CN103087142B - 一种提取雷公藤红素的方法 - Google Patents

Abstract

本发明公开了一种提取雷公藤红素的方法，其中，该方法包括将含有雷公藤红素的植物原料与低级脂肪醇接触，使得到雷公藤红素的含量不低于0.005重量%的醇提液；再将所述醇提液中的低级脂肪醇去除，得到提取物；然后将所述提取物用水悬浮后再用C₁-C₅的卤代烷烃萃取，并将萃取液浓缩并用硅胶柱进行分离，并收集含有雷公藤红素的洗脱液，将所述洗脱液浓缩并结晶。采用本发明的方法得到能够纯度和收率均较高的雷公藤红素。

Description

一种提取雷公藤红素的方法

技术领域

本发明涉及一种提取雷公藤红素的方法。

背景技术

雷公藤红素，又名南蛇藤素、南蛇藤醇、南蛇藤碱，英文名称为celastrol或tripterine，是一种醌甲基五环三萜类化合物，其结构如式（Ⅰ）所示。雷公藤红素广泛存在于卫矛科植物雷公藤属和南蛇藤属植物的根皮部位。雷公藤红素分子式为C₂₉H₃₈O₄，红色针状晶体，其难溶于水，溶于甲醇、乙醇、丙酮、乙酸乙酯、氯仿等有机溶剂，熔点为185-200℃，紫外全波长扫描发现其在425nm处有最强的吸收。

国内外研究发现，雷公藤红素具有多种药效，如抗氧化、抗炎免疫性、抗肿瘤、抗生育、抗纤维化、抗动脉粥样硬化、抑制血管生成、诱导细胞凋亡等。其特有的功能与性质令人瞩目，以致引发了世界性的对雷公藤红素生产技术及应用开发的研究热潮，尤其是雷公藤红素及其衍生物的新药研究已经取得了突破性进展，预示其具有一定的市场前景，工业上对其的生产需求也日益增加。

根据雷公藤红素的溶解性，利用有机溶剂从雷公藤红素含量较高的植物中提取雷公藤红素，是生产雷公藤红素普遍采取的一种方法。目前为止，文献报道的提取工艺主要是有机溶剂提取和超临界CO₂萃取，而最常用的还是有机溶剂提取法。

CN101311186A公开了一种制备雷公藤红素的方法，该方法包括将干重小于6重量%的卫矛科植物粉末用氯仿进行超声提取并浓缩，得到氯仿提取物；将石油醚加入上述氯仿提取物中，加热回流后取出石油醚，并将产物加入硅胶柱中，然后依次用氯仿、含2-4重量丙酮%的氯仿、石油醚、含4-6重量乙酸乙酯%的石油醚和含8-12重量乙酸乙酯%的石油醚进行洗脱，再将得到的雷公藤膏状物用石油醚和乙酸乙酯进行重结晶。

CN101830960A公开了一种南蛇藤素的制备方法，该方法包括以下步骤：取卫矛科植物灯油藤根皮，粉碎，加入其质量4-5倍量体积的甲醇，置入超声提取装置中超声提取1-3次，每次0.2-1小时，提取功率为30-60KHz，合并提取液，过滤，减压回收甲醇，残渣加入0.05-0.15mol/L的碱水溶液溶解，过滤，滤液用稀盐酸酸溶液调节pH值至3-5，静置，过滤，取滤渣，加入到氧化铝层析柱中，用体积比为3:1的甲醇-氯仿混合溶剂洗脱，收集2-4倍量柱体积的洗脱液，减压回收溶剂并浓缩，加入体积比为1:1的乙醇-正己烷混合溶剂结晶。

CN101638425A公开了一种自南蛇藤根皮中提取雷公藤红素的方法，该方法包括以下步骤：以南蛇藤根皮粉为原料，包括提取、分离、纯化和重结晶，所述提取首先以低级氯代烷烃为溶剂，加热回流提取，根皮粉与溶剂的质量比为1:3-20，时间不少于2小时，提取液脱溶剂后得到浸膏状初提物，然后向初提物中加入50-70体积%甲醇或乙醇溶液，充分搅拌、静置萃取，萃取液脱溶剂后得到稠膏状初提物；所述的纯化是初提物用甲醇溶解后再用固定相为正相硅胶或反相硅胶的柱色谱分离纯化，收集洗脱液，脱溶剂干燥后得到粉末状精提物，最后用乙醇-水混合溶剂重结晶。

CN102349917A公开了一种雷公藤红素的用途及制备方法，并具体公开了该制备方法包括以下步骤：（1）将雷公藤地上藤本部分与地下根部分混合粉碎处理后，经乙醇回流提取，过滤后减压浓缩；（2）将浓缩后的乙醇提取物用乙醇水超声混悬，静置后，倾倒出上清液；（3）上清液采用吸附树脂进行吸附，再依次用水、40体积%的乙醇水溶液、70体积%的乙醇水溶液和90-95体积%的乙醇水溶液进行洗脱，收集洗脱液；（4）洗脱部分减压浓缩后，经硅胶柱色谱纯化，回收溶剂后干燥获得红色粉末状提取物；（5）该提取物用热乙醇溶解成饱和溶液后，放置，析出红色结晶后干燥即可。

由于雷公藤红素的化学结构复杂，难以实现低成本合成生产，而从含量相对较高的植物中提取分离，其可行性更高。但雷公藤红素的提取制备目前还仅限于实验室小规模，过去的工艺技术往往由于收率低、成本高、制备量小或因过程复杂而难以实现工艺放大，从而导致植物资源利用率很低、目前市场上雷公藤红素价格非常昂贵。

发明内容

本发明的目的是为了克服现有的方法提取雷公藤红素纯度和收率较低的，而提供一种新的提取雷公藤红素的方法。

本发明提供了一种提取雷公藤红素的方法，其中，该方法包括将含有雷公藤红素的植物原料与低级脂肪醇接触，使得到雷公藤红素的含量不低于0.005重量%的醇提液；再将所述醇提液中的低级脂肪醇去除，得到提取物；然后将所述提取物用水悬浮后再用C₁-C₅的卤代烷烃萃取，并将萃取液浓缩后用硅胶柱进行分离，收集含有雷公藤红素的洗脱液，将所述洗脱液浓缩并结晶。

现有技术采用硅胶柱进行分离提取雷公藤红素时，通常是采用先将含雷公藤红素的植物原料用低级氯代烷烃进行提取，然后将提取的产物用醇溶液进行萃取，最后过硅胶柱。然而，本发明的发明人发现，采用该方法进行雷公藤红素的提取，得到的雷公藤红素的产率和纯度均较低。本发明先采用低级脂肪醇对含有雷公藤红素的植物原料中的雷公藤红素进行提取，再将得到的醇提液中的各组分经水悬浮后用C₁-C₅的卤代烷烃萃取，得到的萃取液能够用硅胶柱进行有效分离，得到富含雷公藤红素的洗脱液，然后将所述富含雷公藤红素的洗脱液浓缩并结晶后，能够得到产率和纯度均较高的雷公藤红素。即，本发明巧妙地将上述醇提、水悬浮、C₁-C₅的卤代烷烃萃取、硅胶柱分离以及结晶这几者相结合，从而实现有效地提取雷公藤红素的目的，得到收率和纯度均较高的雷公藤红素。

此外，在现有的提取步骤中，所用的溶剂通常为低级氯代烷烃。采用氯仿等低级氯代烷烃作为提取溶剂，提取溶剂的需求体积通常为含有雷公藤红素的植物材料重量的15-30倍，使用量非常大。在成本和毒性等方面会使雷公藤红丝的产业化受到限制。而与相同体积的氯仿相比，目前甲醇的价格不到氯仿价格的三分之一，乙醇价格仅为氯仿价格的二分之一左右，因此，本发明采用低级脂肪醇作为提取溶剂更加经济。此外，甲醇的毒性远远低于氯仿，乙醇的毒性更低，因此，本发明采用低级脂肪醇作为提取溶剂对环境和人体的安全性和友好性更具优势。

根据本发明的一种优选实施方式，当所述洗脱的方法包括：先用石油醚进行洗脱，再用石油醚与乙酸乙酯的混合溶剂进行洗脱时，能够得到纯度和收率更高的雷公藤红素。

本发明的其它特征和优点将在随后的具体实施方式部分予以详细说明。

具体实施方式

以下对本发明的具体实施方式进行详细说明。应当理解的是，此处所描述的具体实施方式仅用于说明和解释本发明，并不用于限制本发明。

本发明提供的提取雷公藤红素的方法包括将含有雷公藤红素的植物原料与低级脂肪醇接触，使得到雷公藤红素的含量不低于0.005重量%的醇提液；再将所述醇提液中的低级脂肪醇去除，得到提取物；然后将所述提取物用水悬浮后再用C₁-C₅的卤代烷烃萃取，并将萃取液浓缩并用硅胶柱进行分离，收集含有雷公藤红素的洗脱液，将所述洗脱液浓缩并结晶。

根据本发明，含有雷公藤红素的植物原料的种类为本领域技术人员公知，例如，可以为卫矛科南蛇藤属植物和/或雷公藤属植物的根和/或根皮。具体地，所述卫矛科南蛇藤属植物例如可以选自毛枝南蛇藤、灰叶南蛇藤、粉背南蛇藤、苦皮藤、南蛇藤、毛脉显柱南蛇藤、过山枫、红果藤、短梗南蛇藤、宽叶短梗南蛇藤、独子藤、青江藤和大芽南蛇藤中的一种或多种。所述雷公藤属植物例如可以为雷公藤。

其中，采用高效液相色谱法（HPLC法）对上述13种卫矛科南蛇藤属植物和1种雷公藤属植物的干燥根皮中雷公藤红素的含量进行测定，其中，测试条件为：TSK-GELODS-100ZC18色谱柱（250mm×4.6mm×5μm），流速为1.0mL/min，检测波长为425nm，流动相为甲醇和浓度为1体积%醋酸水溶液的混合溶剂（甲醇与醋酸水溶液的体积比为87：13），测得结果如下：毛枝南蛇藤：3.81重量%；灰叶南蛇藤：1.10重量%；粉背南蛇藤：1.02重量%；苦皮藤：0.67重量%；南蛇藤：0.62重量%；毛脉显柱南蛇藤：0.90重量%；过山枫：0.84重量%；红果藤：1.73重量%；短梗南蛇藤：0.55重量%；宽叶短梗南蛇藤：0.49重量%；独子藤：0.77重量%；青江藤：0.03重量%；大芽南蛇藤：0.39重量%；雷公藤：0.62重量%。

由此可见，上述所分析的13种南蛇藤属植物和1种雷公藤属植物的根皮中均含有雷公藤红素，除青江藤外均可能成为提取雷公藤红素的原料。即，所述卫矛科南蛇藤属植物优选为毛枝南蛇藤、灰叶南蛇藤、粉背南蛇藤、苦皮藤、南蛇藤、毛脉显柱南蛇藤、过山枫、红果藤、短梗南蛇藤、宽叶短梗南蛇藤、独子藤和大芽南蛇藤中的一种或多种。所述雷公藤属植物优选为雷公藤。

根据本发明，所述含有雷公藤红素的植物原料可以以块状的形式存在、也可以以粉末状的形式存在，但为了对其中的雷公藤红素进行更为有效地提取，优选情况下，所述含有雷公藤红素的植物原料以粉末状的形式存在。

根据本发明，所述低级脂肪醇的具体实例可以包括但不限于甲醇、乙醇、正丙醇、异丙醇、正丁醇、异丁醇、叔丁醇、1-戊醇、2-戊醇和3-戊醇中的一种或多种，特别优选为甲醇和/或乙醇。

本发明对所述低级脂肪醇的用量没有特别地限定，可以根据含有雷公藤红素的植物原料的用量进行合理地选择，例如，以100重量份的含有雷公藤红素的植物原料为基准，所述低级脂肪醇的用量可以为1000-4000重量份。

根据本发明，将含有雷公藤红素的植物原料与低级脂肪醇接触的目的将雷公藤红素溶解脂肪醇中。本发明对所述接触的方式没有特别地限定，可以采用本领域技术人员公知的各种方式进行。例如，可以在常温下将含有雷公藤红素的植物原料浸泡在低级脂肪醇中（即常温静置浸提法），也可以在搅拌条件下、在常温下将含有雷公藤红素的植物原料浸泡在低级脂肪醇中（常温搅拌浸提法），也可以在常温下让低级脂肪醇连续通过含有雷公藤红素的植物原料（常温渗漉法），或者也可以在微波条件下将含有雷公藤红素的植物原料浸泡在低级脂肪醇中（微波提取法），或者也可以在超声波条件下将含有雷公藤红素的植物原料浸泡在低级脂肪醇中（超声提取法），还可以在回流条件下将含有雷公藤红素的植物原料浸泡在低级脂肪醇中（热回流提取法）。对此本领域技术人员能够知悉，在此将不再赘述。

在本发明中，所述常温均指25℃。

本发明对将含有雷公藤红素的植物原料与低级脂肪醇接触的条件没有特别地限定，只要能够使得至少部分的雷公藤红素溶解在低级脂肪醇中，使得到雷公藤红素的含量不低于0.005重量%的醇提液即可。例如，所述接触的条件通常包括接触的温度和接触的时间。所述接触的温度可以在较宽的范围内进行选择和变动，但为了更有利于雷公藤红素的提取，所述接触的温度优选为25℃至低级脂肪醇的沸点。接触时间延长有利于雷公藤红素的进一步提取，为了得到雷公藤红素较高的醇提液，所述接触的时间通常不低于1小时。具体地，不同的接触方式对应的接触时间有较大的差异，例如，常温静置浸提法的接触时间通常为6-12小时；常温搅拌浸提法的时间通常为2-4小时；微波辅助提取法或超声波辅助提取法的接触时间通常为0.5-1小时；热回流提取法的接触时间通常为1-2小时。

根据本发明的一种具体实施方法，将含有雷公藤红素的植物原料用甲醇和/或乙醇进行提取，过滤得到醇提液。本领域技术人员应该容易理解的是，在采用甲醇和/或乙醇进行提取的过程中，一次常温提取或回流提取可能还不能足以将含有雷公藤红素的植物原料中的雷公藤红素进行充分提取，因此，为了充分利用原料，优选按照上述方法对同一批含有雷公藤红素的植物原料中的雷公藤红素进行2-5次提取，并将各次提取的产物混合在一起后再进行后续的操作。

根据本发明，所述提取液的浓度较大、体积较小，而将所述提取物用水悬浮的目的是为了提高其流动性并增大与C₁-C₅的卤代烷烃的接触面积，以将所述提取物中的杂质更好地去除。此外，将所述提取液用水悬浮后，提取液中的一些杂质能够与水形成氢键，从而在用C₁-C₅的卤代烷烃进行萃取的过程中，这些杂质分布与水相中而不易溶于C₁-C₅的卤代烷烃中，从而与雷公藤红素分离。需要说明的是，本发明中，用水悬浮是指将提取物与水混合后使提起物以油状颗粒物的形式悬浮在水中。所述水和C₁-C₅的卤代烷烃的用量可以在较宽的范围内进行选择和变动，例如，以1体积的所述提取物为基准，所述水的用量可以为2-5体积，所述C₁-C₅的卤代烷烃的用量可以为2-5体积。

根据本发明，所述C₁-C₅的卤代烷烃的种类为本领域技术人员公知，例如，可以选自氯仿、二氯甲烷、均二氯甲烷和偏三氯乙烷中的一种或多种。

根据本发明，将用水悬浮后得到的产物用C₁-C₅的卤代烷烃萃取一次后，得到的萃取产物中可能还含有大量的杂质，因此，为了得到纯度更高的雷公藤红素，优选情况下，用C₁-C₅的卤代烷烃萃取的次数可以为2-7次。

根据本发明，将所述萃取液浓缩是指将所述萃取液中的溶剂大部分去除，从而使得到的浓缩产物的固含量不低于90重量%。

根据本发明，将浓缩后的萃取液用硅胶柱进行分离的过程包括上样吸附和洗脱两个步骤。其中，所述上样吸附的方法可以为干法上样、也可以为湿法上样，优选为干法上样，这样能够提高得到的雷公藤红素的收率并减少硅胶的用量。具体地，先将萃取液浓缩后得到的产物用硅藻土或硅胶拌样并干燥，再得到的产物置于填充有硅胶的硅胶柱上层中，然后用洗脱液进行洗脱。以100重量份的将萃取液浓缩后得到的产物为基准，用于拌样的硅藻土和硅胶的总用量可以为5-10重量份。

本发明对所述洗脱的方法没有特别地限定，只要能够将雷公藤红素基本上与其它杂质分离即可，优选地，所述洗脱的方法包括：先用石油醚进行洗脱，再用石油醚与乙酸乙酯的混合溶剂进行洗脱，这样能够使得到纯度更高的雷公藤红素。在所述混合溶剂中，所述石油醚与乙酸乙酯的体积比例如可以为5-20：1。

本发明对采用硅胶柱进行分离的条件没有特别地限定，一般地，所述分离的条件包括温度、硅胶柱中填充的硅胶的用量、以及分离所用的洗脱剂在硅胶柱中的流速。所述温度可以在较宽的范围内进行选择和变动，例如，可以为20-50℃。所述硅胶柱中的硅胶的用量可以根据萃取液中雷公藤红素的量来进行选择。例如，以1g的所述萃取液中的雷公藤红素为基准，所述硅胶柱中填充的硅胶的体积可以为25-50mL。此外，分离所用的洗脱剂在硅胶柱中的流速可以为1-2倍柱体积/小时。

本领域技术人员公知，在将上述萃取液的浓缩产物用硅胶柱进行分离的过程中，可以采用薄层色谱法进行监控，以判断雷公藤红素从开始流出至流出结束的时间并收集这段时间的流出产物。此外，由于雷公藤红素为红色，因此，在分离过程中，也可以先根据颜色粗略判断雷公藤红色从开始流出的时间至流出结束的时间，然后再采用薄层色谱法检验这段时间的流出的产物是否富含目标产物。对此本领域技术人员均能知悉，在此将不再赘述。

根据本发明，将所述含有雷公藤红素的洗脱液浓缩是指将所述洗脱液中的溶剂大部分去除，从而使得到的浓缩产物的固含量不低于90重量%，对此本领域技术人员均能知悉，在此将不再赘述。

根据本发明，所述结晶的方法可以按照本领域技术人员公知的各种方法进行，例如，可以先将浓缩液进行冷却结晶，再将得到的粗晶用甲醇和/或乙醇进行重结晶。

以下将通过实施例对本发明进行详细描述。

以下实施例和对比例中，雷公藤红素的纯度（%）采用购自日本岛津公司的高效液相色谱法进行测定；雷公藤红素的收率（%）=（得到的雷公藤红素晶体的重量×纯度）÷（含有雷公藤红素的植物原料的重量×含有雷公藤红素的植物原料中雷公藤红素的含量）×100%。

实施例1

该实施例用于说明本发明提供的提取雷公藤红素的方法。

取218克南蛇藤属植物粉背南蛇藤的干燥根皮并粉碎，每次用1200mL甲醇回流提取1小时、过滤，共提取三次，将每次得到的提取产物混合，得到3390mL雷公藤红素的含量为0.0625重量%的醇提液。将所述醇提液中的甲醇去除，得到提取物。将所述提取物用300mL水悬浮后每次用250mL氯仿萃取，共萃取3次。将氯仿萃取液经浓缩至约8mL（其中的雷公藤红素的含量为1.98g）后，用20克硅藻土拌样，干燥。硅藻土拌样产物置于内放有95克的200-300目硅胶的硅胶柱上层中进行吸附色谱分离，先用石油醚洗脱低极性组分后，再用石油醚与乙酸乙酯（体积比为12：1）的混合溶剂进行洗脱，在洗脱过程中，控制洗脱液在硅胶柱的流速为250mL/h，收集红色洗脱液并经薄层色谱检验为富含雷公藤红素的洗脱液。将该富含雷公藤红素的洗脱液浓缩后冷却结晶，将得到的粗晶用含水乙醇重结晶并干燥，得1.65克纯度为97.05%的雷公藤红素晶体，收率为72.07%。

实施例2

该实施例用于说明本发明提供的提取雷公藤红素的方法。

取1000克南蛇藤属植物苦皮藤的干燥根皮并粉碎，用乙醇常温渗漉提取，得到38升雷公藤红素的含量为0.0169重量%的醇提液。将所述醇提液中的乙醇去除，得到提取物。将所述提取物用500mL水悬浮后每次用300mL氯仿萃取，共萃取5次。将氯仿萃取液经浓缩至18mL（其中的雷公藤红素的含量为6.02g）后，用38克硅藻土拌样，干燥。硅藻土拌样产物置于内放有170克的200-300目硅胶的硅胶柱上层中进行吸附色谱分离，先用石油醚洗脱低极性组分后，再用石油醚与乙酸乙酯（体积比为5：1）的混合溶剂进行洗脱，在洗脱过程中，控制洗脱液在硅胶柱的流速为700mL/h，收集红色洗脱液并经薄层色谱检验为富含雷公藤红素的洗脱液。将该富含雷公藤红素的洗脱液浓缩后冷却结晶，将得到的粗晶用含水乙醇重结晶并干燥，得4.67克纯度为97.59%的雷公藤红素晶体，收率为68.06%。

实施例3

该实施例用于说明本发明提供的提取雷公藤红素的方法。

取150克雷公藤属植物雷公藤的干燥根皮并粉碎，每次用800mL甲醇超声提取、过滤，共提取三次，其中，第一次的提取时间为30分钟，后3次的提取时间均为20分钟，将每次得到的提取产物混合，得到2210mL雷公藤红素的含量为0.0373重量%的醇提液。将所述醇提液中的甲醇去除，得到提取物。将所述提取物用200mL水悬浮后每次用200mL二氯乙烷萃取，共萃取7次。将二氯乙烷萃取液经浓缩至小体积（约3mL，其中的雷公藤红素的含量为0.82g）后，用8克硅藻土拌样，干燥。硅藻土拌样产物置于内放有90mL的200-300目硅胶的硅胶柱上层中进行吸附色谱分离，先用石油醚洗脱低极性组分后，再用石油醚与乙酸乙酯（体积比为20：1）的混合溶剂进行洗脱，在洗脱过程中，控制洗脱液在硅胶柱的流速为200mL/h，收集红色洗脱液并经薄层色谱检验为富含雷公藤红素的洗脱液。将该富含雷公藤红素的洗脱液浓缩后冷却结晶，将得到的粗晶用含水乙醇重结晶并干燥，得649毫克纯度为98.07%的雷公藤红素晶体，产品收率为68.39%。

实施例4

该实施例用于说明本发明提供的提取雷公藤红素的方法。

取10千克南蛇藤属植物苦皮藤的干燥根皮并粉碎，每次用60升甲醇回流提取1.5小时、过滤，共提取三次，将每次得到的提取产物混合，得到172升雷公藤红素的含量为0.0368重量%的醇提液。将所述醇提液中的甲醇去除，得到提取物。将所述提取物用5升水悬浮后每次用4升二氯乙烷萃取，共萃取4次。将二氯乙烷萃取液经浓缩至小体积（205mL，其中的雷公藤红素的含量为62.01g）后，用400克硅藻土拌样，干燥。硅藻土拌样产物置于内放有1700克的200-300目硅胶的硅胶柱上层中进行吸附色谱分离，先用石油醚洗脱低极性组分后，再用石油醚与乙酸乙酯（体积比为8：1）的混合溶剂进行洗脱，在洗脱过程中，控制洗脱液在硅胶柱中的流速为7000mL/h，收集红色洗脱液并经薄层色谱检验为富含雷公藤红素的洗脱液。将该富含雷公藤红素的洗脱液浓缩后冷却结晶，将得到的粗晶用含水乙醇重结晶并干燥，得到47.61克纯度为99.28%的雷公藤红素晶体，产品收率为70.55%。

实施例5

该实施例用于说明本发明提供的提取雷公藤红素的方法。

按照实施例1的方法进行雷公藤红素的提取，不同的是，在硅胶柱分离过程中，采用湿法上样、且硅胶柱中填充的硅胶的量为150克，即，具体地，将氯仿萃取液经浓缩至小体积（约8mL，其中的雷公藤红素的含量为1.98g）后，置于内放有155克的200-300目硅胶的硅胶柱上层中，打开活塞，加压使得浓缩液下降至硅胶柱的硅胶上表面时，用石油醚洗脱低极性组分，再用石油醚与乙酸乙酯（体积比为12：1）的混合溶剂进行洗脱，在洗脱过程中，控制洗脱液在硅胶柱中的流速为250mL/h，收集红色洗脱液并经薄层色谱检验为富含雷公藤红素的洗脱液。将该富含雷公藤红素的洗脱液浓缩后冷却结晶，将得到的粗晶用含水乙醇重结晶三次并干燥，最终得到1.32克纯度为98.25%的雷公藤红素晶体，收率为58.42%。

实施例6

该实施例用于说明本发明提供的提取雷公藤红素的方法。

按照实施例1的方法进行雷公藤红素的提取，不同的是，在硅胶柱分离过程中，所述洗脱剂用氯仿与丙酮（体积比为95:5）的混合溶剂替代。最终得到1.24克纯度为95.91%的雷公藤红素晶体，收率为53.56%。

对比例1

该对比例用于说明参比的提取雷公藤红素的方法。

按照实施例1的方法提取雷公藤红素，不同的是，在回流提取步骤中，所述甲醇用相同体积的氯仿替代，且将所述提取物用300mL水悬浮后每次用250mL氯仿萃取的步骤替换为将所述提取物用250mL的50体积%的乙醇水溶液萃取3次。最终得到1.17克纯度为96.17%的雷公藤红素晶体，收率为50.60%。

对比例2

该对比例用于说明参比的提取雷公藤红素的方法。

按照对比例1的方法提取雷公藤红素，不同的是，在硅胶柱的分离步骤中，所用的洗脱剂为83体积%的甲醇水溶液。最终得到4.02克纯度为39.29%的雷公藤红素晶体，收率为71.12%。

从以上实施例和对比例的对比可以看出，采用本发明的提取方法，能够得到纯度和收率均较高的雷公藤红素。从实施例1和实施例5的对比可以看出，在硅胶柱分离的过程中，采用干法上样，不仅能够得到纯度更高的雷公藤红素，还能够减少硅胶的用量。从实施例1和实施例6的对比可以看出，采用优选的洗脱剂进行洗脱，能够得到纯度和收率更高的雷公藤红素。从实施例1和对比例1-2的对比可以看出，当采用低级脂肪醇作为提取溶剂以及采用石油醚与石油醚和乙酸乙酯的混合溶剂进行梯度洗脱，均能够提高得到的雷公藤红素的纯度。

以上详细描述了本发明的优选实施方式，但是，本发明并不限于上述实施方式中的具体细节，在本发明的技术构思范围内，可以对本发明的技术方案进行多种简单变型，这些简单变型均属于本发明的保护范围。

另外需要说明的是，在上述具体实施方式中所描述的各个具体技术特征，在不矛盾的情况下，可以通过任何合适的方式进行组合。为了避免不必要的重复，本发明对各种可能的组合方式不再另行说明。

此外，本发明的各种不同的实施方式之间也可以进行任意组合，只要其不违背本发明的思想，其同样应当视为本发明所公开的内容。

Claims (10)

1.一种提取雷公藤红素的方法，其特征在于，该方法包括将含有雷公藤红素的植物原料与低级脂肪醇接触，使得到雷公藤红素的含量不低于0.005重量％的醇提液；再将所述醇提液中的低级脂肪醇去除，得到提取物；然后将所述提取物用水悬浮后再用C₁-C₅的卤代烷烃萃取，并将萃取液浓缩后用硅胶柱进行分离，收集含有雷公藤红素的洗脱液，将所述洗脱液浓缩并结晶；将浓缩后的萃取液用硅胶柱进行分离的过程包括上样吸附和洗脱两个步骤，所述洗脱的方法包括先用石油醚进行洗脱，再用石油醚与乙酸乙酯的混合溶剂进行洗脱；在所述混合溶剂中，所述石油醚与乙酸乙酯的体积比为5-20：1；所述低级脂肪醇为C₁-C₅的一元醇。

2.根据权利要求1所述的方法，其中，以100重量份的含有雷公藤红素的植物原料为基准，所述低级脂肪醇的用量为1000-4000重量份。

3.根据权利要求1所述的方法，其中，所述低级脂肪醇为甲醇和/或乙醇。

4.根据权利要求1或2所述的方法，其中，所述接触的条件包括接触的温度为25℃至低级脂肪醇的沸点。

5.根据权利要求1或2所述的方法，其中，在将所述提取物用水悬浮后再用C₁-C₅的卤代烷烃萃取的过程中，以1体积的所述提取物为基准，所述水的用量为2-5体积，所述C₁-C₅的卤代烷烃的用量为2-5体积。

6.根据权利要求5所述的方法，其中，所述C₁-C₅的卤代烷烃选自氯仿、二氯甲烷、均二氯甲烷和偏三氯乙烷中的一种或多种。

7.根据权利要求1或2所述的方法，其中，所述分离的条件包括：温度为不高于40℃；以1g的所述萃取液中的雷公藤红素为基准，所述硅胶柱中的硅胶的体积为25-50mL；所述分离所用的洗脱剂在硅胶柱中的流速为1-2倍柱体积/小时。

8.根据权利要求1所述的方法，其中，含有雷公藤红素的植物原料为卫矛科南蛇藤属植物和/或雷公藤属植物的根和/或根皮。

9.根据权利要求8所述的方法，其中，所述卫矛科南蛇藤属植物选自毛枝南蛇藤、灰叶南蛇藤、粉背南蛇藤、苦皮藤、南蛇藤、毛脉显柱南蛇藤、过山枫、红果藤、短梗南蛇藤、宽叶短梗南蛇藤、独子藤和大芽南蛇藤中的一种或多种。

10.根据权利要求8所述的方法，其中，所述雷公藤属植物为雷公藤。