CN103006643B - 一种含18种氨基酸的复方注射液及其制备方法 - Google Patents

Abstract

本发明涉及一种含18种氨基酸的复方注射液及其制备方法。具体地说，本发明涉及一种复方高支链氨基酸注射液及其制备方法。本发明的制备方法采用氨基酸多步投料法，在不同温度下溶解不同的氨基酸，提高了氨基酸原料的稳定性，也保证了注射液成品质量的稳定性。

Description

一种含18种氨基酸的复方注射液及其制备方法

技术领域

本发明属于医药技术领域，具体涉及一种含18种氨基酸的复方注射液及其制备方法。

背景技术

氨基酸是生物体内构成蛋白质分子的基本单位，与生物的生命活动有着密切的关系，是生物体内不可缺少的营养成分之一，蛋白质在机体内的消化和吸收是通过氨基酸来完成，人体对蛋白质的需要实际上是对氨基酸的需要，氨基酸在蛋白质的合成与分解过程中起维持氮平衡的作用。低蛋白血症是各种原因所致负氮平衡的结果，其主要病因有：蛋白摄入不足或吸收不良，各种原因引起的食欲不振及厌食；蛋白质合成障碍，各种原因的肝损害使肝脏蛋白合成能力减低，血浆蛋白质合成减少；长期大量蛋白质丢失；蛋白质分解加速等。必需氨基酸、半必需氨基酸和非必需氨基酸按适当配比，再加上碳水化合物、电解质等组成氨基酸制剂，可以促进体内蛋白质代谢正常，纠正其负氮平衡。

在创伤、饥饿等应激状态下，机体主要通过骨骼肌蛋白的分解来获取一些必需氨基酸以满足肝脏合成重要生命蛋白质的需要，同时通过生糖和生酮作用为机体供应能量。支链氨基酸（BCAA）约占肌肉蛋白质中必需氨基酸的35%左右，因此其在蛋白质合成和能量代谢中占重要的地位。在消化道术后胃肠道不能充分利用的情况下，通过一定时间的静脉营养支持是必要的。一直以来，完全胃肠外营养支持（TPN）中的氨基酸是根据经口营养或食物中的氨基酸构成比来给予的，即必需氨基酸/非必需氨基酸(EAA/NEAA)之比为1:1左右，BCAA含量20%左右。近年来，对支链氨基酸的研究表明，亮氨酸、异亮氨酸、缬氨酸主要在肌肉内代谢，可作为能量底物、糖元异生底物和肌蛋白调节剂。改变支链氨基酸输入百分率，可影响氮平衡及肌肉内氨基酸流向，支链氨基酸可在外周被氧化提供能量，而不增加肝脏负担。动物实验也证实，创伤后支链氨基酸、精氨酸及天冬氨酸等具有抗氧化作用和免疫调节作用的氨基酸含量明显降低，而使用富含支链氨基酸的氨基酸注射液1周后，上述氨基酸浓度明显上升，且有利于机体免疫力上升及机体伤口的愈合。Kishi等将高BCAA溶液输给大鼠，发现氮平衡明显改善，血浆白蛋白浓度增加，提示蛋白合成增加。因此，术后使用复方支链氨基酸注射液可提高患者肌肉和血浆蛋白水平，改善机体应激的免疫抑制状态，对改善患者免疫力，促进患者恢复十分重要。近年来，BCAA强化的营养支持方案在实验和临床上得到充分的肯定，特别是在创伤等应激状态下，其可促进肝脏蛋白合成、抑制肌肉蛋白分解，具有良好的节氮效应。Cerra等应用含50%BCAA的复方氨基酸与含15%的BCAA复方氨基酸液进行对比性研究，在同样的TPN条件下，应用高浓度支链注射液的术后患者，术后第3d即出现正氮平衡；应用低支链注射液的患者，术后第6d出现正氮平衡。可见，在供给足够热量的情况下，输注适量的氨基酸液都能使机体进入正氮平衡状态，但输注不同种类的氨基酸液，所取得的正氮平衡的效果有差别，高支链注射液能促进机体早日进入正氮平衡阶段。

目前国内外生产的氨基酸制剂品种繁多，各制剂中氨基酸的种类、含量和数量各不相同。本发明的复方注射液是必需氨基酸和非必需氨基酸的复方制剂，它含有18种氨基酸，其中支链氨基酸的含量比率为35.9%，必需氨基酸（EAA）的量为45.0g/L，非必需氨基酸（NEAA）的量为14.0g/L，总氮量为8.1mg/ml，EAA与NEAA比为3.21，是适用于低蛋白血症、低营养状态和手术前后等状态时的氨基酸补充的氨基酸混合液。高支链氨基酸的TPN，不仅是一种营养支持，更是一种有力的治疗措施。EAA与NEAA的比例(E/N比例)适当能保证氨基酸制剂中氨基酸的有效利用。

发明内容

本发明的目的在于提供一种含有18种氨基酸的复方注射液，其每100ml注射液中含有：

其中适量冰醋酸调节注射液的pH值在6.8-7.8之间。

上述的复方注射液，其每1000ml注射液中含有：

其中适量冰醋酸调节注射液的pH值在6.8-7.8之间。

上述的复方注射液，其每1000ml注射液中含有：

其中适量冰醋酸调节注射液的pH值在6.8-7.8之间。

上述的复方注射液，其每1000ml注射液中含有：

其中适量冰醋酸调节注射液的pH值在6.8-7.8之间。

上述的复方注射液，其每1000ml注射液中含有：

其中适量冰醋酸调节注射液的pH值在6.8-7.8之间。

上述的复方注射液的制备方法，包括如下步骤：

（1）取处方量90%的注射用水，通氮气煮沸30-55分钟；

（2）当注射用水的温度降至88～92℃时，在充氮保护下加入1/2处方量的亚硫酸氢钠，搅拌溶解后，依次加入处方量的亮氨酸、异亮氨酸、苯丙氨酸，充分搅拌使其完全溶解；

（3）降温至68～82℃时，在充氮保护下依次加入醋酸赖氨酸、苏氨酸、缬氨酸、丙氨酸、精氨酸、脯氨酸、丝氨酸、甘氨酸、谷氨酸、门冬氨酸、酪氨酸、甲硫氨酸、组氨酸、色氨酸、半胱氨酸及剩余的1/2处方量亚硫酸氢钠充分搅拌使其完全溶解；

（4）药液降温至45-54℃时，在充氮保护下加入冰醋酸适量，调节药液pH至6.8-7.8，加入0.03%（W/V）的药用活性炭，搅拌15分钟，冷却水降温，待药液温度降至40℃以下时，钛棒脱炭；

（5）在充氮保护下补加注射用水至全量，精滤，充氮，灌装，压胶塞，轧盖；

（6）115℃水浴灭菌32min，即得。

上述的复方注射液的制备方法，优选包括如下步骤：

（1）取处方量90%的注射用水，通氮气煮沸45分钟；

（2）当注射用水的温度降至88～92℃时，在充氮保护下加入1/2处方量的亚硫酸氢钠，搅拌溶解后，依次加入处方量的亮氨酸、异亮氨酸、苯丙氨酸，充分搅拌使其完全溶解；

（3）降温至68～82℃时，在充氮保护下依次加入醋酸赖氨酸、苏氨酸、缬氨酸、丙氨酸、精氨酸、脯氨酸、丝氨酸、甘氨酸、谷氨酸、门冬氨酸、酪氨酸、甲硫氨酸、组氨酸、色氨酸、半胱氨酸及剩余的1/2处方量亚硫酸氢钠充分搅拌使其完全溶解；

（4）药液降温至45-50℃时，在充氮保护下加入冰醋酸适量，调节药液pH至6.8-7.8，加入0.03%（W/V）的药用活性炭，搅拌15分钟，冷却水降温，待药液温度降至40℃以下时，钛棒脱炭；

（5）在充氮保护下补加注射用水至全量，精滤，充氮，灌装，压胶塞，轧盖；

（6）115℃水浴灭菌32min，即得。

本发明的复方注射液的制备方法与常规的氨基酸一步投料方法不同，其采用投料分步进行，在较高温度时投入难溶及较稳定的氨基酸，使其易于溶解，然后随着温度的降低，根据氨基酸的水溶性和稳定性分别投入其他氨基酸。本发明的制备方法的优势在于：提高不稳定的氨基酸制剂的稳定性，保证成品质量。通过本发明的制备方法制得的本发明的复方注射液质量稳定，无刺激性。

具体实施方式

下面结合实施例和实验例对本发明进行进一步的说明。

本发明涉及的投料处方1-5：

实施例的总体制备方法：

（1）取处方量90%的注射用水，通氮气煮沸35-45分钟；

（2）当注射用水的温度降至88～92℃时，在充氮保护下加入1/2处方量的亚硫酸氢钠，搅拌溶解后，依次加入处方量的亮氨酸、异亮氨酸、苯丙氨酸，充分搅拌使其完全溶解；

（3）降温至68～82℃时，在充氮保护下依次加入醋酸赖氨酸、苏氨酸、缬氨酸、丙氨酸、精氨酸、脯氨酸、丝氨酸、甘氨酸、谷氨酸、门冬氨酸、酪氨酸、甲硫氨酸、组氨酸、色氨酸、半胱氨酸及剩余的1/2处方量亚硫酸氢钠，搅拌使溶解完全；

（4）药液降温至50℃时，在充氮保护下加入冰醋酸适量，调节药液pH至6.8～7.8左右，加入0.03%（W/V）的药用活性炭，搅拌15分钟，冷却水降温，待药液温度降至40℃以下时，钛棒脱炭；

（5）在充氮保护下补加注射用水至全量，精滤，充氮，灌装，压胶塞，轧盖；

（6）115℃水浴灭菌32min，即得。

细分的本发明实施例的制备工艺表

对比例的制备方法：

（1）取处方量90%的注射用水，通氮气煮沸35-45分钟；

（2）当注射用水的温度降至78～92℃时，在充氮保护下加入处方量的亚硫酸氢钠，搅拌溶解后，依次加入处方量的亮氨酸、异亮氨酸、苯丙氨酸、醋酸赖氨酸、苏氨酸、缬氨酸、丙氨酸、精氨酸、脯氨酸、丝氨酸、甘氨酸、谷氨酸、门冬氨酸、酪氨酸、甲硫氨酸、组氨酸、色氨酸、半胱氨酸，搅拌使溶解完全；

（3）药液降温至50℃时，在充氮保护下加入冰醋酸适量，调节药液pH至6.8～7.8左右，加入0.03%（W/V）的药用活性炭，搅拌15分钟，冷却水降温，待药液温度降至40℃以下时，钛棒脱炭；

（4）在充氮保护下补加注射用水至全量，精滤，充氮，灌装，压胶塞，轧盖；

（5）115℃水浴灭菌32min，即得。

细分的对比例的制备工艺表

	处方	步骤（2）注射用水温度（℃）	步骤（3）pH值
				对比例1	处方1	78	6.8
对比例2	处方1	84	7.2
				对比例3	处方1	88	7.5
对比例4	处方1	92	7.8
				对比例5	处方2	78	6.8
对比例6	处方2	84	7.2
				对比例7	处方2	88	7.5
对比例8	处方2	92	7.8
				对比例9	处方3	78	6.8
对比例10	处方3	84	7.2
				对比例11	处方3	88	7.5
对比例12	处方3	92	7.8
				对比例13	处方4	78	6.8
对比例14	处方4	84	7.2
				对比例15	处方4	88	7.5
对比例16	处方4	92	7.8
				对比例17	处方5	78	6.8
对比例18	处方5	84	7.2
				对比例19	处方5	88	7.5
对比例20	处方5	92	7.8

实验例1—制备工艺对本发明制剂稳定性影响的考察

取实施例1-8和对比例1-8的注射剂成品各5个，在25℃的条件下留样，测定稳定性相对较差的色氨酸和半胱氨酸的相对百分含量，考察制备工艺对制剂稳定性的影响。

*与对比例比较有显著差异

*与对比例比较有显著差异

通过本实验可以得出结论：本发明的制备方法对注射液的稳定性有显著改善作用。

实验例2—血管刺激性试验

血管刺激性试验结果显示，本发明的复方注射液（实施例1-20）家兔耳缘静脉受试侧无充血、出血和变性坏死现象出现，亦无病理性损害，表明本发明的复方注射液静脉滴注对家兔耳血管未产生刺激反应，检查符合规定。

实验例3--肌肉刺激性试验

肌肉刺激性试验结果显示，本发明的复方注射液（实施例1-20）家兔腿股四头肌受试侧无红肿、充血和变性坏死现象出现，亦无病理性损害，表明本发明的复方注射液肌内注射对家兔股四头肌未产生刺激反应，检查符合规定。

实验例4--溶血试验

溶血试验结果显示，本发明的复方注射液（实施例1-20）1～5号管均无溶血现象发生，振摇后红细胞可分散，表明无凝聚现象，表明本发明的复方注射液溶血性试验检查符合规定。

实验例5--过敏性试验

过敏性试验结果显示，本发明的复方注射液（实施例1-20）受试组豚鼠激发时（脚背静脉注射）均未出现竖毛、搔鼻、喷嚏、咳嗽、呼吸困难、痉挛等全身过敏反应，表明本发明的复方注射液豚鼠全身过敏试验检查符合规定。

Claims (2)

1.一种含18种氨基酸的复方注射液，每1000ml注射液中含有：

其中适量冰醋酸调节注射液的pH值在6.8-7.8之间，其特征在于采用以下方法制备：

（1）取处方量90%的注射用水，通氮气煮沸30-55分钟；

（2）当注射用水的温度降至88～92℃时，在充氮保护下加入1/2处方量的亚硫酸氢钠，搅拌溶解后，依次加入处方量的亮氨酸、异亮氨酸、苯丙氨酸，充分搅拌使其完全溶解；

（3）降温至68～82℃时，在充氮保护下依次加入醋酸赖氨酸、苏氨酸、缬氨酸、丙氨酸、精氨酸、脯氨酸、丝氨酸、甘氨酸、谷氨酸、门冬氨酸、酪氨酸、甲硫氨酸、组氨酸、色氨酸、半胱氨酸及剩余的1/2处方量亚硫酸氢钠充分搅拌使其完全溶解；

（4）药液降温至45-54℃时，在充氮保护下加入冰醋酸适量，调节药液pH至6.8-7.8，加入0.03%（W/V）的药用活性炭，搅拌15分钟，冷却水降温，待药液温度降至40℃以下时，钛棒脱炭；

（5）在充氮保护下补加注射用水至全量，精滤，充氮，灌装，压胶塞，轧盖；

（6）115℃水浴灭菌32min，即得。

2.根据权利要求1所述的复方注射液，其特征在于采用以下方法制备：

（1）取处方量90%的注射用水，通氮气煮沸45分钟；

（2）当注射用水的温度降至88～92℃时，在充氮保护下加入1/2处方量的亚硫酸氢钠，搅拌溶解后，依次加入处方量的亮氨酸、异亮氨酸、苯丙氨酸，充分搅拌使其完全溶解；

（3）降温至68～82℃时，在充氮保护下依次加入醋酸赖氨酸、苏氨酸、缬氨酸、丙氨酸、精氨酸、脯氨酸、丝氨酸、甘氨酸、谷氨酸、门冬氨酸、酪氨酸、甲硫氨酸、组氨酸、色氨酸、半胱氨酸及剩余的1/2处方量亚硫酸氢钠充分搅拌使其完全溶解；

（4）药液降温至45-50℃时，在充氮保护下加入冰醋酸适量，调节药液pH至6.8-7.8，加入0.03%（W/V）的药用活性炭，搅拌15分钟，冷却水降温，待药液温度降至40℃以下时，钛棒脱炭；

（5）在充氮保护下补加注射用水至全量，精滤，充氮，灌装，压胶塞，轧盖；

（6）115℃水浴灭菌32min，即得。