CN112545993A - 一种纳米脂质体制备方法 - Google Patents

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Abstract

本发明公了一种纳米脂质体制备方法，包括以下步骤：S1、玉米黄色素的提取；S2、称取玉米黄色素和Tween80溶解于Na2HPO4KH2PO4缓冲液中，制得水相；S3、蛋黄卵磷脂和胆固醇溶解于无水乙醇中，制得有机相；S4、将有机相快速注入水相中，搅拌，得到玉米黄色素纳米脂质体悬浮液，将悬浮液减压旋转蒸发后，挥去残留乙醇，即得玉米黄色素纳米脂质体。本发明采用超声辅助酶法从玉米中提取玉米黄色素，以缩短提取时间并使提取更加充分，采用乙醇注入法制备玉米黄色素纳米脂质体，通过纳米化可提高玉米黄色素的稳定性、水溶性和体内外吸收效果，使其充分发挥生物活性，制备成具有良好稳定性和促进消化吸收的纳米结构体系。

Description

一种纳米脂质体制备方法
技术领域
本发明属于纳米脂质体技术领域，具体涉及一种纳米脂质体制备方法。
背景技术
玉米黄色素是一种可以从玉米中提取的几种类胡萝卜素的含氧衍生物的混合物，主要由玉米黄素、黄体素、隐黄素和β－胡萝卜素组成，可广泛应用于医药、食品、包装等行业。玉米黄色素属异戊二烯类色素，具有重要的生理功能，例如抑制肿瘤的增长，预防心脑血管疾病，增强人体免疫力和预防老年性视黄斑变性等，传统玉米黄色素的提取为有机溶剂浸提法，不仅仅浸提时间长，而且玉米黄色素的有效溶出率较低；脂质体是由双亲性的分子分散在水溶液中自发形成的闭合小囊泡，对内容物起到保护与缓释作用，且由于脂质体的粒径小，有利于提高芯材的吸收利用率。因而近年来常用在食品、医药以及化妆品领域中食品和药物活性成分纳米化制备研究。通过脂质体的载体作用将玉米黄色素进行物理改性，可以改变其颗粒存在状态，制备成具有良好稳定性和促进消化吸收的纳米结构体系，对于提高玉米黄色素的溶解性、稳定性和体内吸收利用率，扩大应用领域具有重要意义。
发明内容
本发明的目的在于提供一种纳米脂质体制备方法，以解决上述背景技术中提出的问题。
为实现上述目的，本发明提供如下技术方案：一种纳米脂质体制备方法，包括以下步骤：
S1、玉米黄色素的提取：首先，对玉米预处理，将玉米洗净、脱粒并粉碎过筛备用，其次，取过筛后的玉米粉，加入碱性蛋白酶进行酶法提取，之后加入无水乙醇进行超声提取，再次，将加酶水解以及无水乙醇处理后浸提液进行超声离心处理，离心后取上清液通过三层纱布过滤，用旋转蒸发仪对滤液进行浓缩，最后，冷冻干燥得到玉米黄色素粉末；
S2、水相的制备：称取玉米黄色素和Tween80溶解于pH6.5、0.05mol/mL的Na2HPO4KH2PO4缓冲液中，制得水相；
S3、有机相的制备：蛋黄卵磷脂和胆固醇溶解于无水乙醇中，制得有机相；
S4、玉米黄色素纳米脂质体的制备：用注射器将步骤3中的脂质乙醇溶液，即有机相快速注入步骤2中溶有玉米黄色素和Tween-80的缓冲液中，即将有机相快速注入水相中，搅拌30min，得到玉米黄色素纳米脂质体悬浮液，将悬浮液减压旋转蒸发30min后，挥去残留乙醇，即得玉米黄色素纳米脂质体。
优选的，所述步骤S1中玉米粉碎过筛为过120目筛。
优选的，所述步骤S1中酶解温度为35-40℃。
优选的，所述步骤S1中对浸提液进行超声离心处理时，离心机的转速为4000r/min，离心时间为6min。
优选的，所述步骤S2中玉米黄色素相对于Na2HPO4KH2PO4缓冲液的添加量为5mg/mL。
优选的，所述步骤S4中蛋黄卵磷脂和胆固醇的质量比为4:1。
优选的，所述步骤S4中有机相与水相的搅拌温度为50℃。
本发明的技术效果和优点：该纳米脂质体制备方法，玉米黄色素的提取溶剂为无水乙醇，采用超声辅助酶法从玉米中提取玉米黄色素，以缩短提取时间并使提取更加充分，超声波借助机械振动，改变物质内部结构、状态、功能或加速这些过程，从而增加溶剂对细胞壁的穿透力，强化浸提过程，缩短浸提时间，碱性蛋白酶可有效降解蛋白质，释放玉米黄色素，提高玉米黄色素的有效溶出率，采用乙醇注入法制备玉米黄色素纳米脂质体是一种将玉米黄色素纳米化的有效手段之一，通过纳米化可提高玉米黄色素的稳定性、水溶性和体内外吸收效果，使其充分发挥生物活性，制备成具有良好稳定性和促进消化吸收的纳米结构体系，对于提高玉米黄色素的溶解性、稳定性和体内吸收利用率，为玉米黄色素在保健食品和药品领域的进一步深入研究和应用奠定了基础。
具体实施方式
下面将对本发明实施例中的技术方案进行清楚、完整地描述，显然，所描述的实施例仅仅是本发明一部分实施例，而不是全部的实施例。基于本发明中的实施例，本领域普通技术人员在没有做出创造性劳动前提下所获得的所有其他实施例，都属于本发明保护的范围。
一种纳米脂质体制备方法，包括以下步骤：
S1、玉米黄色素的提取：首先，对玉米预处理，将玉米洗净、脱粒并粉碎过筛备用，其次，取过筛后的玉米粉，加入碱性蛋白酶进行酶法提取，之后加入无水乙醇进行超声提取，再次，将加酶水解以及无水乙醇处理后浸提液进行超声离心处理，离心后取上清液通过三层纱布过滤，用旋转蒸发仪对滤液进行浓缩，最后，冷冻干燥得到玉米黄色素粉末；
S2、水相的制备：称取玉米黄色素和Tween80溶解于pH6.5、0.05mol/mL的Na2HPO4KH2PO4缓冲液中，制得水相；
S3、有机相的制备：蛋黄卵磷脂和胆固醇溶解于无水乙醇中，制得有机相；
S4、玉米黄色素纳米脂质体的制备：用注射器将步骤3中的脂质乙醇溶液，即有机相快速注入步骤2中溶有玉米黄色素和Tween-80的缓冲液中，即将有机相快速注入水相中，搅拌30min，得到玉米黄色素纳米脂质体悬浮液，将悬浮液减压旋转蒸发30min后，挥去残留乙醇，即得玉米黄色素纳米脂质体。
具体的，所述步骤S1中玉米粉碎过筛为过120目筛。
具体的，所述步骤S1中酶解温度为35-40℃。
具体的，所述步骤S1中对浸提液进行超声离心处理时，离心机的转速为4000r/min，离心时间为6min。
具体的，所述步骤S2中玉米黄色素相对于Na2HPO4KH2PO4缓冲液的添加量为5mg/mL。
具体的，所述步骤S4中蛋黄卵磷脂和胆固醇的质量比为4:1。
具体的，所述步骤S4中有机相与水相的搅拌温度为50℃。
该纳米脂质体制备方法，玉米黄色素的提取溶剂为无水乙醇，采用超声辅助酶法从玉米中提取玉米黄色素，以缩短提取时间并使提取更加充分，超声波借助机械振动，改变物质内部结构、状态、功能或加速这些过程，从而增加溶剂对细胞壁的穿透力，强化浸提过程，缩短浸提时间，碱性蛋白酶可有效降解蛋白质，释放玉米黄色素，提高玉米黄色素的有效溶出率，采用乙醇注入法制备玉米黄色素纳米脂质体是一种将玉米黄色素纳米化的有效手段之一，通过纳米化可提高玉米黄色素的稳定性、水溶性和体内外吸收效果，使其充分发挥生物活性，制备成具有良好稳定性和促进消化吸收的纳米结构体系，对于提高玉米黄色素的溶解性、稳定性和体内吸收利用率，为玉米黄色素在保健食品和药品领域的进一步深入研究和应用奠定了基础。
最后应说明的是：以上所述仅为本发明的优选实施例而已，并不用于限制本发明，尽管参照前述实施例对本发明进行了详细的说明，对于本领域的技术人员来说，其依然可以对前述各实施例所记载的技术方案进行修改，或者对其中部分技术特征进行等同替换，凡在本发明的精神和原则之内，所作的任何修改、等同替换、改进等，均应包含在本发明的保护范围之内。

Claims (7)

1.一种纳米脂质体制备方法，其特征在于，包括以下步骤：
S1、玉米黄色素的提取：首先，对玉米预处理，将玉米洗净、脱粒并粉碎过筛备用，其次，取过筛后的玉米粉，加入碱性蛋白酶进行酶法提取，之后加入无水乙醇进行超声提取，再次，将加酶水解以及无水乙醇处理后浸提液进行超声离心处理，离心后取上清液通过三层纱布过滤，用旋转蒸发仪对滤液进行浓缩，最后，冷冻干燥得到玉米黄色素粉末；
S2、水相的制备：称取玉米黄色素和Tween80溶解于pH6.5、0.05mol/mL的Na2HPO4KH2PO4缓冲液中，制得水相；
S3、有机相的制备：蛋黄卵磷脂和胆固醇溶解于无水乙醇中，制得有机相；
S4、玉米黄色素纳米脂质体的制备：用注射器将步骤3中的脂质乙醇溶液，即有机相快速注入步骤2中溶有玉米黄色素和Tween-80的缓冲液中，即将有机相快速注入水相中，搅拌30min，得到玉米黄色素纳米脂质体悬浮液，将悬浮液减压旋转蒸发30min后，挥去残留乙醇，即得玉米黄色素纳米脂质体。
2.根据权利要求1所述的一种纳米脂质体制备方法，其特征在于：所述步骤S1中玉米粉碎过筛为过120目筛。
3.根据权利要求1所述的一种纳米脂质体制备方法，其特征在于：所述步骤S1中酶解温度为35-40℃。
4.根据权利要求1所述的一种纳米脂质体制备方法，其特征在于：所述步骤S1中对浸提液进行超声离心处理时，离心机的转速为4000r/min，离心时间为6min。
5.根据权利要求1所述的一种纳米脂质体制备方法，其特征在于：所述步骤S2中玉米黄色素相对于Na2HPO4KH2PO4缓冲液的添加量为5mg/mL。
6.根据权利要求1所述的一种纳米脂质体制备方法，其特征在于：所述步骤S4中蛋黄卵磷脂和胆固醇的质量比为4:1。
7.根据权利要求1所述的一种纳米脂质体制备方法，其特征在于：所述步骤S4中有机相与水相的搅拌温度为50℃。
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