CN102836179A - 一种植物中多酚类物质的提取方法 - Google Patents
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Abstract
本发明涉及一种从植物中提取多酚类物质的方法。特点在于提取步骤包括:(1)配制提取剂,即每升浓度为30-70%的丙酮溶液中加入6g NaCl,同时用稀HCl调节溶液的pH值为2.5-3.5;(2)超声波提取:按料液比为1g:10-50ml的比例,向原料中加入步骤(1)所述的提取剂,采用超声波提取10-120min,提取温度为30-60℃;离心分离;(3)微波提取:将步骤(2)中离心分离后的液体放入微波炉中,于120-700W功率下,微波辐射1-3min。本发明将超声波提取方法与微波提取方法结合,优化了提取剂的配方,使得提取剂更适合植物多酚的提取,增大了植物多酚的提取率,找到了一种更为简单、高效、成本低廉的提取植物中多酚类物质方法。
Description
技术领域
本发明涉及一种从植物中提取多酚类物质的方法,具体涉及采用超声波与微波综合提取法从植物中提取多酚类物质。
背景技术
植物多酚是一类广泛存在于植物体内的多酚类物质,是植物的次生代谢产物,主要存在于植物的皮、根、茎、叶、果实中,其含量仅次于纤维素、半纤维素和木质素。植物多酚具有清除机体内自由基、抗脂质氧化、延缓机体衰老、预防心血管疾病、防癌、抗辐射等生物活性功能。因此,开发和利用植物多酚在现实生活中具有重要意义。
目前提取植物中多酚类物质的方法已有很多,但提取工艺相对繁锁。如水浴法、溶剂萃取法、超声波浸提法、微波浸提法等。
水浴法是将待测样品粉碎后,称取一定质量的粉末。加入适量的有机溶剂,在45℃-50℃的水浴条件下加热,通常加热时间在8-12小时,最后得到待测液。此种方法主要受水浴时间所限。因为酚类物质很不稳定,长时间的加热提取会使得相当一部分的酚类物质损失,对最后结果造成影响。
溶剂萃取法是目前国内使用最广泛的多酚提取方法之一,该法常用的溶剂有甲醇、乙醇、丙酮。以体积分数为60%-70%的乙醇最为常用。虽然溶剂萃取法操作简单,但其使用的有机试剂易燃,且部分有毒,对安全生产十分不利。
近几年来,利用超声波提取植物中的活性物质取得了良好的效果,提取溶剂主要采用乙醇等有机溶剂,料液比一般为1:20左右,提取时间一般多在24-35min之间。
微波浸提法也是最近几年研发的一种新方法,提取溶剂均采用乙醇。与目前常规使用的溶剂萃取方法相比,具有节能、省工、省时、对环境无污染等优点,是一种可大力提倡的应用技术。
结合超声波与微波提取法的优点,近年来出现了将超声波与微波联合用于植物多酚类物质的提取。如申请号为CN201110164647.4(西北师范大学,从油橄榄加工废渣中同时提取果渣油和多酚的方法)的中国发明专利申请,采用微波(100-700W、5-30min)与超声波(100-300W、20-60min、20-60℃)联用技术,溶剂为乙醇或丙酮与非极性有机溶剂。又如申请号为CN200910143440.1(江南大学,由亚麻籽或壳中提取亚麻木酚素的方法、所得提取物及其用途)的中国发明专利申请,采用超声波(50-300W/g、)与微波(150-600W/g、50-1000W/s)联用技术,溶剂为乙醇。这两件发明所采用的方法由于只是单一的选择了非极性有机溶剂作为提取剂,提取率相对较低,提取效果不稳定,不能将样品中多酚类物质最大限度的提取出来。
发明内容
本发明要解决的技术问题是针对现有技术的不足,提供一种简单、高效、成本低廉的从植物中提取多酚类物质的方法。
本发明的目的通过以下技术方案实现:
本发明所述的一种植物中多酚类物质的提取方法,主要包括清洗、干燥、粉碎、提取和测定步骤,其特征在于,所述提取步骤包括:
(1)配制提取剂:每升浓度为30-70%的丙酮溶液中加入6g NaCl,同时用稀HCl调节溶液的pH值为2.5-3.5;
(2)超声波提取:按料液比为1g:10-50ml的比例,向原料中加入步骤(1)所述的提取剂,使植物样品被完全浸透,振荡,然后转移至超声波清洗仪中,采用超声波提取10-120min,超声功率为40KHz,提取温度为30-60℃;离心分离;
(3)微波提取:将步骤(2)中离心分离后的液体放入微波炉中,于120-700W功率下,微波辐射1-3min。
配制提取剂时,最佳的丙酮浓度为50%。
超声波提取步骤中,最佳的料液比为1g:40ml,提取温度为50℃,在超声波设备内提取60min,超声波频率为40KHz。
微波提取步骤中,优选的微波功率为600W,微波辐射2min。
本发明将现有超声波提取方法与微波提取方法结合,并对提取工艺进行了优化,优化了提取剂的配方,使得提取剂更适合植物多酚的提取,增大了植物多酚的提取率,找到了一种更为简单、高效、成本低廉的提取植物中多酚类物质方法。
通过试验对比可以发现,本发明所采用的方法的提取效率是微波提取法提取效率的1.023倍,效率提高了2.35%;是超声波提取法提取效率的1.017倍,效率提高了1.69%;是水浴加热法提取效率的1.472倍,效率提高了47.24%。同时,发明人员以4个树种叶片为样品,对酸性丙酮-NaCl溶液的作用进行了检验。对比实验的提取剂为50%的丙酮溶液,检验实验的提取剂为酸性丙酮-NaCl溶液,二者实验条件相同。实验结果数据如表1所示,结果表明,使用酸性丙酮-NaCl溶液后,多酚类物质的提取率均有提高。
表1实验条件相同情况下丙酮与酸性丙酮-NaCl溶剂提取率对比
样品 | 丙酮提取剂的提取率 | 酸性丙酮-NaCl溶剂的提取率 | 提取效率提高比例 |
冷杉 | 4.74% | 4.80% | 1.27% |
红桦 | 1.44% | 1.49% | 3.47% |
红杉 | 4.45% | 4.50% | 1.12% |
方枝柏 | 3.17% | 3.21% | 1.26% |
实施例一
冷杉凋落物采自四川省阿坝州理县境内的毕棚沟风景区,自然阴干后粉碎,过60目筛备用。
准确称取1.0g冷杉样品于三角瓶中,加入10ml浓度为30%的丙酮溶剂,同时加入6gNaCl,并用稀HCl调整溶液pH为2.5。振荡10min后,于30℃下超声波提取120min,超声波频率为40KHz。离心5min后,再将离心分离后的液体置于容器中,放至微波炉,120W微波处理3min。然后将上清液转移到50ml容量瓶中定容,得待测液,测其吸光值,计算多酚类物质的总的提取率为4.54%。
实施例二
冷杉凋落物采自四川省阿坝州理县境内的毕棚沟风景区,自然阴干后粉碎,过60目筛备用。
准确称取1.0g冷杉样品于三角瓶中,加入50ml浓度为40%的丙酮溶剂,同时加入6gNaCl,并用稀HCl调整溶液pH为3.0。振荡10min后,于40℃下超声波提取90min,超声波频率为40KHz。离心5min后,再将离心分离后的液体置于容器中,放至微波炉中,400W微波处理2min。然后将上清液转移到50ml容量瓶中定容,得待测液,测其吸光值,计算多酚类物质的总的提取率为4.61%。
实施例三
冷杉凋落物采自四川省阿坝州理县境内的毕棚沟风景区,自然阴干后粉碎,过60目筛备用。
准确称取1.0g冷杉样品于三角瓶中,加入40ml浓度为50%的丙酮溶剂,同时加入6gNaCl,并用稀HCl调整溶液pH为3.0。振荡10min后,于50℃下超声波提取60min,超声波频率为40KHz。离心5min后,再将离心分离后的液体置于容器中,并放至微波炉中,600W微波处理2min,将上清液转移到50ml容量瓶中定容,得待测液,测其吸光值,计算多酚类物质的总的提取率为4.80%。
实施例四
冷杉凋落物采自四川省阿坝州理县境内的毕棚沟风景区,自然阴干后粉碎,过60目筛备用。
准确称取1.0g冷杉样品于三角瓶中,加入20ml浓度为70%的丙酮溶剂,同时加入6gNaCl,并用稀HCl调整溶液pH为3.5。振荡10min后,于60℃下超声波提取10min,超声波频率为40KHz。离心5min后,再将离心分离后的液体置于容器中,并放至微波炉中,700W微波处理1min。然后将上清液转移到50ml容量瓶中定容,得待测液,测其吸光值,计算多酚类物质的总的提取率为4.57%。
实施例五
红桦凋落物采自四川省阿坝州理县境内的毕棚沟风景区,自然阴干后粉碎,过80目筛备用。
准确称取1.0g红桦样品于三角瓶中,加入40ml浓度为50%的丙酮溶剂,同时加入6gNaCl,并用稀HCl调整溶液pH为3.0。振荡10min后,于50℃下超声波提取30min,超声波频率为40KHz。离心5min后,再将离心分离后的液体置于容器中,并放至微波炉中,600W微波处理2min,将上清液转移到50ml容量瓶中定容,得待测液,测其吸光值,计算多酚类物质的总的提取率为1.47%。
实施例六
红桦凋落物采自四川省阿坝州理县境内的毕棚沟风景区,自然阴干后粉碎,过80目筛备用。
准确称取1.0g红桦样品于三角瓶中,加入40ml浓度为50%的丙酮溶剂,同时加入6gNaCl,并用稀HCl调整溶液pH为3.0。振荡10min后,于50℃下超声波提取60min,超声波频率为40KHz。离心5min后,再将离心分离后的液体置于容器中,并放至微波炉中,600W微波处理2min,将上清液转移到50ml容量瓶中定容,得待测液,测其吸光值,计算多酚类物质的总的提取率为1.49%。
实施例七
四川红杉凋落物采自四川省阿坝州理县境内的毕棚沟风景区,自然阴干后粉碎,过60目筛备用。
准确称取1.0g四川红杉样品于三角瓶中,加入40ml浓度为50%的丙酮溶剂,同时加入6g NaCl,并用稀HCl调整溶液pH为3.5。振荡10min后,于50℃下超声波提取60min,超声波频率为40KHz。离心5min后,再将离心分离后的液体置于容器中,并放至微波炉中,600W微波处理2min,将上清液转移到50ml容量瓶中定容,得待测液,测其吸光值,计算多酚类物质的总的提取率为4.50%。
实施例八
方枝柏凋落物采自四川省阿坝州理县境内的毕棚沟风景区,自然阴干后粉碎,过60目筛备用。
准确称取1.0g方枝柏样品于三角瓶中,加入40ml浓度为50%的丙酮溶剂,同时加入6gNaCl,并用稀HCl调整溶液pH为2.5。振荡10min后,于50℃下超声波提取60min,超声波频率为40KHz。离心5min后,再将离心分离后的液体置于容器中,并放至微波炉中,600W微波处理2min,将上清液转移到50ml容量瓶中定容,得待测液,测其吸光值,计算多酚类物质的总的提取率为3.21%。
Claims (5)
1.一种植物中多酚类物质的提取方法,主要包括清洗、干燥、粉碎、提取和测定步骤,其特征在于,所述提取步骤包括:
(1)配制提取剂:每升浓度为30-70%的丙酮溶液中加入6g NaCl,同时用稀HCl调节溶液的pH值为2.5-3.5;
(2)超声波提取:按料液比为1g:10-50ml的比例加入步骤(1)中所述的提取剂,使植物样品被完全浸透,振荡,然后转移至超声波清洗仪中,采用超声波提取10-120min,超声功率为40KHz,提取温度为30-60℃;离心分离;
(3)微波提取:将步骤(2)中离心分离后的液体放入微波炉中,于120-700W功率下,微波辐射1-3min。
2.根据权利要求1所述的一种植物中多酚类物质的提取方法,其特征在于,配制提取剂时,丙酮浓度为50%。
3.根据权利要求1或2所述的一种植物中多酚类物质的提取方法,其特征在于,按料液比为1g:40ml的比例加入提取剂,于50℃温度下,在超声波设备内提取60min,超声波频率为40KHz。
4.根据权利要求1或2所述的一种植物中多酚类物质的提取方法,其特征在于,微波提取步骤中,微波功率为600W,微波辐射2min。
5.根据权利要求3所述的一种植物中多酚类物质的提取方法,其特征在于,微波提取步骤中,微波功率为600W,微波辐射2min。
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CN107271581A (zh) * | 2017-05-10 | 2017-10-20 | 四川农业大学 | 一种利用hplc高效测定柑橘果实中酚类化合物的方法 |
CN109010538A (zh) * | 2018-10-11 | 2018-12-18 | 田国荣 | 复方一枝蒿片 |
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杨会成: "海带(Laminaria japonica Aresch)多酚的提取、分离及其抗肿瘤、抗菌活性研究", 《中国优秀硕士学位论文全文数据库 工程科技I辑》 * |
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