CN103191356B

CN103191356B - 抗菌喷剂及其制备方法

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Publication number: CN103191356B
Application number: CN201310137602.7A
Authority: CN
Inventors: 黄分雪
Original assignee: Individual
Current assignee: Liu Chao
Priority date: 2013-04-19
Filing date: 2013-04-19
Publication date: 2014-07-23
Anticipated expiration: 2033-04-19
Also published as: CN103191356A

Abstract

本发明公开了一种抗菌喷剂及其制备方法，抗菌喷剂中含有蛇床子、苦参、黄柏、百部等中药成分，能够有效调节阴道内的pH值，维护阴道内的正常酸性环境，起到温补调理保养的效果；制备方法是先经过三次水提后再经过醇提的过程，使得有效成分被完全提取出，所制得的抗菌喷剂不但具有中药成分本身的药效作用，还具有易吸收的特点，且喷涂后不用再次清洗，使用方法简单，毒性较低；并且所有的检验指标均符合《消毒技术规范》中的相关规定，抗菌喷剂的微生物污染检测符合GB-15979-2002的相关规定，并且金黄色葡萄球菌2min时的抑菌率均达到100%、白色念珠菌2min时的抑菌率达到99.5%以上。本发明的抗菌喷剂用于生殖系统感染疾病的治疗。

Description

抗菌喷剂及其制备方法

技术领域

本发明属于医药领域，涉及外用保健药物，具体涉及一种抗菌喷剂及其制备方法。

背景技术

随着社会经济文化的发展以及男女自我保健意识增强，近年来男女生殖系统用药市场需求量巨大。目前妇科用药品种繁多，以酸性及化学产品居多。长期使用不仅会影响阴道正常菌群的生长，酸碱失衡，使其抑制病菌的作用下降。然而男性泌尿系统日常护理产品缺乏。目前妇科日常护理产品不能有效达到治疗与保养的目的，并且男性泌尿系统的日常护理产品同样具有缺乏的现象。

妇科炎症的常见病中生殖道感染以慢性子宫颈炎、阴道炎、白带异常为多外阴炎次之；男性生殖系统炎症如常见的龟头炎、阴囊炎、前列腺炎等。这些常见的男女生殖系统炎症大都是由多种细菌，真菌、霉菌引发的。北京大学妇儿保健研究培训中心的赵更力等，在全国15个省、直辖市（区）进行的流行病学调查结果表明，我国城市妇女中已婚女性生殖道感染的发病率为46.5%。随着国内零售市场的快速发展以及女性健康知识的普及，妇科炎症患者采用自我药疗的比例越来越多，妇科炎症用药零售市场将会越来越大。有关数据显示，零售市场占妇科炎症用药市场的63%，医院市场所占比例为37%，零售市场与医院的比例接近2:1。现有的治疗生殖系统感染的中药，分为口服药物或外用药物，而外用药大都是洗液，在使用前要进行稀释，使用起来不方便；而外用药物中也有使用喷剂的，但是使用过后，一般都要经过再次的清洗，操作繁琐。

发明内容

本发明要解决的技术问题，是提供一种抗菌喷剂及其制备方法，该抗菌喷剂不但具有杀菌、消炎的作用，还能够有效调节阴道内的pH值，维护阴道内的正常酸性环境，起到温补调理保养的效果且毒性较低；制备方法是采用先经过三次水提后经过醇提的过程，使得中药组成中的有效成分被完全提取出。

为解决上述技术问题，本发明所采取的技术方案是：

一、抗菌喷剂

一种抗菌喷剂，由中药原料经水提、醇提制成，中药原料按重量份数计包括如下组成：

芦荟 0.8～0.95份，蛇床子0.5～0.8份，黄柏 0.5～0.8份，

黄连 0.32～0.45份，百部 0.8～0.95份，地肤子 0.4～0.5份，

苦参 0.25～0.4份，人参 0.7～0.78份，黄芩 0.4～0.45份，

薄荷 0.01～0.03份，冰片 0.01～0.03份。

本发明的上述组方中各组分所起的作用如下：

1)芦荟具有杀菌作用，其中含有的芦荟酊(Aloetin)．是抗菌性很强的物质，能杀灭真菌、霉菌、细菌、病毒等病菌，抑制和消灭病原体的发育繁殖，芦荟抗菌杀菌的病菌类有：白喉菌、破伤风菌、肺炎菌、乳酸菌、痢疾菌、大肠菌、黑死病菌、霍乱菌以及引发中耳炎、膀胱炎、化脓症、麻疹、狂犬病、小儿麻痹、流行性脑炎等疾病的病菌。

2)蛇床子具有解毒杀虫、燥湿、祛风等功效。对于治疗外阴湿疹，妇人阴痒、滴虫性阴道炎和湿疹疥癣具有较强的作用。

3)黄柏具有清热燥湿，泻火解毒，除骨蒸清虚热的功效。主要真对于阴虚火旺，盗汗骨蒸、痿辟、盗汗、遗精、疮疡肿毒，湿疹瘙痒具有较强的作用。

4)黄连具有清热燥湿，泻火解毒的作用。

5)百部具有治疗阴虚的作用，对于头虱，体虱，蛲虫病，阴部瘙痒治疗效果明显。

6)地肤子具有清热利湿，祛风止痒的功效，对于小便涩痛、阴痒带下、风疹、湿疹、皮肤瘙痒治疗效果明显。

7)苦参具有清热燥湿，杀虫，利尿的功效。对于热痢、便血、黄疸尿闭、赤白带下、阴肿阴痒、湿疹、湿疮、皮肤瘙痒、疥癣麻风和滴虫性阴道炎作用明显。

8)人参具有增强人的生命力和促进阴部血液循环的作用。可以大补元气，复脉固脱，补脾益肺，生津止渴，安神益智。

9)黄芩具有清热燥湿，凉血安胎，解毒功效。黄芩抗菌的临床应用比黄连还好，而且不产生抗药性。借助广谱抗菌作用强的特点，用在真菌培养杂菌感染特厉害，用黄芩提取液效果很好。

10)薄荷具有疏散风热，清利头目，利咽透疹，疏肝行气的作用。对于解毒、疮疥、瘾疹、风疹瘙痒具有很好的治疗效果。

11)冰片具有开窍醒神，清热散毒，明目退翳的功效，对于口疮齿肿，疮痈疳痔，目赤肿痛效果明显。

上述中药成分联合使用，在实现其各自的功效的前提下，功效更佳突出。

二、抗菌喷剂的制备方法

本发明还提供了一种制备上述抗菌喷剂的方法，其特征在于它包括以下步骤：

（1）将处方中的中药原料首先进行检验，符合相应药典标准后方可入药；

（2）所用的中药材入药前均需净制成相应的中药饮片；

（3）将中药饮片中加水煎煮三次后合并煎煮液，过滤，浓缩得浸膏；

（4）浸膏中加入含量达70-80%医用乙醇，搅匀，放置8-10h，过滤，滤液浓缩，得提取物；

（5）提取物中加入饮片总量2%的苯扎溴铵，搅拌均匀，静置24-48h，过滤取上清液，待检；

（6）中心化验室化验合格后按规定量分装、贴标签，即得抗菌喷剂。

作为本发明的一种限定，所述步骤（3）中的煎煮三次具体操作如下：

①第一次加入饮片总量8-12倍量的水，煎煮1.0-2.0h；

②第二次加入饮片总量8-10倍量的水，煎煮1.0-1.5h；

③第三次加入饮片总量6-8倍量的水，煎煮0.5-1.0h；

作为本发明的另一种限定，所述步骤（3）中的滤液浓缩为相对密度1.00-1.30的浸膏，其中浸膏相对密度的检测是在40-50℃下进行的。

由于采用了上述的技术方案，本发明与现有技术相比，所取得的技术进步在于：

①本发明所提供的抗菌喷剂，含有蛇床子、苦参、黄柏、百部等中药成分，具有杀灭白色念珠菌、阴道滴虫、大肠杆菌、金黄色葡萄球菌、淋球菌等功能和消炎的作用，还能有效调节阴道内的pH值，维护阴道内的正常酸性环境，起到温补调理保养的效果。

②本发明所提供的制备方法是采用先经过三次水提后经过醇提的过程，使得中药成分中的有效成分被完全提取出；其中，三次水提过程中所加入的水量和煎煮时间是不同的，是因为每次提取的中药中的有效成分不同，因此制备参数有所差别；之前的产物再经过醇提，使得有效成分充分在乙醇中溶解，所制得的抗菌喷剂不但具有中药成分的药效作用，还具有易吸收的特点，且喷涂后不用再次清洗，操作简单，毒性较低。本发明在制备过程中使用了苯扎溴铵，起到防腐的作用，能够使所制得的抗菌喷剂具有更长的存放时间，并且所有的检验指标均符合《消毒技术规范》中的相关规定，并取得了河北省卫生防疫站出具的检验报告。本发明所制得的抗菌喷剂的细菌菌落总数、大肠菌群、金黄色葡萄球菌、绿脓杆菌、溶血性链球菌和真菌菌落总数均符合GB-15979-2002的相关规定，并且金黄色葡萄球菌２min时的抑菌率均达到100%、白色念珠菌２min时的抑菌率达到99.5%以上。

本发明的抗菌喷剂用于生殖系统感染疾病的治疗。

本发明下面将结合具体实施例作进一步详细说明。

具体实施方式

实施例１一种抗菌喷剂及其制备方法

一种抗菌喷剂，按重量份数计包括如下中药原料组成：

芦荟 0.8 g，蛇床子 5.0 g，黄柏 0.5 g，黄连 0.32 g，百部 0.8 g，地肤子 0.4 g，苦参 0.25 g，人参 0.7 g，黄芩 0.4 g，薄荷 0.01 g，冰片 0.01 g。

上述抗菌喷剂的制备方法，包括以下步骤：

（1）将上述中药成分进行检验，符合其标准后方可入药；

（2）检验合格的各中药材检验合格后，分别净制成相应的中药饮片；

（3）取配方量的各种中药饮片，加水煎煮三次后合并煎煮液，过滤，浓缩成浸膏相对密度为1.00的浸膏，该浸膏的相对密度以在50℃条件下检测为准。

三次煎煮的具体操作如下：

①第一次加入饮片总量8倍重量的水，煎煮1.0h；

②第二次加入饮片总量8倍重量的水，煎煮1.0h；

③第三次加入饮片总量6倍重量的水，煎煮0.5h；

（4）浸膏中加入含量75%医用乙醇，搅匀，放置10h，过滤，滤液浓缩，得提取物；

（5）提取物中加入饮片总量2%的苯扎溴铵，搅拌均匀，静置24h，过滤取上清液，待检；

其中，本实施例所制得的抗菌喷剂，所述的化验合格是指消毒剂安全评价，具体的分别经过急性经口毒性试验、皮肤刺激试验和眼刺激试验、小鼠骨髓细胞微核试验和蓄积毒性试验的检验，其结果均符合相关规定。具体结果如下：

一、安全性评价

（1）消毒剂安全性评价

根据《消毒技术规范》对送检样品进行安全性检验，结果如下：

急性经口毒性试验：属于实际无毒级。

皮肤刺激试验：无刺激性。

眼刺激试验：无刺激性。

小鼠骨髓细胞微核试验：该项试验为阴性。

蓄积毒性试验：弱蓄积毒性。

（2）急性经口毒性试验

实验目的：检测消毒剂对试验动物的急性毒性作用和强度。

试验材料和方法：

a、受试物：本实施例中所制得的抗菌喷剂。

b、受试物的配置方法：受试物用蒸馏水配制成所需的浓度。

c、试验动物：由中国医科院实验动物中心提供清洁级昆明种小鼠（合格证号：医动字01-3010号），体重18-22g。

d、动物饲养环境：饲料由中国医科院实验动物中心提供，室温为26℃，相对湿度为57%，饲养方式为群饲。

e、剂量和给药方式：选用昆明种小鼠50只，随机分成五组，每组10只，雌雄各半。采用霍恩氏法，设受试物为五个剂量，分别为10000、4640、2150、1000、464mg/kg体重。采用一次经口灌胃方式，按0.2ml/10g体重计算染毒量。动物试验前禁食过夜。

f、观察指标：染毒后，观察动物的一般状况、中毒症状和死亡情况，观察期限为两周。根据试验结果计算LD₅₀，并确定急性毒性分级。

经过上述试验后得到如下结果：

染毒后，动物无不良反应、中毒症状和死亡情况出现。

LD₅₀及95%可信区间：

雄性动物LD₅₀﹥10000 mg/kg体重；雌性动物LD₅₀﹥10000 mg/kg体重。

按照《消毒技术规范》LD₅₀﹥5000 mg/kg体重，该受试物属实际无毒物。

（3）皮肤刺激试验

试验目的：检测消毒剂对试验动物的皮肤的刺激/腐蚀的作用和强度。

试验材料和方法：

a、受试物：本实施例中所制得的抗菌喷剂。

b、受试物的配置方法：直接使用原液。

c、试验动物：由河北省试验动物中心提供普通级大白兔（合格证号04063），体重2-3Kg，雌雄各半。

d、动物饲养环境：饲料由中国医科院实验动物中心提供，室温为26℃，相对湿度为54%。

e、试验方法：

e1）试验前24h将家兔背部脊柱两侧毛剪掉，去毛范围为左、右各约3cm×3cm。

e2）正式试验时，将受试物0.2ml滴在2.5cm×2.5cm的二层纱布上，贴敷于左侧去毛皮肤上，然后用一层油纸覆盖其上，再用无刺激性胶布固定。右侧去毛皮肤作为空白对照，敷用时间为4h，试验结果结束后用温水除去残留受试物。

e3）除去受试物1、24、48h，分别观察皮肤局部反应，按《消毒技术规范》中表3-3和表3-4进行皮肤反应积分和刺激强度评价。

经过上述试验后得到如下结果：

上述试验结果表明：受试物对动物的皮肤刺激性强度属于无刺激性。

（4）眼刺激试验

实验目的：检测消毒剂对试验动物的眼睛进行即兴刺激和腐蚀作用。

试验材料和方法：

a、受试物：本实施例中所制得的抗菌喷剂。

b、受试物的配置方法：直接使用原液。

d、动物饲养环境：饲料由中国医科院实验动物中心提供，室温为26℃，相对湿度为52%。

e、试验方法：吸取浓度浓缩5倍的受试物1-2滴，滴入家兔左眼结膜囊内，被动闭合4s后，用生理盐水冲洗5min，右眼作为对照。记录染毒后6、24、48h和第4、7天观察家兔的眼的局部反应，必要时用2%荧光素钠溶液或者裂隙灯对家兔眼睛做进一步检查，按《消毒技术规范》中表3-5所列眼损害评分标准进行评分，再按照表3-6进行眼刺激强度的评价。

经过上述试验后得到如下结果：

上述试验结果表明：受试物对动物眼睛的刺激作用属于无刺激性。

（5）小鼠骨髓细胞微核试验

实验目的：检测消毒剂对小鼠骨髓嗜多染红细胞微核形成的影响，评价消毒剂的体内遗传毒性。

试验材料和方法：

a、受试物：本实施例中所制得的抗菌喷剂。

b、受试物的配置方法：将原液用蒸馏水配制成所需浓度。

c、试验动物：由中国医科院实验动物中心提供清洁级昆明种小鼠（合格证号：医动字01-3001号），体重25-30g。

d、动物饲养环境：饲料由中国医科院实验动物中心提供，室温为26℃，相对湿度为56%，饲养方式为群饲。

e、给药剂量和给药方式：设置3个剂量组，采用蒸馏水分别配制1250、2500和5000mg/kg体重的浓度，同时设定阴性对照组（即为蒸馏水）和阳性对照组（即为CP为40mg/kg体重），按照0.2ml/10g体重计算染毒量。每个剂量组10只动物，雌雄各半。每组均间隔24h给样，第二次给样后6h取胸骨骨髓制片，每只动物计数1000个嗜多染红细胞，观察其微核发生率。

经过上述试验后得到如下结果：

上述试验结果表明：受试物三个剂量的微核发生率与对照组相比无显著性差异，与阳性对照组相比较具有显著性差异。受试物对小鼠骨髓细胞微核试验为阴性。

（6）蓄积毒性试验

实验目的：检测消毒剂在实验动物体内的蓄积毒性，并为亚慢性毒性试验以及其他有关毒性试验的剂量选择参考依据。

试验材料和方法：

a、受试物：本实施例中所制得的抗菌喷剂。

b、受试物的配置方法：受试物用蒸馏水配制成所需的浓度。

c、试验动物：由中国医科院实验动物中心提供清洁级昆明种小鼠（合格证号：医动字01-3001号），体重18-20g。

d、动物饲养环境：饲料由中国医科院实验动物中心提供，室温为26℃，相对湿度为54%，饲养方式为群饲。

e、剂量和给药方式：选用昆明种小鼠40只，雌雄各半，同性小鼠10只一组，共4组。每天灌胃一次，按0.2ml/10g体重计算染毒量，每4天为一期。第一期剂量为0.1LD₅₀，以后每期剂量按《消毒技术规范》表3-9定期递增染毒剂量，用表中所示递增量进行递增，直至半数动物死亡为止，计算累计总剂量，即为LD_50（n）。如果给药20天，死亡动物仍未足半数即停止试验。

f、试验结束后按下式计算蓄积系数（K）：K= LD_50（n）/ LD_50（1），并确定蓄积毒性分级。

经过上述试验后得到如下结果：试验结束时，动物无中毒症状及死亡出现；经计算所得的蓄积系数（K）﹥5.24﹥5，按照《消毒技术规范》评价该受试动物为弱蓄积毒性。

二、微生物污染检测

1）试验材料和条件：

a、受试物：本实施例所制得的抗菌喷剂。

b、受试物的数量和性状：5瓶；液态/100ml/瓶。

c、检验依据：GB-15979-2002中的B1-B8.2。

d、检测条件：百级净化室中，环境温度26℃，相对湿度50%。

2）试验结果：

3）结论：经检测本实施例所制得的抗菌喷剂的细菌菌落总数、大肠菌群、金黄色葡萄球菌、绿脓杆菌、溶血性链球菌和真菌菌落总数均符合GB-15979-2002的相关规定。

三、抑菌试验

抑菌试验分别对金黄色葡萄球菌和白色念珠菌进行了效果检测。

金黄色葡萄球菌的检测如下所示：

11）试验材料和条件

a、试验菌株：由军事医学科学院微生物流行病研究所提供的金黄色葡萄球菌，菌株号为ATCC6538，培养代数为第11-13代。

b、试验样品：本实施例所制得的抗菌喷剂。

c、试验样品的数量和性状：3瓶；液体/100ml/瓶。

d 、稀释液：0.03mol/L的磷酸盐缓冲液，pH=7.2。

e、培养基：营养琼脂。

f、检验依据：GB15979-2002中的C4.1-C4.2。

g、检测条件和次数：检测温度为22-24℃；3次。

12）检测结果

13）结论

依据GB15979-2002，本实施例在试验温度为22-24℃下，作用2min后对金黄色葡萄球菌的平均抑菌率达到了100％，具有较强的抑菌作用。

白色念珠菌的检测如下所示：

21）试验材料和条件

a、试验菌株：由军事医学科学院微生物流行病研究所提供的白色念珠菌，菌株号为ATCC10231，培养代数为第12-14代。

b、试验样品：本实施例所制得的抗菌喷剂。

c、试验样品的数量和性状：3瓶；液体/100ml/瓶。

d 、稀释液：0.03mol/L的磷酸盐缓冲液，pH=7.2。

e、培养基：沙氏琼脂。

f、检验依据：GB15979-2002中的C4.1-C4.2。

g、检测条件和次数：检测温度为22-24℃；3次。

２2）检测结果

２3）结论

依据GB15979-2002，本实施例在试验温度为22-24℃下，作用2min后对金黄色葡萄球菌的平均抑菌率达到了99.67％，具有较强的抑菌作用。

实施例2-5

实施例2-5分别为一种抗菌喷剂，其所涉及的中药成分和制备过程与实施例1相同，不同之处仅在于：

中药原料组成的用量与制备方法中所涉及的参数有差异，安全性评价指标也是参照实施例1进行评价。具体如下表所示：

Claims

1.一种抗菌喷剂，由中药原料经水提、醇提制成，其特征在于按重量份数计由如下中药原料组成：

芦荟 0.8～0.95份，蛇床子 0.5～0.8份，黄柏 0.5～0.8份，

黄连 0.32～0.45份，百部 0.8～0.95份，地肤子 0.4～0.5份，

苦参 0.25～0.4份，人参 0.7～0.78份，黄芩 0.4～0.45份，

薄荷 0.01～0.03份，冰片 0.01～0.03份。

2.一种制备如权利要求1所述的抗菌喷剂的方法，其特征在于它包括以下步骤：

（2）所用的中药原料入药前均需净制成相应的中药饮片；

（4）浸膏中加入含量达75%的医用乙醇，搅匀，放置8-10h，过滤，滤液浓缩，得提取物；

3.根据权利要求2所述的制备抗菌喷剂的方法，其特征在于所述步骤（3）中的煎煮三次具体操作如下：

①第一次加入饮片总量8-12倍重量的水，煎煮1.0-2.0h；

②第二次加入饮片总量8-10倍重量的水，煎煮1.0-1.5h；

③第三次加入饮片总量6-8倍重量的水，煎煮0.5-1.0h。

4.根据权利要求2或3所述的制备抗菌喷剂的方法，其特征在于：所述步骤（3）中所得浸膏的相对密度为1.00-1.30，其相对密度的检测在40-50℃下进行。