CN105175466B - 一种从陈皮中提取橙皮苷的方法 - Google Patents

Abstract

本发明公开了一种从陈皮中提取橙皮苷的方法，属于橙皮苷提取技术领域。该方法为：取陈皮粉末，加入乙醇溶液，每1g陈皮粉末加入40～90mL乙醇溶液，得混合物；将混合物置于密闭容器中，在90～135℃下提取15～75min，冷却至室温，取上清液离心分离，即得橙皮苷提取液。采用乙醇溶液对陈皮中的橙皮苷进行提取，提取得率较高，最高达到6.1％。该从陈皮中提取橙皮苷的方法具有设备廉价易得、操作简便、快速、提取得率高等优点，有利于大规模生产。

Description

一种从陈皮中提取橙皮苷的方法

技术领域

本发明属于橙皮苷提取技术领域，具体涉及一种从陈皮中提取橙皮苷的方法。

背景技术

陈皮为芸香科植物橘及其栽培变种的干燥成熟果皮，富含色素、精油以及黄酮等多种有效成分，具有理气健脾、燥湿化痰的功效。橙皮苷是陈皮的主要活性成分之一，纯品为白色针状晶体，分子式C₂₈H₃₄O₁₅。研究表明，橙皮苷具有抗氧化、抗过敏、抑菌消炎、抗病毒和抗癌，预防心血管病症，降低血压、降低低密度胆固醇等生理功能，具有很高的药用价值。此外，橙皮苷还作为天然氧化剂用于食品和化妆品行业。传统从陈皮中提取橙皮苷的方法主要有水提法、醇回流法和碱提醇沉法，这些方法虽然操作简单，但是提取效率低，易造成环境污染。近年来，报道采用微波法和超声法提取陈皮中的橙皮苷，提取效率较高，提取时间也较短，但是超声法的噪音很大，微波法有辐射，且微波设备价格比较昂贵，这在一定程度上限制了其在企业大生产中的应用。

现有技术中，文献(陈皮中橙皮苷的提取与纯化工艺研究，齐兵，食品工业科技，第33卷第24期，第343-346页，2012年)记载了一种从陈皮中提取橙皮苷的技术方案，即粉碎干燥陈皮，并将陈皮放入烧瓶中，按照一定料液比加入一定浓度的乙醇溶液，置于恒温水浴，回流提取一段时间后将提取液冷却至室温，过滤，即得，料液比为陈皮：乙醇溶液＝1g:(25，30，35)mL；乙醇溶液体积浓度为75％、80％、85％；提取时间为2.5h、3h、3.5h；提取温度为75℃、80℃、85℃，提取得率为2.16～3.33％，该提取方法时间较长，容易破坏有效成分，提取得率较低。

发明内容

本发明的目的在于提供一种从陈皮中提取橙皮苷的方法，该方法具有设备廉价易得、操作简便、快速、提取得率高等优点。

为实现以上目的，本发明采用的技术方案为：

一种从陈皮中提取橙皮苷的方法，包括以下步骤：

1)取陈皮粉末，加入乙醇溶液，每1g陈皮粉末加入40～90mL乙醇溶液，得混合物；

2)将步骤1)混合物置于密闭容器中，在90～135℃下提取15～75min，冷却至室温，离心分离，即得橙皮苷提取液。

步骤1)所述陈皮粉末为80～100目。

步骤1)所述陈皮粉末是将陈皮在50～60℃下干燥3～5h，后粉碎得到的。

步骤1)所述乙醇溶液的体积浓度为40～70％。

步骤2)所述离心分离是在10000r/min转速下离心分离5min。

步骤2)所述密闭容器为聚四氟乙烯内衬的不锈钢反应釜。

优选的，步骤1)中每1g陈皮粉末加入40～70mL乙醇溶液。

步骤2)所述橙皮苷的得率测定，包括以下步骤：取橙皮苷提取液，稀释，采用高效液相色谱法测定。

所述高效液相色谱法的色谱条件：色谱柱为Kromasil C18，色谱柱的规格是250×4.6mm，流动相为乙腈、水和磷酸的混合物，乙腈:水:磷酸的体积比为20:80:0.024，流动相的流速为1mL/min，检测波长为283nm，进样量为20μL，柱温为室温。

本发明的有益效果：

本发明的从陈皮中提取橙皮苷的方法为溶剂热法，溶剂热法是一种新型的提取技术，是指将物料置于密闭的反应器内，以有机溶剂或者混合溶剂为反应介质，通过对体系加热进行提取的一种方法。具有以下优点：首先温度的影响，当体系的温度超过提取溶剂的沸点后，溶剂将处于临界或超临界状态，在这种情况下，溶剂将表现出一些独特的化学性质，如溶剂的表面张力、介电常数以及分子极性都会降低，这些都有助于提高活性组分的提取率，此外，温度的升高还可以加快分子扩散的速度，从而加快整个提取过程的质量转移；其次是压力的影响，随着提取温度的升高，反应体系内溶剂的自生压力也随之升高，压力的升高一方面有助于提高溶剂对基质的穿透能力，另一方面可以加快植物细胞壁的破裂，加速有效成分的溶出速度，提高活性组分的提取效率。

本发明采用溶剂热法从陈皮中提取橙皮苷，溶剂处于超临界状态，反应体系内压力较高，陈皮细胞破裂较快，橙皮苷的提取得率较高。以乙醇溶液为提取溶剂一方面降低了蛋白质、多糖、鞣质等杂质再提取液中的含量；另一方面也防止提取液发霉、变质，便于后续的分离、纯化。

本发明的从陈皮中提取橙皮苷的方法，快速、环保、廉价、高效，为陈皮的深加工及资源的合理利用提供了一种新思路、新方法。

附图说明

图1为本发明试验例中橙皮苷的标准曲线；

图2为实施例5与橙皮苷标准品的高效液相色谱图。

具体实施方式

下面结合具体实施例对本发明作进一步详细说明，但不构成对本发明的任何限制。

实施例1

本实施例从陈皮中提取橙皮苷的方法，包括以下步骤：

1)将陈皮在50℃下干燥4h，粉碎至100目，得陈皮粉末；

2)取陈皮粉末，加入体积浓度为50％的乙醇溶液，每1g陈皮粉末加入40mL乙醇溶液，得混合物；

3)将步骤2)中混合物置于聚四氟乙烯内衬的不锈钢反应釜中，后放入温度为120℃的烘箱中，提取45min，冷却至室温，后在10000r/min转速下高速离心分离5min，即得橙皮苷提取液。

取橙皮苷提取液，用体积浓度为50％的甲醇溶液稀释100倍，采用高效液相色谱测定橙皮苷的得率，色谱条件为色谱柱：Kromasil C18，规格250×4.6mm，流动相：乙腈:水:磷酸，体积比20:80:0.024，流速：1mL/min，检测波长：283nm，进样量：20μL，柱温：室温。

从陈皮中提取出橙皮苷的得率为4.74％。

实施例2

本实施例从陈皮中提取橙皮苷的方法，包括以下步骤：

1)将陈皮在60℃下干燥3h，粉碎至80目，得陈皮粉末；

2)取陈皮粉末，加入体积浓度为60％的乙醇溶液，每1g陈皮粉末加入70mL乙醇溶液，得混合物；

3)将步骤2)中混合物置于聚四氟乙烯内衬的不锈钢反应釜中，后放入温度为120℃的烘箱中，提取15min，冷却至室温，后在10000r/min转速下高速离心分离5min，即得橙皮苷提取液。

采用高效液相色谱法测定橙皮苷的得率，测定方法同实施例1，橙皮苷的得率为4.38％。

实施例3

本实施例从陈皮中提取橙皮苷的方法，包括以下步骤：

1)将陈皮在60℃下干燥3h，粉碎至100目，得陈皮粉末；

2)取陈皮粉末，加入体积浓度为50％的乙醇溶液，每1g陈皮粉末加入50mL乙醇溶液，得混合物；

3)将步骤2)中混合物置于聚四氟乙烯内衬的不锈钢反应釜中，后放入温度为135℃的烘箱中，提取45min，冷却至室温，后在10000r/min转速下高速离心分离5min，即得橙皮苷提取液。

采用高效液相色谱法测定橙皮苷的得率，测定方法同实施例1，橙皮苷的得率为4.62％。

实施例4

本实施例从陈皮中提取橙皮苷的方法，包括以下步骤：

1)将陈皮在60℃下干燥3h，粉碎至100目，得陈皮粉末；

2)取陈皮粉末，加入体积浓度为40％的乙醇溶液，每1g陈皮粉末加入70mL乙醇溶液，得到陈皮粉末和乙醇溶液的混合物；

3)将步骤2)中混合物置于聚四氟乙烯内衬的不锈钢反应釜中，后放入温度为135℃的烘箱中，提取30min，冷却至室温，后在10000r/min转速下高速离心分离5min，即得橙皮苷提取液。

采用高效液相色谱法测定橙皮苷的得率，测定方法同实施例1，橙皮苷的得率为4.01％。

实施例5

本实施例从陈皮中提取橙皮苷的方法，包括以下步骤：

1)将陈皮在60℃下干燥3h，粉碎至80目，得陈皮粉末；

2)取陈皮粉末，加入体积浓度为60％的乙醇溶液，每1g陈皮粉末加入70mL乙醇溶液，得混合物；

3)将步骤2)中混合物置于聚四氟乙烯内衬的不锈钢反应釜中，后放入温度为120℃的烘箱中，提取45min，冷却至室温，后在10000r/min转速下高速离心分离5min，即得橙皮苷提取液。

采用高效液相色谱法测定橙皮苷的得率，测定方法同实施例1，橙皮苷的得率为6.1％。

实施例6

本实施例从陈皮中提取橙皮苷的方法，包括以下步骤：

1)将陈皮在50℃下干燥4h，粉碎至100目，得陈皮粉末；

2)取陈皮粉末，加入体积浓度为70％的乙醇溶液，每1g陈皮粉末加入60mL乙醇溶液，得混合物；

3)将步骤2)中混合物置于聚四氟乙烯内衬的不锈钢反应釜中，后放入温度为120℃的烘箱中，提取45min，冷却至室温，后在10000r/min转速下高速离心分离5min，即得橙皮苷提取液。

采用高效液相色谱法测定橙皮苷的得率，测定方法同实施例1，橙皮苷的得率为5.89％。

实施例7

本实施例从陈皮中提取橙皮苷的方法，包括以下步骤：

1)将陈皮在55℃下干燥4h，粉碎至80目，得陈皮粉末；

2)取陈皮粉末，加入体积浓度为50％的乙醇溶液，每1g陈皮粉末加入60mL乙醇溶液，得混合物；

3)将步骤2)中混合物置于聚四氟乙烯内衬的不锈钢反应釜中，后放入温度为90℃的烘箱中，提取75min，冷却至室温，后在10000r/min转速下高速离心分离5min，即得橙皮苷提取液。

采用高效液相色谱法测定橙皮苷的得率，测定方法同实施例1，橙皮苷的得率为4.10％。

对比例1

本对比例采用乙醇回流法提取陈皮中的橙皮苷，包括以下步骤：

1)将陈皮条在60℃温度下干燥3h，得干燥后陈皮条；

2)取干燥后陈皮条，加入体积浓度为75％的乙醇溶液，每1g陈皮条加入乙醇溶液的量为35mL，得混合物，将混合物置于烧瓶中，后在85℃水浴条件下，回流提取45min，得提取物；

3)取步骤2)中的提取物在10000r/min转速下高速离心分离5min，取上清液，用50％甲醇溶液(体积浓度)稀释100倍，采用实施例1中高效液相色谱测定方法测得橙皮苷的得率为2.20％。

对比例2

本对比例采用超声法提取陈皮中的橙皮苷，包括以下步骤：

1)将陈皮在60℃温度下干燥3h，粉碎至100目，得陈皮粉末；

2)取陈皮粉末，加入体积浓度为60％的乙醇溶液，每1g陈皮粉末加入乙醇溶液的量为70mL，得混合物，将混合物置于具塞锥形瓶中，在超声频率为40KHz条件下，超声提取45min，得提取物；

3)取步骤2)中提取物的提取液在10000r/min转速下高速离心分离5min，取上清液，用50％甲醇溶液(体积浓度)稀释100倍，采用实施例1中高效液相色谱测定方法测得橙皮苷的得率为3.15％。

试验例

本试验例为橙皮苷提取的得率的测定。

试验方法：取实施例1-7橙皮苷提取液及对比例1-2的上清液各0.1mL，采用体积浓度为50％的甲醇溶液定容至10mL，避光保存；采用高效液相色谱法测定橙皮苷的得率，测定结果如表1所示。

色谱条件:

色谱柱：Kromasil C18(250×4.6mm，5μm)；

流动相：乙腈:水:磷酸，体积比20:80:0.024；

流速：1mL/min；

检测波长：283nm；

进样量：20μL；

柱温：室温。

标准曲线的制作方法为：精确取橙皮苷标准品4.0mg，用体积浓度为50％甲醇溶液定容于100mL容量瓶中，用体积浓度为50％甲醇溶液逐级稀释，配制成橙皮苷浓度为2.5、5.0、10、15、20μg/mL的标准溶液，按照上述色谱条件测定，根据色谱峰的保留时间确定样品中的橙皮苷。以橙皮苷标准品溶度为纵坐标，峰面积为横坐标，绘制标准曲线(见图1)。得出橙皮苷的回归方程为Y＝0.0782+4.0e^-5X，R²＝0.9999。橙皮苷标准品与陈皮中提取橙皮苷的高效液相色谱图见图2。由图2可以看出，提取液中的有两个色谱峰，其中一个与橙皮苷标准品的保留时间相吻合，由此可认为该物质为橙皮苷，这也证明了溶剂热法可以用来提取陈皮中橙皮苷。

橙皮苷的得率的计算：橙皮苷的得率＝(提取液中橙皮苷的质量/陈皮粉末质量)×100％

表1实施例1-7中橙皮苷的得率

项目	橙皮苷的得率
		实施例1	4.74％
实施例2	4.38％
		实施例3	4.62％
实施例4	4.01％
		实施例5	6.10％
实施例6	5.89％
		实施例7	4.10％
对比例1	2.20％
		对比例2	3.15％

从表1中可以看出，乙醇浓度、提取温度、提取时间以及加入乙醇溶液的量都会影响到橙皮苷的得率，当乙醇浓度为60％，提取温度为120℃，提取时间为45min，每1g陈皮粉末加入乙醇溶液的量为70mL时，橙皮苷的得率最高为6.10％。在相同的提取时间内，溶剂热法的得率比乙醇回流法提高了2.8倍，比超声回流提高了1.9倍。

Claims (5)

1.一种从陈皮中提取橙皮苷的方法，其特征在于，包括以下步骤：

1）取陈皮粉末，加入乙醇溶液，每1g陈皮粉末加入40~90mL乙醇溶液，得混合物；

2）将步骤1）所述混合物置于密闭容器中，在90~135℃下提取15~75min，冷却至室温，离心分离，即得橙皮苷提取液；

步骤1）所述陈皮粉末为80~100目；

步骤1）所述乙醇溶液的体积浓度为40~70%。

2.根据权利要求1所述的从陈皮中提取橙皮苷的方法，其特征在于，步骤1）所述陈皮粉末是将陈皮在50~60℃下干燥3~5h，后粉碎制得的。

3.根据权利要求1所述的从陈皮中提取橙皮苷的方法，其特征在于，步骤2）所述离心分离是在10000r/min转速下离心分离5min。

4.根据权利要求1所述的从陈皮中提取橙皮苷的方法，其特征在于，步骤2）中还包括得到橙皮苷提取液后对提取橙皮苷的得率测定，包括以下步骤：取橙皮苷提取液，稀释，采用高效液相色谱法测定。

5.根据权利要求4所述的从陈皮中提取橙皮苷的方法，其特征在于，所述高效液相色谱法的色谱条件：色谱柱为Kromasil C18，色谱柱的规格是250×4.6mm，流动相为乙腈、水和磷酸的混合物，乙腈:水:磷酸的体积比为20:80:0.024，流动相的流速为1mL/min，检测波长为283nm，进样量为20μL，柱温为室温。