CN102786505B - 斑唇马先蒿中分离三种黄酮类单体化合物的制备方法 - Google Patents
斑唇马先蒿中分离三种黄酮类单体化合物的制备方法 Download PDFInfo
- Publication number
- CN102786505B CN102786505B CN201210325100.2A CN201210325100A CN102786505B CN 102786505 B CN102786505 B CN 102786505B CN 201210325100 A CN201210325100 A CN 201210325100A CN 102786505 B CN102786505 B CN 102786505B
- Authority
- CN
- China
- Prior art keywords
- herb
- chloroform
- ethyl acetate
- resupinate woodbetony
- methanol
- Prior art date
- Legal status (The legal status is an assumption and is not a legal conclusion. Google has not performed a legal analysis and makes no representation as to the accuracy of the status listed.)
- Expired - Fee Related
Links
- 229930003944 flavone Natural products 0.000 title claims abstract description 28
- 235000011949 flavones Nutrition 0.000 title claims abstract description 28
- GAMYVSCDDLXAQW-AOIWZFSPSA-N Thermopsosid Natural products O(C)c1c(O)ccc(C=2Oc3c(c(O)cc(O[C@H]4[C@H](O)[C@@H](O)[C@H](O)[C@H](CO)O4)c3)C(=O)C=2)c1 GAMYVSCDDLXAQW-AOIWZFSPSA-N 0.000 title claims abstract description 27
- 150000002212 flavone derivatives Chemical class 0.000 title claims abstract description 27
- VHBFFQKBGNRLFZ-UHFFFAOYSA-N vitamin p Natural products O1C2=CC=CC=C2C(=O)C=C1C1=CC=CC=C1 VHBFFQKBGNRLFZ-UHFFFAOYSA-N 0.000 title claims abstract description 27
- 150000001875 compounds Chemical class 0.000 title claims abstract description 20
- 238000002360 preparation method Methods 0.000 title claims abstract description 19
- 241000167859 Pedicularis Species 0.000 title abstract description 8
- 241000628997 Flos Species 0.000 title abstract 7
- XEKOWRVHYACXOJ-UHFFFAOYSA-N Ethyl acetate Chemical compound CCOC(C)=O XEKOWRVHYACXOJ-UHFFFAOYSA-N 0.000 claims abstract description 48
- HEDRZPFGACZZDS-UHFFFAOYSA-N Chloroform Chemical compound ClC(Cl)Cl HEDRZPFGACZZDS-UHFFFAOYSA-N 0.000 claims abstract description 46
- XADJWCRESPGUTB-UHFFFAOYSA-N apigenin Natural products C1=CC(O)=CC=C1C1=CC(=O)C2=CC(O)=C(O)C=C2O1 XADJWCRESPGUTB-UHFFFAOYSA-N 0.000 claims abstract description 36
- 235000008714 apigenin Nutrition 0.000 claims abstract description 36
- KZNIFHPLKGYRTM-UHFFFAOYSA-N apigenin Chemical compound C1=CC(O)=CC=C1C1=CC(=O)C2=C(O)C=C(O)C=C2O1 KZNIFHPLKGYRTM-UHFFFAOYSA-N 0.000 claims abstract description 36
- 229940117893 apigenin Drugs 0.000 claims abstract description 36
- SCZVLDHREVKTSH-UHFFFAOYSA-N 4',5,7-trihydroxy-3'-methoxyflavone Chemical compound C1=C(O)C(OC)=CC(C=2OC3=CC(O)=CC(O)=C3C(=O)C=2)=C1 SCZVLDHREVKTSH-UHFFFAOYSA-N 0.000 claims abstract description 35
- UOSZQIQUCYTISS-UHFFFAOYSA-N chrysoeriol Natural products C1=C(O)C(C)=CC(C=2OC3=CC(O)=CC(O)=C3C(=O)C=2)=C1 UOSZQIQUCYTISS-UHFFFAOYSA-N 0.000 claims abstract description 35
- MWDZOUNAPSSOEL-UHFFFAOYSA-N kaempferol Natural products OC1=C(C(=O)c2cc(O)cc(O)c2O1)c3ccc(O)cc3 MWDZOUNAPSSOEL-UHFFFAOYSA-N 0.000 claims abstract description 35
- LRDGATPGVJTWLJ-UHFFFAOYSA-N luteolin Natural products OC1=CC(O)=CC(C=2OC3=CC(O)=CC(O)=C3C(=O)C=2)=C1 LRDGATPGVJTWLJ-UHFFFAOYSA-N 0.000 claims abstract description 35
- 235000009498 luteolin Nutrition 0.000 claims abstract description 35
- IQPNAANSBPBGFQ-UHFFFAOYSA-N luteolin Chemical compound C=1C(O)=CC(O)=C(C(C=2)=O)C=1OC=2C1=CC=C(O)C(O)=C1 IQPNAANSBPBGFQ-UHFFFAOYSA-N 0.000 claims abstract description 35
- XLYOFNOQVPJJNP-UHFFFAOYSA-N water Chemical compound O XLYOFNOQVPJJNP-UHFFFAOYSA-N 0.000 claims abstract description 34
- 239000000178 monomer Substances 0.000 claims abstract description 27
- WORJEOGGNQDSOE-UHFFFAOYSA-N chloroform;methanol Chemical compound OC.ClC(Cl)Cl WORJEOGGNQDSOE-UHFFFAOYSA-N 0.000 claims abstract description 23
- 239000008367 deionised water Substances 0.000 claims abstract description 23
- 229910021641 deionized water Inorganic materials 0.000 claims abstract description 23
- 238000004821 distillation Methods 0.000 claims abstract description 14
- 239000007788 liquid Substances 0.000 claims abstract description 14
- LFQSCWFLJHTTHZ-UHFFFAOYSA-N Ethanol Chemical compound CCO LFQSCWFLJHTTHZ-UHFFFAOYSA-N 0.000 claims abstract description 12
- VYPSYNLAJGMNEJ-UHFFFAOYSA-N Silicium dioxide Chemical compound O=[Si]=O VYPSYNLAJGMNEJ-UHFFFAOYSA-N 0.000 claims abstract description 12
- 229910002027 silica gel Inorganic materials 0.000 claims abstract description 12
- 239000000741 silica gel Substances 0.000 claims abstract description 12
- 229960001866 silicon dioxide Drugs 0.000 claims abstract description 12
- 241001423752 Pedicularis canadensis Species 0.000 claims description 81
- 235000009225 Stachys officinalis Nutrition 0.000 claims description 81
- OKKJLVBELUTLKV-UHFFFAOYSA-N Methanol Chemical compound OC OKKJLVBELUTLKV-UHFFFAOYSA-N 0.000 claims description 66
- 239000000284 extract Substances 0.000 claims description 44
- 238000003810 ethyl acetate extraction Methods 0.000 claims description 33
- 229930003935 flavonoid Natural products 0.000 claims description 27
- 235000017173 flavonoids Nutrition 0.000 claims description 27
- 230000002829 reductive effect Effects 0.000 claims description 22
- 239000000126 substance Substances 0.000 claims description 22
- 150000002215 flavonoids Chemical class 0.000 claims description 15
- -1 flavonoid compound Chemical class 0.000 claims description 14
- 230000002411 adverse Effects 0.000 claims description 13
- UGAPHEBNTGUMBB-UHFFFAOYSA-N acetic acid;ethyl acetate Chemical compound CC(O)=O.CCOC(C)=O UGAPHEBNTGUMBB-UHFFFAOYSA-N 0.000 claims description 11
- 239000002024 ethyl acetate extract Substances 0.000 claims description 11
- 238000000605 extraction Methods 0.000 claims description 11
- 238000010298 pulverizing process Methods 0.000 claims description 11
- 238000010262 high-speed countercurrent chromatography Methods 0.000 abstract description 5
- 238000000034 method Methods 0.000 abstract description 5
- 238000001035 drying Methods 0.000 abstract 3
- 230000006837 decompression Effects 0.000 abstract 2
- HIXDQWDOVZUNNA-UHFFFAOYSA-N 2-(3,4-dimethoxyphenyl)-5-hydroxy-7-methoxychromen-4-one Chemical compound C=1C(OC)=CC(O)=C(C(C=2)=O)C=1OC=2C1=CC=C(OC)C(OC)=C1 HIXDQWDOVZUNNA-UHFFFAOYSA-N 0.000 abstract 1
- SIHHLZPXQLFPMC-UHFFFAOYSA-N chloroform;methanol;hydrate Chemical compound O.OC.ClC(Cl)Cl SIHHLZPXQLFPMC-UHFFFAOYSA-N 0.000 abstract 1
- 239000003480 eluent Substances 0.000 abstract 1
- RTZKZFJDLAIYFH-UHFFFAOYSA-N ether Substances CCOCC RTZKZFJDLAIYFH-UHFFFAOYSA-N 0.000 abstract 1
- 239000003208 petroleum Substances 0.000 abstract 1
- 239000003814 drug Substances 0.000 description 5
- 210000004027 cell Anatomy 0.000 description 3
- 238000005516 engineering process Methods 0.000 description 3
- 229930182470 glycoside Natural products 0.000 description 3
- 206010028980 Neoplasm Diseases 0.000 description 2
- 230000008901 benefit Effects 0.000 description 2
- 235000019636 bitter flavor Nutrition 0.000 description 2
- 201000011510 cancer Diseases 0.000 description 2
- 201000010099 disease Diseases 0.000 description 2
- 208000037265 diseases, disorders, signs and symptoms Diseases 0.000 description 2
- 230000000694 effects Effects 0.000 description 2
- 238000002955 isolation Methods 0.000 description 2
- 238000011084 recovery Methods 0.000 description 2
- 238000000926 separation method Methods 0.000 description 2
- 238000001179 sorption measurement Methods 0.000 description 2
- 206010006187 Breast cancer Diseases 0.000 description 1
- 208000026310 Breast neoplasm Diseases 0.000 description 1
- 208000017897 Carcinoma of esophagus Diseases 0.000 description 1
- 206010012218 Delirium Diseases 0.000 description 1
- 230000005526 G1 to G0 transition Effects 0.000 description 1
- 201000003741 Gastrointestinal carcinoma Diseases 0.000 description 1
- 206010019133 Hangover Diseases 0.000 description 1
- ZUKLFFYDSALIQW-MSUKCBDUSA-N Iridoid glycoside Chemical compound [H][C@]12CC[C@H](C(O)=O)[C@@]1([H])[C@H](OC1O[C@H](CO)[C@@H](O)[C@H](O)[C@H]1O)OC=C2 ZUKLFFYDSALIQW-MSUKCBDUSA-N 0.000 description 1
- 206010058467 Lung neoplasm malignant Diseases 0.000 description 1
- 206010029260 Neuroblastoma Diseases 0.000 description 1
- 206010059013 Nocturnal emission Diseases 0.000 description 1
- 206010030113 Oedema Diseases 0.000 description 1
- 206010030155 Oesophageal carcinoma Diseases 0.000 description 1
- 241001529246 Platymiscium Species 0.000 description 1
- 206010060862 Prostate cancer Diseases 0.000 description 1
- 208000000236 Prostatic Neoplasms Diseases 0.000 description 1
- 208000003443 Unconsciousness Diseases 0.000 description 1
- 238000004458 analytical method Methods 0.000 description 1
- 230000003110 anti-inflammatory effect Effects 0.000 description 1
- 230000000259 anti-tumor effect Effects 0.000 description 1
- 239000003963 antioxidant agent Substances 0.000 description 1
- 230000003078 antioxidant effect Effects 0.000 description 1
- 235000006708 antioxidants Nutrition 0.000 description 1
- 230000006907 apoptotic process Effects 0.000 description 1
- 230000008859 change Effects 0.000 description 1
- 238000013375 chromatographic separation Methods 0.000 description 1
- 238000004587 chromatography analysis Methods 0.000 description 1
- 238000004440 column chromatography Methods 0.000 description 1
- 230000001472 cytotoxic effect Effects 0.000 description 1
- 230000003247 decreasing effect Effects 0.000 description 1
- 229940079593 drug Drugs 0.000 description 1
- 238000005265 energy consumption Methods 0.000 description 1
- 201000005619 esophageal carcinoma Diseases 0.000 description 1
- 230000002349 favourable effect Effects 0.000 description 1
- 150000002213 flavones Chemical class 0.000 description 1
- 235000013305 food Nutrition 0.000 description 1
- 230000036541 health Effects 0.000 description 1
- 241000411851 herbal medicine Species 0.000 description 1
- 208000021760 high fever Diseases 0.000 description 1
- 239000004615 ingredient Substances 0.000 description 1
- 230000005764 inhibitory process Effects 0.000 description 1
- 201000002313 intestinal cancer Diseases 0.000 description 1
- 229930182489 iridoid glycoside Natural products 0.000 description 1
- 238000000622 liquid--liquid extraction Methods 0.000 description 1
- 201000007270 liver cancer Diseases 0.000 description 1
- 208000014018 liver neoplasm Diseases 0.000 description 1
- 201000005202 lung cancer Diseases 0.000 description 1
- 208000020816 lung neoplasm Diseases 0.000 description 1
- 235000013372 meat Nutrition 0.000 description 1
- 230000010534 mechanism of action Effects 0.000 description 1
- 230000000394 mitotic effect Effects 0.000 description 1
- 210000003205 muscle Anatomy 0.000 description 1
- 239000003960 organic solvent Substances 0.000 description 1
- 229930015704 phenylpropanoid Natural products 0.000 description 1
- 239000002574 poison Substances 0.000 description 1
- 231100000614 poison Toxicity 0.000 description 1
- 230000008569 process Effects 0.000 description 1
- 230000001681 protective effect Effects 0.000 description 1
- 239000012925 reference material Substances 0.000 description 1
- 230000000452 restraining effect Effects 0.000 description 1
- 239000007787 solid Substances 0.000 description 1
- 239000007790 solid phase Substances 0.000 description 1
- 210000004881 tumor cell Anatomy 0.000 description 1
Landscapes
- Medicines Containing Plant Substances (AREA)
- Medicines That Contain Protein Lipid Enzymes And Other Medicines (AREA)
- Pharmaceuticals Containing Other Organic And Inorganic Compounds (AREA)
Abstract
本发明涉及一种斑唇马先蒿中分离三种黄酮类单体化合物的制备方法,该方法包括以下步骤:⑴将粉碎的斑唇马先蒿全草用酒精进行热回流提取,合并得到提取液;⑵提取液进行减压蒸干,得到斑唇马先蒿提取物;⑶将斑唇马先蒿提取物先用去离子水溶解,再依次用石油醚、乙酸乙酯萃取,合并乙酸乙酯萃取液;乙酸乙酯萃取液进行减压蒸干,即得斑唇马先蒿乙酸乙酯萃取部分;⑷将斑唇马先蒿乙酸乙酯萃取部分上硅胶柱,用氯仿-甲醇溶液洗脱,得到洗脱液,该洗脱液蒸干,即得黄酮粗提物;⑸黄酮粗提物采用高速逆流色谱设备,在氯仿-甲醇-水体系中进行分离,即可分别得到木犀草素、芹菜素、柯伊利素三种黄酮类化合物高纯度单体。本发明简便、快速、成本低廉。
Description
技术领域
本发明涉及木犀草素、芹菜素、柯伊利素三种黄酮类单体化合物的制备方法,尤其涉及斑唇马先蒿中分离三种黄酮类单体化合物的制备方法。
背景技术
木犀草素、芹菜素、柯伊利素均属于黄酮类化合物,被发现具有良好的抗肿瘤、抗氧化、抗炎和许多其它药理活性。最近报道芹菜素在许多类型的癌症细胞表现出强烈的细胞毒活性,对神经母细胞瘤肝癌、乳腺癌、食管癌、大肠癌、肺癌和前列腺癌细胞都有明显抑制作用,它的作用机理主要是通过损伤癌细胞的有丝分裂或促进细胞凋亡而达到抑制肿瘤细胞的作用。
斑唇马先蒿(Pedicularis longiflora Rudolph. var. tubiformis(Klotz.)Tsoong)的花呈棕黄色或棕褐色,气微,味微苦、辣。性味微苦、涩,寒,具有清热解毒、强筋利水、固精等功效,可全草入药,用于风热症、肉食中毒、高烧神昏谵语、水肿、遗精等症,具有较高的药用价值,是藏药中的一种传统药材。近年来, 该属植物的药用价值逐渐引起研究者的重视,其中黄酮、环烯醚萜苷、苯丙素苷类化合物是该属的特征性化合物,具有较高的药用价值。
高速逆流色谱(High-speed Countercurrent Chromatography,简称HSCCC)是不使用固态支撑体或载体的液液分配色谱技术,具有应用范围广,适应性好;操作简便,容易掌握;回收率高;重现性好;分离效率高,分离量较大的优点,它克服了固相载体对样品的吸附损失、变性等缺点,样品回收率高,已被广泛应用于天然药物成分的分析鉴定及分离制备。与其它柱色谱相比较,它克服了固定相载体带来的样品吸附、损失、污染和峰形拖尾等缺点。
发明内容
本发明所要解决的技术问题是提供一种简便、快速、成本低廉的斑唇马先蒿中分离三种黄酮类单体化合物的制备方法。
为解决上述问题,本发明所述的斑唇马先蒿中分离三种黄酮类单体化合物的制备方法,包括以下步骤:
⑴将粉碎的斑唇马先蒿全草采用质量浓度为30%~95%的酒精在30~80℃下进行热回流提取,提取1~4次、每次1~4h,合并得到提取液;
⑵将所述提取液在温度为40~80℃、压力为0.05~0.08MPa的条件下减压蒸干,得到斑唇马先蒿提取物;
⑶将所述斑唇马先蒿提取物先用去离子水溶解,再依次用石油醚、乙酸乙酯萃取2~10次,合并乙酸乙酯萃取液;所述乙酸乙酯萃取液在温度为40~70℃、压力为0.05~0.08MPa的条件下减压蒸干,即得斑唇马先蒿乙酸乙酯萃取部分;
⑷将所述斑唇马先蒿乙酸乙酯萃取部分上硅胶柱,用2~50倍柱床体积的氯仿-甲醇溶液洗脱,得到含有木犀草素、芹菜素和柯伊利素的洗脱液,该洗脱液在温度为40~80℃、压力为0.05~0.08MPa的条件下蒸干,即得黄酮粗提物;
⑸所述黄酮粗提物采用高速逆流色谱设备,在氯仿-甲醇-水体系中以转速为500~1000r/min、温度为20~50℃的条件对其进行分离,即可分别得到木犀草素(Luteolin)、芹菜素(apigenin)、柯伊利素(chrysoeriol)三种黄酮类化合物高纯度单体。
所述步骤⑶中斑唇马先蒿提取物与所述去离子水的质量体积比为1:1~10。
所述步骤⑷氯仿-甲醇溶液中氯仿与甲醇的体积比为1~20:1。
所述步骤⑸氯仿-甲醇-水体系中氯仿、甲醇、水的体积比为1~4:1~4:1~4。
本发明与现有技术相比具有以下优点:
1、本发明采用高速逆流色谱(HSCCC)分离技术,与传统柱色谱分离技术相比,不但有效地缩短了分离时间,而且减少了工艺过程中的有机溶剂消耗和能耗。
2、本发明一次分离可以同时得到三种二苯乙烯苷类单体化合物、性质稳定,纯度高(可达到98%以上),可应用于医药、标准物质、保健食品和保健药物等。
3、本发明采用HSCCC分离技术,该方法重现性高、简单、快速、可以有效地减少传统固液分离中的样品损耗问题,成本低廉、简便易行。
具体实施方式
实施例1 斑唇马先蒿中分离三种黄酮类单体化合物的制备方法,包括以下步骤:
⑴将粉碎的斑唇马先蒿全草采用质量浓度为30%的酒精在50℃下进行热回流提取,提取1次,1h后得到提取液。
⑵将提取液在温度为40℃、压力为0.05MPa的条件下减压蒸干,得到斑唇马先蒿提取物。
⑶将斑唇马先蒿提取物先用去离子水溶解,再依次用石油醚、乙酸乙酯萃取2次,合并乙酸乙酯萃取液;其中斑唇马先蒿提取物与去离子水的质量体积比(kg/ml)为1:1。
乙酸乙酯萃取液在温度为40℃、压力为0.05MPa的条件下减压蒸干,即得斑唇马先蒿乙酸乙酯萃取部分。
⑷将斑唇马先蒿乙酸乙酯萃取部分上硅胶柱,用2倍柱床体积的氯仿-甲醇溶液洗脱,得到含有木犀草素、芹菜素和柯伊利素的洗脱液,该洗脱液在温度为40℃、压力为0.05MPa的条件下蒸干,即得黄酮粗提物。
其中:氯仿-甲醇溶液中氯仿与甲醇的体积比(ml/ml)为20:1。
⑸黄酮粗提物采用高速逆流色谱设备,在氯仿-甲醇-水体系中以转速为500r/min、温度为20℃的条件对其进行分离,即可分别得到木犀草素(Luteolin)、芹菜素(apigenin)、柯伊利素(chrysoeriol)三种黄酮类化合物高纯度单体。
其中:氯仿-甲醇-水体系中氯仿、甲醇、水的体积比(ml/ml)为1:1:1。
实施例2 斑唇马先蒿中分离三种黄酮类单体化合物的制备方法,包括以下步骤:
⑴将粉碎的斑唇马先蒿全草采用质量浓度为95%的酒精在80℃下进行热回流提取,提取4次、每次4h,合并得到提取液。
⑵将提取液在温度为80℃、压力为0.08MPa的条件下减压蒸干,得到斑唇马先蒿提取物。
⑶将斑唇马先蒿提取物先用去离子水溶解,再依次用石油醚、乙酸乙酯萃取10次,合并乙酸乙酯萃取液;其中斑唇马先蒿提取物与去离子水的质量体积比(kg/ml)为1:10。
乙酸乙酯萃取液在温度为70℃、压力为0.08MPa的条件下减压蒸干,即得斑唇马先蒿乙酸乙酯萃取部分。
⑷将斑唇马先蒿乙酸乙酯萃取部分上硅胶柱,用50倍柱床体积的氯仿-甲醇溶液洗脱,得到含有木犀草素、芹菜素和柯伊利素的洗脱液,该洗脱液在温度为80℃、压力为0.08MPa的条件下蒸干,即得黄酮粗提物。
其中:氯仿-甲醇溶液中氯仿与甲醇的体积比(ml/ml)为1:1。
⑸黄酮粗提物采用高速逆流色谱设备,在氯仿-甲醇-水体系中以转速为1000r/min、温度为50℃的条件对其进行分离,即可分别得到木犀草素(Luteolin)、芹菜素(apigenin)、柯伊利素(chrysoeriol)三种黄酮类化合物高纯度单体。
其中:氯仿-甲醇-水体系中氯仿、甲醇、水的体积比(ml/ml)为4:1:4。
实施例3 斑唇马先蒿中分离三种黄酮类单体化合物的制备方法,包括以下步骤:
⑴将粉碎的斑唇马先蒿全草采用质量浓度为95%的酒精在80℃下进行热回流提取,提取2次、每次3h,合并得到提取液。
⑵将提取液在温度为70℃、压力为0.07MPa的条件下减压蒸干,得到斑唇马先蒿提取物。
⑶将斑唇马先蒿提取物先用去离子水溶解,再依次用石油醚、乙酸乙酯萃取8次,合并乙酸乙酯萃取液;其中斑唇马先蒿提取物与去离子水的质量体积比(kg/ml)为1:2。
乙酸乙酯萃取液在温度为50℃、压力为0.07MPa的条件下减压蒸干,即得斑唇马先蒿乙酸乙酯萃取部分。
⑷将斑唇马先蒿乙酸乙酯萃取部分上硅胶柱,用16倍柱床体积的氯仿-甲醇溶液洗脱,得到含有木犀草素、芹菜素和柯伊利素的洗脱液,该洗脱液在温度为50℃、压力为0.07MPa的条件下蒸干,即得黄酮粗提物。
其中:氯仿-甲醇溶液中氯仿与甲醇的体积比(ml/ml)为5:1。
⑸黄酮粗提物采用高速逆流色谱设备,在氯仿-甲醇-水体系中以转速为850r/min、温度为40℃的条件对其进行分离,即可分别得到木犀草素(Luteolin)、芹菜素(apigenin)、柯伊利素(chrysoeriol)三种黄酮类化合物高纯度单体。
其中:氯仿-甲醇-水体系中氯仿、甲醇、水的体积比(ml/ml)为1:4:1。
实施例4 斑唇马先蒿中分离三种黄酮类单体化合物的制备方法,包括以下步骤:
⑴将粉碎的斑唇马先蒿全草采用质量浓度为70%的酒精在65℃下进行热回流提取,提取3次、每次2h,合并得到提取液。
⑵将提取液在温度为65℃、压力为0.06MPa的条件下减压蒸干,得到斑唇马先蒿提取物。
⑶将斑唇马先蒿提取物先用去离子水溶解,再依次用石油醚、乙酸乙酯萃取6次,合并乙酸乙酯萃取液;其中斑唇马先蒿提取物与去离子水的质量体积比(kg/ml)为1:3。
乙酸乙酯萃取液在温度为60℃、压力为0.06MPa的条件下减压蒸干,即得斑唇马先蒿乙酸乙酯萃取部分。
⑷将斑唇马先蒿乙酸乙酯萃取部分上硅胶柱,用12倍柱床体积的氯仿-甲醇溶液洗脱,得到含有木犀草素、芹菜素和柯伊利素的洗脱液,该洗脱液在温度为60℃、压力为0.06MPa的条件下蒸干,即得黄酮粗提物。
其中:氯仿-甲醇溶液中氯仿与甲醇的体积比(ml/ml)为10:1。
⑸黄酮粗提物采用高速逆流色谱设备,在氯仿-甲醇-水体系中以转速为850r/min、温度为35℃的条件对其进行分离,即可分别得到木犀草素(Luteolin)、芹菜素(apigenin)、柯伊利素(chrysoeriol)三种黄酮类化合物高纯度单体。
其中:氯仿-甲醇-水体系中氯仿、甲醇、水的体积比(ml/ml)为4:1:1。
实施例5 斑唇马先蒿中分离三种黄酮类单体化合物的制备方法,包括以下步骤:
⑴将粉碎的斑唇马先蒿全草采用质量浓度为60%的酒精在70℃下进行热回流提取,提取3次、每次3h,合并得到提取液。
⑵将提取液在温度为60℃、压力为0.05MPa的条件下减压蒸干,得到斑唇马先蒿提取物。
⑶将斑唇马先蒿提取物先用去离子水溶解,再依次用石油醚、乙酸乙酯萃取5次,合并乙酸乙酯萃取液;其中斑唇马先蒿提取物与去离子水的质量体积比(kg/ml)为1:5。
乙酸乙酯萃取液在温度为60℃、压力为0.05MPa的条件下减压蒸干,即得斑唇马先蒿乙酸乙酯萃取部分。
⑷将斑唇马先蒿乙酸乙酯萃取部分上硅胶柱,用4倍柱床体积的氯仿-甲醇溶液洗脱,得到含有木犀草素、芹菜素和柯伊利素的洗脱液,该洗脱液在温度为60℃、压力为0.05MPa的条件下蒸干,即得黄酮粗提物。
其中:氯仿-甲醇溶液中氯仿与甲醇的体积比(ml/ml)为3:1。
⑸黄酮粗提物采用高速逆流色谱设备,在氯仿-甲醇-水体系中以转速为750r/min、温度为30℃的条件对其进行分离,即可分别得到木犀草素(Luteolin)、芹菜素(apigenin)、柯伊利素(chrysoeriol)三种黄酮类化合物高纯度单体。
其中:氯仿-甲醇-水体系中氯仿、甲醇、水的体积比(ml/ml)为3.5:2:2.5。
实施例6 斑唇马先蒿中分离三种黄酮类单体化合物的制备方法,包括以下步骤:
⑴将粉碎的斑唇马先蒿全草采用质量浓度为65%的酒精在65℃下进行热回流提取,提取2次、每次3h,合并得到提取液。
⑵将提取液在温度为60℃、压力为0.08MPa的条件下减压蒸干,得到斑唇马先蒿提取物。
⑶将斑唇马先蒿提取物先用去离子水溶解,再依次用石油醚、乙酸乙酯萃取7次,合并乙酸乙酯萃取液;其中斑唇马先蒿提取物与去离子水的质量体积比(kg/ml)为1:6。
乙酸乙酯萃取液在温度为55℃、压力为0.07MPa的条件下减压蒸干,即得斑唇马先蒿乙酸乙酯萃取部分。
⑷将斑唇马先蒿乙酸乙酯萃取部分上硅胶柱,用20倍柱床体积的氯仿-甲醇溶液洗脱,得到含有木犀草素、芹菜素和柯伊利素的洗脱液,该洗脱液在温度为75℃、压力为0.07MPa的条件下蒸干,即得黄酮粗提物。
其中:氯仿-甲醇溶液中氯仿与甲醇的体积比(ml/ml)为4:1。
⑸黄酮粗提物采用高速逆流色谱设备,在氯仿-甲醇-水体系中以转速为950r/min、温度为35℃的条件对其进行分离,即可分别得到木犀草素(Luteolin)、芹菜素(apigenin)、柯伊利素(chrysoeriol)三种黄酮类化合物高纯度单体。
其中:氯仿-甲醇-水体系中氯仿、甲醇、水的体积比(ml/ml)为2:1:2。
实施例7 斑唇马先蒿中分离三种黄酮类单体化合物的制备方法,包括以下步骤:
⑴将粉碎的斑唇马先蒿全草采用质量浓度为50%的酒精在70℃下进行热回流提取,提取1次、每次4h,合并得到提取液。
⑵将提取液在温度为55℃、压力为0.07MPa的条件下减压蒸干,得到斑唇马先蒿提取物。
⑶将斑唇马先蒿提取物先用去离子水溶解,再依次用石油醚、乙酸乙酯萃取10次,合并乙酸乙酯萃取液;其中斑唇马先蒿提取物与去离子水的质量体积比(kg/ml)为1:8。
乙酸乙酯萃取液在温度为55℃、压力为0.06MPa的条件下减压蒸干,即得斑唇马先蒿乙酸乙酯萃取部分。
⑷将斑唇马先蒿乙酸乙酯萃取部分上硅胶柱,用10倍柱床体积的氯仿-甲醇溶液洗脱,得到含有木犀草素、芹菜素和柯伊利素的洗脱液,该洗脱液在温度为55℃、压力为0.06MPa的条件下蒸干,即得黄酮粗提物。
其中:氯仿-甲醇溶液中氯仿与甲醇的体积比(ml/ml)为5:1。
⑸黄酮粗提物采用高速逆流色谱设备,在氯仿-甲醇-水体系中以转速为750r/min、温度为30℃的条件对其进行分离,即可分别得到木犀草素(Luteolin)、芹菜素(apigenin)、柯伊利素(chrysoeriol)三种黄酮类化合物高纯度单体。
其中:氯仿-甲醇-水体系中氯仿、甲醇、水的体积比(ml/ml)为4:2:2.5。
实施例8 斑唇马先蒿中分离三种黄酮类单体化合物的制备方法,包括以下步骤:
⑴将粉碎的斑唇马先蒿全草采用质量浓度为60%的酒精在70℃下进行热回流提取,提取4次、每次1h,合并得到提取液。
⑵将提取液在温度为65℃、压力为0.08MPa的条件下减压蒸干,得到斑唇马先蒿提取物。
⑶将斑唇马先蒿提取物先用去离子水溶解,再依次用石油醚、乙酸乙酯萃取5次,合并乙酸乙酯萃取液;其中斑唇马先蒿提取物与去离子水的质量体积比(kg/ml)为1:9。
乙酸乙酯萃取液在温度为65℃、压力为0.08MPa的条件下减压蒸干,即得斑唇马先蒿乙酸乙酯萃取部分。
⑷将斑唇马先蒿乙酸乙酯萃取部分上硅胶柱,用2倍柱床体积的氯仿-甲醇溶液洗脱,得到含有木犀草素、芹菜素和柯伊利素的洗脱液,该洗脱液在温度为65℃、压力为0.08MPa的条件下蒸干,即得黄酮粗提物。
其中:氯仿-甲醇溶液中氯仿与甲醇的体积比(ml/ml)为8:1。
⑸黄酮粗提物采用高速逆流色谱设备,在氯仿-甲醇-水体系中以转速为700r/min、温度为25℃的条件对其进行分离,即可分别得到木犀草素(Luteolin)、芹菜素(apigenin)、柯伊利素(chrysoeriol)三种黄酮类化合物高纯度单体。
其中:氯仿-甲醇-水体系中氯仿、甲醇、水的体积比(ml/ml)为3:2:2.5。
实施例9 斑唇马先蒿中分离三种黄酮类单体化合物的制备方法,包括以下步骤:
⑴将粉碎的斑唇马先蒿全草采用质量浓度为60%的酒精在30℃下进行热回流提取,提取3次、每次2h,合并得到提取液。
⑵将提取液在温度为45℃、压力为0.05MPa的条件下减压蒸干,得到斑唇马先蒿提取物。
⑶将斑唇马先蒿提取物先用去离子水溶解,再依次用石油醚、乙酸乙酯萃取5次,合并乙酸乙酯萃取液;其中斑唇马先蒿提取物与去离子水的质量体积比(kg/ml)为1:4。
乙酸乙酯萃取液在温度为45℃、压力为0.05MPa的条件下减压蒸干,即得斑唇马先蒿乙酸乙酯萃取部分。
⑷将斑唇马先蒿乙酸乙酯萃取部分上硅胶柱,用50倍柱床体积的氯仿-甲醇溶液洗脱,得到含有木犀草素、芹菜素和柯伊利素的洗脱液,该洗脱液在温度为45℃、压力为0.06MPa的条件下蒸干,即得黄酮粗提物。
其中:氯仿-甲醇溶液中氯仿与甲醇的体积比(ml/ml)为10:1。
⑸黄酮粗提物采用高速逆流色谱设备,在氯仿-甲醇-水体系中以转速为1000r/min、温度为45℃的条件对其进行分离,即可分别得到木犀草素(Luteolin)、芹菜素(apigenin)、柯伊利素(chrysoeriol)三种黄酮类化合物高纯度单体。
其中:氯仿-甲醇-水体系中氯仿、甲醇、水的体积比(ml/ml)为1:4:1。
Claims (1)
1.斑唇马先蒿中分离三种黄酮类单体化合物的制备方法,包括以下步骤:
⑴将粉碎的斑唇马先蒿全草采用质量浓度为30%~95%的酒精在30~80℃下进行热回流提取,提取1~4次、每次1~4h,合并得到提取液;
⑵将所述提取液在温度为40~80℃、压力为0.05~0.08MPa的条件下减压蒸干,得到斑唇马先蒿提取物;
⑶将所述斑唇马先蒿提取物先用去离子水溶解,再依次用石油醚、乙酸乙酯萃取2~10次,合并乙酸乙酯萃取液;所述乙酸乙酯萃取液在温度为40~70℃、压力为0.05~0.08MPa的条件下减压蒸干,即得斑唇马先蒿乙酸乙酯萃取部分;所述斑唇马先蒿提取物与所述去离子水的质量体积比为1:1~10;
⑷将所述斑唇马先蒿乙酸乙酯萃取部分上硅胶柱,用2~50倍柱床体积的氯仿-甲醇溶液洗脱,得到含有木犀草素、芹菜素和柯伊利素的洗脱液,该洗脱液在温度为40~80℃、压力为0.05~0.08MPa的条件下蒸干,即得黄酮粗提物;所述氯仿-甲醇溶液中氯仿与甲醇的体积比为1~20:1;
⑸所述黄酮粗提物采用高速逆流色谱设备,在氯仿-甲醇-水体系中以转速为500~1000r/min、温度为20~50℃的条件对其进行分离,即可分别得到木犀草素、芹菜素、柯伊利素三种黄酮类化合物单体;所述氯仿-甲醇-水体系中氯仿、甲醇、水的体积比为1~4:1~4:1~4。
Priority Applications (1)
Application Number | Priority Date | Filing Date | Title |
---|---|---|---|
CN201210325100.2A CN102786505B (zh) | 2012-09-05 | 2012-09-05 | 斑唇马先蒿中分离三种黄酮类单体化合物的制备方法 |
Applications Claiming Priority (1)
Application Number | Priority Date | Filing Date | Title |
---|---|---|---|
CN201210325100.2A CN102786505B (zh) | 2012-09-05 | 2012-09-05 | 斑唇马先蒿中分离三种黄酮类单体化合物的制备方法 |
Publications (2)
Publication Number | Publication Date |
---|---|
CN102786505A CN102786505A (zh) | 2012-11-21 |
CN102786505B true CN102786505B (zh) | 2014-12-17 |
Family
ID=47152110
Family Applications (1)
Application Number | Title | Priority Date | Filing Date |
---|---|---|---|
CN201210325100.2A Expired - Fee Related CN102786505B (zh) | 2012-09-05 | 2012-09-05 | 斑唇马先蒿中分离三种黄酮类单体化合物的制备方法 |
Country Status (1)
Country | Link |
---|---|
CN (1) | CN102786505B (zh) |
Families Citing this family (3)
Publication number | Priority date | Publication date | Assignee | Title |
---|---|---|---|---|
CN103613621B (zh) * | 2013-12-04 | 2016-04-20 | 中国科学院西北高原生物研究所 | 斑唇马先蒿中毛蕊花苷和异毛蕊花苷的制备方法 |
CN106177126A (zh) * | 2014-08-25 | 2016-12-07 | 烟台市华文欣欣医药科技有限公司 | 一种制备促进伤口愈合的药物组合物的方法 |
CN110075179B (zh) * | 2019-05-15 | 2021-10-01 | 青海普兰特药业有限公司 | 一种斑唇马先蒿配方颗粒、制备方法及其检测方法 |
Citations (3)
Publication number | Priority date | Publication date | Assignee | Title |
---|---|---|---|---|
CN101168551A (zh) * | 2007-11-16 | 2008-04-30 | 河北大学 | 马先蒿木脂素类化合物、制备方法及应用 |
EP1925311A1 (en) * | 2006-11-15 | 2008-05-28 | Melbrosin International Produktions und Vertriebs GmbH & Co KG | Use of a plant extract or plant juice |
CN101225095A (zh) * | 2008-01-22 | 2008-07-23 | 西安交通大学 | 一种从马先蒿植物中提取桃叶珊瑚苷的方法 |
-
2012
- 2012-09-05 CN CN201210325100.2A patent/CN102786505B/zh not_active Expired - Fee Related
Patent Citations (3)
Publication number | Priority date | Publication date | Assignee | Title |
---|---|---|---|---|
EP1925311A1 (en) * | 2006-11-15 | 2008-05-28 | Melbrosin International Produktions und Vertriebs GmbH & Co KG | Use of a plant extract or plant juice |
CN101168551A (zh) * | 2007-11-16 | 2008-04-30 | 河北大学 | 马先蒿木脂素类化合物、制备方法及应用 |
CN101225095A (zh) * | 2008-01-22 | 2008-07-23 | 西安交通大学 | 一种从马先蒿植物中提取桃叶珊瑚苷的方法 |
Non-Patent Citations (3)
Title |
---|
Flavonoid, phenylethanoid and iridoid constituents of the whole plant of Pedicularis longiflora var. tubiformis;Masayuki Fujii,等;《Planta Medica》;19951231;第61卷(第6期);第584页 * |
Hong-Biao Chu,等.Chemical Constituents from Pedicularis rex C. B. Clarke.《Z. Naturforsch.》.2007,第62b卷 * |
三色马先蒿的化学成分研究;杨利荣,等;《云南植物研究》;20061231;第28卷(第5期);第553-557页 * |
Also Published As
Publication number | Publication date |
---|---|
CN102786505A (zh) | 2012-11-21 |
Similar Documents
Publication | Publication Date | Title |
---|---|---|
CN102976909B (zh) | 一种从生姜中提取纯化6-姜酚的方法 | |
CN103145677B (zh) | 一种利用高速逆流色谱分离白木香叶片中活性成分的方法 | |
CN102786563A (zh) | 从大黄中分离三种二苯乙烯苷类单体化合物的制备方法 | |
CN101343225A (zh) | 高纯度二咖啡酰奎宁酸类化合物的制备方法 | |
CN104825463A (zh) | 白肉灵芝提取物的代谢调节及抗缺氧的用途 | |
CN104031013A (zh) | 一种利用高速逆流色谱分离纯化制备丹酚酸b和迷迭香酸的方法 | |
CN103193610A (zh) | 从姜黄中提取纯化姜黄素类化合物的制备方法 | |
CN103304605A (zh) | 从胡芦巴中分离制备黄酮苷和二苯乙烯苷类化合物的方法 | |
CN102786505B (zh) | 斑唇马先蒿中分离三种黄酮类单体化合物的制备方法 | |
CN103408613A (zh) | 大黄药材中蒽醌苷和二苯乙烯苷化学对照品的制备方法 | |
CN104072513A (zh) | 一种防风草二内酯的制备方法及抗肿瘤应用 | |
CN103450286A (zh) | 独一味中四种环烯醚萜苷类单体化合物的分离制备方法 | |
CN102924542A (zh) | 一种从小叶丁香中提取松果菊苷的方法 | |
CN102653537B (zh) | 从头花蓼全草中提取制备高纯度水飞蓟宾的方法 | |
CN103880895A (zh) | 一种利用高速逆流色谱分离纯化制备哈巴俄苷和斩龙剑苷a的方法 | |
CN101671321B (zh) | 一种脱水穿心莲内酯分离纯化方法 | |
CN103479723A (zh) | 丹参二萜醌有效部位及其逆流色谱制备方法和癌症治疗应用 | |
CN105085453A (zh) | 一种利用高速逆流色谱法从马蔺子中分离制备低聚芪类化合物的方法 | |
CN106674305A (zh) | 一种促进机体冷习服能力的单体药物的提取方法及应用 | |
CN102260152A (zh) | 一种姜烯酚提取物的制备方法及其医药用途 | |
CN102108072A (zh) | 从当归提取物中制备洋川芎内酯i的方法 | |
CN105384784A (zh) | 青海栽培何首乌中三种抗氧化活性芪多酚类物质的筛选、分离制备方法 | |
CN111777657A (zh) | 一种皂苷化合物及其制备方法与应用 | |
CN103351411B (zh) | 独一味中五种苯丙素苷类单体化合物的分离制备方法 | |
CN103613621B (zh) | 斑唇马先蒿中毛蕊花苷和异毛蕊花苷的制备方法 |
Legal Events
Date | Code | Title | Description |
---|---|---|---|
C06 | Publication | ||
PB01 | Publication | ||
C10 | Entry into substantive examination | ||
SE01 | Entry into force of request for substantive examination | ||
C14 | Grant of patent or utility model | ||
GR01 | Patent grant | ||
CF01 | Termination of patent right due to non-payment of annual fee |
Granted publication date: 20141217 |
|
CF01 | Termination of patent right due to non-payment of annual fee |