CN103239391B - 一种他克莫司软膏 - Google Patents

Abstract

本发明提供一种他克莫司软膏组合物及其制备方法。本发明的他克莫司软膏组合物具有增强的渗透性和降低的皮肤刺激性，可用于治疗特应性皮炎。

Description

一种他克莫司软膏

技术领域

本发明涉及一种含有他克莫司的软膏组合物。本发明新颖的软膏组合物可用作皮肤局部给药系统，用于治疗特应性皮炎。

技术背景

特应性皮炎(atopic dermatitis，AD，也称为特应性湿疹)是一种以剧烈瘙痒为特征的慢性、复发性、炎症性皮肤病，其病因和发病机制尚不明确，但普遍认为与免疫功能异常有关。由于缺乏特效治疗手段，对患者生活质量影响较大，且其发病率日益上升，因此成为近年来的研究热点。近40年来，外用皮质类固醇已成为AD的主要治疗方法，但这类药物治疗AD存在明显的局限性，长期应用易导致皮肤萎缩变薄、毛细血管扩张等不良反应，因而仅限于短期治疗，并且激素制剂不能用于颜面和颈部。因此迫切需要一种非皮质类固醇类，且安全有效的治疗药物。

他克莫司(Tacrolimus，FK506)，商品名为普乐可复(PullockReusable)，是日本藤泽集团(Fujisawa)于1984年从tsukubaensis链霉菌(一种类似真菌的细菌，由Tsukuba在土壤样本中发现)的发酵培养基中分离而得的一种大环内酯类强效免疫抑制剂。他克莫司的免疫抑制作用比环孢素A(CsA)强10～100倍，因而大大降低了临床使用剂量，同时不良反应也明显降低。

已知他克莫司外用可用于治疗皮肤病，如特应性皮炎。目前患特应性皮炎的患者数量显著增加。已知患特应性皮炎患者与正常对象相比表皮脂质和角质水分含量更低，形成水脂膜的能力更低，并且对外部刺激的抵抗阈值更低。而且，已知皮肤的异常干燥或瘙痒是由于皮肤屏障功能的损坏而致。因此，需要含有他克莫司的外用制剂。

已有的含有他克莫司的外用制剂，例如软膏、洗剂、乳膏和凝胶。大部分含有他克莫司的现有的产品仍然为油性基质软膏剂，由于该软膏剂为油脂性基质，因此存在令人不愉快的粘性以及油腻性，而且不容易清洗，更重要的是软膏基质的特性限制了药物自其中的释放，影响药物渗透性，阻碍药效的及时发挥。因此，本领域仍然需要有适合于他克莫司给药特别是通过皮肤给药的性能改进的组合物。

由于他克莫司在水和脂溶性溶剂中溶解不佳，因此含有其的制剂需要能溶解他克莫司的增溶剂。通常使用表面活性剂作为增溶剂。然而，由于其皮肤刺激性，表面活性剂不适用于治疗皮肤病(如特应性皮炎)的制剂。除表面活性剂以外的可用的增溶剂非常有限。这些增溶剂可能如表面活性剂一样具有皮肤刺激性，或可能使活性成分如他克莫司在化学上不稳定，因此不适宜采用具有所述不理想特性的增溶剂。此外，为了降低他克莫司软膏引起的皮肤刺激性，优选的是能够形成不与软膏基质混溶的稳定液滴分散体的增溶剂。而且，在治疗皮肤病(如特应性皮炎)的情况下，由于他克莫司为免疫抑制剂因此优选将其表面递送。如果全身施用他克莫司，则可引起不期望的副作用(例如肾功能障碍)以及导致感染正常情况下免疫系统可预防的疾病的风险。此外，优选的是药物产品具有足够的化学和物理稳定性。

因此，本发明的目的是提供一种具有增强渗透性和低皮肤刺激性的含有他克莫司的外用制剂。

发明内容

本发明提供一种他克莫司的软膏剂，其中包含他克莫司，软膏基质、渗透促进剂、聚乙烯醇和薄荷油。

软膏的基质包括高级脂肪酸及其酯(例如己二酸、肉豆蔻酸、棕榈酸、硬脂酸、油酸、己二酸酯、肉豆蔻酸酯、棕榈酸酯、癸二酸二乙酯、月桂酸己酯、异辛酸鲸蜡酯、羊毛脂和羊毛脂衍生物)、蜡(例如鲸蜡、蜂蜡、地蜡)、高级醇(例如鲸蜡醇、硬脂醇、鲸蜡硬脂醇)、烃类(例如亲水性凡士林、白凡士林、纯化羊毛脂、液体石蜡)、动物和植物油及其组合。除以上所述基质外，本发明的软膏可以任选地包含石蜡如液体石蜡、羊毛脂、动物和植物油、天然蜡、氢化大豆磷脂(卵磷脂)、高级醇。所述乳膏还可包含例如表面活性剂(如聚氧乙烯乙二醇脂肪酸酯或聚氧乙烯乙二醇脂肪酸酯乙二醇烷基醚)，pH调节剂(如二异丙醇胺或氢氧化钠)，稳定剂(如磷酸氢钠、氯化纳或亚硫酸钠)，防腐剂(如羟苯甲酯、羟苯乙酯等)。

软膏基质的油相可以选自凡士林、石蜡、液体石蜡、羊毛脂、蜂蜡、硬脂酸、植物油、高级醇中的一种或多种。软膏基质的乳化剂类型可以选自皂类、月桂醇硫酸钠、多元醇的脂肪酸酯、聚山梨酯类等等中的一种或多种。乳化剂的具体物质可选自三乙醇胺、氢氧化铝、双硬脂酸铝、十二烷基酸钠、硬脂酸甘油酯、聚山梨酯等等中的一种或几种。

在本发明的一个实施方式中，优选的软膏基质的油相为硬脂酸、蓖麻油、凡士林、液体石蜡、羊毛脂中的一种或多种，乳化剂为三乙醇胺、单硬脂酸甘油酯、十二烷基酸钠、聚山梨酯80中的一种或多种。

渗透促进剂可以选自二甲亚砜及其类似物，例如十二烷基甲基亚砜、癸基甲基亚砜，氮酮类物质(例如laurocapam)，醇类，例如多元醇，低级醇等等，以及氨基酸，油酸，磷脂等物质中的一种或多种。

在本发明的一个实施方案中，其中所述多元醇、低级醇是选自下列中的一种或多种：乙醇、异丙醇、丙二醇、乙二醇。

在本发明的一个实施方式中，优选的渗透促进剂是十二烷基甲基亚砜、丙二醇、异丙醇、油酸、氮酮和磷脂中的一种或多种。

在本发明的一个实施方案中，其中聚乙烯醇优选是聚乙烯醇-124。

在本发明的他克莫司软膏剂中，他克莫司的重量份数为0.1-5份，优选0.3-1份。

在本发明的他克莫司软膏剂中，软膏基质的重量份数为500-1000份，优选700-950份。

在本发明的他克莫司软膏剂中，渗透促进剂的重量份数为5-100份，优选10-50份。

在本发明的他克莫司软膏剂中，聚乙烯醇-124的重量份数为5-100份，优选10-50份。

在本发明的他克莫司软膏剂中，薄荷油的重量份数为5-100份，优选10-50份。

在本发明的一个优选的实施方案中，含有按重量份数计的他克莫司0.3-1份，软膏基质700-950份，渗透促进剂10-50份，聚乙烯醇-124 10-50份，薄荷油10-50份。

本发明的他克莫司软膏中的渗透促进剂能够加速他克莫司渗透穿过皮肤，聚乙烯醇具有粘着性和成膜性，具有稳定性好，吸收起效快，成膜后增强药物在皮肤上的停留等优点，薄荷油属于萜烯类化合物，能够促进药物的渗透并刺激皮下毛细曲管的血液循环，此外还能提供清凉舒适的使用感受。上述三类物质的组合使本发明的他克莫司软膏与普通他克莫司软膏相比，具有更强的药物渗透性和更低的皮肤刺激性和更舒适的使用感受。

具体实施方式

通过下面的实施例可以对本发明进行进一步的描述，然而，本发明的范围并不限于下述实施例。本领域的专业人员能够理解，在不背离本发明的精神和范围的前提下，可以对本发明进行各种变化和修饰。本发明对试验中所使用到的材料以及试验方法进行一般性和/或具体的描述。虽然为实现本发明目的所使用的许多材料和操作方法是本领域公知的，但是本发明仍然在此作尽可能详细描述。

A.制剂实施例

实施例1，他克莫司0.3份，硬脂酸150份，蓖麻油150份，液体石蜡100份，三乙醇胺20份，甘油60份，蒸馏水420份，十二烷基甲基亚砜40份，油酸40份，聚乙烯醇-124 80份，薄荷油30份(均按重量份数计)

制备方法：将硬脂酸、蓖麻油、液体石蜡混合，在80℃水浴上融化。另取三乙醇胺、甘油与蒸馏水混匀，加热至相同温度，缓缓加入油相，边加入边搅拌直至乳化完全，冷却备用。另取十二烷基甲基亚砜，油酸，聚乙烯醇-124和薄荷油，加入研细的他克莫司，搅拌均匀。将所得产品边搅拌边加入前述制得的软膏基质中，即得。

实施例2，他克莫司1份，硬脂酸100份，聚山梨酯80 60份，液体石蜡60份，白凡士林100份，甘油100份，山梨酸5份，蒸馏水474份，油酸20份，丙二醇30份，聚乙烯醇-124 30份，薄荷油20份(均按重量份数计)

实施例3，他克莫司5份，石蜡100份，白凡士林100份，单硬脂酸甘油酯150份，液体石蜡150份，聚山梨酯80 20份，羟苯乙酯10份，蒸馏水300份，癸基甲基亚砜45份，laurocapam55份，聚乙烯醇-124 45份，薄荷油30份(均按重量份数计)

实施例4，他克莫司0.1份，硬脂醇220份，十二烷基酸钠15份，白凡士林250份，羟苯甲酯2份，丙二醇100份，蒸馏水308份，磷脂40份，异丙醇5份，聚乙烯醇-124 40份，薄荷油20份(均按重量份数计)

实施例5，他克莫司0.5份，硬脂酸甘油酯35份，硬脂酸120份，液体石蜡60份，白凡士林10份，羊毛脂50份，三乙醇胺5份，蒸馏水420份，十二烷基甲基亚砜15份，磷脂20份，聚乙烯醇-124 40份，薄荷油20份(均按重量份数计)

实施例6，他克莫司0.5份，硬脂酸甘油酯35份，硬脂酸120份，液体石蜡60份，白凡士林10份，羊毛脂50份，三乙醇胺5份，蒸馏水420份，十二烷基甲基亚砜15份，磷脂20份，聚乙烯醇-0588 40份，薄荷油20份(均按重量份数计)

实施例7，他克莫司0.5份，硬脂酸甘油酯35份，硬脂酸120份，液体石蜡60份，白凡士林10份，羊毛脂50份，三乙醇胺5份，蒸馏水420份，十二烷基甲基亚砜15份，磷脂20份，聚乙烯醇-1788 40份，薄荷油20份(均按重量份数计)

实施例2-7的制备方法与实施例1相似，按照乳剂型基质的常规制备方法，称取软膏基质中的油相，加热融化后，加入软膏基质中的乳化剂和水形成的混合物，搅拌直至乳化完全。另取渗透促进剂、聚乙烯醇和薄荷油，与研细的他克莫司混合，在搅拌中加入制得的软膏基质中。

对照实施例8，他克莫司0.3份，硬脂酸200份，蓖麻油200份，液体石蜡150份，三乙醇胺20份，甘油80份，蒸馏水450份(均按重量份数计)

制备方法：将硬脂酸、蓖麻油、液体石蜡混合，在80℃水浴上融化。另取三乙醇胺、甘油与蒸馏水混匀，加热至相同温度，缓缓加入油相，边加入边搅拌直至乳化完全，冷却备用。将研细的他克莫司加入上述制得的软膏基质中，搅拌均匀，即得。

B.实验实施例

一、本实验的目的在于测定他克莫司软膏的皮肤累积透过量及皮肤滞留量。

方法：取Wistar大鼠，体重为200～250g。将其断颈处死、剃毛，分离完整的腹部皮肤，小心剥离皮下脂肪，洗净后备用。

采用改良Franz扩散池法，将上述处理好的皮肤置于供给室和接受室间，角质层面向供给室；接受液为PBS(pH7.4)，供给室中加入1.0ml他克莫司软膏(实施例1-7制备)或1.0ml他克莫司软膏对照品(实施例8制备)或市售品(普彼特软膏，0.03％，安斯泰来制药(中国)有限公司产品)，(37±1)℃水浴恒温24h后，取接收液，采用RP-HPLC法测定其中药物浓度，并计算累积透过量。实验结束后，用胶带剥离法分离角质层，将粘有角质层的胶带置于3.0ml甲醇中，涡旋混合5min，该溶液经0.22μm微孔滤膜滤过后，适当稀释，取20μL注入液相色谱仪，测定大鼠角质层中的药物含量。将胶带剥离后的皮肤组织捣碎并置于10ml甲醇中，涡旋混合10min，超声30min循环3次后，溶液经0.45μm微孔滤膜滤过，取20μL注入液相色谱仪，测定大鼠深部皮肤中的他克莫司含量。

实验结果见表1。

表1，本发明他克莫司软膏及市售品(普特彼软膏)的皮肤渗透试验结果

样品	累积透过量％	角质层滞留量(ug)	深部皮肤滞留量(ug)
				实施例1	未检出	16.78±0.33	14.88±0.56
实施例2	未检出	19.72±0.65	18.77±0.24

实施例3	未检出	14.85±0.39	12.98±0.47
				实施例4	未检出	22.85±0.74	21.63±0.25
实施例5	未检出	20.45±0.12	19.38±0.73
				实施例6	未检出	13.45±0.57	11.96±0.31
实施例7	未检出	14.55±0.28	11.42±0.63
				实施例8	未检出	2.02±0.37	1.47±0.25
市售他克莫司软膏	未检出	2.18±0.46	1.62±0.33

结果：上述制剂24小时透过皮肤的量均在检出限以下，说明透过量极少，因此，药物不易进入血液循环，避免带来全身不良反应。此外，从结果可见，本发明制备的含有渗透促进剂，聚乙烯醇，尤其是聚乙烯醇-124，和薄荷油的软膏组合物与不含上述物质的软膏组合物，以及市售品(普特彼软膏)相比，在角质层与深部皮肤的滞留量均高出很多倍，而特应性皮炎的治疗靶部位在角质层和深部皮肤部位。

二、他克莫司软膏抗小鼠耳特应性皮炎的研究

1.试剂：2，4-二硝基氟苯(DNFB)，溶于丙酮-橄榄油(3∶1，v/v)混合溶剂中，配制成0.15％w/v的溶液；本发明他克莫司软膏(按实施例1-8的处方制备)；市售0.1％他克莫司软膏(Astellas Toyama公司，日本)；地塞米松软膏(深圳三九公司10g∶5mg)。

2.动物模型的制备：取7周龄雄性BALB/c小鼠(体重18～22g)，随机分成致敏组和溶剂组，致敏组66只，溶剂组6只。致敏组分别于小鼠右耳两侧涂0.15％DNFB25ul诱发皮炎，溶剂组涂抹同体积的丙酮-橄榄油(3∶1，v/v)混合溶剂作为对照(未致炎)。一周后观察鼠耳是否发生明显肿胀，作为模型制备成功与否的标志。

3.实验分组与给药：将已成功致敏的小鼠随机分为11组，每组6只。在最后一次攻击前8小时，每组分别给予他克莫司软膏(实施例1-7)、对照他克莫司软膏组(实施例8)、他克莫司市售软膏(0.1％)以及地塞米松市售软膏和辅料对照组(实施例1的配方制备但不含他克莫司)。他克莫司制剂的剂量约为其软膏剂人用剂量的6倍(以体重折算)，地塞米松亦约为人用剂量的6倍。

4.观察指标鼠耳厚度的测定：实验各组于最后一次攻击后6h用数显螺旋测微器(Kenta公司，新加坡)测定小鼠右耳厚度并与攻击前鼠耳厚度比较。

5.实验结果显示于表2。

表2、本发明他克莫司软膏、市售他克莫司软膏及地塞米松软膏抗小鼠耳特应性皮炎的结果

样品	鼠耳增厚(微米)
		溶剂组	0.3
辅料对照组	163.7
		实施例1	78.4
实施例2	71.8
		实施例3	66.7
实施例4	53.1
		实施例5	70.9
实施例6	78.4
		实施例7	76.3
实施例8	98.5
		他克莫司市售软膏	90.2
地塞米松市售软膏	105.5

从表中结果可见，溶剂组对小鼠耳增厚没有明显影响；相对于辅料对照组，本发明的他克莫司软膏、他克莫司市售软膏及地塞米松市售软膏均能降低鼠耳厚度，而本发明的他克莫司软膏组能明显降低小鼠耳的厚度，说明该制剂具有显著的抑制小鼠耳皮炎的作用。因此，本发明皮肤局部用他克莫司软膏剂不但能够克服市售软膏的油脂性基质所产生的令人不愉悦的粘性和油腻性、不易清洗的缺点，并能够提高药物的渗透性，增加皮肤内药物的滞留量，从而增强疗效。

Claims (1)

1.一种他克莫司软膏，其中含有他克莫司0.1份，硬脂醇220份，十二烷基酸钠15份，白凡士林250份，羟苯甲酯2份，丙二醇100份，蒸馏水308份，磷脂40份，异丙醇5份，聚乙烯醇-124 40份，薄荷油20份(均按重量份数计)。