CN104274496A - 一种铜藻多酚的提取方法 - Google Patents

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Abstract

一种铜藻多酚的提取方法，其特征在于：A、以铜藻为原料，将铜藻进行粉碎、25～35目过筛得到均匀的铜藻粉末；B、准确称取一定量的铜藻粉末，按照料液比1:9～11（w/v）加入浓度为40%～90%的有机溶剂水溶液，充分混匀浸泡；C、浸泡10～15min后，用超声波细胞粉碎机破碎5～10min进行多酚的提取；D、将提取液离心处理，处理工艺为：3500～4500rpm、4～6min；E、重复提取4～6次，合并上清液；F、将上清液在旋转蒸发仪上45度蒸发浓缩，然后真空冷冻干燥，得到铜藻多酚粗提物。本发明克服了传统水提取多酚的时间长、温度高、提取率低等不良效果影响，更为简单、省时且成本低，提取的铜藻多酚产品含量高、细胞抗氧化能力较强。

Description

一种铜藻多酚的提取方法
技术领域
本发明涉及海洋生物技术领域，涉及褐藻中天然产物的提取，具体是一种铜藻多酚的提取方法。
背景技术
铜藻是一种海洋大型褐藻，属于马尾藻属中的一种，褐藻多酚含量较高。褐藻多酚亦称间苯三酚鞣质（phlorotannin），是一类来自褐藻、以间苯三酚为结构单元的聚合物，具有许多独特的生物活性和医药价值。褐藻多酚能够使SOD和多糖降解，特别是马尾藻类，它们的提取液很快变成棕色至棕褐色，SOD同工酶带也全部消失，羟基是决定褐藻多酚化学性质和生物学活性的主要官能基团。褐藻多酚具有较强的生理活性和较强的自由基清除活性，可阻断自由基的侵袭，降低癌症、冠心病及其他疾病的发病风险，被认为是一类潜在的海洋生物天然抗氧化剂。毒理试验研究表明，褐藻多酚是食用安全的天然抗氧化活性物质，可以进行进一步的产业化开发。铜藻作为海洋褐藻的一种，生物量巨大且抗氧化能力强，具有较大的开发潜力。
褐藻多酚一般生产方法是以褐藻为原料，采用水提取法，即先将褐藻粉末与沸蒸馏水混匀，移入沸水浴中浸提40-50min，浸提完毕后立即趁热减压过滤，如此提取2-3次，再经干燥和粉碎而得到产品，该方法具有时间长、温度高、提取率低等缺点，不利于工业化生产。还有专利号为CN201010277902.1的中国发明《一种从生物体中提取褐藻多酚的方法》，采用以下步骤对褐藻多酚进行提取：原料预处理、浸取、冷却洗涤、树脂吸附、洗脱和冷冻干燥，这种方法是采用有机溶剂粗提褐藻多酚，但是需要加入抗氧化剂，浸取时间长需要1～6小时，冷却又需要2～8小时，该方法工序多、时间较长，成本高，而且生产效率也较低。
发明内容
本发明所要解决的技术问题是提供一种工艺简单、成本低、时间短的铜藻多酚的提取方法，且提取的铜藻多酚产品含量较高。
本发明解决上述技术问题所采用的技术方案为：一种铜藻多酚的提取方法，其特征在于包括以下步骤：
A、以铜藻为原料，将铜藻进行粉碎、25～35目过筛得到均匀的铜藻粉末；
B、准确称取一定量的铜藻粉末，按照料液比1:9～11（w/v）加入体积浓度为40%～90%的有机溶剂水溶液，充分混匀浸泡；
C、浸泡10～15min后，用超声波细胞粉碎机破碎5～10min进行多酚的提取；
D、将提取液离心处理，处理工艺为：3500～4500rpm、4～6min；
E、重复提取4～6次，合并上清液；
F、将上清液在旋转蒸发仪上40～50℃蒸发浓缩，然后真空冷冻干燥，得到铜藻多酚粗提物。
作为改进，还可以通过福林酚试剂比色法测定多酚含量，计算提取率。
作为优选，所述步骤B）中的有机溶剂为乙醇或丙酮，所述料液比为1:10（w/v）。
作为优选，所述步骤B）中的有机溶剂为乙醇。
再优选，所述步骤D）中的处理工艺为：4000rpm、5min。
再优选，所述步骤E）中的重复提取为5次；
最后，所述步骤F）的蒸发浓缩温度为45℃。
与现有技术相比，本发明的优点在于：
1、选用乙醇为提取液，不仅有利于铜藻多酚的溶出，且乙醇对铜藻多酚有保护作用，使铜藻多酚不易被氧化，因此不必再另外加入抗氧化剂，减少了工序，节约了成本；
2.采用GB/T8313-2008《福林酚试剂比色法》测定多酚含量，用没食子酸作为标准物质，建立标准曲线，通过标准曲线来换算样品中的铜藻多酚含量，计算更为准确；
3.真空冷冻干燥，既能保持铜藻多酚产品在干燥过程中的质量稳定性，又能有效的祛除残存的有机溶剂的味道，干燥除味效果好；
4.本发明的提取方法克服了传统水提取多酚的时间长、温度高、提取率低等不良效果影响，更为简单、省时，且提取的铜藻多酚产品含量较高。
具体实施方式
以下结合实施例对本发明作进一步详细描述。
实施例1
①.以铜藻为原料，将铜藻进行粉碎、30目过筛得到均匀的铜藻粉末；
②.准确称取一定量的铜藻粉末，按照料液比1:10（w/v）加入70%的乙醇水溶液，充分混匀浸泡；
③.浸泡10min后用超声波细胞粉碎机进行多酚的提取5min；
④.将提取液离心处理：4000rpm、5min；
⑤.重复提取5次，合并上清液，于旋转蒸发仪上45℃旋转蒸干；
⑥.旋转蒸发仪上45℃蒸发浓缩，然后真空冷冻干燥，得到铜藻多酚粗提物；
⑦.福林酚试剂比色法测定多酚含量，计算提取率为3.7‰。
实施例2
①.以铜藻为原料，将铜藻进行粉碎、30目过筛得到均匀的铜藻粉末；
②.准确称取一定量的铜藻粉末，按照料液比1:10（w/v）加入80%的乙醇水溶液，充分混匀浸泡；
③.浸泡10min后用超声波细胞粉碎机进行多酚的提取5min；
④.将提取液离心处理：4000rpm、5min；
⑤.重复提取5次，合并上清液，于旋转蒸发仪上45℃旋转蒸干；
⑥.旋转蒸发仪上45℃蒸发浓缩，然后真空冷冻干燥，得到铜藻多酚粗提物；
⑦.福林酚试剂比色法测定多酚含量，计算提取率为3.6‰。
实施例3
①.以铜藻为原料，将铜藻进行粉碎、30目过筛得到均匀的铜藻粉末；
②.准确称取1.000g铜藻粉末，按照料液比1:10（w/v）加入80%的丙酮水溶液，充分混匀浸泡；
③.浸泡15min后用超声波细胞粉碎机进行多酚的提取10min；
④.将提取液离心处理：4000rpm、5min，取上清液再用0.22um尼龙针头滤器过滤；
⑤.重复提取5次，合并滤液，于旋转蒸发仪上45℃旋转蒸干；
⑥.10mL离子水复溶后，真空冷冻干燥提取多酚产物，即为产品；
⑦.福林酚试剂比色法测定多酚含量，计算提取率为3.2‰。
从上面三个实施例可以看出，采用70%乙醇作为提取液，提取率更高。
以上所述，仅是本发明的较佳实施例而已，并非是对本发明作其他形式的限制，任何熟悉本专业的技术人员可能利用上述揭示的技术内容加以更改或改型为等同变化的等效实施例。但是凡是未脱离本发明技术方案内容，依据本发明的技术实质对以上实施例所作的任何简单修改、等同变化与改型，仍属于本发明技术方案的保护范围。

Claims (6)

1.一种铜藻多酚的提取方法，其特征在于包括以下步骤：
A、以铜藻为原料，将铜藻进行粉碎、25～35目过筛得到均匀的铜藻粉末；
B、准确称取一定量的铜藻粉末，按照料液比1:9～11（w/v）加入体积浓度为40%～90%的有机溶剂水溶液，充分混匀浸泡；
C、浸泡10～15min后，用超声波细胞粉碎机破碎5～10min进行多酚的提取；
D、将提取液离心处理，处理工艺为：3500～4500rpm、4～6min；
E、重复提取4～6次，合并上清液；
F、将上清液在旋转蒸发仪上40～50℃蒸发浓缩，然后真空冷冻干燥，得到铜藻多酚粗提物。
2.根据权利要求1所述的提取方法，其特征在于所述步骤B）中的有机溶剂为乙醇或丙酮，所述料液比为1:10（w/v）。
3.根据权利要求2所述的提取方法，其特征在于所述步骤B）中的有机溶剂为乙醇。
4.根据权利要求1所述的提取方法，其特征在于所述步骤D）中的处理工艺为：4000rpm、5min。
5.根据权利要求1所述的提取方法，其特征在于所述步骤E）中的重复提取为5次。
6.根据权利要求1所述的提取方法，其特征在于所述步骤F）中的蒸发浓缩温度为45℃。
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