CN104313074A - 一种青霉催化生产吡啶基乙醇方法 - Google Patents
一种青霉催化生产吡啶基乙醇方法 Download PDFInfo
- Publication number
- CN104313074A CN104313074A CN201410593046.9A CN201410593046A CN104313074A CN 104313074 A CN104313074 A CN 104313074A CN 201410593046 A CN201410593046 A CN 201410593046A CN 104313074 A CN104313074 A CN 104313074A
- Authority
- CN
- China
- Prior art keywords
- substrate
- cotton gauze
- reaction
- penicillium
- acetylpyridine
- Prior art date
- Legal status (The legal status is an assumption and is not a legal conclusion. Google has not performed a legal analysis and makes no representation as to the accuracy of the status listed.)
- Pending
Links
- 241000228143 Penicillium Species 0.000 title claims abstract description 17
- 238000006555 catalytic reaction Methods 0.000 title abstract description 12
- PPHIIIRFJKDTLG-UHFFFAOYSA-N 1-pyridin-2-ylethanol Chemical compound CC(O)C1=CC=CC=N1 PPHIIIRFJKDTLG-UHFFFAOYSA-N 0.000 title abstract description 3
- 238000004519 manufacturing process Methods 0.000 title abstract description 3
- 229920000742 Cotton Polymers 0.000 claims abstract description 64
- 239000000758 substrate Substances 0.000 claims abstract description 57
- 238000006243 chemical reaction Methods 0.000 claims abstract description 44
- 238000000034 method Methods 0.000 claims abstract description 23
- PPHIIIRFJKDTLG-LURJTMIESA-N (1s)-1-pyridin-2-ylethanol Chemical compound C[C@H](O)C1=CC=CC=N1 PPHIIIRFJKDTLG-LURJTMIESA-N 0.000 claims abstract description 13
- XEKOWRVHYACXOJ-UHFFFAOYSA-N Ethyl acetate Chemical compound CCOC(C)=O XEKOWRVHYACXOJ-UHFFFAOYSA-N 0.000 claims description 39
- AJKVQEKCUACUMD-UHFFFAOYSA-N 2-Acetylpyridine Chemical compound CC(=O)C1=CC=CC=N1 AJKVQEKCUACUMD-UHFFFAOYSA-N 0.000 claims description 19
- 239000000243 solution Substances 0.000 claims description 16
- 230000002210 biocatalytic effect Effects 0.000 claims description 12
- 238000009423 ventilation Methods 0.000 claims description 12
- WQZGKKKJIJFFOK-GASJEMHNSA-N Glucose Natural products OC[C@H]1OC(O)[C@H](O)[C@@H](O)[C@@H]1O WQZGKKKJIJFFOK-GASJEMHNSA-N 0.000 claims description 8
- 239000008103 glucose Substances 0.000 claims description 8
- 239000007788 liquid Substances 0.000 claims description 8
- 208000012839 conversion disease Diseases 0.000 claims description 7
- 238000000605 extraction Methods 0.000 claims description 7
- 229960003487 xylose Drugs 0.000 claims description 7
- 240000008042 Zea mays Species 0.000 claims description 6
- 235000005824 Zea mays ssp. parviglumis Nutrition 0.000 claims description 6
- 235000002017 Zea mays subsp mays Nutrition 0.000 claims description 6
- SRBFZHDQGSBBOR-LECHCGJUSA-N alpha-D-xylose Chemical compound O[C@@H]1CO[C@H](O)[C@H](O)[C@H]1O SRBFZHDQGSBBOR-LECHCGJUSA-N 0.000 claims description 6
- 239000000872 buffer Substances 0.000 claims description 6
- 235000005822 corn Nutrition 0.000 claims description 6
- LOKCTEFSRHRXRJ-UHFFFAOYSA-I dipotassium trisodium dihydrogen phosphate hydrogen phosphate dichloride Chemical compound P(=O)(O)(O)[O-].[K+].P(=O)(O)([O-])[O-].[Na+].[Na+].[Cl-].[K+].[Cl-].[Na+] LOKCTEFSRHRXRJ-UHFFFAOYSA-I 0.000 claims description 6
- 238000003810 ethyl acetate extraction Methods 0.000 claims description 6
- 239000002953 phosphate buffered saline Substances 0.000 claims description 6
- 235000010482 polyoxyethylene sorbitan monooleate Nutrition 0.000 claims description 6
- 229920000053 polysorbate 80 Polymers 0.000 claims description 6
- 230000035484 reaction time Effects 0.000 claims description 6
- LFQSCWFLJHTTHZ-UHFFFAOYSA-N Ethanol Chemical compound CCO LFQSCWFLJHTTHZ-UHFFFAOYSA-N 0.000 claims description 4
- 238000002360 preparation method Methods 0.000 claims description 2
- 230000002349 favourable effect Effects 0.000 abstract 1
- 239000008055 phosphate buffer solution Substances 0.000 abstract 1
- 241000228150 Penicillium chrysogenum Species 0.000 description 9
- 230000008569 process Effects 0.000 description 6
- 238000002474 experimental method Methods 0.000 description 5
- 238000004321 preservation Methods 0.000 description 5
- 230000001954 sterilising effect Effects 0.000 description 5
- 230000000694 effects Effects 0.000 description 4
- 230000001580 bacterial effect Effects 0.000 description 3
- 230000008901 benefit Effects 0.000 description 3
- 230000003197 catalytic effect Effects 0.000 description 3
- 239000005515 coenzyme Substances 0.000 description 3
- 150000001875 compounds Chemical class 0.000 description 3
- 239000000203 mixture Substances 0.000 description 3
- 239000007787 solid Substances 0.000 description 3
- 230000001629 suppression Effects 0.000 description 3
- 238000003786 synthesis reaction Methods 0.000 description 3
- 238000012360 testing method Methods 0.000 description 3
- VTYYLEPIZMXCLO-UHFFFAOYSA-L Calcium carbonate Chemical compound [Ca+2].[O-]C([O-])=O VTYYLEPIZMXCLO-UHFFFAOYSA-L 0.000 description 2
- SRBFZHDQGSBBOR-IOVATXLUSA-N D-xylopyranose Chemical compound O[C@@H]1COC(O)[C@H](O)[C@H]1O SRBFZHDQGSBBOR-IOVATXLUSA-N 0.000 description 2
- 101000925662 Enterobacteria phage PRD1 Endolysin Proteins 0.000 description 2
- CSNNHWWHGAXBCP-UHFFFAOYSA-L Magnesium sulfate Chemical compound [Mg+2].[O-][S+2]([O-])([O-])[O-] CSNNHWWHGAXBCP-UHFFFAOYSA-L 0.000 description 2
- NBIIXXVUZAFLBC-UHFFFAOYSA-N Phosphoric acid Chemical compound OP(O)(O)=O NBIIXXVUZAFLBC-UHFFFAOYSA-N 0.000 description 2
- 238000010521 absorption reaction Methods 0.000 description 2
- 239000003905 agrochemical Substances 0.000 description 2
- 230000015572 biosynthetic process Effects 0.000 description 2
- 239000003814 drug Substances 0.000 description 2
- 230000007613 environmental effect Effects 0.000 description 2
- 239000012847 fine chemical Substances 0.000 description 2
- 235000015097 nutrients Nutrition 0.000 description 2
- 238000005457 optimization Methods 0.000 description 2
- 229920001817 Agar Polymers 0.000 description 1
- 241000024287 Areas Species 0.000 description 1
- 239000002028 Biomass Substances 0.000 description 1
- 240000008564 Boehmeria nivea Species 0.000 description 1
- 241000790917 Dioxys <bee> Species 0.000 description 1
- 108090000790 Enzymes Proteins 0.000 description 1
- 102000004190 Enzymes Human genes 0.000 description 1
- 101710157860 Oxydoreductase Proteins 0.000 description 1
- ZLMJMSJWJFRBEC-UHFFFAOYSA-N Potassium Chemical compound [K] ZLMJMSJWJFRBEC-UHFFFAOYSA-N 0.000 description 1
- VYPSYNLAJGMNEJ-UHFFFAOYSA-N Silicium dioxide Chemical compound O=[Si]=O VYPSYNLAJGMNEJ-UHFFFAOYSA-N 0.000 description 1
- 239000008272 agar Substances 0.000 description 1
- 229910000147 aluminium phosphate Inorganic materials 0.000 description 1
- BFNBIHQBYMNNAN-UHFFFAOYSA-N ammonium sulfate Chemical compound N.N.OS(O)(=O)=O BFNBIHQBYMNNAN-UHFFFAOYSA-N 0.000 description 1
- 229910052921 ammonium sulfate Inorganic materials 0.000 description 1
- 235000011130 ammonium sulphate Nutrition 0.000 description 1
- 238000013459 approach Methods 0.000 description 1
- PYMYPHUHKUWMLA-UHFFFAOYSA-N arabinose Natural products OCC(O)C(O)C(O)C=O PYMYPHUHKUWMLA-UHFFFAOYSA-N 0.000 description 1
- 238000011914 asymmetric synthesis Methods 0.000 description 1
- SRBFZHDQGSBBOR-UHFFFAOYSA-N beta-D-Pyranose-Lyxose Natural products OC1COC(O)C(O)C1O SRBFZHDQGSBBOR-UHFFFAOYSA-N 0.000 description 1
- 229910000019 calcium carbonate Inorganic materials 0.000 description 1
- 229940041514 candida albicans extract Drugs 0.000 description 1
- 239000003054 catalyst Substances 0.000 description 1
- 229920002301 cellulose acetate Polymers 0.000 description 1
- 125000004122 cyclic group Chemical group 0.000 description 1
- 230000007423 decrease Effects 0.000 description 1
- 230000001419 dependent effect Effects 0.000 description 1
- 238000013461 design Methods 0.000 description 1
- 238000011161 development Methods 0.000 description 1
- 230000018109 developmental process Effects 0.000 description 1
- 239000011790 ferrous sulphate Substances 0.000 description 1
- 235000003891 ferrous sulphate Nutrition 0.000 description 1
- 238000001914 filtration Methods 0.000 description 1
- 125000002887 hydroxy group Chemical group [H]O* 0.000 description 1
- 230000006872 improvement Effects 0.000 description 1
- BAUYGSIQEAFULO-UHFFFAOYSA-L iron(2+) sulfate (anhydrous) Chemical compound [Fe+2].[O-]S([O-])(=O)=O BAUYGSIQEAFULO-UHFFFAOYSA-L 0.000 description 1
- 229910000359 iron(II) sulfate Inorganic materials 0.000 description 1
- 229910052943 magnesium sulfate Inorganic materials 0.000 description 1
- 235000019341 magnesium sulphate Nutrition 0.000 description 1
- 230000005389 magnetism Effects 0.000 description 1
- SQQMAOCOWKFBNP-UHFFFAOYSA-L manganese(II) sulfate Chemical compound [Mn+2].[O-]S([O-])(=O)=O SQQMAOCOWKFBNP-UHFFFAOYSA-L 0.000 description 1
- 239000000463 material Substances 0.000 description 1
- 239000013028 medium composition Substances 0.000 description 1
- 230000003287 optical effect Effects 0.000 description 1
- 239000003960 organic solvent Substances 0.000 description 1
- 230000003647 oxidation Effects 0.000 description 1
- 238000007254 oxidation reaction Methods 0.000 description 1
- 239000011591 potassium Substances 0.000 description 1
- 229910052700 potassium Inorganic materials 0.000 description 1
- 239000000843 powder Substances 0.000 description 1
- 238000000746 purification Methods 0.000 description 1
- 239000012429 reaction media Substances 0.000 description 1
- 230000009467 reduction Effects 0.000 description 1
- 230000008929 regeneration Effects 0.000 description 1
- 238000011069 regeneration method Methods 0.000 description 1
- 239000011347 resin Substances 0.000 description 1
- 229920005989 resin Polymers 0.000 description 1
- 230000004044 response Effects 0.000 description 1
- 230000000452 restraining effect Effects 0.000 description 1
- 238000012216 screening Methods 0.000 description 1
- 238000000926 separation method Methods 0.000 description 1
- 239000004094 surface-active agent Substances 0.000 description 1
- XLYOFNOQVPJJNP-UHFFFAOYSA-N water Substances O XLYOFNOQVPJJNP-UHFFFAOYSA-N 0.000 description 1
- 239000012138 yeast extract Substances 0.000 description 1
Landscapes
- Pyridine Compounds (AREA)
- Pharmaceuticals Containing Other Organic And Inorganic Compounds (AREA)
Abstract
一种青霉催化生产吡啶基乙醇方法，即用青霉菌细胞生物催化制备光活性(S)-1-（2-吡啶基）乙醇，反应罐中加入磷酸盐缓冲液，加入棉纱布调控底物、产物浓度。用青霉菌细胞进行生物催化反应，产品收率高，对映体过量率（ee%）高，具有很好的应用前景。
Description
技术领域
本发明属于制药工程技术领域，特别涉及到青霉菌细胞生物催化制备手性医药中间体(S)-1-（2-吡啶基）乙醇的技术。
背景技术
手性(S)-1-（2-吡啶基）乙醇是合成手性药物、精细化学品、农药品和其他特殊材料的重要中间体。生物催化不对称反应具有环境友好、条件温和、选择性高等优点,作为绿色高效制备羟基手性化合物的优先途径,被越来越多地应用于生产一些高附加值的手性化合物。生物催化制备手性(S)-1-（2-吡啶基）乙醇具有很好的应用前景。
生物催化具有催化效率高、选择性强、条件温和、环境友好等突出优点,是可持续发展过程中替代和拓展传统有机化学合成的重要方法。其中手性拆分和不对称合成是生物催化最具吸引力的应用领域。在作为生物催化剂的六大类酶中,水解酶能够催化动力学拆分外消旋体得到手性产品,在工业生物催化中一直扮演着重要角色。近几年来,氧化还原酶在工业上的应用得到了迅速增长。目前,采用水解酶动力学拆分法、生物催化法和生物氧化法工业制备光学活性手性化合物的比例为4:2:1。生物细胞还原法相对于动力学拆分法而言,最大的优势在于理论收率可达100%,原子经济性好。然而生物还原反应需要辅酶或辅因子的参与,一定程度上限制了其应用。由于辅酶依赖性的缘故,生物还原反应中多釆用整细胞作为催化剂,实现体内辅酶循环再生的同时免去了酶的分离纯化步骤。
(S)-1-（2-吡啶基）乙醇是合成手性药物、精细化学品、农药品的重要手性砌块，由于有2个手性中心，使得化学合成较为困难，成本高。本发明将采用生物催化制备(S)-1-（2-吡啶基）乙醇。
发明内容
本发明采用青霉菌细胞催化制备(S)-1-（2-吡啶基）乙醇，反应式如下：
底物2-乙酰基吡啶（1）经青霉菌催化反应，得到产物(S)-1-（2-吡啶基）乙醇（2）。有多种微生物可以催化此反应，经过大量实验筛选，最终确定采用青霉菌作为催化剂，因为其催化1反应的效果最好，反应收率、对映体过量率（ee%）均很高。
许多青霉菌都可以进行生物催化本反应，然而，其效果不同，相差很大，经实验，本发明选用青霉菌菌株为ATCC 204045，其催化本反应效果最佳。
培养介质：
1、 培养液成份：玉米浆( 以干物质计)含量为35-45g/L， 酵母浸膏8-10 g/L，葡萄糖18-22 g/L，麦芽浸膏25-30 g，硫酸铵0.5-0.7g/L，硫酸镁0.3-0.4g/L，磷酸二氧钾1.8-2.3g/L，碳酸钙 0.7 g/L,硫酸亚铁 0.18 g/L,硫酸锰 0.025 g/L;pH 4.7-4.9。
2、固体培养基成份： 在液体培养基中加入1.5-2%的琼脂粉。
青霉菌细胞制备。青霉菌经斜面、摇瓶、种子罐培养得到种子液；发酵罐加入培养液，装料系数为0.6-0.7，121℃高压灭菌30分钟，冷却至25-26℃，将青霉菌ATCC 204045种子液接种至发酵罐，接种比例为10-15％，通气比为0.5-1V/（V分钟），即每分钟通气量为0.5-1倍发酵液体积，25-26℃培养32-40小时，用过滤式离心机离心得到湿青霉菌细胞，用作生物催化反应催化剂。湿细胞制取技术为成熟技术。
由于底物、产物均对青霉菌细胞有抑制作用，为了减少底物、产物对细胞的抑制，本发明采用棉纱布吸附底物，反应中，当底物被细胞催化反应，浓度降低时，底物从棉纱布溶出，补充反应消耗的底物。同时，产物被棉纱布吸附，减少了其在水中的浓度，从而大幅度降低了底物、产物对细胞的抑制。底物与棉纱布的比率，决定了反应液中底物、产物的浓度，而且，浓度还与反应温度、反应液成份有关。不同细胞对底物、产物的敏感度不同，所以，要进行大量实验，才能确定最佳的底物与棉纱布的比率。实验表明，对于本发明的菌株、反应液成份、反应温度，最佳的底物与棉纱布的比率为0.3-0.32。具体吸附时，将底物2-乙酰基吡啶用尺寸为0.5cmX0.5cm的棉纱布吸收，即得到吸附了底物的棉纱布。调节底物与棉纱布用量，使得底物与棉纱布的质量比率为0.3-0.32。所用棉纱布为普通棉纱布，从市场上购买后，切成0.5cmX0.5cm小块，灭菌，无菌保存待用。
底部通气搅拌反应罐中加入磷酸盐缓冲液，装料系数为0.6-0.7，pH为6.0，加入吸附了底物2-乙酰基吡啶的棉纱布，使底物2-乙酰基吡啶添加量为80-90 g/L。玉米浆( 以干物质计)含量为12-15g/L，葡萄糖含量为 16-18g/L，木糖9-10 g/L，吐温80含量为15-16g/L，121℃高压灭菌30分钟；冷却至30-31℃时，加入湿青霉菌细胞使浓度为20-22g/L，通气比为0.1-0.12V/（V分钟），即每分钟通气量为0.1-0.12倍反应液体积，进行生物催化反应，反应时间为42-46小时；反应结束后，先滤出细胞，再滤出棉纱布，用0.3倍反应体积的乙酸乙酯萃取反应液2次，用3倍棉纱布质量的乙酸乙酯萃取棉纱布3次，合并乙酸乙酯萃取液，蒸出乙酸乙酯，反应转化率96-98％，产品收率94-96％，对映体过量率（ee%）98-99％。
本发明所开展工作包括菌株选择（从近百个菌株中选择）、催化反应条件优化（反应温度、通气量、pH）、反应介质选择和浓度优化（底物浓度、葡萄糖含量、木糖含量、表面活性剂种类（20多种选1）及浓度、其它多种成份选择排除），采用固体吸附控制底物产物浓度，从而减少对细胞的抑制，试验了白土、硅藻土、棉纱布、苎麻纱布、大孔树酯等多种固体材料，还曾进行了水-有机溶剂2相体系试验。由于试验量很大，尽管采用了响应面优化设计试验，大幅度减少了试验量，试验量仍然很大，全部试验进行2年多才完成，达成目前的技术方案。对于光活性产物而言，当反应转化率96-98％，产品收率94-96％时，对映体过量率（ee%）仍然高达98-99％，是非常不易的，我们的工作取得了显著进步。
实施例1
用常规方法制取湿青霉菌ATCC 204045细胞，用作生物催化反应催化剂。
吸附了底物的棉纱布制作方法为，将底物2-乙酰基吡啶用尺寸为0.5cmX0.5cm的棉纱布吸收，即得到吸附了底物的棉纱布，调节底物与棉纱布用量，使得底物与棉纱布的质量比率为0.3。所用棉纱布为普通棉纱布，从市场上购买后，切成0.5cmX0.5cm小块，灭菌，无菌保存待用，其它实施例棉纱布处理相同。
15L底部通气搅拌反应罐中加入磷酸盐缓冲液，装料系数为0.6，pH为6.0，加入吸附了底物2-乙酰基吡啶的棉纱布，使底物2-乙酰基吡啶添加量为80 g/L，玉米浆( 以干物质计)含量为12g/L，葡萄糖含量为 16g/L，木糖9 g/L，吐温80含量为15g/L，121℃高压灭菌30分钟；冷却至30℃时，加入湿青霉菌细胞使浓度为20g/L，通气比为0.1V/（V分钟），即每分钟通气量为0.1倍反应液体积，进行生物催化反应，反应时间为42小时；反应结束后，分别滤出细胞、棉纱布，用乙酸乙酯萃取反应液、萃取棉纱布，合并乙酸乙酯萃取液，蒸出乙酸乙酯，得到产物(S)-1-（2-吡啶基）乙醇，反应转化率96％，产品收率94％，对映体过量率（ee%）99％。
实施例2
用常规方法制取湿青霉菌ATCC 204045细胞，用作生物催化反应催化剂。
吸附了底物的棉纱布制作方法为，将底物2-乙酰基吡啶用尺寸为0.5cmX0.5cm的棉纱布吸收，即得到吸附了底物的棉纱布，调节底物与棉纱布用量，使得底物与棉纱布的质量比率为0.32。所用棉纱布为普通棉纱布，从市场上购买后，切成0.5cmX0.5cm小块，灭菌，无菌保存待用，其它实施例棉纱布处理相同。
100L底部通气搅拌反应罐中加入磷酸盐缓冲液，装料系数为0.7，pH为6.0，加入吸附了底物2-乙酰基吡啶的棉纱布，使底物2-乙酰基吡啶添加量为90 g/L，玉米浆( 以干物质计)含量为15g/L，葡萄糖含量为18g/L，木糖10 g/L，吐温80含量为16g/L，121℃高压灭菌30分钟；冷却至31℃时，加入湿青霉菌细胞使浓度为22g/L，通气比为0.12V/（V分钟），即每分钟通气量为0.12倍反应液体积，进行生物催化反应，反应时间为46小时；反应结束后，分别滤出细胞、棉纱布，用乙酸乙酯萃取反应液、萃取棉纱布，合并乙酸乙酯萃取液，蒸出乙酸乙酯，得到产物(S)-1-（2-吡啶基）乙醇，反应转化率98％，产品收率96％，对映体过量率（ee%）98％。
实施例3
用常规方法制取湿青霉菌ATCC 204045细胞，用作生物催化反应催化剂。
吸附了底物的棉纱布制作方法为，将底物2-乙酰基吡啶用尺寸为0.5cmX0.5cm的棉纱布吸收，即得到吸附了底物的棉纱布，调节底物与棉纱布用量，使得底物与棉纱布的质量比率为0.31。所用棉纱布为普通棉纱布，从市场上购买后，切成0.5cmX0.5cm小块，灭菌，无菌保存待用，其它实施例棉纱布处理相同。
500L底部通气搅拌反应罐中加入磷酸盐缓冲液，装料系数为0.65，pH为6.0，加入吸附了底物2-乙酰基吡啶的棉纱布，使底物2-乙酰基吡啶添加量为85 g/L，玉米浆( 以干物质计)含量为13g/L，葡萄糖含量为 17g/L，木糖9.5 g/L，吐温80含量为15.5g/L，121℃高压灭菌30分钟；冷却至30.5℃时，加入湿青霉菌细胞使浓度为21g/L，通气比为0.11V/（V分钟），即每分钟通气量为0.11倍反应液体积，进行生物催化反应，反应时间为44小时；反应结束后，分别滤出细胞、棉纱布，用乙酸乙酯萃取反应液、萃取棉纱布，合并乙酸乙酯萃取液，蒸出乙酸乙酯，得到产物(S)-1-（2-吡啶基）乙醇，反应转化率97％，产品收率95％，对映体过量率（ee%）98.5％。
实施例4
用常规方法制取湿青霉菌ATCC 204045细胞，用作生物催化反应催化剂。
吸附了底物的棉纱布制作方法为，将底物2-乙酰基吡啶用尺寸为0.5cmX0.5cm的棉纱布吸收，即得到吸附了底物的棉纱布，调节底物与棉纱布用量，使得底物与棉纱布的质量比率为0.32。所用棉纱布为普通棉纱布，从市场上购买后，切成0.5cmX0.5cm小块，灭菌，无菌保存待用，其它实施例棉纱布处理相同。
1000L底部通气搅拌反应罐中加入磷酸盐缓冲液，装料系数为0.67，pH为6.0，加入吸附了底物2-乙酰基吡啶的棉纱布，使底物2-乙酰基吡啶添加量为90 g/L，玉米浆( 以干物质计)含量为14g/L，葡萄糖含量为 17g/L，木糖10 g/L，吐温80含量为16g/L，121℃高压灭菌30分钟；冷却至31℃时，加入湿青霉菌细胞使浓度为21g/L，通气比为0.12V/（V分钟），即每分钟通气量为0.12倍反应液体积，进行生物催化反应，反应时间为45小时；反应结束后，分别滤出细胞、棉纱布，用乙酸乙酯萃取反应液、萃取棉纱布，合并乙酸乙酯萃取液，蒸出乙酸乙酯，得到产物(S)-1-（2-吡啶基）乙醇，反应转化率97％，产品收率95.5％，对映体过量率（ee%）98.5％。
Claims (2)
1.一种青霉菌细胞生物催化制备(S)-1-（2-吡啶基）乙醇的方法，其特征在于反应罐中加入磷酸盐缓冲液，装料系数为0.6-0.7，pH为6.0，加入吸附了底物2-乙酰基吡啶的棉纱布，使底物2-乙酰基吡啶添加量为80-90 g/L，玉米浆( 以干物质计)含量为12-15g/L，葡萄糖含量为 16-18g/L，木糖9-10 g/L，吐温80含量为15-16g/L，121℃高压灭菌30分钟；冷却至30-31℃时，加入湿青霉菌细胞使浓度为20-22g/L，通气比为0.1-0.12V/（V分钟），进行生物催化反应，反应时间为42-46小时；反应结束后，分别滤出细胞、棉纱布，用乙酸乙酯萃取反应液、萃取棉纱布，合并乙酸乙酯萃取液，蒸出乙酸乙酯，得到产物(S)-1-（2-吡啶基）乙醇，反应转化率96-98％，产品收率94-96％，对映体过量率（ee%）98-99％。
2.权利要求1所述的方法，其特征在于所述吸附了底物的棉纱布制作方法为，将底物2-乙酰基吡啶用尺寸为0.5cmX0.5cm的棉纱布吸收，即得到吸附了底物的棉纱布，调节底物与棉纱布用量，使得底物与棉纱布的质量比率为0.3-0.32。
Priority Applications (1)
| Application Number | Priority Date | Filing Date | Title |
|---|---|---|---|
| CN201410593046.9A CN104313074A (zh) | 2014-10-30 | 2014-10-30 | 一种青霉催化生产吡啶基乙醇方法 |
Applications Claiming Priority (1)
| Application Number | Priority Date | Filing Date | Title |
|---|---|---|---|
| CN201410593046.9A CN104313074A (zh) | 2014-10-30 | 2014-10-30 | 一种青霉催化生产吡啶基乙醇方法 |
Publications (1)
| Publication Number | Publication Date |
|---|---|
| CN104313074A true CN104313074A (zh) | 2015-01-28 |
Family
ID=52368384
Family Applications (1)
| Application Number | Title | Priority Date | Filing Date |
|---|---|---|---|
| CN201410593046.9A Pending CN104313074A (zh) | 2014-10-30 | 2014-10-30 | 一种青霉催化生产吡啶基乙醇方法 |
Country Status (1)
| Country | Link |
|---|---|
| CN (1) | CN104313074A (zh) |
Cited By (1)
| Publication number | Priority date | Publication date | Assignee | Title |
|---|---|---|---|---|
| CN114934083A (zh) * | 2022-05-31 | 2022-08-23 | 重庆张邦医药科技有限责任公司 | 一种高纯度(s)-1-(吡啶-2-基)乙醇衍生物的制备方法 |
-
2014
- 2014-10-30 CN CN201410593046.9A patent/CN104313074A/zh active Pending
Non-Patent Citations (2)
| Title |
|---|
| MOHAN PAL等: "bioreduction of methyl heteroaryl and aryl heteroaryl ketones in high enantiomeric excess with newly isolated fungal strains", 《BIORESOURCE TECHNOLOGY》 * |
| 杨忠华等: "活性酵母细胞不对称催化苯乙酮还原及树脂吸附对反应的促进作用", 《催化学报》 * |
Cited By (1)
| Publication number | Priority date | Publication date | Assignee | Title |
|---|---|---|---|---|
| CN114934083A (zh) * | 2022-05-31 | 2022-08-23 | 重庆张邦医药科技有限责任公司 | 一种高纯度(s)-1-(吡啶-2-基)乙醇衍生物的制备方法 |
Similar Documents
| Publication | Publication Date | Title |
|---|---|---|
| CN104293851A (zh) | 一种链格孢菌生产羟乙基吡啶的方法 | |
| CN104313074A (zh) | 一种青霉催化生产吡啶基乙醇方法 | |
| CN104342464A (zh) | 一种黄蓝状菌催化生产手性苯基甲醇方法 | |
| CN104263776A (zh) | 一种生物催化生产手性吡啶乙醇的方法 | |
| CN104313078A (zh) | 一种生物催化生产手性噻唑乙醇的方法 | |
| CN104313075A (zh) | 一种光活性溴吡啶乙醇的细胞生产方法 | |
| CN104263775A (zh) | 一种黑霉菌催化生产4-吡啶乙醇的方法 | |
| CN104212843A (zh) | 一种酿酒酵母还原生产溴苯基丙酸甲酯的方法 | |
| CN104328154A (zh) | 一种青霉生产(s)-苯基甲醇的方法 | |
| CN104313076A (zh) | 一种生物催化生产甲基吡啶乙醇的方法 | |
| CN104313077A (zh) | 一种生物法生产异噁唑乙醇的方法 | |
| CN104293856A (zh) | 一种细胞催化生产氟吡啶乙酮的方法 | |
| CN104293852A (zh) | 一种细胞催化生产异喹啉甲醇的方法 | |
| CN104328147A (zh) | 一种含氯(2r,3s)甲基丙酸甲酯的生产方法 | |
| CN104357504A (zh) | 一种细胞催化生产手性甲氧基吡啶乙醇 | |
| CN104313062A (zh) | 一种细胞催化生产光活性苯乙醇的方法 | |
| CN104388490A (zh) | 一种生物催化生产手性吡嗪基乙醇的方法 | |
| CN104328151A (zh) | 一种细胞催化生产苯并噻吩乙醇的方法 | |
| CN104263774A (zh) | 一种酿酒酵母催化生产手性亚环己基烯醇的方法 | |
| CN104263769A (zh) | 一种生物法生产氯苯基丙酸甲酯的方法 | |
| CN104263773A (zh) | 一种生物法生产二氧基庚烯醇的方法 | |
| CN105039449A (zh) | 一种青霉菌生产(s)-呋喃乙醇的方法 | |
| CN104293847A (zh) | 一种生产亚环己基二氧基庚烯醇的产朊酵母催化法 | |
| CN104313072A (zh) | 一种假丝酵母生产(1r,3s) 二氧基庚烯醇的方法 | |
| CN104293848A (zh) | 一种生产(1s,3r) 亚环己基二氧基庚烯醇的方法 |
Legal Events
| Date | Code | Title | Description |
|---|---|---|---|
| C06 | Publication | ||
| PB01 | Publication | ||
| C10 | Entry into substantive examination | ||
| SE01 | Entry into force of request for substantive examination | ||
| RJ01 | Rejection of invention patent application after publication | ||
| RJ01 | Rejection of invention patent application after publication |
Application publication date: 20150128 |