CN103127395A - 一种石斛抗氧化制剂及其制备方法 - Google Patents

Abstract

本发明提供一种石斛抗氧化制剂，其特征在于由下列质量份的组分制成：石斛粉150～220份，三七粉80～120份，黄芪提取物15～25份，山茱萸提取物3～6份，丹参提取物2～5份。所得石斛抗氧化制剂，经动物试验结果表明，能明显降低大鼠的血和脑组织中的脂质过氧化物(LPO)水平及脑组织中的脂褐质含量，提高血液及脑组织中的抗氧化酶(SOD)的活力，对大鼠的体重无影响，表明该石斛抗氧化制剂具有较好的抗氧化、消除自由基的保健功效，且无毒副作用。

Description

一种石斛抗氧化制剂及其制备方法

技术领域

    本发明涉及一种石斛抗氧化制剂及其制备方，属于生物制剂加工技术领域。 

    背景技术 

为维持生命，人体除了要定期补充足够的营养物质、水分外，更需要不断地呼吸新鲜空气来获得氧气，通过氧气进行机体内的各种氧化反应，然而当机体利用氧气进行某些代谢反应时，不可避免地会产生一些不稳定物质，而这些不稳定的物质都是氧气的“变身”，它们非常活泼，不会安稳地原地不动，而更善于攻击人体内的健康细胞，故人们根据其不受拘束的个性，将其命名为“自由基”。当人体内自由基的浓度不是很高时，我们的身体自有一套完善的系统来消灭这些自由基，该系统称为抗氧化系统。然而由于我们所处的生活环境存在诸多现实问题，如饮食（高油、高脂）、吸烟、空气及水污染、放射性（X线、紫外线）物质、农药残留、工作生活压力大等等，造成人体内自由基浓度增加，尤其是高油、高脂食物的氧化酸败速度快，不仅会导致褪色、褐变，而且维生素流失严重，摄入后极易产生大量自由基，对人体健康非常不利。

越来越多的研究显示：抗氧化是预防衰老的重要途径。因为自由基或氧化剂会将细胞及组织分解，影响代谢功能，并会引起不同的健康问题。如果能够消除过多的自由基，会对许多因自由基而引起的与老化有关的疾病，如癌症、心脑血管疾病、糖尿病、白内障、动脉硬化、老年痴呆、骨关节病等，具有预防作用。因此，人们应摄取足够的抗氧化物质，以预防慢性疾病的发生和延缓身体退化速度。 

日常生活中，许多食物如蔬菜、水果都具有抗氧化功能，且蔬菜、水果中还含有众多的维生素，因此，每日多吃果蔬，对人体是有益处的。然而在快节奏的都市生活中，人们却无法每天吃下足够量的果蔬，难于摄取到足够的抗氧化物质，加之市场上的抗氧化补充剂效果不一、品质不一，且含有化学添加物，有一定的毒副作用，加之个体差异的客观现实，导致抗氧化效果不一。满足不了人们的健康保障。因此，研究并开发纯天然抗氧化剂，是保障人们身体健康的重要途径。 

发明内容

本发明的目的在于提供一种抗氧化功效明显，无毒副作用的纯天然抗氧化物质——石斛抗氧化制剂及其制备方法。 

本发明提供的是这样一种石斛抗氧化制剂，其特征在于由下列质量份的组分制成： 

石斛粉                    150～220份

三七粉                     80～120份

黄芪提取物                  15～25份

山茱萸提取物                  3～6份

丹参提取物                    2～5份。

所述石斛粉是细度为1200目的超微粉。 

所述三七粉是细度为1200目的超微粉。 

所述黄芪提取物、山茱萸提取物、丹参提取物是市购产品，或者是经过下列常规方法提取： 

A、分别将所述黄芪、山茱萸、丹参各原料药粉碎后，水煎提取2～3次，每次用水量为药材总质量的8～12倍，每次水煎提取保持微沸0.5～1.5小时，合并各次提取液，过滤分离出滤液和滤渣；

B、将A步骤的滤液浓缩至1g药材/ml，冷却、静置至室温，搅拌下缓慢加入乙醇至乙醇终浓度为60wt%，静置至沉淀完全，抽滤分离出滤液和滤渣；

C、将B步骤的滤渣用质量浓度为60%的乙醇洗涤，直至洗涤液无色，将洗涤液并入B步骤的滤液中，回收乙醇，干燥，粉碎，分别得黄芪、山茱萸、丹参的提取物——干浸膏粉。

本发明提供的石斛抗氧化制剂的制备经过下列步骤： 

A、按下列质量份配料：

石斛粉                    150～220份

三七粉                     80～120份

黄芪提取物                  15～25份

山茱萸提取物                  3～6份

丹参提取物                    2～5份

食用辅料                  100～150份；

B、将步骤A的各组分混合均匀后，与食用辅料混合后，通过常规成型工艺制备成具有抗氧化作用的胶囊剂、颗粒剂、片剂、散剂或丸药等口服剂型。

所述食用辅料为蜂蜜、淀粉、硬脂酸镁、糊精中的一种或几种，且几种的混合比是任意的。 

所述组分中，石斛性味甘淡微咸、寒，入胃、肺、肾经，具有生津益胃，清热养阴的作用；三七性味甘微苦，温，入肝、胃、大肠经，具有止血，散瘀，消肿，定痛的作用；黄芪又名黄耆，其性味甘，微温，入肺、脾经，具有固表、利水消肿，托毒，生肌等作用，能治自汗，盗汗，浮肿，溃久不敛等；山茱萸性味酸，微温，入肝、肾经，具有补肝肾，涩精气，固虚脱的作用；丹参性味苦，微温，入心、肝经，具有活血祛瘀，安神宁心，排脓、止痛的作用。各组分配伍后，具有较好的抗氧化、消除自由基的保健功效。 

本发明具有下列优点和效果：采用上述方案获得的石斛抗氧化制剂，经动物试验结果表明，能明显降低大鼠的血和脑组织中的脂质过氧化物(LPO)水平及脑组织中的脂褐质含量，提高血液及脑组织中的抗氧化酶 (SOD)的活力，对大鼠的体重无影响，表明该石斛抗氧化制剂具有较好的抗氧化、消除自由基的保健功效，且无毒副作用。 

具体实施方式

下面结合实施例对本发明做进一步说明。 

实施例1 

A、按下列质量份配料：

细度为1200目的石斛超微粉           150份

细度为1200目的三七粉超微           120份

市购的黄芪提取物                     15份

市购的山茱萸提取物                    6份

市购的丹参提取物                      5份

糊精                                150 份；

B、将步骤A的各组分混合均匀后，通过常规成型工艺制备成具有抗氧化作用的片剂。

实施例2 

A、按下列质量份配料：

细度为1200目的石斛超微粉            220份

细度为1200目的三七粉超微             80 份

市购的黄芪提取物                     25份

市购的山茱萸提取物                   3 份

市购的丹参提取物                     2 份

淀粉                               100 份；

B、将步骤A的各组分混合均匀后，通过常规成型工艺制备成具有抗氧化作用的胶囊剂。

实施例3 

A、按下列质量份配料：

细度为1200目的石斛超微粉      180份

细度为1200目的三七粉超微      100份

黄芪提取物                      20份

山茱萸提取物                     5份

丹参提取物                       3份

淀粉                            50份

硬脂酸镁                        70份；

B、将步骤A的各组分混合均匀后，通过常规成型工艺制备成具有抗氧化作用的胶囊；

其中，黄芪提取物、山茱萸提取物、丹参提取物经过下列常规方法提取：

A、分别将所述黄芪、山茱萸、丹参各原料药粉碎后，水煎提取2次，每次用水量为药材总质量的12倍，每次水煎提取保持微沸1.5小时，合并各次提取液，过滤分离出滤液和滤渣；

B、将A步骤的滤液浓缩至1g药材/ml，冷却、静置至室温，搅拌下缓慢加入乙醇至乙醇终浓度为60wt%，静置至沉淀完全，抽滤分离出滤液和滤渣；

C、将B步骤的滤渣用质量浓度为60%的乙醇洗涤，直至洗涤液无色，将洗涤液并入B步骤的滤液中，回收乙醇，干燥，粉碎，分别得黄芪、山茱萸、丹参的提取物——干浸膏粉。

实施例4 

A、按下列质量份配料：

细度为1200目的石斛超微粉      200份

细度为1200目的三七粉超微       90份

黄芪提取物                      22份

山茱萸提取物                     5份

丹参提取物                       4份

淀粉                            50份

糊精                            60份

B、将步骤A的各组分混合均匀后，通过常规成型工艺制备成具有抗氧化作用的片剂；

其中，黄芪提取物、山茱萸提取物、丹参提取物经过下列常规方法提取：

A、分别将所述黄芪、山茱萸、丹参各原料药粉碎后，水煎提取3次，每次用水量为药材总质量的8倍，每次水煎提取保持微沸0.5小时，合并各次提取液，过滤分离出滤液和滤渣；

B、将A步骤的滤液浓缩至1g药材/ml，冷却、静置至室温，搅拌下缓慢加入乙醇至乙醇终浓度为60wt%，静置至沉淀完全，抽滤分离出滤液和滤渣；

C、将B步骤的滤渣用质量浓度为60%的乙醇洗涤，直至洗涤液无色，将洗涤液并入B步骤的滤液中，回收乙醇，干燥，粉碎，分别得黄芪、山茱萸、丹参的提取物——干浸膏粉。

实施例5 

A、按下列质量份配料：

细度为1200目的石斛超微粉      160份

细度为1200目的三七粉超微      110份

黄芪提取物                      23份

山茱萸提取物                     4份

丹参提取物                       2份

蜂蜜                            60份

淀粉                            70份

B、将步骤A的各组分混合均匀后，通过常规成型工艺制备成具有抗氧化作用的颗粒剂；

其中，黄芪提取物、山茱萸提取物、丹参提取物经过下列常规方法提取：

A、分别将所述黄芪、山茱萸、丹参各原料药粉碎后，水煎提取2次，每次用水量为药材总质量的10倍，每次水煎提取保持微沸1.0小时，合并各次提取液，过滤分离出滤液和滤渣；

B、将A步骤的滤液浓缩至1g药材/ml，冷却、静置至室温，搅拌下缓慢加入乙醇至乙醇终浓度为60wt%，静置至沉淀完全，抽滤分离出滤液和滤渣；

C、将B步骤的滤渣用质量浓度为60%的乙醇洗涤，直至洗涤液无色，将洗涤液并入B步骤的滤液中，回收乙醇，干燥，粉碎，分别得黄芪、山茱萸、丹参的提取物——干浸膏粉。

为表明本发明之抗氧化作用，下列通过动物试验加以证明。 

材料和方法

1.1样品：实施例3的抗氧化胶囊，规格为 0.45/粒。人体推荐用量为每人(成人)每日2次，每次1粒，成人体重按60kg计，折算剂量为15 mg/kg BW。室温保存。 

实验动物：选用广西医科大学医学实验动物中心繁殖的清洁级15月龄SD种雄性大鼠56只，体重665±70.8g，实验动物生产许可证号：SCXK桂2009-0002。本中心实验动物使用许可证号：SYXK桂2012-0001。动物室温度：22～25℃，相对湿度：55～75%。 

剂量选择与受试物给予方式：根据样品的人体推荐量设300、150、75 mg/kg BW 3个剂量组，同时设一个阴性对照组，每组14只动物。称取40.0g实施例3的抗氧化胶囊，加蒸馏水至1000mL，溶解、搅匀，配成40.0 mg/mL浓度溶液，再依次对倍稀释成20.0、10.0 mg/mL浓度，采用经口方式，分别给予相应剂量组动物灌胃，灌胃体积为1.0mL/100g BW，阴性对照组给予等体积的蒸馏水，每天灌胃一次，连续60天。 

仪器与试剂

1.4.1 仪器：754紫外可见分光光度计、日立KY2000型半自动生化分析仪、荧光分光光度计、电子分析天平、低温离心机、恒温水浴箱、旋涡混匀器等。

试剂：无水乙醇、CHCl₃、CH₃OH (均为分析纯)，NaN₃、EDTA-Na₂、还原型GSH、TBA、MDA试剂盒(南京建成生物工程研究所提供)等。   

1.5 实验方法

受试老龄大鼠在SPF级动物实验室内喂养观察5天，未见异常后眼内眦取血测定血清MDA含量。根据MDA含量将大鼠分层随机分成4个组，每组14只，并适当调整，使各组的平均体重也尽可能的均衡。按1.0mL/100g BW的体积，分别给予相应剂量组动物灌胃，灌胃体积为1.0mL/100g BW，阴性对照组给予等体积的蒸馏水，每天一次，连续60天，然后处死动物，取血、肝、脑组织进行观察指标测定。

1.5.1 大鼠血清及肝、脑组织匀浆液中LPO含量测定（以MDA含量计）。 

1.5.2 大鼠血清及肝、脑组织匀浆液中抗氧化酶（GSH-Px及SOD）活力测定。 

1.5.3 大鼠肝、脑组织匀浆液中脂褐质（Lip）含量测定。 

实验数据统计：实验数据用Microsoft Excell表的统计程序进行方差分析统计处理。 

试验结果

2.1 样品对大鼠体重的影响

试验前各组大鼠体重无明显差异，试验中期和验结束样品各剂量组大鼠的体重及增重量与阴性对照组比较，差异均无显著性（P<0.05），表明该样品对老龄大鼠的体重无明显影响，见表1。

  

2.2  样品对大鼠血清及组织抗氧化酶(SOD及GSH-Px)活性的影响

2.2.1 样品对大鼠血清及组织中超氧化物岐化酶活力的影响。

                                                       

从表2可见，样品各剂量组大鼠的血清及肝、脑组织中SOD含量均高于阴性对照组，其中的高剂量组大鼠的血清和脑组织SOD含量与阴性对照组的差异具有显著性（P<0.01），表明该样品具有提高血清和脑组织中超氧化物歧化酶(SOD)活性作用。

样品对大鼠组织中谷胱甘肽过氧化物酶(GSH-Px)活力的影响

         

从表3可见，样品各剂量组大鼠的血清、肝组织中GSH-Px活力稍高于阴性对照组，但各剂量组与阴性对照组的差异均无显著性（P>0.05），表明该样品对大鼠血和组织谷胱甘肽过氧化物酶(GSH-Px)活力影响不大。

样品对大鼠血清及组织过氧化脂质(LPO)含量的影响

    

从表4可见，试验前各组动物的血清LPO含量较均衡，各组之间差异无显著性（P>0.01）。试验结束样品各剂量组大鼠的脑组织的过氧化脂质（LPO）含量均低于阴性对照组，且各剂量组与阴性对照组的差异均具有显著性（P<0.01或P<0.05）；各剂量组大鼠的血清LPO含量亦低于阴性对照组。结果表明该样品具有降低组织中过氧化脂质含量的作用。

样品对大鼠组织脂褐质(Lip)含量的影响

结果见表5，样品各剂量组大鼠的脑组织脂褐质和肝组织脂褐质含量均低于阴性对照组，其中各剂量组大鼠的脑组织脂褐质与阴性对照组的差异均具有显著性（P<0.01或P<0.05），表明该样品具有降低脑组织和肝组织中的脂褐质含量的作用。

         

3、小结

分别以300、150、75 mg/kg BW剂量（分别相当于人体推荐用量的20、10、5倍）的云尚牌抗氧化胶囊给予老龄大鼠连续灌胃60天，能明显降低大鼠的血和脑组织中的脂质过氧化物(LPO)水平及脑组织中的脂褐质含量，提高血液及脑组织中的抗氧化酶 (SOD)的活力，对大鼠的体重无影响，表明该样品具有抗氧化功能。

  

Claims (6)

1.一种石斛抗氧化制剂，其特征在于由下列质量份的组分制成：

石斛粉                    150～220份

三七粉                     80～120份

黄芪提取物                  15～25份

山茱萸提取物                  3～6份

丹参提取物                    2～5份。

2.如权利要求1所述的石斛抗氧化制剂，其特征在于所述石斛粉是细度为1200目的超微粉。

3.如权利要求1所述的石斛抗氧化制剂，其特征在于所述三七粉是细度为1200目的超微粉。

4.如权利要求1所述的石斛抗氧化制剂，其特征在于所述黄芪提取物、山茱萸提取物、丹参提取物是市购产品，或者是经过下列常规方法提取：

A、分别将所述黄芪、山茱萸、丹参各原料药粉碎后，水煎提取2～3次，每次用水量为药材总质量的8～12倍，每次水煎提取保持微沸0.5～1.5小时，合并各次提取液，过滤分离出滤液和滤渣；

B、将A步骤的滤液浓缩至1g药材/ml，冷却、静置至室温，搅拌下缓慢加入乙醇至乙醇终浓度为60wt%，静置至沉淀完全，抽滤分离出滤液和滤渣；

C、将B步骤的滤渣用质量浓度为60%的乙醇洗涤，直至洗涤液无色，将洗涤液并入B步骤的滤液中，回收乙醇，干燥，粉碎，分别得黄芪、山茱萸、丹参的提取物——干浸膏粉。

5.如权利要求1所述的石斛抗氧化制剂，其特征在于经过下列步骤：

A、按下列质量份配料：

石斛粉                    150～220份

三七粉                     80～120份

黄芪提取物                  15～25份

山茱萸提取物                  3～6份

丹参提取物                    2～5份

食用辅料                  100～150份；

B、将步骤A的各组分混合均匀后，与食用辅料混合后，通过常规成型工艺制备成具有抗氧化作用的胶囊剂、颗粒剂、片剂、散剂或丸药等口服剂型。

6.如权利要求5所述的石斛抗氧化制剂，其特征在于所述食用辅料为蜂蜜、淀粉、硬脂酸镁、糊精中的一种或几种，且几种的混合比是任意的。