CN102696392B - 天然冬虫夏草的增产方法 - Google Patents
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Abstract
一种天然冬虫夏草的增产方法,该方法的具体做法如下:(1)天然冬虫夏草增长基地的选择;(2)诱集灯的设置;(3)诱集液的配置;(4)蝙蝠蛾被毛孢和蝙蝠蛾拟青霉菌种的培养基筛选和制备;(5)增产条件的控制。本发明在成虫期时利用高压汞灯进行诱集,使其周边的蝙蝠夜蛾成虫飞集在虫草基地,增加产卵量。并配置乙醇、醋、糖液洒于利于幼虫生长的草甸上,使其幼虫集聚在一起。并在幼虫集聚地,喷洒蝙蝠蛾被毛孢和蝙蝠蛾拟青霉液体菌种而增加蝙蝠夜蛾幼虫的感染率,以此达到增加冬虫夏草产量的目的,从而实现产业化生产。
Description
技术领域
本发明涉及一种天然冬虫夏草的增产方法。
背景技术
冬虫夏草(Cordyceps sinensis(Berk.)Sacc)生长在青海、甘肃、西藏、四川、云南、贵州等地高寒地带和雪山草甸之中,是蝙蝠蛾孢、蝙蝠蛾拟青霉寄生在蝙蝠夜蛾的幼虫体内,经过秋、冬、春、夏的孕育,生成的蝙蝠夜蛾的幼虫与虫草菌的复合子实体,是一种珍稀名贵、食药两用补益佳品,享有极高的盛誉。《本草从新》记载:虫草具有“保肺益肾,止血化痰,止劳嗽”等作用。《本草纲目拾遗》记载,具“秘精益气,专补命门”,“与鸭同煮食可抵人参”之功效。《重庆堂随笔》记载,冬虫夏草“具温和平补之性,为虚疟、虚痞、虚胀、虚痛之圣药”。中医认为,虫草入肺肾两经,即补阴肺,又补肾阳,是唯一的一种能同时平衡、调节阴阳的神奇药物。是治疗肺、肝、肾疾患的要药。同时,又具抗衰老、增强免疫、降血脂、提高机体应激力等多种保健功能,是中老年不可多得的保健佳品。所以近年来,随着对冬虫夏草营养和药用价值认识的普及,加之人们生活水平的不断提高,对冬虫夏草的需求不断增大,导致乱采滥挖不断加剧,资源破坏越来越严重,致使野生冬虫夏草资源锐减,也对生态环境造成一定程度的影响和破坏。根据《中华人民共和国野生植物保护条例》和《国家重点保护野生植物名录(第一批)》都对野生冬虫夏草依法保护,严格控制采集数量。卫生部规定保健食品﹑药品中不得使用野生冬虫夏草,为了弥补药源的不足,人工虫草应运而生。
天然冬虫夏草是以蝙蝠夜蛾(Hepialus armoricanus)的幼虫体为寄主,蝙蝠夜蛾主要生活在海拔3000m以上的高山草甸之中,以蓼科植物珠芽蓼(Polygonum viviparum)、头花蓼(Polygonum capitatum)、小大黄(Rheum pumilum),豆科黄芪属(Astragalussp.),蔷薇科金腊梅(Potenitilla frutiusa)等植物根部为食物。由于蝙蝠夜蛾和珠芽蓼在低海拔区不能存活,因此,以蝙蝠夜蛾幼虫为寄主人工培养冬虫夏草不能实现。国内外人工虫草多以瓶栽(大米培养基)及液体发酵为主,90%以上的虫草制剂均以菌丝体替代,以弥补天然虫草资源不足,让这一昂贵的补益佳品进入寻常百姓家,为中老年的保健做出了积极的贡献。但同时,也存在着产品上的缺陷,菌丝体缺乏昆虫体特有的昆虫蛋白、蜕皮激素、保幼激素、胃泌素、胰岛分泌素、溶菌酶等生物活性物质,菌丝体培养多以动植物蛋白及无机盐类为培养基,浓缩干燥后,存在品味不正、纯度不高等缺陷。
总体来讲,国内有关冬虫夏草人工增产获得成功的报道不多,多数仍属于仿生栽培范畴,即“利用蝙蝠夜蛾的趋光性和趋化性,诱集成虫增加产量”形式,受气候、生态、环境等条件限制重复性差,还未在生产中得到应用和实践的验证,国内实际上还未能进行正常的人工栽培。有专家认为:目前冬虫夏草人工栽培尚存在难度,受各地自然条件差异的影响,即使成功的范例,距产业化生产还是有一定的距离的,基本都是以深层发酵获取菌丝体为主。
发明内容
本发明提供一种使天然冬虫夏草增产的新途径,可以利用天然环境诱集蝙蝠夜蛾群集,同时增加蝙蝠夜蛾幼虫的感染率,以达到增加单位产量的目的,从而实现产业化生产。
为此,采用如下技术方案:一种天然冬虫夏草的增产方法,该方法的具体做法如下:
(1)天然冬虫夏草增长基地的选择:选择海拔在3000m以上,蓼科植物珠芽蓼、头花蓼、小大黄,豆科黄芪属,蔷薇科金腊梅植物植被丰富,历年来均有野生冬虫夏草生长的高山草甸;
(2)诱集灯的设置:在蝙蝠夜蛾成虫期时利用330~400nm的紫外波长高压汞灯进行诱集,每亩草甸架设6-10盏高压汞灯,使其周边的蝙蝠蛾成虫飞集在虫草基地,以增加产卵量;
(3)诱集液的配置:乙醇5-10%(V/V)、食醋40-60%(V/V)、白沙糖5-8%(W/V)、蜂蜜3-6%(W/V),加水至100-150ml;备用;
(4)蝙蝠蛾被毛孢和蝙蝠蛾拟青霉菌种的培养基筛选和制备:
a)液体培养基配方:马铃薯200-300g、蛋白胨5-10g、葡萄糖10-15g、蚕蛹粉10-20g 、磷酸二氢钾1-3g、 磷酸氢二钾1-3g、硫酸镁1-3g、酵母浸膏5-10g,加蒸馏水至1000 ml;
b)液体培养基配置方法:取新鲜马铃薯去皮,称取200-300g,切块,置于烧杯中加800ml蒸馏水,加热至沸,浸提20min,纱布过滤,滤液中依次加入所述配方中的蛋白胨5-10g、葡萄糖10-15g、蚕蛹粉10-20g 、磷酸二氢钾1-3g、 磷酸氢二钾1-3g、硫酸镁1-3g、酵母浸膏5-10g,溶解,加蒸馏水至1000ml,高压灭菌15P,115℃,20min备用;
c)液体一级种培养:
将蝙蝠蛾被毛孢和蝙蝠蛾拟青霉菌原种在无菌条件下挑取黄豆粒大数块,分别接种于所述液体培养基中,分别置于恒温摇床上,蝙蝠蛾被毛孢控制温度在18-22℃,震摇次数在60-80次/min,培养4-7天,菌丝呈球形或菌体密集后取出;蝙蝠蛾拟青霉菌控制温度在30-36℃,震摇次数在60-80次/min,培养3-4天,菌丝呈球形或菌体密集后取出;即为一级种;
d)液体喷洒种培养:
在100L全自动发酵罐中加入80L纯净水,按所述液体培养基配方比例称取培养基各组分,依次加入,溶解后,加水至100L,加热至115℃,保温30min,冷却至室温,在酒精灯下打开发酵罐接种口,加入3-6L所述的液体一级种,蝙蝠蛾被毛孢控制温度在18-22℃,通气量早期控制在10-15L/min,罐压0.1-0.2P,后期在20-30L/min,罐压0.3-0.4P,培养4-7天,菌丝呈球形或菌体密集后分装于10-20kg无菌容器中;蝙蝠蛾拟青霉菌控制温度在30-36℃,通气量早期控制10-15L/min,罐压0.1-0.2P,后期在20-30L/min,罐压0.3-0.4P,培养3-4天,菌丝呈球形或菌体密集后分装于10-20kg无菌容器中;即为喷洒种;备用;
(5)增产条件的控制:从每年7月份开始至8月底,每晚21时至次日早6时打开所述的诱集灯,诱集蝙蝠夜蛾成虫;在每年8和9月份,按每亩10-20kg剂量, 设10-30个点喷洒所述的诱集液,诱集蝙蝠夜蛾幼虫,每月1-2次;观测到有大量幼虫聚集时,按每亩50-100kg的剂量,喷洒蝙蝠蛾被毛孢和蝙蝠蛾拟青霉液体种,每月1-2次,以增加蝙蝠夜蛾幼虫的感染率。
本发明利用蝙蝠夜蛾的趋光性和趋化性,在成虫期诱集,使之周边的蝙蝠夜蛾成虫集聚在一起,增加产卵数量。蝙蝠夜蛾每年可繁殖2~3代,6~9月为生长期。成虫期5~7天,幼虫期30~45天。在成虫期时可利用330~400nm的紫外波长高压汞灯进行诱集,使其周边的蝙蝠夜蛾成虫飞集在虫草基地,增加产卵量。并可配置乙醇、醋、糖液洒于利于幼虫生长的草甸上,使其幼虫集聚在一起。并在幼虫集聚地,喷洒蝙蝠蛾被毛孢和蝙蝠蛾拟青霉液体菌种而增加蝙蝠夜蛾幼虫的感染率,以此达到增加冬虫夏草产量的目的,从而实现产业化生产。
本发明可以在保护现有资源的基础上,实现区域冬虫夏草资源优势向经济优势的转化,并进一步推动当地冬虫夏草培育基地建设的发展。可使冬虫夏草在现有的草甸基础上,实现高产化,提高冬虫夏草的产量,为市场提供优质的冬虫夏草产品,还可以使农牧民通过冬虫夏草的人工增产,得到稳定的经济收入,形成新的经济增长点,对当地的经济发展也有举足轻重的作用。
具体实施方式
一种天然冬虫夏草的增产方法,该方法的具体做法如下:
(1)天然冬虫夏草增长基地的选择:选择海拔在3000m以上,蓼科植物珠芽蓼(Polygonum viviparum)、头花蓼(Polygonum capitatum)、小大黄(Rheum pumilum),豆科黄芪属(Astragalussp.),蔷薇科金腊梅(Potenitilla frutiusa)等植物植被丰富,历年来均有野生冬虫夏草生长的高山草甸;如甘肃省的甘南藏族自治州玛曲、碌曲、夏河县等地;
(2)诱集灯的设置:在蝙蝠夜蛾成虫期时利用330~400nm的紫外波长高压汞灯进行诱集,每亩草甸架设6、7、8、9或10盏高压汞灯,使其周边的蝙蝠夜蛾成虫飞集在虫草基地,增加产卵量;
(3)诱集液的配置:
配方1:乙醇5%(V/V)、食醋60%(V/V)、白沙糖8%(W/V)、蜂蜜6%(W/V),加水至130ml;
配方2:乙醇10%(V/V)、食醋40%(V/V)、白沙糖5%(W/V)、蜂蜜3%(W/V),加水至120ml;
配方3:乙醇8%(V/V)、食醋50%(V/V)、白沙糖7%(W/V)、蜂蜜5%(W/V),加水至150ml;
配方4:乙醇5%(V/V)、食醋40%(V/V)、白沙糖5%(W/V)、蜂蜜5%(W/V),加水至100ml;
每亩草甸按10、15或20kg剂量,洒于幼虫生长的草甸上,使其幼虫集聚在一起;
(4)蝙蝠蛾被毛孢和蝙蝠蛾拟青霉菌种的培养基筛选和制备:
a)液体培养基配方:
配方1:马铃薯200g 、蛋白胨10g、葡萄糖15g、蚕蛹粉20g 、磷酸二氢钾3g 、磷酸氢二钾3g、硫酸镁3g 、酵母浸膏10g ,蒸馏水至1000 ml;
配方2:马铃薯300g 、蛋白胨5g、葡萄糖10g、蚕蛹粉10g 、磷酸二氢钾1g 、磷酸氢二钾1g、硫酸镁1g 、酵母浸膏5g ,加蒸馏水至1000 ml;
配方3:马铃薯250g 、蛋白胨8g、葡萄糖12g、蚕蛹粉15g 、磷酸二氢钾2g 、磷酸氢二钾2g、硫酸镁2g 、酵母浸膏8g ,加蒸馏水至1000 ml;
配方4:马铃薯200g 、蛋白胨10g、葡萄糖10g、蚕蛹粉10g 、磷酸二氢钾3g 、磷酸氢二钾3g、硫酸镁3g 、酵母浸膏10g ,加蒸馏水至1000 ml;
b)液体培养基配置方法:取新鲜马铃薯去皮,按所述配方比例称取,切块,置于烧杯中加800ml蒸馏水,加热至沸,浸提20min,纱布过滤,滤液中依次加入所述配方中其他试剂,溶解,加蒸馏水至1000ml,高压灭菌15P,115℃,20min备用;
c)液体一级种培养:
将蝙蝠蛾被毛孢和蝙蝠蛾拟青霉菌原种在无菌条件下挑取黄豆粒大数块,分别接种于所述液体培养基中,分别置于恒温摇床上,蝙蝠蛾被毛孢控制温度在18-22℃,震摇次数在60-80次/min,培养4-7天,菌丝呈球形或菌体密集后取出;蝙蝠蛾拟青霉菌控制温度在30-36℃,震摇次数在60-80次/min,培养3-4天,菌丝呈球形或菌体密集后取出;即为一级种;
d)液体喷洒种培养:
在100L全自动发酵罐中加入80L纯净水,按所述液体培养基配方比例称取培养基各组分,依次加入,溶解后,加水至100L,加热至115℃,保温30min,冷却至室温,在酒精灯下打开发酵罐接种口,加入3-6L所述的液体一级种,蝙蝠蛾被毛孢控制温度在18-22℃,通气量早期控制在10-15L/min,罐压0.1-0.2P,后期在20-30L/min,罐压0.3-0.4P,培养4-7天,菌丝呈球形或菌体密集后分装于10-20kg无菌塑料桶中;蝙蝠蛾拟青霉菌控制温度在30-36℃,通气量早期控制在10-15L/min,罐压0.1-0.2P,后期在20-30L/min,罐压0.3-0.4P,培养3-4天,菌丝呈球形或菌体密集后分装于10-20kg无菌塑料桶中;即为喷洒种,备用;
(5)增产条件的控制:从每年7月份开始至8月底,每晚21时至次日早6时打开所述的诱集灯,诱集蝙蝠夜蛾成虫。在每年8和9月份,按每亩10、15或20kg剂量,设10-30个点喷洒所述的诱集液,诱集蝙蝠夜蛾幼虫,每月1-2次。观测到有大量幼虫聚集时,按每亩50、60、70、80、90或100kg的剂量,喷洒蝙蝠蛾被毛孢和蝙蝠蛾拟青霉液体种,每月1-2次,以增加蝙蝠夜蛾幼虫的感染率。
Claims (3)
1.一种天然冬虫夏草的增产方法,其特征在于:该方法的具体做法如下:
(1)天然冬虫夏草增长基地的选择:选择海拔在3000m以上,蓼科植物珠芽蓼、头花蓼、小大黄,豆科黄芪属,蔷薇科金腊梅植物植被丰富,历年来均有野生冬虫夏草生长的高山草甸;
(2)诱集灯的设置:在蝙蝠夜蛾成虫期时利用330~400nm的紫外波长高压汞灯进行诱集,每亩草甸架设6-10盏高压汞灯,使其周边的蝙蝠蛾成虫飞集在虫草基地,以增加产卵量;
(3)诱集液的配置:乙醇5-10%(V/V)、食醋40-60%(V/V)、白沙糖5-8%(W/V)、蜂蜜3-6%(W/V),加水至100-150ml;备用;
(4)蝙蝠蛾被毛孢和蝙蝠蛾拟青霉菌种的培养基筛选和制备:
a)液体培养基配方:马铃薯200-300g、蛋白胨5-10g、葡萄糖10-15g、蚕蛹粉10-20g 、磷酸二氢钾1-3g、 磷酸氢二钾1-3g、硫酸镁1-3g、酵母浸膏5-10g,加蒸馏水至1000 ml;
b)液体培养基配置方法:取新鲜马铃薯去皮,称取200-300g,切块,置于烧杯中加800ml蒸馏水,加热至沸,浸提20min,纱布过滤,滤液中依次加入所述配方中的蛋白胨5-10g、葡萄糖10-15g、蚕蛹粉10-20g 、磷酸二氢钾1-3g、 磷酸氢二钾1-3g、硫酸镁1-3g、酵母浸膏5-10g,溶解,加蒸馏水至1000ml,高压灭菌15P,115℃,20min备用;
c)液体一级种培养:
将蝙蝠蛾被毛孢和蝙蝠蛾拟青霉菌原种在无菌条件下挑取黄豆粒大数块,分别接种于所述液体培养基中,分别置于恒温摇床上,蝙蝠蛾被毛孢控制温度在18-22℃,震摇次数在60-80次/min,培养4-7天,菌丝呈球形或菌体密集后取出;蝙蝠蛾拟青霉菌控制温度在30-36℃,震摇次数在60-80次/min,培养3-4天,菌丝呈球形或菌体密集后取出;即为一级种;
d)液体喷洒种培养:
在100L全自动发酵罐中加入80L纯净水,按所述液体培养基配方比例称取培养基各组分,依次加入,溶解后,加水至100L,加热至115℃,保温30min,冷却至室温,在酒精灯下打开发酵罐接种口,加入3-6L所述的液体一级种,蝙蝠蛾被毛孢控制温度在18-22℃,通气量早期控制在10-15L/min,罐压0.1-0.2P,后期在20-30L/min,罐压0.3-0.4P,培养4-7天,菌丝呈球形或菌体密集后分装于10-20kg无菌容器中;蝙蝠蛾拟青霉菌控制温度在30-36℃,
通气量早期控制10-15L/min,罐压0.1-0.2P,后期在20-30L/min,罐压0.3-0.4P,培养3-4天,菌丝呈球形或菌体密集后分装于10-20kg无菌容器中;即为喷洒种;备用;
(5)增产条件的控制:从每年7月份开始至8月底,每晚21时至次日早6时打开所述的诱集灯,诱集蝙蝠夜蛾成虫;在每年8和9月份,按每亩10-20kg剂量, 设10-30个点喷洒所述的诱集液,诱集蝙蝠夜蛾幼虫,每月1-2次;观测到有大量幼虫聚集时,按每亩50-100kg的剂量,喷洒蝙蝠蛾被毛孢和蝙蝠蛾拟青霉液体种,每月1-2次,以增加蝙蝠夜蛾幼虫的感染率。
2. 根据权利要求1所述的一种天然冬虫夏草的增产方法,其特征在于:所述的诱集液的配方为:乙醇5%(V/V)、食醋40%(V/V)、白沙糖5%(W/V)、蜂蜜5%(W/V),加水至100ml。
3.根据权利要求1所述的一种天然冬虫夏草的增产方法,其特征在于:所述的液体培养基配方为:马铃薯200g 、蛋白胨10g、葡萄糖10g、蚕蛹粉10g、 磷酸二氢钾3g、磷酸氢二钾3g、硫酸镁3g、 酵母浸膏10g,加蒸馏水至1000 ml。
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