后得含量70%以上的山茱萸总三萜类物质提取物。

实施例2

原料山茱萸粉碎，过筛至60目，用20倍纯水（pH5.0）80℃提取1小时，过滤得滤渣（冷却至室温再过滤，接下来两次操作一样），再用15倍纯水（pH5.0）80℃提取1小时，过滤得滤渣，滤渣第三次用10倍纯水（pH5.0）80℃提取1小时，过滤得滤渣。滤渣经酸水清洗两次后第一次用20倍70%乙醇回流提取2小时，滤出提取液，第二次用15倍70%乙醇回流提取2小时。合并两次提取液，40℃减压蒸至无醇味。浓缩液冷却至10℃以下，静置过夜，浓缩液5000转离心20分钟，得沉淀，沉淀用10℃以下经硫酸调节pH值至3的纯水水洗两遍，过滤后得沉淀。沉淀干燥后得含量70%以上的山茱萸总三萜类物质提取物。

实施例3

原料山茱萸粉碎，过筛至60目，用20倍纯水（pH3）90℃提取1小时，过滤得滤渣（冷却至室温再过滤，接下来两次操作一样），再用15倍纯水（pH3）90℃提取1小时，过滤得滤渣，滤渣第三次用10倍纯水（pH3）90℃提取1小时，过滤得滤渣。滤渣经酸水清洗两次后用第一次用20倍80%乙醇回流提取2小时，滤出提取液，第二次用10倍80%乙醇回流提取2小时。合并两次提取液，40℃减压蒸至无醇味。浓缩液冷却至10℃以下，静置过夜，浓缩液5000转离心20分钟，得沉淀，沉淀用10℃以下经磷酸调节pH值至5的纯水水洗两遍，过滤后得沉淀。沉淀干燥后得含量70%以上的山茱萸总三萜类物质提取物。

实施例4

原料山茱萸粉碎，过筛至60目，用20倍纯水（pH4）100℃提取1小时，过滤得滤渣（冷却至室温再过滤，接下来两次操作一样），再用20倍纯水（pH4）100℃提取1小时，过滤得滤渣，滤渣第三次用20倍纯水（pH4）100℃提取1小时，过滤得滤渣。滤渣经酸水清洗两次后第一次用20倍50%乙醇回流提取2小时，滤出提取液，第二次用15倍50%乙醇再回流提取2小时。合并两次提取液，40℃减压蒸至无醇味。浓缩液冷却至10℃以下，静置过夜，浓缩液5000转离心20分钟，得沉淀，沉淀用10℃以下经盐酸磷酸的混合酸调节pH值至4的纯水水洗两遍，过滤后得沉淀。沉淀干燥后得含量70%以上的山茱萸总三萜类物质提取物。

尽管上文对本发明的具体实施方式给予了详细描述和说明，但是应该指明的是，我们可以依据本发明的构想对上述实施方式进行各种等效改变和修改，其所产生的功能作用仍未超出说明书所涵盖的精神时，均应在本发明的保护范围之内。

Claims

1.一种从山茱萸中提取总三萜类物质的方法，包括以下步骤：

2.根据权利要求1所述的方法，其特征在于所述步骤a）中用10~20倍pH=3~6的水溶液70~100℃温度下连续提取三次。

3. 根据权利要求1或2所述的方法，其特征在于所述步骤a）中山茱萸粉碎过筛至40~80目。

4.根据权利要求2所述的方法，其特征在于所述步骤a）中充分水提后的山茱萸残渣用pH=3~6的酸水淋洗1~2遍，并过滤得到水洗后的残渣。

5.根据权利要求1所述的方法，其特征在于所述步骤b）中用50%~90%乙醇溶液回流提取2~3次。

6.根据权利要求1所述的方法，其特征在于所述步骤d）的pH=3~6的低温水溶液为10℃以下的酸水。

7.根据权利要求1所述的方法，其特征在于得到的提取物中山茱萸总三萜类物质含量70%以上。

8.根据权利要求1所述的方法，其特征在于所述调节pH=3~6采用的酸为盐酸、磷酸、硫酸及其混合酸。