CN105726482A - 一种叶黄素纳米脂质体及其制备方法 - Google Patents

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Abstract

一种叶黄素纳米脂质体及其制备方法,本发明涉及一种新的叶黄素纳米脂质体及其制备方法。本发明解决了叶黄素稳定性差不宜生产和保存、水溶性差及颗粒较大体内吸收利用率低等问题。本发明叶黄素纳米脂质体是由叶黄素晶体粉末、蛋黄卵磷脂和胆固醇通过高压均质、超声波分散水合及微孔过滤制备而成。本发明叶黄素纳米脂质体具有的优点是:一、脂质体属于纳米级,粒度小、溶解性高。二、经有效食材包封叶黄素损失小,稳定性好。三、未使用任何有毒副作用的有机溶剂和添加剂,可直接作用为保健食品和药物补充剂等产品。四、方法简单,成本较低。五、应用前景广阔,为叶黄素的广泛应用奠定基础。

Description

一种叶黄素纳米脂质体及其制备方法
技术领域:本发明涉及一种叶黄素纳米脂质体及其制备方法。
背景技术:
叶黄素又名“黄体素”,属于类胡萝卜素,广泛分布于植物的果实、枝叶和花当中,在自然界当中存在着600多种类胡萝卜素,只有20种在人体内发挥着重要的生理功能,如β-胡萝卜素、玉米黄素(3,3’-二羟基-β胡萝卜素)、隐黄素(3-羟基-β胡萝卜素)、叶黄素和番茄红素等。
叶黄素类具有抗氧化等多种生理功能,是人体内重要的类胡萝卜素,广泛分布于人体多个组织,对维持健康起到重要作用。例如,叶黄素是一种重要的抗氧化剂,具有高效泯灭单线态氧和清除自由基作用,可保护人体免受氧和自由基作用而带来的损害,增强机体免疫力;叶黄素可以通过滤过蓝光和抗氧化作用保护皮肤、视网膜和体内多个组织免受氧化损伤;叶黄素具有保护视力的作用,叶黄素和玉米黄素是视网膜中两种主要色素,叶黄素对视网膜中的黄斑具有重要保护作用,叶黄素在视网膜中的含量随着年龄的增加逐年下降,缺乏时容易引起黄斑退化和视力模糊,进而出现视力退化,近视等症状,更容易引起如老年黄斑变性(age-relatedmaculardegenera-tion,AMD)这一不可逆的致盲性眼病。研究显示,较多的玉米黄质、叶黄素和维生素E可预防眼部黄斑退化,可降低老年性白内障的风险;叶黄素还可以抑制体内组织的炎性和免疫反应,动脉壁细胞中的叶黄索还可降低LDL胆固醇的氧化性,对早期的动脉硬化进程有延缓作用;叶黄素对多种癌症如乳腺癌、前列腺癌、直肠癌、皮肤癌等有预防和抑制作用。因此,叶黄素作为功能食品原料和保健食品越来越受到人们的重视,在食品和医药领域应用越来越广泛。
但是,从图1叶黄素的分子结构我们可以看出:由于其分子结构中碳链较长且含有较多疏水基团,在水中溶解性差,降低了体内吸收和生物利用率;其分子中含有多个多不饱双键,导致易受氧、光辐射、高温、pH值以及体内酶、抗体和胃酸等因素的影响而发生分解和失活,失去原有的生理活性,稳定性较差。这两个因素严重限制了叶黄素进入体内到达有效部位和被较好的吸收,难以有效地发挥其生理功能。
当今国内外市场上的叶黄素类产品主要是以叶黄素粗品的微胶囊形式为主,纯度低,稳定性不佳,同时也没有很好的解决上述叶黄素在应用方面的两个难题。因此,极大地影响了叶黄素在食品或医药领域的应用。
目前,针对上述问题对叶黄素产品的开发主要是以微胶囊法为主,微胶囊虽然可以减少叶黄素的降解和损失,但是微胶囊化叶黄素普遍颗粒较大,分散溶解性差,体内吸收效果不好,制备过程中往往需要高压和高温造粒技术,叶黄素损失较大。现在比较先进的方法是纳米包埋技术,纳米化是一种物理改性手段,是目前提高药物和食品活性成分溶解性和促进体内吸收比较常用的方法,通过纳米化可以减小叶黄素微粒尺寸,增大比表面积和在水中的分散性能,有利于胃肠道的吸收。脂质体化是纳米化的一种有效手段,脂质体是由双亲性的分子分散在水溶液中自发形成的闭合小囊泡,是一种特殊的微纳米技术,其结构如图2所示。脂质体可将包封的芯材有效保护起来,对内容物起到保护与缓/控释作用,且有利于提高芯材的吸收利用率,因此常用于食品、医药以及化妆品领域中微纳米包埋体系的制备。
除了微胶囊技术以外,近年来也有人将叶黄素制备成脂质体。如中国专利CN101716144A申请公开的叶黄素氢化磷脂脂质体前体及其制备方法,将叶黄素和氢化磷脂加入到二氯甲烷和乙醇溶液中,采用超临界二氧化碳抗溶剂法制备叶黄素脂质体,该方法使用超临界二氧化碳操作压力大,成本高,且二氯甲烷毒性大、容易残留。再如中国专利CN104095816A公开的叶黄素酯纳米颗粒及其制备方法,将叶黄素酯溶液批量加入到包裹材料溶液中并添加乳化剂,使溶液颗粒达到纳米级,再通过常规方法挥去溶液中溶剂,喷雾干燥干燥制成粉末,可以使其溶于冷水或常温水中,增强了叶黄素酯的稳定性,该方法是一种微胶囊方法,干燥过程叶黄素会发生损失,且仅靠乳化剂提高叶黄素的溶解性,不能明显提高叶黄素体内生物利用率。又如中国专利CN102329520A公开的一种叶黄素纳米液的制备方法,将抗氧化剂和稳定剂添加到植物油脂中,再加入叶黄素晶体经球磨机、超高压均质机或高压微射流,破碎制得叶黄素纳米液。所得叶黄素颗粒较大,吸收利用率低,溶液体系稳定性不佳。
因此,目前还没有一种兼有叶黄素损失少、稳定性高、溶解性好以及体内利用率高的叶黄素纳米脂质体及其制备方法。
发明内容:本发明的目的是提供一种具有方法简单、成本低,稳定性好、溶解性高、叶黄素充分得以保留和体内吸收利用率较高的纳米级叶黄素脂质体及其制备方法。
本发明的制备工艺包括以下步骤:
一种叶黄素纳米脂质体,其特征在于由下列乙醇注入结合超声分散法制备叶黄素的纳米脂质体,叶黄素纳米脂质体呈球形纳米微粒状,具有较强的水溶解性和分散性,叶黄素晶体均匀分布在脂质体内部,平均粒径在200~250nm,对叶黄素包封率高达98%,4℃条件保藏30天,叶黄素保存率80%以上;
所述乙醇注入结合超声分散法制备叶黄素的纳米脂质体,包括下列步骤:
(1)取1.0~1.5份重量的纯度为80%~98%的叶黄素晶体的加入到1000份无水乙醇溶液中充分溶解,加入5.0~8.0份重量的蛋黄卵磷脂和1.0~2.0份重量的胆固醇混合物,水浴搅拌使其完全溶解,经高压均质使各组分微粒充分混匀,高压均质条件为:10~30MPa,3~8min;
(2)将上述混合溶液用注射器快速注入到1~4倍体积的PBS混合溶液中,在30~60℃下超声分散搅拌,方式为采用聚能式的超声波间歇超声振动,超声波功率为100w,超声间隔5~10s,边超声振动边搅拌水合30~50min,得到叶黄素混合液;
(3)将叶黄素混合液经50℃减压旋转蒸发30min,挥去残留乙醇,在真空度为-0.09MPa下用0.1~1.0μm的微孔滤膜真空抽滤,即得叶黄素纳米脂质体。
经粒度分析仪测得叶黄素纳米脂质体平均粒径大小为200~250nm,叶黄素包封率最高可达98%。扫描电镜SEM显示为叶黄素均匀分布于纳米微球型结构内,该结构具有增强叶黄素稳定性和促进其体内吸收的作用。
附图说明:
图1叶黄素分子结构示意图
图2脂质体结构示意图
图3叶黄素纳米脂质体粒径分布图
图4叶黄素纳米脂质体微观结构扫描电镜图
本发明和现有的技术相比具有以下优点:
一、粒度小、溶解性高。和现有制备叶黄素微胶囊的方法相比,叶黄素纳米脂质体粒径较小(平均粒径200~250nm)。采用磷脂双分子层包封叶黄素,在水中形成稳定的体系,叶黄素在水中分散溶解性好,稳定性高。
二、叶黄素损失小,稳定性好。叶黄素纳米脂质体制备过程温度低,时间短,避免了高温高压等不利条件对叶黄素的破坏作用,叶黄素损失率低。叶黄素纳米脂质体的包封率在98%以上,叶黄素被包封在磷脂膜双分子层内,具有稳定的球形微纳米结构,具有良好的光热稳定性和抗氧化能力,4℃条件保藏30天,叶黄素保存率在80%以上。
三、食用安全,营养价值高。和目前现有的脂质体制备技术相比,制备方法中未使用任何有毒副作用的有机溶剂和添加剂,可直接作用为保健食品和药物补充剂使用。
四、方法简单,成本较低。所采用方法简单,工艺中使用了超声波和高压均质等先进、成熟的方法,工艺先进且成本较低,易于推广。
五、应用前景广阔。本方法可解决叶黄素在外界条件下稳定性不好应用受限的问题,同时,制备成纳米脂质体后增强了叶黄素晶体的水溶解性并降低了颗粒度,大大增强了其在肠道内的吸收,扩大了叶黄素的应用领域和范围,因此具有广阔的发展前景。
具体实施方式
具体实施方式一:一种叶黄素纳米脂质体的制备方法通过以下步骤实现:
(1)取1.0~1.5份重量的纯度为80%~98%的叶黄素晶体的加入到1000份无水乙醇溶液中充分溶解,加入5.0~8.0份重量的蛋黄卵磷脂和1.0~2.0份重量的胆固醇混合物,水浴搅拌使其完全溶解,经高压均质使各组分微粒充分混匀,高压均质条件为:10~30MPa,3~8min;
(2)将上述混合溶液用注射器快速注入到1~4倍体积的PBS混合溶液中,在30~60℃下超声分散搅拌,方式为采用聚能式的超声波间歇超声振动,超声波功率为100w,超声间隔5~10s,边超声振动边搅拌水合30~50min,得到叶黄素混合液;
(3)将叶黄素混合液经50℃减压旋转蒸发30min,挥去残留乙醇,在真空度为-0.09MPa下用0.1~1.0μm的微孔滤膜真空抽滤,即得叶黄素纳米脂质体。
具体实施方式二:本实施方式与具体实施方式一的不同点在于步骤(1)中取1.1~1.3份重量的纯度为80%~98%的叶黄素晶体的加入到1000份无水乙醇溶液中充分溶解,加入5.6~7.2份重量的蛋黄卵磷脂和1.4~1.8份重量的胆固醇混合物,水浴搅拌使其并完全溶解,在压力为15~25MPa下高压均质4~6min使各组分微粒充分混匀,其它步骤与具体实施方式一相同。
具体实施方式三:本实施方式与具体实施方式一的不同点在于步骤(1)中取1.2份重量的纯度为80%~98%的叶黄素晶体的加入到1000份无水乙醇溶液中充分溶解,加入6.0份重量的蛋黄卵磷脂和1.5份重量的胆固醇混合物,水浴搅拌使其并完全溶解,在压力为20MPa下高压均质5min使各组分微粒充分混匀,其它步骤与具体实施方式一相同。
具体实施方式四:本实施方式与具体实施方式一的不同点在于步骤(2)中将上述混合溶液用注射器快速注入到2~3倍体积的PBS混合溶液中,在40~50℃下超声分散搅拌,超声波功率为100w,超声间隔5~10s,水合30~40min,得到叶黄素混合液。其它步骤与具体实施方式一相同。
具体实施方式五:本实施方式与具体实施方式一的不同点在于步骤(2)中超声分散搅拌方式为采用聚能式的超声波间歇超声振动,边超声振动边搅拌水合。其它步骤与具体实施方式一相同。
具体实施方式六:本实施方式与具体实施方式一的不同点在于步骤(3)中用0.4~0.5μm的微孔滤膜真空抽滤,即得叶黄素纳米脂质体。

Claims (5)

1.一种叶黄素纳米脂质体及其制备方法,其特征在于由下列乙醇注入结合超声分散法制备叶黄素的纳米脂质体,叶黄素纳米脂质体呈球形纳米微粒状,具有较强的水溶解性和分散性,叶黄素晶体均匀分布在脂质体内部,平均粒径在200~250nm,对叶黄素包封率高达98%,4℃条件保藏30天,叶黄素保存率80%以上;
所述乙醇注入结合超声分散法制备叶黄素的纳米脂质体,包括下列步骤:
(1)取浓度为1.0~1.5份重量的叶黄素晶体的加入到1000份无水乙醇溶液中充分溶解,加入一定量的磷脂和胆固醇混合物,水浴搅拌使其完全溶解,经高压均质使各组分微粒充分混匀;
(2)将上述混合溶液用注射器快速注入到1~4倍体积的PBS混合溶液中,在30~60℃下超声波分散搅拌水合30~50min,得到叶黄素混合液;
(3)将混合液经50℃减压旋转蒸发30min,挥去残留乙醇,在真空度为-0.09MPa下真空抽滤,即得叶黄素纳米脂质体。
2.根据权利要求1所述的一种叶黄素纳米脂质体,其特征在于所用叶黄素晶体纯度为80%以上。
3.根据权利要求1所述的一种叶黄素纳米脂质体,其特征是:步骤(1)中磷脂为蛋黄卵磷脂,加入5.0~8.0份重量的蛋黄卵磷脂和1.0~2.0份重量的胆固醇混合物,水浴搅拌使其并完全溶解,高压均质条件为:10~30MPa,3~8min。
4.根据权利要求1所述的一种叶黄素纳米脂质体,其特征是:步骤(2)中在30~60℃下超声分散搅拌方式为采用聚能式的超声波间歇超声振动,超声波功率为100w,超声间隔5~10s,边超声振动边搅拌水合30~50min。
5.根据权利要求1所述的一种叶黄素纳米脂质体,其特征是:步骤(3)中过滤方式为用0.1~1.0μm的微孔滤膜抽滤,即得叶黄素纳米脂质体。
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