CN106860502A - 苦瓜籽黄酮的制备方法 - Google Patents

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Abstract

本发明涉及黄酮的制备技术领域，具体涉及一种苦瓜籽黄酮的制备方法，包括以下制备步骤：1)取苦瓜籽除杂洗净，烘干，粉碎；2)向破碎后的苦瓜籽中加入其重量6～10倍的溶剂，在120～240MPa下超高压处理1～3min；3)将步骤2)得到的浆液，在350～500W下微波提取8～16min；4)将步骤3)得到的溶液过滤，浓缩，喷雾干燥得到苦瓜籽黄酮。本发明通过采用两种提取方式的结合，能够有效提高苦瓜籽黄酮的纯度和提取率，还有效提高苦瓜籽黄酮的生物活性，同时还有效缩短制备周期。

Description

苦瓜籽黄酮的制备方法
技术领域
本发明涉及黄酮的制备技术领域，具体涉及一种苦瓜籽黄酮的制备方法。
背景技术
苦瓜为葫芦科一年生草本植物苦瓜的果实，又称凉瓜、癩葡萄、锦荔枝。原产东印度，我国南方各省均有栽培，尤以广西、广东、福建、湖南、贵州、四川更为普遍。苦瓜营养丰富，其中Vc含量很髙，居瓜类蔬菜之首，资源十分丰富，明代大药物学家李时珍说：“苦瓜气味苦、寒、无毒，具有除邪热、解劳乏,清心明目，益气壮阳之功效”。在民间，苦瓜药食两用已有儿千年的历史，世界各国均有苦瓜治病食疗的记载，我国传统医学记载，它性味苦寒，具有清暑涤热、明目解毒、凉血止疼、补肾润脾、降低血糖等功效。目前苦瓜食品的加工越来越普遍，而苦瓜籽的利用也显得比较重要。苦瓜籽为苦瓜的种子，苦甘、无毒，含有丰富的生物活性物质，有苦瓜籽蛋白和多肽以苦瓜籽黄酮类化合物、苦瓜籽油和苦瓜籽脂肪酸、Vc和类胡萝卜素等，而黄酮类化合物具有生物抗氧化、抗菌作用及抗衰老、治疗脑血管病、降血脂等药用保健功能，因此格外引人注目。黄酮具有的药理活性和医学价值，使其在医药、食品领域有广阔的应用前景。
目前，对于利用苦瓜籽中生理功能成分主要集中在多肽甙等，少见关于苦瓜籽黄酮的报道。因此，若能将苦瓜籽黄酮提取应用，可大程度提高苦瓜籽的综合利用价值。
发明内容
本发明所要解决的技术问题是提供苦瓜籽黄酮的制备方法，该方法制备的黄酮纯度和提取率高。
为实现上述目的，本发明所要解决的技术方案为：
本发明提供苦瓜籽黄酮的制备方法，包括以下制备步骤：
1)取苦瓜籽除杂洗净，烘干，粉碎；
2)向破碎后的苦瓜籽中加入其重量6～10倍的溶剂，在120～240MPa下超高压处理1～3min；
3)将步骤2)得到的浆液，在350～500W下微波提取8～16min；
4)将步骤3)得到的溶液过滤，浓缩，喷雾干燥得到苦瓜籽黄酮。
本发明所述的溶剂为乙醇溶液和乙酸乙酯的混合物。
本发明所述步骤1)中，烘干至含水量为30％～45％。
本发明所述步骤1)中，粉碎至100～200目。
本发明所述步骤2)中，超高压处理时的温度为38～48℃。
本发明所述步骤3)中，微波提取时的温度为35～45℃。
本发明所述步骤2)中，所述的溶剂为重量比为4～8:1的乙醇溶液和乙酸乙酯的混合物。
本发明所述的乙醇溶液的体积浓度为75～95％。
本发明所述步骤4)中，所述过滤使用孔径为0.05～0.18μm的膜进行过滤。
本发明所述步骤4)中，浓缩至相对密度为1.12～1.3。
本发明采用超高压处理苦瓜籽，在预定压力保持一段时间,使原料细胞内外压力达到平衡(有效成分达到溶解平衡)后迅速卸压,使细胞内外渗透压力差突然增大,细胞内的有效成分穿过细胞膜(细胞膜的结构在超高压下发生变化),转移到细胞外的提取液中,达到提取目标成分的目的。特别是针对苦瓜籽这种黄酮含量较低，且硬度较大的原料，更有利于提高黄酮的提取率。同时超高压提取避免了因长时间高温而引起的有效成分的变化、损失以及生理活性的降低，同时因为超高压是在密闭的环境下进行的，没有溶剂的挥发，不会对环境造成污染。
本发明在采用超高压处理原料后，接着使用微波提取，条件温和，使苦瓜籽的有效物质不被破坏，保持黄酮的生物活性，还有效促进苦瓜籽黄酮的溶出，本发明通过采用两种提取方式的结合，能够有效提高苦瓜籽黄酮的纯度和提取率，还有效提高苦瓜籽黄酮的生物活性，同时还有效缩短制备周期。
本发明方法制备得到的苦瓜籽黄酮的生物抗氧化、抗菌作用及抗衰老、治疗脑血管病、降血脂等药用保健功能比现有技术方法制备得到的苦瓜籽黄酮生物活性高。经试验，本发明制备得到的苦瓜籽黄酮对高血脂患者(200例)的有效率为100％；而现有技术制备得到的苦瓜籽黄酮对高血脂患者(200例)的有效率为78～88％，对应所选的病人病情程度相近；较好的抗氧化性，相对现有技术方法制备的苦瓜籽黄酮DPPH抑制率提高36.45～42.56％，ABTS+抑制率提高32.56～38.45％，总抗氧化能力提高29.5～36.8％。
具体实施方式
以下结合实施例对本发明作进一步说明，但本发明并不局限于这些实施例。
实施例1
苦瓜籽黄酮的制备方法，，包括以下制备步骤：
1)取苦瓜籽除杂洗净，烘干至含水量为30％，粉碎至200目；
2)向破碎后的苦瓜籽中加入其重量6倍的溶剂，在240MPa和38℃下超高压处理2min，所述的溶剂为重量比为4:1的体积浓度为95％的乙醇溶液和乙酸乙酯的混合物；
3)将步骤2)得到的浆液，在350W和45℃下微波取8min；
4)将步骤3)得到的溶液使用孔径为0.18μm的膜进行过滤，浓缩至相对密度为1.12，喷雾干燥得到苦瓜籽黄酮。
经HPLC检测，苦瓜籽黄酮纯度为98.2％，提取率为90％。
实施例2
苦瓜籽黄酮的制备方法，，包括以下制备步骤：
1)取苦瓜籽除杂洗净，烘干至含水量为35％，粉碎至180目；
2)向破碎后的苦瓜籽中加入其重量7倍的溶剂，在210MPa和40℃下超高压处理1min，所述的溶剂为重量比为5:1的体积浓度为90％的乙醇溶液和乙酸乙酯的混合物；
3)将步骤2)得到的浆液，在400W和43℃下微波取10min；
4)将步骤3)得到的溶液使用孔径为0.14μm的膜进行过滤，浓缩至相对密度为1.16，喷雾干燥得到苦瓜籽黄酮。
经HPLC检测，苦瓜籽黄酮纯度为98.6％，提取率为91％。
实施例3
苦瓜籽黄酮的制备方法，，包括以下制备步骤：
1)取苦瓜籽除杂洗净，烘干至含水量为40％，粉碎至150目；
2)向破碎后的苦瓜籽中加入其重量8倍的溶剂，在180MPa和43℃下超高压处理3min，所述的溶剂为重量比为6:1的体积浓度为85％的乙醇溶液和乙酸乙酯的混合物；
3)将步骤2)得到的浆液，在450W和40℃下微波取12min；
4)将步骤3)得到的溶液使用孔径为0.12μm的膜进行过滤，浓缩至相对密度为1.2，喷雾干燥得到苦瓜籽黄酮。经HPLC检测，苦瓜籽黄酮纯度为98.3％，提取率为91％。
实施例4
苦瓜籽黄酮的制备方法，，包括以下制备步骤：
1)取苦瓜籽除杂洗净，烘干至含水量为45％，粉碎至120目；
2)向破碎后的苦瓜籽中加入其重量9倍的溶剂，在150MPa和45℃下超高压处理2min，所述的溶剂为重量比为7:1的体积浓度为80％的乙醇溶液和乙酸乙酯的混合物；
3)将步骤2)得到的浆液，在500W和37℃下微波取14min；
4)将步骤3)得到的溶液使用孔径为0.1μm的膜进行过滤，浓缩至相对密度为1.25，喷雾干燥得到苦瓜籽黄酮。
经HPLC检测，苦瓜籽黄酮纯度为98.8％，提取率为92％。
实施例5
苦瓜籽黄酮的制备方法，，包括以下制备步骤：
1)取苦瓜籽除杂洗净，烘干至含水量为40％，粉碎至100目；
2)向破碎后的苦瓜籽中加入其重量10倍的溶剂，在120MPa和48℃下超高压处理1min，所述的溶剂为重量比为8:1的体积浓度为75％的乙醇溶液和乙酸乙酯的混合物；
3)将步骤2)得到的浆液，在450W和35℃下微波取16min；
4)将步骤3)得到的溶液使用孔径为0.05μm的膜进行过滤，浓缩至相对密度为1.3，喷雾干燥得到苦瓜籽黄酮。
经HPLC检测，苦瓜籽黄酮纯度为98.9％，提取率为92％。
现有技术制备苦瓜籽黄酮的方法：苦瓜籽在60℃下烘干，用粉碎机粉碎，采用索氏提取的方法对其进行脱脂脱色后干燥2h，置于干燥器中；或者苦瓜籽在60℃下烘干，用粉碎机粉碎，超声波提取，冷冻干燥。

Claims (9)

1.苦瓜籽黄酮的制备方法，其特征在于，包括以下制备步骤：
1)取苦瓜籽除杂洗净，烘干，粉碎；
2)向破碎后的苦瓜籽中加入其重量6～10倍的溶剂，在120～240MPa下超高压处理1～3min；
3)将步骤2)得到的浆液，在350～500W下微波提取8～16min；
4)将步骤3)得到的溶液过滤，浓缩，喷雾干燥得到苦瓜籽黄酮；
所述的溶剂为乙醇溶液和乙酸乙酯的混合物。
2.根据权利要求1所述的苦瓜籽黄酮的制备方法，其特征在于：所述步骤1)中，烘干至含水量为30％～45％。
3.根据权利要求1所述的苦瓜籽黄酮的制备方法，其特征在于：所述步骤1)中，粉碎至100～200目。
4.根据权利要求1所述的苦瓜籽黄酮的制备方法，其特征在于：所述步骤2)中，超高压处理时的温度为38～48℃。
5.根据权利要求1所述的苦瓜籽黄酮的制备方法，其特征在于：所述步骤3)中，微波提取时的温度为35～45℃。
6.根据权利要求1～4任意一项所述的苦瓜籽黄酮的制备方法，其特征在于：所述步骤2)中，所述的溶剂为重量比为4～8:1的乙醇溶液和乙酸乙酯的混合物。
7.根据权利要求5所述的苦瓜籽黄酮的制备方法，其特征在于：所述的乙醇溶液的体积浓度为75～95％。
8.根据权利要求1所述的苦瓜籽黄酮的制备方法，其特征在于：所述步骤4)中，所述过滤使用孔径为0.05～0.18μm的膜进行过滤。
9.根据权利要求7所述的苦瓜籽黄酮的制备方法，其特征在于：所述步骤4)中，浓缩至相对密度为1.12～1.3。
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