CN103191356A - 抗菌喷剂及其制备方法 - Google Patents

Abstract

本发明公开了一种抗菌喷剂及其制备方法，抗菌喷剂中含有蛇床子、苦参、黄柏、百部等中药成分，能够有效调节阴道内的pH值，维护阴道内的正常酸性环境，起到温补调理保养的效果；制备方法是先经过三次水提后再经过醇提的过程，使得有效成分被完全提取出，所制得的抗菌喷剂不但具有中药成分本身的药效作用，还具有易吸收的特点，且喷涂后不用再次清洗，使用方法简单，毒性较低；并且所有的检验指标均符合《消毒技术规范》中的相关规定，抗菌喷剂的微生物污染检测符合GB-15979-2002的相关规定，并且金黄色葡萄球菌2min时的抑菌率均达到100%、白色念珠菌2min时的抑菌率达到99.5%以上。本发明的抗菌喷剂用于生殖系统感染疾病的治疗。

Description

抗菌喷剂及其制备方法

技术领域

本发明属于医药领域，涉及外用保健药物，具体涉及一种抗菌喷剂及其制备方法。

背景技术

随着社会经济文化的发展以及男女自我保健意识增强，近年来男女生殖系统用药市场需求量巨大。目前妇科用药品种繁多，以酸性及化学产品居多。长期使用不仅会影响阴道正常菌群的生长，酸碱失衡，使其抑制病菌的作用下降。然而男性泌尿系统日常护理产品缺乏。目前妇科日常护理产品不能有效达到治疗与保养的目的，并且男性泌尿系统的日常护理产品同样具有缺乏的现象。

妇科炎症的常见病中生殖道感染以慢性子宫颈炎、阴道炎、白带异常为多                                                

外阴炎次之；男性生殖系统炎症如常见的龟头炎、阴囊炎、前列腺炎等。这些常见的男女生殖系统炎症大都是由多种细菌，真菌、霉菌引发的。北京大学妇儿保健研究培训中心的赵更力等，在全国15个省、直辖市（区）进行的流行病学调查结果表明，我国城市妇女中已婚女性生殖道感染的发病率为46.5%。随着国内零售市场的快速发展以及女性健康知识的普及，妇科炎症患者采用自我药疗的比例越来越多，妇科炎症用药零售市场将会越来越大。有关数据显示，零售市场占妇科炎症用药市场的63%，医院市场所占比例为37%，零售市场与医院的比例接近2:1。现有的治疗生殖系统感染的中药，分为口服药物或外用药物，而外用药大都是洗液，在使用前要进行稀释，使用起来不方便；而外用药物中也有使用喷剂的，但是使用过后，一般都要经过再次的清洗，操作繁琐。

发明内容

本发明要解决的技术问题，是提供一种抗菌喷剂及其制备方法，该抗菌喷剂不但具有杀菌、消炎的作用，还能够有效调节阴道内的pH值，维护阴道内的正常酸性环境，起到温补调理保养的效果且毒性较低；制备方法是采用先经过三次水提后经过醇提的过程，使得中药组成中的有效成分被完全提取出。

为解决上述技术问题，本发明所采取的技术方案是：

一、抗菌喷剂

一种抗菌喷剂，由中药原料经水提、醇提制成，中药原料按重量份数计包括如下组成：

芦荟  0.8～0.95份，蛇床子0.5～0.8份， 黄柏  0.5～0.8份，

黄连 0.32～0.45份，百部  0.8～0.95份，地肤子  0.4～0.5份，

苦参  0.25～0.4份，人参 0.7～0.78份，黄芩  0.4～0.45份，

薄荷   0.01～0.03份，冰片 0.01～0.03份。

本发明的上述组方中各组分所起的作用如下： 

1)芦荟具有杀菌作用，其中含有的芦荟酊(Aloetin)．是抗菌性很强的物质，能杀灭真菌、霉菌、细菌、病毒等病菌，抑制和消灭病原体的发育繁殖，芦荟抗菌杀菌的病菌类有：白喉菌、破伤风菌、肺炎菌、乳酸菌、痢疾菌、大肠菌、黑死病菌、霍乱菌以及引发中耳炎、膀胱炎、化脓症、麻疹、狂犬病、小儿麻痹、流行性脑炎等疾病的病菌。

2)蛇床子具有解毒杀虫、燥湿、祛风等功效。对于治疗外阴湿疹，妇人阴痒、滴虫性阴道炎和湿疹疥癣具有较强的作用。

3)黄柏具有清热燥湿，泻火解毒，除骨蒸清虚热的功效。主要真对于阴虚火旺，盗汗骨蒸、痿辟、盗汗、遗精、疮疡肿毒，湿疹瘙痒具有较强的作用。

4)黄连具有清热燥湿，泻火解毒的作用。

5)百部具有治疗阴虚的作用，对于头虱，体虱，蛲虫病，阴部瘙痒治疗效果明显。

6)地肤子具有清热利湿，祛风止痒的功效，对于小便涩痛、阴痒带下、风疹、湿疹、皮肤瘙痒治疗效果明显。

7)苦参具有清热燥湿，杀虫，利尿的功效。对于热痢、便血、黄疸尿闭、赤白带下、阴肿阴痒、湿疹、湿疮、皮肤瘙痒、疥癣麻风和滴虫性阴道炎作用明显。

8)人参具有增强人的生命力和促进阴部血液循环的作用。可以大补元气，复脉固脱，补脾益肺，生津止渴，安神益智。

9)黄芩具有清热燥湿，凉血安胎，解毒功效。黄芩抗菌的临床应用比黄连还好，而且不产生抗药性。借助广谱抗菌作用强的特点，用在真菌培养杂菌感染特厉害，用黄芩提取液效果很好。

10)薄荷具有疏散风热，清利头目，利咽透疹，疏肝行气的作用。对于解毒、疮疥、瘾疹、风疹瘙痒具有很好的治疗效果。

11)冰片具有开窍醒神，清热散毒，明目退翳的功效，对于口疮齿肿，疮痈疳痔，目赤肿痛效果明显。

上述中药成分联合使用，在实现其各自的功效的前提下，功效更佳突出。

二、抗菌喷剂的制备方法

本发明还提供了一种制备上述抗菌喷剂的方法，其特征在于它包括以下步骤：

（1）将处方中的中药原料首先进行检验，符合相应药典标准后方可入药；

（2）所用的中药材入药前均需净制成相应的中药饮片；

（3）将中药饮片中加水煎煮三次后合并煎煮液，过滤，浓缩得浸膏；

（4）浸膏中加入含量达70-80%医用乙醇，搅匀，放置8-10h，过滤，滤液浓缩，得提取物； 

（5）提取物中加入饮片总量2%的苯扎溴铵，搅拌均匀，静置24-48h，过滤取上清液，待检；

（6）中心化验室化验合格后按规定量分装、贴标签，即得抗菌喷剂。

作为本发明的一种限定，所述步骤（3）中的煎煮三次具体操作如下：

①第一次加入饮片总量8-12倍量的水，煎煮1.0-2.0h；

②第二次加入饮片总量8-10倍量的水，煎煮1.0-1.5h；

③第三次加入饮片总量6-8倍量的水，煎煮0.5-1.0h；

作为本发明的另一种限定，所述步骤（3）中的滤液浓缩为相对密度1.00-1.30的浸膏，其中浸膏相对密度的检测是在40-50℃下进行的。

由于采用了上述的技术方案，本发明与现有技术相比，所取得的技术进步在于：

①本发明所提供的抗菌喷剂，含有蛇床子、苦参、黄柏、百部等中药成分，具有杀灭白色念珠菌、阴道滴虫、大肠杆菌、金黄色葡萄球菌、淋球菌等功能和消炎的作用，还能有效调节阴道内的pH值，维护阴道内的正常酸性环境，起到温补调理保养的效果。

②本发明所提供的制备方法是采用先经过三次水提后经过醇提的过程，使得中药成分中的有效成分被完全提取出；其中，三次水提过程中所加入的水量和煎煮时间是不同的，是因为每次提取的中药中的有效成分不同，因此制备参数有所差别；之前的产物再经过醇提，使得有效成分充分在乙醇中溶解，所制得的抗菌喷剂不但具有中药成分的药效作用，还具有易吸收的特点，且喷涂后不用再次清洗，操作简单，毒性较低。本发明在制备过程中使用了苯扎溴铵，起到防腐的作用，能够使所制得的抗菌喷剂具有更长的存放时间，并且所有的检验指标均符合《消毒技术规范》中的相关规定，并取得了河北省卫生防疫站出具的检验报告。本发明所制得的抗菌喷剂的细菌菌落总数、大肠菌群、金黄色葡萄球菌、绿脓杆菌、溶血性链球菌和真菌菌落总数均符合GB-15979-2002的相关规定，并且金黄色葡萄球菌２min时的抑菌率均达到100%、白色念珠菌２min时的抑菌率达到99.5%以上。

本发明的抗菌喷剂用于生殖系统感染疾病的治疗。

本发明下面将结合具体实施例作进一步详细说明。

具体实施方式

实施例１  一种抗菌喷剂及其制备方法

一种抗菌喷剂，按重量份数计包括如下中药原料组成：

芦荟 0.8 g，蛇床子  5.0 g， 黄柏  0.5 g， 黄连  0.32 g，百部  0.8 g，地肤子  0.4 g，苦参  0.25 g，人参  0.7 g，黄芩  0.4 g，薄荷   0.01 g， 冰片  0.01 g。

上述抗菌喷剂的制备方法，包括以下步骤：

（1）将上述中药成分进行检验，符合其标准后方可入药；

（2）检验合格的各中药材检验合格后，分别净制成相应的中药饮片；

（3）取配方量的各种中药饮片，加水煎煮三次后合并煎煮液，过滤，浓缩成浸膏相对密度为1.00的浸膏，该浸膏的相对密度以在50℃条件下检测为准。

三次煎煮的具体操作如下：

①第一次加入饮片总量8倍重量的水，煎煮1.0h；

②第二次加入饮片总量8倍重量的水，煎煮1.0h；

③第三次加入饮片总量6倍重量的水，煎煮0.5h； 

（4）浸膏中加入含量75%医用乙醇，搅匀，放置10h，过滤，滤液浓缩，得提取物； 

（5）提取物中加入饮片总量2%的苯扎溴铵，搅拌均匀，静置24h，过滤取上清液，待检；

（6）中心化验室化验合格后按规定量分装、贴标签，即得抗菌喷剂。

其中，本实施例所制得的抗菌喷剂，所述的化验合格是指消毒剂安全评价，具体的分别经过急性经口毒性试验、皮肤刺激试验和眼刺激试验、小鼠骨髓细胞微核试验和蓄积毒性试验的检验，其结果均符合相关规定。具体结果如下：

一、安全性评价

（1）消毒剂安全性评价

根据《消毒技术规范》对送检样品进行安全性检验，结果如下：

急性经口毒性试验：属于实际无毒级。

皮肤刺激试验：无刺激性。

眼刺激试验：无刺激性。

小鼠骨髓细胞微核试验：该项试验为阴性。

蓄积毒性试验：弱蓄积毒性。

（2）急性经口毒性试验

实验目的：检测消毒剂对试验动物的急性毒性作用和强度。

试验材料和方法：

a、受试物：本实施例中所制得的抗菌喷剂。

b、受试物的配置方法：受试物用蒸馏水配制成所需的浓度。

c、试验动物：由中国医科院实验动物中心提供清洁级昆明种小鼠（合格证号：医动字01-3010号），体重18-22g。

d、动物饲养环境：饲料由中国医科院实验动物中心提供，室温为26℃，相对湿度为57%，饲养方式为群饲。

e、剂量和给药方式：选用昆明种小鼠50只，随机分成五组，每组10只，雌雄各半。采用霍恩氏法，设受试物为五个剂量，分别为10000、4640、2150、1000、464mg/kg体重。采用一次经口灌胃方式，按0.2ml/10g体重计算染毒量。动物试验前禁食过夜。

f、观察指标：染毒后，观察动物的一般状况、中毒症状和死亡情况，观察期限为两周。根据试验结果计算LD₅₀，并确定急性毒性分级。

经过上述试验后得到如下结果：

染毒后，动物无不良反应、中毒症状和死亡情况出现。

LD₅₀及95%可信区间：

雄性动物LD₅₀﹥10000 mg/kg体重；雌性动物LD₅₀﹥10000 mg/kg体重。

按照《消毒技术规范》LD₅₀﹥5000 mg/kg体重，该受试物属实际无毒物。

（3）皮肤刺激试验

试验目的：检测消毒剂对试验动物的皮肤的刺激/腐蚀的作用和强度。

试验材料和方法：

a、受试物：本实施例中所制得的抗菌喷剂。

b、受试物的配置方法：直接使用原液。

c、试验动物：由河北省试验动物中心提供普通级大白兔（合格证号04063），体重2-3Kg，雌雄各半。

d、动物饲养环境：饲料由中国医科院实验动物中心提供，室温为26℃，相对湿度为54%。

e、试验方法：

e1）试验前24h将家兔背部脊柱两侧毛剪掉，去毛范围为左、右各约3cm×3cm。

e2）正式试验时，将受试物0.2ml滴在2.5cm×2.5cm的二层纱布上，贴敷于左侧去毛皮肤上，然后用一层油纸覆盖其上，再用无刺激性胶布固定。右侧去毛皮肤作为空白对照，敷用时间为4h，试验结果结束后用温水除去残留受试物。

e3）除去受试物1、24、48h，分别观察皮肤局部反应，按《消毒技术规范》中表3-3和表3-4进行皮肤反应积分和刺激强度评价。

经过上述试验后得到如下结果：

上述试验结果表明：受试物对动物的皮肤刺激性强度属于无刺激性。

（4）眼刺激试验

实验目的：检测消毒剂对试验动物的眼睛进行即兴刺激和腐蚀作用。

试验材料和方法：

a、受试物：本实施例中所制得的抗菌喷剂。

b、受试物的配置方法：直接使用原液。

c、试验动物：由河北省试验动物中心提供普通级大白兔（合格证号04063），体重2-3Kg，雌雄各半。

d、动物饲养环境：饲料由中国医科院实验动物中心提供，室温为26℃，相对湿度为52%。

e、试验方法：吸取浓度浓缩5倍的受试物1-2滴，滴入家兔左眼结膜囊内，被动闭合4s后，用生理盐水冲洗5min，右眼作为对照。记录染毒后6、24、48h和第4、7天观察家兔的眼的局部反应，必要时用2%荧光素钠溶液或者裂隙灯对家兔眼睛做进一步检查，按《消毒技术规范》中表3-5所列眼损害评分标准进行评分，再按照表3-6进行眼刺激强度的评价。

经过上述试验后得到如下结果：

上述试验结果表明：受试物对动物眼睛的刺激作用属于无刺激性。

（5）小鼠骨髓细胞微核试验

实验目的：检测消毒剂对小鼠骨髓嗜多染红细胞微核形成的影响，评价消毒剂的体内遗传毒性。

试验材料和方法：

a、受试物：本实施例中所制得的抗菌喷剂。

b、受试物的配置方法：将原液用蒸馏水配制成所需浓度。

c、试验动物：由中国医科院实验动物中心提供清洁级昆明种小鼠（合格证号：医动字01-3001号），体重25-30g。

d、动物饲养环境：饲料由中国医科院实验动物中心提供，室温为26℃，相对湿度为56%，饲养方式为群饲。

e、给药剂量和给药方式：设置3个剂量组，采用蒸馏水分别配制1250、2500和5000mg/kg体重的浓度，同时设定阴性对照组（即为蒸馏水）和阳性对照组（即为CP为40mg/kg体重），按照0.2ml/10g体重计算染毒量。每个剂量组10只动物，雌雄各半。每组均间隔24h给样，第二次给样后6h取胸骨骨髓制片，每只动物计数1000个嗜多染红细胞，观察其微核发生率。

经过上述试验后得到如下结果：

上述试验结果表明：受试物三个剂量的微核发生率与对照组相比无显著性差异，与阳性对照组相比较具有显著性差异。受试物对小鼠骨髓细胞微核试验为阴性。

（6）蓄积毒性试验

实验目的：检测消毒剂在实验动物体内的蓄积毒性，并为亚慢性毒性试验以及其他有关毒性试验的剂量选择参考依据。

试验材料和方法：

a、受试物：本实施例中所制得的抗菌喷剂。

b、受试物的配置方法：受试物用蒸馏水配制成所需的浓度。

c、试验动物：由中国医科院实验动物中心提供清洁级昆明种小鼠（合格证号：医动字01-3001号），体重18-20g。

d、动物饲养环境：饲料由中国医科院实验动物中心提供，室温为26℃，相对湿度为54%，饲养方式为群饲。

e、剂量和给药方式：选用昆明种小鼠40只，雌雄各半，同性小鼠10只一组，共4组。每天灌胃一次，按0.2ml/10g体重计算染毒量，每4天为一期。第一期剂量为0.1LD₅₀，以后每期剂量按《消毒技术规范》表3-9定期递增染毒剂量，用表中所示递增量进行递增，直至半数动物死亡为止，计算累计总剂量，即为LD_50（n）。如果给药20天，死亡动物仍未足半数即停止试验。

f、试验结束后按下式计算蓄积系数（K）：K= LD_50（n）/ LD_50（1），并确定蓄积毒性分级。

经过上述试验后得到如下结果：试验结束时，动物无中毒症状及死亡出现；经计算所得的蓄积系数（K）﹥5.24﹥5，按照《消毒技术规范》评价该受试动物为弱蓄积毒性。

二、微生物污染检测

1）试验材料和条件：

a、受试物：本实施例所制得的抗菌喷剂。

b、受试物的数量和性状：5瓶；液态/100ml/瓶。

c、检验依据：GB-15979-2002中的B1-B8.2。

d、检测条件：百级净化室中，环境温度26℃，相对湿度50%。

2）试验结果：

3）结论：经检测本实施例所制得的抗菌喷剂的细菌菌落总数、大肠菌群、金黄色葡萄球菌、绿脓杆菌、溶血性链球菌和真菌菌落总数均符合GB-15979-2002的相关规定。

三、抑菌试验

抑菌试验分别对金黄色葡萄球菌和白色念珠菌进行了效果检测。

金黄色葡萄球菌的检测如下所示：

11）试验材料和条件

a、试验菌株：由军事医学科学院微生物流行病研究所提供的金黄色葡萄球菌，菌株号为ATCC6538，培养代数为第11-13代。

b、试验样品：本实施例所制得的抗菌喷剂。

c、试验样品的数量和性状：3瓶；液体/100ml/瓶。

d 、稀释液：0.03mol/L的磷酸盐缓冲液，pH=7.2。

e、培养基：营养琼脂。

f、检验依据：GB15979-2002中的C4.1-C4.2。

g、检测条件和次数：检测温度为22-24℃；3次。

12）检测结果

13）结论

依据GB15979-2002，本实施例在试验温度为22-24℃下，作用2min后对金黄色葡萄球菌的平均抑菌率达到了100％，具有较强的抑菌作用。

白色念珠菌的检测如下所示：

21）试验材料和条件

a、试验菌株：由军事医学科学院微生物流行病研究所提供的白色念珠菌，菌株号为ATCC10231，培养代数为第12-14代。

b、试验样品：本实施例所制得的抗菌喷剂。

c、试验样品的数量和性状：3瓶；液体/100ml/瓶。

d 、稀释液：0.03mol/L的磷酸盐缓冲液，pH=7.2。

e、培养基：沙氏琼脂。

f、检验依据：GB15979-2002中的C4.1-C4.2。

g、检测条件和次数：检测温度为22-24℃；3次。

２2）检测结果

２3）结论

依据GB15979-2002，本实施例在试验温度为22-24℃下，作用2min后对金黄色葡萄球菌的平均抑菌率达到了99.67％，具有较强的抑菌作用。

实施例2-5

实施例2-5分别为一种抗菌喷剂，其所涉及的中药成分和制备过程与实施例1相同，不同之处仅在于：

中药原料组成的用量与制备方法中所涉及的参数有差异，安全性评价指标也是参照实施例1进行评价。具体如下表所示：

Claims (4)

1.一种抗菌喷剂，由中药原料经水提、醇提制成，其特征在于按重量份数计其中药原料包括下列组成：

芦荟  0.8～0.95份，蛇床子  0.5～0.8份，黄柏 0.5～0.8份，

黄连  0.32～0.45份，百部  0.8～0.95份，地肤子  0.4～0.5份，

苦参 0.25～0.4份，人参  0.7～0.78份，黄芩  0.4～0.45份，

薄荷   0.01～0.03份，冰片 0.01～0.03份。

2.一种制备如权利要求1所述的抗菌喷剂的方法，其特征在于它包括以下步骤：

（1）将处方中的中药原料首先进行检验，符合相应药典标准后方可入药；

（2）所用的中药原料入药前均需净制成相应的中药饮片；

（3）将中药饮片中加水煎煮三次后合并煎煮液，过滤，浓缩得浸膏；

（4）浸膏中加入含量达75%的医用乙醇，搅匀，放置8-10h，过滤，滤液浓缩，得提取物； 

（5）提取物中加入饮片总量2%的苯扎溴铵，搅拌均匀，静置24-48h，过滤取上清液，待检；

（6）中心化验室化验合格后按规定量分装、贴标签，即得抗菌喷剂。

3.根据权利要求2所述的抗菌喷剂的制备方法，其特征在于所述步骤（3）中的煎煮三次具体操作如下：

①第一次加入饮片总量8-12倍重量的水，煎煮1.0-2.0h；

②第二次加入饮片总量8-10倍重量的水，煎煮1.0-1.5h；

③第三次加入饮片总量6-8倍重量的水，煎煮0.5-1.0h。

4.根据权利要求2或3所述的抗菌喷剂的制备方法，其特征在于：所述步骤（3）中所得浸膏的相对密度为1.00-1.30，其相对密度的检测在40-50℃下进行。