CN103044427B - 一种药用级腺嘌呤精制纯化方法 - Google Patents

Abstract

本发明公开了一种药用级腺嘌呤精制纯化方法，属于医药化工领域。将工业级腺嘌呤粗品加水煮沸，保温5分钟，离心，固体用热水洗涤至洗液不呈氯离子反应。取离心后固体溶于水，加有机酸调pH为2~3，再加入药用活性炭和EDTA，加热至90℃，保温反应后趁热过滤后超滤，滤液冷却后用无机碱性物质调pH至7~8，搅拌均匀后过滤，滤饼用冷水洗涤，烘干即得腺嘌呤纯品。本发明方案与现有技术相比，有益效果在于：操作简便，过程稳定，产品质量优，没有引入无机酸根等杂质离子，提纯产品收率高，纯度高，具有明显的实施价值和社会经济效益。

Description

一种药用级腺嘌呤精制纯化方法

技术领域

本发明涉及一种腺嘌呤精制纯化方法，属于医药化工领域。

背景技术

腺嘌呤主要用于生产维生素B4，植物生长激素6-苄基腺嘌呤、抗病毒药物、血液制品保护剂等。

腺嘌呤是核酸的组成成分，参与遗传物质的合成。能促进白细胞增生，使白细胞数目增加，用于防治各种原因引起的白细胞减少症，特别是用于肿瘤化学治疗时引起的白细胞减少症，也用于急性粒细胞减少症。以及用于各种原因引起的白细胞减少症、急性粒细胞减少症。

腺嘌呤制备方法通常是：由次黄嘌呤或乙酰基次黄嘌呤与三氯氧磷反应生成6-氯嘌呤，然后氨化得到腺嘌呤粗品，或者由发酵产品腺苷水解获得。以上方法制备得到的腺嘌呤粗品含有次黄嘌呤，腺苷、叔胺盐酸盐、磷酸盐、金属离子等杂质，需要经过精制才能得到高纯度的腺嘌呤纯品。

传统上，腺嘌呤精制过程如下：将制得的腺嘌呤粗品加入40~60倍的水和适量的活性炭，加热至沸，保温，趁热过滤，长时间冷却结晶，过滤，烘干。

例如，JP56131584A、JP58008083A、JP56131585A、JP57062279A对上述腺嘌呤精致过程进行了改进：将制得的腺嘌呤粗品加入40~60倍的稀碱液和活性炭，加热脱色，过滤后用矿物酸调pH值至中性，然后使腺嘌呤结晶析出。

CN101125854A公开了一种类似的腺嘌呤精制方法，即在高温液态水中腺苷无催化水解制备腺嘌呤的方法，方法的步骤如下：1)在高压反应釜中加入去离子水和腺苷，去离子水与腺苷质量比为3：1~10：1，开搅拌，常压下升温至沸腾，打开排气阀2-5分钟；2)关闭排气阀，继续升温至170-210℃水解10-60min；3)水解产物经冷却结晶，得到粗腺嘌呤；4)粗腺嘌呤用热水溶解，经活性炭脱色、二次结晶、真空干燥后得到精制腺嘌呤。该方法对设备要求高，生产成本贵。

CN102127081A公开了一种制备腺嘌呤的方法，包括有以下步骤：1)将4，6-二氯-5-硝基嘧啶溶于乙酸或盐酸水溶液中，加入过量Fe粉，回流下反应，反应完毕，趁热过滤，水洗涤铁泥，滤液冷却结晶，得到4，6-二氯-5-氨基嘧啶；2)将步骤1)制得的4，6-二氯-5-氨基嘧啶加入到甲酰胺中，加入固体碱，反应，直接加入氨水，继续反应3-12h，反应完毕，减压回收去除甲酰胺，残余物加入水溶解后，加入活性炭脱色，趁热过滤，滤液冷却结晶，得到目标化合物腺嘌呤。

CN102321086A公开了一种制备腺嘌呤的方法，包括下列步骤：(1)式(III)所示的乙酰次黄嘌呤和过量的三氯氧磷在N,N-二甲基苯胺的催化下进行氯代反应，充分反应后经后处理得到式(II)所示的6-氯嘌呤；(2)在高压釜中，往6-氯嘌呤的水溶液中通氨气至饱和，密闭反应釜，升温至120~140℃进行反应直至反应完全，调反应液pH至7~8，冷却，析出腺嘌呤粗品，腺嘌呤粗品用水精制、活性碳脱色得式(I)所示的腺嘌呤。

CN102731501A公开了一种腺嘌呤精制纯化方法：将腺嘌呤粗品溶于水中，加无机酸调pH值为3~5，再加入活性炭，加热至沸腾，保温反应后趁热过滤，滤液冷却后用无机碱性物质调pH值到中性，搅拌均匀后过滤，所得滤饼烘干即得腺嘌呤纯品，所述腺嘌呤粗品为6-氯嘌呤氨化后固体产物。上述精制方法腺嘌呤在碱性和中性条件下溶解性差，需要更多的水、活性炭、更长的脱色时间的缺点进行改进：将制得的腺嘌呤粗品加入10~40倍稀无机酸和活性炭，加热脱色，过滤后用无机碱调pH至中性，然后是腺嘌呤结晶析出。    

发明内容

上述现有技术的主要缺点是：在溶解腺嘌呤时使用盐酸、硫酸等无机酸，这些酸根离子在后续步骤中较难除去，使得成品腺嘌呤中会带有氯离子或硫酸根离子，影响产品质量，同时，上述方法无法除去腺嘌呤中的细胞内毒素，难以达到血液制品用腺嘌呤的杂质要求。

为解决现有精致过程中腺嘌呤产品无机酸根杂质残留以及细胞内毒素的问题，本发明中，先将工业级腺嘌呤粗品加水煮沸后离心，洗涤沉淀，事先除去可溶于水的无机酸根杂质，再将溶解腺嘌呤用的无机酸改为有机酸，避免无机酸根引入，同时可有助于粗品腺嘌呤中可能存着的腺苷杂质水解。然后加入药用活性炭和EDTA，可以除去参杂在溶液中的各种色素、有次黄嘌呤、金属离子、酸性有机分子等杂质。另外，在普通过滤后增加超滤工序，用以除去腺嘌呤中的细胞内毒素，再用碱性物质中和，使腺嘌呤析出。

本发明的目的旨在提供一种操作方便，废水量少，产品收率高，质量好的药用腺嘌呤的工艺方法。

本发明采用的技术方案是：

一种药用级腺嘌呤精制纯化方法：将工业级腺嘌呤粗品加水煮沸，保温5分钟，离心，固体用热水洗涤至洗液不呈氯离子反应。取离心后固体溶于水，加有机酸调pH为2~3，再加入药用活性炭和EDTA，加热至90℃，保温反应后趁热过滤后超滤，滤液冷却后用无机碱性物质调pH至7~8，搅拌均匀后过滤，滤饼用冷水洗涤，烘干即得腺嘌呤纯品。

本发明所述的有机酸为醋酸，所述醋酸通常用冰醋酸。

本发明所述无机碱性物质为碳酸钠或碳酸钾，所述的碳酸钠或碳酸钾以固体形式加入，优选为经去除细胞内毒素处理的碳酸钾固体。

本发明所述腺嘌呤粗品与水的投料质量比为1:10~30，优选1:10~20，最有选1:10~15。

本发明所述腺嘌呤粗品与药用活性炭的投料质量比为1:0.01~0.1，优选1:0.03~0.08。

本发明所述腺嘌呤粗品与EDTA的投料质量比为1:0.01~0.1，优选1:0.01~0.02。

本发明所述的趁热过滤后超滤，趁热过滤分粗滤和精滤，粗滤滤器孔径为0.45μm，精滤滤器孔径为0.22μm。

本发明所述的超滤所使用的为纤维型的各向异性膜，例如聚砜膜、聚砜酰胺膜和聚丙烯腈膜等，优选为聚丙烯腈膜。

本发明所述保温反应时间通常为30~60分钟，优选30~40分钟。

本发明所属用无机碱性物质调pH值到中性，通常15~25℃搅拌120~240分钟后过滤，优选15~20℃搅拌180~240分钟后过滤。

本发明所述烘干可以在140℃烘120分钟，得腺嘌呤纯品。

进一步，本发明所述方法优选为：将工业级腺嘌呤粗品加水煮沸，保温5分钟，离心，固体用热水洗涤至洗液不呈氯离子反应。取离心后固体溶于水，加有机酸调pH为2~3，再加入药用活性炭和EDTA，加热至90℃，保温反应30~60分钟后趁热过粗滤、精滤后用纤维型的各向异性膜超滤，优选为聚丙烯腈膜，滤液冷却至15~25℃后用无机碱性物质调pH至7~8，搅拌均匀后过滤，滤饼用冷水洗涤，在140℃烘干120分钟即得腺嘌呤纯品。所述腺嘌呤粗品为腺苷水解后固体产物；所述腺嘌呤粗品与水的投料质量比为1:10~20；所述腺嘌呤粗品与活性炭的投料比为1:0.01~0.1；所述腺嘌呤粗品与EDTA的投料质量比为1:0.01~0.1；所述有机酸为冰醋酸；所述无机碱为碳酸钠固体或碳酸钾固体。

更进一步，本发明所述方法优选按照以下步骤进行：将工业级腺嘌呤粗品加水煮沸，保温5分钟，离心，固体用热水洗涤至洗液不呈氯离子反应。取离心后固体溶于水，加有机酸调pH为2~3，再加入药用活性炭和EDTA，加热至90℃，保温反应30~40分钟后趁热过粗滤、精滤后用纤维型的各向异性膜超滤，优选为聚丙烯腈膜，滤液冷却至15~20℃后用无机碱性物质调pH至7~8，搅拌均匀后过滤，滤饼用冷水洗涤，在140℃烘干120分钟即得腺嘌呤纯品。所述腺嘌呤粗品为腺苷水解后固体产物；所述腺嘌呤粗品与水的投料质量比为1:10~15；所述腺嘌呤粗品与活性炭的投料比为1:0.03~0.08；所述腺嘌呤粗品与EDTA的投料质量比为1:0.01~0.02；所述有机酸为冰醋酸；所述无机碱为碳酸钾固体。

与现有技术相比，本发明具有以下的优良效果：

1.  本发明具有反应条件平缓、操作方便、污染少等特点，有利于工业化生产。

2. 本发明运用EDTA处理有次黄嘌呤、金属离子、酸性有机分子等杂质，可以在用水量较少的条件下，使腺嘌呤纯度大大提高，由于水资源越来越宝贵，通过本发明所述的技术方案，在提高腺嘌呤纯度的同时，还可以节约大量宝贵的水资源。

3. 本发明的制备方法所得到的腺嘌呤纯度高，杂质极少，完全符合制药领域的要求。

具体实施方式

下面结合具体实例对本发明进行进一步描述，但本发明的保护范围并不仅限于此：

实施例1

投料质量比为腺嘌呤粗品：水=1:10。

称取10公斤腺嘌呤粗品，投入脱色釜中，加入100公斤纯水，煮沸5分钟，离心，固体用热水洗涤直至不呈氯离子反应，取离心后固体加入100公斤纯水用冰醋酸调节pH至2，加入0.8公斤活性炭和0.1公斤EDTA，然后加热至90度，保温30分钟。趁热粗滤、精滤后超滤。滤液冷却到室温，用固体碳酸钾调pH至7~8，继续冷却到15~25度，搅拌240分钟。过滤，滤饼用冷水洗涤直至滤液无醋酸根和碳酸根。滤饼烘干，得到腺嘌呤白色晶体9.32公斤，收率93.2%，含量99.8%（HPLC）。

实施例2

投料质量比为腺嘌呤粗品：水=1:15.

称取10公斤腺嘌呤粗品，投入脱色釜中，加入150公斤纯水，煮沸5分钟，离心，固体用热水洗涤直至不呈氯离子反应，取离心后固体加入150公斤纯水，用冰醋酸调节pH至2，加入0.3公斤活性炭和0.2公斤EDTA，然后加热至90度，保温30分钟。趁热粗滤、精滤后超滤。滤液冷却到室温，用固体碳酸钾调pH至7~8，继续冷却到15~25度，搅拌240分钟。过滤，滤饼用冷水洗涤直至滤液无醋酸根和碳酸根。滤饼烘干，得到腺嘌呤白色晶体9.55公斤，收率95.5%，含量99.9%（HPLC）。

实施例3：对比实施例

根据本发明所述实施例方法制备腺嘌呤，然后根据JP58008083A、JP56131585A、JP56131584A和CN102731501A记载的方法纯化腺嘌呤，所用的材料如下表1所示，分别计算腺嘌呤的最终收率和纯度。

表1：本发明方案与现有技术方案对比表

从上表对比可以明显看出，本发明方案与现有技术方案相比，本发明技术方案用水量相对现有技术大大减少，所得产品的纯度更高。

Claims (13)

1.一种药用级腺嘌呤精制纯化方法：将工业级腺嘌呤粗品加水煮沸，保温5分钟，离心，固体用热水洗涤至洗液不呈氯离子反应，取离心后固体溶于水，加有机酸调pH为2～3，再加入药用活性炭和EDTA，加热至90℃，保温反应后趁热过滤后超滤，滤液冷却后用无机碱性物质调pH至7～8，搅拌均匀后过滤，滤饼用冷水洗涤，烘干即得腺嘌呤纯品。

2.如权利要求1所述的方法，其特征在于所述工序中，先在工业级腺嘌呤中加水煮沸，后离心，所述的腺嘌呤粗品与水的投料质量比为1：10～30。

3.如权利要求1所述的方法，其特征在于所述工序中，先在工业级腺嘌呤中加水煮沸，后离心，所述的腺嘌呤粗品与水的投料质量比为1：10～20。

4.如权利要求1所述的方法，其特征在于所述工序中，先在工业级腺嘌呤中加水煮沸，后离心，所述的腺嘌呤粗品与水的投料质量比为1：10～15。

5.如权利要求1所述的方法，其特征在于所述过滤后超滤，为温度保持在80～90℃，经传统过滤器滤去废活性炭等固体杂质后，再使用聚丙烯腈超滤膜进行。

6.如权利要求1所述的方法，其特征在于所述有机酸为乙酸。

7.如权利要求1所述的方法，其特征在于所述无机碱性物质为碳酸钠或碳酸钾。

8.如权利要求7所述的方法，其特征在于所述碳酸钠或者碳酸钾以固体形式加入。

9.如权利要求1所述的方法，其特征在于所述腺嘌呤粗品与药用活性炭的投料质量比为1：0.01～0.1。

10.如权利要求1所述的方法，其特征在于所述腺嘌呤粗品与药用活性炭的投料质量比为1：0.03～0.08。

11.如权利要求1所述的方法，其特征在于所述腺嘌呤粗品与EDTA的投料质量比为1:0.01～0.1。

12.如权利要求1所述的方法，其特征在于所述腺嘌呤粗品与EDTA的投料质量比为1:0.01～0.02。

13.如权利要求1所述的方法，其特征在于所述无机碱性物质调pH值到中性，15～25℃温度下搅拌120～240分钟后过滤。