CN102716135A - 羽扇豆酮在制备预防或治疗糖尿病的产品中的应用 - Google Patents

Abstract

本发明公开了羽扇豆酮在制备预防或治疗糖尿病的产品中的应用，发明人采用现代药效及急性毒性研究技术对羽扇豆酮进行了深度开发，经药效学试验研究表明：以羽扇豆酮为主要成分可加工制成适宜的药物制剂用于预防或治疗糖尿病，其药理活性明显，性能稳定，安全可靠，不仅降血糖作用明显，还能降低由于胰岛素抵抗导致的血清胰岛素和C肽升高现象，从而改善糖耐量；另外，羽扇豆酮的提取原料来源易得，制备工艺易于产业化，可带动药材资源的充分开发与利用，因此羽扇豆酮在作为防治糖尿病的药物或保健品方面具有良好的应用前景。

Description

羽扇豆酮在制备预防或治疗糖尿病的产品中的应用

 

技术领域

本发明涉及五环三萜类化合物羽扇豆酮在制备预防或治疗糖尿病的产品中的应用。

背景技术

糖尿病是一种由于胰岛素分泌缺陷及(或)其生物学作用障碍引起的以高血糖为特征的代谢性疾病，糖尿病已经成为世界上继肿瘤、心脑血管病之后第三位严重危害人类健康的慢性疾病。

目前临床上用于治疗糖尿病的药物主要有双胍类、噻唑烷二酮类等，如双胍类的二甲双胍，主要作用是提高胰岛素的敏感性，增加葡萄糖的利用量，抑制肝葡萄糖的输出，增加胰岛素受体的数量和亲和力，减少肠道对葡萄糖的吸收，达到治疗作用；罗格列酮及吡格列酮作为胰岛素增敏剂，通过在骨骼肌、脂肪组织、肝脏改善胰岛素的敏感性而降低血糖。但都存在一定的局限性和不良反应，如体重增加、心衰、乳酸性酸中毒，长期使用可引起并发症等，如文迪雅，表现出更易增加患者心脏病突发和心脏衰竭的风险。目前美国已经限制该类药品的使用，同时这些药品将退出欧洲市场。因此，寻找新的副作用小的抗糖尿病药物成为国内外研究热点。

   在木榄Bruguiera gymnorrhiza (L.) Savigny.、鬼箭羽 Euonymus alatus (Thunb.) Sieb.、野葛Pueraria lobata (Willd) Ohwi、紫矿Butea monosperma (Lam.)等用于治疗糖尿病的植物中和资源丰富的盆架树 Winchia calophylla A.DC.和毛排钱草Phyllodium elegans (Lour.) Desv.等民族药用植物中含有羽扇豆烷型五环三萜类化合物羽扇豆酮。近年来的体外细胞研究表明，羽扇豆酮具有抑制α-葡萄糖苷酶、胆碱脂酶及蛋白酪氨酸磷酸酶1B活性与抗氧化作用，但这些关于羽扇豆酮的研究均在体外进行，当存在糖尿病的病理状态下，属五环三萜类化合物的羽扇豆酮在动物体内可能会发生生物转化，在体内能否发挥抗糖尿病作用，值得商榷。同时，判断一个产品能否应用于临床治疗糖尿病，是以其在体内能否具有改善糖耐量、刺激胰岛素分泌或降低由于胰岛素抵抗导致的血清胰岛素升高现象，最终改善糖尿病的高血糖状况为主要依据和前提条件的，而国内外目前的研究尚未涉及羽扇豆酮在体内的抗糖尿病作用。

发明内容

本发明的目的在于，提供羽扇豆酮在制备预防或治疗糖尿病的产品中的应用。本发明经实验研究证实：羽扇豆酮对糖尿病的药理活性明显，安全可靠，可用于制备预防或治疗糖尿病的产品。

本发明采用如下的技术方案：羽扇豆酮在制备预防或治疗糖尿病的产品中的应用。

羽扇豆酮(lupenone)的化学结构为：

所述的羽扇豆酮，是从芭蕉根药材中提取得到的羽扇豆酮粗品或羽扇豆酮单体，其纯度大于90%。

所述羽扇豆酮的提取方法为：取新鲜或干燥的芭蕉根，用水或乙醇冷浸、渗漉、回流或超声提取1～6次，滤过，合并滤液，将滤液浓缩成浸膏；浸膏加入适量的水分散，用石油醚萃取1～8次至石油醚无色，再用乙酸乙酯萃取1～8次，回收乙酸乙酯得乙酸乙酯浸膏；浸膏用乙酸乙酯溶解后拌样，湿法装200目硅胶柱，用3～11倍柱体积石油醚冲洗，再用3～12倍柱体积的石油醚∶乙酸乙酯=100∶1洗脱、回收，得羽扇豆酮粗品；再用乙醇重结晶，即得羽扇豆酮单体。

前述产品为药物或保健品。

所述的药物或保健品优选为口服制剂。具体地说，以羽扇豆酮为活性成分，加入药用载体或赋形剂制成药物或保健品制剂。

例如：取羽扇豆酮适量，加入胶囊剂常用辅料，混匀，装入胶囊，包装，制成胶囊剂。

或取羽扇豆酮，加适量的增溶剂，研磨，加入少量水稀释，混匀，加入矫味剂和防腐剂，混匀，加水至规定量，过滤，混匀，分装，灭菌，制成口服液。

 或取羽扇豆酮，加入片剂常用辅料，混匀，制成颗粒，干燥，压片，制成片剂。

或取羽扇豆酮，加入颗粒剂常用辅料，制成颗粒，干燥，整粒，制成颗粒剂。

或取羽扇豆酮，加入丸剂常用辅料，整丸，干燥，制成丸剂。

或取羽扇豆酮，加入滴丸基质，混匀，滴制成丸，制成滴丸制剂。

也可以将羽扇豆酮与其它药用活性成分组合，加入药用载体或赋形剂制成药物组合物或保健品制剂。

上述药物制剂或保健品可根据本领域已知的方法制备成可作为人用的适当的施用形式或剂量形式，给药途径可为肠道或非肠道，如口服、肌肉、皮下、鼻腔、口腔粘膜、皮肤、腹膜或直肠等。给药剂型例如片剂、胶囊、滴丸、气雾剂、丸剂、粉剂、溶液剂、混悬剂、乳剂、颗粒剂、脂质体、透皮剂、口含片、检剂、膏剂等。可以是普通制剂、缓释制剂、控释制剂及各种微粒给药系统。

制成片剂时，可以广泛使用本领域公知的各种载体：例如稀释剂与吸收剂，如淀粉、糊精、乳糖、甘露醇、蔗糖、氯化钠、葡萄糖、尿素、碳酸钙、白陶土、微晶纤维素等；湿润剂与粘合剂，如水、甘油、聚乙二醇、乙醇、丙醇、淀粉浆、糊精、糖浆、蜂蜜、葡萄糖溶液、阿拉伯胶浆、明胶浆、羧甲基纤维素钠、甲基纤维素、聚乙烯吡咯烷酮等；润滑剂，如滑石粉、玉米淀粉、硬脂酸盐、硼酸、液体石蜡、聚乙二醇等。还可以将片剂进一步制成包衣片，例如糖包衣片、薄膜包衣片、肠溶包衣片，或双层片、多层片。制成丸剂时，可以广泛使用本领域公知的各种载体：例如稀释剂与吸收剂，如葡萄糖、乳糖、淀粉、氮化植物油、聚乙烯吡咯烷酮、滑石粉等；粘合剂如阿拉伯胶、明胶、乙醇、蜂蜜、米糊或面糊等；崩解剂，如干燥淀粉、海藻酸盐、十二烷基磺酸钠、甲基纤维素、乙基纤维素等。此外，还可以添加常规的助溶剂、缓冲剂、pH调节剂等。如需要，也可以向药物制剂或保健品中添加着色剂、防腐剂、香料、矫味剂、甜味剂或其它辅料。

为了验证羽扇豆酮在预防或治疗糖尿病方面的作用效果，申请人进行了一系列试验研究，具体如下：

一、羽扇豆酮对四氧嘧啶糖尿病小鼠模型的影响

1．供试药液的制备

取羽扇豆酮配制成1.2mg/ml的溶液，按0.1ml/10g灌胃给药。

2．羽扇豆酮对四氧嘧啶糖尿病小鼠血糖的影响

2.1造模方法：昆明种小白鼠，6-8周龄，体重18-22g，雄性，小鼠禁食不禁水12h后，断尾取尾静脉血，用强生稳豪血糖仪测定空腹血糖值，作为造模前血糖。血糖值均在正常范围之内，表明小鼠基础血糖合格。随机取10只小鼠定为空白对照组，将剩余的小鼠禁食不禁水12h后，腹腔注射200mg/kg四氧嘧啶生理盐水溶液，正常喂食给水。当晚再次禁食不禁水12h后，腹腔注射200mg/kg四氧嘧啶生理盐水溶液，正常喂食给水。正常喂养72h后，尾静脉取血，用强生稳豪血糖仪测定空腹血糖 (测定前禁食不禁水12h)，以血糖值超过10.0mmol者为造模成功。

2.2 分组及给药：取造模成功的小鼠20只，随机分为2组，每组10只。分别为模型组、羽扇豆酮组，加上空白对照组10只，共3组。分别给药2周（空白对照组和模型组给予相同体积的蒸馏水），末次给药后禁食不禁水12h，尾静脉取血，用强生稳豪血糖仪测定小鼠空腹血糖值。结果见表1。

表1  不同化合物对四氧嘧啶糖尿病小鼠血糖的影响

﹡与模型组比较，P﹤0.05；﹡﹡与模型组比较，P﹤0.01

通过表1可以看出，与模型组相比，羽扇豆酮具有降低类似1型糖尿病小鼠血糖的作用。本发明人首次通过体内研究证明羽扇豆酮具有降低糖尿病模型小鼠（类似1型糖尿病）血糖的作用。

二、羽扇豆酮对四氧嘧啶糖尿病肥胖小鼠模型的影响

1．供试药液的制备

取羽扇豆酮配制成1.2mg/ml的溶液，按0.1ml/10g灌胃给药；取二甲双胍3片（0.25g/片），研碎溶于25mL蒸馏水中，配制成浓度为0.03g/ml的溶液，用前摇匀。按0.1ml/10g给药。

2．羽扇豆酮对四氧嘧啶糖尿病肥胖小鼠的血清胰岛素、C肽的影响

2.1 造模方法：昆明种小白鼠，6-8周龄，体重18-22g，雄性，小鼠禁食不禁水12h后，断尾取尾静脉血，用强生稳豪血糖仪测定空腹血糖值，作为造模前血糖。血糖值均在正常范围之内，表明小鼠基础血糖合格。随机取10只小鼠定为空白对照组，将剩余的小鼠禁食不禁水12h后，腹腔注射200mg/kg四氧嘧啶生理盐水溶液，正常喂食给水。当晚再次禁食不禁水12h后，腹腔注射200mg/kg四氧嘧啶生理盐水溶液，正常喂食给水。正常喂养72h后，尾静脉取血，用强生稳豪血糖仪测定空腹血糖 (测定前禁食不禁水12h)，以血糖值超过10.0mmol者为造模成功。

2.2 分组及给药：取造模成功的小鼠30只，随机分为3组，每组10只。分别为模型组、羽扇豆酮组和阳性药组，加上空白对照组10只，共4组。分别给药2周（空白对照组和模型组给予相同体积的蒸馏水），末次给药后禁食不禁水12h，尾静脉取血，用强生稳豪血糖仪测定小鼠空腹血糖值。从空白对照组、模型组、羽扇豆酮组及阳性药组小鼠的眼眶静脉取血，用放射免疫法测定血清胰岛素、C肽的含量。结果见表2。

表2  不同化合物对四氧嘧啶糖尿病肥胖小鼠血糖的影响

﹡与模型组比较，P﹤0.05；﹡﹡与模型组比较，P﹤0.01。-，表示未检测。

由表2可知，和模型组相比，羽扇豆酮对四氧嘧啶糖尿病肥胖小鼠的降血糖作用明显；同时羽扇豆酮还能降低由于胰岛素抵抗导致的血清胰岛素和C肽升高的现象。研究结果表明：羽扇豆酮具有抗类似2型糖尿病胰岛素抵抗的作用。

三、羽扇豆酮对四氧嘧啶糖尿病肥胖小鼠糖耐量的影响

1.取羽扇豆酮，配制成1.2mg/ml的溶液，按0.1ml/10g灌胃给药。葡萄糖：2g/kg，给药体积：0.2ml/10g。取二甲双胍3片（0.25g/片），配制成浓度为30mg/ml的水溶液，用前摇匀，按0.1mL/10g灌胃给药。

2. 羽扇豆酮对四氧嘧啶糖尿病肥胖小鼠糖耐量的影响

2.1 造模方法：昆明种小鼠，6～8周龄，体重18～22g，雄性，正常喂养4周变肥胖后，小鼠禁食不禁水12h，尾静脉取血，用强生稳豪血糖仪测定空腹血糖值，作为造模前血糖，结果血糖值均在正常值范围值之内。随机取10只小鼠为空白对照组，将剩余的小鼠禁食不禁水12h后，腹腔注射剂量为200mg/kg四氧嘧啶生理盐水溶液，正常喂食给水。当晚再次禁食不禁水12h后，腹腔注射剂量为200 mg/kg四氧嘧啶生理盐水溶液，正常喂食给水。正常喂养72h后，尾静脉取血，用强生稳豪血糖仪测定空腹血糖 (测定前禁食不禁水12h) ，以血糖值超过10.0mmol/L者为造模成功。

2.2 分组及给药：取造模成功的小鼠30只，随机分为3组，每组10只。分别为模型组、羽扇豆酮组及二甲双胍阳性药组，加上空白对照组10只，共4组；羽扇豆酮组和二甲双胍阳性药组连续给药8d（空白组和模型组给予同等剂量的蒸馏水），末次给药后再禁食不禁水12h，给葡萄糖水溶液后分别在0min、30min、60min、120min从尾静脉取血检测血糖，结果见表3。

表3  羽扇豆酮对四氧嘧啶糖尿病肥胖小鼠糖耐量的影响

通过表3可以看出，测量比较模型组小鼠、正常小鼠空白对照组和给药组在分别给葡萄糖之后的0min、30min、60min、120min的血糖值，可以看出在给葡萄糖30min后，羽扇豆酮组的血糖值均低于模型组的血糖值。说明羽扇豆酮能改善四氧嘧啶糖尿病肥胖小鼠的胰岛素抵抗现象，从而改善糖耐量，增加小鼠糖的负荷。

四、羽扇豆酮对正常小鼠糖耐量的影响

1.取羽扇豆酮配制成1.2mg/ml的溶液，按0.1ml/10g灌胃给药。葡萄糖：2g/kg，给药体积：0.2ml/10g。

2.分组及给药：昆明种小鼠，6～8周龄，体重18～22g，雄性，20只，禁食不禁水12h后，测其血糖值，根据血糖值分为2组：空白对照组和羽扇豆酮组，每组10只；连续给药8d（空白对照组给予同等剂量的蒸馏水），末次给药后再禁食不禁水12h，给葡萄糖水溶液后分别在第0min、30min、60min、120min从尾静脉取血检测血糖，结果见表4。

表4  羽扇豆酮对正常小鼠糖耐量的影响

通过比较正常小鼠空白对照组和给药小鼠羽扇豆酮组在分别给葡萄糖之后的0min、30min、60min、120min的血糖值，结果显示：空白对照组呈现正常动物体内糖代谢趋势，在120min时体内血糖值已经正常；而给药组同样呈现这种趋势，并且在各个时间段的血糖值均低于空白对照组，说明羽扇豆酮能改善正常小鼠的糖耐量，增加小鼠糖的负荷。

五、急性毒性研究

昆明种小鼠，6～8周龄，体重18～22g，取羽扇豆酮配制成20mg/ml的溶液。灌胃1次,给药体积为0.2 ml/10g,空白对照组给予等体积的蒸馏水。给药后连续观察14天,每天观察比较两组小鼠的外观、行为和毒性反应,每两天测1次体重。连续观察14天后，动物未出现死亡,一般状况良好,饮食、大小便正常,且外观、皮毛、行为、呼吸均正常,鼻、眼、口腔无异常分泌物,说明羽扇豆酮具有较好的安全性。

与现有技术相比，本发明采用现代药效及急性毒性研究技术对羽扇豆酮进行了深度开发，以羽扇豆酮为主要成分可加工制成适宜的药物制剂用于预防或治疗糖尿病，其药理活性明显，性能稳定、安全可靠。另外，羽扇豆酮的提取原料来源易得，制备工艺易于产业化，可带动药材资源的充分开发和利用。

具体实施方式

实施例1：羽扇豆酮粗品的制备：取新鲜或干燥的芭蕉根，用水或乙醇冷浸、渗漉、回流或超声提取1～6次，滤过，合并滤液，将滤液浓缩成浸膏；浸膏加入适量的水分散，用石油醚萃取1～8次至石油醚无色，再用乙酸乙酯萃取1～8次，回收乙酸乙酯得乙酸乙酯浸膏；浸膏用乙酸乙酯溶解后拌样，湿法装200目硅胶柱（径高比1:10，装样量为30倍左右），用3～11倍柱体积石油醚冲洗，再用3～12倍柱体积的石油醚∶乙酸乙酯=100∶1洗脱、回收，得羽扇豆酮粗品。

实施例2：羽扇豆酮单体的制备：取新鲜或干燥的芭蕉根，用水或乙醇冷浸、渗漉、回流或超声提取1～6次，滤过，合并滤液，将滤液浓缩成浸膏；浸膏加入适量的水分散，用石油醚萃取1～8次至石油醚无色，再用乙酸乙酯萃取1～8次，回收乙酸乙酯得乙酸乙酯浸膏；浸膏用乙酸乙酯溶解后拌样，湿法装200目硅胶柱（径高比1:10，装样量为30倍左右），用3～11倍柱体积石油醚冲洗，再用3～12倍柱体积的石油醚∶乙酸乙酯=100∶1洗脱、回收，得羽扇豆酮粗品；再用乙醇重结晶，即得羽扇豆酮单体。

实施例3：取实施例1所得羽扇豆酮粗品，加入适量的常规辅料，混匀，烘干，灭菌，装入硬胶囊，包装，制成胶囊剂。该制剂日服1～3次，每次10～20 mg，可用于治疗糖尿病。

实施例4：取实施例2所得羽扇豆酮单体，加适量的增溶剂，研磨，加入少量水稀释，混匀，加入矫味剂和防腐剂，混匀，加水至规定量，过滤，混匀，分装，灭菌，制成口服液。该制剂日服1～3次，每次10～20ml，用于糖尿病的治疗。

实施例5：取羽扇豆酮（从市场上购买），加适量的常规辅料，混匀，制成颗粒，干燥，压片，制成片剂。该制剂日服1～3次，每次10～20 mg，用于糖尿病的防治。

实施例6：取羽扇豆酮（从市场上购买），加入适量常用辅料，制成颗粒，干燥，整粒，制成颗粒剂。该制剂日服1～3次，每次10～20 mg，用于糖尿病的防治。

实施例7：取羽扇豆酮，加入适量常用辅料，成丸，干燥，制成丸剂。该制剂日服1～3次，每次10～20 mg，用于治疗糖尿病。

实施例8：取羽扇豆酮，加入适量滴丸基质，混匀，滴制成丸，即得滴丸剂。该制剂日服1～3次，每次10～20 mg，用于糖尿病的防治。

Claims (10)

1.羽扇豆酮在制备预防或治疗糖尿病的产品中的应用。

2.根据权利要求1所述的羽扇豆酮的应用，其特征在于：所述的羽扇豆酮，是从芭蕉根药材中提取得到的羽扇豆酮粗品或羽扇豆酮单体，其纯度大于90%。

3.根据权利要求2所述的羽扇豆酮的应用，其特征在于，所述羽扇豆酮的提取方法为：取新鲜或干燥的芭蕉根，用水或乙醇冷浸、渗漉、回流或超声提取1～6次，滤过，合并滤液，将滤液浓缩成浸膏；浸膏加入适量的水分散，用石油醚萃取1～8次至石油醚无色，再用乙酸乙酯萃取1～8次，回收乙酸乙酯得乙酸乙酯浸膏；浸膏用乙酸乙酯溶解后拌样，湿法装200目硅胶柱，用3～11倍柱体积石油醚冲洗，再用3～12倍柱体积的石油醚∶乙酸乙酯=100∶1洗脱、回收，得羽扇豆酮粗品；再用乙醇重结晶，即得羽扇豆酮单体。

4.根据权利要求1所述的羽扇豆酮的应用，其特征在于，所述的产品为药物或保健品。

5.根据权利要求4所述的羽扇豆酮的应用，其特征在于，所述的药物或保健品为口服制剂。

6.根据权利要求2～5中任一项所述的羽扇豆酮的应用，其特征在于，以羽扇豆酮为活性成分，加入药用载体或赋形剂制成药物或保健品制剂。

7.根据权利要求6所述的羽扇豆酮的应用，其特征在于，取羽扇豆酮适量，加入胶囊剂常用辅料，混匀，装入胶囊，包装，制成胶囊剂。

8.根据权利要求6所述的羽扇豆酮的应用，其特征在于，取羽扇豆酮，加适量的增溶剂，研磨，加入少量水稀释，混匀，加入矫味剂和防腐剂，混匀，加水至规定量，过滤，混匀，分装，灭菌，制成口服液。

9.根据权利要求6所述的羽扇豆酮的应用，其特征在于，取羽扇豆酮，加入片剂常用辅料，混匀，制成颗粒，干燥，压片，制成片剂。

10.根据权利要求2～5中任一项所述的羽扇豆酮的应用，其特征在于，将羽扇豆酮与其它药用活性成分组合，加入药用载体或赋形剂制成药物组合物或保健品制剂。