CN111763626A - 一种固定化酶法催化合成没食子酸丙酯的方法 - Google Patents
一种固定化酶法催化合成没食子酸丙酯的方法 Download PDFInfo
- Publication number
- CN111763626A CN111763626A CN202010535954.8A CN202010535954A CN111763626A CN 111763626 A CN111763626 A CN 111763626A CN 202010535954 A CN202010535954 A CN 202010535954A CN 111763626 A CN111763626 A CN 111763626A
- Authority
- CN
- China
- Prior art keywords
- graphene
- immobilized enzyme
- propyl gallate
- tannase
- stirring
- Prior art date
- Legal status (The legal status is an assumption and is not a legal conclusion. Google has not performed a legal analysis and makes no representation as to the accuracy of the status listed.)
- Pending
Links
Classifications
-
- C—CHEMISTRY; METALLURGY
- C12—BIOCHEMISTRY; BEER; SPIRITS; WINE; VINEGAR; MICROBIOLOGY; ENZYMOLOGY; MUTATION OR GENETIC ENGINEERING
- C12N—MICROORGANISMS OR ENZYMES; COMPOSITIONS THEREOF; PROPAGATING, PRESERVING, OR MAINTAINING MICROORGANISMS; MUTATION OR GENETIC ENGINEERING; CULTURE MEDIA
- C12N1/00—Microorganisms, e.g. protozoa; Compositions thereof; Processes of propagating, maintaining or preserving microorganisms or compositions thereof; Processes of preparing or isolating a composition containing a microorganism; Culture media therefor
- C12N1/14—Fungi; Culture media therefor
-
- C—CHEMISTRY; METALLURGY
- C12—BIOCHEMISTRY; BEER; SPIRITS; WINE; VINEGAR; MICROBIOLOGY; ENZYMOLOGY; MUTATION OR GENETIC ENGINEERING
- C12N—MICROORGANISMS OR ENZYMES; COMPOSITIONS THEREOF; PROPAGATING, PRESERVING, OR MAINTAINING MICROORGANISMS; MUTATION OR GENETIC ENGINEERING; CULTURE MEDIA
- C12N11/00—Carrier-bound or immobilised enzymes; Carrier-bound or immobilised microbial cells; Preparation thereof
- C12N11/14—Enzymes or microbial cells immobilised on or in an inorganic carrier
-
- C—CHEMISTRY; METALLURGY
- C12—BIOCHEMISTRY; BEER; SPIRITS; WINE; VINEGAR; MICROBIOLOGY; ENZYMOLOGY; MUTATION OR GENETIC ENGINEERING
- C12N—MICROORGANISMS OR ENZYMES; COMPOSITIONS THEREOF; PROPAGATING, PRESERVING, OR MAINTAINING MICROORGANISMS; MUTATION OR GENETIC ENGINEERING; CULTURE MEDIA
- C12N9/00—Enzymes; Proenzymes; Compositions thereof; Processes for preparing, activating, inhibiting, separating or purifying enzymes
- C12N9/14—Hydrolases (3)
- C12N9/16—Hydrolases (3) acting on ester bonds (3.1)
- C12N9/18—Carboxylic ester hydrolases (3.1.1)
-
- C—CHEMISTRY; METALLURGY
- C12—BIOCHEMISTRY; BEER; SPIRITS; WINE; VINEGAR; MICROBIOLOGY; ENZYMOLOGY; MUTATION OR GENETIC ENGINEERING
- C12P—FERMENTATION OR ENZYME-USING PROCESSES TO SYNTHESISE A DESIRED CHEMICAL COMPOUND OR COMPOSITION OR TO SEPARATE OPTICAL ISOMERS FROM A RACEMIC MIXTURE
- C12P7/00—Preparation of oxygen-containing organic compounds
- C12P7/62—Carboxylic acid esters
-
- C—CHEMISTRY; METALLURGY
- C12—BIOCHEMISTRY; BEER; SPIRITS; WINE; VINEGAR; MICROBIOLOGY; ENZYMOLOGY; MUTATION OR GENETIC ENGINEERING
- C12Y—ENZYMES
- C12Y301/00—Hydrolases acting on ester bonds (3.1)
- C12Y301/01—Carboxylic ester hydrolases (3.1.1)
- C12Y301/0102—Tannase (3.1.1.20)
Landscapes
- Chemical & Material Sciences (AREA)
- Life Sciences & Earth Sciences (AREA)
- Organic Chemistry (AREA)
- Engineering & Computer Science (AREA)
- Health & Medical Sciences (AREA)
- Zoology (AREA)
- Wood Science & Technology (AREA)
- Genetics & Genomics (AREA)
- Bioinformatics & Cheminformatics (AREA)
- General Health & Medical Sciences (AREA)
- General Engineering & Computer Science (AREA)
- Biotechnology (AREA)
- Biochemistry (AREA)
- Microbiology (AREA)
- Biomedical Technology (AREA)
- Medicinal Chemistry (AREA)
- General Chemical & Material Sciences (AREA)
- Chemical Kinetics & Catalysis (AREA)
- Botany (AREA)
- Mycology (AREA)
- Tropical Medicine & Parasitology (AREA)
- Virology (AREA)
- Molecular Biology (AREA)
- Inorganic Chemistry (AREA)
- Immobilizing And Processing Of Enzymes And Microorganisms (AREA)
Abstract
本发明公开了一种固定化酶法催化合成没食子酸丙酯的方法,括以下步骤:(1)产酶菌筛选;(2)单宁酶生产;(3)酶固定:取石墨烯粉,经改性处理后,制得改性石墨烯粉;将改性石墨烯粉加蒸馏水,超声分散均匀,制成石墨烯悬浮液;向石墨烯悬浮液中加入单宁酶,搅拌处理,制得固定化酶;(4)溶剂处理:将固定化酶添加到有机溶剂苯中,并加入激活剂,搅拌均匀后,立即加入没食子酸和正丙醇,加热,保温,搅拌反应8‑10h后,超声处理15‑20min,继续搅拌反应7‑8h,过滤,获得石墨烯滤渣和滤液;(5)反应后处理。本发明提供的方法,酯化反应时间短,没食子酸丙酯的收率较高,解决了现有技术中反应时间长、收率偏低的问题。
Description
技术领域
本发明属于抗氧化剂制备技术领域,尤其涉及一种固定化酶法催化合成没食子酸丙酯的方法。
背景技术
没食子酸丙酯(Propyl gallate,简称PG)为白色至浅褐色结晶粉末或微乳白色针状结晶,化学名称为3,4,5-三羟基苯甲酸丙酯,具有良好的抗氧性能,抗氧化性能较叔丁基羟基茴香醚(BHA)和2,6-二叔丁基对甲酚(BHT)强,耐热性好,主要用于油脂或油基食品的抗氧化、水果及蔬菜的保鲜,可作为生物柴油及某些材料的抗氧化稳定剂或抗老化剂。没食子酸酯类化合物还具有显著的药理活性和生物活性,能有效地消除自由基,用于抗氧化和抗微生物等。因而,在药物、化妆品、饲料等领域也有着广泛的用途。
没食子酸丙酯是食品和农业组织(FAO)/世界卫生组织(WHO)两大组织成为合成食品抗氧化剂之一,它具有杀菌、抑菌、防腐作用。PG还在治疗心脑血管疾病、抗血小板聚集、增强纤维蛋白和血栓溶解、扩张血管、增强冠动脉血流量等方面具有明显的作用。没食子酸丙酯作为脂溶性抗氧化剂,适宜在植物油脂中使用,对稳定豆油、棉籽油、棕榈油及氢化植物油有显著效果。我国规定用于油脂、油炸食品、干鱼制品、饼干、方便面、腌腊肉制品中,最大使用量为0.1g/kg。
传统没食子酸丙酯的制备方法通常是以浓硫酸或对甲苯磺酸作催化剂,以没食子酸与正丙醇为原料进行酯化反应,用环己烷作夹带剂分离水,经结晶、提纯制得高纯度的没食子酸丙酯。传统制备没食子酸丙酯的的方法存在以下缺点:(1)从制备没食子酸到没食子酸丙酯生产工艺繁琐,成本高,废水量大,难以治理:(2)以传统的浓硫酸作催化剂,收率较低,易使反应物没食子酸被氧化,副产品多,设备腐蚀严重,废液若不经处理直接排除,会对环境造成较大污染。(3)以对甲基苯磺酸作催化剂且加带水剂,虽然收率提高,但催化剂用量大,且不易回收,环境污染。
由于传统没食子酸丙酯制备方法存在的缺点,人们开始对传统没食子酸丙酯制备工艺进行改进创新,研究出了不少关于没食子酸丙酯的新型制备工艺,例如微生物法催化法合成没食子酸丙酯,这种方法虽然对环境友好,但反应时间长,收率偏低。如申请号为CN200410068174.8的专利提供了一种微生物法在有机相中合成没食子酸丙酯的方法方法的步骤如下:1)将黑曲霉孢子培养得到的菌丝体收集过滤,用0.85%(w/v)NaCl溶液冲洗,在0.01~0.2mol/L pH2.2~5.8缓冲溶液中平衡后过滤,得到含水量为60~80%(w/w)的菌丝体;2)在有机溶剂苯体系中,每升有机溶剂中加入0.06~0.1L的正丙醇和4~10mmol的没食子酸,再在每升有机溶剂中加入20~50g的上述黑曲霉菌丝体,在搅拌速度150~220rpm和反应温度20~50℃下进行生物催化反应,反应时间为48~96h。该专利是采用特定的黑曲霉菌种才能实现,反应时间还是较长。如文《黑曲霉全细胞生物催化制备没食子酸丙酯的研究》(裴建军等)利用黑曲霉细胞作为全细胞生物催化剂,研究了催化没食子酸生成没食子酸丙酯的条件,探讨了有机溶剂、细胞预处理、底物浓度、反应时间和水分含量等因素在酶催化没食子酸丙酯合成中的影响,结果表明,苯是最佳溶剂,而菌丝体的含水量在80%时得率最高。在此基础上,选择菌丝量、没食子酸浓度、正丙醇体积分数和反应时间进行了正交试验,在200r/min、40℃的转化条件下得到的较佳催化组合为:25mL锥形瓶中加入10mL苯、0.5g菌丝、7mmol没食子酸、0.73mL正丙醇组成的有机催化体系中,反应时间18h,产率为36.4%。由如文献《有机相生物催化酯转换合成没食子酸丙酯的研究》(聂光军)以印迹单宁酶为催化剂,以TA和正丙醇为底物,转酷合成PG。反应体系10mL,由1mL正丙醇、9mL正己烷和0.1mL的蒸馏水组成,反应在25mL的摇瓶中、40℃和200rpm的条件下运行24h。该技术是采用印泥技术提高的单宁酶的活性,生产成本高。
发明内容
为了解决现有技术中存在的上述技术问题,本发明提供了是一种固定化酶法催化合成没食子酸丙酯的方法。,具体是通过以下技术方案实现的。
一种固定化酶法催化合成没食子酸丙酯的方法,包括以下步骤:
(1)产酶菌筛选:将黑曲霉菌接种到筛选培养基,在28-30℃下培养6天,挑选出长势好的黑曲霉孢子;
(2)单宁酶生产:将挑选的黑曲霉孢子,接种到生产培养基中培养,在在28-30℃下培养3天,将获得培养液按照常规技术经过滤、分离、葡萄糖凝胶色层析、真空冷冻干燥处理,制得单宁酶;
(3)酶固定:取石墨烯粉,经改性处理后,制得改性石墨烯粉;将改性石墨烯粉加蒸馏水,超声分散均匀,制成石墨烯悬浮液;向石墨烯悬浮液中加入单宁酶,在40℃下搅拌处理40-50min,真空冷冻干燥制得固定化酶;
(4)酯化反应:将固定化酶添加到有机溶剂苯中,并加入激活剂,搅拌均匀后,立即加入没食子酸和正丙醇,加温至40℃,保温,搅拌反应8-10h后,超声处理15-20min,继续搅拌反应7-8h,过滤,获得石墨烯滤渣和滤液;
(5)反应后处理:石墨烯滤渣回充分重复使用;滤液按照常规方法进行回收有机溶剂苯、干燥处理,制得没食子酸丙酯。
优选地,所述筛选培养基、生产培养基的组成为:5g/L单宁酸、15g/L葡萄糖、0.5g/L MgCl2、0.5g/L K2HPO4、0.6g/L NaNO3、0.02g/L FeSO4;黑曲霉菌、黑曲霉孢子均是按照5%接种量接种。
优选地,所述石墨烯粉的改性处理为:将石墨细粉放入其质量10倍的浓硫酸溶液中,在60-70℃下回流改性2h,冷却后,过滤后,水冲洗净石墨烯表面的浓硫酸,干燥,制得氧化石墨烯;再将氧化石墨加入等质量的水中,加入氧化石墨烯质量3%的聚丙烯酰胺,再加入聚丙烯酰胺质量5%的硫酸铵,在85℃下反应4h,过滤,洗涤,干燥,制得改性石墨烯。
优选地,所述步骤(3),石墨烯悬浮液的浓度为1g/ml,单宁酶的添加量为石墨烯质量的4倍。
优选地,所述步骤(4),激活剂为硫酸镁,添加量为固定酶质量的0.1-0.2%。
优选地,所述步骤(4),每升有机溶剂苯中加入0.05-0.1L的正丙醇、5-10mol的没食子酸、60-100g的固定酶。
优选地,所述步骤(4),搅拌反应的速度为150-200r/min。
优选地,所述步骤(4),超声处理的功率为40W、频率为15kHz。
本发明的有益效果在于:
本发明采用改性石墨烯粉对单宁酶进行固化处理,一方面,改性后的石墨烯粉在有机溶剂苯中有良好的分散性,能吸附固定单宁酶,增加单宁酶与反应底物的接触性;另一方面,固化处理有利于提高酶的稳定性、活性,在反应过程中酶活性损失较小,提高了酶催化酯化反应的活性;而且,石墨烯粉中固定的单宁酶还回收循环使用。在反应过程中添加硫酸镁,可进一步提高单宁酶的活力,提高单宁酶的催化反应能力。本发明在反应一段时间后采用超声处理反应体系,提高固定酶的活性,降低反应体系对固定酶活性的影响,加快固定酶催化酯化反应的过程。
本发明提供的方法通过固定化酶技术有效提高了单宁酶的活性,与反应底物之间的接触性,提高了单宁酶催化酯化反应的能力;缩短了酯化反应时间,提高了没食子酸丙酯的收率,解决了现有技术中反应时间长、收率偏低的问题。
具体实施方式
下面结核具体的实施方式来对本发明的技术方案做进一步的限定,但要求保护的范围不仅局限于所作的描述。
实施例1
一种固定化酶法催化合成没食子酸丙酯的方法,包括以下步骤:
(1)产酶菌筛选:将黑曲霉菌接种到筛选培养基,在28-30℃下培养6天,挑选出长势好的黑曲霉孢子;
(2)单宁酶生产:将挑选的黑曲霉孢子,接种到生产培养基中培养,在在28-30℃下培养3天,将获得培养液按照常规技术经过滤、分离、葡萄糖凝胶色层析、真空冷冻干燥处理,制得单宁酶;
(3)酶固定:取石墨烯粉,经改性处理后,制得改性石墨烯粉;将改性石墨烯粉加蒸馏水,超声分散均匀,制成浓度度为1g/ml的石墨烯悬浮液;向石墨烯悬浮液中加入改性石墨烯质量4倍的单宁酶,在40℃下搅拌处理40-50min,真空冷冻干燥制得固定化酶;
(4)溶剂处理:将6kg固定化酶添加到100L有机溶剂苯中,并加入固定酶质量0.1%的硫酸镁,搅拌均匀后,立即加入0.5mol没食子酸和5L正丙醇,加温至40℃,保温,150r/min搅拌反应10h后,超声处理20min,继续150r/min搅拌反应8h,过滤,获得石墨烯滤渣和滤液;
(5)反应后处理:石墨烯滤渣回充分重复使用;滤液按照常规方法进行回收有机溶剂苯、干燥处理,制得没食子酸丙酯。
所述筛选培养基、生产培养基的组成为:5g/L单宁酸、15g/L葡萄糖、0.5g/LMgCl2、0.5g/L K2HPO4、0.6g/L NaNO3、0.02g/L FeSO4;黑曲霉菌、黑曲霉孢子均是按照5%接种量接种。
所述石墨烯粉的改性处理为:将石墨细粉放入其质量10倍的浓硫酸溶液中,在60-70℃下回流改性2h,冷却后,过滤后,水冲洗净石墨烯表面的浓硫酸,干燥,制得氧化石墨烯;再将氧化石墨加入等质量的水中,加入氧化石墨烯质量3%的聚丙烯酰胺,再加入聚丙烯酰胺质量5%的硫酸铵,在85℃下反应4h,过滤,洗涤,干燥,制得改性石墨烯。
所述步骤(4),超声处理的功率为40W、频率为15kHz。
上述实施例1中没食子酸丙酯的产率为58.3%(以没食子酸计)。
实施例2
一种固定化酶法催化合成没食子酸丙酯的方法,包括以下步骤:
(1)产酶菌筛选:将黑曲霉菌接种到筛选培养基,在28-30℃下培养6天,挑选出长势好的黑曲霉孢子;
(2)单宁酶生产:将挑选的黑曲霉孢子,接种到生产培养基中培养,在在28-30℃下培养3天,将获得培养液按照常规技术经过滤、分离、葡萄糖凝胶色层析、真空冷冻干燥处理,制得单宁酶;
(3)酶固定:取石墨烯粉,经改性处理后,制得改性石墨烯粉;将改性石墨烯粉加蒸馏水,超声分散均匀,制成浓度度为1g/ml的石墨烯悬浮液;向石墨烯悬浮液中加入改性石墨烯质量4倍的单宁酶,在40℃下搅拌处理40-50min,真空冷冻干燥制得固定化酶;
(4)酯化反应:将8kg固定化酶添加到有机溶剂苯中,并加入固定酶质量0.12%的硫酸镁,搅拌均匀后,立即加入0.8mol没食子酸和8L正丙醇,加温至40℃,保温,200r/min搅拌反应8h后,超声处理20min,继续200r/min搅拌反应8h,过滤,获得石墨烯滤渣和滤液;
(5)反应后处理:石墨烯滤渣回充分重复使用;滤液按照常规方法进行回收有机溶剂苯、干燥处理,制得没食子酸丙酯。
所述筛选培养基、生产培养基的组成为:5g/L单宁酸、15g/L葡萄糖、0.5g/LMgCl2、0.5g/L K2HPO4、0.6g/L NaNO3、0.02g/L FeSO4;黑曲霉菌、黑曲霉孢子均是按照5%接种量接种。
所述石墨烯粉的改性处理为:将石墨细粉放入其质量10倍的浓硫酸溶液中,在60-70℃下回流改性2h,冷却后,过滤后,水冲洗净石墨烯表面的浓硫酸,干燥,制得氧化石墨烯;再将氧化石墨加入等质量的水中,加入氧化石墨烯质量3%的聚丙烯酰胺,再加入聚丙烯酰胺质量5%的硫酸铵,在85℃下反应4h,过滤,洗涤,干燥,制得改性石墨烯。
所述步骤(4),超声处理的功率为40W、频率为15kHz。
上述实施例2中没食子酸丙酯的产率为60.7%(以没食子酸计)。
实施例3
一种固定化酶法催化合成没食子酸丙酯的方法,包括以下步骤:
(1)产酶菌筛选:将黑曲霉菌接种到筛选培养基,在28-30℃下培养6天,挑选出长势好的黑曲霉孢子;
(2)单宁酶生产:将挑选的黑曲霉孢子,接种到生产培养基中培养,在在28-30℃下培养3天,将获得培养液按照常规技术经过滤、分离、葡萄糖凝胶色层析、真空冷冻干燥处理,制得单宁酶;
(3)酶固定:取石墨烯粉,经改性处理后,制得改性石墨烯粉;将改性石墨烯粉加蒸馏水,超声分散均匀,制成浓度度为1g/ml的石墨烯悬浮液;向石墨烯悬浮液中加入改性石墨烯质量4倍的单宁酶,在40℃下搅拌处理40-50min,真空冷冻干燥制得固定化酶;
(4)酯化反应:将10kg固定化酶添加到100L有机溶剂苯中,并加入固定酶质量0.2%的硫酸镁,搅拌均匀后,立即加入1mol没食子酸和10L正丙醇,加温至40℃,保温,200r/min搅拌反应10h后,超声处理20min,继续200r/min搅拌反应8h,过滤,获得石墨烯滤渣和滤液;
(5)反应后处理:石墨烯滤渣回充分重复使用;滤液按照常规方法进行回收有机溶剂苯、干燥处理,制得没食子酸丙酯。
所述筛选培养基、生产培养基的组成为:5g/L单宁酸、15g/L葡萄糖、0.5g/LMgCl2、0.5g/L K2HPO4、0.6g/L NaNO3、0.02g/L FeSO4;黑曲霉菌、黑曲霉孢子均是按照5%接种量接种。
所述石墨烯粉的改性处理为:将石墨细粉放入其质量10倍的浓硫酸溶液中,在60-70℃下回流改性2h,冷却后,过滤后,水冲洗净石墨烯表面的浓硫酸,干燥,制得氧化石墨烯;再将氧化石墨加入等质量的水中,加入氧化石墨烯质量3%的聚丙烯酰胺,再加入聚丙烯酰胺质量5%的硫酸铵,在85℃下反应4h,过滤,洗涤,干燥,制得改性石墨烯。
所述步骤(4),所述超声处理的功率为40W、频率为15kHz。
上述实施例2中没食子酸丙酯的产率为61.1%(以没食子酸计)。
实施例4
实施例4与实施例1的区别在于单宁酶没有进行固定化处理,反应过程中直接添加的单宁酶而不是固定化酶;其余过程相同。
实施例4中没食子酸丙酯的产率为41.3%(以没食子酸计)。
实施例5
实施例5与实施例1的区别在于酯化反应过程中没有添加激活剂;其余过程相同。
实施例5没食子酸丙酯的产率为46.7%(以没食子酸计)。
实施例6
实施例6与实施例1的区别在于酯化反应过程中没有采用超声进行处理,其余过程相同。
实施例6没食子酸丙酯的产率为52.6%(以没食子酸计)。
在此有必要指出的是,以上实施例和试验例仅限于对本发明的技术方案做进一步的阐述和理解,不能理解为对本发明的技术方案做进一步的限定,本领域技术人员作出的非突出实质性特征和显著进步的发明创造,仍然属于本发明的保护范畴。
Claims (8)
1.一种固定化酶法催化合成没食子酸丙酯的方法,其特征在于,包括以下步骤:
(1)产酶菌筛选:将黑曲霉菌接种到筛选培养基,在28-30℃下培养6天,挑选出长势好的黑曲霉孢子;
(2)单宁酶生产:将挑选的黑曲霉孢子,接种到生产培养基中培养,在在28-30℃下培养3天,将获得培养液按照常规技术经过滤、分离、葡萄糖凝胶色层析、真空冷冻干燥处理,制得单宁酶;
(3)酶固定:取石墨烯粉,经改性处理后,制得改性石墨烯粉;将改性石墨烯粉加蒸馏水,超声分散均匀,制成石墨烯悬浮液;向石墨烯悬浮液中加入单宁酶,在40℃下搅拌处理40-50min,真空冷冻干燥制得固定化酶;
(4)酯化反应:将固定化酶添加到有机溶剂苯中,并加入激活剂,搅拌均匀后,立即加入没食子酸和正丙醇,加温至40℃,保温,搅拌反应8-10h后,超声处理15-20min,继续搅拌反应7-8h,过滤,获得石墨烯滤渣和滤液;
(5)反应后处理:石墨烯滤渣回充分重复使用;滤液按照常规方法进行回收有机溶剂苯、干燥处理,制得没食子酸丙酯。
2.如权利要求1所述的固定化酶催化合成没食子酸丙酯的方法,其特征在于,所述筛选培养基、生产培养基的组成为:5g/L单宁酸、15g/L葡萄糖、0.5g/L MgCl2、0.5g/L K2HPO4、0.6g/L NaNO3、0.02g/L FeSO4;黑曲霉菌、黑曲霉孢子均是按照5%接种量接种。
3.如权利要求1所述的固定化酶催化合成没食子酸丙酯的方法,其特征在于,所述石墨烯粉的改性处理为:将石墨细粉放入其质量10倍的浓硫酸溶液中,在60-70℃下回流改性2h,冷却后,过滤后,水冲洗净石墨烯表面的浓硫酸,干燥,制得氧化石墨烯;再将氧化石墨加入等质量的水中,加入氧化石墨烯质量3%的聚丙烯酰胺,再加入聚丙烯酰胺质量5%的硫酸铵,在85℃下反应4h,过滤,洗涤,干燥,制得改性石墨烯。
4.如权利要求1所述的固定化酶催化合成没食子酸丙酯的方法,其特征在于,所述步骤(3),石墨烯悬浮液的浓度为1g/ml,单宁酶的添加量为石墨烯质量的4倍。
5.如权利要求1所述的固定化酶催化合成没食子酸丙酯的方法,其特征在于,所述步骤(4),激活剂为硫酸镁,添加量为固定酶质量的0.1-0.2%。
6.如权利要求1所述的固定化酶催化合成没食子酸丙酯的方法,其特征在于,所述步骤(4),每升有机溶剂苯中加入0.05-0.1L的正丙醇、5-10mol的没食子酸、60-100g的固定酶。
7.如权利要求1所述的固定化酶催化合成没食子酸丙酯的方法,其特征在于,所述步骤(4),搅拌反应的速度为150-200r/min。
8.如权利要求1所述的固定化酶催化合成没食子酸丙酯的方法,其特征在于,所述步骤(4),超声处理的功率为40W。
Priority Applications (1)
Application Number | Priority Date | Filing Date | Title |
---|---|---|---|
CN202010535954.8A CN111763626A (zh) | 2020-06-12 | 2020-06-12 | 一种固定化酶法催化合成没食子酸丙酯的方法 |
Applications Claiming Priority (1)
Application Number | Priority Date | Filing Date | Title |
---|---|---|---|
CN202010535954.8A CN111763626A (zh) | 2020-06-12 | 2020-06-12 | 一种固定化酶法催化合成没食子酸丙酯的方法 |
Publications (1)
Publication Number | Publication Date |
---|---|
CN111763626A true CN111763626A (zh) | 2020-10-13 |
Family
ID=72720824
Family Applications (1)
Application Number | Title | Priority Date | Filing Date |
---|---|---|---|
CN202010535954.8A Pending CN111763626A (zh) | 2020-06-12 | 2020-06-12 | 一种固定化酶法催化合成没食子酸丙酯的方法 |
Country Status (1)
Country | Link |
---|---|
CN (1) | CN111763626A (zh) |
Cited By (1)
Publication number | Priority date | Publication date | Assignee | Title |
---|---|---|---|---|
CN113042099A (zh) * | 2021-03-19 | 2021-06-29 | 江南大学 | 一种用于催化酯化合成没食子酸酯的固体酸催化剂 |
Citations (1)
Publication number | Priority date | Publication date | Assignee | Title |
---|---|---|---|---|
CN105695518A (zh) * | 2016-04-21 | 2016-06-22 | 贵州大学 | 一种固定化菌体生物法转化单宁酸重复制备没食子酸的方法 |
-
2020
- 2020-06-12 CN CN202010535954.8A patent/CN111763626A/zh active Pending
Patent Citations (1)
Publication number | Priority date | Publication date | Assignee | Title |
---|---|---|---|---|
CN105695518A (zh) * | 2016-04-21 | 2016-06-22 | 贵州大学 | 一种固定化菌体生物法转化单宁酸重复制备没食子酸的方法 |
Non-Patent Citations (2)
Title |
---|
LUCINDA MULKO等: "Improving the retention and reusability of Alpha-amylase by immobilization in nanoporous polyacrylamide-graphene oxide nanocomposites", 《INT J BIOL MACROMOL.》 * |
王挥: "黑曲霉产单宁酶与固定化酶制备没食子酸及其丙酯的研究", 《中国优秀博硕士论文全文数据库(博士) 工程科技I辑》 * |
Cited By (1)
Publication number | Priority date | Publication date | Assignee | Title |
---|---|---|---|---|
CN113042099A (zh) * | 2021-03-19 | 2021-06-29 | 江南大学 | 一种用于催化酯化合成没食子酸酯的固体酸催化剂 |
Similar Documents
Publication | Publication Date | Title |
---|---|---|
Ramachandran et al. | Gluconic acid: properties, applications and microbial production. | |
CN102268490B (zh) | 农林废弃物为原料联产木糖、木糖醇和阿拉伯糖清洁工艺 | |
CN107418995B (zh) | 一种石榴皮单宁液态发酵制备的鞣花酸及其制备方法 | |
WO2018040372A1 (zh) | 一株酵母菌及其在催化2,5-二羟甲基呋喃合成中的应用 | |
CN100345974C (zh) | S-(+)-2,2-二甲基环丙甲酰胺的微生物制备方法 | |
CN103911295A (zh) | 毛栓菌菌株及其在利用市政脱水污泥生产漆酶中的应用 | |
CN115044624B (zh) | 一种利用盐单胞菌重复批次发酵生产pha的方法 | |
CN111763626A (zh) | 一种固定化酶法催化合成没食子酸丙酯的方法 | |
CN102925418B (zh) | 一种α-熊果苷生产过程中蔗糖磷酸化酶的回收方法 | |
CN103773827A (zh) | 一种提高α-熊果苷产量的方法 | |
CN1165610C (zh) | 一种黑曲霉菌及用其生产香草酸和香草醛的微生物转化方法 | |
KR102090063B1 (ko) | 알돈산 생산능을 갖는 신규 미생물 및 이를 이용한 알돈산의 생산 방법 | |
CN109136320A (zh) | 一种酶菌复合体系转化根皮苷制备根皮素的方法 | |
CN101054597A (zh) | 一种微生物转化生产胱氨酸的方法 | |
CN109988784B (zh) | 一种固定化甘醇酸氧化酶催化合成丙酮酸的方法 | |
CN110885760B (zh) | 一种生产果胶酶的液体发酵方法 | |
CN1133746C (zh) | 游离细胞重复利用多次转化制备木糖醇的方法 | |
KR930001261B1 (ko) | 감귤과피를 이용한 구연산의 제조방법 | |
CN102212565A (zh) | 一种超低电导率30%丙烯酰胺水溶液的制备方法 | |
CN108285894B (zh) | 一种提高变色栓菌(Trametes versicolor)漆酶产量的方法 | |
CN113564215A (zh) | 一种以二氧化碳和/或木质纤维素为底物的生物表面活性剂制备方法 | |
CN102071231B (zh) | 一种微生物转化制备s-(+)-3-羟基四氢呋喃的方法 | |
CN111607625B (zh) | 一种酶法生产抗坏血酸棕榈酸酯的方法 | |
CN104293851A (zh) | 一种链格孢菌生产羟乙基吡啶的方法 | |
CN115678930B (zh) | 一种丙烯酰胺的制备方法 |
Legal Events
Date | Code | Title | Description |
---|---|---|---|
PB01 | Publication | ||
PB01 | Publication | ||
SE01 | Entry into force of request for substantive examination | ||
SE01 | Entry into force of request for substantive examination | ||
RJ01 | Rejection of invention patent application after publication | ||
RJ01 | Rejection of invention patent application after publication |
Application publication date: 20201013 |