CN105998792A - 一种从箬叶中提取总黄酮的方法 - Google Patents

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Abstract

本发明公开了一种从箬叶中提取总黄酮的提取方法。将新鲜箬叶洗净，干燥，粉碎，过160目得箬叶粉；然后将箬叶粉与NaCl‑NaOH混合溶液按照一定比例混合均匀，放入微波提取设备里在密闭高压环境下进行提取两次，提取完成后，提取液过滤，合并后定容，测定箬叶总黄酮的含量。本发明首次以NaCl‑NaOH混合溶液作为提取溶剂，结合微波辅助法在密闭高压环境条件下提取箬叶总黄酮。本发明具有快速高效、提取率高和环境友好的优点，有利于箬叶总黄酮后续的分离纯化工作。

Description

一种从箬叶中提取总黄酮的方法
技术领域
本发明属于天然植物有效活性成分提取领域，涉及一种从箬叶中提取总黄酮的方法。
背景技术
箬叶为箬竹的叶子，箬竹为禾本科、箬竹属植物，箬竹属约含有20种以上，主要分布于我国长江以南各省区。箬叶被国家卫生部确认为药食两用资源，是一种可以开发利用的新型食用、药用资源。
现代药物分析研究表明，箬叶中含有箬叶黄酮、箬叶多糖、有机硒、锌、碘、钙、多种维生素和氨基酸等对人体有益的活性成分。其中的黄酮类化合物与银杏黄酮类化合物具有相似的化学组成，具有明显的清除自由基、抗脂质过氧化和调节血脂的功效。
目前植物总黄酮的提取主要是以酒精溶液为提取溶剂，提取法有超声辅助法、热回流提取法、浸提法和超临界CO2提取法等。这些方法不同程度地存在提取时间长、效率低等问题，无法满足人们对现代化大生产的需求。微波辅助提取(Microwave-AssistedExtraction,MAE)是利用微波加热来加速溶剂对固体样品中目标提取物的提取过程。其作用机理是微波射线能够使植物细胞内温度急剧升高，使其内部压力超过细胞壁膨胀能力而导致细胞破裂，使细胞内活性物质传递到周围溶剂中被溶解而使提取率大大提高。目前以有机溶剂作为总黄酮提取介质结合微波辅助提取的设备主要是以微波炉为基础，经过改造后作为微波提取设备，在常压条件下进行提取。以有机溶剂作为提取介质，在密闭的微波提取环境条件下容易产生高温高压而发生爆炸危险，因此，微波辅助提取的溶剂应选择挥发性不强而且极性较强的离子溶液。试验表明，黄酮类物质在PH＝8.2的离子溶液中溶解度较高，而且，NaCl-NaOH混合溶液作为一种极性极高的介质，可以充分吸收微波能，促进植物细胞壁的溶胀破裂，进而提高植物细胞内活性成分的提取效率。目前以NaCl-NaOH混合溶液作为提取溶剂结合微波辅助法在密闭高压条件下提取的方法还没有文献报道过。
发明内容
针对目前利用有机溶剂提取植物总黄酮提取时间长、效率低且对环境造成污染等缺点，本发明提供了一种从箬叶中高效、环保、低成本地提取箬叶总黄酮的方法。
为了达到上述目的，本发明采用的技术方案如下：
(1)将新鲜的箬叶洗净，干燥，粉碎过160目得箬叶粉；
(2)在箬叶粉中加入NaCl-NaOH混合溶液，混合均匀后结合微波辅助在封闭高压环境条件下进行提取，提取两次。
(3)提取完成后，提取液过滤，合并后定容，测定箬叶总黄酮的吸光度，计算箬叶总黄酮提取率。
本发明方法步骤(1)中箬叶洗净后于50℃烘箱干燥，使箬叶中含水量在5％以下。
本发明步骤(2)中的微波提取设备为Multivave3000微波提取仪(奥地利安东帕有限公司)，微波功率为300～500W，提取液料比1:20～40g/mL，提取时间2～6min，提取温度为100℃。
本发明步骤(2)中NaCl-NaOH混合溶液，NaCl的质量浓度为0.2％～1.2％，PH＝8.2。
本发明方法得到的箬叶提取液，用“亚硝酸钠－硝酸铝－氢氧化钠比色法”测定总黄酮的含量。
本发明具有的优点体现在：
箬叶总黄酮类在PH＝8.2的NaCl-NaOH溶液中溶解度较高，而且，NaCl-NaOH混合溶液作为一种极性极高的介质，结合微波辅助在密闭高压环境下提取箬叶总黄酮，可以充分吸收微波能，促进植物细胞壁的溶胀破裂，导致黄酮类成分充分溶出扩散到溶剂中，从而提高了提取率，是一种高效、环保、低成本地提取箬叶总黄酮的方法；同时微波具有加热速度快，提取时间短，可有效保护黄酮的功能性成分不被不坏。
本发明提供上述箬叶总黄酮的提取方法，可以在制备食品、药品中应用，达到充分利用箬叶资源的目的。
具体实施方式
以下通过实施例形式对本发明的上述内容再作进一步的详细说明，但不应将此理解为本发明上述主题的范围仅限于以下的实施例，凡基于本发明上述内容所实现的技术均属于本发明的范围。
具体实施例1
将采摘的新鲜箬叶冲洗干净，自然晾干后放入烘箱中50℃烘干,使箬叶含水量降至5％以下。将干燥后的箬叶放入高速粉碎机粉碎，然后过160目得到箬叶粉；取0.5g箬叶粉放入微波提取罐中，按照1:20g/mL的比例加入PH＝8.2的NaCl-NaOH混合溶液，其中NaCl的质量浓度为0.2％，然后密封后放入微波提取仪中进行提取，功率为500W，提取温度为100℃，提取时间为4min。提取两次，将两次所得提取液过滤至50mL容量瓶中，定容，采用“亚硝酸钠－硝酸铝－氢氧化钠比色法”在510nm测定提取液吸光值，计算箬叶总黄酮的提取率达到2.54％。
具体实施例2
将采摘的新鲜箬叶冲洗干净，自然晾干后放入烘箱中50℃烘干,使箬叶含水量降至5％以下。将干燥后的箬叶放入高速粉碎机粉碎，然后过160目得到箬叶粉；取0.5g箬叶粉放入微波提取罐中，按照1:30g/mL的比例加入PH＝8.2的NaCl-NaOH混合溶液，其中NaCl的质量浓度为0.4％，然后密封后放入微波提取仪中进行提取，功率为400W，提取温度为100℃，提取时间为4min。提取两次，将两次所得提取液过滤至50mL容量瓶中，定容，采用“亚硝酸钠－硝酸铝－氢氧化钠比色法”在510nm测定提取液吸光值，计算箬叶总黄酮的提取率达到2.62％。
具体实施例3
将采摘的新鲜箬叶冲洗干净，自然晾干后放入烘箱中50℃烘干,使箬叶含水量降至5％以下。将干燥后的箬叶放入高速粉碎机粉碎，然后过160目得到箬叶粉；取0.5g箬叶粉放入微波提取罐中，按照1:40g/mL的比例加入PH＝8.2的NaCl-NaOH混合溶液，其中NaCl的质量浓度为1.0％，然后密封后放入微波提取仪中进行提取，功率为500W，提取温度为100℃，提取时间为6min。提取两次，将两次所得提取液过滤至50mL容量瓶中，定容，采用“亚硝酸钠－硝酸铝－氢氧化钠比色法”在510nm测定提取液吸光值，计算箬叶总黄酮的提取率达到2.88％。
具体实施例4
将采摘的新鲜箬叶冲洗干净，自然晾干后放入烘箱中50℃烘干,使箬叶含水量降至5％以下。将干燥后的箬叶放入高速粉碎机粉碎，然后过160目得到箬叶粉；取0.5g箬叶粉放入微波提取罐中，按照1:40g/mL的比例加入PH＝8.2的NaCl-NaOH混合溶液，其中NaCl的质量浓度为0.8％，然后密封后放入微波提取仪中进行提取，功率为400W，提取温度为100℃，提取时间为6min。提取两次，将两次所得提取液过滤至50mL容量瓶中，定容，采用“亚硝酸钠－硝酸铝－氢氧化钠比色法”在510nm测定提取液吸光值，计算箬叶总黄酮的提取率达到2.80％。
具体实施例5
将采摘的新鲜箬叶冲洗干净，自然晾干后放入烘箱中50℃烘干,使箬叶含水量降至5％以下。将干燥后的箬叶放入高速粉碎机粉碎，然后过160目得到箬叶粉；取0.5g箬叶粉放入微波提取罐中，按照1:30g/mL的比例加入PH＝8.2的NaCl-NaOH混合溶液，其中NaCl的质量浓度为1.0％，然后密封后放入微波提取仪中进行提取，功率为300W，提取温度为100℃，提取时间为4min。提取两次，将两次所得提取液过滤至50mL容量瓶中，定容，采用“亚硝酸钠－硝酸铝－氢氧化钠比色法”在510nm测定提取液吸光值，计算箬叶总黄酮的提取率达到2.68％。
具体实施例6
将采摘的新鲜箬叶冲洗干净，自然晾干后放入烘箱中50℃烘干,使箬叶含水量降至5％以下。将干燥后的箬叶放入高速粉碎机粉碎，然后过160目得到箬叶粉；取0.5g箬叶粉放入微波提取罐中，按照1:40g/mL的比例加入PH＝8.2的NaCl-NaOH混合溶液，其中NaCl的质量浓度为1.2％，然后密封后放入微波提取仪中进行提取，功率为500W，提取温度为100℃，提取时间为2min。提取两次，将两次所得提取液过滤至50mL容量瓶中，定容，采用“亚硝酸钠－硝酸铝－氢氧化钠比色法”在510nm测定提取液吸光值，计算箬叶总黄酮的提取率达到2.48％。
具体实施例7
将采摘的新鲜箬叶冲洗干净，自然晾干后放入烘箱中50℃烘干,使箬叶含水量降至5％以下。将干燥后的箬叶放入高速粉碎机粉碎，然后过160目得到箬叶粉；取0.5g箬叶粉放入微波提取罐中，按照1:36g/mL的比例加入PH＝8.2的NaCl-NaOH混合溶液，其中NaCl的质量浓度为1.0％，然后密封后放入微波提取仪中进行提取，功率为438W，提取温度为100℃，提取时间为5min。提取两次，将两次所得提取液过滤至50mL容量瓶中，定容，采用“亚硝酸钠－硝酸铝－氢氧化钠比色法”在510nm测定提取液吸光值，计算箬叶总黄酮的提取率达到2.92％。

Claims (5)

1.一种从箬叶中提取总黄酮的方法，其特征在于：(1)将新鲜的箬叶洗净，干燥，粉碎过160目得箬叶粉；(2)向箬叶粉中加入NaCl-NaOH混合溶液，混合均匀后结合微波辅助法在封闭高压环境下进行提取，重复提取两次；(3)提取完成后，提取液过滤，合并后定容，测定箬叶总黄酮的吸光度，计算箬叶总黄酮提取率。
2.根据权利要求1所述从箬叶中提取总黄酮的方法，其特征在于：步骤(1)中箬叶洗净后于50℃烘箱干燥，使箬叶含水量在5％以下。
3.根据权利要求1所述从箬叶中提取总黄酮的方法，其特征在于：步骤(2)中微波功率为300～500W，提取液料比1:20～40g/mL，提取时间2～6min，提取温度设定为100℃。
4.根据权利要求1所述从箬叶中提取总黄酮的方法，其特征在于：步骤(2)中NaCl-NaOH混合溶液，NaCl的质量浓度为0.2％～1.2％，向NaCl溶液中滴入微量NaOH溶液调节PH＝8.2。
5.根据权利要求1所述从箬叶中提取总黄酮的方法，其特征在于：步骤(3)中提取液过定容于50mL容量瓶中，用“亚硝酸钠－硝酸铝－氢氧化钠比色法”测定总黄酮的含量。
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