CN103005458A - 一种盐生杜氏藻β-胡萝卜素微胶囊及其制备方法 - Google Patents
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Abstract
本发明公开了一种盐生杜氏藻β-胡萝卜素微胶囊及其制备方法,该胶囊以盐生杜氏藻β-胡萝卜素提取液为芯材,以加乳化剂吐温-80的海藻酸钠为壁材,将芯材和壁材按体积比1:1-3的比例混合均匀后,加入到凝固剂氯化钙中,经固化、过滤和干燥处理后得到,具体制备过程包括芯材的制备、壁材的处理、芯材/壁材混合液的制备、制珠、固化,最后过滤干燥,即获得盐生杜氏藻β-胡萝卜素微胶囊,优点是该微胶囊化天然β-胡萝卜素不仅可以保持其固有活性,又可以增强其稳定性,克服自身易遭破坏的缺点,同时弥补其在水溶液中不易分散的不足,便于天然β-胡萝卜素的应用、运输和贮藏。
Description
技术领域
本发明涉及食品加工技术领域,尤其是涉及一种盐生杜氏藻β-胡萝卜素微胶囊及其制备方法。
背景技术
盐生杜氏藻是一种营养丰富均衡、生长繁殖快的单细胞绿藻,是已知的最具嗜盐特性的真核生物,其直径仅有10-15 μm,细胞内含有多种对人体有益的物质。盐生杜氏藻可以利用广阔的沿海滩涂进行养殖,在对优良藻种筛选后,藻粉中天然β-胡萝卜素的含量可达14%。天然β-胡萝卜素一般作为食品添加剂使用,以取代合成色素,β-胡萝卜素本身又是维生素A原,近来发现,β-胡萝卜素还能清除人体内自由基,是一种良好的抗氧化剂和氧化保护剂,起防癌、抗衰老、延年益寿等作用,β-胡萝卜素在食品、医学、保健等方面有着广泛的用途。藻类的β-胡萝卜素是一种天然制品,价格是化学合成品的两倍。受到逆境胁迫的盐生杜氏藻可被诱导合成大量β-胡萝卜素,因此选用盐生杜氏藻作为工业化生产β-胡萝卜素的生物反应器具有很大的潜力。该产品售价近600美元/公斤,估计每年有2亿美元的市场。目前国际市场的天然β-胡萝卜素供不应求,价格在7000-10000元/公斤。澳大利亚、以色列、美国等已实现了盐藻养殖的工业化,用来提取β-胡萝卜素和甘油。
由于β-胡萝卜素分子中存在共轭双键的结构,对氧敏感而不稳定的,特别是纯的结晶产品更易被氧化破坏,另外,光辐射、高温、酸、碱、游离卤素、水分状况等也会影响天然β-胡萝卜素的稳定性,导致天然β-胡萝卜素本身不易保存,在酸碱热紫外线等条件下极易遭到破坏,这给β-胡萝卜素的运输、贮藏及其应用带来了极大的限制。微胶囊技术是一种利用天然或合成的高分子成膜材料作为壁膜壁壳,将固体或液体的活性物质包埋并封存于一种微型胶囊内成为一种固体微粒产品的技术。
中国专利名称为β-胡萝卜素微囊粉及其制备工艺(申请号CN95121363.6)公开了一种β-胡萝卜素微囊粉及其制备工艺:由β-胡萝卜素、植物油、没食子酸丙脂、明胶、淀粉、苯甲酸钠六种物质组成。把β-胡萝卜素与没食子酸丙脂和植物油做成的油相加入用明胶、淀粉、苯甲酸钠、蒸馏水做成的水相中,经乳化均质后,再进行喷雾干燥即做成β-胡萝卜素微囊粉,具有含量高,微囊粉直径小等特点。该方法以明胶、淀粉、苯甲酸钠等为壁材制取微囊粉,生产过程中需要大量的合成乳化剂,会影响微胶囊的食用安全。
中国专利名称一种β-胡萝卜素微囊粉及其制备方法(申请号CN201010510779.3)公开了一种β-胡萝卜素微囊粉及其制备方法。β-胡萝卜素微囊粉中各成分组成按重量百分比计算为β-胡萝卜素3~6%、维生素C棕桐酸酯3~5%、食品级明胶30~45%、淀粉15~30%、维生素C钠3~5%、大豆磷脂2~5%和蔗糖20~30%。其制备方法包括提取β-胡萝卜素,有机相、水相溶液的配制并混合后经超声波高速剪切、高压均质乳化及喷雾干燥等步骤,最终得粒径达到纳米级的β-胡萝卜素微囊粉,该微囊粉具有溶解时间短,稳定不分层等特点。该方法过程复杂,使用了大量的明胶,容易造成粘度过大,两项混合搅拌难以保证乳液的均匀,从而影响包埋效果,超声波高速剪切和高压均质乳化会影响β-胡萝卜素的质量,导致β-胡萝卜素被部分破坏。上述两种专利均需采用喷雾干燥制备得到微囊粉,能耗均较制作微胶囊高。
中国专利名称为一种类β-胡萝卜素微囊及其制备方法(申请号CN200710011080.0)公开了一种类β-胡萝卜素微囊及其制备方法,它是由下述原料按照重量比组成,类β-胡萝卜素∶脂质物质∶囊材∶乳化剂∶水=1∶1-20∶1-20∶1-10∶80-100,该微囊产品具有良好的对光热稳定性和水溶性或水分散性。类胡萝卜素是β-胡萝卜素、番茄红素、叶黄素、虾青素和玉米黄质等物质的混合物,由于各种成分用途不尽相同,相较β-胡萝卜素单一物质,其应用范围受到了一定的限制。目前,国内外还没有关于利用盐生杜氏藻制备β-胡萝卜素微胶囊的方法的相关研究报道。
发明内容
本发明所要解决的技术问题是提供一种简便、有效、食用安全、能耗低且能提高盐生杜氏藻β-胡萝卜素稳定性的盐生杜氏藻β-胡萝卜素微胶囊及其制备方法。
本发明解决上述技术问题所采用的技术方案为:一种盐生杜氏藻β-胡萝卜素微胶囊,以盐生杜氏藻β-胡萝卜素提取液为芯材,以加乳化剂吐温-80的海藻酸钠为壁材,将芯材和壁材按体积比1:1-3的比例混合均匀后,加入到凝固剂氯化钙中,经固化、过滤和干燥处理后得到。
一种盐生杜氏藻β-胡萝卜素微胶囊的制备方法,具体步骤如下:
(1)芯材的制备:将处于对数生长期的浓度为0.8×107~1×107个细胞/mL的盐生杜氏藻液置于离心管中,5000rpm离心8-10min后,取固体沉淀物藻泥,按质量体积比1g:40ml的比例加入萃取液于离心管中,在震荡仪上震荡2-3 min,在功率450-550W、频率20-24KHZ的超声辅助下萃取8-12min,然后5000rpm离心5-10min,将上层萃取液转移到旋转蒸发仪中100℃水浴旋转蒸发,蒸发25-35min后,取料液瓶,加石油醚定容于容量瓶中,得到质量体积浓度浓度为1-10mg/L的盐生杜氏藻β-胡萝卜素溶液,作为芯材溶液,其中所述的萃取液为乙醇-石油醚、乙醇-乙酸乙酯、乙醇-正己烷和乙醇-氯仿中的任一种;
(2)壁材的制备:以海藻酸钠为溶质,以水为溶剂,水浴加热溶解后,加乳化剂吐温80配制海藻酸钠溶液,得到壁材溶液,其中所述的壁材溶液中海藻酸钠的质量浓度为0.5-2%,吐温80的质量浓度为4-10%;
(3)芯材/壁材混合液的制备:将芯材溶液和壁材溶液按体积比1:1-3的比例混合,得到芯材/壁材混合液;
(4)凝珠的制备:以氯化钙为溶质,以水为溶剂,溶解后制备得到氯化钙浓度为1-6%的凝固剂;将步骤(3)制备得到的芯材/壁材混合液用针头匀速注射到凝固剂中,并用磁力搅拌器搅动,待芯材/壁材混合液在凝固剂中形成小球珠后,将小球珠在固化温度20-30℃下,静置5-15 min后,获得凝珠;
(5)微胶囊的制备:将步骤(4)获得的凝珠用干净的纱布过滤除去凝固剂,将过滤后获得的凝珠在常温下干燥,即获得盐生杜氏藻β-胡萝卜素微胶囊。
步骤(1)中所述的萃取液为乙醇-氯仿提取液,所述的乙醇-氯仿提取液中乙醇和氯仿体积比为3:7。采用乙醇和氯仿按体积比3:7混合成的萃取液。β-胡萝卜素的提取率最佳,β-胡萝卜素的含量达27.99ug/ml。
步骤(1)中所述的超声萃取时间为10min。
步骤(2)中所述的海藻酸钠浓度为1%,所述的吐温80浓度为8%,所述的海藻酸钠的加热溶解采用100℃水浴。
步骤(3)中所述的芯材溶液和所述的壁材溶液按体积比1:2的比例混合。按该比例混合盐生杜氏藻β-胡萝卜素微胶囊的包埋率最佳,达到70%。
步骤(4)中所述的氯化钙浓度为2%。
步骤(4)中所述的针头孔径大小为0.5-0.6mm,所述的针头注射速度为100-110滴/分钟。
步骤(4)中所述的磁力器搅拌速度为800rpm。
步骤(4)中所述的固化温度为25℃,静置时间为10 min。
步骤(5)中所述的过滤纱布的层数为3-5层。
与现有技术相比,本发明的优点在于:本发明公开了一种盐生杜氏藻β-胡萝卜素微胶囊及其制备方法,其以盐生杜氏藻β-胡萝卜素提取液为芯材,以加乳化剂吐温-80的海藻酸钠为壁材,将芯材和壁材按一定比例混合均匀后,加入到凝固剂氯化钙中,经固化、过滤和干燥处理后得到,包括芯材的制备、壁材的处理、芯材/壁材混合液的制备、制珠、固化,最后过滤干燥,即获得盐生杜氏藻β-胡萝卜素微胶囊。微胶囊化天然β-胡萝卜素不仅可以保持其固有活性,又可以增强其稳定性,克服自身易遭破坏的缺点,同时弥补其在水溶液中不易分散的不足,便于天然β-胡萝卜素的应用、运输和贮藏。优点如下:
1)本发明所使用的壁材海藻酸钠,原料来源广泛,价格低廉,对人体无毒,为食品许可添加剂;
2)本发明的制备方法操作简单,路线合理,安全可靠,对操作人员专业素质要求低,具有应用于实际生产的能力;
3)本发明制备的盐生杜氏藻β-胡萝卜素微胶囊,包埋率为60~70%,大大提高了产品的稳定性,增强了其着色效果,扩大了其使用范围;
4)本发明制备的盐生杜氏藻β-胡萝卜素微胶囊粒度均匀,具有较好的流动性,便于贮藏和运输。
综上所述,本发明所述的制备盐生杜氏藻β-胡萝卜素微胶囊的方法采用合适的对人体无毒的包埋材料,不仅提高了β-胡萝卜素的稳定性,而且可通过微胶囊的缓释作用来增强β-胡萝卜素的生理功能。该制备方法操作简单,所用原料均为食品领域许可原料,不仅扩大了其使用范围,还有效地克服了盐生杜氏藻β-胡萝卜素使用时存在的弊端,具有极大的经济价值。
具体实施方式
以下结合实施例对本发明作进一步详细描述。
一、实验方法
1、β-胡萝卜素含量的测定方法
准确称取β-胡萝卜素标准品(Labor Dr. Ehren-storfer-Schafers , Augshurg公司,German),用石油醚配制1ug/mL、2ug/mL、3ug/mL、4ug/mL、5ug/mL、6ug/mL、7ug/mL、8ug/mL、9ug/mL和10ug/mL的β-胡萝卜素溶液共10管,用紫外分光光度计测出1~10号管在450nm处的吸光值,其中每个浓度做3个平行。以吸光值为纵坐标,β-胡萝卜素溶液的浓度(ug/mL)为横坐标,绘出标准曲线。试验样品在450nm下测定吸光值,根据β-胡萝卜素标准曲线计算出样品中β-胡萝卜素的含量。
2、包埋率的测定方法
微胶囊包埋率用间接法测定。微胶囊制作后,离心取上清,测定上清液中β-胡萝卜素含量,用初始β-胡萝卜素含量减去上清液β-胡萝卜素含量可计算出微胶囊包埋的β-胡萝卜素含量,再计算微胶囊的包埋率。包埋率%=(初始β-胡萝卜素含量—上清液β-胡萝卜素含量)/初始β-胡萝卜素含量。
二、具体实施例
实施例1
本发明一种盐生杜氏藻β-胡萝卜素微胶囊,以盐生杜氏藻β-胡萝卜素提取液为芯材,以加乳化剂吐温-80的海藻酸钠为壁材,将芯材和壁材按一定比例混合均匀后,加入到凝固剂氯化钙中,经固化、过滤和干燥处理后得到,其制备方法具体包括以下步骤:
(1)芯材的制备:量取40 ml处于对数生长期的浓度为0.8×107-1×107个细胞/mL的盐生杜氏藻液放在50 ml大离心管中,5000rpm离心8min,去掉上清液,得到0.1g藻泥,取0.1g藻泥加入4 ml乙醇-氯仿(3:7,V/V) 萃取液于离心管中,在震荡仪上震荡2-3 min,在功率500W、频率20-24KHZ的超声辅助下萃取10min,5000rpm离心5min,将上层液转移到旋转蒸发仪中100℃水浴旋转蒸发,蒸发30min后,取下料液瓶,加石油醚定容于10ml容量瓶中,制得β-胡萝卜素浓度为1-10 mg/L的盐生杜氏藻β-胡萝卜素母液,即制得芯材溶液;
(2)壁材的制备:以海藻酸钠为溶质,以水为溶剂,水浴加热溶解后,加乳化剂吐温80配制海藻酸钠溶液,得到壁材溶液,其中所述的壁材溶液中海藻酸钠的质量浓度为1%,吐温80的质量浓度为8%;
(3)芯材/壁材混合液的制备:将芯材溶液和壁材溶液按1:2(V/V,体积比)比例混合,得到芯材/壁材混合液;
(4)凝固剂的制备:以氯化钙为溶质,以水为溶剂,溶解后制备得到氯化钙浓度为2%的凝固剂;
(5)制珠:用0.6mm孔径针头将步骤(3)制备的芯材/壁材混合液以100-110滴/分钟的注入速度匀速注射到步骤(4)制备的2%凝固剂中,并用磁力搅拌器以800rpm的速度搅动;
(6)固化:待芯材/壁材混合液在凝固剂中形成小球珠后,将其放在25℃下放置10min,获得凝珠;
(7)过滤干燥:将步骤(6)获得的凝珠用干净的纱布过滤除去凝固剂,将过滤后获得的凝珠在常温下干燥,即获得盐生杜氏藻β-胡萝卜素微胶囊。
用该方法制取的盐生杜氏藻β-胡萝卜素微胶囊成珠速度较快,形成的胶囊外形饱满圆润,凝胶强度较好,颜色绿色,透明度好,胶囊上泡沫较少。
实施例2
同实施例1,其区别在于:吐温浓度为4%、6%或10%时,制备得到的盐生杜氏藻β-胡萝卜素微胶囊均颜色不均一,颜色发黄,透明度差,形状不成圆形。吐温80作为非离子型表面活性剂对微胶囊粒径大小、微胶囊形态的影响非常重要。表面活性剂吐温80可以增强Gibbs-Marangoni效应,增加胶囊的弹性或提高界面粘度,减少聚并,而吐温浓度过高或过低均影响胶囊的形成,导致形状变形。
实施例3
同实施例1,其区别在于:海藻酸钠溶液浓度为0.5%、1.5%或2%,海藻酸钠溶液浓度为0.5%时,制备得到的盐生杜氏藻β-胡萝卜素微胶囊颜色不均匀,形状不均匀;海藻酸钠溶液浓度为1.5%时,制备得到的盐生杜氏藻β-胡萝卜素微胶囊形状呈豆状;海藻酸钠溶液浓度为2%时,制备得到的盐生杜氏藻β-胡萝卜素微胶囊形状呈豆状,凝胶强度较差;制备得到的盐生杜氏藻β-胡萝卜素微胶囊外形呈蝌蚪状,颜色浅黄,凝胶强度较差,原因是随着海藻酸钠浓度的增加,单位体积中凝聚物量增加,更易相互碰撞而聚集成不规则的状态。
实施例4
同实施例1,其区别在于:凝固剂中氯化钙浓度为1%、3%或6%,凝固剂中氯化钙浓度为1%时,制备得到的盐生杜氏藻β-胡萝卜素微胶囊透明度较低;凝固剂中氯化钙浓度为3%或6%时,制备得到的盐生杜氏藻β-胡萝卜素微胶囊颜色发黄。凝固效果与凝固剂浓度和时间有关,凝固剂浓度过高,则乳状液粘度过高,会产生均质或破坏β-胡萝卜素,导致颜色发黄。
实施例5
同实施例1,其区别在于:针头大小为0.5mm、1.0mm或1.2mm,针头大小为0.5mm时,制备得到的盐生杜氏藻β-胡萝卜素微胶囊较小;针头大小为1.2mm时,制备得到的盐生杜氏藻β-胡萝卜素微胶囊较大。针头大小决定微胶囊形成的粒径大小,针头过大,形成的胶囊粒径大,但由于表面张力而不易成圆形。
实施例6
同实施例1,其区别在于:针头的注射速度为40-50滴/min、70-80滴/min或者120-130滴/min,针头的注射速度为40-50滴/min时,制备得到的盐生杜氏藻β-胡萝卜素微胶囊产生泡沫;针头的注射速度为70-80滴/min时,制备得到的盐生杜氏藻β-胡萝卜素微胶囊颜色较浅;针头的注射速度为120-130滴/min时,制备得到的盐生杜氏藻β-胡萝卜素微胶囊泡沫很多。滴注速度太慢,耗费时间,滴注速度过快,易粘连并形成气泡。
实施例7
同实施例1,其区别在于:搅拌器搅拌速度为500rpm、1100rpm或者1400rpm,搅拌速度为500rpm时,制备得到的盐生杜氏藻β-胡萝卜素微胶囊形状不圆;搅拌速度为1100rpm时,制备得到的盐生杜氏藻β-胡萝卜素微胶囊颜色不均匀;搅拌速度为1400rpm时,制备得到的盐生杜氏藻β-胡萝卜素微胶囊外形圆形,但容易粘在一起,凝胶强度差,凝胶表明有大量泡沫产生。在凝胶形成过程中,搅拌可避免微胶囊互相粘连,但速度过慢或过快均可能导致微胶囊互相粘连。
从上述七个实施例可以看出,实施例1制备所得的盐生杜氏藻β-胡萝卜素微胶囊,不但成珠速度较快,形成的胶囊外形饱满圆润,凝胶强度较好,且颜色绿色,透明度好,胶囊上泡沫较少,是一种最佳的盐生杜氏藻β-胡萝卜素微胶囊制备方法。
实施例8
将萃取β-胡萝卜素的萃取液设置为:乙醇-石油醚(3:7,V/V)、乙醇-乙酸乙酯(3:7,V/V)、乙醇-正己烷(3:7,V/V)、乙醇-氯仿(3:7,V/V),萃取辅助超声时间设置为10min、25min、40min和55min共4个水平,固体沉淀物藻泥与萃取液料液比设置1:40、1:60,1:80和1:100,4个水平,采用L16(45)正交试验,结果以乙醇-氯仿(3:7,V/V)为萃取液,料液比为1:40(g/ml),超声提取10min为最佳,β-胡萝卜素含量为27.99ug/ml。
除上述实施例外,本发明一种盐生杜氏藻β-胡萝卜素微胶囊的制备方法的步骤(1)中的萃取液还可以选择乙醇-石油醚、乙醇-乙酸乙酯或乙醇-正己烷,并且各个萃取液中的两种组分可按任意比混合。
对比试验
研究光照、温度对盐生杜氏藻β-胡萝卜素微胶囊贮藏稳定性的影响,以β-胡萝卜素保存率(处理后的β-胡萝卜素含量除以处理前的β-胡萝卜素含量得到的值)为指标。将上述所得微胶囊贮藏在光照、黑暗和紫外照射等条件下,5h后测定β-胡萝卜素保存率。将上述所得微胶囊贮藏在-20℃、-4℃、25℃和37℃等温度下,15d后测定β-胡萝卜素保存率。结果表明在相同贮藏条件下,盐生杜氏藻β-胡萝卜素微胶囊稳定性均高于β-胡萝卜素提取液。
表1 光照对盐生杜氏藻β-胡萝卜素微胶囊贮藏稳定性的影响
表2 温度对盐生杜氏藻β-胡萝卜素微胶囊贮藏稳定性的影响
当然,上述说明并非对本发明的限制,本发明也并不限于上述举例。本技术领域的普通技术人员在本发明的实质范围内,作出的变化、改型、添加或替换,也应属于本发明的保护范围。
Claims (10)
1.一种盐生杜氏藻β-胡萝卜素微胶囊,其特征在于:以盐生杜氏藻β-胡萝卜素提取液为芯材,以加乳化剂吐温-80的海藻酸钠为壁材,将芯材和壁材按体积比1:1-3的比例混合均匀后,加入到凝固剂氯化钙中,经固化、过滤和干燥处理后得到。
2.一种盐生杜氏藻β-胡萝卜素微胶囊的制备方法,其特征在于具体步骤如下:
(1)芯材的制备:将处于对数生长期的浓度为0.8×107~1×107个细胞/mL的盐生杜氏藻液置于离心管中,5000rpm离心8-10min后,取固体沉淀物藻泥,按质量体积比1g:40ml的比例加入萃取液于离心管中,在震荡仪上震荡2-3 min,在功率450-550W、频率20-24KHZ的超声辅助下萃取8-12min,然后5000rpm离心5-10min,将上层萃取液转移到旋转蒸发仪中100℃水浴旋转蒸发,蒸发25-35min后,取料液瓶,加石油醚定容于容量瓶中,得到质量体积浓度浓度为1-10 mg/L的盐生杜氏藻β-胡萝卜素溶液,作为芯材溶液,其中所述的萃取液为乙醇-石油醚、乙醇-乙酸乙酯、乙醇-正己烷和乙醇-氯仿中的任一种;
(2)壁材的制备:以海藻酸钠为溶质,以水为溶剂,水浴加热溶解后,加乳化剂吐温80配制海藻酸钠溶液,得到壁材溶液,其中所述的壁材溶液中海藻酸钠的质量浓度为0.5-2%,吐温80的质量浓度为4-10%;
(3)芯材/壁材混合液的制备:将芯材溶液和壁材溶液按体积比1:1-3的比例混合,得到芯材/壁材混合液;
(4)凝珠的制备:以氯化钙为溶质,以水为溶剂,溶解后制备得到氯化钙浓度为1-6%的凝固剂;将步骤(3)制备得到的芯材/壁材混合液用针头匀速注射到凝固剂中,并用磁力搅拌器搅动,待芯材/壁材混合液在凝固剂中形成小球珠后,将小球珠在固化温度20-30℃下,静置5-15 min后,获得凝珠;
(5)微胶囊的制备:将步骤(4)获得的凝珠用干净的纱布过滤除去凝固剂,将过滤后获得的凝珠在常温下干燥,即获得盐生杜氏藻β-胡萝卜素微胶囊。
3.根据权利要求2所述的一种盐生杜氏藻β-胡萝卜素微胶囊的制备方法,其特征在于:步骤(1)中所述的萃取液为乙醇-氯仿提取液,所述的乙醇-氯仿提取液中乙醇和氯仿的体积比为3:7,所述的超声萃取时间为10min。
4.根据权利要求2所述的一种盐生杜氏藻β-胡萝卜素微胶囊的制备方法,其特征在于:步骤(2)中所述的海藻酸钠浓度为1%,所述的吐温80浓度为8%,所述的海藻酸钠的加热溶解采用100℃水浴。
5.根据权利要求2所述的一种盐生杜氏藻β-胡萝卜素微胶囊的制备方法,其特征在于:步骤(3)中所述的芯材溶液和所述的壁材溶液按体积比1:2的比例混合。
6.根据权利要求2所述的一种盐生杜氏藻β-胡萝卜素微胶囊的制备方法,其特征在于:步骤(4)中氯化钙浓度浓度为2%。
7.根据权利要求2所述的一种盐生杜氏藻β-胡萝卜素微胶囊的制备方法,其特征在于:步骤(4)中所述的针头孔径大小为0.5-0.6mm,所述的针头注射速度为100-110滴/分钟。
8.根据权利要求2所述的一种盐生杜氏藻β-胡萝卜素微胶囊的制备方法,其特征在于:步骤(4)中所述的磁力器搅拌速度为800rpm。
9.根据权利要求2所述的一种盐生杜氏藻β-胡萝卜素微胶囊的制备方法,其特征在于:骤(4)中所述的固化温度为25℃,静置时间为10 min。
10.根据权利要求2-9中任一项所述的一种盐生杜氏藻β-胡萝卜素微胶囊的制备方法,其特征在于:步骤(5)中所述的过滤纱布的层数为3-5层。
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