CN102925418A - 一种α-熊果苷生产过程中蔗糖磷酸化酶的回收方法 - Google Patents
一种α-熊果苷生产过程中蔗糖磷酸化酶的回收方法 Download PDFInfo
- Publication number
- CN102925418A CN102925418A CN2012104747039A CN201210474703A CN102925418A CN 102925418 A CN102925418 A CN 102925418A CN 2012104747039 A CN2012104747039 A CN 2012104747039A CN 201210474703 A CN201210474703 A CN 201210474703A CN 102925418 A CN102925418 A CN 102925418A
- Authority
- CN
- China
- Prior art keywords
- sucrose
- sucrose phosphorylase
- arbutin
- recovery method
- alpha
- Prior art date
- Legal status (The legal status is an assumption and is not a legal conclusion. Google has not performed a legal analysis and makes no representation as to the accuracy of the status listed.)
- Granted
Links
- 238000000034 method Methods 0.000 title claims abstract description 30
- BJRNKVDFDLYUGJ-ZIQFBCGOSA-N alpha-Arbutin Chemical compound O[C@@H]1[C@@H](O)[C@H](O)[C@@H](CO)O[C@@H]1OC1=CC=C(O)C=C1 BJRNKVDFDLYUGJ-ZIQFBCGOSA-N 0.000 title claims abstract description 25
- 229940033280 alpha-arbutin Drugs 0.000 title claims abstract description 25
- CZMRCDWAGMRECN-UGDNZRGBSA-N Sucrose Chemical compound O[C@H]1[C@H](O)[C@@H](CO)O[C@@]1(CO)O[C@@H]1[C@H](O)[C@@H](O)[C@H](O)[C@@H](CO)O1 CZMRCDWAGMRECN-UGDNZRGBSA-N 0.000 title claims abstract description 21
- 229930006000 Sucrose Natural products 0.000 title claims abstract description 21
- 239000005720 sucrose Substances 0.000 title claims abstract description 21
- 238000004519 manufacturing process Methods 0.000 title claims abstract description 12
- 238000004064 recycling Methods 0.000 title claims abstract description 11
- 238000006243 chemical reaction Methods 0.000 claims abstract description 51
- 102000004190 Enzymes Human genes 0.000 claims abstract description 40
- 108090000790 Enzymes Proteins 0.000 claims abstract description 40
- 239000007788 liquid Substances 0.000 claims abstract description 21
- 239000000654 additive Substances 0.000 claims abstract description 14
- 230000000996 additive effect Effects 0.000 claims abstract description 13
- 239000000919 ceramic Substances 0.000 claims abstract description 13
- 102000004169 proteins and genes Human genes 0.000 claims abstract description 10
- 108090000623 proteins and genes Proteins 0.000 claims abstract description 10
- 239000003054 catalyst Substances 0.000 claims abstract description 4
- 239000000758 substrate Substances 0.000 claims abstract description 3
- 108020000005 Sucrose phosphorylase Proteins 0.000 claims description 70
- 238000011084 recovery Methods 0.000 claims description 38
- 239000012528 membrane Substances 0.000 claims description 31
- 238000000108 ultra-filtration Methods 0.000 claims description 15
- 239000000126 substance Substances 0.000 claims description 10
- HDTRYLNUVZCQOY-UHFFFAOYSA-N α-D-glucopyranosyl-α-D-glucopyranoside Natural products OC1C(O)C(O)C(CO)OC1OC1C(O)C(O)C(O)C(CO)O1 HDTRYLNUVZCQOY-UHFFFAOYSA-N 0.000 claims description 8
- HDTRYLNUVZCQOY-WSWWMNSNSA-N Trehalose Natural products O[C@@H]1[C@@H](O)[C@@H](O)[C@@H](CO)O[C@@H]1O[C@@H]1[C@H](O)[C@@H](O)[C@@H](O)[C@@H](CO)O1 HDTRYLNUVZCQOY-WSWWMNSNSA-N 0.000 claims description 8
- 238000003756 stirring Methods 0.000 claims description 8
- FBPFZTCFMRRESA-KVTDHHQDSA-N D-Mannitol Chemical compound OC[C@@H](O)[C@@H](O)[C@H](O)[C@H](O)CO FBPFZTCFMRRESA-KVTDHHQDSA-N 0.000 claims description 6
- 229920002307 Dextran Polymers 0.000 claims description 6
- 229930195725 Mannitol Natural products 0.000 claims description 6
- HDTRYLNUVZCQOY-LIZSDCNHSA-N alpha,alpha-trehalose Chemical compound O[C@@H]1[C@@H](O)[C@H](O)[C@@H](CO)O[C@@H]1O[C@@H]1[C@H](O)[C@@H](O)[C@H](O)[C@@H](CO)O1 HDTRYLNUVZCQOY-LIZSDCNHSA-N 0.000 claims description 6
- 229920002301 cellulose acetate Polymers 0.000 claims description 6
- 239000000594 mannitol Substances 0.000 claims description 6
- 235000010355 mannitol Nutrition 0.000 claims description 6
- 239000000203 mixture Substances 0.000 claims description 5
- 241000894006 Bacteria Species 0.000 claims description 4
- 239000000835 fiber Substances 0.000 claims description 4
- 229920002492 poly(sulfone) Polymers 0.000 claims description 4
- 230000000968 intestinal effect Effects 0.000 claims description 3
- 125000000647 trehalose group Chemical group 0.000 claims 2
- 238000006555 catalytic reaction Methods 0.000 abstract description 10
- QIGBRXMKCJKVMJ-UHFFFAOYSA-N Hydroquinone Chemical compound OC1=CC=C(O)C=C1 QIGBRXMKCJKVMJ-UHFFFAOYSA-N 0.000 abstract 2
- 239000012295 chemical reaction liquid Substances 0.000 abstract 2
- 241000628997 Flos Species 0.000 abstract 1
- 239000000463 material Substances 0.000 abstract 1
- BJRNKVDFDLYUGJ-RMPHRYRLSA-N hydroquinone O-beta-D-glucopyranoside Chemical compound O[C@@H]1[C@@H](O)[C@H](O)[C@@H](CO)O[C@H]1OC1=CC=C(O)C=C1 BJRNKVDFDLYUGJ-RMPHRYRLSA-N 0.000 description 15
- 238000013019 agitation Methods 0.000 description 8
- 239000000047 product Substances 0.000 description 8
- 239000000376 reactant Substances 0.000 description 7
- 230000009466 transformation Effects 0.000 description 7
- 239000011148 porous material Substances 0.000 description 6
- 229960000271 arbutin Drugs 0.000 description 5
- BJRNKVDFDLYUGJ-UHFFFAOYSA-N p-hydroxyphenyl beta-D-alloside Natural products OC1C(O)C(O)C(CO)OC1OC1=CC=C(O)C=C1 BJRNKVDFDLYUGJ-UHFFFAOYSA-N 0.000 description 5
- 230000000694 effects Effects 0.000 description 4
- 244000005700 microbiome Species 0.000 description 3
- 238000002360 preparation method Methods 0.000 description 3
- 230000006098 transglycosylation Effects 0.000 description 3
- 238000005918 transglycosylation reaction Methods 0.000 description 3
- 230000002087 whitening effect Effects 0.000 description 3
- 241000196324 Embryophyta Species 0.000 description 2
- 230000004048 modification Effects 0.000 description 2
- 238000012986 modification Methods 0.000 description 2
- 238000000926 separation method Methods 0.000 description 2
- 241001656831 Arctous alpina Species 0.000 description 1
- 102000051366 Glycosyltransferases Human genes 0.000 description 1
- 108700023372 Glycosyltransferases Proteins 0.000 description 1
- 206010062717 Increased upper airway secretion Diseases 0.000 description 1
- 108010043943 Starch Phosphorylase Proteins 0.000 description 1
- 102000003425 Tyrosinase Human genes 0.000 description 1
- 108060008724 Tyrosinase Proteins 0.000 description 1
- 230000000954 anitussive effect Effects 0.000 description 1
- 230000003110 anti-inflammatory effect Effects 0.000 description 1
- 229940124584 antitussives Drugs 0.000 description 1
- 230000001580 bacterial effect Effects 0.000 description 1
- 230000009286 beneficial effect Effects 0.000 description 1
- 230000003115 biocidal effect Effects 0.000 description 1
- 230000002860 competitive effect Effects 0.000 description 1
- ZZVUWRFHKOJYTH-UHFFFAOYSA-N diphenhydramine Chemical compound C=1C=CC=CC=1C(OCCN(C)C)C1=CC=CC=C1 ZZVUWRFHKOJYTH-UHFFFAOYSA-N 0.000 description 1
- 239000003814 drug Substances 0.000 description 1
- 238000005516 engineering process Methods 0.000 description 1
- 238000000855 fermentation Methods 0.000 description 1
- 230000004151 fermentation Effects 0.000 description 1
- 239000000706 filtrate Substances 0.000 description 1
- 229930182478 glucoside Natural products 0.000 description 1
- 150000008131 glucosides Chemical class 0.000 description 1
- 208000026435 phlegm Diseases 0.000 description 1
- 239000000419 plant extract Substances 0.000 description 1
- 238000000746 purification Methods 0.000 description 1
- 230000035484 reaction time Effects 0.000 description 1
- 230000000452 restraining effect Effects 0.000 description 1
- 230000006641 stabilisation Effects 0.000 description 1
- 238000011105 stabilization Methods 0.000 description 1
- 239000003206 sterilizing agent Substances 0.000 description 1
- 238000003786 synthesis reaction Methods 0.000 description 1
- 210000003708 urethra Anatomy 0.000 description 1
- 230000003245 working effect Effects 0.000 description 1
Landscapes
- Preparation Of Compounds By Using Micro-Organisms (AREA)
Abstract
本发明提供了一种α-熊果苷生产过程中蔗糖磷酸化酶的回收方法，所述α-熊果苷生产过程以蔗糖和氢醌为底物，利用游离的蔗糖磷酸化酶粗酶液作为催化剂催化合成α-熊果苷。反应结束后，首先向反应液中加入一定浓度的添加剂以提高其稳定性，然后利用陶瓷膜过滤除去不溶性的絮状物质以及一些大分子蛋白，再利用孔径较小的超滤膜进行游离蔗糖磷酸化酶的回收，最后利用回收的蔗糖磷酸化酶进行下一批次的催化反应。反复操作，达到重复利用蔗糖磷酸化酶的目的。本发明首次提出蔗糖磷酸化酶的回收利用，并且该方法对于降低膜污染，延长膜的使用寿命，降低生产成本等都具有重大意义，从而使得游离蔗糖磷酸化酶在酶催化领域有很好的应用前景。
Description
技术领域
本发明属于生物化工领域，涉及一种α-熊果苷生产过程中蔗糖磷酸化酶的回收方法。
背景技术
熊果苷是一种氢醌的葡萄糖苷衍生物，首次发现于熊果属的植物叶子中。熊果苷具有镇咳、祛痰、抗炎、抗菌等生理活性，因而被用作镇咳药物和尿道消毒剂等使用。更为重要的是，熊果苷能够抑制酪氨酸酶的活性，从而遏制黑色素的生长，因此可以作为一种美白成分添加于化妆品中。熊果苷有两种异构体：α-熊果苷和β-熊果苷。其中，α-熊果苷的结构比β-熊果苷更稳定，美白效果是β-熊果苷10倍以上，并且对表皮细胞的正常生长没有影响，具有稳定、有效、安全的特点，因此α-熊果苷是21世纪最有竞争力的美白添加剂之一。
α-熊果苷与β-熊果苷的来源有所不同，β-熊果苷可以通过植物提取、植物细胞培养、有机合成以及糖基转移酶或糖苷酶的转糖基反应或逆水解反应获得。，而α-熊果苷一般只能通过微生物直接转化或或微生物的酶催化转糖基反应获得。但通过微生物直接转化制备熊果苷的产率较低，而糖苷酶的价格昂贵，只适于实验室制备，都不适用于工业化大规模生产α-熊果苷。因而较低成本的获得高酶活的糖苷酶对于生产催化合成α-熊果苷十分必要。
专利201110009399.6公开了一株表达重组蔗糖磷酸化酶的大肠杆菌，利用该菌发酵可以生成高酶活的蔗糖磷酸化酶，并且利用该酶催化蔗糖和氢醌进行转糖基反应可以大量生产α-熊果苷，生产成本相对于直接利用糖苷酶低。此外由于整个酶催化反应的条件温和，反应时间短，所以反应结束后，反应液中蔗糖磷酸化酶的酶活仍然较高。因此回收并重复利用蔗糖磷酸化酶，可以进一步降低生产成本。
固定化蔗糖磷酸化酶可以重复利用，这可以在一定程度上降低酶的使用成 成本较高。但整个酶的固定化成本也比较高，包括酶的分离纯化成本及固定化成本。因此直接利用非固定的即游离的蔗糖磷酸化酶作为催化剂，可有效地省去酶的分离、纯化、固定化等过程，大大降低酶的制备成本。在利用游离的蔗糖磷酸化酶催化合成α-熊果苷的过程中，能否实现非固定化蔗糖磷酸化酶的多次回收利用是降低酶成本的关键，也是游离蔗糖磷酸化酶能否应用于工业化生产α-熊果苷的制约因素。
发明内容
本发明的目的在于提供一种α-熊果苷生产过程中蔗糖磷酸化酶的回收方法，有效地解决游离蔗糖磷酸化酶的回收利用，使得蔗糖磷酸化酶的使用成本显著降低，对于游离蔗糖磷酸化酶应用于酶催化领域有着重大的意义。
本发明以蔗糖和氢醌为底物，利用游离蔗糖磷酸化酶粗酶液作为催化剂催化生产α-熊果苷，反应结束后，利用膜分离方法进行游离蔗糖磷酸化酶的回收，再利用回收的蔗糖磷酸化酶进行下一批次的催化反应。
本发明中，利用游离的蔗糖磷酸化酶粗酶液作为催化剂催化合成α-熊果苷可以采用现有技术公开的任一种技术方案，作为本发明的最佳实施方式，优选合成过程为：加入浓度为20-50% (w/v) 的蔗糖，浓度为1-5% (w/v)的氢醌，酶活为100-300 U/mL的蔗糖磷酸化酶粗酶液，反应pH为6-7， 反应温度为20-40 ℃，轻微搅拌，反应20-30h后，氢醌的转化率可达到90%，更优选合成过程为：将浓度为20% (w/v) 的蔗糖，浓度为:2% (w/v) 的氢醌，酶活为200U/mL的蔗糖磷酸化酶酶液置于反应器中，调节pH 至6， 反应温度为35 ℃，轻微搅拌，反应24h。。
上述合成反应结束后，首先加入浓度为1%-10%（w/v）的稳定添加剂，然后利用陶瓷膜过滤除去不溶性的絮状物质以及一些大分子蛋白，再利用孔径较小的超滤膜进行游离蔗糖磷酸化酶的回收。该超滤回收过程中，α-熊果苷作为滤出液滤出，收集处理后可得合成产物α-熊果苷。
本发明所述的蔗糖磷酸化酶的回收方法，蔗糖磷酸化酶的回收率达到95%以上，回收的酶液中残留的反应物以及产物均小于5%。最后利用回收的蔗糖磷酸化酶进行下一批次的催化合成α-熊果苷，除了不需要另外添加酶液以外，其他反应条件与前一批次相同，这样可以达到反复使用蔗糖磷酸化酶的目的。如此进行5个批次反应后，回收的蔗糖磷酸化酶的活性还可以保持在初始酶活的85%以上。
本发明所述蔗糖磷酸化酶为游离的蔗糖磷酸化酶粗酶液，理论上所述的蔗糖磷酸化酶可以来源于多种菌株，为实现更好的回收效果，本发明优先考虑大肠杆菌sp1515，该酶在催化反应结束之后仍然具有较高的酶活力。
本发明所述的添加剂为海藻糖、葡聚糖和/或甘露醇，所述添加剂的用量为反应液的1%-10%（w/v）。优选地，所述的添加剂为相当于反应液5%（w/v）的海藻糖、葡聚糖或甘露醇。更优选所述的添加剂为相当于反应液5%（w/v）的海藻糖。
本发明所述的蔗糖磷酸化酶的回收方法中，特别的使用了添加剂来增强蔗糖磷酸化酶的稳定性，使得回收过程中蔗糖磷酸化酶的酶活损失较少。
本发明所述的蔗糖磷酸化酶的回收方法中，所述陶瓷膜的孔径为0.1-0.15μm，优选为0.12μm。
本发明所述的蔗糖磷酸化酶的回收方法中，所述超滤膜为醋酸纤维膜、混合纤维膜或聚砜膜，优选醋酸纤维膜膜，所述超滤膜的截留分子量为2000-10000Da，优选为5000Da。
采用上述技术方案，本发明的有益效果在于：本发明首次提出利用膜回收游离蔗糖磷酸化酶，有效地解决游离蔗糖磷酸化酶的回收利用。并通过加入添加剂，增加回收过程中酶的稳定性，提高了酶活的回收率。此外先利用陶瓷膜过滤除去不溶性的絮状物质以及一些大分子蛋白，然后再利用孔径较小的超滤膜进行游离蔗糖磷酸化酶的回收，对于降低膜污染，延长膜的使用寿命，降低生产成本等都具有重大意义，从而使得游离蔗糖磷酸化酶在酶催化领域有很好的应用前景。
具体实施方式
以下结合实施例对本发明做进一步描述。
实施例1：
将浓度为20% (w/v) 的蔗糖，浓度为1.6% (w/v) 的氢醌，酶活为200U/mL的蔗糖磷酸化酶酶液置于反应器中，调节pH 至6， 反应温度为25 ℃，轻微搅拌，反应24h。在此反应条件下，氢醌的转化率可达到90%。
反应结束后，向反应液中加入相当于反应液5%（w/v）的海藻糖并搅拌均匀，先利用膜孔径为0.15μm的陶瓷膜过滤除去不溶性的絮状物质以及一些大分子蛋白，然后利用截留分子量为5000Da的醋酸纤维膜进行超滤，回收游离的蔗糖磷酸化酶。蔗糖磷酸化酶的回收率达到97%，回收的酶液中残留的反应物以及产物均小于5%。
实施例2：
将浓度为20% (w/v) 的蔗糖，浓度为1.6% (w/v) 的氢醌，酶活为200U/mL的蔗糖磷酸化酶酶液置于反应器中，调节pH 至6， 反应温度为25 ℃，轻微搅拌，反应24h。在此反应条件下，氢醌的转化率可达到90%。
反应结束后，向反应液中加入相当于反应液5%（w/v）的海藻糖并搅拌均匀，先利用膜孔径为0.1μm的陶瓷膜过滤除去不溶性的絮状物质以及一些大分子蛋白，然后利用截留分子量为2000Da的醋酸纤维膜进行超滤，回收游离的蔗糖磷酸化酶。蔗糖磷酸化酶的回收率达到93%，回收的酶液中残留的反应物以及产物均小于5%。
实施例3：
将浓度为20% (w/v) 的蔗糖，浓度为1.8% (w/v) 的氢醌，酶活为200U/mL的蔗糖磷酸化酶酶液置于反应器中，调节pH 至6， 反应温度为30 ℃，轻微搅拌，反应24h。在此反应条件下，氢醌的转化率可达到85%。
反应结束后，向反应液中加入相当于反应液5%（w/v）的葡聚糖并搅拌均匀，先利用膜孔径为0.15μm的陶瓷膜过滤除去不溶性的絮状物质以及一些大分子蛋白，然后利用截留分子量为5000Da的混合纤维膜进行超滤，回收游离的蔗糖磷酸化酶。蔗糖磷酸化酶的回收率达到90%，回收的酶液中残留的反应物以及产物均小于5%。
实施例4：
将浓度为20% (w/v) 的蔗糖，浓度为1.8% (w/v) 的氢醌，酶活为200U/mL的蔗糖磷酸化酶酶液置于反应器中，调节pH 至6， 反应温度为30 ℃，轻微搅拌，反应24h。在此反应条件下，氢醌的转化率可达到85%。
反应结束后，向反应液中加入相当于反应液3%（w/v）的葡聚糖并搅拌均匀，先利用膜孔径为0.1μm的陶瓷膜过滤除去不溶性的絮状物质以及一些大分子蛋白，然后利用截留分子量为10000Da的混合纤维膜进行超滤，回收游离的蔗糖磷酸化酶。蔗糖磷酸化酶的回收率达到86%，回收的酶液中残留的反应物以及产物均小于5%。
实施例5：
将浓度为20% (w/v) 的蔗糖，浓度为:2% (w/v) 的氢醌，酶活为200U/mL的蔗糖磷酸化酶酶液置于反应器中，调节pH 至6， 反应温度为35 ℃，轻微搅拌，反应24h。在此反应条件下，氢醌的转化率可达到81%。
反应结束后，向反应液中加入相当于反应液5%（w/v）的甘露醇并搅拌均匀，先利用膜孔径为0.15μm的陶瓷膜过滤除去不溶性的絮状物质以及一些大分子蛋白，然后利用截留分子量为5000Da的聚砜膜进行超滤，回收游离的蔗糖磷酸化酶。蔗糖磷酸化酶的回收率达到88%，回收的酶液中残留的反应物以及产物均小于5%。
实施例6：
将浓度为20% (w/v) 的蔗糖，浓度为:2% (w/v) 的氢醌，酶活为200U/mL的蔗糖磷酸化酶酶液置于反应器中，调节pH 至6， 反应温度为35 ℃，轻微搅拌，反应24h。在此反应条件下，氢醌的转化率可达到81%。
反应结束后，向反应液中加入相当于反应液3%（w/v）的甘露醇并搅拌均匀，先利用膜孔径为0.15μm的陶瓷膜过滤除去不溶性的絮状物质以及一些大分子蛋白，然后利用截留分子量为2000Da的聚砜膜进行超滤，回收游离的蔗糖磷酸化酶。蔗糖磷酸化酶的回收率达到84%，回收的酶液中残留的反应物以及产物均小于5%。
虽然，上文中已经用一般性说明、具体实施方式及试验，对本发明作了详尽的描述，但在本发明基础上，可以对之作一些修改或改进，这对本领域技术人员而言是显而易见的。因此，在不偏离本发明精神的基础上所做的这些修改或改进，均属于本发明要求保护的范围。
Claims (10)
1. 一种α-熊果苷生产过程中蔗糖磷酸化酶的回收方法，以蔗糖和氢醌为底物，利用游离的蔗糖磷酸化酶粗酶液作为催化剂催化合成α-熊果苷，其特征在于：合成反应结束后，首先向除去α-熊果苷的反应液中加入添加剂以增加蔗糖磷酸化酶的稳定性，然后利用陶瓷膜过滤除去不溶性的絮状物质以及大分子蛋白，再利用超滤膜进行游离蔗糖磷酸化酶的回收。
2.根据权利要求1所述的蔗糖磷酸化酶的回收方法，其特征在于，所述蔗糖磷酸化酶来源于大肠杆菌sp1515。
3. 根据权利要求1所述的蔗糖磷酸化酶的回收方法，其特征在于，所述的添加剂为海藻糖、葡聚糖或甘露醇，所述添加剂的用量为反应液质量体积比的1%-10%。
4. 根据权利要求3所述的蔗糖磷酸化酶的回收方法，其特征在于，所述的添加剂为相当于反应液质量体积比5%的海藻糖、葡聚糖或甘露醇，并搅拌均匀 。
5. 根据权利要求4所述的蔗糖磷酸化酶的回收方法，其特征在于，所述的添加剂为相当于反应液质量体积比5%的海藻糖，并搅拌均匀。
6. 根据权利要求1所述的蔗糖磷酸化酶的回收方法，其特征在于，所述陶瓷膜的孔径为0.1-0.2μm。
7. 根据权利要求6所述的蔗糖磷酸化酶的回收方法，其特征在于，所述陶瓷膜的孔径为0.15μm。
8. 根据权利要求1所述的蔗糖磷酸化酶的回收方法，其特征在于，所述超滤膜为醋酸纤维膜、混合纤维膜或聚砜膜。
9. 根据权利要求1所述的蔗糖磷酸化酶的回收方法，其特征在于，所述超滤膜为醋酸纤维膜。
10. 根据权利要求1-9任一项所述的蔗糖磷酸化酶的回收方法，其特征在于，所述超滤膜的截留分子量为2000-10000Da。
Priority Applications (1)
| Application Number | Priority Date | Filing Date | Title |
|---|---|---|---|
| CN201210474703.9A CN102925418B (zh) | 2012-11-21 | 2012-11-21 | 一种α-熊果苷生产过程中蔗糖磷酸化酶的回收方法 |
Applications Claiming Priority (1)
| Application Number | Priority Date | Filing Date | Title |
|---|---|---|---|
| CN201210474703.9A CN102925418B (zh) | 2012-11-21 | 2012-11-21 | 一种α-熊果苷生产过程中蔗糖磷酸化酶的回收方法 |
Publications (2)
| Publication Number | Publication Date |
|---|---|
| CN102925418A true CN102925418A (zh) | 2013-02-13 |
| CN102925418B CN102925418B (zh) | 2014-08-20 |
Family
ID=47640349
Family Applications (1)
| Application Number | Title | Priority Date | Filing Date |
|---|---|---|---|
| CN201210474703.9A Active CN102925418B (zh) | 2012-11-21 | 2012-11-21 | 一种α-熊果苷生产过程中蔗糖磷酸化酶的回收方法 |
Country Status (1)
| Country | Link |
|---|---|
| CN (1) | CN102925418B (zh) |
Cited By (5)
| Publication number | Priority date | Publication date | Assignee | Title |
|---|---|---|---|---|
| CN105400851A (zh) * | 2015-12-25 | 2016-03-16 | 天津宏顺科生物科技有限公司 | α-熊果苷的制备方法 |
| CN108329363A (zh) * | 2018-01-30 | 2018-07-27 | 合肥华恒生物工程有限公司 | α-熊果苷转化液中氢醌的去除方法 |
| CN110272326A (zh) * | 2019-06-01 | 2019-09-24 | 苏州禾研生物技术有限公司 | 一种熊果苷生产中废液回收的方法 |
| CN110452845A (zh) * | 2019-08-15 | 2019-11-15 | 江南大学 | 一种产蔗糖磷酸化酶的大肠杆菌 |
| CN114262703A (zh) * | 2021-12-31 | 2022-04-01 | 保龄宝生物股份有限公司 | 一种利用膜富集d-阿洛酮糖3-差向异构酶的方法及应用 |
-
2012
- 2012-11-21 CN CN201210474703.9A patent/CN102925418B/zh active Active
Non-Patent Citations (3)
| Title |
|---|
| 《生物技术通报》 20111231 候顾伟等 蔗糖磷酸化酶的分离纯化及其催化合成alpha-熊国苷的研究 第182-186页 1-10 , * |
| 候顾伟等: "蔗糖磷酸化酶的分离纯化及其催化合成α-熊国苷的研究", 《生物技术通报》 * |
| 林细才等: "糖化酶废液超滤回收技术", 《水处理技术》 * |
Cited By (6)
| Publication number | Priority date | Publication date | Assignee | Title |
|---|---|---|---|---|
| CN105400851A (zh) * | 2015-12-25 | 2016-03-16 | 天津宏顺科生物科技有限公司 | α-熊果苷的制备方法 |
| CN108329363A (zh) * | 2018-01-30 | 2018-07-27 | 合肥华恒生物工程有限公司 | α-熊果苷转化液中氢醌的去除方法 |
| CN110272326A (zh) * | 2019-06-01 | 2019-09-24 | 苏州禾研生物技术有限公司 | 一种熊果苷生产中废液回收的方法 |
| CN110452845A (zh) * | 2019-08-15 | 2019-11-15 | 江南大学 | 一种产蔗糖磷酸化酶的大肠杆菌 |
| CN110452845B (zh) * | 2019-08-15 | 2021-03-02 | 江南大学 | 一种产蔗糖磷酸化酶的大肠杆菌 |
| CN114262703A (zh) * | 2021-12-31 | 2022-04-01 | 保龄宝生物股份有限公司 | 一种利用膜富集d-阿洛酮糖3-差向异构酶的方法及应用 |
Also Published As
| Publication number | Publication date |
|---|---|
| CN102925418B (zh) | 2014-08-20 |
Similar Documents
| Publication | Publication Date | Title |
|---|---|---|
| CN102925418B (zh) | 一种α-熊果苷生产过程中蔗糖磷酸化酶的回收方法 | |
| CN107217048A (zh) | 一种催化合成肌肽的氨肽酶及其制备方法和应用 | |
| CN111876452A (zh) | 一种利用生物酶一锅法制备玻色因的方法 | |
| CN103509843A (zh) | 一种高产率制备单葡萄糖醛酸甘草次酸的方法 | |
| CN100478451C (zh) | 游离细胞或固定化细胞催化合成α-熊果苷的方法 | |
| CN103805657A (zh) | 游离细胞催化固定化对苯二酚合成α-熊果苷的方法 | |
| CN104762360A (zh) | 新特性腈水合酶诱导的高含量烟酰胺合成 | |
| CN104059952A (zh) | 固定化全细胞组合物催化合成(s)-n-叔丁氧羰基-3-羟基哌啶的方法 | |
| CN108285908B (zh) | 一种固定化双酶催化合成(s)-1-(2,6-二氯-3-氟-苯基)乙醇的方法 | |
| CN109055454A (zh) | 一种饲料级烟酸的分离提取方法 | |
| CN101709322A (zh) | 生物催化白桦脂醇合成白桦脂酸的方法 | |
| CN109988784B (zh) | 一种固定化甘醇酸氧化酶催化合成丙酮酸的方法 | |
| CN109706204B (zh) | 一种固定化大肠杆菌制备胸苷的方法 | |
| CN102517362A (zh) | 一种利用脂肪酶催化合成α-熊果苷的方法 | |
| CN111065644B (zh) | 一种制备高纯度nad的方法 | |
| CN102212565A (zh) | 一种超低电导率30%丙烯酰胺水溶液的制备方法 | |
| JP3845912B2 (ja) | エリスリトールの製造方法 | |
| CN108315375B (zh) | 一种氧化型烟酰胺腺嘌呤二核苷酸磷酸的生产方法 | |
| CN111763626A (zh) | 一种固定化酶法催化合成没食子酸丙酯的方法 | |
| CN101875889A (zh) | 一种黄酒酿造酵母的固定化方法 | |
| CN105154424A (zh) | 一种固定化环脂肽脱酰酶的制备方法及其应用 | |
| CN1163598C (zh) | 用动物肠衣膜固定化生物催化剂的方法及其用途 | |
| CN112457307B (zh) | 一种r-奎宁醇的提取方法 | |
| CN102517274B (zh) | 一种制备固定化腈水解酶的方法 | |
| CN104313074A (zh) | 一种青霉催化生产吡啶基乙醇方法 |
Legal Events
| Date | Code | Title | Description |
|---|---|---|---|
| C06 | Publication | ||
| PB01 | Publication | ||
| C10 | Entry into substantive examination | ||
| SE01 | Entry into force of request for substantive examination | ||
| C14 | Grant of patent or utility model | ||
| C53 | Correction of patent of invention or patent application | ||
| CB03 | Change of inventor or designer information |
Inventor after: Ma Jiangfeng Inventor after: Wan Yuejia Inventor after: He Aiyong Inventor after: Jiang Min Inventor after: Zhang Min Inventor after: Chen Kequan Inventor after: Wei Ping Inventor after: Ouyang Pingkai Inventor before: Jiang Min Inventor before: Wan Yuejia Inventor before: He Aiyong Inventor before: Ma Jiangfeng Inventor before: Zhang Min Inventor before: Chen Kequan Inventor before: Wei Ping Inventor before: Ouyang Pingkai |
|
| COR | Change of bibliographic data |
Free format text: CORRECT: INVENTOR; FROM: JIANG MIN WAN YUEJIA HE AIYONG MA JIANGFENG ZHANG MIN CHEN KEQUAN WEI PINGOUYANG PINGKAI TO: MA JIANGFENG WAN YUEJIA HE AIYONG JIANG MIN ZHANG MIN CHEN KEQUAN WEI PING OUYANG PINGKAI |
|
| GR01 | Patent grant |