CN103038333B - 用于制备组织、特别是脂肪组织的方法 - Google Patents

Abstract

用于从例如通过脂肪抽吸而提取的小叶脂肪来制备用于移植的脂肪组织的装置和方法，所述脂肪由流体组分和固体组分组成，所述流体组分包括油组分、血液组分和/或消毒溶液，所述固体组分包含异种尺寸的细胞碎片、细胞和一个或多个细胞大团块，其中所述装置包括至少一个洗涤和分离容器（1），所述至少一个洗涤和分离容器（1）具有用于洗涤腔室（101），所述容器（1）具有入口（102）和出口（103），用于使吸脂材料穿过入口（102）进入洗涤腔室（101）和用于使所述材料的至少一部分通过所述出口（103）离开所述腔室（101），所述洗涤腔室（101）包括用于形成流体组分的乳状液的搅拌装置。

Description

用于制备组织、特别是脂肪组织的方法

技术领域

本发明涉及用于从通过脂肪抽吸而提取的小叶脂肪来制备用于移植的组织、具体地是脂肪组织的装置和方法。本发明还涉及处理身体和面部体积缺陷、改进皮肤营养性和/或用于借助于通过所述装置和方法获得的脂肪组织进行生物刺激的方法。本发明还涉及用于执行所述方法的套件。

背景技术

根据现有技术，再使用吸脂材料所需的制备涉及待再注射的活细胞组分与废弃材料的分离,所述废弃材料包括麻醉剂液体或生物流体(血清或血液)和由抽吸的脂肪细胞的破裂产生的细胞碎片和油。

这种分离可在用于抽取的注射器或在特定的容器中发生，基本上以三种方式发生：

-通过沉淀：材料通过密度差异在重力下分离，

-通过离心作用：材料通过密度差异在离心力的作用下分离，

-通过洗涤：将脂肪抽吸物放置在薄网式滤器中并通常利用盐水进行洗涤，盐水可逐渐地被替换或不被替换。

根据最为广知的技术(Coleman脂肪结构移植)，容纳脂肪抽吸物的注射器在底部由鲁尔锁帽封闭，并且放置在离心机中以将液相与固体生物材料分离。

在利用如此获得的生物材料之前，在离心作用之后留在注射器底部的麻醉剂和生物液体应通过将鲁尔锁帽从注射器移除并使所述生物材料通过重力流出而被手动地排出，而由脂肪细胞的细胞壁的破裂引起的细胞碎片和油存在于待移植的细胞材料上，并且利用部分地吸收过量的油的纱布以不完全的且初步的方式移除，并且通常使抽吸的材料的最后部分不可用。

上述技术具有某些缺陷。

首先，通过离心进行的抽吸和分离步骤导致大量脂肪细胞破碎并释放很多油，油不能够利用Coleman技术完全去除，并且使大部分脂肪抽吸物不可用，即：在离心之后位于注射器筒的上部的细胞材料的部分与油接触，并因此被所述油污染。

这是因为在待注射的生物填充物中的油的存在增加传染和排斥的危险，并且引起增加的发炎。

而且，上述过程涉及抽吸的材料与各种类型的器械表面的多次接触，以及与在可能非消毒环境中的空气长期接触，从而推荐在手术室的使用该过程。

还已知但很少使用的一种技术，其涉及利用混合器对抽吸的细胞团块进行机械分裂，混合器的切割刀片分离脂肪小叶并且提供可注射的细胞悬液。

该分裂技术具有许多缺陷。

首先，之后是离心的分裂步骤引起大量脂肪抽吸物破裂，这引起多于一半的抽吸的材料不可用于稍后的麻醉处理。作为直接结果，需要增加的脂肪抽吸时间量来补偿在待移植材料制备期间发生的材料损失，并且增加患者的不舒适。

此外，可利用上述程序和装置获得的可使用的细胞悬液的量主要取决于在设定混合器和离心机的速度和操作时间参数中健康护理人员的技能以及器械的条件：刀片的过大旋转速度或具有较差切割刀片的混合器的使用，例如不会引起脂肪小叶的分离，而是相反引起大量脂肪抽吸物的细胞壁的机械破裂，除需要细胞碎片和油与悬液的精确分离之外，这涉及油形成和使细胞悬液不可用。这是因为在待注射的生物填充物中油的存在增加传染和排斥的危险。

此外，上述过程涉及抽吸的材料与各种类型的器械的表面的多次接触，以及与非完美的消毒环境中的空气的一些接触，如医生办公室的情形中的那样。因为材料是生物性质的，与空气或与可能不是完美地消毒的多个器械长期接触，增加了细菌或病毒污染的危险，且可以影响处理结果。

涉及通过滤器洗涤的技术也具有某些缺陷。

具体地，滤器网可以容易被抽吸的材料堵塞，这需要手动作用来从网眼移除脂肪，从而减慢制备过程并且具体地增加待注射材料污染的危险。

简单滤器的使用不允许抽吸的材料在整个制备过程，即从脂肪抽吸步骤到注射步骤被恒定地保持在封闭且完美消毒的环境中。

公开细胞隔离装置的专利文献是已知的。

国际申请WO 2009/073724公开了用于将细胞从脂肪抽吸物隔离的方法和设备。

具体地，其公开了用于将脂肪细胞和油部分从脂肪抽吸物中的非脂肪细胞部分分离的方法。

为获得在关注的细胞溶液和在定义为“分离腔室”的容器内的其它小细胞的细胞溶液上漂浮的脂类和脂肪细胞，脂肪组织被置于消化腔室中，并迫使其穿过过滤器并穿过具有孔的头部进入所述“腔室”。

洗涤组织、移除过量的液体、酶消化、添加抗生素和细胞选择的步骤可在定义为“消化腔室”的容器中进行。消化腔室可包含保持组织但是允许分离的细胞和流体通过的过滤器。包含脂肪细胞脂类的含水乳化液在该腔室中形成。

消化腔室中的分离的材料可通过具有小于包含在第一“分离腔室”中的分散头部上的孔的分散过滤器。该过滤器115用于防止分散头部的孔堵塞。

在“分离腔室”中，脂类和脂肪细胞与细胞群分离。

该装置在不利用离心力而是通过迫使溶液穿过具有各种尺寸的孔的过滤器来从组织提供细胞群。

所述装置尤其是在构造方面来说是复杂的，如图所示的那样。

此外，器官材料多次穿过腔室和过滤器通过延长了方法的持续时间并且使有机材料受到污染危险。

而且，方法和装置的复杂性使它们不适合用于例如门诊环境，所述门诊环境需要在没有特别的专门人员的辅助的情况下从脂肪抽吸物迅速地制备可注射的材料以及面部和身体缺陷矫正的迅速实现。

此外，在该方法中，利用化学物质形成了乳化液，而不是仅通过使用机械装置和力。

美国申请2007/0274960公开了制备包含干细胞的组分的方法。为了制备干细胞群，在某些实施方式中，抽吸的脂肪组织被物理处理，即切割或切碎成较小的片，并且经历酶处理，这促进感兴趣细胞从其它组织组分的释放。

因此，US 2007/0274960允许通过迫使脂肪组织通过一组网眼将脂肪组织分离成较小的片，以获得能够以更均匀的方式经历酶处理的均匀尺寸的较小部分，从而提供干细胞的较迅速的释放并减少释放细胞和酶溶液之间的接触时间。

根据该专利，可利用全氟化碳溶液来制备脂肪组织乳化液，该乳化液可从感兴趣干细胞分离。

该专利不包括液体的乳化液的制备，所述液体的乳化液能够从脂类细胞或小的细胞团块机械地分离。

包含切割装置的容器也不能用于将脂肪组织注射到患者。专利US6,020,196公开了用于收集微脉管内皮细胞的方法。

该专利描述了处理所抽吸的脂肪组织的方法，通过具有带有最小化细胞组分上的应力并获得均质脂肪细胞的尺寸的孔隙的插管的注射器抽吸的该脂肪组织从一个注射器到另一个注射器而被迫通过位于两个注射器的抽吸孔口之间的过滤器(74)。

通过拉动注射器的活塞，抽吸的脂肪组织通过从一个注射器到另一个注射器被迫通过过滤器而被均匀化。

所抽吸的材料的较低粘度允许污染物的较容易去除以及改进的样品消化，以获得内皮细胞。

该专利中公开的方法具有使其不适合用于制备可注射脂肪的某些缺陷，因为：

-过滤器可能被脂肪组织堵塞：过滤器保持装置在从一个注射器到另一个注射器的流动线路中形成限制；堵塞的过滤器阻碍脂肪组织从一个注射器到另一个注射器穿过并需要断开注射器和更换过滤器以继续脂肪组织洗涤；由于这些步骤，固体组分和液体组分的乳化液的制备变得困难且耗时并且器官材料受到污染；

-通过用于结缔组织的分解的过滤器网眼也导致脂肪细胞破裂，并且形成过量油并需要完好无损的脂肪细胞稍后从油的精确分离。

US 6,020,196提供了匀浆，内皮细胞可通过添加胶原酶和离心作用，因此通过化学作用和物理作用的组合而从该匀浆中被提取。该专利没有涉及形成液体组分的乳化液，从抽吸的脂肪组织获得的脂类细胞或脂类细胞的小团块可漂浮在该乳化液上，该细胞在合适的处理之后直接地可注射到患者，而不需要特定的环境消毒条件，例如不需要完美消毒的手术室。

US 6,020,196没有涉及提供单个装置的可能性，该单个装置通过几个简单的处理步骤，允许制备抽吸的材料并收集和临时储存脂肪直到再注射为止。

专利申请US 2003/0100105公开了用于从器官提取细胞的设备。该设备包括容纳器官和蛋白酶的消化腔室以及诸如具有至少一个空腔的球的搅拌装置，该球仅作用于器官。

因此，与前述专利一样，该专利涉及器官材料的化学侵害性处理。

如第0026段第3栏描述的那样，搅拌装置14随消化腔室12移动以搅拌器官并方便细胞的释放。

该专利没有涉及从小叶脂肪获得用于移植的脂肪细胞制备的可能性，具体地说，该专利涉及使用球来搅拌器官并促进从所述器官释放细胞。

发明内容

本发明的目的在于提供一种能够避免上述缺陷的简单且低价的装置，用于从小叶脂肪、即包含细胞大团块、细胞和细胞碎片的脂肪制备组织，特别是用于移植的脂肪组织，所述脂肪借助于脂肪抽吸而获得。

本发明的目的是提供一种装置，该装置能够不使用化学物质来提供用于移植的组织，即没有化学侵害或脂肪抽吸物的任何其它化学处理。这提供仅使用手动施加的机械力的简单且容易使用的装置，该装置可能不需要医疗使用的试验或仅需要简单试验。本发明的装置也可用于医疗门诊环境，而不需要特定的消毒条件，诸如在手术室中需要的条件。

本发明另外的目的是涉及使用所述装置来制备组织、具体地是用于移植的脂肪组织的方法，所述方法和装置允许将生物材料维持在完全封闭的系统中，即防止抽吸的患者材料与外部环境有任何接触的系统。

另一目的也是借助于通过所述装置和方法获得的脂肪组织来处理身体和面部体积缺陷、改进皮肤营养性和/或用于生物刺激的方法。

特别地，本发明的装置允许利用几个简单的器械和少数处理步骤来制备细胞团块、具体地是脂肪细胞团块，而不使用化学或物理化学处理，而是仅使用机械搅拌，同时消除了大部分油组分并避免了在非完美的消毒环境中操纵生物材料。

因此，还由于使用特别细的针，脂肪组织的移植将是侵入性小的、微创的且更有效的。而且，由本发明的装置产生的细胞团块是在与外部环境的最小接触或没有接触的情况下并且利用一次性器械来制备的，所述一次性仪器减少生物材料污染的危险、器械劣化的危险和与洗涤和再消毒有关的缺陷。

如此获得的生物材料可被注射到任何组织或器官。

上述目的通过包括至少一个洗涤和分离容器的装置来实现，所述至少一个洗涤和分离容器具有用于洗涤抽吸的材料的洗涤腔室，该容器具有入口和出口，用于使抽吸的材料通过入口进入洗涤腔室并且使所述材料的至少一部分，具体地是流体组分穿过出口离开所述腔室，所述洗涤腔室包括用于机械地形成流体组分的乳化液的装置，被设计为用于稍后移植的细胞组分将漂浮在该乳化液上，从该液体组分中分离。

优选地，如此制备的组织用于自体移植，但是该装置也可用于制备用于异体移植的组织。

本发明的装置和方法不仅能够提供用作生物填充物的脂肪组织、即用于面部和身体体积缺陷的矫正的脂肪组织，而且还能够提供在其表面上具有干细胞的脂肪组织的大团块，其与注射区域的组织的接触的布置允许处理组织的迅速再生。

用于机械地形成乳化液的这些装置能够通过简单的机械作用而获得包含在抽吸的材料中的血液流体、血液残余物、油和其它溶液(诸如洗涤盐水溶液或在抽吸期间使用的麻醉剂溶液)的乳化液，从而允许所述流体保持与固体材料(即脂类细胞、干细胞)分离。

待除去的液相与待移植的固相的分离仅通过机械(而非化学)作用而获得。

在优选实施方式中，该作用通过搅拌装置来执行，其可为任何类型，具体地是主动类型或被动类型。

主动装置为由马达或动力驱动以提供搅拌运动的机动化搅拌装置。

被动装置为在搅拌容器时施加其作用的装置，并且因此例如通过惯性操作。

搅拌装置形成待除去的液体的乳化液，且具体地在诸如生理洗涤流体的溶剂中的脂肪液体。尤其是，在具有被动搅拌装置的实施方式中，装置具有非常简单的构造且是有效的。

利用该装置，容器的机械作用与被动搅拌装置组合将不具有与需要使用机械装置一样的强度。手动搅拌在本装置中是足够的。

优选地，机械搅拌作用在于：容器围绕垂直于容器的端表面并且在容器外部或内部的轴线，诸如纵轴线的旋转。还可以提供其它种类的搅拌，诸如摇动等。

用于在不使用可能导致细胞材料分解的酶或化学物质的情况下，通过洗涤和分离容器的简单手动或可能地机械搅拌而形成乳化液的这些装置提供在洗涤腔室中固体组分与液体组分的分离，并且特别地允许由细胞碎片、细胞和细胞团块组成的固体组分漂浮在液体物质诸如血液、消毒溶液和由脂肪细胞破裂而产生的油的乳化液上。在优选实施方式中，固体组分在洗涤腔室中被洗涤：消毒洗涤溶液，例如消毒盐水，通过入口被注射到洗涤和分离容器中一次或多次。利用容器的搅拌，该溶液允许用于移植的细胞材料没有任何废弃液体诸如血液和油。

抽吸的脂肪包含流体材料和细胞碎片、细胞和异种(heterogeneous)尺寸的一个或多个细胞大团块的混合物。

使由于在洗涤腔室中机械乳化装置的存在而在搅拌时形成的乳化液从出口离开并且将乳化液收集在密封容器中，以防止外部环境污染以及获得在完美消毒条件下被储存在洗涤腔室中的用于移植的细胞材料(细胞碎片、细胞、细胞团块)。

然后，使所述细胞材料离开洗涤和分离腔室，并且被注射或分离并且被储存到一个或多个消毒容器，诸如注射器等中，用于稍后移植。

因此，简单地形成了废弃液体的乳化液，细胞碎片、脂类细胞、脂质大团块和干细胞则漂浮在该乳化液上，碎片或细胞将准备使用而不需要额外处理，具体地不需要化学处理。

洗涤和分离容器将填充有高达其容积的约1/3的脂肪抽吸物，其余容积由洗涤液体填充。

在材料处理期间在容器中没有空气。

通过使用压缩装置诸如连接到所述容器的注射器、与所述容器的开口配合的活塞等对所述洗涤和分离和/或尺寸减小容器的内含物、即对在待处理材料施加压力或抽吸，而迫使脂肪和/或脂肪洗涤或处理液体通过本发明的装置。

因而，该装置允许脂肪抽吸物的洗涤并且从流体材料，诸如洗涤溶液、盐水溶液、麻醉剂溶液、血液和油的的乳化液分离细胞物质，使得过程结束时收集到最少量的与细胞或细胞团块、具体地是脂肪细胞混在一起的不期望的杂质。

利用本发明的装置，通过机械装置并且具体地通过洗涤形成了乳化液，并且通过密度梯度而除去液体组分的乳化液。

装置可用于洗涤分离成较小细胞和/或团块的脂肪抽吸物。

用于分离抽吸的材料的技术是已知的，例如通过使用搅拌器。

在优选实施方式中，抽吸的材料、具体地是细胞大团块被减小到较小的尺寸，用于更容易的移植。

根据本发明，在洗涤和分离容器或在称为尺寸减小容器的另一容器中，其适合于流体密封地连接到所述洗涤和分离容器，提供了尺寸减小装置，用于将脂肪抽吸物的固体组分、具体地是细胞大团块的尺寸减小到具有等于或小于给定值的尺寸的平均相等的更小的细胞团块，该装置由至少一组平行的或相交的片材或切割线构成，以形成至少一个尺寸减小网，抽吸的材料通过该至少一个尺寸减小网。

在优选实施方式中，脂肪抽吸物的同种化和/或尺寸减小在洗涤之前借助于第一尺寸减小网发生，抽吸的材料在进入洗涤和分离容器的洗涤腔室之前被迫通过该第一尺寸减小网，而第二尺寸减小/同种化借助于第二尺寸减小网发生，该尺寸减小在洗涤和分离容器中的至少一个细胞材料洗涤步骤之后执行。

第二尺寸减小/同种化(homologation)可在洗涤步骤结束时、在用于移植的材料从洗涤和分离容器离开之前发生。

优选地，第二尺寸减小网具有比第一尺寸减小网更窄的网眼。

明显地，可使用于移植的材料通过多个网或尺寸减小装置、具体地是通过两个或更多个网或尺寸减小装置，所述尺寸减小装置可能地设置在单个容器中或者在两个或更多个可连接的洗涤和分离容器中。

第一减小促进洗涤，因为其使脂肪小叶的纤维组分破碎或停止并且其通过将脂肪抽吸物块减小到较小的团块而均匀化该脂肪抽吸物块的尺寸，将团块相互分离并且与脂肪抽吸物自身分离。第二减小提供洗涤的准备用于移植的细胞材料，其尺寸允许通过任何种类的针，甚至是非常小尺寸的针进行注射。

具有不同尺寸的网眼或网孔、具体地具有在位于脂肪抽吸物入口处的网中的较大网眼或网孔和在位于准备移植的材料的出口处的网中的较小网眼的至少两个尺寸减小装置的存在，以及所述至少两个尺寸减小装置在所述两个装置之间的给定距离的设置，即所述至少两个尺寸减小装置被设置在洗涤腔室的端侧处，防止所述尺寸减小装置被细胞材料堵塞，因为尺寸减小是逐渐发生的。

此外，这种脂肪抽吸物的逐渐尺寸减小允许在从供体区域抽取组织期间可能地使用大的针，从而加速材料收集过程。因此，甚至当抽吸的材料包括大的团块时，其仍不会堵塞装置的网孔或尺寸减小装置，因为大的团块不是通过穿过单个尺寸减小网眼、网或片材，而是通过顺序地通过在待处理材料的流动方向上具有减小的尺寸的网眼或网孔的两个或更多个尺寸减小装置，而被逐渐减小到较小的团块。

优选地，细胞材料被减小到允许在洗涤步骤结束之后通过非常细的针将其移植的尺寸。

特别小的尺寸的移植插管的使用减小由移植过程引起的创伤，并允许移植过程在局部麻醉下执行，而没有缝合或特殊的药疗法且具有快速的愈合效果。

考虑到抽吸的材料也含有干细胞，脂肪尺寸减小提供小的细胞团块、具体地是其表面附有干细胞的单个细胞或脂肪细胞的大团块。脂肪抽吸物块减小成多个团块提供在注射由本发明的方法和装置制备的材料时可能接触待处理的组织的大量干细胞，因为除将抽吸的物质减小成多个相等的较小的团块之外，尺寸减小作用还导致可能接触待处理组织的表面积的增加，从而增加其上具有干细胞的暴露区域。

将由脂肪抽吸取得的脂肪组织的小叶转变成生物填充物，即含有脂肪细胞、其它类型的细胞诸如干细胞或间质细胞和可能地结缔材料的细胞碎片和残余物的细胞悬液或物质或流体或半流体团块，所述悬液在本申请的转变过程结束时具有包含小的平均地均匀尺寸的细胞和/或细胞团块的固相，适合于以小量或大量注射，允许所制备的脂肪不仅在肌肉注射或肌下注射中使用，而且在皮下注射中使用，而没有不规则性、硬化效果、钙化和注射脂肪的总体再吸收。

然而，脂肪材料可被注射到任何组织或器官。

此外，脂肪小叶分离成小细胞或细胞团块促进杂交，即在其被注射在其中的组织中细胞物质的整合。

脂肪小叶分成细胞团块还提供接触经受移植的组织的注射细胞物质的表面的增加，从而促进处理组织的生物刺激以及因此注射的细胞材料的整合。

包括在实际上整个制备过程中将提取的生物材料与外部环境隔离的几个消毒部件的简单装置的使用明显减少生物材料污染、人员和环境的危险、以及因此在细胞材料的稍后使用期间传染或排斥的危险。

因此，本发明的装置还允许在手术室外面，在门诊环境中处理生物材料。

装置的简单构造，以及除导致乳化液形成的洗涤溶液之外的脂肪抽吸物的任何化学和/或酶处理的缺乏，能够促进生产和销售，并且能够避免、促进或减小收集关于新的药物或新的装置的安全和有效数据以获得其使用授权所进行的长期和昂贵研究步骤。

因此，本发明的装置和方法提供简单且快速的程序，例如为从患者身体抽吸脂肪需要单个门诊会晤，所述脂肪的处理没有脂肪抽吸物的化学/酶乳化剂，以及其储存和/或向患者的再注射。

利用其中具有用于形成液体乳化液的装置、具体地是球的本发明的装置通过手动机械搅拌需要非常短的时间来获得液体乳化液以及漂浮在所述乳化液上的固体细胞材料的分离。

处理脂肪抽吸物和使其适合使用所需的时间平均地为10至20分钟；在任何情形中，获得可移植材料所需的时间比其它现有技术装置或方法所需的时间短。

脂肪抽吸物储存和处理装置还可用于稍后的移植步骤。

另外，优选地，处理材料可被分离并转移到其它容器，例如一个或多个10cc注射器，该容器可经受沉淀和/或离心，以将残余液体/油组分与固体组分分离，所述固体组分将通过随后转移到较小容量的一个或多个注射器而因此准备用于移植。

因此，本发明的装置提供脂肪组织群的快速尺寸减小，允许通过非常小的针来注射所述脂肪组织群，从而在患者上留下不可见的疤痕(制备组织可用于面部移植，其中大的且可见的孔将是美学上不可接受)，且分离乳化液/细胞相，以获得可注射的细胞或细胞团块，所述可注射的细胞或细胞团块具有较大表面，用于包含在脂肪抽吸物中的干细胞与待处理组织接触。

减小到小的团块允许位于所述团块的外表面上的末梢干细胞活化。团块越多，暴露的细胞表面就越大并且可能地与处理组织相互作用的末梢干细胞就越多。

下面更详细描述的方法、装置和套件可用于简单地通过机械搅拌而不仅处理脂类材料而且用于需要细胞团块尺寸减小和/或从固体细胞相洗涤和分离液相的任何种类的细胞团块。

附图说明

本发明的这些及其它特征和优点将通过在附图中示出的几个实施方式的以下说明而变得更清楚，在附图中：

图1是根据一个实施方式的洗涤和分离容器的透视图，

图2是根据不同实施方式的洗涤和分离容器的透视图，

图3是洗涤和分离容器的侧视图，

图4是具有位于出口附近的过滤器的洗涤和分离容器的纵截面图，

图5是洗涤和分离容器的纵截面图，所述洗涤和分离容器具有：位于洗涤腔室的入口附近的细胞团块尺寸减小网、位于出口附近的第二尺寸减小网和在洗涤腔室中的搅拌元件，

图6是尺寸减小容器的透视图，

图7是尺寸减小容器的纵截面图，所述尺寸减小容器具有在入口附近的尺寸减小网和用于减小尺寸的脂肪的收集腔室，

图8a-8d示出了在洗涤和分离容器中发生的脂肪抽吸物处理步骤，

图9是洗涤和分离容器的纵截面图，其中固体组分漂浮在液体组分的乳化液上以允许液体组分从洗涤腔室的出口离开，

图10示出了在前景位置中连接到非固定的和/或外科手术装备中的本发明的装置，

图11a、11b、11c示出了尺寸减小装置的实施例，

图12a、12b以放大细节示出尺寸减小网的实施例，

图13a、13b、13c示出洗涤和分离容器以及封闭端子的实施例，

图14示出了适于与本装置组合使用的、以移植所制备的材料的针。

具体实施方式

本发明的装置在身体和面部体积矫形过程和/或在单独地利用所述处理的脂肪材料或利用任何其它合成或天然填充物注射的任何组织或器官的生物刺激期间、提供用作生物填充物、即天然和自源或异源的填充物的脂肪组织的细胞悬液。

由本发明的装置处理的小叶脂肪材料，即细胞的大团块，具体地是脂肪细胞，可借助于吸脂过程来获得，所述吸脂过程涉及在局部麻醉下或通常在门诊环境中从患者的任何供区，例如皮下髋部、腹部或膝部区域提取脂肪组织。

一旦已经利用本发明的装置对所述脂肪组织进行了处理，该脂肪组织就能够用于自体移植，即注入到组织已经被抽取的患者的身体的特定区域中，以填充如下区域：由于老化、疾病、例如放射疗法的治疗或以往的手术而展现出皮下脂肪的体积缺乏或重吸收，并且身体相关部位凹陷，骨骼突出和皮肤松弛的区域。

利用本发明的装置和方法处理的组织可以被布置为用在受体患者上而不是供体患者上。

现在将描述示例性的脂肪抽吸过程。

脂肪抽吸过程包括在消毒过的注射器中制备麻醉剂液体，该麻醉剂液体被适当地稀释并且可能地添加有血管收缩肾上腺素，该消毒注射器优选地具有针或称为鲁尔连接器的插管连接器，具有适于待麻醉的身体的表面区域的筒体积，例如10至60cc注射器。

一旦用于抽取脂肪组织的区域已经被标记并合适地消毒，通过具有约1mm直径的消毒的一次性钝端的插管注射局部麻醉剂液体，该插管优选地具有鲁尔连接器。

患者皮肤利用常规技术消毒并通过疹块(wheal)来麻醉。麻醉是通过将一次性钝端的消毒过的插管逐渐引入穿过皮肤而将麻醉剂溶液引入到皮下组织中，以用麻醉剂浸渍整个目标区域来获得的。

为了注射麻醉剂以及稍后插入针或插管以进行脂肪组织抽取，可利用具有充分直径的消毒的尖针或消毒的柳叶刀形刀片穿透皮肤，以允许稍后将一次性抽取插管引入。

如果需要，可给患者服用镇静剂。

脂肪抽吸，即脂肪组织的抽取利用连接到插管的消毒注射器来执行，该插管优选地具有直径在1.2至3mm范围的多个孔。也可以使用高达6mm直径的插管。

利用本发明的装置，可以使用大直径插管(优选3mm的多孔插管)来抽取，从而允许快速抽出大量脂肪组织，因为被如此抽出的细胞的大团块将在使用之前经受尺寸减小，如下面更详细说明的那样。在一个实施方式中，具有至少10cc容积的所述注射器具有用于连接到一次性消毒插管的鲁尔连接器，所述插管在其表面上具有用于抽吸组织的一个或多个孔。

明显地，抽吸注射器和抽吸插管的容积取决于待抽吸的脂肪组织的量，待抽吸的脂肪组织的量则取决于稍后的填充和/或矫形手术必定需要的处理脂肪组织的体积。

脂肪组织抽取插管优选地被引入通过为了麻醉而预先形成在皮肤中的孔。

对于脂肪抽吸来说优选地使用10cc注射器，因为它们对组织施加足够的压力并允许容易的操纵。

这些优选是已知的鲁尔锁注射器7，其被直接地连接到具有相应的鲁尔连接器的抽吸插管，或者在插管和注射器之间插入有特定的双向阀的情况下被连接到具有相应的鲁尔连接器的抽吸插管，所述阀，与图10中示意性显示的阀类似，由管或导管8连接到优选地配备有三向阀9的装置的入口102，并且允许通过一个或多个步骤将脂肪抽吸物从患者直接转移到本发明的装置。

这样的转移可在封闭系统中发生，在该封闭系统中生物材料决不接触外部环境。

下面所描述和要求保护的装置和方法使用抽吸的小叶脂肪来获得细胞悬液，所述细胞悬液具有固相和液相，所述固相由细胞、具有小的且平均恒定的尺寸的细胞团块组成，所述液相没有任何诸如血液、油、细胞碎片和麻醉剂液体的杂质。

如图1和2所示，本发明的装置包括洗涤和分离容器1，所述洗涤和分离容器1具有用于洗涤抽吸的材料的洗涤腔室101，所述容器1具有入口102和出口103，用于使抽吸的材料通过入口102进入洗涤腔室101并且用于所述材料的至少一部分，具体地是以时间顺序，即首先流体组分和然后固体组分的顺序通过出口103离开所述腔室101，所述洗涤腔室101包括用于机械地形成流体组分、具体地是从破裂的脂肪细胞获得的油、血液和/或其它消毒液体溶液的乳化液的装置。

所述乳化液形成装置由至少一个搅拌元件104组成，所述至少一个搅拌元件104诸如具有相等或不同尺寸的球等，用于在使洗涤和分离容器1经受搅拌时增加液体组分的乳化液。在本发明的装置中，装置的简单手动搅拌能够提供液相与固相的分离，所述液相包括流体乳化液，所述固相包括细胞、细胞碎片、细胞团块。

显然，还可提供机械搅拌来模仿至少手动施加的力。

这些搅拌元件104在与洗涤腔室101相比时可具有较小的尺寸，因为如果它们太大，则它们不能在腔室101中自由地移动且可能破坏容纳在该腔室101中的细胞材料。所述搅拌构件的重量也应是足够的，以形成液体乳化液而不会引起细胞壁破裂。

这些搅拌构件104可为大体球形本体，即具有连续的圆化外表面，且为中空的或实心的，并且可在腔室101内旋转和移动，以辅助液体组分的缓和混合。

搅拌构件104优选地由消毒材料制成，该消毒材料不与容纳在洗涤腔室中的生物材料相互作用或不与为洗涤细胞材料而被注入的溶液相互作用：例如，它们可以由金属制成，所述金属即使在高温下也容易消毒并且防止搅拌构件在相互碰撞时或与洗涤腔室101的内壁碰撞时制动或变形。

因为搅拌构件104的圆化表面防止在所述构件104上产生将阻碍清洁和消毒条件的维持的碎片积聚区域或细菌繁殖区域，所以搅拌构件104的圆化表面还可促进消毒。优选地，搅拌构件104由具有给定重量和尺寸的球组成，以促进液体的相互乳化，而不会在手动或机械搅拌期间引起细胞壁的机械破裂。

液体的乳化液由于搅拌装置104的存在而获得，该搅拌装置104增强混合作用，同时还温和地搅拌容器，以获得液体的乳化液并防止可能导致细胞破裂的突然运动，这样的搅拌不涉及液体组分之间的键的分解。

显然，可以使用具有任何形状和材料、诸如玻璃的搅拌构件104。

洗涤和分离容器1优选地具有柱形形状，但是其可以被形成为可以容纳给定量的抽吸的脂肪并且确保最佳操纵的任何形状和尺寸。

在优选实施方式中，洗涤腔室中的脂肪抽吸物不超过整个腔室容量的1/3。其余容积由液体填充。

例如，可提供具有10至3000cc容积的容器1。

优选的尺寸是300至600cc的容器，其中约100至250cc脂肪抽吸物被处理。

如图所示，洗涤和分离容器1由具有形成在其中的洗涤腔室101的中心管状部分111，以及在所述管状部分111的端部处的两个封闭端子112、113诸如盖帽112、113等组成，洗涤和分离容器1的洗涤腔室101的入口102和出口103由形成在每个盖帽112、113中的、与连接端子1021、1031和/或封闭阀连通的孔构成。

很显然，所述端子1021、1031和/或所述至少一个入口102和出口103可被设计成在将脂肪注射和压入到所述容器1中的步骤期间利用消毒盖帽来封闭，并且/或者配备有防回流装置，诸如单向阀。

例如，所述入口102和/或出口103和/或所述连接端子1021、1032可被连接到三向阀9，类似于图10中示意性示出的那些。

脂肪材料通过开口102而被注射到容器1的洗涤腔室101中，所述开口102例如配备有例如鲁尔连接器1021和/或三向阀9。

阳性、阴性和中性鲁尔连接器是已知的并允许具有所述连接器的两个装置之间的流体密封连接。鲁尔连接器例如为由GVS公司在其网址www.gvs.com上销售的连接器。具有双向阀的注射器的示例在www.interaationalpbi.it中示出。

可在洗涤和分离容器1的洗涤腔室101中靠近出口103设置至少一个过滤器4，所述过滤器允许脂肪的流体组分和/或固体组分通过并将搅拌元件104保持在洗涤腔室101中。

在本发明的变型实施方式中，所述过滤器4可由选择性可渗透膜构成，该选择性可渗透膜允许液相的至少一部分通过，并且保留固体细胞相，所述液相由含油组分、血液组分、诸如麻醉剂液体和/或盐水的消毒溶液构成，所述固体细胞相由细胞碎片、整细胞和细胞团块构成，从而允许乳化液的液相与固相分离。

所述选择性可渗透膜可由具有细网眼的网组成，其为光滑的，即不具有可能破坏细胞壁的突出部分或不规则或尖锐表面，其网眼或贯通网孔小于容纳在洗涤和分离容器1的洗涤腔室101中的细胞团块。

形成选择性可渗透膜的网的网眼可具有在1000至50μm范围的尺寸。

这种过滤器4用于将搅拌构件104保持在洗涤腔室101中，并且防止它们在洗涤和将固体细胞组分从乳化液分离期间堵塞出口103。

在一个优选实施方式中，如下文更好地描述的那样，所述过滤器4由细网眼的切割网(cutting net)代替，其提供用于减小从洗涤腔室101出来的脂肪抽吸物的固体组分的尺寸的装置。

在一个实施方式中，在相对端，即在入口102处，可提供尺寸减小装置以将抽吸的脂肪3的固体组分、具体地是细胞大团块的尺寸减小成较小的细胞团块，即具有等于或小于给定值的尺寸的细胞团块，所述装置由至少一组平行的或相交的由消毒材料诸如金属制成的片材或切割线构成，以形成至少一个尺寸减小网，抽吸的材料在进入洗涤和分离容器1的洗涤腔室101之前通过该尺寸减小网。

所述容器可由消毒塑料或玻璃制成，或总之由优选地耐高温和高压釜可处理的半透明材料制成，以将抽吸的脂肪注入其中。

如图4和5所示，用于细胞团块的所述尺寸减小网3在大体垂直于进入所述洗涤和分离容器1的洗涤腔室101的脂肪流的方向的位置中、靠近洗涤和分离容器1的入口103被包(subtended)在洗涤腔室102中。

在本发明的优选实施方式中，脂肪抽吸物的尺寸被逐渐减小。

这种逐渐减小通过强迫脂肪抽吸物通过定位在距离彼此给定距离处的两个或更多个尺寸减小网的网眼或网孔至少一次来获得。

除靠近入口102的网之外，洗涤和分离容器1具有第二尺寸减小切割网6，所述第二尺寸减小切割网6在大体垂直于从所述洗涤和分离容器1的洗涤腔室101离开的脂肪流的方向的位置中、靠近洗涤和分离容器1的出口103被包在洗涤腔室101中，使得进入洗涤和分离腔室101的脂肪抽吸物在从所述腔室101离开之前可流过具有逐渐变细的网眼的两个网，较粗的网眼被设置在位于入口102附近的网中。

因此，两个网被设置在距离彼此给定距离处：具体地，两个网被设置在洗涤和分离容器的端侧处，与洗涤和分离腔室101分开，所述洗涤和分离腔室101容纳搅拌装置104以及用以形成乳化液的足够空间。

考虑脂肪抽吸物的流动方向，第一网3，即位于入口102附近的一个网阻挡脂肪小叶的纤维组分并执行第一减小，例如提供具有相对均匀的最大尺寸、即具有从0.5至2mm的直径的细胞团块，而位于出口103附近的第二网6执行先前已经被洗涤的团块的进一步减小。例如，在洗涤和分离容器1上出来的团块和/或细胞可具有至多10μm的直径。

可使用第二网6替代过滤器4，用以将搅拌构件保持在洗涤和分离腔室中。

通过多个网的切割网眼的这种逐渐减小提供待注射的固体组分，所述待注射的固体组分包括非常小直径的团块，并且如果需要的话则包括单个细胞。本发明的装置允许脂肪抽吸物减小到具有任何尺寸的可移植材料。

随着细胞材料在洗涤和分离腔室103中执行的洗涤步骤之后穿过位于出口103附近的第二网6，所述网具有减小尺寸的网眼或网孔，由于脂肪细胞的破裂，其可导致油形成。

可通过将细胞材料转移到具有洗涤和分离腔室101的另一容器1内而移除该油，该另一容器1具有或不具有尺寸减小装置。

作为到第二洗涤和分离容器中的这种转移的替代或与这种转移组合，可通过一个或一个地对离开洗涤和分离腔室的处理材料进行沉淀和/或离心而将任何残余的油/液体移除，并且放置在特定容器中。

这些容器可为被保持在注射器保持器中的一个或多个注射器。

如图12a和12b所示，利用已知的技术和装置的位于洗涤和分离腔室101的入口和出口附近的网可具有蜂窝状切割网眼。

在一个实施方式中，靠近入口102的网的每个网眼的面积约为4mm²，而靠近出口103的网的每个网眼的面积约为1mm²。

细胞团块尺寸的减小和同种化(homologation)可由网或优选地位于容器1中的两个切割网的网眼或片材来提供。

每个网均具有相同的网眼或贯通网孔，所述网眼或贯通网孔具有2000μm至50μm范围、优选地1500μm至100μm范围的直径。

因为位于入口102附近的网3的网眼大于位于出口103附近的第二网6的网眼，所以脂肪抽吸物团块的第一尺寸同种化和/或减小通过穿过第一网3的网眼来获得，而第二增加的减小在通过使材料穿过第二网6的网眼而从容器1离开时获得。

在一个实施方式中，用于细胞团块的尺寸减小装置的空隙(网眼、孔隙)，具体地在位于出口103附近的网6中的空隙(网眼、网孔)，具有750μm至50μm范围的直径并且总之足以允许细胞材料通过，甚至允许单个细胞通过。

显然，脂肪抽吸物尺寸减小和/或洗涤也可不利用在其中具有尺寸减小装置，即一个、两个或更多个网的单个洗涤和分离容器1来进行，而是利用适合于连接在一起的两个或多个容器1的序列来进行。每个容器1的网3、6的网眼可具有与设置在另一容器1中的网的网眼不同的尺寸，和/或容器的网的网眼可具有彼此不同的尺寸。

因此，对于脂肪抽吸物团块的逐渐尺寸减小，可迫使材料从装置出来而进入到第二装置中，所述第二装置具有洗涤和分离腔室1和具有比在先前使用的装置中设置的网更小的网眼的尺寸减小装置。

如图6和7所示，用于细胞团块的至少一个尺寸减小网3被包在脂肪尺寸减小容器2的减小腔室201中的入口202和出口203之间，靠近用于接收进入所述减小腔室202的脂肪的尺寸减小容器2的所述入口202，所述容器2还具有出口203，用于使抽吸的脂肪通过入口202被注入，穿过尺寸减小网3进入到第二容器2的减小腔室201中并且允许所述抽吸的脂肪通过出口203离开所述减小腔室201，所述出口203被设计成连接到分离和收集容器1的入口102以提供尺寸减小容器(2)的尺寸减小腔室(201)与洗涤和分离容器1的洗涤腔室101之间的连通。

可选择地且优选地，多步骤的减小可通过将细胞材料收集到注射器，例如10cc注射器中，并利用注射器将所述材料引入到具有逐渐变细的网眼的第二完整装置来进行。

如图6和7所示，尺寸减小容器2可包括连接在一起的半壳体和两个部分，所述两个部分中的至少一个部分，优选地具有出口203的部分，具有用于收集减小尺寸的脂肪的内腔室201。

在一个实施方式中，所述收集容器2可被设计成包括与在此描述的洗涤腔室的封闭端子类似的两个元件。

两个端子可以固定或可移除方式连接到彼此，以形成具有内尺寸减小腔室201的尺寸减小容器2。

与洗涤和分离容器1相似，收集容器优选地为一次性类型的或者可被移除，以进行内部元件的消毒并且再使用。

显然，尺寸减小腔室201可允许具有各种尺寸，以收集各种量的通过至少尺寸减小网3的尺寸减小的细胞材料。

在出口203附近，可提供另外的细胞团块尺寸减小网。

具体地，可在尺寸减小容器2中设置两个脂肪抽吸物尺寸减小网，一个靠近入口202且另一个靠近出口203，所述两个网具有不同尺寸的网眼：具体地，靠近入口202的网具有比靠近出口203的网大的网眼。根据变型，本发明的装置包括至少一个尺寸减小容器2和用于将流体组分与固体组分分开的至少一个洗涤和分离容器，所述尺寸减小容器2具有尺寸减小腔室201，所述尺寸减小腔室201带有入口202和出口203以及在入口202和出口203之间的尺寸减小网3，所述出口203具有可移除的流体密封连接装置2021、2031，用于与位于洗涤和分离容器1的洗涤腔室101的入口102处的配合连接装置102连接。

如图7所示，尺寸减小容器2具有入口202和出口203以及用于细胞团块的尺寸减小网3，所述细胞团块形成脂肪的固体组分，该尺寸减小网3位于入口202和出口203之间的中间位置中或者朝入口203偏移，并且参考脂肪的注射方向，下游隔间作为用于减小尺寸的材料202的收集腔室，所述隔间具有预定的容积。

尺寸减小容器2和/或洗涤和分离容器1的入口102、202和出口103、203具有可移除的流体密封连接装置诸如鲁尔连接器等，用于连接到医疗装置诸如注射器、袋子等，所述医疗装置具有与位于开口102、202、103、203处的装置相容的可移除的流体密封连接装置。

显然，尺寸减小容器2的入口202和出口203可被设计成在尺寸减小期间由消毒盖帽封闭和/或配备有防回流装置，诸如单向阀。

为了允许抽吸的脂肪流入和流出尺寸减小容器的尺寸减小腔室201和/或洗涤和分离容器1的洗涤腔室101，并且允许从洗涤腔室101移除流体组分，即由机械搅拌获得的乳化液，提供了用于压缩或抽吸脂肪的流体组分和/或固体组分的装置诸如注射器等，所述装置可以与位于尺寸减小腔室201和/或洗涤和分离腔室101的入口102、202和出口103、203处的配合装置1021、1031、2021、2031可移除地且流体密封地连接。

明显地，脂肪材料穿过尺寸减小网3、4的网眼的流动可通过将所述脂肪材料与液体、具体地是盐水混合来促进。

洗涤和分离容器1中的尺寸减小网3、6和/或尺寸减小容器2中的网3可分别被设计成具有不同尺寸的空隙或网眼，使得容器中的网具有彼此不同的尺寸的网眼和/或具有与另一容器中的网的网眼不同尺寸的网眼，使得旨在获得等于或小于给定值的细胞团块的细胞团块尺寸减小在多个步骤中通过所述容器1和/或2中的网来进行。

因此，本发明的装置的这一部分的目的在于，通过迫使脂肪组织小叶穿过特定的切割网或平行的切割片材，优选地通过两个网而减小脂肪组织小叶的尺寸，并且形成细胞悬液，所述细胞悬液带有具有减小的且平均均匀的尺寸的细胞和/或细胞团块、具体地是脂肪细胞，或总之具有等于或小于预定值的团块，所述细胞悬液适于在使用特别细的针或插管的稍后移植步骤中使用，同时避免其堵塞。

尺寸减小网的目的还在于，增加外周的干细胞的量，所述外周干细胞在被注射之后可以接触待处理的组织，该干细胞附着到通过减小脂肪抽吸物块而获得的细胞团块的外表面。

利用上述装置，细胞团块的尺寸在穿过尺寸减小装置时基本上是相等的且范围从2000μm至50μm，优选地从1500μm至100μm。

如附图所示，洗涤和分离容器1包括中心管状本体111和被固定到或能够被固定到中心本体111的端部的两个封闭端子112、113或盖帽。

所述中心部分111被示出为具有柱形形状，但是可具有任何形状和尺寸。

洗涤容器101所具有的尺寸允许由单手操纵该洗涤容器101。

在一个变型中，如图2、3、4和5所示，在中心管状部分111的一端处提供了加宽的杯形部分115，该部分是所述管状部分的加宽的轴向端，其内直径大于中心部分111的内直径。

一个封闭端子112具有适于与中心部分的端部接合的开口，而第二封闭端子113具有轴向柱形延伸部116，用于通过抵靠外环形径向邻接肩部117而接合在中心部分111的杯形底座115中。

在封闭端子113的轴向延伸部116和在中心部分111的一端处的加宽的杯形部分115的接触表面处，以及在中心部分的端侧的外表面和与其接触的第二封闭端子112的开口的内表面之间，可以提供用于流体密封连接的装置，例如O形圈等，其与上述部件，即封闭端子112、113以及与中心部分111组合而形成与外部环境隔离的完全消毒的洗涤腔室101。还可在这些接触表面上进设置凹入和凹槽，以确保这些端子112、113在管状本体111上的固定。

所述封闭端子112、113可以被设计成被可移除地固定到中心管状本体111，但是所述洗涤和分离容器1还可以设计成是可移除的，以允许一个或两个端子从管状部分111的分离。由此，这将提供一次性洗涤和分离容器1，其适合于也在其内洗涤腔室101中进行消毒，并且因此是可再使用的。

如图13a、13b、13c所示，封闭端子112、113和中心管状部分可具有非常简单的结构。两个封闭端子可为被固定地或可移除地安装到管状本体111的端部的盖帽的形式。

这些端子可以在面朝洗涤腔室的一侧上具有肩部，以防止网的变形，所述网可以是薄且易碎的。

这些封闭端子112、113具有形成在管状部分的纵向中心轴线处的孔隙，诸如通孔，所述孔隙具有封闭阀和/或诸如鲁尔连接器或卡扣配合或螺钉连接器等的流体密封连接装置1021、1031，或多向阀，从而提供洗涤腔室101与一个或多个医疗装置诸如注射器、袋子等的可能同时的连接，或者通过具有配合连接装置2021、2031的相应的入口202和/或出口203而与尺寸减小容器的尺寸减小腔室201的连接。

如图所示，在洗涤腔室内侧，在封闭端子113和中心管状部分的端侧之间的连接处，在出口103处，大致垂直于中心管状部分111的纵向轴线设置过滤器4，该过滤器将搅拌构件104维持在洗涤腔室101内，以防止当洗涤和分离容器2相对于地面垂直地定向以移除液体乳化液时搅拌构件104堵塞任何开口，具体地堵塞出口133。如上面所提到的，洗涤和分离容器1还可被设计成在入口102处设有尺寸减小装置3，用于将从脂肪抽吸产生的小叶脂肪的尺寸减小成具有较小且相同或相似尺寸的细胞和细胞团块，具体地是脂肪细胞和干细胞。

如上面提到的，代替过滤器4或除过滤器4之外，可设置用于抽吸的材料的尺寸减小装置，诸如脂肪抽吸物尺寸减小网，所述脂肪抽吸物在从洗涤和分离腔室101出来之前被进一步分离成较小的团块。

因此，在封闭端子112和中心管状部分的端侧之间的连接部处，在洗涤腔室中靠近入口102，大致垂直于中心管状部分111的纵向轴线地设置了尺寸减小网，该网将大团块的尺寸减小到预定值，该大团块通过入口102被注射或推压到洗涤和分离腔室中。

可在封闭端子113和中心管状部分的端侧之间的连接部处，在洗涤腔室101中靠近出口103，大致垂直于中心管状部分111的纵向轴线地设置另外的尺寸减小网。

在该优选实施方式中，穿过靠近入口102的它们的第一尺寸减小网，将脂肪抽吸物的结缔组织片破碎，并且/或提供脂肪抽吸物团块尺寸的第一粗略的减小，而穿过位于出口103附近的第二尺寸减小网提供其尺寸等于或小于给定值的细胞团块，所述网具有不同尺寸的网眼，具体地，参考流入洗涤和分离容器1的脂肪的流动方向，第一个网具有比第二个网大的网眼。

由上述装置制备的脂肪组织物质，即通过尺寸减小网进行尺寸减小的，和/或被洗涤并且固体组分被从液体组分分离的脂肪组织主要包括脂肪细胞，但是还可以包括其它类型的完美健康的且有活力的细胞，所述完美健康的且有活力的细胞可以在脂肪抽吸物中发现并且可用于在面部和/或身体重塑过程中的移植。

本发明涉及一种处理或防止在患者中造成伤害或疾病的方法，具体地涉及一种处理身体和面部中的体积缺陷、改进皮肤营养性和/或生物刺激的方法，所述方法包括：

-从患者的供体区域提取生物材料的至少一个步骤，具体地是通过脂肪抽吸而提取的脂肪组织，

-处理所述材料的至少一个步骤，

-将所处理的材料注射到患者中的至少一个步骤。

在注射步骤之前，显然可以提供生物材料的收集和储存的步骤。

处理步骤包括：用于减小所提取材料的尺寸的至少一个尺寸减小步骤，和/或用于洗涤和将液相从固体细胞相分离的至少一个洗涤和分离步骤，所述处理步骤利用本发明的装置和方法实施。

在本方法中，供体患者也是在其中执行注射步骤的受体患者。

然而，供体和受者也可以是不同的人员。

显然，用于处理组织的装置和方法以及用于处理患者的方法可涉及使用除脂肪组织之外的组织。

现在描述用于移植通过上述装置制备的生物材料的示例性过程。

使用上述装置制备的材料可以被储存在一个或多个消毒容器，例如注射器中，并且被允许沉淀且可能地进行离心，以将固体组分从任何残余的油或溶液分离。

可利用任何合适的过程将使用本发明的装置和方法制备的细胞材料注射到任何类型的组织中。

一旦接收区域已经被设计并且被正确地消毒，就将含有制备的细胞悬液的注射器的针或微插管引入到皮下或肌肉组织中，从而产生用于注射非常少量的细胞团块的三维通道网。

该步骤优选地利用具有鲁尔连接器的一次性消毒钝端插管来实施，所述鲁尔连接器具有非常小的直径。

形成在处理组织中的小尺寸的通道促进细胞和细胞团块在皮下组织的胞间隙或在肌肉组织中的整合，由此减小手术创伤并且促进经受体积增加和重塑处理的组织快速恢复至正常的稠度。

因此，组织中的各种小直径通道的形成优化组织体积重构和/或生物刺激效果。通过将这种小叶分解成细胞团块来减小脂肪小叶的尺寸在注射物质和被处理组织之间提供更大的接触表面，从而促进相关区域的生物刺激和移植的脂肪组织的整合。

这些特别细的、可能地小于1mm的插管的使用是通过抽吸的小叶脂肪的尺寸的减小而被允许的，所述抽吸的小叶脂肪的尺寸的减小在具有的尺寸减小装置的至少一个尺寸减小容器2和/或至少一个洗涤和分离容器1中发生，所述尺寸减小装置由至少一组平行的片材和/或至少一个线网或薄片材网，优选地至少两个网构成，所述两个网中的至少一个网具有非常小尺寸的网眼，这允许细胞团块或甚至具有微米级尺寸的单个细胞通过。

如果脂肪尺寸减小没有发生，则在移植过程中使用的插管将被堵塞。

作为具有钝端的消毒插管的替代，可以使用与图12所示类似的具有尖端或钝端的螺旋状或螺旋形插管5来移植脂肪细胞。

螺旋插管5对于其中需要移植针的几个穿透步骤的注射到器官中来说是特别有用的：螺旋形针提供沿单个路径沉积的最大化的细胞材料密度。

这种类型的插管允许通过单个注射部位甚至在高稠度的组织或具体地精细组织中移植脂肪组织细胞团块，所述单个注射部位允许一定体积的组织的处理，所述精细组织诸如疤痕组织、骨骼、软骨、心肌或其它器官。利用旋转运动将插管引入以允许螺旋进入组织。然后，以相同的方式将插管抽出、同时注射脂肪组织的细胞团块或细胞群。与通过直线针的单个注射相比，这将显著地增加每单位体积移植的脂肪组织的量，并且因此增加处理体积的量，而没有减小注射脂肪组织和接收组织之间的接触表面，从而增加注射细胞的脉管形成可能性，因为脂肪组织由于插管的小直径且具有螺旋状路径而作为条带或非常薄的细胞珠释放。

以螺旋状路径被释放到待处理组织中的这些插管的使用在例如由于待处理组织的过度的稠度而没有办法执行科尔曼(Coleman)填充、即在待处理的组织中形成通道网时，或当组织创伤是不期望、诸如在心肌处理中时，是特别适合的，所述插管允许制备除脂肪细胞之外还包含其它类型的细胞(包括干细胞)的脂肪组织。本发明还涉及用于移植的组织，例如用于自体移植或异种移植的组织，所述组织包括细胞，可能地包括细胞碎片和/或细胞团块，并且是使用上述装置和/或方法获得的。

所述组织包括均匀尺寸的细胞材料，所述细胞材料具有范围从10μm至2mm的平均直径。

优选地，0.05至1.5mm，特别是约0.75-0.5mm或更小(达10μm)。

如果需要，本装置还可提供包括单个细胞的组织。

在优选实施例中，所述组织为主要包括脂肪细胞和干细胞的脂肪组织。

所述干细胞适于用来产生任何细胞类型，诸如软骨细胞、骨细胞、脂肪细胞、神经细胞。

在制备之后，该脂肪组织具有小的液体部分，没有任何杂质，其与细胞团块混合并且足以促进将细胞引入到待处理的组织中。

所述液体部分可以是按重量计为移植而制备的脂肪组织的约50％。

本发明还明显地涉及具有上述一种或多种特性，而不是脂肪组织的组织。

本发明还涉及优选地消毒的和一次性的套件，适合用于门诊患者和外科手术环境。

本发明的装置或套件具有带有阀或没有阀的双向连接器或三向连接器、连接管和注射器以及各种容器(例如，用于洗涤盐水的袋子和用于收集洗涤废物的袋子)。

套件可用于处理任何类型的细胞材料，优选地为用于自体移植或异种移植1的脂肪，并且包括用于洗涤脂肪的固体组分并将所述固体组分与流体组分分离的至少一个容器1，所述洗涤和分离容器1如上所述形成。

包括在洗涤腔室101中具有尺寸减小装置的至少一个洗涤和分离容器的该套件在美容处理例如门诊环境的场所中使用时是特别有利的，因为其提供简单完美的消毒装置，以被用于快速地处理从患者提取的材料，而没有由于与外部环境接触而对细胞材料污染的危险。

该套件允许从第一组织抽吸步骤到最后的注射步骤在完全封闭的系统中处理生物材料，这允许材料被处理而不会使材料接触外部环境和/或不必使用可能污染该材料的装置。

这是通过使用一个或多个管、注射器、袋子、多向阀、鲁尔连接器和明显地一个或多个洗涤和分离容器1(以及可能地一个或多个尺寸减小容器2)而被允许的，它们被消毒并以或能够以流体密封的方式连接在一起。

因此，提供生物材料的抽取、材料的处理、生物材料的储存、注射的系统是在从患者抽取到注射到受体患者中的所有其步骤中与外部环境完全隔离的系统。

一个或多个系统部件可通过连接到特定设备而机械化，使得包括生物材料的抽吸和/或处理和/或注射的过程的一个或多个步骤可在不需要由操作者执行的任何动作的情况下实施。

该套件特别适于轻度美容外科手术过程。在一个优选实施例中，该套件包括一个或多个容器1，所述一个或多个容器1具有至少一个尺寸减小网，优选具有两个尺寸减小网，如上所述。该套件的每个容器1可被设计成具有带有尺寸与其它容器1的网的网眼不同的网眼的网，使得通过迫使材料穿过多个容器的网的网眼，细胞团块的尺寸被逐渐地减小到允许移植的期望值。

这种逐渐减小避免了网的网眼堵塞的危险并且防止处理过程减慢。

作为替代，可提供这样的套件，其包括：

-至少一个容器1，用于洗涤脂肪的固体组分并将所述固体组分与流体组分分离，该至少一个容器1可能具有至少一个尺寸减小网或片材3，

-至少一个尺寸减小容器2，所述至少一个尺寸减小容器2如上所述形成并且适于连接到所述容器1。

在一个实施例中，套件具有两个或更多个尺寸减小容器2，所述尺寸减小容器2适合于通过其出口203或入口202交替地连接到洗涤和分离容器1的入口102或出口103，预定量的减小尺寸的脂肪在消毒状态下被储存并保存在每个尺寸减小容器2的减小腔室201中。

还可提供具有一组尺寸减小容器2的套件，其包括至少两个尺寸减小容器2，所述至少两个尺寸减小容器2就尺寸减小网3的网眼和容纳在减小腔室201中的减小尺寸的脂肪的体积而言具有不同尺寸。

例如，该套件可被设计成包含具有尺寸减小装置3的两个或更多个尺寸减小容器2，细胞材料可被迫使穿过所述尺寸减小装置3，其具有带有不同尺寸的网眼的网3。

提供两个或更多个尺寸减小容器2允许处理大量的脂肪而没有堵塞尺寸减小网的网眼并且因此减慢材料处理过程的危险。

洗涤和分离容器1和/或尺寸减小容器2可为一次性类型或以某种方式被形成以允许完全消毒和其稍后的再使用。

可替代地或组合地，本发明的套件还可包括：

-具有不同容积的一个或多个一次性消毒注射器，

-一个或多个消毒的尖针或消毒的柳叶刀形刀片，其具有不同的特定尺寸以允许用于麻醉、切除和移植的插管的经皮引入，

-一个或多个一次性消毒插管，其具有尖端或钝端，该一个或多个一次性消毒插管中的至少一个一次性消毒插管具有非常小的、1mm级别的直径，

-一个或多个单向或多向阀，具有或不具有止回阀，例如将连接到容器1和/或2的入口102、202和/或出口103、203的三向阀，

-一个或多个消毒管，其具有鲁尔连接器，从而允许生物材料从套件的一个部件通过到达另一部件(例如，从注射器到洗涤和分离腔室1或者从盐水袋子到洗涤和分离腔室)，

-诸如注射器的装置或容器，以允许利用上述装置制备的脂肪材料的沉淀和/或可能地离心，所述脂肪材料可被分布到一个或多个消毒容器中，以提供固体组分的额外分离，所述固体组分在沉淀之后漂浮在残余的液体/油组分上，以便在移植之前被移除，

-用于保存所制备并准备用于移植的生物材料的装置，例如用于所述生物材料在充当清洁室的封闭环境、即例如就特定污染物、压力和温度而言具有受控条件的容器中的低温贮藏的装置。

如图10中示意性地示出的那样，套件可包括一个或多个装置，诸如一个或多个洗涤和分离以及尺寸减小容器1、用于从患者抽吸材料的注射器8、用于收集/注射处理的生物材料的注射器12、洗涤液体袋子10(例如，容纳盐水的袋子)、用于收集废弃材料的袋子11，它们通过消毒管、多向阀、鲁尔连接器连接或能够连接到一起。

代替或除所述小直径插管之外，套件可包括具有尖端或钝端的至少一个螺旋状或螺旋形插管5，允许如上所述通过利用单个注射点增加处理组织的体积，而将脂肪组织的细胞物质移植到高稠度或特别精细的组织中。

套件还可包括用于在抽吸期间将注射器锁紧以暂时防止柱塞例如在脂肪抽吸期间弹回，并且允许较少创伤的脂肪组织抽吸的器械。

套件还可包括弹簧偏压机构，用于向注射器活塞赋予往复运动，所述机构被连接到双向阀并且提供脂肪组织的快速抽取，所述脂肪组织通过在其端部具有鲁尔连接器的管而在不接触外部环境的情况下被输送到洗涤和分离腔室101。

在腔室的入口102处提供三向阀还允许将洗涤溶液注射到所述腔室中而不断开抽取注射器。

套件中的注射器可由塑料制成，优选地具有鲁尔连接器等并且具有各种容积。

以下可以使用，举例来说：

-用于局部麻醉注射的10至60cc注射器，

-用于产生麻醉疹块的具有针的5cc注射器，

-10cc或更大容积的注射器，其连接到消毒的1.5至3mm直径插管，用于从供体区域吸出脂肪组织，

-用于脂肪移植的1至5cc注射器。

因此，可利用本发明的装置实施的处理方法允许制备例如通过脂肪抽吸获得的脂肪提取物，所述脂肪提取物为在含有细胞团块、具体地是脂肪细胞团块的细胞悬液中的流体材料和细胞碎片以及异种尺寸的一个或多个细胞大团块的混合物的形式，其具有较小和相等或类似尺寸，在任何情形中，小于给定值，以允许移植到患者面部或身体区域内，且需要具有微小创伤的填充程序，并且伴随在过程中涉及的组织的生物刺激。

该方法可以在封闭系统中实施，以避免在其施用到患者之前对细胞材料的污染。

显然，待移植的脂肪组织可以不仅通过脂肪抽吸，而且还可以利用其它已知技术来获得。

如上所述，根据用于抽吸的材料尺寸减小的尺寸减小装置的网眼或网孔的尺寸，可以获得具有500μm或更小，即约100-10μm的平均尺寸的团块。

因此，脂肪材料的制备涉及将所述脂肪材料分离成小于抽吸的大团块的细胞碎片、细胞或细胞团块。

如上所述，因为其产生促进干细胞与移植在其中发生的组织接触的有利微观环境，所以这种分离提高干细胞的活性。

在本发明中，对于要被分离成等于或小于给定值的尺寸的细胞团块，脂肪抽吸物尺寸的逐渐减小是优选的，这意味着脂肪被迫使穿过相交的或平行的线或片材的至少一个切割网，优选地穿过位于距离彼此给定距离处的两个网至少一次，所述网具有不同尺寸的网眼。

在尺寸减小之前和/或之后，显然可以利用消毒洗涤溶液对脂肪进行一次或多次洗涤。

如此获得的细胞团块经受额外的处理，该处理涉及利用消毒溶液洗涤和将细胞组分与液相分离，即与血液、从脂肪细胞破裂出来的油、使用的任何麻醉剂溶液和所述团块已经混合的溶液例如盐水分离。

通过带有洗涤腔室的容器1而允许洗涤和分离，所述洗涤腔室容纳诸如球等的搅拌构件104，所述搅拌构件104通过搅拌容器1能够形成容纳在所述洗涤腔室中的液体组分的乳化液。

在一个或多个洗涤和分离容器中的细胞团块的洗涤可继续，直到从出口103出来的液相废弃物是完全清澈的为止。

有利地，因为脂肪抽吸物的逐渐尺寸减小是通过迫使该脂肪抽吸物穿过在洗涤和分离容器中位于距离彼此给定距离处，即在中心管状部分的端部处的至少两个网来获得的，所以在分离脂肪组织小叶或大团块以及将所述团块的尺寸减小/同种化到预定值以下的第一步骤之后对所述细胞团块进行第一次洗涤，这是因为通过对所述脂肪组织施加压力而获得的穿过脂肪组织尺寸减小装置3可以导致脂肪细胞的细胞壁破裂，且形成油，所述油必须从含有细胞团块的细胞悬液移除以确保所述组织的成功移植。

一个或多个稍后的洗涤步骤将在第二或稍后的尺寸减小步骤之后执行，用于获得用于移植的足够尺寸的固体组分。

细胞组分的洗涤以及与在上述容器1中的提取的脂肪的液相的分离还可以在细胞团块尺寸减小步骤之前发生。

代替或除了分开步骤之外，本发明的方法包括洗涤细胞团块的至少一个步骤，其与将乳化液形式的流体组分从固体组分分离的步骤同时实施。

图8a-8d和10示意性地示出了该方法。

在第一步骤中，空气从洗涤和分离容器1排出，并且整个内容积填充液体。

例如，在使用装置之前要排出的空气可通过以下方式移除：通过利用注射器7将盐水吸出、通过借助于重力使其进入袋子10以及通过使空气从注射器12离开(在移除注射器帽之后)和/或从容器11(其可配备有可打开的排气阀)离开。

洗涤和分离容器1以出口103打开并且向上面向的方式竖直地定向：液体被引入到容器1中并且空气通过入口102从该容器1排出。

液体可以是容纳在袋子10中的盐水，所述袋子10经由管而连接到具有三向阀的腔室的开口。

然后，将脂肪抽吸物注射到洗涤和分离腔室101中。

可以将脂肪抽吸物从容器1的抽吸注射器直接注射或通过如图10所示的完全封闭系统来注射。

可以使用任何容积的注射器。10cc注射器是优选的。

通过用于抽取的抽吸注射器，例如配备有阀的双向注射器、直接地或通过连接到注射器并且连接到容器的开口的管来将脂肪材料注射到腔室101中，并且通过由注射器的活塞施加的压力作用将脂肪材料推压到所述腔室中。

在该步骤中，优选地以出口103向下面向的方式将容器保持在相对于地面的竖直位置。

靠近入口102的尺寸减小装置的存在提供第一脂肪抽吸物尺寸减小/同种化。

可通过处于压力作用下的洗涤流体对脂肪材料施加液压力，该洗涤流体被注射到洗涤和分离腔室101中并迫使脂肪材料进入和离开该洗涤腔室101。

通过入口102被注射到分离和洗涤容器1中的脂肪团块可通过将诸如消毒盐水的液体材料压力注射到所述内洗涤腔室101中来进行重复洗涤，以获得没有任何油、血液以及任何抽取期间使用的溶液的高纯度细胞团块。

所述流体材料从所述团块分离的洗涤和分离步骤通过以下方式来发生：

-将诸如盐水的消毒洗涤溶液注射到洗涤和分离容器1的含有脂肪材料的洗涤腔室101中至少一次，该洗涤腔室包含至少一个搅拌元件104。

在该步骤中，以出口103面朝地面并平行于地面的方式将容器保持在竖直位置，

-手动或机械地搅拌所述洗涤和分离容器1，手动搅拌是足够的，以促进流体组分、具体地具有消毒流体物质的油组分和血液的乳化；乳化通过将洗涤和分离容器定向在水平位置，即近似平行于地面(图8b)来形成，

-以出口103面朝下的方式将洗涤和分离容器1布置在相对于地板的竖直位置中，以获得在构成容纳在洗涤腔室101中的脂肪的液体乳化液上的固体组分的分层，具体地获得包括在流体组分的乳化液上漂浮的细胞碎片、细胞和一个或多个细胞团块的固体组分，所述流体组分在洗涤腔室101的下部中与洗涤和分离容器1的出口103接触，

-将流体组分(即，油/液体)的乳化液通过洗涤和分离容器1的出口103从洗涤腔室101排出(图8c)。通过利用给定的压力通过开口102将洗涤流体注入来迫使乳化液出来。

因为容器具有柱形形状，所以其水平位置意味着其长轴平行于地面穿过端侧，而其竖直位置意味着柱体以其长轴垂直于地面定向。

乳化液被收集在另一容器11中，该容器11通过合适的装置流体密封地连接到所述开口103，以防止外部环境和容纳在腔室101中的细胞材料两者的污染。

因此，在洗涤步骤中，由于球104的存在，容纳有脂肪的洗涤和分离容器1被以一定的力搅拌，所述力不引起细胞壁破裂但是足以形成乳化液、即微小油滴在洗涤流体中的分散，所述脂肪与消毒溶液、例如利用注射器通过入口102注入的盐水或者从袋子抽取的盐水混合。

在容器1被水平定向的情况下容器被搅拌以形成乳化液。

显然，在该步骤中，容器1的开口，即至少一个入口102和/或一个出口103被封闭以防止材料的任何泄漏。

在容器搅拌步骤结束时，将容器移动到竖直位置，并且形成脂肪抽吸物的材料的不同密度在洗涤腔室101中产生细胞和细胞碎片的一个固体层，所述层漂浮在液体乳化液上。

通过将消毒洗涤溶液注射到腔室中，且随后(通过搅拌容器，同时封闭入口和出口)形成乳化液并且(通过注射干净的洗涤溶液)将乳化液排出而重复洗涤步骤，直到流出的液体-油-血液乳化液显现出没有诸如血液和油的任何杂质为止。

因此，可重复流体组分乳化液的排出。

乳化液的这种排出是通过由重力引起的生理液体的流动来获得的，该流动允许液体组分(油/液体)通过密度梯度以至少给定的时间间隔移除，即直到存在微小油滴和液体之间的乳化液为止，其每次、即对于每个洗涤循环是足够的，以移除大量废弃液体(特别是油)。

显然只要所述洗涤流体足够，则在流出的液体(从入口102到出口103的流动)之后，水/油乳化液通过密度梯度而从溶液被消除。

如图9所示，油/液体乳化液被排出。

只要其为乳化液的一部分，油就可以被排出。

所排出的是微小油滴和洗涤溶液的乳化液。

细胞物质漂浮在所述乳化液上。

因此，需要乳化以允许消除在脂肪抽吸物中的杂质诸如油。

在洗涤步骤结束时，固体组分漂浮在干净的洗涤溶液上。

因此，在洗涤和分离步骤结束时，容器的腔室101中的材料可用于移植。

脂肪组织洗涤是重要的步骤，因为其允许油的移除，所述油是在使用插管或针从供体区域机械抽取脂肪组织期间，和在在压力下使脂肪通过尺寸减小网3期间由脂肪细胞的细胞壁的破裂而导致的。

固体组分不保留在装置1中而是被回收，优选地在出口103处通过从入口102施加的液压推力而执行进一步的尺寸减小之后进行回收。

通过在出口103向上面向，使得固体组分漂浮在洗涤溶液上(图8d)的情况下将所述容器竖直定向而将固体组分从洗涤和分离容器排出，所述出口103具有优选地靠近该出口103设置的尺寸减小网6。

因此，待被排出的固体组分位于出口103附近。

通过将洗涤溶液穿过入口102注入而将固体组分穿过第二网6推出。

发现的是，所排出的首先是具有很少细胞材料的含水溶液，然后是富含细胞材料的溶液，最后是具有很少细胞材料的溶液。

一个或多个容器可一个接一个地连接到出口103，例如注射器12，用于收集所制备的与液体混合的生物材料。

该材料已经通过网6而经受了进一步的减小/同种化。

容器12被允许沉淀以获得固体组分与残余的液体组分的分离。

代替或除上述之外，可通过离心来进行分离。

如此制备的生物材料被保存或优选地低温贮存在用作清洁室的封闭环境中。

显然，储存在容器12中的材料可以被设计成在最终保存和/或再注射之前在洗涤和分离容器1和/或尺寸减小容器2中进行再次处理。

整个材料处理系统从患者的抽取到再注射都是封闭的。该特性对于生物组织的库存，即其在生物库中的保存是特别重要的。

因此，被输送到容器12中的生物材料总是在消毒的封闭系统中，决不与空气接触。

因而，所述材料可被直接地低温贮存而不需要使用清洁腔室的进一步的改变。

如上所述，可提供多个相互可连接的洗涤和分离容器，以逐渐地减小和/或洗涤脂肪抽吸物。

本发明的装置允许细胞提取物的简单、迅速且低价的处理，所述细胞提取物是与液相混合的细胞大团块形式的，这提供预定尺寸的，总之小于预定值的大致相等的全和活细胞的细胞团块，所述团块与含有废弃液体的乳化液形式的液体组分分离。这些团块可以用于移植。

明显地，从脂肪小叶的处理得到的材料可不仅包含细胞团块而且还包含待被用作生物填充物的单个细胞和细胞碎片。

此外，抽吸的材料不仅包含脂肪细胞而且还包含其它类型的细胞，诸如干细胞。

由该装置实施的处理方法不涉及使用酶或其它组分，所述酶或其它组分可能对抽吸的材料具有化学作用或对构成细胞的团块具有生物作用，而是使用改变细胞团块尺寸的可能性来获得较大暴露的细胞表面，所述细胞表面可以在移植期间接触处理的组织。具体地，提供了用于注射的固体材料，其还形成对于干细胞在所述处理材料被再注射的区域中的作用来说最理想的在活的有机体内的微观环境，所述干细胞被包含在抽吸材料中。

因此，也由于干细胞的存在，本发明的方法简单地且低价地提供了来自从患者提取的材料的生物活性可注射生物材料，而且既不需要使用诸如乳化剂或酶的化学物质也不需要离体培养步骤。此外，这些非常小的细胞团块可使用非常细的插管来移植，这减少手术创伤并最佳化组织完整性。

而且，使用本发明的装置提供使生物材料与外部环境隔离的封闭系统，并允许以非常短的时间制备该生物材料以进行使用，由此减少可能的污染危险。

形成本发明的主题的以上公开的装置、套件和方法可以明显地不仅用于制备待移植的脂肪组织，而且还用于制备需要具有高纯度水平以供使用的任何类型的细胞团块。

Claims (12)

1.一种用于从通过脂肪抽吸而提取的小叶脂肪制备用于移植的脂肪组织的方法，所述脂肪由流体组分和固体组分构成，所述流体组分由油组分和血液组分构成，所述固体组分包括异种尺寸的细胞碎片、细胞和一个或多个细胞大团块，其特征在于，所述方法包括如下尺寸减小步骤：将所述脂肪分离成小于所述大团块的细胞团块，使得所述细胞团块与预定尺寸一样大或小于预定尺寸，并且使得所述细胞团块平均起来具有相同的尺寸，所述尺寸减小步骤通过使所述提取的小叶脂肪通过尺寸减小装置(3)至少一次来执行，所述尺寸减小装置(3)由形成定位于洗涤和分离容器(1)和/或尺寸减小容器(2)中的至少一个尺寸减小网的至少一组平行的或相交的片材或线构成，代替所述尺寸减小步骤或除所述尺寸减小步骤之外，所述方法包括洗涤所述细胞大团块或细胞团块的至少一个步骤，洗涤细胞大团块或细胞团块的所述至少一个步骤与将所述流体组分与所述固体组分分离的步骤同时执行，洗涤以及将所述流体组分与所述固体组分分离的所述步骤包括：

-将消毒洗涤溶液注射到洗涤和分离容器(1)的脂肪洗涤腔室(101)中至少一次，所述洗涤腔室(101)容纳至少一个搅拌元件(104)，所述至少一个搅拌元件具有这样的形状和尺寸，即：相对于所述洗涤腔室(101)，在所述容器(1)经受搅拌时允许流体组分乳化，且手动搅拌作用是足够的，

-搅拌所述洗涤和分离容器(1)，以通过搅拌元件(104)的设置而促进流体组分的乳化，

-将所述洗涤和分离容器(1)布置在这样的位置中，即：获得所述固体组分在液体乳化液上的分层，所述固体组分的分层构成容纳在所述洗涤腔室(101)中的脂肪，

通过入口(102)将清洁的洗涤溶液注入，并且通过所述洗涤和分离容器(1)的出口(103)以及流体组分的乳化液的密度梯度的除去作用而将所述流体组分的乳化液从所述洗涤腔室(101)排出。

2.根据权利要求1所述的方法，其特征在于，将脂肪尺寸分离或减小或均匀化的所述尺寸减小步骤通过使所述脂肪通过具有不同直径的网眼或网孔的两个或更多个尺寸减小网(3、6)的方式执行。

3.根据权利要求2所述的方法，其特征在于，脂肪尺寸的逐渐减小通过使脂肪通过两个或更多个尺寸减小网来获得，所述两个或更多个尺寸减小网被包在适于连接在一起的一个或多个容器(1、2)的腔室(101、201)中。

4.根据权利要求1所述的方法，其特征在于：

-所述洗涤溶液注射步骤和所述乳化液排出步骤在所述容器(1)被布置在竖直位置中，并且所述出口(103)向下面向，即朝向地面的情况下发生，

-用于产生所述乳化液的所述搅拌步骤在所述容器被相对于地面水平地布置的情况下发生。

5.根据权利要求4所述的方法，其特征在于：将洗涤以及使所述流体组分与所述团块分离的所述步骤重复多次，直到出来的流体组分没有任何杂质为止。

6.根据前述权利要求1至5中的任一项所述的方法，其特征在于，所述尺寸减小步骤和/或所述洗涤步骤在其中所述洗涤和分离容器(1)完全地填充消毒洗涤溶液的步骤之后进行，所述容器(1)被保持在竖直位置中，并且所述出口(103)打开并且向上面向，以完全释放空气。

7.根据前述权利要求1至5中的任一项所述的方法，其特征在于，提供了固体组分排出步骤，该步骤包括：

-在所述出口(103)向上面向的情况下将所述洗涤和分离容器(1)竖直地定位，以允许所述固体组分漂浮在所述洗涤溶液上，

-通过所述洗涤和分离容器(1)的所述入口(102)在压力作用下将洗涤溶液注入，以允许所述固体组分的排出。

8.根据权利要求1所述的方法，其特征在于，所述至少一个搅拌元件(104)是球。

9.根据权利要求1所述的方法，其特征在于，在油组分和消毒洗涤溶液都存在的情况下，通过所述搅拌元件(104)的设置，促进油组分与消毒洗涤溶液的乳化。

10.根据权利要求1所述的方法，其特征在于，获得包含漂浮在与所述洗涤和分离容器(1)的所述出口(103)接触的所述洗涤腔室(101)的下部中的流体组分的乳化液上的细胞碎片、细胞和一个或多个细胞团块的固体组分。

11.根据权利要求2所述的方法，其特征在于，将脂肪尺寸分离或减小或均匀化的所述尺寸减小步骤通过在脂肪流动方向上具有减小的直径的网眼或网孔的网而以逐渐的方式执行。

12.根据权利要求5所述的方法，其特征在于，所述任何杂质是油和/或血液。