CN102816052A - 一种微波辅助提取杜仲叶中杜仲醇的方法 - Google Patents

Abstract

一种从杜仲叶中提取制备杜仲醇的提取的方法，是将杜仲叶粉碎、过筛，加入乙醇，微波加热，浸提液低速离心，上清液再经减压蒸馏浓缩，乙醇沉淀，醇液再次浓缩后得到浸膏；将浸膏上大孔吸附树脂柱进行分离，水洗脱，TLC检测，CHCl₃-MeOH-H₂O展开，收集10%硫酸乙醇溶液显粉紫色的部分；收集液再上硅胶柱分离，5%、10%CHCl₃-MeOH溶液依次洗脱，收集10%CHCl₃-MeOH洗脱部分，浓缩后得无色油状物，即杜仲醇。本发明的方法简单，容易工业化生产，通过微波辅助，能显著减少提取时间，提高杜仲醇的提取率。

Description

一种微波辅助提取杜仲叶中杜仲醇的方法

 

技术领域

     本发明属于中药提取技术，具体来说，即是一种微波辅助从杜仲叶中提取杜仲醇的方法。

背景技术

      杜仲(Eucommia ulmoides Oliv.)是中国特有的名贵经济树种，也是世界上适应范围

广的重要胶源植物，在我国26个省（区、市）均有栽培。杜仲自古以取皮入药而称，具有强筋骨、补肝肾、久服轻身耐老等功效，为中药之上品。国内外学者杜仲的丰产栽培、生理形态、化学成分及其含量、药理药效作用、系列产品开发以及仲胶进行了大量的研究，取得了丰硕的成果。特别是对化学成分的研究，已经分离出个木脂素类化合物，15个环烯醚萜类化合物，12个酚类化合物（包括8个苯丙素类合物），并分别对其进行了药理药效学研究。 [唐建军等,植物学通报.15(6),21-25(1998)；尉芹等,西北林学院学报.10(4):88-93(1995)；张康健等,西北林学院学报, 11(2):75-79(1996)，李家实等,中药通报,11(8):41-42(1986)；翰龙等,中草药,17(5):40-44(1996)；赵玉英等,天然产物研究与开发,7(3)：46-52(1995)；管淑玉等,中药材26(2):124-129(2003)；王文明等,西北药学杂志, 13(2):60-62(1998)]。早在1974年日本学者Bianco等就从杜仲中分离出一种无色油状物，结构鉴定为一化合物，命名为杜仲醇。经文献查证，仲醇只存在于植物杜仲（Eucommia ulmoides Olive）中，其他来源未见报道，是杜仲特异性成分，专属性强。经研究表明杜仲醇对大鼠体内胶原蛋白的形成具有明显的促进作用。

    现有制备杜仲醇的方法是采用乙酸乙酯萃取，再用活性碳-硅藻土分离，最后用甲醇洗脱。该方法所用原材料价格较高，具有一定毒性，工艺也较为复杂，很难实现工业化生产（M.Hattor，Q.M.CHE, et al, Shoyakygakuzasshi,42（1）：76-80,1998）。也有报道直接使用水提法[彭金年等,西北农林科技大学学报,34(01):35-38(2006)]，其收率较低，仅能达到8.95mg/g，经济效益低下。本发明方法中，通过引入微波辅助，极大的缩短了提取时间，提高了提取收率，整体工艺的经济效益得到明显改善。

发明内容

本发明的目的是提供一种简单易行的，借助微波辅助从杜仲叶中提取杜仲醇的方法。

本发明所述制备杜仲醇的工艺步骤如下：

（1）将杜仲叶粉碎，过80目筛；加入杜仲叶重量的10-30倍乙醇，乙醇浓度V/V为30-80%，在300-800W功率下微波加热1-10min，浸提液低速离心，上清液再经减压蒸馏浓缩，以95%乙醇沉淀，醇液再次浓缩后得到浸膏；

（2）将步骤（1）得到的浸膏，上D-101大孔吸附树脂柱进行分离，水洗脱，TLC检测，CHCl₃-MeOH-H₂O展开，展开剂中CHCl₃、MeOH、H₂O三者的比例为7:3:0.5，收集10%硫酸乙醇溶液显粉紫色的部分；收集液再上硅胶柱分离，5%、10%CHCl₃-MeOH溶液依次洗脱，收集10%CHCl₃-MeOH洗脱部分，浓缩后得无色油状物，即杜仲醇。

本发明的有益效果是：本发明的方法简单，容易工业化生产，通过微波辅助，能显著减少提取时间，提高杜仲醇的提取率。经检测，按本发明方法制得的杜仲醇粗提物含量在95%以上，提取率达到13.5mg/g，提取时间为5min。

具体实施方式

下面通过具体实施例进一步说明本发明的特点。

实例1

本实例是在微波辅助条件下，从杜仲叶中提取制备杜仲醇。具体提取过程为：

取干燥的杜仲叶1公斤，用植物粉碎机粉碎，过80目筛。加入杜仲叶重量的10倍的乙醇，乙醇浓度（V/V）为30%，在800W功率下微波加热5min，浸提液低速离心，上清液再经减压蒸馏浓缩，以95%乙醇沉淀，醇液再次浓缩后得到浸膏。浸膏上D-101大孔吸附树脂柱进行分离，5L水洗脱，每500mL收集为一份，用TLC检测，CHCl₃-MeOH-H₂O(7:3:0.5)展开， 10%硫酸乙醇溶液显粉紫色的部分收集合并。收集液再上硅胶柱分离，5%、10%CHCl₃-MeOH溶液依次洗脱，收集10%CHCl₃-MeOH洗脱部分，浓缩后得无色油状物，即杜仲醇。

实例2

本实例是在微波辅助条件下，从杜仲叶中提取制备杜仲醇。具体提取过程为：

取干燥的杜仲叶1公斤，用植物粉碎机粉碎，过80目筛。加入杜仲叶重量的20倍的乙醇，乙醇浓度（V/V）为50%，在800W功率下微波加热8min，浸提液低速离心，上清液再经减压蒸馏浓缩，以95%乙醇沉淀，醇液再次浓缩后得到浸膏。浸膏上D-101大孔吸附树脂柱进行分离，5L水洗脱，每500mL收集为一份，用TLC检测，CHCl₃-MeOH-H₂O(7:3:0.5)展开， 10%硫酸乙醇溶液显粉紫色的部分收集合并。收集液再上硅胶柱分离，5%、10%CHCl₃-MeOH溶液依次洗脱，收集10%CHCl₃-MeOH洗脱部分，浓缩后得无色油状物，即杜仲醇。

实例3

本实例是在微波辅助条件下，从杜仲叶中提取制备杜仲醇。具体提取过程为：

取干燥的杜仲叶1公斤，用植物粉碎机粉碎，过80目筛。加入杜仲叶重量的30倍的乙醇，乙醇浓度（V/V）为30%，在600W功率下微波加热10min，浸提液低速离心，上清液再经减压蒸馏浓缩，以95%乙醇沉淀，醇液再次浓缩后得到浸膏。浸膏上D-101大孔吸附树脂柱进行分离，5L水洗脱，每500mL收集为一份，用TLC检测，CHCl₃-MeOH-H₂O(7:3:0.5)展开， 10%硫酸乙醇溶液显粉紫色的部分收集合并。收集液再上硅胶柱分离，5%、10%CHCl₃-MeOH溶液依次洗脱，收集10%CHCl₃-MeOH洗脱部分，浓缩后得无色油状物，即杜仲醇。

实例4

本实例是对实例1获得的杜仲醇进行结构分析：

通过质谱、红外、核磁共振氢谱确定该油状物的结构，数据如下：EI-MS，m/z 189（M+1）；¹H NMR(CDCl₃) 3.99(d，1H)，2.48(m，1H)，2.07(1H)，2.62(m，1H)，1.26(m，1H)，1.58 (m，1H)，3.87(s，1H)，4.09(s，1H)，4.05(d，1H)，3.97(m，1H)；IR(KBr压片)：1423cm^-1（c=c），3340cm^-1（OH）。通过与杜仲醇标准药品比照，以高效液相色谱法测定，本方法提取得到的杜仲醇提取物中杜仲醇的含量达到95%以上。

Claims (1)

1.一种微波辅助提取杜仲叶中杜仲醇的制备方法，其特征是：

（1）将杜仲叶粉碎，过80目筛；加入杜仲叶重量的10-30倍乙醇，乙醇浓度V/V为30-80%，在300-800W功率下微波加热1-10min，浸提液低速离心，上清液再经减压蒸馏浓缩，以95%乙醇沉淀，醇液再次浓缩后得到浸膏；

（2）将步骤（1）得到的浸膏，上D-101大孔吸附树脂柱进行分离，水洗脱，TLC检测，CHCl₃-MeOH-H₂O展开，展开剂中CHCl₃、MeOH、H₂O三者的比例为7:3:0.5，收集10%硫酸乙醇溶液显粉紫色的部分；收集液再上硅胶柱分离，5%、10%CHCl₃-MeOH溶液依次洗脱，收集10%CHCl₃-MeOH洗脱部分，浓缩后得无色油状物，即杜仲醇。