CN103190345A - 葡萄一步法组培快繁方法 - Google Patents

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Abstract

本发明公开了葡萄一步法组培快繁方法，它包括以下步骤：S1、外植体灭菌，采集半木质化的葡萄当年生嫩茎，切成带芽茎段，流水冲洗后于超净台上进行灭菌，灭菌采用酒精加升汞的组合灭菌方式；S2、接种及繁殖，将灭菌后带芽茎段接种于培养基上生长，并将接种后的培养材料置于光照强度为3000LX、光照时间为16h/d、温度为24～26℃的培养室内培养，一周后，带芽茎段长成完整植株。本发明的有益效果是：实现了葡萄带芽茎段同时增殖及生根的一步法快繁，仅需一种培养基，同时进行繁殖、壮苗、生根培养，组培苗生长健壮，生产成本低廉，得到的组培苗遗传状一致，且繁殖系数高，繁殖周期短；降低了操作难度，利于提高培养效率。

Description

葡萄一步法组培快繁方法
技术领域
本发明涉及葡萄栽培方法，特别是葡萄一步法组培快繁方法。
背景技术
葡萄是一种应用广泛，经济价值极高的作物。在栽培方式上，呈现出由传统自根苗向嫁接苗逐渐过渡的发展趋势。常规繁殖多采用嫁接和扦插，但这两种繁殖方式易造成病毒积累，同时繁殖时间受季节限制。组织培养在葡萄快速繁殖中应用较为广泛，其优点不仅可以加快繁殖速度，而且还可以热处理结合茎尖培养，有效地消除病毒，获得无毒苗木。葡萄的组培快繁可有效解决葡萄繁殖的技术难题，已在葡萄的繁殖上成熟应用。但现阶段葡萄组培快繁方法大多需要经过初代诱导、增殖及生根三部进行，操作步骤复杂，并且每个培养阶段都需要不同成分的培养基，增加了实际操作的难度。
发明内容
本发明的目的在于克服现有技术的缺点，提供一种可提高繁殖效率、降低操作难度、可实现同时增殖及生根的葡萄一步法组培快繁方法。
本发明的目的通过以下技术方案来实现：葡萄一步法组培快繁方法，它包括以下步骤：
S1、外植体灭菌，采集半木质化的葡萄当年生嫩茎，切成带芽茎段，流水冲洗后于超净台上进行灭菌，灭菌采用酒精加升汞的组合灭菌方式，先用酒精灭菌30～60s，再用升汞灭菌3～5min；
S2、接种及繁殖，将灭菌后带芽茎段接种于培养基上生长，所述的培养基为MS+NAA0.2mg/L+IAA0.1mg/L，并将接种后的培养材料置于光照强度为3000LX、光照时间为16h/d、温度为24～26℃的培养室内培养，一周后，带芽茎段长成完整植株。
本发明具有以下优点：本发明实现了葡萄带芽茎段同时增殖及生根的一步法快繁，仅需一种培养基，同时进行繁殖、壮苗、生根培养，组培苗生长健壮，生产成本低廉，得到的组培苗遗传状一致，且繁殖系数高，繁殖周期短，是葡萄组培快繁的有效途径，且避免了病毒积累。本发明的通过一种培养基实现了葡萄带芽茎段同时增殖及生根，降低了操作难度，利于提高培养效率。
 
附图说明
图1 为本发明的组培快繁初期示意图
图2 为本发明的组培快繁后期示意图。 
具体实施方式
下面结合附图对本发明做进一步的描述，本发明的保护范围不局限于以下所述：
实施例1：
葡萄一步法组培快繁方法，它包括以下步骤：
S1、外植体灭菌，采集半木质化的葡萄当年生嫩茎，切成带芽茎段，流水冲洗后于超净台上进行灭菌，灭菌采用酒精加升汞的组合灭菌方式，先用酒精灭菌45s，再用升汞灭菌4min；
S2、接种及繁殖，将灭菌后带芽茎段接种于培养基上生长，如图1所示，所述的培养基为MS+NAA0.2mg/L+IAA0.1mg/L，并将接种后的培养材料置于光照强度为3000LX、光照时间为16h/d、温度为25℃的培养室培养，繁殖周期为一周，实现培养材料的同步增殖及生根，一周后，带芽茎段长成完整植株，如图2所示。
实施例2：
葡萄一步法组培快繁方法，它包括以下步骤：
S1、外植体灭菌，采集半木质化的葡萄当年生嫩茎，切成2～3cm带单芽茎段，流水冲洗后于超净台上进行灭菌，灭菌采用酒精加升汞的组合灭菌方式，先用体积百分比为70%的酒精漂洗30s，再用无菌水冲洗3次后，用质量百分比为0.1%的升汞溶液浸泡消毒5min后，用无菌水冲洗3～5次，
S2、接种及繁殖，将灭菌后带芽茎段接种于培养基上生长，如图1所示，所述的培养基为MS+NAA0.2mg/L+IAA0.1mg/L，pH 5.8～6.0，并将接种后的培养材料置于光照强度为3000LX、光照时间为16h/d、温度为24℃的培养室培养，繁殖周期为一周，实现培养材料的同步增殖及生根，一周后，带芽茎段长成完整植株，如图2所示。
实施例3：
葡萄一步法组培快繁方法，它包括以下步骤：
S1、外植体灭菌，采集半木质化的葡萄当年生嫩茎，切成2～3cm带单芽茎段，流水冲洗后于超净台上进行灭菌，灭菌采用酒精加升汞的组合灭菌方式，先用体积百分比为70%的酒精漂洗60s，再用无菌水冲洗3次后，用质量百分比为0.1%的升汞溶液浸泡消毒3min后，用无菌水冲洗3次，
S2、接种及繁殖，将灭菌后带芽茎段接种于培养基上生长，如图1所示，所述的培养基为MS+NAA0.2mg/L+IAA0.1mg/L，pH 5.8，并将接种后的培养材料置于光照强度为3000LX、光照时间为16h/d、温度为26℃的培养室培养，繁殖周期为一周，实现培养材料的同步增殖及生根，一周后，带芽茎段长成完整植株，如图2所示。 

Claims (1)

1.葡萄一步法组培快繁方法，其特征在于：它包括以下步骤：
S1、外植体灭菌，采集半木质化的葡萄当年生嫩茎，切成带芽茎段，流水冲洗后于超净台上进行灭菌，灭菌采用酒精加升汞的组合灭菌方式，先用酒精灭菌30～60s，再用升汞灭菌3～5min；
S2、接种及繁殖，将灭菌后带芽茎段接种于培养基上生长，所述的培养基为MS+NAA0.2mg/L+IAA0.1mg/L，并将接种后的培养材料置于光照强度为3000LX、光照时间为16h/d、温度为24～26℃的培养室内培养，一周后，带芽茎段长成完整植株。
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