CN102944618A - 治疗胃病的中药制剂的含量检测方法 - Google Patents

Abstract

本发明公开了一种治疗胃病的中药制剂的含量检测方法，该方法对原有检测技术中金不换总碱中延胡索乙素的含量方法进行了改进，优选出最佳色谱条件，为保证金莲胃舒片或胶囊相关产品的质量稳定可控、疗效稳定确切提供了可靠保障。

Description

治疗胃病的中药制剂的含量检测方法

技术领域

本发明属于中药制剂的质量检测领域，尤其是一种治疗胃病的中药制剂的含量检测方法，涉及到由金不换提取物加枯矾、老蛇莲制成的治疗胃病的中药制剂，如金莲胃舒片或胶囊等制剂中金不换总碱中延胡索乙素的含量检测方法。

背景技术

金不换总碱为防己科植物金不换的干燥块跟经加工制成的提取物。目前市场上流通的有关制剂有金莲胃舒片，收载于《国家中成药标准汇编》中成药地方标准上升国家标准部分内科脾胃分册。金莲胃舒片是由金不换总碱、白矾（煅）、老蛇莲和辅料制备而成，具有舒肝和胃的功效，用于慢性胃炎、消化性溃疡见于肝胃不和兼胃热证所致的胃痛、返酸。现有的金莲胃舒片制剂质量检测方法含量测定项采用薄层扫描方法，质量不稳定，重现性差，不利于金莲胃舒片的质量稳定控制。

发明内容

本发明要解决的技术问题是提供一种稳定性佳、重现性好的治疗胃病的中药制剂的含量检测方法，特别适用于金莲胃舒片或胶囊等制剂中金不换总碱中延胡索乙素的含量检测，以利于有效控制有关产品的质量稳定。

为解决上述技术问题，本发明采用如下技术方案：治疗胃病的中药制剂的含量检测方法，该方法包括以下步骤：

（1）色谱条件与系统适用性试验以十八烷基硅烷键合硅胶为填充剂，以甲醇-水-三乙胺为流动相，检测波长为280nm；

（2）对照品溶液的制备取延胡索乙素对照品适量，精密称定，加甲醇制成每1ml含0.1mg的溶液，即得；

（3）供试品溶液的制备取该中药制剂0.4-0.6g，精密称定，置具塞锥形瓶中，精密加入甲醇20-40ml，密塞，称定重量，超声处理（功率160W、频率59HZ）25-45分钟，取出，放冷，再称定重量，用甲醇补足减失的重量，摇匀，滤过，取续滤液，作为供试品；

（4）含量测定方法分别精密吸取对照品溶液与供试品溶液各10μl，注入液相色谱仪，记录色谱图，按外标法分别以峰面积计算延胡索乙素的含量。

上述治疗胃病的中药制剂是由金不换提取物加枯矾、老蛇莲制成。

上述治疗胃病的中药制剂为金莲胃舒片或胶囊。

步骤（1）中色谱条件的流动相由甲醇-水-三乙胺的混合溶液组成，各组分的体积比为55-65：45-35：0.5。

各组分的体积比为65：35：0.5。

金莲胃舒片或胶囊中，以延胡索乙素（C₂₁H₂₅NO₄）计，每片或粒含金不换总碱不得少于0.6-1.8mg。

针对现有金不换总碱有关中药制剂质量检测方法存在的问题，发明人进行了改进，主要是采用优选色谱条件的高效液相色谱法测定制剂中延胡索乙素的含量，经多次实验验证，该方法稳定性佳、重现性好，可有效控制有关产品的质量稳定，保证生产工艺可控，为产品疗效稳定确切提供了可靠保障。

具体实施方式

以下结合实施例进一步说明本发明。

实施例1延胡索乙素的含量测定方法的研究

（1）仪器与试药

高效液相色谱仪：安捷伦1100，G1311A（四元泵），G1314A（VWD检测器），BP211D型十万分之一电子天平。

延胡索乙素对照品由中国药品生物制品检验所提供，供含量测定用，纯度为（98%以上），甲醇为色谱纯，水为二次蒸馏水，其他试剂均为分析纯。待检测的金莲胃舒片由广西万寿堂药业有限公司提供。

（2）色谱条件色谱柱

流动相体积比为甲醇-水-三乙胺（65：35：0.5），流速为1ml/min；检测波长：280nm。

（3）提取时间的选择

取金莲胃舒片约0.5g（批号：120601，规格：小片（薄膜衣片）），精密称定，以甲醇为提取溶剂，采用超声方法提取，不同时间的延胡索乙素的含量的测定结果如下表1：

表1  提取时间考察结果

结果表明：提取时间在20分钟的含量较低，而在30分钟、40分钟的时候含量无太大变化，优选提取时间为30分钟。

（4）流动相的选择

延胡索乙素含量测定选用甲醇：水：三乙胺不同比例为流动相，有些比例保留时间长，经调整比例后，采用体积比65：35：0.5的甲醇-水-三乙胺混合溶液为流动相，保留时间适宜，分离效果良好，峰型好。

（5）阴性对照试验

按处方配制不含金不换总碱的阴性对照制剂，按照对照品溶液制备方法制成阴性对照溶液。精密吸取对照品溶液、供试品溶液和阴性溶液各10μl，注入液相色谱仪，按上述色谱条件测定，记录液相图谱。在延胡索乙素对照品色谱峰相应位置上，供试品溶液有相同保留时间的色谱峰，而阴性液在此位置上无色谱峰。

（6）标准曲线的绘制及线性范围考察

对照品溶液的制备：取延胡索乙素对照品11.08mg，置100ml量瓶中，加甲醇溶解并稀释至刻度，摇匀，即得（每1ml含0.1108mg的延胡索乙素）。

标准曲线的绘制：分别精密吸取延胡索乙素对照品溶液2、4、6、8、10μl，按上述色谱条件进行色谱分析，结果见表2。

表2  线性范围考察结果

以进样量为横坐标，以色谱峰面积为纵坐标，经回归处理，得回归方程为Y=7884.4X-1429.7，相关系数为R²=0.9976。结果表明，延胡索乙素进样量在0.2172-1.0860μg范围内线性关系良好。

（7）精密度实验

精密吸取同一供试品溶液（批号：120601），分别测定5次，结果见表3。

表3  精密度考察结果

（8）重复性试验

取五份同一批号的金莲胃舒片（批号120601），分别按【含量测定】项下方法测定，结果见表4。

表4  重复性考察结果

结果表明，本方法的重复性较好。

（9）稳定性试验

取同一供试品溶液（批号：120601），每隔2个小时进样一次，分别测定其色谱峰面积，结果见表5。

表5  稳定性试验

结果表明，色谱峰面积在8个小时内基本无变化，表明本实验条件下稳定性良好。（10）回收率试验

取已知延胡索乙素的金莲胃舒片（批号：120601，规格：小片（薄膜衣片），含量为：1.21mg/片）5份，各0.25g，精密称定，置具塞锥形瓶中，再精密加入延胡索乙素对照品5ml（浓度为0.1108mg/ml），置具塞锥形瓶中，按【含量测定】项下的供试品溶液制备方法操作，注入液相色谱仪中测定，结果见表6。

表6  加样回收率考察结果

结果表明，本方法回收率较高。

实施例2金莲胃舒片中的延胡索乙素的含量测定

按照上述含量测定方法操作，分别测定金莲胃舒片10批的含量，测定结果见表7。

表7  10批样品的含测结果

10批金莲胃舒片（规格：小片（薄膜衣片））样品测定结果表明，10批样品中的延胡索乙素最低含量为1.140mg/片，依据其他剂型的含量限度，规定本品每单位剂量制剂含金不换以延胡索乙素计，不得少于0.6mg。

实施例3比较两种延胡索乙素的含量检测方法

原标准方法：取金莲胃舒片（批号：120601）20片，除去包衣，精密称定，研细，取3g，精密称定，置具塞锥形瓶中，加入浓氨试液5ml使湿润后，精密加入氯仿20ml，密塞，称定重量，浸渍2小时，超声处理30分钟，放冷，再称定重量，用氯仿补足减失的重量，摇匀，滤过，精密量取续滤液5ml，蒸干，残渣加甲醇适量使溶解，转移至2ml量瓶中，用甲醇稀释至刻度，摇匀，作为供试品溶液。另取延胡索乙素对照品适量，精密称定，加甲醇制成每1ml含0.5mg的溶液，作为对照品溶液。照薄层色谱法(中国药典2000年版一部附录ⅥB)试验，精密吸取供试品溶液2μl、对照品溶液2μl与4μl，分别交叉点于同一用1％氢氧化钠溶液制备的以羧甲基纤维素钠为黏合剂的硅胶G薄层板上，以石油醚(60～90℃)-醋酸乙酯(5:6)为展开剂，展开，取出，晾干。照薄层色谱法(中国药典2000年版一部附录ⅥB薄层扫描法)进行扫描，波长：λS=280nm，λR=360nm，测量供试品吸收度积分值与对照品吸收度积分值，计算，即得。测得含量：每片含金不换总碱以延胡索乙素(C₂₁H₂₅NO₄)计为0.98mg。

以本发明建立的标准是：色谱条件与系统适用性试验：以十八烷基硅烷键合硅胶为填充剂；以甲醇-水-三乙胺（65：35：0.5）为流动相；检测波长为280nm；

对照品溶液的制备：取延胡索乙素对照品适量，精密称定，加甲醇制成每1ml含0.1mg的溶液，即得；

供试品溶液的制备：取该中药制剂0.5g，精密称定，置具塞锥形瓶中，精密加入甲醇20ml，密塞，称定重量，超声处理（功率160W，频率59HZ）30分钟，取出，放冷，再称定重量，用甲醇补足减失的重量，摇匀，滤过，取续滤液，作为供试品；

含量测定方法：分别精密吸取对照品溶液与供试品溶液各10μl，注入液相色谱仪测定。

测得含量：每片含金不换总碱以延胡索乙素（C₂₁H₂₅NO₄）计为1.21mg。

原标准中含量测定的方法为薄层扫描法，这种方法对薄层板的要求及其显示效果较高，温湿度对它的影响较大，因此测出来的结果不稳定，重现性效果不好，不能很好的控制金莲胃舒片有效组分的含量。而本发明样品处理简单，含量检测方便，而且峰型、分离度、拖尾因子也较好。新方法的含量限度比原来方法的限度有所提高，通过大量的实验证明，采用本发明的新方法检测，金莲胃舒片含量都可以达到1mg/片以上，但又考虑到原料药材的差异性，因此把含量检测限度规定每小片不少于0.6mg（薄膜衣片或糖衣片每片重0.31g（小片））。

实施例4

取金莲胃舒片（批号：120601）按实施例3项下的新方法测定，流动相体积比改为甲醇-水-三乙胺（55：45：0.5），测得的含量每片含金不换总碱以延胡索乙素（C₂₁H₂₅NO₄）计为1.17mg。

实施例5

取金莲胃舒片（批号：120601）按实施例3项下的新方法测定，流动相体积比改为甲醇-水-三乙胺（60：40：0.5），测得的含量每片含金不换总碱以延胡索乙素（C₂₁H₂₅NO₄）计为1.06mg。

Claims (6)

1.一种治疗胃病的中药制剂的含量检测方法，其特征在于该方法包括以下步骤：

（1）色谱条件与系统适用性试验  以十八烷基硅烷键合硅胶为填充剂，以甲醇-水-三乙胺为流动相，检测波长为280nm；

（2）对照品溶液的制备  取延胡索乙素对照品适量，精密称定，加甲醇制成每1ml含0.1mg的溶液，即得；

（3）供试品溶液的制备  取该中药制剂0.4-0.6g，精密称定，置具塞锥形瓶中，精密加入甲醇20-40ml，密塞，称定重量，功率160W、频率59HZ超声处理25-45分钟，取出，放冷，再称定重量，用甲醇补足减失的重量，摇匀，滤过，取续滤液，作为供试品；

（4）含量测定方法  分别精密吸取对照品溶液与供试品溶液各10μl，注入液相色谱仪，记录色谱图，按外标法分别以峰面积计算延胡索乙素的含量。

2.根据权利要求1所述的治疗胃病的中药制剂的含量检测方法，其特征在于：所述治疗胃病的中药制剂是由金不换提取物加枯矾、老蛇莲制成。

3.根据权利要求2所述的治疗胃病的中药制剂的含量检测方法，其特征在于：所述治疗胃病的中药制剂为金莲胃舒片或胶囊。

4.根据权利要求3所述的治疗胃病的中药制剂的含量检测方法，其特征在于：步骤（1）中色谱条件的流动相由甲醇-水-三乙胺的混合溶液组成，各组分的体积比为55-65：45-35：0.5。

5.根据权利要求4所述的治疗胃病的中药制剂的含量检测方法，其特征在于：所述各组分的体积比为65：35：0.5。

6.根据权利要求4所述的治疗胃病的中药制剂的含量检测方法，其特征在于：所述金莲胃舒片或胶囊中，以延胡索乙素计，每片或粒含金不换总碱不得少于0.6-1.8mg。