附图说明
图1显示了用于在细菌和酵母CBP平台中生产混合醇的理论代谢通路的图示。酵母特异性的分支通路由深灰色框中的EC编号显示。细菌特异性的分支通路由浅灰色框中的EC编号显示。
图2显示了用于在细菌CBP平台中生产正丙醇和异丙醇的理论代谢通路的图示。
图3显示了用于在细菌CBP平台中生产异丙醇和甲醇的理论代谢通路的图示。
图4显示了用于在细菌和酵母CBP平台中厌氧生产丙二醇和丙酮的理论代谢通路的图示。酵母特异性的分支通路由深灰色框中的EC编号显示。细菌特异性的分支通路由浅灰色框中的EC编号显示。
图5显示了用于在酵母CBP平台中好氧生产丙二醇的理论代谢通路的图示。
图6显示了解糖热厌氧杆菌(T.saccharolyticum)中丙二醇利用(pdu)基因组织结构的图示。
图7显示了用于在细菌和酵母CBP平台中生产正丙醇和异丙醇的理论代谢通路的图示。
发明详述
代谢通路工程化
许多细菌具有通过糖酵解过程而将简单己糖发酵成为酸性和pH中性产物的混合物的能力。糖酵解通路是丰富的并且包括一系列酶促步骤,其中六碳葡萄糖分子通过多个中间产物而被分解成为两个分子的三碳化合物丙酮酸。此过程引起ATP(生物学能量供应)和经还原的辅因子NADH的净生成。
丙酮酸是代谢的重要中间化合物。例如,在好氧条件下,丙酮酸可被氧化成为乙酰辅酶A(acetyl CoA),其然后进入三羧酸循环(TCA),转而产生合成的前体、CO2和经还原的辅因子。然后,所述辅因子通过经由一系列酶促步骤向氧提供氢等价物而被氧化,这引起水和ATP的形成。这种能量形成的过程已知为氧化磷酸化。
在厌氧条件下(没有可获得的氧),发生发酵,其中有机化合物的降解产物作为氢供体和受体。来自糖酵解的过量NADH在涉及将有机底物还原为产物(例如乳酸和乙醇)的反应中被氧化。此外,在已知为底物水平磷酸化的过程中,由有机酸(例如乳酸)的生产产生了ATP。因此,糖酵解和丙酮酸代谢的发酵产物包括各种有机酸、醇和CO2。
大多数兼性厌氧菌通过丙酮酸脱氢酶(PDH)和三羧酸循环(TCA)厌氧地代谢丙酮酸。在厌氧条件下,用于丙酮酸代谢的主要能量通路是通过丙酮酸-甲酸-裂解酶(PFL)通路以提供甲酸和乙酰辅酶A。然后乙酰辅酶A通过磷酸乙酸转移酶(PTA)和乙酸激酶(ACK)被转化为乙酸,伴随共产生ATP;或者乙酰辅酶A通过乙醛脱氢酶(AcDH)和醇脱氢酶(ADH)被还原为乙醇。为了保持还原性等价物的平衡,由糖酵解产生的过量NADH在丙酮酸被还原为乳酸的过程中被乳酸脱氢酶(LDH)重新氧化为NAD+。在乙酰辅酶A被还原为乙醇的过程中,NADH也可被AcDH和ADH重新氧化,但是这在具有有功能的LDH的细胞中是次要反应。
产乙醇的生物体(包括酵母,例如酿酒酵母(Saccharomycescerevisiae))能够进行第二种类型的厌氧发酵,这通常被称作醇发酵,其中丙酮酸被丙酮酸脱羧酶(PDC)代谢为乙醛和CO2。然后,乙醛被ADH还原为乙醇,再生出NAD+。醇发酵导致将一个葡萄糖分子代谢为两个乙醇分子和两个CO2分子。
本发明涉及修饰细菌和酵母中的传统糖酵解通路,如上文所述,以工程化能够生成或增加某些产物的产率的新代谢通路,所述产物否则不能被天然的生物体生成。此类产物包括正丙醇或异丙醇,以及醇、丙二醇、乙醇和甘油。
在具体实施方案中,本发明涉及在CBP酵母和细菌平台中生产混合醇。在其它实施方案中,本发明涉及在CBP细菌平台中生产正丙醇和异丙醇。在其它的实施方案中,本发明涉及在CBP细菌平台中生产异丙醇和甲醇。在某些其它实施方案中,本发明涉及在CBP酵母或细菌平台中生产丙二醇。在其它实施方案中,丙二醇可在工业应用中被直接利用或者被浓缩为丙烯或通过基于化学或微生物的生物催化被转化为丙醇。
本发明涉及工程化各种微生物(包括细菌和酵母)中的此类备选的代谢通路。如本申请中所使用的,术语“微生物”是指显微大小或亚显微大小的生物体,其仅能借助显微镜被看到并且通常仅由单个细胞组成。微生物包括细菌、原生动物以及某些藻类和真菌。
在某些实施方案中,细菌微生物是下列属的菌种:热厌氧杆菌属(Thermoanaerobacterium)、好热厌氧杆菌属(Thermoanaerobacter)、梭菌属(Clostridium)、土芽孢杆菌属(Geobacillus)、糖球菌属(Saccharococcus)、类芽孢杆菌属(Paenibacillus)、芽孢杆菌属(Bacillus)、热解纤维素菌属(Caldicellulosiruptor)、Anaerocellum或厌氧芽孢杆菌属(Anoxybacillus)。在某些实施方案中,所述微生物是选自下列的细菌:热产硫磺热厌氧杆菌(Thermoanaerobacteriumthermosulfurigenes)、嗜热厌氧杆菌(Thermoanaerobacteriumaotearoense)、解多糖热厌氧杆菌(Thermoanaerobacteriumpolysaccharolyticum)、玉蜀黍热厌氧杆菌(Thermoanaerobacteriumzeae)、解木聚糖热厌氧杆菌(Thermoanaerobacteriumxylanolyticum)、解糖热厌氧杆菌(Thermoanaerobacteriumsaccharolyticum)、布氏热厌氧杆菌(Thermoanaerobium brockii)、热解糖热厌氧杆菌(Thermoanaerobacteriumthermosaccharolyticum)、热硫化氢热厌氧杆菌(Thermoanaerobacterthermohydrosulfuricus)、产乙醇热厌氧杆菌(Thermoanaerobacterethanolicus)、布氏热厌氧杆菌(Thermoanaerobacter brocki)、热纤维素梭菌(Clostridium thermocellum)、解纤维梭菌(Clostridiumcellulolyticum)、Clostridium phytofermentans、Clostridiumstraminosolvens、热葡糖苷酶地芽孢杆菌(Geobacillusthermoglucosidasius)、嗜热脂肪地芽孢杆菌(Geobacillusstearothermophilus)、Saccharococcus caldoxylosilyticus、嗜热糖球菌(Saccharoccus thermophilus)、坎皮纳斯类芽孢杆菌(Paenibacilluscampinasensis)、黄热芽孢杆菌(Bacillus flavothermus)、Anoxybacilluskamchatkensis、Anoxybacillus gonensis、Caldicellulosiruptoracetigenus、解糖热解纤维素菌(Caldicellulosiruptor saccharolyticus)、Caldicellulosiruptor kristjanssonii、Caldicellulosiruptor owensensis、Caldicellulosiruptor lactoaceticus和嗜热厌氧纤维降解菌(Anaerocellum thermophilum)。在具体的实施方案中,所述微生物是热纤维素梭菌(Clostridium thermocellum)或解糖热厌氧杆菌(Thermoanaerobacterium saccharolyticum)。
在某些其它的实施方案中,酵母微生物选自:酿酒酵母(Saccharomyces cerevisiae)、乳酸克鲁维酵母(Kluyveromyceslactis),马克思克鲁维酵母(Kluyveromyces marxianus),巴斯德毕赤酵母(Pichia pastoris),解脂耶氏酵母(Yarrowia lipolytica),多形汉逊酵母(Hansenula polymorpha),红法夫酵母(Phaffiarhodozyma),实用假丝酵母(Candida utliis),Arxulaadeninivorans,树干毕赤酵母(Pichia stipitis),汉逊德巴利酵母(Debaryomyces hansenii),多形德巴利酵母(Debaryomycespolymorphus),粟酒裂殖酵母(Schizosaccharomyces pombe),白色假丝酵母(Candida albicans)和西方许旺酵母(Schwanniomycesoccidentalis)。在具体的实施方案中,酵母微生物是酿酒酵母。
在某些情形中,本发明的微生物是纤维素分解性的。术语“纤维素分解性”是指能够水解寡聚己糖和多聚己糖中的糖苷键。纤维素分解性活性也可包括使纤维素和半纤维素解聚或脱支的能力。
术语“产乙醇性”意在包括微生物由碳水化合物产生乙醇作为发酵产物的能力。此术语意在包括但不限于,天然存在的产乙醇性生物体、具有天然存在或引入的突变的产乙醇性生物体,经遗传修饰的产乙醇性生物体。
术语“发酵(fermenting)”和“发酵(fermentation)”意在包括这样的酶促过程(例如细胞的或无细胞的,例如裂解物或纯化的多肽混合物),其中由碳水化合物产生乙醇,特别是作为发酵的产物。
“嗜热的”是指在约45℃或更高的温度下生长旺盛的生物体。
“嗜温的”是指在约20-约45℃的温度下生长旺盛的生物体。
术语“CBP生物体”意在包括本发明的微生物,例如具有适于CBP的性质的微生物。
在本发明的某些实施方案中,利用了一个或多个工程化的代谢通路来由葡萄糖组合生产丙二醇和异丙醇。组合生产丙二醇和异丙醇所需的代谢通路和各种不同的酶(表2)显示在图1中并在下面的实施例1中进一步描述。这些代谢通路可被细分为下列不同的生产途径:i)将二羟丙酮磷酸转化为丙二醇;ii)将丙酮酸转化为异丙醇;iii)将丙酮酸转化为乙醇(仅细菌平台);和iv)将二羟丙酮磷酸转化为甘油(仅酵母平台)。
在本发明的某些其它实施方案中,利用一个或多个工程化的代谢通路来生产正丙醇和异丙醇。生产正丙醇和异丙醇所需的代谢通路和各种不同的酶(表3)显示在图2中并在下文的实施例2中进一步描述。所述代谢通路可被进一步细分为两种不同的生产途径:i)将二羟丙酮磷酸转化为正丙醇;和ii)将丙酮酸转化为异丙醇。
在本发明的其它实施方案中,利用了一个或多个工程化的代谢通路来由碳水化合物组合生产异丙醇和甲醇。生产异丙醇和甲醇所需的代谢通路和各种不同的酶(表4)显示在图3中并在下文中的实施例3中进一步描述。所述代谢通路可被细分为不同的生产途径:i)将丙酮酸转化为异丙醇;和ii)将甲酸转化为CO2和甲醇。
在本发明的其它实施方案中,利用了一个或多个工程化的代谢通路来在嗜热梭菌和酵母(例如酿酒酵母)中由己糖和戊糖共生产丙二醇和丙酮。生产丙二醇和丙酮所需的代谢通路和各种不同的酶(表5)显示在图4和5中,并在下文的实施例4和5中进一步描述。所述代谢通路可被如下细分:i)由葡萄糖产生二羟丙酮磷酸和甘油醛-3-磷酸;ii)随后由二羟丙酮磷酸生成丙二醇;和iii)由甘油醛-3-磷酸生成丙酮。
本发明的通路的总结提供在如下的表1中:
代谢酶
如上文所描述的,工程化微生物中的代谢通路需要某些酶,以在沿所述通路的特定步骤处起作用,如图1-5中所示。
如本文所描述的,本发明的酶可以是微生物天然株系内源性的,并且可因此被理解为称作“天然的”或“内源性的”。如果生物体未经遗传工程化,或者未以有意改变所述生物体的遗传和/或表型构成的方式经人工操作的话,则所述生物体处于“天然状态”。例如,野生型生物体可被认为是处于天然状态。
例如,在某些实施方案中,当宿主细胞是特定的热厌氧杆菌菌株时,一种或多种代谢酶可以是源自同一热厌氧杆菌菌株的酶。可用启动子、终止子、复制起源或同源重组靶标对含有来自此类热厌氧杆菌菌株的整个基因组DNA的片段的来源文库进行宿主修饰。筛选这些文库可鉴别出编码目的酶的DNA,所述目的酶在一个或多个本发明的工程化的代谢通路中起作用。
在其它实施方案中,本发明的酶可以是非天然的或对于生物体为“异源性的”,并且可通过转化或本领域普通技术人员所知的其它方法而在载体上被引入生物体中,如下文中进一步描述的。
术语“活性(activity)”、“活性(activities)”、“酶促活性(enzymaticactivity)”和“酶促活性(enzymatic activities)”可互换地使用并意在包括通常归于所选择的多肽的任何功能活性。通常,所选多肽的活性涵盖与所产生的多肽相关的总的酶促活性。由宿主细胞产生并具有酶促活性的多肽可位于细胞的细胞内空间中、与细胞相关联、被分泌到细胞外环境中,或者它们的组合。
在某些实施方案中,在本发明的代谢通路中起作用的酶显示在下文中的表2-5中并包括下述:甲基乙二醛合酶,醛-酮还原酶,乙醛酸还原酶,甲基乙二醛脱氢酶,醛还原酶,丙酮酸甲酸裂解酶,硫解酶,辅酶A转移酶,乙酰乙酸脱羧酶,异丙醇,醛脱氢酶,醇脱氢酶,二醇-水解酶,脱氢酶,磷酸乙酰转移酶,氧化还原酶,甲酸脱氢酶,甲醛脱氢酶和甲醇脱氢酶。
如本申请中所使用的,术语“甲基乙二醛合酶”或“mgs”是指催化下述化学反应的酶:
如本申请中所使用的,术语“醛-酮还原酶”可指任何数目的、相关的单体NADPH依赖性氧化还原酶,例如醛糖还原酶、前列腺素F合酶、木糖还原酶和许多其它的酶。
如本申请中所使用的,术语“氧化还原酶”指催化从一个分子(还原剂,也称作氢或电子供体)向另一个(氧化剂,也称作氢或电子受体)转移电子的酶。
如本申请中所使用的,术语“乙醛酸还原酶”是指催化下述化学反应的酶:
这种酶属于氧化还原酶家族,特别是那些以NAD+或NADP+作为受体而作用于供体的CH-OH基团的酶。
如本申请中所使用的,术语“甲基乙二醛脱氢酶”是指将甲基乙二醛氧化为丙酮酸的酶。
如本申请中所使用的,术语“辅酶A转移酶”是这样的酶(例如乙酰辅酶A转移酶),其催化下述化学反应:
术语“辅酶A转移酶”也指这样的酶,其催化下述化学反应:
如本申请中所使用的,术语“乙酰乙酸脱羧酶”或“ADC”是指参与人和其它动物中的酮体产生通路以及某些细菌中的溶剂生成的酶。其反应涉及乙酰乙酸的脱羧作用,这形成丙酮和二氧化碳。
如本申请中所使用的,术语“醛脱氢酶”是指催化醛的氧化(脱氢作用)的酶。
如本申请中所使用的,术语“脱氢酶”是指通过将一个或多个氢化物(H-)转移至受体(通常为NAD+/NADP+)而氧化底物的酶。
如本申请中所使用的,术语“甲酸脱氢酶”是指这样的酶:其催化甲酸氧化成为重碳酸或二氧化碳,这向第二底物(例如甲酸:NAD+氧化还原酶中的NAD+)贡献电子。
如本申请中所使用的,术语“甲醛脱氢酶”是指这样的酶,其催化下述化学反应:
这种酶属于氧化还原酶家族,特别是以NAD
+或NADP
+作为受体而作用于供体的醛基或桥氧基的那些酶。
如本申请中所使用的,术语“甲醇脱氢酶”是催化下述化学反应的酶:
这种酶也属于氧化还原酶家族,特别是以NAD
+或NADP
+作为受体而作用于供体的醛或桥氧基的那些酶。
如本申请中所使用的,术语“丙酮酸甲酸裂解酶”或“PFL”意在包括能够将丙酮酸转化为乙酰辅酶A和甲酸的酶。
如本申请中所使用的,术语“醇脱氢酶”或“ADH”意在包括能够将醛(例如乙醛和丙醛)和酮(例如丙酮)转化为醇(例如乙醇、正丙醇或异丙醇)的酶。
如本申请中所使用的,术语“磷酸乙酰转移酶”或“PTA”意在包括能够将乙酰辅酶A转化为乙酰磷酸的酶。
如本申请中所使用的,术语“二醇脱水酶”意在包括能够将丙二醇转化为丙醛的酶。
术语“上调的”是指活性增加,例如与天然宿主中的活性相比,酶的酶促活性增加。
术语“下调的”是指活性的减少,例如与天然宿主中的活性相比,酶的酶促活性减少。
术语“活化的”是指经表达的或有代谢功能的。
相应于本发明的某些酶的多肽序列如下:
热纤维素梭菌蛋白
EC 2.3.1.54(Cthe0505;SEQ ID NO:1)
MDAWRGFNKGNWCQEIDVRDFIIRNYTPYEGDESFLVGPTDRTRKLWEKVSELLKKERENGGVLDVDTHTISTITSHKPGYIDKELEVIVGLQTDEPLKRAIMPFGGIRMVIKGAEAYGHSVDPQVVEIFTKYRKTHNQGVYDVYTPEMRKAKKAGIITGLPDAYGRGRIIGDYRRVALYGVDRLIAEKEKEMASLERDYIDYETVRDREEISEQIKSLKQLKEMALSYGFDISCPAKDAREAFQWLYFAYLAAVKEQNGAAMSIGRISTFLDIYIERDLKEGKLTEELAQELVDQLVIKLRIVRFLRTPEYEKLFSGDPTWVTESIGGMALDGRTLVTKSSFRFLHTLFNLGHAPEPNLTVLWSVNLPEGFKKYCAKVSIHSSSIQYESDDIMRKHWGDDYGIACCVSAMRIGKQMQFFGARCNLAKALLYAINGGKDEMTGEQIAPMFAPVETEYLDYEDVMKRFDMVLDWVARLYMNTLNIIHYMHDKYAYEALQMALHDKDVFRTMACGIAGLSVVADSLSAIKYAKVKPIRNENNLVVDYEVEGDYPKFGNNDERVDEIAVQVVKMFMNKLRKQRAYRSATPTLSILTITSNVVYGKKTGNTPDGRKAGEPLAPGANPMHGRDINGALAVLNSIAKLPYEYAQDGISYTFSIIPKALGRDEETRINNLKSMLDGYFKQGGHHINVNVFEKETLLDAMEHPEKYPQLTIRVSGYAVNFIKLTREQQLDVINRTIHGKI
EC 2.3.1.8(Cthe1029;SEQ ID NO:2)
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EC 2.7.2.1(Cthe1028;SEQ ID NO:3)
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EC 1.1.1.80(Cthe101;SEQ ID NO:4)
MINFVYKNPTKIIFGRGTELKVGEEVRQYSGKVLLHYGGGSIKKTGLYDRVVNSLKQAGVEVVELGGVMPNPRLGLVNEGIKICREKGIDFILAVGGGSAIDSAKAIAVGVPYDGDVWDFFCGKAEPKEALPVGVVLTIPAAGSEASPNSVITREDGLYKRGMYSELIRPVFAIMNPELTYTLPAYQTACGTADIMAHIMERYFTNETHTDLTDRLCEATLKTMIKNVPIALEEPDNYNARAEIMWAGTIAHNGLLGTGRIEDWASHNIEHEISAIYDVAHGAGLAVVFPAWMKYVYKNNLDRFVQFAVRVWNVEMNFDEPERTALEGIERLKKFFKEIGLPVSLKEMNIGDDRLEEMASKCTNGGKATIGNFVKLNREDVYNILKLAV
Cthe0394(SEQ ID NO:5)
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Cthe0423(SEQ ID NO:6)
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EC 1.12.7.2
Cthe425(SEQ ID NO:19)
MKVSICIGSSCHLKGAKQIVEQLQSLVADYNLKEKVELGGAFCMKNCVNGVSVTVDDKLFSVTPENVKSFFETEILKKLED
Cthe426(SEQ ID NO:20)
MTECLQTKKSNCKNCYKCIRHCPVKSLKFTDGQAHIVRDECVLCGECYVVCPQNAKQIRSDVEKAKQLVLKYDVYASIAPSFVAWFHNKSIHDMEQALIKLGFKGADETAKGAYIVKKQYEKMIEEKKSKIIISSCCHTVNTLIQRHYTGAIQYLADVVSPMLAHAQMLKKEHKGAKVVFIGPCISKKDEAEKYKGYVELVLTFDELDEWLKSENITIESNRGSSKEGRTRSFPVSGGIISSMDKDLGYHYMVVDGMENCINALENIERGEIDNCFIEMSACRGSCINGPPARRKSNNIVGAILAVNKNTGAKDFSVPMPEPEKLKKEFRFEGVHKIMPGGTAIEEILKKMGKTSIEHELNCGSCGYDTCRDKAVAVLNGKADLTMCLPYLKEKAESFSDAIIKNTPNGVIVLNEDLEIQQINNSAKRILNLSPSTDLLGSPVSRILDPIDYILALREGKNCYYKRKYFAEYKKYVDETIIYDKEYHVIIIIMRDVTEEEKIKALKNKQSEAAIEIADKVVEKQMRVVQEIALLLGETAAETKIALTKLKETMEDE
Cthe427(SEQ ID NO:21)
MNDLCVDLGYKSLNKFGEQLCGDMIQVVKDDDTTILVLADGLGSGVKANILSTLTSKIISTMIAAHMGIEECVNTIMSTLPVCKVRGIAYSTFTIIKITNNTYAEIIQYDNPLVILLRNGKKYDYPTQTKIISGKKIVESKIRLNCDDVFVVMSDGAIYAGVGQTLNYGWQRENIIEFIESHYDKSLSANALTSLLIDTCNNLYANMPGDDTTIAAIKIRKRQVVNLMFGPPQNPEDVHNMMSLFFAKQGRHIVCGGTTSTLAAKFLGKELETTIDYIDPRIPPIARIEGVDLVTEGVLTISRVLEYAKDYIGKNILYNEWHSKNDGASIIARMLFEEATDINFYVGKAINPAHQNPNLPIGFNIKMQLVEELSKILKQMGKTINLSYF
Cthe428(SEQ ID NO:22)
MSVTMSEAFDYSMIDNILSEHGTSETAIIAILQSIQEEYHYIPKEVFPYLSKKLKVSEARIFSVATFYENFSLEPKGKYIIKVCDGTACHVRKSIPIIERLRKELGLSGTKPTTDDLMFTVETVSCLGACGLAPVITVNDKVYAEMTPDKASELIKQLREGDADA
Cthe429(SEQ ID NO:23)
MLKNREELRKAREMYSRYLKAEKRRVLVCAGTGCVSGGSMEIFERLSELVSKRGMDCQVELKEEPHDNTIGMKKSGCHGFCEMGPLVRIEPEGYLYTKVKLEDCEEIVDRTIVAGEHIERLAYKQNGVVYKKQDEIPFYKKQTRLVLEHCGQIDSTSITEYLATGGYYALEKALFDMTGDEIINEITEANLRGRGGGGFPAGRKWAQVKRQNAKQKYVVCNGDEGDPGAFMDRSIMEGDPHRMIEGMIIAGIACGASEGYIYVRAEYPLAVSRLKRAIEQAKEFGLLGENILGSNFSFNIHINRGAGAFVCGEGSALTASIEGKRGMPRVKPPRTVEQGLFDMPTVLNNVETFANVPLIIKNGADWYKSIGTEKSPGTKAFALTGNIENTGLIEIPMGTTLREVIFDIGGGMRNGADFKAVQIGGPSGGCLSEKDLDLPLDFDSLKKAGAMIGSGGLVVMDSNTCMVEVARFFMNFTQNESCGKCVPCREGTKRMLEILERIVEGNGQDGDIELLLELADTISATALCGLGKAAAFPVVSTIKNFREEYEAHIYDKRCPTGNCQKLKTITIDASLCKGCSKCARSCPVGAITGKVKEPFVIDQSKCIKCGACIETCAFHAILEG
Cthe430(SEQ ID NO:24)
MDNREYMLIDGIPVEINGEKNLLELIRKAGIKLPTFCYHSELSVYGACRMCMVENEWGGLDAACSTPPRAGMSIKTNTERLQKYRKMILELLLANHCRDCTTCNNNGKCKLQDLAMRYNISHIRFPNTASNPDVDDSSLCITRDRSKCILCGDCVRVCNEVQNVGAIDFAYRGSKMTISTVFDKPIFESNCVGCGQCALACPTGAIVVKDDTQKVWKEIYDKNTRVSVQIAPAVRVALGKELGLNDGENAIGKIVAALRRMGFDDIFDTSTGADLTVLEESAELLRRIREGKNDMPLFTSCCPAWVNYCEKFYPELLPHVSTCRSPMQMFASIIKEEYSTSSKRLVHVAVMPCTAKKFEAARKEFKVNGVPNVDYVLTTQELVRMIKESGIVFSELEPEAIDMPFGTYTGAGVIFGVSGGVTEAVLRRVVSDKSPTSFRSLAYTGVRGMNGVKEASVMYGDRKLKVAVVSGLKNAGDLIERIKAGEHYDLVEVMACPGGCINGGGQPFVQSEEREKRGKGLYSADKLCNIKSSEENPLMMTLYKGILKGRVHELLHVDYASKKEAK
Cthe431
SEQ ID NO:25:
MLEIKICVGSSCHLKGSYNVINEFQHLIEEKALHDKIDIKATFCMKQCQKNGVAVEVNNEIFGVLPEAAEEFFKNVILPKV
EC 1.12.7.2
Hyd Cthe3019-24
Cthe3019(SEQ ID NO:26)
MSFFTMTKTLIKSIFHGPYTVRYPLEKKEPFPASRGRIEINIQDCIFCGLCARRCPTGAINVEKPESRWSINRLRCIQCGYCSEVCPKKCLKMNNMYPAPSFENIEDVYQNARVPDNKENNRNIAGAC
Cthe3020(SEQ ID NO:27)
MGKKTVIPFGPQHPVLPEPIHLDLVLEDETVVEAIPSIGYIHRGLEKLVEKKDYQQFVYVAERICGICSFMHGMGYCMSIENIMGVQIPERAEFLRTIWAELSRIHSHMLWLGLLADALGFESLFMHSWRLREQILDIFEETTGGRVIFSVCDIGGVRRDIDSEMLKKINSILDGFEKEFSEITKVFLNDSSVKLRTQGLGVLSREEAFELGAVGPMARASGIDIDMRKSGYAAYGKLKIEPVVETAGDCYARTSVRIREVFQSIDLIRQCISLIPDGEIKVKIVGNPSGEYFTRLEQPRGEVLYYVKANGTKFLERFRVRTPTFANIPALLHTLKGCQLADVPVLILTIDPCISCTER
Cthe3021(SEQ ID NO:28)
MAQQTINTISPNELLAYALRLKNANYRLVAISCTNAENGVEMSYSFDSGSDFTNLRITVAPGDEIESISSIYSYSFLYENEIKELFGVNITGISPDYKDKLYRISVKTPFNMKEGDKNG
Cthe3022(SEQ ID NO:29)
MNFSKKSPWILHYDGSSCNGCDIEVLACLTPLYDIERFGVINTGNPKHADILLITGSINEQNKSVVKQLYEQMADPKVVVAVGICAATGGIFSECYNVSGGVDKIIPVDVYVPGCAARPEAIIDGVVKALGILEERQKYARKKDK
Cthe3023(SEQ ID NO:30)
MSQIIRLVLYIIAIIIVAPLLGGLLTGIDRVITARMQGRKGPSVLQPFYDVLKLFQKESIEVNTMHRFFVYISLIFVIFTTVIMLLGGDILLALFALTLGSIFFVLGGYASNSPYSTIGSERELLQMMAFEPMLLLAAIGLYYGDKSFFIKDIVTARIPSIVYLPGVFLGLLYVLTFKLRKSPFDLSMSHHGHQEIVQGITTEYSGKDLAIIQITHWYETIIALALVYLFFAFRSPFSHVIAILACIIAFLLEIVVDNAFARAKWEFALKSTWIVTGVLASVNLIILSFFR
Cthe3024(SEQ ID NO:31)
MNAILILILFPLLASVTVLSVRKDAIRNIIVRIFAFITGILTLFVVCRYFKDGISLSIENRNIIDMTISLAEVLIAAYIIFTGIKNKKFIVSIFAAVQTALILWFEFTQKHGINVHSDIVFDRLSAVMVLIVGCIGSLILIYTVGYMKWYHIHHEGYKERKSFFFSVIFLFLFAMFGLIFSNNLIWMYFCWELTTLCSYLLIGYTRTPEAVNNSFHALAINLGGGLAFASAMVYIGTNFKTLELSALTAMKLELAVLIPVFLLCIAALTKSAQMPFSSWLLGAMVAPTPSSALLHSATMVKAGVYLLIRLAPLLAGTTIGKVIALLGAVTFLASSIIAISKSDAKKILAYSTISNLGLIVTCAAIGTQESLWAAILLLIFHSISKSLLFLTGGSVEHQIGSRNVEDMDILLQVSRRLSVYMIVGIAGMFLAPFGMLISKWVAMKAFIDSKNILTVIILGYGSATTLFYWTKWMGKLVANANRKDHIKHTFHIDEEIPIFIHAVLVVLSCFTFPLVSRYVLVPYLSGLFGPDVPIPIGTSDVNIMLIMLSMLLILPISFIPIYKSDRRRIVPIYMAGENTGDNESFYGAFDEKRKVELHNWYMKNFFSVKKLTFWSNLLCAVVILVGVVLLIGGITK
Cthe342(SEQ ID NO:32)
MQMVNVTIDNCKIQVPANYTVLEAAKQANIDIPTLCFLKDINEVGACRMCVVEVKGARSLQAACVYPVSE GLEVYTQTPAVREARKVTLELILSNHEKKCLTCVRSENCELQRLAKDLNVKDIRFEGEMSNLPIDDLSPSVVRDPNKCVLCRRCVSMCKNVQTVGAIDVTERGFRTTVSTAFNKPLSEVPCVNCGQCINVCPVGALREKDDIDKVWEALANPELHVVVQTAPAVRVALGEEFGMPIGSRVTGKMVAALSRLGFKKVFDTDTAADLTIMEEGTELINRIKNGGKLPLITSCSPGWIKFCEHNYPEFLDNLSSCKSPHEMFGAVLKSYYAQKNGIDPSKVFVVSIMPCTAKKFEAQRPELSSTGYPDVDVVLTTRELARMIKETGIDFNSLPDKQFDDPMGEASGAGVIFGATGGVMEAAIRTVGELLSGKPADKIEYTEVRGLDGIKEASIELDGFTLKAAVAHGLGNARKLLDKIKAGEADYHFIEIMACPGGCINGGGQPIQPSSVRNWKDIRCERAKAIYEEDESLPIRKSHENPKIKMLYEEFFGEPGSHKAHELLHTHYEKRENYPVK
Cthe430(SEQ ID NO:33)
MDNREYMLIDGIPVEINGEKNLLELIRKAGIKLPTFCYHSELSVYGACRMCMVENEWGGLDAACSTPPRAGMSIKTNTERLQKYRKMILELLLANHCRDCTTCNNNGKCKLQDLAMRYNISHIRFPNTASNPDVDDSSLCITRDRSKCILCGDCVRVCNEVQNVGAIDFAYRGSKMTISTVFDKPIFESNCVGCGQCALACPTGAIVVKDDTQKVWKEIYDKNTRVSVQIAPAVRVALGKELGLNDGENAIGKIVAALRRMGFDDIFDTSTGADLTVLEESAELLRRIREGKNDMPLFTSCCPAWVNYCEKFYPELLPHVSTCRSPMQMFASIIKEEYSTSSKRLVHVAVMPCTAKKFEAARKEFKVNGVPNVDYVLTTQELVRMIKESGIVFSELEPEAIDMPFGTYTGAGVIFGVSGGVTEAVLRRVVSDKSPTSFRSLAYTGVRGMNGVKEASVMYGDRKLKVAVVSGLKNAGDLIERIKAGEHYDLVEVMACPGGCINGGGQPFVQSEEREKRGKGLYSADKLCNIKSSEENPLMMTLYKGILKGRVHELLHVDYASKKEAK
Cthe3003(SEQ ID NO:34)
MDSFLMKGYIKEANIDYSCSRGSMEDLPKWEFREIPKVPRAVMPSLSLEERKNNFNEVELGLSEEVARKEARRCLKCGCSARFTCDLRKEASNHGIVYEEPIHDRPYIPKVDDHPFIVRDHNKCISCGRCIAACAEIEGPGVLTFYMKNGRQLVGTKSGLPLRDTDCVSCGQCVTACPCAALDYRRERGKVVRAINDPKKTVVGFVAPAVRSLISNTFGVSYEEASPFMAGLLKKLGFDKVFDFTFAADLTIVEETTEFLSRIQNKGVMPQFTSCCPGWINFVEKRYPEIIPHLSTCKSPQMMMGATVKNHYAKLMGINKEDLFVVSIVPCLAKKYEAARPEFIHDGIRDVDAVLTTTEMLEMMELADIKPSEVVPQEFDEPYKQVSGAGILFGASGGVAEAALRMAVEKLTGKVLTDHLEFEEIRGFEGVKESTIDVNGTKVRVAVVSGLKNAEPIIEKILNGVDVGYDLIEVMACPGGCICGAGHPVPEKIDSLEKRQQVLVNIDKVSKYRKSQENPDILRLYNEFYGEPNSPLAHELLHTHYTPKHGDSTCSPERKKGTAAFDVQEFTICMCESCMEKGAENLYNDLSSKIRLFKMDPFVQIKRIRLKETHPGKGVYIALNGKQIEEPMLSGNIPDESESE
Cthe3004(SEQ ID NO:35)
MKTLENHNRIKVTVNGREIEVYDNLTILQALLQEDIHIPHLCYDIRLERSNGNCGLCVVTLISPDGERDVKACQTPIKEGMVICTNTPKLENYRKIRLEQLLSDHNADCVAPCVMTCPANIDIQSYLRHVGNGDFEAAIRVIKERNPFPIVCGRVCPHTCESQCRRNLVDAPVAINYVKRFAADWDMARPEPWTPEKKPPTGKKIAIVGAGPSGLSAAYYSAIKGHDVTVFERQPHPGGMMRYGIPEYRLPKAILDKEIEMIKKLGVKIMTEKALGIHIRLEDLSKDFDAVYLAIGSWQATPMHIEGEKLDGVWAGINYLEQVAKNVDIPLGDNVVVIGGGNTAIDCARTALRKGAKSVKLVYRCTREEMPAAPYEVEEAIHEGVEMIFLMAPTKIIVKDGKKKLVCIRMQLGEPDRSGRRRPVPIEGSEVEIDADTIIGAIGQSTNTQFLYNDLPVKLNKWGDIEVNGKTLQTSEYNIFAGGDCVTGPATVI
Cthe0349(SEQ ID NO:36)
MPLVTSTEMFKKAYE GKYAIGAFNVNNMEIIQGITEAAKEVNAPLILQVSAGARKYANHTYLVKLVEAAVEETGLPICLHLDHGDSFELCKSCIDGGFTSVMIDGSHLPFEENIKLTKQVVDYAHSKGVVVEGELGRLAGIEDDVNVSEADAAFTDPDQAEEFVKRTGVDSLAIAIGTSHGAYKFKGEAKLRFDILEEIEKRLPGFPIVLHGASSVIPEYVDMINKYGGDMPGAKGVPEDMLRKAASMAVCKINIDSDLRLAMTATIRKYFAENPSHFDPRQYLGPARNAIKELVKHKIVNVLGCDGKA
Cthe1019(SEQ ID NO:37)
MDIQLKKSGIGVKEKKSKNHLLYSIKQNLFAYAMLIPTFVCMMCIHFIPMLQGIYLSLLDLNQLTMTKFLNAPFIGLKNYYEILFDEKSLIRRGFWFALRNTAIYTVVVTFATFALGIILAMLVNREFKGRGIVRTALLMPWVVPSYVVGMTWGFLWRQDSGLINIILCDILHILPEKPYWLVGSNQIWAIIIPTIWRGLPLSMILMLAGLQSISPDYYEAADIDGANGWQKFWHITLPLLKPILAINVMFSLISNIYSFNIVSMMFGNGAGIPGEWGDLLMTYIQRNTFQMWRFGPGAAALMIVMFFVLGIVALWYTLFKDDLVVK
Cthe0390(SEQ ID NO:38)
VDKFTKLDLNSITSNNRMNIFNCILEAKEINRAVIAKKVGLSIPAVMSITDDLIQKGIIYVIGKGKSSGGKRPELLAVVPDRFFFVGVDVGRTSVRVVVMNNCRDVVYKVSKPTESVEPDELINQITEMTMESINESKFPLDRVVGIGVAMPGLIERGTGRVIFSPNFGWNNIALQDELKKHLPFNVLVENANRALVIGEIKNTQPNPTSCIVGVNLGYGIGSAIVLPNGLYYGVSGTSGEIGHIIVENHGSYCSCGNYGCIESIASGEAIAREARIAIANKIQSSVFEKCEGDLKKIDAKMVFDAAKEGDHLAQSIVEKAADYIGKGLAITINMLDPEQIILCGGLTLSGDFFIDMIKKAVSKYQMRYAGGNVKIVVGKSGLYATAIGGAWIVANNIDFLSSN
Cthe2938(SEQ ID NO:39)
MYYIGIDLGGTNIAVGLVNEEGKILHKDSVPTLRERPYQEIIKDMAMLTLKVIKDADVSIDQVKSIGVGSPGTPNCKDGILIYNNNLNFRNVPIRSEIQKYIDLPVYLDNDANCAALAESVAGAAKGANTSVTITLGTGIGGGVVIDGKIYSGFNYAGGELGHTVLMMDGEPCTCGRKGCWEAYASATALIRQARKAAEANPDSLINKLVGGDLSKIDAKIPFDAAKQGDKTGEMVVQQYIRYIAEGLINMINIFMPEVLVIGGGVCKEGEYLLKPLRELIKQGVYSKEDIPQTELRTAQMGNDAGIIGAAMLGKEC
Cthe0217(SEQ ID NO:40)
MERIKFDYSKALPFVSEREVAYFENFVRSAHDMLHNKTGAGNDFVGWVDLPVNYDREEFARIKAAAEKIKSDSDALVVIGIGGSYLGARAAIEMLSHSFHNLMPKSKRNAPEIYFVGNNISSTYIADLLEVIEGKEISVNVISKSGTTTEPAIAFRIFKEYMENKYGKDGASKRIYATTDKEKGALRKLATEEGYETFVVPDDIGGRFSVLTAVGLLPIAVAGIDIDSMMKGAADARELYSNPNLMENDCYKYAAVRNALYRKNKTIEIMVNYEPSLHYFTEWWKQLYGESEGKDQKGIFPAGVDFTTDLHSMGQYIQDGLRNIFETVIRVEKPRKNIVIKEEKDNLDGLNFIAGKDVDYVNKKAMEGTVLAHTDGGVPNLVVTVPELSAYYFGNMVYFFEKACGISGYLLGVNPFDQPGVEAYKKNMFALLGKPG YEEQRKKLEERL
Cthe1261(SEQ ID NO:41)
MSSVRTIGVLTSGGDAPGMNAAIRSVVRTGLYYGFKVLGIRKGFNGLINGDIEELTARSVGDIIHRGGTILQTARSPQFKTEEGLKKAMSMAKVFGIDALVVIGGDGSYRGARDISKLGLNVIGIPGTIDNDIGCTDYTIGFDTAMNTVQDAIDKIRDTAYSHERCSVLEVMGRHAGYIAVNVSISGGAEAVVLPEKPFDMDTDVIKPIIEGRNRGKKHYLVIVAEGGEGKAIEIAKEITEKTGIEARATILGHIQRGGSPTVYDRVMASQMGAKAVEVLMENKRNRVIVFKDNQIGDMDLEEALQVKKTISEDLIQLSKILAL
解糖热厌氧杆菌蛋白
反应6b,EC or0411(SEQ ID NO:42)
MSYIPNENRYEKMIYRRCGRSGIMLPAISLGLWHNFGGYDVFENMREMVKKAFDLGITHFDLANNYGPPPGSAEENFGKILRTDLRGYRDELLISTKAGYTMWPGPYGDWGSRKYLLSSLDQSLKRMGIDYVDIFYSHRRDPNTPLEETMSALAQAVRQGKALYVGISNYNAEDTKKAAEILRQLGTPLLINQPSYSMFNRWIEDGLTDVLEEEGVGSIAFSPLAQGLLTDKYLNGVPDDSRAVRKNTSLRGNLTEENINKVRELKKIADKRGQSIAQMALAWDLRKVTSVIIGASRVSQIEENVKALDNLEFSHEELKOIDEILSK
EC4.2.3.4 or2316(SEQ ID NO:43)
LNIALIAHDMKKSIMVDFAIAYKEILKKCNIYATGATGQLVEEATGIKVNKFLPGPMGGDQQIGAMIAENNMDLVIFLRDPLTAQPHEPDILALLRVCDVHSIPLATNLATAEVLIKGLDAGFLEWRDAVK
EC5.3.1.1 or2687(SEQ ID NO:44)
LRRPIIAGNWKMYMTPSEAVNLVNELKPLVSGAEAEVVVIPPFVDLVDVKKAIDASNIKLGAQNMHWEEKGAFTGEVSPIMLKEIGVEYVVIGHSERRQYFAETDETVNKKVKSALSHGLKPIVCVGESLSQREAGEAFNVVREQTKKALDGIKSEDVLNVVIAYEPIWAIGTGKTATSKDANDVIKVIRETIADIYSIDIANEVRIQYGGSVKPDNAKELMSESDIDGALVGGASLKAQDFAKIVNY
反应7(gldA)or104(SEQ ID NO:45)
MYMKTNFTYFMPTEIFGPGTLGKLATVKLPGKKALLVIGSGNSMRRHGYLDRVVNYLKQNGVDYVVYDKILPNPIAEHVAEGAKVAKDNGCDFVIGLGGGSTIDSSKAIAVMAKNPGDYWDYVSGGSGKGMEVKNGALPIVAIPTTAGTGTESDPWAVVTKTETNEKIGFGCKYTYPTLSIVDPELMVSIPPKFTAYQGMDAFFHSVEGYLATVNQPGSDVLALQSISLITENLPKAVADGNNMEARTALAWASTAAGIVESLSSCISHHSLEHALSAYHPEIPHGAGLIMLSVSYFSFMASKAPERFVDIAKAMGEEIVGNTVEEQAMCFINGLKKLIRNIGMEDLSLSSFGVTEDEATKLAKNAMDTMGGLFNVDPYKLSLDEVVSIYKNCF
EC2.3.1.54(SEQ ID NO:46)
VDDKKVFDHLFILTDDTGMMQHSVGSVPDPKYGYTTDDNGRALIACAMMYEKYKDDAYINLIKKYLSFLMYAQEDDGRFRNFMSFDRKFIDEDFSEDCFGRCMWALGYLINSNIDERVKLPAYKMIEKSLLLVDTLNYIRGKAYTLIGLYYIYNSFKNLDKDFVRKKMDKLAHDIVEEYEKNSSEDWQWFEDVVSYDNGVIPLSLLKYFSIAKDEEVLDIALKTIDFLDSVCFKNGYFKAVGCKGWYRKGKDIAEYDEQPVEAYTMALMYIEAYKLTGDEKYKKRAIDCDKWFYGKNSKGLSLYDEDSGGCSDGITEDGVNSNEGAESLISIMISHCAIDQLK
EC2.3.1.8(SEQ ID NO:47)
MKTSELLAMVVEKGASDLHITVGVPPVLRINGQLIKLNLPQLTPQDTEEITKDLLSSDELKKLEDMGDIDLSYSVKGLGRFRINAYKQRGTYSLAIRSVALRIPTIDELGLPEVIKELALKTRGLIIVTGPTGSGKSTTLASMIDLINEERNCHILTLEDPIEYLHKHKKSIVNQREIGHDAASYASALRAALREDPDVILVGEMRDLETIQIAITAAETGHLVLSTLHTIGSAKTIDRIIDVFPPHQQQQIKVQLSNVLEGIVSQQLLPKIDNSGRVVAVEVMIATPAIRNLIREGKSFQIQSMVQTGNKFGMVTMDMWISQLLKRNLISMDDALTYCVDRENFSRLVV
EC 2.7.2.1(SEQ ID NO:48)
MIKKKLGDLLVEVGLLDESQLNNAIKIQKKTGEKLGKILVKEGYLTEEQIIEALEFQLGIPHIDMKKVFIDANVAKLIPESMAKRHVAIPIKKENNSIFVAMADPLNIFAIDDIKLVTKLDVKPLIASEDGILKAIDRVFGKEEAERAVQDFKKELSHDSAEDDGNLLRDISEDEINNAPAVRLVNSIIEQAVKNRASDVHIEPTENDLRIRFRIDGELHEAMRVFKSTQGPVITRIKIMANMNIAERRIPQDGKIEMNAGGKNIDIRVSSLPTIYGEKLVLRILDKSGYIITKDKLGLGNDDLKLFDNLLKHPNGIILLTGPTGSGKTTTLYAMLNELNKPDKNIITVEDPVEYTLEGLNQVQVNEKAGLTFASALRSILRQDPDIIMIGEIRDRETAEIAIRSSITGHLVLSTLHTNDSAGAITRLIDMGIEPYLVSSSVVGVIAQRLARKICDNCKIEYDASKREKIILGIDADESLKLYRSKGCAVCNKTGYRGRVPIYEIMMMTPKIKELTNEKAPADVILNEAVSNGMSTLKESAKKLVLSGVTTVDEMLRLTYDDAY
EC 1.2.7.1 or0047(SEQ ID NO:49)
MSKVMKTMDGNTAAAHVAYAFTEVAAIYPITPSSPMAEHVDEWSAHGRKNLFGQEVKVIEMQSEAGAAGAVHGSLAAGALTTTFTASQGLLLMIPNMYKIAGELLPGVFHVSARALASHALSIFGDHQDVMACRQTGFALLASGSVQEVMDLGSVAHLAAIKGRVPFLHFFDGFRTSHEYQKIEVMDYEDLRKLLDMDAVREFKKRALNPEHPVTRGTAQNPDIYFQEREASNRYYNAVPEIVEEYMKEISKITGREYKLFNYYGAPDAERIVIAMGSVTETIEETIDYLLKKGEKVGVVKVHLYRPFSFKHFMDAIPKTVKKIAVLDRTKEAGAFGEPLYEDVRAAFYDSEMKPIIVGGRYGLGSKDTTPAQIVAVFDNLKSDTPKNNFTIGIVDDVTYTSLPVGEEIETTAEGTISCKFWGFGSDGTVGANKSAIQIIGDNTDMYAQAYFSYDSKKSGGVTISHLRFGKKPIRSTYLINNADFVACHKQAYVYNYDVLAGLKKGGTFLLNCTWKPEELDEKLPASMKRYIAKNNINFYIINAVDIAKELGLGARINMIMQSAFFKLANIIPIDEAVKHLKDAIVKSYGHKGEKIVNMNYAAVDRGIDALVKVDVPASWANAEDEAKVERNVPDFIKNIADVMNRQEGDKLPVSAFVGMEDGTFPMGTAAYEKRGIAVDVPEWQIDNCIQCNQCAYVCPHAAIRPFLLNEEEVKNAPEGFTSKKAIGKGLEGLNFRIQVSVLDCTGCGVCANTCPSKEKSLIMKPLETQLDQAKNWEYAMSLSYKENPLGTDTVKGSQFEKPLLEFSGACAGCGETPYARLVTQLFGDRMLIANATGCSSIWGGSAPSTPYTVNKDGHGPAWANSLFEDNAEFGFGMALAVKQQREKLADIVKEALELDLTQDLKNALKLWLDNFNSSEITKKTANIIVSLIQDYKTDDSKVKELLNEILDRKEYLVKKSQWIFGGDGWAYDIGFGGLDHVLASGEDVNVLVFDTEVYSNTGGQSSKATPVGAIAQFAAAGKGIGKKDLGRIAMSYGYVYVAQIAMGANQAQTIKALKEAESYPGPSLIIAYAPCINHGIKLGMGCSQIEEKKAVEAGYWHLYRYNPMLKAEGKNPFILDSKAPTASYKEFIMGEVRYSSLAKTFPERAEALFEKAEELAKEKYETYKKLAEQN
EC 1.1.1.2
Or180(SEQ ID NO:50)
MSKVAIIGSGFVGATSAFTLALSGTVTDIVLVDLNKDKAIGDALDISHGIPLIQPVNVYAGDYKDVKGADVIVVTAGAAQKPGETRLDLVKKNTAIFKSMIPELLKYNDKAIYLIVTNPVDILTYVTYKISGLPWGRVFGSGTVLDSSRFRYLLSKHCNIDPRNVHGRIIGEHGDTEFAAWSITNISGISFNEYCSICGRVCNTNFRKEVEEEVVNAAYKIIDKKGATYYAVAVAVRRIVECILRDENSILTVSSPLNGQYGVKDVSLSLPSIVGRNGVARILDLPLSDEEVEKFRHSASVMADVIKQLDI
EC 2.3.1.54(SEQ ID NO:51)
MINEWRGFQEGKWQKTIDVQDFIQKNYTLYEGDDSFLEGPTEKTIKLWNKVLELMKEELKKGVLDIDTKTVSSITSHDAGYIDKDLEEIVGLQTDKPLKRAIMPYGGIRMVKKACEAYGYKVDPKVEEIFTKYRKTHNDGVFDAYTPEIRAARHAGIITGLPDAYGRGRIIGDYRRVALYGIDRLIEEKEKEKLELDYDEFDEATIRLREELTEQIKALNEMKEMALKYGYDISKPAKNAKEAVQWTYFAFLAAIKEQNGAAMSLGRVSTFLDIYIERDLKEGTLTEKQAQELMDHFVMKLRMVRFLRTPDYNELFSGDPVWVTESIGGVGVDGRPLVTKNSFRILNTLYNLGPAPEPNLTVLWSKNLPENFKRFCAKVSIDTSSIQYENDDLMRPIYNDDYSIACCVSAMKTGEQMQFFGARANLAKALLYAINGGIDERYKTQVAPKFNPITSEYLDYDEVMAAYDNMLEWLAKVYVKAMNIIHYMHDKYAYERSLMALHDRDIVRTMAFGIAGLSVAADSLSAIKYAKVKAIRDENGIAIDYEVEGDFPKFGNDDDRVDSIAVDIVERFMNKLKKHKTYRNSIPTLSVLTITSNVVYGKKTGATPDGRKAGEPFAPGANPMHGRDTKGAIASMNSSKIPYDSSLDGISYTFTIVPNALGKDDEDKINNLVGLLDGYAFNAGHHININVLNRDMLLDAMEHPEKYPQLTIRVSGYAVNFNKLTREQQLEVISRTFHESM
EC1.2.7.1(下列四种蛋白)
Or1545(SEQ ID NO:52)
MVITVCVGSSCHLKGSYDVINKLKEMIKNYGIEDKVELKADFCMGNCLRAVSVKIDGGACLSIKPNSVERFFKEHVLGELK
Or1546(SEQ ID NO:53)
MSVINFKEANCRNCYKCIRYCPVKAIKVNDEQAEIIEYRCIACGRCLNICPQNAKTVRSDVERVQSFLNKGEKVAFTVAPSYPALVGHDGALNFLKALKSLGAEMIVETSVGAMLISKEYERYYNDLKYDNLITTSCPSVNYLVEKYYPDLIKCLVPVVSPMVAVGRAIKNIHGEGVKVVFIGPCLAKKAEMSDFSCEGAIDAVLTFEEVMNLFNTNKIGVECTKENLEDVDSESRFKLYPIEGKTMDCMDVDLNLRKFISVSSIENVKDILNDLRAGNLHGYWIEANACDGGCINGPAFGKLESGIAKRKEEVISYSRMKERFSGDFSGITDFSLDLSRKFIDLSDRWKMPSEMEIKEILSKIGKFSVEDELNCGACGYDTCREKAIAVFNGMAEPYMCLPYMRGRAETLSNIIISSTPNAIIAVNNEYEIQDMNRAFEKMFLVNSAMVKGEDLSLIFDISDFVEVIENKKSIFNKKVSFKNYGIIALESIYYLEEYKIAIGIFTDITKMEKQKESFSKLKRENYQLAQQVIDRQMKVAQEIASLLGETTAETKVILTKMKDMLLNQGDDE
or1547(SEQ ID NO:54)
MSHYIDIAHASLNKYDEELCGDSVQIIRKKDYAMAVMADGLGSGVKANILSTLTTRIVSKMLDMGSELRDVVETVAETLPICKERNIAYSTFTVVSIYGDNAHLVEYDNPSVFYFKNGVHKKVDRKCVEIGDKKIFE SSFKLDLNDALIVVSDGVIHAGVGGILNLGWQWDNVKQYLSKVLEVYSDASDICSQLITTCNNLYKNRPGDDTTAIVIKVNESKKVTVMVGPPILKNMDEWVVKKLMKSEGLKVVCGGTAAKIVSRILNKDVITSTEYIDPDIPPYAHIDGIDLVTE GVLTLRKTVEIFKEYMNDKDSNLLRFSKKDAATRLFKILNYATDVNFLVGQAVNSAHQNPDFPSDLRIKVRIVEELISLLERLNKNVEVNYF
or1548(SEQ ID NO:55)
LFKFNTDVQMLKYEVLYNVAKLTLEDRLEDEYDEIPYEIIPGTKPRFRCCVYKERAIIEQRTKVAMGKNLKRTMKHAVDGEEPIIQVLDIACEECPIKRYRVTEACRGCITHRCTEVCPKGAITIINKKANIDYDKCIECGRCKDACPYNAISDNLRPCIRSCSAKAITMDEELKAAINYEKCTSCGACTLACPFGAITDKSYIVDIIRAIKSGKKVYALVAPAIASQFKDVTVGQIKSALKEFGFVDVIEVALGADFVAMEEAKEFSHKIKDIKVMTSSCCPAFVAHIKKSYPELSQNISTTVSPMTAISKYIKKHDPMAVTVFIGPCTAKKSEVMRDDVKGITDFAMTFEEMVAVLDAAKIDMKEQQDVEVDDATLFGRKFARSGGVLEAVVEAVKEIGADVEVNPVVCNGLDECNKTLKIMKAGKLPNNFIEGMACIGGCIGGAGVINNNVNQAKLAVNKFGDSSYHKSIKDRISQFDTDDVDFHVDSGEDESSETSFKEA
EC 1.2.1.43
or2328(SEQ ID NO:56)
MDKVRITIDGIPAEVPANYTVLQAAKYAKIEIPTLCYLEEINEIGACRLCVVEIKGVRNLQASCVYPVSDGMEIYTNTPRVREARRSNLELILSAHDRSCLTCVRSGNCELQDLSRKSGIDEIRFMGENIKYQKDESSPSIVRDPNKCVLCRRCVATCNNVQNVFAIGMVNRGFKTIVAPSFGRGLNESPCISCGQCIEACPVGAIYEKDHTKIVYDALLDEKKYVVVQTAPAVRVALGEEFGMPYGSIVTGKMVSALKRLGFDKVFDTDFAADLTIIEEGNELLKRLNEGGKLPMITSCSPGWINYCERYYPEFIDNLSTCKSPHMMMGAIIKSYFAEKEGIDPKDIFVVSIMPCTAKKYEIDRPQMIVDGMKDVDAVLTTRELARMIKQSGIDFVNLPDSEYDNPLGESSGAGVIFGATGGVMEAALRTVADIVEGKDIENFEYEEVRGLE GIKEAKIDIGGKEIKIAVANGTGNAKKLLDKIKNGEAEYHFIEVMGCPGGCIMGGGQPIHNPNEKDLVRKSRLKAIYEADKDLPIRKSHKNPMITKLYEEFLISPLGEKSHHLLHTTYSKKDLYPMND
EC 4.1.2.13
or0260(SEQ ID NO:57)
LNDILVKARNNKYAIGGFNFNFYDDALGIISAAYELKSPIILMASE GCVKFLGVKHIVNFVNQLKDEYNIPIILHLDHGKDIEIIKNCIDNKFDSIMYDGSLLNFEENIKNTKFIADLCHDKGMTIEGELGRISGAEENIENSEDVFTDPDSVAEFTERSDVDSLAVAIGNAHGLYKGRPRLDFERLSKINKISKVPLVLHGGTGIPYEDIQKAIQLGISKVNVGTEIKIAYIKSIKKHLETINDNDIRHLVSMVQNDIKELVKQYLDIFGTANKYSQLQSM
or0330(SEQ ID NO:58)
MLVTGIELLKKANEEGYAVGAFNTSNLEITQAIVEAAEEMRSPAIIQVSEGGLKYAGIETISAIVRTLATKASVPIALHLDHGTDFNNVMKCLRNGWTSVMMDASKLPLEKNIEVTKNVVTIAHGMGVSVEAEIGKIGGTEDNVTVDEREASMTDPDEAFKFAKETGVDYLAISIGTAHGPYKGEPKLDFDRLVKIKEMLKMPIVLHGASGVPEADIRKAVSLGVNKINIDTDIRQAFAARLRELLKNDEEVYDPRKILGPCKEAMKEVIKNKM RMFGSEGRA
or0272(SEQ ID NO:59)
MITGDQLLIKQINKSIVLNTIRKKGLISRADLANITGLNKSTVSSLVDELIKEGFVEEEGPGESKGGRKPIMLMINSLAGCVIGVDLDVNYILVILTDILANILWQKRINLKLGESKEDIISKMLELIDEAIKNSPNTVKGILGIGIGVPGITDYKRGVVLKAPNLNWENVELKKMVEERFNLKVYIDNEANTGAIGEKWFGGGRNAKNFVYVSAGIGIGTGIIINNELYRGSNGLAGEMGHMTIDINDHMCSCGNRGCWENYASEKSLFRYIKERLEAGQEDDFIDSENIDSLDINDIAGYAELGSKLAIDAINEISKNLSVGIVNIVNTFNPDLVLIGNTLSAIGDMLIDAVKEYVREKCLVSRYNDIAIEISKLGMLERAIGAVTLVISEVFSYPGL
or1389(SEQ ID NO:60)
MTNVLNFDYSNALNFVNEHEISYLEKQALLSLDMVLNKTAQGSDFLGWVDLPKDYDKEEFARIKKAAEKIKSDSDALVVIGIGGSYLGARAAIEMLTHSFYNVLPQSVRKAPEIYFAGNSISSTYLQDLLEILEGKDVSINVISKSGTTTEPAIAFRVFRDFLEKKYGKEEAKSRIYVTTDRQKGALKKLADEEGYETFVIPDDVGGRYSVLTAVGLLPIAAAGIDIDEMMKGAYDASIVFKKPDIKENLSMQYAVLRNALYRKGKSVEILVNYEPRLHYFSEWWKQLYGESEGKDHKGIYPASVDFSTDLHSMGQFIQDGSRIMFETVINVEKPLKEITINEDKDNVDGLNFLTGKTVDLVNKKAFEGTVLAHNDGGVPNLIVNVPEISAYNFGYLVYFFEMACGISGYLNGVNPFDQPGVEAYKKNMFALLGKPGYEKEKEELEKRLKR
or2875(SEQ ID NO:61)
MYNIQLDSPNLGDKEKDYLVKCIESGYVSTVGPFVPEFERRFAEFLNVNHCVSVQSGTAALYMALYELGIKDGDEVIVPAITFVATVNPIVYCGATPVFVDVDKDTWNIDPKEIEKAITPKTKAIIPVHLYGNPCDMDKIMEIAKENNIYVIEDATESLGALYKGRMTGTIGHIGCFSFNGNKVITTGGGGMVASNNEDWVSHIRFLVNQARDMTQGYFHTEIGFNYRMTNLEASLGIAQLERLAGFLEKKRMYFEIYKKIFNGIEEISLQTEYEGAKSSDWLSSVKIDCKKVGMTIHQIQDELKRRGIPTRRIFNPIVDLPPYKKYKKGSYSNSYEIYENGLNLPSSTLNTYEDVKYVAKTLLDILSIKKR
解糖热厌氧杆菌pdu基因or228-or200
or228
SEQ ID NO:62:
MLAIERRKRIMRLIQENQSVLVPELSKLFNVTEETIRRDLEKLEAEGLLKRTYGGAVINENSSADIPLNIREITNIESKQAISMKVAEYIEDGDTLLLDSSSTVLQVAKQLKFKKKLTVITNSEKIILELANAKDCKVISTGGVLKQNSMSLIGNFAEDMIKNFCVDKAIISSKGFDMTNGITESNEMEAEIKKAMANSAEKVFLLLDHNKFDKSSFVKMFDLDKIDYLFTDRKLSLEWEEFLKKHNIDLIYC
SEQ ID NO:63:
ATGCTTGCGATAGAACGAAGGAAGAGGATAATGAGGCTTATACAGGAAAATCAAAGCGTTTGGTGCCTGAGTTAAGTAAATTGTTTAATGTGACAGAGGAAACTATAAGGAGAGATTTAGAGAAACTTGAAGCAGAAGGGCTTTTAAAGAGGACTTATGGTGGTGCTGTTATAAATGAAAATTCAAGTGCTGATATCCCCTTAAATATAAGGGAAATAACGAATATAGAAAGCAAACAGGCCATAAGTATGAAGGTTGCCGAATACATTGAAGATGGTGATACACTTTTGCTTGATTCAAGCTCTACAGTTCTTCAAGTAGCAAAGCAATTAAAATTCAAAAAGAAGCTTACAGTCATAACAAATTCGGAAAAGATAATATTAGAATTAGCAAATGCGAAAGATTGCAAAGTCATTTCTACAGGAGGAGTATTGAAGCAAAATTCTATGTCGCTAATTGGAAATTTCGCGGAAGATATGATAAAAAATTTCTGTGTAGATAAAGCCATAATATCATCAAAAGGTTTTGACATGACAAATGGCATTACAGAGTCAAACGAAATGGAAGCTGAAATAAAAAAAGCCATGGCCAACTCGGCAGAAAAAGTGTTTTTACTTCTTGATCACAACAAATTTGACAAGTCATCGTTCGTCAAGATGTTTGACTTAGATAAAATCGATTATCTATTTACCGATAGAAAGCTGTCTTTAGAATGGGAAGAATTCTTGAAAAAACACAATATTGATTTAATCTATTGTTAG
or227
SEQ ID NO:64:
VYSEYEVKKQICEIGKRIYMNGFVAANDGNITVRIGENEIITTPTGVSKGFMTPDMLLNINLNGEVLKSSGDYKPSTEIKMHLRVYRERPDVKSVIHAHPPFGTGFAIVGIPLTKPIMPEAVISLGCVPIAEYGTPSTEELPDAVSKYLQNYDALLLENHGALTYGPDLISAYYKMESLEFYAKLTFISTLLGGPKELSDSQVEKLYEIRRKFGLKGRHPGDLCSTLGCSTNSAKSNDDDISELVNVITKKVLEQLKYN
SEQ ID NO:65:
GTGTATTCTGAATATGAGGTAAAAAAACAGATCTGCGAAATAGGAAAGAGAATCTACATGAATGGGTTTGTGGCAGCGAATGACGGCAATATCACCGTTAGGATTGGTGAAAATGAAATAATAACGACGCCTACCGGTGTCAGCAAAGGTTTCATGACTCCAGACATGCTATTAAATATTAATTTAAACGGTGAAGTATTAAAATCTTCAGGCGACTACAAACCGTCCACAGAAATAAAGATGCATCTTAGAGTCTATAGAGAAAGGCCAGATGTCAAATCAGTCATACATGCACATCCACCATTTGGCACAGGTTTTGCTATTGTAGGGATCCCGCTTACAAAGCCAATAATGCCAGAAGCAGTTATATCTTTAGGCTGTGTGCCGATAGCCGAATACGGGACGCCTTCTACAGAAGAGCTGCCAGATGCCGTCTCTAAATATTTGCAAAATTACGATGCGCTTTTATTAGAAAATCATGGTGCGTTGACATACGGTCCTGATTTAATTAGCGCATACTACAAGATGGAATCACTTGAATTTTACGCAAAATTGACATTTATTTCTACACTTCTCGGAGGTCCAAAAGAATTATCAGATAGCCAAGTAGAAAAGCTTTATGAAATTAGGAGAAAATTCGGTTTAAAAGGAAGACATCCAGGCGATTTGTGCAGTACATTAGGATGCAGCACAAATTCTGCAAAATCGAATGATGATGACATTTCTGAACTTGTGAATGTTATCACTAAGAAAGTATTAGAACAATTGAAATACAATTAA
or226
SEQ ID NO:66:
MKHSKRFEVLGKRPVNQDGFINEWPEKGFIAMCSPNDPKPSIKIENDKIVEMDGKRREDFDFIDLFIADHAINIYQAEKSMKMNSLDIAKMLVDINVERKTIIKVVSGLTPAKIMEVVNHLNVVEMMMAMQKMRARKIPANQSHITNLKDNPVQIAADAAECALRGFREEETTVGVTKYAPFNAIALLIGSQALKRGVLTQCAVEEATELELGMRGFTTYAETISVYGTESVFIDGDDTPYSKAFLASAYASRGLKMRFTSGTGSEVLMGNAEGKSMLYLEIRCIMVTKGAGVQGLQNGAISCIGITSSVPSGIRAVLAENLIASMLDLEVASGNDQTFTHSDIRRTARTMMQFLPGTDFIFSGYSGTPNYDNMFAGSNFDAEDFDDYNVLQRDLMVDGGLRPVKEEDVVEVRRKAAKALQDVFRELNLGVVTDEEVEAAAYAHGSKDMPERDVLSDLESIDEMMKRGITGIDIVKALYRSGHEDIAENILNMLKQRISGDYLQTSAILDEDFNVISAINCPNDYLGPGTGYRIDKDRWEEIKNIPYTINPDNL
SEQ ID NO:67:
ATGAAACATTCTAAGCGATTTGAGGTTCTCGGCAAAAGACCTGTAAATCAGGATGGATTTATAAATGAATGGCCAGAAAAAGGCTTCATAGCAATGTGTAGTCCCAATGATCCTAAGCCATCAATAAAGATTGAAAACGACAAGATCGTTGAGATGGATGGGAAGAGAAGAGAAGACTTTGATTTTATAGATTTATTCATAGCTGATCACGCTATAAATATTTATCAGGCTGAGAAATCCATGAAAATGAACTCGCTTGATATAGCCAAAATGCTTGTAGATATAAATGTAGAGAGAAAGACTATAATAAAAGTAGTTTCGGGACTTACACCTGCCAAAATAATGGAAGTTGTAAATCATCTTAATGTCGTTGAAATGATGATGGCTATGCAGAAAATGCGAGCAAGAAAGATTCCGGCTAATCAATCACATATTACAAATCTTAAAGATAATCCTGTGCAGATTGCAGCGGATGCTGCCGAATGTGCTTTAAGAGGTTTTAGGGAAGAAGAGACCACCGTAGGAGTGACAAAATATGCTCCGTTTAATGCAATAGCGTTATTGATAGGGTCTCAGGCATTAAAAAGAGGCGTGCTTACTCAATGTGCTGTTGAGGAGGCGACGGAACTTGAATTAGGCATGAGGGGATTTACCACATACGCTGAGACTATATCTGTTTATGGAACTGAAAGTGTTTTTATAGATGGTGACGATACACCTTACTCCAAAGCATTCCTTGCTTCTGCTTATGCGTCAAGAGGATTGAAAATGAGGTTTACGTCAGGTACAGGTTCAGAAGTTCTTATGGGAAATGCAGAGGGTAAATCGATGTTGTACCTGGAAATCAGGTGCATCATGGTTACAAAAGGTGCAGGAGTGCAGGGGCTTCAAAATGGTGCAATAAGCTGTATAGGCATAACTAGCTCAGTTCCTTCAGGTATAAGGGCGGTGCTGGCTGAAAACCTTATAGCATCTATGCTTGATTTAGAGGTAGCATCAGGCAATGATCAGACTTTTACACATTCAGACATAAGAAGGACAGCAAGGACTATGATGCAGTTTTTACCCGGTACTGATTTCATATTTTCAGGTTACAGTGGAACGCCTAATTATGACAATATGTTTGCAGGTTCCAATTTTGATGCAGAAGATTTTGATGACTACAATGTACTGCAAAGGGATTTAATGGTAGATGGAGGGTTAAGGCCTGTAAAAGAAGAAGATGTGGTAGAAGTGAGGCGAAAGGCAGCTAAAGCTTTGCAGGATGTATTTAGAGAGTTAAATCTTGGAGTAGTTACAGATGAAGAAGTAGAAGCAGCAGCATATGCACACGGCAGCAAAGATATGCCTGAAAGAGATGTTTTGTCTGACCTTGAATCAATCGATGAGATGATGAAAAGAGGGATTACAGGCATTGACATCGTAAAGGCTTTATATAGATCTGGACATGAGGATATAGCGGAAAACATTTTAAACATGTTAAAACAGCGCATATCTGGAGACTATTTGCAGACATCAGCTATTCTTGATGAAGATTTTAATGTTATAAGCGCCATAAATTGTCCAAATGATTACTTAGGACCTGGAACAGGATATAGGATTGATAAAGATAGATGGGAAGAGATAAAGAATATTCCTTACACCATTAATCCTGACAATTTGTAA
or225
SEQ ID NO:68:
MYVDEELLKEITKRVIEELNNKHKTDNVPSYFIENGVAYKGKNIEEVVIGVGPAFGKHIKKTINGLDHRDVIKEIIAGIEEEGMVHRIVRVLKTSDVAFIGKEAALLSGSGIGIGIQSKGTTVIHQKDLYPLSNLELFPQAPLLNLELYREIGKNAARYAKGMMVKPILIQNDYMVRPKYQVKAAIMHIKETEKILKNAQSIQLTIDL
SEQ ID NO:69:
ATGTACGTAGATGAAGAACTGTTAAAAGAAATTACTAAACGTGTTATAGAAGAATTAAATAATAAGCATAAAACTGATAATGTGCCTTCGTATTTTATTGAAAATGGAGTTGCCTATAAGGGTAAAAATATAGAGGAAGTCGTCATTGGTGTTGGGCCTGCATTTGGAAAGCATATAAAAAAGACTATAAATGGCCTTGACCATAGAGATGTCATAAAAGAAATAATTGCAGGCATCGAAGAAGAAGGTATGGTTCATAGAATTGTAAGAGTTCTAAAGACTTCTGATGTGGCGTTCATAGGCAAAGAAGCTGCTTTATTAAGCGGATCGGGAATAGGCATAGGCATACAATCAAAAGGTACTACAGTGATTCATCAAAAAGATTTATATCCTTTAAGCAATTTAGAACTGTTTCCACAAGCTCCACTGCTAAATTTAGAATTATACAGGGAAATAGGCAAAAATGCGGCGAGATATGCTAAAGGCATGATGGTAAAGCCTATTTTGATTCAAAATGATTACATGGTGAGACCTAAATACCAAGTGAAAGCTGCTATAATGCATATAAAAGAGACGGAAAAGATATTGAAAAATGCTCAATCAATCCAATTGACGATAGACTTGTAA
or224
SEQ ID NO:70:
MEEYPLSKSAFDKLVTKTGKHLNEINIENVMKGNVKPDDIKISKEVLLMQGQIAERYGRHQMKENFTRASELTDVPDEKILEIYESLRPFRSTKEELINLAYELRDKYNAINCANLILEAAEVYEKRNILKT
SEQ ID NO:71:
ATGGAAGAATATCCGCTATCAAAAAGTGCTTTTGATAAATTGGTGACAAAAACAGGCAAACATTTGAATGAAATAAATATTGAAAATGTAATGAAGGGAAACGTAAAACCCGATGATATCAAGATATCCAAAGAAGTGCTTTTAATGCAAGGGCAAATTGCAGAAAGATACGGCAGGCATCAGATGAAGGAGAATTTCACAAGAGCATCGGAGCTTACAGATGTTCCAGATGAAAAGATTTTGGAAATATATGAGAGCTTAAGGCCGTTTAGATCTACAAAGGAAGAGCTTATAAATCTTGCCTATGAATTAAGAGATAAGTACAATGCCATTAACTGTGCAAACTTGATACTTGAGGCTGCTGAAGTATATGAAAAAAGAAATATTTTGAAAACTTAA
or223
SEQ ID NO:72:
MKLIAGVDIGNSTTEVCIAAIKDDNTLEFLSSSLTATTGVKGTVDNVTGVINGLTEALKKIGKNIRDLSLIRINEAAPVVCGAAMETITETVITGSTMIGHNPSTPGGVGLGVGEIIHINDLADATKGKNYIVVIPKEIGYEEASIMINKSFENDIDVKAAIVQSDEAVLINNRLKKIIPIVDEVRQIEKIPSGVVAAVEVAPE GKSISTLSNPYGIATIFDLTPEETKYVIPISKSLMGKKSAVVIKTPRGQVKERIIPAGNLLIMGPTMSSKVSVDSGAEAIMESVEEVGTIDDVEGEENTNVGNMIKNLKNKMANITGQKVDKIKIKDIFAVDTTVPVKVEGGLAGETSMEKAVVLAAMVKTDTLPMIEIAEKLQRKLGVFVKIAGVEAVMATLGALTTPGTKLPLAILDIGGGSTDAALIDEKGIVKSIHMAGAGELVTMLIDSELGLNDRYLSEEIKRNPIGKVESLFHIRMENREIKFFDKPLNPRYYGRIVILKENDMIPVFKEDLTMEKIIYVRRQAKDKVFVKNAIRALKKIAPENNLRRIPNVVLVGGSALDFEIPEMILSELSKYKIIAGRGNIRKIEGPRNAVATGLVMSYLG
SEQ ID NO:73:
ATGAAACTCATAGCAGGTGTTGATATTGGCAATTCTACAACAGAAGTGTGTATAGCCGCTATTAAAGATGACAATACATTAGAATTTTTAAGCAGTTCCTTGACAGCTACGACAGGTGTAAAAGGCACTGTGGATAATGTGACAGGGGTTATTAATGGATTGACTGAGGCACTAAAAAAAATTGGCAAGAATATTAGGGATTTAAGCCTCATTAGAATCAATGAAGCCGCCCCAGTTGTCTGTGGTGCTGCTATGGAGACAATAACGGAAACTGTTATCACTGGTTCGACTATGATAGGTCATAATCCATCCACGCCGGGTGGTGTCGGACTTGGAGTAGGCGAGATAATACATATAAATGATTTAGCTGATGCTACTAAAGGCAAAAATTACATTGTGGTTATACCTAAGGAGATTGGCTATGAAGAAGCTTCAATAATGATAAACAAATCTTTTGAAAACGATATTGATGTAAAAGCTGCTATAGTTCAAAGCGATGAAGCAGTTTTAATCAACAACAGGCTTAAAAAGATTATACCAATTGTTGACGAAGTAAGGCAGATAGAAAAGATTCCATCGGGTGTTGTAGCGGCTGTAGAGGTGGCACCAGAAGGCAAGTCCATAAGCACGTTATCAAATCCTTATGGTATCGCAACAATATTTGACTTAACTCCAGAAGAGACAAAGTATGTCATACCGATTTCGAAAAGTTTGATGGGGAAAAAGTCAGCAGTTGTCATAAAAACACCGAGGGGACAAGTGAAAGAAAGAATAATTCCGGCTGGTAATCTCTTAATCATGGGGCCTACTATGTCATCAAAAGTAAGTGTTGATTCTGGTGCTGAAGCTATAATGGAATCAGTTGAAGAAGTCGGCACAATTGATGACGTAGAAGGTGAAGAAAATACAAATGTTGGGAATATGATAAAAAATCTAAAAAACAAGATGGCAAATATAACTGGGCAAAAAGTAGATAAGATAAAGATTAAAGATATCTTCGCTGTTGATACGACAGTCCCTGTTAAAGTAGAGGGCGGACTTGCTGGTGAGACTTCAATGGAAAAAGCAGTCGTGTTGGCGGCTATGGTAAAGACAGATACGCTTCGATGATAGAAATTGCAGAAAAGCTTCAAAGAAAGTTGGGTGTATTTGTAAAAATAGCTGGAGTAGAAGCTGTGATGGCTACATTAGGTGCGCTTACAACTCCAGGCACAAAGTTGCCACTTGCAATACTGGATATCGGTGGGGGTTCTACAGATGCAGCTTTGATTGATGAAAAAGGCATTGTAAAATCTATACACATGGCAGGTGCTGGAGAATTAGTCACAATGCTTATTGATTCAGAATTAGGGTTAAATGATAGATATTTGTCTGAAGAAATAAAGAGAAATCCGATTGGAAAAGTTGAAAGCCTATTTCACATAAGAATGGAAAATAGGGAGATAAAGTTTTTTGACAAACCTTTAAATCCTCGATATTACGGTAGGATCGTAATTTTAAAAGAAAATGACATGATCCCTGTATTTAAAGAAGATTTGACAATGGAAAAGATTATTTACGTGCGAAGACAAGCGAAGGATAAAGTTTTCGTTAAAAATGCTATTAGAGCTTTGAAAAAAATTGCTCCGGAAAATAATTTAAGGCGAATACCAAATGTAGTCTTGGTTGGCGGTTCTGCTTTGGACTTTGAAATTCCAGAGATGATTTTATCAGAGCTATCAAAATACAAAATCATAGCAGGCAGAGGGAATATAAGAAAAATCGAAGGGCCAAGAAATGCTGTAGCGACAGGTCTTGTGATGTCTTATTTAGGGTGA
or222
SEQ ID NO:74:
MEFIKPQIVIFANTENKYIINEVIAGIEEEGALYRLSYNECADVMKMAYDAAKASVLGIGIGISGDLVCLHSKNLEINTPLILSKTSENFDPRLVGCNAAKYVKGLPLKYLD
SEQ ID NO:75:
ATGGAATTTATAAAGCCTCAAATAGTGATTTTTGCAAATACAGAAAACAAATATATAATAAACGAGGTTATAGCTGGCATTGAAGAAGAAGGTGCATTATATAGATTATCTTACAATGAATGTGCTGATGTTATGAAAATGGCTTATGATGCAGCAAAAGCATCTGTATTAGGTATCGGAATAGGCATATCTGGAGATTTAGTGTGTTTGCACTCTAAAAACTTGGAAATCAATACACCTTTGATTCTTTCAAAGACAAGTGAAAACTTTGATCCACGACTCGTTGGATGCAATGCTGCAAAATATGTAAAGGGTTTGCCACTTAAATACTTAGATTAG
or221
SEQ ID NO:76:
MSVYTKTGDDGYTLLLNGERIPKDDLRIETLGNLDELTSYLGFAKAQINDDSIKKR
SEQ ID NO:77:
ATGAGTGTTTATACTAAAACTGGTGATGATGGTTACACGTTGCTATTAAATGGAGAAAGAATTCCAAAGGACGATTTGAGAATAGAGACATTGGGAAATTTGGATGAATTGACAAGCTATTTAGGATTTGCAAAAGCTCAAATAAATGATGATTC CATAAAAAAGAGATAG
or220
SEQ ID NO:78:
MVKIKNGFVIPGKNQISALLDIVRTITRKTERSLIKVDKKYPVNINSKVYINRLSDYLFVLARYMEIRTEIEEKVKDVIRKHYGKNKGEIKLNLDIAKNLMAKVEKKAESINLPVAIAIVDMHGNLIAAHFMDGTLLESMNLAINKAYTSVVLKMSTQELSKLAQPGQPLYGINTTDNRIVVFGGGCPIKHQGEIVGGIGVSGGTVEQDIELSIYGADVFEEVIS
SEQ ID NO:79:
ATGGTAAAGATTAAAAATGGTTTTGTAATACCTGGTAAAAACCAAATCTCAGCATTATTAGATATTGTAAGGACTATAACGAGAAAAACTGAGAGAAGCTTAATCAAAGTTGACAAGAAATATCCTGTAAATATTAATTCGAAAGTTTACATCAATAGATTGTCTGATTATTTGTTTGTTTTAGCAAGGTATATGGAAATAAGAACGGAAATAGAAGAAAAAGTAAAAGACGTGATAAGAAAGCATTATGGAAAGAACAAAGGCGAAATAAAGCTAAATTTAGATATAGCAAAAAATTTAATGGCTAAGGTAGAAAAGAAGGCAGAAAGCATTAATCTACCGGTTGCTATTGCAATAGTTGACATGCATGGCAATTTGATAGCGGCTCATTTTATGGATGGTACACTTCTTGAAAGCATGAATCTAGCTATAAATAAAGCTTATACATCAGTGGTGCTTAAAATGTCGACGCAAGAGTTATCAAAACTTGCACAACCAGGGCAGCCTCTTTACGGGATAAATACAACTGATAATAGAATCGTAGTGTTTGGAGGTGGGTGCCCTATAAAACATCAAGGTGAAATAGTTGGTGGAATTGGAGTTAGCGGTGGTACAGTAGAACAAGATATAGAACTTTCTATTTATGGTGCAGATGTATTTGAGGAGGTTATATCATGA
or219
SEQ ID NO:80:
MKVKEEDIEAIVKKVLSEFNFEKNTKSFRDFGVFQDMNDAIRAAKDAQKKLRNMSME SREKIIQNIRKKIMENKKILAEMGVSETGMGKVEHKIIKHELVALKTPGTEDIVTTAWSGDKGLTLVEMGPFGVIGTITPSTNPSETVLCNSIGMIAAGNSVVFNPHPGAVNVSNYAVKLVNEAVMEAGGPENLVASVEKPTLETGNIMFKSPDVSLLVATGGPGVVTSVLSSGKRAIGAGAGNPPVVVDETADIKKAAKDIVDGATFDNNLPCIAEKEVVSVDKITDELIYYMQQNGCYKIEGREIEKLIELVLDHKGGKITLNRKWVGKDAHLILKAIGIDADESVRCIIFEAEKDNPLVVEELMMPILGIVRAKNVDEAIMIATELEHGNRHSAHMHSKNVDNLTKFGKIIDTAIFVKNAPSYAALGYGGE GYCTFTIASRTGEGLTSARTFTKSRRCVLADGLSIR
SEQ ID NO:81:
ATGAAAGTTAAAGAGGAAGATATTGAAGCGATCGTCAAAAAAGTCTTATCGGAATTTAATTTTGAAAAAAATACTAAAAGTTTCAGAGATTTTGGCGTATTTCAAGATATGAATGATGCTATTCGTGCTGCAAAAGATGCCCAGAAAAAATTGAGAAATATGTCCATGGAGTCGAGAGAAAAGATTATACAGAATATAAGAAAAAAGATTATGGAGAATAAAAAAATACTTGCAGAGATGGGCGTCAGTGAAACTGGCATGGGGAAAGTAGAGCACAAAATAATAAAACATGAGCTTGTAGCACTTAAGACACCTGGTACCGAAGATATAGTGACAACAGCATGGTCTGGCGATAAGGGACTGACATTGGTTGAAATGGGGCCATTTGGTGTAATAGGTACGATTACTCCTTCGACAAATCCAAGTGAAACCGTCCTTTGCAATAGCATAGGTATGATAGCCGCAGGTAATTCAGTCGTATTTAATCCACATCCAGGTGCGGTAAATGTATCTAATTACGCTGTCAAGTTAGTAAATGAAGCGGTGATGGAAGCTGGCGGCCCTGAGAATTTAGTCGCATCTGTTGAAAAACCTACACTTGAAACTGGAAATATTATGTTCAAGAGTCCTGATGTTTCGCTATTAGTAGCGACAGGCGGACCTGGTGTAGTAACATCGGTTCTCTCATCTGGCAAAAGGGCAATAGGAGCAGGAGCAGGAAATCCACCAGTTGTAGTTGATGAAACGGCAGATATAAAAAAAGCTGCGAAAGATATAGTCGATGGTGCTACATTTGACAACAATTTGCCTTGTATTGCTGAAAAGGAAGTAGTTTCTGTAGATAAAATAACAGATGAACTGATTTACTACATGCAACAGAATGGCTGCTACAAGATTGAGGGGCGAGAAATTGAAAAGCTCATTGAACTTGTATTGGATCACAAAGGTGGCAAGATAACATTAAACAGGAAATGGGTTGGCAAAGATGCTCATTTAATACTAAAAGCTATAGGCATAGATGCTGATGAAAGCGTAAGGTGCATAATTTTTGAGGCGGAAAAAGACAATCCGTTAGTGGTAGAAGAGCTGATGATGCCTATTTTAGGAATAGTAAGAGCCAAAAATGTAGATGAAGCGATAATGATTGCGACAGAGTTAGAACATGGCAATAGGCATTCAGCACATATGCATTCTAAAAACGTTGATAATTTAACAAAGTTTGGAAAAATAATTGACACTGCTATATTTGTAAAAAATGCTCCATCGTATGCCGCGTTAGGATATGGTGGTGAAGGTTATTGCACATTTACGATTGCAAGCAGAACAGGTGAAGGATTGACATCTGCAAGGACTTTTACTAAAAGTCGTAGATGTGTCTTGGCAGATGGATTATCAATAAGATAG
or218
SEQ ID NO:82:
MEVNQIDIEEIVKKILNDLRNEPKENIKESNSKIPSICRAAVLTDVKKIEVKEFNIPEINDDEMLVKVEGCGVCGTDVHEYKGDPFGLIPLVLGHEGTGEIVKLGKNVRRDSAGKEIKEGDKIVTSVVPCGECDICLNHPDKTNLCENSKIYGLISDDNYHLNGWFSEYIVIRKGSTFYKVNDINLNLRLLVEPAAVVVHAVERAKSTGLMKFNSKVLVQGCGPIGLLLLSVVKTLGVENIIAVDGDENRLNMAKRLGATALINFTKYSNIDELVDAVKKASDGIGADFAFQCTGVPSAASNIWKFVRRGGGLCEVGFFVNNGDCKINPHYDICNKEITAVGSWTYTPQDYLTTFDFLKRAKEIGLPIEELITHRFSLDKMNEAMEVNMKQEGIKVVYINDRF
SEQ ID NO:83:
ATGGAAGTCAATCAGATAGACATTGAGGAGATAGTTAAGAAAATATTAAATGATTTAAGAAATGAGCCTAAAGAAAACATTAAAGAGAGCAATTCAAAAATACCATCTATCTGCAGAGCTGCTGTACTTACAGATGTTAAAAAAATAGAAGTAAAAGAATTTAATATTCCAGAAATAAATGATGATGAAATGCTTGTCAAGGTGGAAGGCTGTGGCGTTTGCGGTACTGATGTTCATGAATACAAAGGAGATCCTTTTGGACTTATACCATTGGTTTTAGGACACGAAGGTACAGGTGAGATAGTCAAGCTGGGGAAAAACGTGAGACGAGATTCTGCTGGTAAAGAAATCAAAGAAGGCGATAAGATTGTTACATCTGTCGTTCCGTGCGGTGAATGCGATATATGTTTGAATCATCCAGACAAGACAAATTTGTGTGAAAACTCAAAGATTTACGGCTTAATATCCGATGATAATTACCATTTAAATGGTTGGTTCTCAGAGTACATCGTCATAAGGAAAGGCTCAACATTTTATAAGGTCAATGATATAAACCTTAATTTGAGGCTTTTGGTAGAACCGGCTGCAGTAGTCGTACATGCAGTAGAGCGCGCAAAATCCACAGGTCTTATGAAATTCAACAGTAAAGTTCTCGTACAAGGCTGTGGCCCTATAGGATTACTGCTATTGTCGGTTGTAAAGACGCTTGGAGTAGAAAATATCATAGCCGTCGACGGCGATGAGAATAGACTCAACATGGCTAAAAGATTAGGTGCTACAGCACTCATTAATTTTACTAAATACAGCAATATTGATGAGCTTGTTGATGCTGTTAAAAAAGCAAGCGATGGAATTGGCGCAGATTTTGCATTTCAATGTACAGGCGTTCCTTCTGCAGCGTCTAATATTTGGAAGTTTGTAAGGCGGGGAGGTGGTTTATGCGAAGTTGGATTTTTTGTAAATAATGGTGATTGTAAGATAAACCCCCATTATGATATTTGCAATAAGGAGATAACAGCAGTTGGCTCATGGACTTACACTCCTCAAGACTATTTGACAACTTTTGATTTTCTCAAAAGAGCTAAAGAAATAGGACTTCCAATTGAAGAGCTGATAACACATAGATTTTCACTTGATAAAATGAATGAAGCTATGGAAGTTAATATGAAGCAGGAAGGGATAAAAGTAGTGTATATAAATGACAGATTTTAG
or217
SEQ ID NO:84:
MQAVGLIEVYGLVAAFVAADAACKKANVVIESFDNNKPLNAEALPVPLIIVVKLRGDLEDVKIAVDAAVDAANKISGVVATNIIAKPEEDTEKLLKLNCLK
SEQ ID NO:85:
ATGCAGGCTGTTGGATTGATTGAAGTTTATGGATTAGTAGCGGCATTTGTGGCAGCAGATGCTGCATGCAAAAAAGCGAATGTCGTAATAGAGTCTTTTGACAACAATAAGCCATTAAATGCTGAAGCATTGCCAGTTCCATTGATAATAGTCGTTAAGCTCAGAGGAGATCTTGAGGATGTAAAAATAGCGGTAGATGCTGCAGTTGATGCAGCTAATAAAATATCTGGTGTAGTTGCTACAAATATAATAGCAAAACCAGAAGAAGATACTGAAAAGCTATTAAAGCTAAATTGTCTTAAATAA
or216
SEQ ID NO:86:
MVQEALGMVETRGLVAAIEAADAMVKAADVTLIGTEKIGSGLVTVMVRGDVGAVKAATEVGASAASKLGELVAVHVIPRPHTDVEKILPTIK
SEQ ID NO:87:
ATGGTACAAGAAGCATTGGGAATGGTAGAAACGAGAGGATTGGTAGCAGCAATAGAAGCAGCAGATGCTATGGTAAAGGCTGCGGATGTCACTTTGATAGGAACTGAAAAAATAGGTTCAGGACTTGTAACAGTCATGGTAAGAGGAGATGTCGGTGCAGTAAAAGCAGCGACAGAAGTTGGCGCAAGTGCAGCTTCAAAATTGGGAGAGTTAGTGGCTGTTCACGTAATACCAAGGCCTCATACTGATGTTGAAAAGATACTGCCGACAATTAAATAA
or215
SEQ ID NO:88:
MYAIGLIEVNGFVTAVETLDAMLKTANVEFVTWEKKLGGRLVTIIIKGDVSAVEEAILTGKIEADKITRTVAYAVIPNPHPETIKMVNISAGKLFKADGGEINEF
SEQ ID NO:89:
ATGTATGCAATTGGACTTATTGAAGTAAATGGGTTTGTCACAGCGGTTGAAACACTGGATGCAATGTTGAAAACAGCCAATGTAGAGTTTGTAACATGGGAGAAAAAACTTGGAGGCAGACTTGTGACAATCATTATTAAAGGAGATGTTTCAGCAGTTGAAGAAGCAATTTTAACTGGAAAGATTGAAGCTGACAAGATTACACGGACAGTAGCATACGCAGTTATTCCAAATCCACATCCAGAAACTATAAAGATGGTAAATATTAGTGCAGGAAAGCTATTTAAAGCAGATGGTGGTGAAATAAATGAGTTCTGA
or214
SEQ ID NO:90:
MSSEEKDTNAKDVKVEKQKNNLTKTSNKEFKEELIMEQQALGMVETRGLVAAIEAADAMVKAANVTLIGTEKIGSGLVTVMVRGDVGAVKAATETGANAAKKLGELVAVHVIPRPHADVEKILPTIK
SEQ ID NO:91:
ATGAGTTCTGAAGAAAAGGATACGAATGCAAAAGATGTTAAAGTCGAAAAGCAGAAAAATAATTTAACGAAAACATCAAATAAAGAATTTAAGGAGGAATTGATTATGGAACAACAAGCATTAGGAATGGTAGAGACGAGAGGATTGGTAGCAGCGATAGAAGCTGCTGATGCAATGGTAAAGGCTGCTAATGTCACGTTAATAGGAACTGAAAAAATAGGTTCAGGACTTGTAACAGTCATGGTAAGAGGAGATGTTGGTGCAGTAAAAGCAGCGACAGAGACTGGAGCAAATGCAGCTAAAAAGTTAGGGGAGTTAGTAGCTGTTCACGTAATACCAAGACCTCATGCAGATGTAGAGAAAATACTGCCTACGATAAAGTAG
or213
SEQ ID NO:92:
VITVNEKLIEIISKTIADTISERNSLKIPVGVSARHVHLTKEHLDILFGKDYILKKKKELMGGQFAAEECVTIIGFKLNAIEKVRVLGPLRDKTQVEISKTDAISLGLNPPIRESGDIKGSSPITIVGPRGAISLKEGCIIAKRHIHMSPEDSKRFNVKDDDIISVKINGQRGGILENVQIRVDEKYTLEMHIDTDEANCMGLKSGDFVEIVRDNRS
SEQ ID NO:93:
GTGATAACAGTGAACGAAAAATTGATAGAGATTATATCAAAAACTATAGCGGATACGATTAGTGAAAGGAATTCGCTTAAGATACCAGTAGGCGTATCAGCCCGACATGTACATCTGACTAAAGAACATTTGGATATATTATTTGGAAAAGATTATATCCTTAAAAAGAAAAAGGAATTGATGGGTGGACAGTTCGCAGCAGAGGAATGTGTGACAATTATCGGATTTAAATTAAATGCTATTGAGAAAGTGAGAGTTTTGGGTCCTTTAAGAGATAAAACGCAGGTAGAAATATCGAAGACCGATGCAATAAGTTTAGGGTTAAACCCTCCTATACGGGAATCAGGTGATATAAAAGGTTCATCGCCAATTACAATTGTAGGGCCGAGAGGAGCAATATCATTAAAAGAAGGATGTATAATAGCAAAACGACATATTCACATGTCACCGGAAGATTCCAAAAGATTCAATGTTAAAGACGACGATATAATATCAGTAAAAATAAATGGTCAGCGAGGCGGAATTTTAGAAAATGTACAGATTAGAGTTGACGAAAAGTATACACTTGAGATGCATATTGACACAGATGAAGCTAATTGCATGGGACTAAAAAGCGGCGATTTTGTTGAAATAGTAAGAGATAATAGGAGTTGA
or212
SEQ ID NO:94:
LIIAKVVGTVISTRKNQNLIGNKFLIVEPVSEMNYDSKNRVVAIDNVGAGVGEIVLVTFGSSARIGCGMPDSPVDAAIVGIVDSIKDIIIDD
SEQ ID NO:95:
TTGATAATAGCTAAAGTTGTTGGTACTGTTATTTCTACCCGCAAGAATCAAAATTTAATAGGCAATAAATTTTTAATAGTAGAACCAGTAAGTGAAATGAATTATGACAGTAAAAATAGGGTTGTTGCAATAGATAATGTAGGTGCAGGTGTAGGAGAGATAGTATTAGTTACCTTTGGAAGTTCAGCAAGAATCGGTTGTGGTATGCCAGATTCGCCTGTAGATGCGGCAATTGTCGGAATTGTTGATAGCATAAAAGATATTATCATTGATGATTAG
or211
SEQ ID NO:96:
MMNIDELKNIVFENGIVGAGGAGFPTHAKLTTGIDTIILNGAECEPLLRVDRQLLAIYTDEILMTLSFIVDTLGAKRGIVAIKSAYKTAISSVKNLIGNYKNLELKVLPDVYPAGDEVVLIYETTGRIVPEGSIPISVGTLVMNVETVLNVYNAIYLKHPVTEKYVTVTGDVKYPSTFKAKVGTSVARLIEKAGGCLEKDCEVIMGGPMTGKIVDVKTPITKTTKAIIVLPKDHPVITKRKTNIRIGLKRAMSVCSQCQMCTDLCPRNLLGHSIKPHKVMNAVANSIIDDTAAYTMTMLCSECGLCEMYSCHQSLSPRKIISQIKIKLRQNGVKNPHNKRPETANVMRDERLVPMERLISRLSLKKYDVDAPMNFDTVIPSHHVVMQLSQHVGAKAIPVVKVGDIVKEGDLIGDVPNNKLGAKLHASIDGIIIDVTDDSIVIKPRGDFDGQSDRIG
SEQ ID NO:97:
ATGATGAATATTGATGAACTTAAAAATATCGTATTTGAAAATGGAATAGTCGGTGCAGGCGGAGCTGGATTTCCTACACATGCAAAACTTACTACAGGTATAGATACAATCATATTAAATGGCGCTGAATGTGAACCGCTTTTAAGAGTAGATAGGCAGCTACTTGCAATATATACTGATGAAATATTGATGACTTTATCATTCATAGTTGATACTTTAGGAGCCAAACGTGGCATTGTAGCAATAAAATCAGCATACAAAACTGCCATCAGCTCAGTTAAGAATTTGATTGGTAATTATAAAAACTTGGAGTTAAAGGTATTGCCAGACGTTTATCCTGCTGGTGATGAAGTTGTATTAATATATGAAACGACTGGAAGAATTGTGCCAGAAGGTTCTATACCTATTTCTGTTGGCACGTTGGTAATGAATGTGGAAACTGTGCTTAATGTTTATAATGCTATTTATTTAAAACATCCAGTCACAGAAAAGTATGTAACAGTAACGGGAGATGTCAAATATCCCAGCACATTTAAAGCAAAAGTAGGAACATCTGTAGCTCGTCTTATTGAAAAAGCAGGAGGATGCTTAGAAAAAGATTGTGAAGTGATAATGGGTGGTCCTATGACTGGGAAAATAGTTGATGTAAAGACTCCAATAACAAAAACTACAAAAGCTATTATCGTTCTCCCAAAAGACCACCCTGTGATAACAAAGAGAAAGACAAACATAAGGATAGGGTTAAAACGAGCAATGTCTGTTTGCTCTCAATGCCAAATGTGCACAGATCTATGTCCTAGAAATTTATTAGGTCATTCCATCAAACCTCATAAAGTCATGAATGCAGTTGCAAATAGTATTATTGATGATACCGCTGCATATACGATGACAATGTTATGTTCTGAATGTGGATTGTGCGAGATGTATTCATGTCATCAAAGTTTGTCGCCGAGAAAGATAATAAGCCAGATAAAGATAAAATTAAGGCAAAATGGTGTAAAAAATCCACACAACAAAAGACCAGAAACAGCAAATGTCATGCGAGATGAGAGATTAGTGCCGATGGAAAGGCTTATTTCAAGACTTTCGCTCAAAAAATACGATGTAGATGCTCCGATGAATTTTGATACTGTTATTCCTTCACATCACGTTGTCATGCAACTAAGTCAGCATGTTGGTGCCAAAGCGATACCTGTAGTAAAGGTAGGAGATATTGTGAAAGAAGGAGATCTGATAGGCGATGTGCCTAATAATAAGCTGGGTGCTAAATTGCATGCCAGTATTGACGGCATTATAATAGATGTAACTGATGACAGTATTGTTATCAAACCAAGAGGTGATTTTGATGGACAAAGCGATAGGATTGGTTGA
or210
SEQ ID NO:98:
MDKAIGLVEYKSVATGITAADDMAKTADVEIIEAYTVCPGKYIVLLAGKLSAVNSAIEKGINQYSENVIDSFILGNPHETIYKAMSGTSVIEDVEALGIIETFSAASIILAADTAAKAAKVNLVEIRIARGMCGKSYLLLTGELAAVEASINAGCKALERTGMLLNKSIIPNPDRAIWDKII
SEQ ID NO:99:
ATGGACAAAGCGATAGGATTGGTTGAATACAAATCAGTTGCTACAGGTATAACTGCTGCTGATGACATGGCTAAAACTGCTGATGTGGAAATAATAGAAGCATATACAGTATGTCCGGGGAAATACATTGTTCTGTTAGCTGGGAAATTAAGTGCAGTTAATTCGGCGATAGAAAAGGGCATAAATCAGTATTCGGAAAATGTCATTGATAGCTTTATATTGGGAAATCCGCATGAAACAATATATAAAGCTATGAGTGGCACGTCTGTAATTGAAGATGTAGAAGCACTTGGTATCATAGAGACATTTTCTGCAGCATCAATAATACTTGCAGCAGATACGGCTGCAAAAGCTGCAAAAGTGAATCTGGTAGAGATAAGAATAGCCAGAGGTATGTGCGGCAAGTCATATCTACTGCTTACAGGAGAACTTGCTGCTGTTGAAGCATCTATAAATGCAGGATGCAAAGCTTTGGAGAGAACGGGTATGCTTTTAAATAAGTCTATAATACCCAATCCAGATAGAGCTATTTGGGATAAGATAATTTAA
or209
SEQ ID NO:100:
MYEAEKDKILNDYYNAKEIYAKFDIDIDKVLDKMKKIRISLHCWQGDDVTGFEKSANGLSGGGILATGNWPGRARNGEELRQDIEKALSLIPGKHKINLHAIYAETDGEFVDRDEINVEHFRKWIYWAKENGLGLDFNPTFFSHPKANDGYTLSSKDENIRKFWIQHGKRCREIANEIGRELKTQCVNNVWIPDGSKDLPANRIEHRKILKESLDEIFSVKYDKSNIVDSVESKLFGIGSESYVVGSHEFYMNYASRNDVMLCLDMGHFHPTENIADKISSILTFNDNLLIHVSRGVRWDSDHVVILNEDLLSLAKEIRRCDAYDKVYIALDFFDASINRIMAWVIGARATLKAILISLLEPVHLLMEEENKGNFGARLALMEEFKTLPFYSVWNKYCMDENVPIGTSWIDDVKEYEKEIVKNRA
SEQ ID NO:101:
ATGTATGAAGCAGAAAAAGATAAAATTTTAAATGATTATTATAATGCAAAAGAGATTTATGCAAAGTTTGACATAGATATTGATAAAGTATTAGATAAAATGAAGAAGATTCGTATTTCACTTCACTGCTGGCAAGGCGATGATGTAACTGGATTCGAAAAAAGTGCCAATGGATTAAGCGGTGGAGGTATTTTGGCGACAGGAAACTGGCCTGGTAGAGCAAGAAATGGTGAAGAATTAAGGCAAGACATTGAAAAAGCCTTAAGCCTTATACCAGGCAAACACAAAATCAATTTACATGCCATTTACGCAGAAACGGATGGTGAATTTGTAGACAGAGATGAAATAAACGTGGAGCATTTCAGGAAATGGATTTACTGGGCAAAAGAAAATGGCCTTGGCCTTGACTTCAATCCTACGTTTTTTTCGCATCCTAAAGCAAATGATGGCTATACGCTTTCAAGCAAAGATGAAAACATAAGAAAATTTTGGATCCAACATGGTAAAAGATGCCGTGAAATCGCAAATGAAATAGGAAGAGAGCTAAAAACTCAATGTGTGAATAATGTTTGGATTCCTGATGGTTCAAAAGATTTGCCTGCTAATAGGATTGAACACAGAAAAATACTTAAAGAATCTTTAGATGAGATATTTTCAGTAAAATATGACAAATCAAATATCGTTGATTCTGTTGAAAGCAAATTATTTGGCATTGGATCTGAAAGCTATGTGGTTGGTTCACATGAGTTTTATATGAACTATGCGTCGAGAAATGATGTAATGCTGTGCCTTGATATGGGACATTTTCATCCTACTGAGAATATTGCTGATAAGATATCATCAATACTTACATTCAATGACAATTTGTTGATTCATGTAAGCCGTGGTGTCCGGTGGGATAGCGACCATGTAGTCATTTTAAATGAAGATTTGCTTTCATTAGCAAAAGAAATAAGAAGATGTGATGCTTATGACAAAGTGTATATTGCATTAGATTTCTTTGATGCAAGCATAAATAGGATAATGGCATGGGTAATAGGTGCAAGAGCGACGCTAAAAGCCATATTAATATCACTATTAGAGCCTGTGCATCTACTTATGGAAGAGGAGAATAAAGGAAATTTTGGTGCAAGACTTGCTTTGATGGAGGAATTCAAAACATTGCCATTTTACTCTGTTTGGAACAAATACTGCATGGACGAAAATGTGCCTATTGGTACATCGTGGATTGATGATGTTAAAGAATATGAAAAAGAAATTGTAAAAAATAGGGCTTAA
or208
SEQ ID NO:102:
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SEQ ID NO:103:
ATGAAAGATATTGTGTATAATCTGGCTTTTGATTTTGGAGCTTCAAGTGGCCGTCTTATGCTATCCGCGTTTGATGGCGAAAAAATCACAATTGAAGAGATTTATAGATTTCCAAATGAGCCAGTCAAGCTGGGACAATCATTTTATTGGGATTTTTTAAGGCTTTTTCACGAATTAAAAAACGGATTAAAAATAGCATCAAAGAGGAAAATCAAAATATCCGGCATTGGTATAGACACTTGGGGTGTCGATTATGGATTGCTTGATAAAAATGATCAATTGATTTCAAATCCTTTTCATTACAGAGATAAAAGAACGGATGGCATAATAAAAGATTTTGAAAATATGGCGTTACTGGAGGAAATCTACAACGTAACTGGTATACAGTTTATGGAATTTAATACAATATTCCAATTGTATTGCGATTATAAAAAGCGTCCAGAATTATTGGATAATGCAAAGACATTGTTGTTTATTCCAGATTTATTTAACTTTTATTTGACAAATGAGAAATACAATGAATATACTGTTGCATCCACATCGCAAATGTTGGATGCTAACAAGAAAGATTGGGCAAATGATCTTATAGAAAAGTTAAATTTGCCAGAAGGTATTTTTCAAAAGATACTGATGCCAGGAAATACAATTGGTTATCTAACAAAAGAAATTCAAGAAGAAACAGGATTGTCTGAAGTTCCCGTGATTTCTGTTGGCAGCCATGATACGGCATCAGCAGTTGCAGGTACACCTATTGAAAACGGTTCAAGTGCTTATTTGATTTGTGGTACTTGGTCATTATTAGGTGTTGAAAGTGAAAAACCTATAATAAATGAAAATACAAAGAAGTACAATTTTACAAATGAAGGCGGTGTCGAAGGCCTTATAAGGCTACTTAAAAATATTAATGGTCTGTGGATAATTCAGCAATTAAAACAAAGTTGGAATTCAAATGGCATTAAAATAGGATTTCCAGAAATCAGCCAGATGGCATCTAAAGCAGAGCACGAAGAATTTATCATAAATCCTGATGACAAATTGTTTATAGCTCCAGATGATATGGCTGAGGCGATAAGGCAATATTGTACAAAAACAGGACAGGGTTTGCCGCAGAATATTGGCGACATAGCAAGAGCCGCTTACAATGGTATAGTTGAACAATACAAAAATTGCTTAAACAATTTAGAAGATATTGTAGGGCAAGAAATAGATAATATTCACATGGTTGGTGGTGGGATACAGGATAAGTTCCTGTGCAAGCTGACTGCAGATGTTACAGGGAAAAAAGTCATAACAGGCCCTGTAGAAGCTTCAATCTATGGCAATGTGATAGTCCAGCTTATGGCATTGGGATATATAAAAGACTTGAGAGAAGGAAGAAAGATAATAAAGAATTCTATAGAGAATGATGAAGAGATGTTTGCTAAATAG
or207
SEQ ID NO:104:
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SEQ ID NO:105:
GTGTCTAATATTTATACGCTTGTAGTAGTAGAAGATGAATATGAGATAAGAACAGGATTAGTTAACTGCTTTCCATGGAACAAAATGGGTTTTGTTGTTGCAGAAGAATTTGAAAATGGAGGAGAATGTTTTGAGTATTTGTGTAAAAATAAGGTTGATACAATTTTATGTGATATAAAAATGCCAGTTATGTCTGGTATAGAGTTGGCAAAGAAAATTTTTGAAAGTAATATAAGCACTAAAATAGTTATAATCAGTGGTTATACTGATTTTGAATATGCCAGACAGGCGTTAAGATATGGTGTTAAAGATTATATAGTAAAACCTACTAAATATAATGAAATAATTGATGTTTTCAGCAGAATAAAAAAAGAATTAGACAATGAAAATACAAAGGAAATATTGAATAACTCATGTAACAATGAAATTGATCAGTACAGCAGCATAATTTCAATCATAGAAAAATATGTTGATGAACATTACAGAGATGTGACATTGGAAGATGTAGCTAAAGTAGTTTATATGAATCCGTATTATTTAAGCAAATATTTTAAACAAAAAACCGGTATGAATTTTTCTGATTATATAACTGAGGTCAGAATGAAAAAAGCTGTAGAGTTTCTAAAAAATCCTTTGTATAAAACTTATGAAATAAGTTATATGATTGGATATAAAAATCCAAAAAATTTTACTAGAGCATTTAAAAAATATTATAAAAAATCCCCAAGAGAATTTGTAAATTCAGCAATAAATTTTAAGGAATGA
or206
SEQ ID NO:106:
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SEQ ID NO:107:
ATGAGAGAATTAAACAATAAATTTTTTTATAAAAATCTTTTTGTTTTGGCATTGCCATTAATTTTAATTGTTATTGTATTAGGTTCATTTTCAATATTAATAACAGAAAGATATGTTAGAGATGAAATATACAAAAATAGTAGAGAAATATTAAAGCAAAGCAGTAATGATTTGTCAATTTTATTTAATGATATAAATAAAATTTATTTAACATTTGGAACAAACAAAGATGTGACATTGTATTTGGAAAGGATCTTAAATACAAATAAATATTCTTTAGATGATATGTGGCATCTTAGCATGATAGAAAGTTTATTTGATTCTACGTCGTTTTCAGAACCTTATATACAATCAATTTATTTGTATTTTAACAATCCTAATAAAAATTTTTTAGTGACAGGAAATGGTATTAATTCTGTAACAAATTATATTGATAATAAATGGTATGACAGCTTTTTAAATGCACCAAAAGATGAGATTTCTTGGATAGAGGTTAGAAATTTAAAAATGTATAGTTTCGATAAAAAGGGGATAAAAGTCCTAAGTATATACAAAAAAATTGCAAACTTTAACGGGGATAAAATTGATGGTGTGCTTGTACTAAATATATATTTGGACTATATTGAAAATTTGCTAAATACTTCAACAATATTTCCTGACCAAAAAATTCTTATATTAGATGCCCACGACAATTTAATATGTCAAAATATTAATGGGAATTTCACTGGGAAGATAGACTTAGATAATTATAGCAAAGCAAACATCATAACAAAATTAGAATCTCCAAATTATAATATAAAATATGTATCTATTGTTCCTAAAAAATACCTTTATGAAGTTCCTATAAAGCTTTTAAAGATGACTTTAGTTTTACTTTTGACGTCAATTTTTTTTGTGATATTGATAACATTTAGAATCACTAAACGAAATTACGAAAATGTAAATAAAATATTAAAGATTATAGAGGCAGAAAAGACAAATGAGATATTTCCAGAAATTCCAGTAGAAAGTAGAGATGAGTACAGCTATATAATTTACAACATTATTAATAGTTATATTGAAAAAAGTCAATTGAAAATGGAATTAGCAGAAAAGAAGTATAAAATGAAAGCAATGGAGTTATTAGCACTGCAATCGCAAATTAGTCCTCATTTTTTGTCTAATGCGTTGGAGATTATTTATCTTAGGGCATTGTCATACACAAACGGTCCTAATGATGTCACAAAAATGATTGAAAATTTGTCACAGATTTTAAAGTATTTGTTAAGTAATCCAAATGAAACAGTAACTGTAAAAGAAGAAATTGAAAATACAAAGGCATATATACAAATATTGAAGGTCAGGTATAGAGATAAATTTAAAGTAAATCTAATTTATGATGAAAGTATTTTATCATGTCTCATGATGAAACTGATGCTGCAACATTTAATAGAAAATTCTATAAAACATGGGCTTAAGAAGAAAAATTATGAAGGATCAATAAAAATCAAAATAAAAGCAGTTGATAAAAAGAAAATAAAAATTTCAGTAATCGATAATGGCATAGGAATGTCCAAAGAGAGGCTAAATTATGTAAAAAGAATTCTTGACTCTGACTTCGATTTTTATGAACATATTGGACTAATGAATACAAATGAACGGTTAAAACTTCTCTATGGGAAAGATTGTGAAATATTAATAAGAAGTAAATTGAATATTGGTACTGCCGTATATATAATTTTTCCATATCAATTAAAAAATCAGAATAATGATGATTATAATAAGTGA
or205
SEQ ID NO:108:
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SEQ ID NO:109
ATGGGAATTAACAGATATGATCTTGTAAAAAGGCATAATGTAATTTTGGAAAAAGCAGATATCGAAAATCCATTGTCAGTAGGTAATGGAGAAATTGCTTTTACAGCTGATATAACGGGAATGCAAACTTTTATTGATGACTATAAGAGCATTCCTTTATGTACCATGTCACAGTGGGGGTTTCATACTACGCCGGCACAGAATGATAAGGGCTATTATACTTTGGAAGATTTGAACCTCAAGTATTACGATGCATTTGACCGAAAGGTTGGATATGTAACATCAGCAGAAAATCAAGAGAATGTATTTAATTGGTTGAGGAGTAATCCTCATAGAATTAATTTAGGTAATATAGGATTAAATATAATTCTTGATGATGGCACAAAAGCAGAATTGAAAGATATTTTCGAAATACACCAAGTATTAGATTTGTGGAACGGAATATTGATAAGTGACTTTAAAGTCGAAAAAGTCCCTGTTCACGTTGAGACTTTTTGCCATCCATATGAAGATATGATAAATTTTTCTGTTGAATCAGAACTGCTAAAACAAAATAAAATTTATATTGAAGTAAAATTTCCATATGGTGCGGCCAATATATCAGGCTCCGATTGGGATAGAAATGATAGACATGATACAAATGTGGTTGATTATGGCAGAGATTTTGTCGAATTATTGAGAACTGTCGATGAAGATGTTTATTTTGTAAAAATAGAGTACTCAAAAGGCGTTTATTTAAATAGAATCGGGGAAAATCATTTTGCATTAAAGCAAAAAGAGTATAATGGGAGAATAGAATTTTCGTGCTTGTTTTCGAAGCAAAAACCTCTTAAGTGCTTGCATTCATTTAGTGAAAGCAAAAGGATGTGTAAAGAATATTGGAATAGCTTTTGGAGAGGAGGTGGTGCAATAGATTTTTCAAAGTGTGAGGATAAAAGAGCTTTTGAATTGGAGAGAAGGGTAATACTTTCGCAATATCTTACAGCTATTCAATGTTCGGGTTCTATGCCGCCGCAAGAAACAGGGCTCACCTGTAATAGCTGGTATGGTAAATTTCATTTGGAAATGCATTGGTGGCATGCTGTACATTTTGCTTTATGGGGTAGAATGCCTTTGCTGAGTAGAAGTATATGGTGGTACAGGAGCATTTTCAATGTATCACGTGACATTGCGAGAAAGCAAGGATACAAAGGTGTACGCTGGCCTAAAATGGTTGGACCAGATGGAAGGGATAGCCCTTCTCCGATAGGACCATTGCTTGTTTGGCAGCAGCCTCATCTTATATATTACAGTGAACTGTTTTTTAGAGAAAATCCTACGGAAGAAACATTAGATATGTTTAAAGACATAGTAATTAATACTGCTGATTTTATTGCATCATTTGTTGCATATGATAGAAAAAATGATAGATATATACTTGCGCCACCTTTGATTCCAGCACAAGAAAATCATGATCCTAACGTTACATTAAATCCGGTATTTGAATTGGAGTATTTTTCGTTTGCGCTGGAAATAGCAGTTAAATGGATTGAAAGGTTAGGACTAAATGTGAACCAAGAGTGGAATGAAATACGTTTTAAATTAGCTAATTTACCTTCAAAAGACGGTGTATATATATCGCATGAAAAATGTATTAACACTTATGAGAAATTTAATTTTGACCATCCATCTATGCTTGCAGCATTGGGGATGCTACCAGGCCGCAAGGTTGATAAAGAAACTATGAGAAGGACTTTACATAGAGTATTAAAAGAGTGGAAATTTGAGGAAATGTGGGGTTGGGATTTTCCGATGATGGCTATGACTGCAACAAGATTAGGCGAACCGGAGACAGCAATAAATATTCTTTTGATGGATTCACCAAAAAATACTTATATGGTAAATGGCCATAATAACCAAATACCGAATAAAGAACTACCAGTATATTTGCCTGGAAATGGTGGACTATTGGCGGCAATGGCCCTCATGACAGCTGGTTGGGATGGGAATAGCCAAAGCACACCTGGATTTCCTAAAAATGGGATGTGGAATGTTGAATGGGAAGGGTTAAAAGCGATGATATGA
or204
SEQ ID NO:110:
MIKRKDLYIRDPFVVPVPNEKIYYMFGTTDINCWNDEKATGFDYYKSSDLENFEGPFIAFRPDKNFIWDKNFWAPEVHKYNDMYYMFATFFADGRNRGTQILVSEKISGPYRPWSIEPVTPKDWMCLDGTFYVDENGEPWMIFCHEWVQIYDGEICAVRLSKDLKTTIGNPITLFKASSANWTRSIKKIKDHECYVTDGPFIYRSEEGKLYMLWSSFIENNIYAVGISLSRTGKITGPWVHSENPIFAGDGGHGMIFKTFEGNLTLAVHTPNKRKEERPLFITLEKSVLNDTL
SEQ ID NO:111:
ATGATAAAACGAAAGGATCTTTATATACGTGATCCATTTGTAGTTCCAGTACCGAATGAAAAAATATATTATATGTTTGGAACTACTGATATAAATTGCTGGAATGATGAGAAAGCAACTGGATTTGATTACTATAAATCATCTGATTTAGAAAATTTTGAAGGACCTTTTATTGCATTTAGACCAGATAAAAACTTTATTTGGGATAAAAATTTTTGGGCTCCAGAAGTGCACAAATACAATGACATGTATTATATGTTTGCTACATTTTTCGCTGATGGCAGAAATAGAGGAACGCAAATTTTAGTATCTGAAAAAATAAGTGGGCCATATAGACCATGGAGTATTGAACCGGTGACGCCGAAGGATTGGATGTGTTTAGATGGGACTTTTTATGTAGATGAGAATGGGGAACCCTGGATGATATTTTGCCATGAATGGGTACAAATATATGATGGGGAAATTTGTGCTGTAAGATTGTCGAAAGATTTAAAAACAACGATAGGAAATCCTATTACACTTTTTAAAGCTTCCAGTGCTAATTGGACAAGAAGTATTAAAAAGATTAAAGATCATGAATGCTACGTTACGGATGGCCCTTTTATTTATAGGTCTGAAGAGGGAAAGCTTTATATGTTGTGGTCCAGTTTTATTGAAAACAATATATACGCTGTTGGTATATCATTATCGAGAACAGGCAAAATAACCGGCCCGTGGGTACACAGTGAAAATCCAATTTTCGCAGGTGATGGTGGGCATGGTATGATATTTAAGACCTTTGAAGGGAATCTAACATTGGCAGTACACACACCTAATAAAAGGAAAGAAGAACGGCCCCTTTTTATAACTTTAGAAAAATCTGTGCTTAATGATACCTTATAA
or203
SEQ ID NO:112:
MFKKITSLLISLLLIISLVTGCSSSSNSSSSSKNSSENNTSPKTVTLRFMWWGGDARHKATLDAISLYEKEHPNVKINAEYGGVTDYLQKLITQLSSGTAPDLIQIDVTWLQQLFSQGDFFADLSKLKDINVNAFDQNFLKNYCYVNNKLIGLPTGINNSAMYINKDFFNKFGIDDKTVWTWDNLLQTAKMVHEKDKNAYLLDADSTICDYILVTYVGQKTGNQWVKDDYTLGFDKQTLTEAFKYLNDLFEVGAIEPFSQSAPYEGKPDQNPMWLNGQTGMLWNWSSIYAGVKANIKNLSLALPPIDPNAKQTGIVVRPSQLIAINKDSKNIDEAAKFLNWFFTNTDAIKTLKDVRGVPATADARKILSENNLLDSTLTDNANQAMEKMAPPENGISGNQELEKINTDIIQELAYKKITPEQAADELINTYKQKLPELKSQQ
SEQ ID NO:113:
ATGTTTAAAAAAATTACATCTCTGTTAATATCGCTTCTTTTGATAATTTCATTAGTTACAGGATGTAGCAGTTCTTCGAATTCTTCGAGTTCATCGAAAAATAGTTCTGAAAATAATACCAGCCCAAAAACCGTAACATTAAGATTTATGTGGTGGGGTGGAGATGCCAGACATAAAGCAACACTTGATGCCATAAGTCTTTATGAAAAAGAACATCCCAATGTAAAGATTAATGCTGAATATGGCGGCGTTACTGACTATCTCCAAAAGCTGATAACTCAATTAAGCAGTGGTACAGCACCTGATCTTATACAAATAGATGTAACATGGTTGCAGCAACTTTTTAGCCAAGGTGATTTTTTTGCAGATTTAAGTAAGTTAAAAGATATCAATGTGAATGCATTTGATCAAAATTTTCTTAAAAATTATTGCTATGTCAACAATAAGTTGATAGGTTTGCCTACAGGAATAAACAATTCGGCAATGTATATTAACAAAGACTTTTTTAATAAATTTGGCATAGACGATAAGACGGTTTGGACATGGGATAATCTCTTGCAAACCGCTAAGATGGTGCATGAAAAGGATAAAAATGCTTATCTTTTAGATGCTGATTCTACTATTTGTGATTATATATTGGTCACATACGTGGGGCAAAAAACTGGAAATCAGTGGGTGAAAGATGATTACACTTTAGGTTTTGATAAACAAACATTGACAGAGGCATTCAAATATTTAAACGATTTGTTCGAAGTAGGCGCTATAGAGCCATTTTCTCAAAGTGCTCCATACGAAGGAAAACCTGATCAAAATCCTATGTGGCTTAATGGTCAAACGGGTATGCTTTGGAACTGGTCATCTATATATGCTGGTGTAAAAGCAAACATAAAGAACCTGTCATTGGCATTGCCACCTATTGACCCTAATGCAAAACAGACAGGCATAGTTGTAAGACCATCACAGCTTATTGCTATTAACAAGGATTCTAAAAATATCGATGAAGCAGCAAAATTTTTAAATTGGTTCTTTACGAATACAGATGCTATAAAAACACTTAAAGATGTCAGAGGAGTTCCAGCTACCGCAGATGCACGCAAAATTTTATCAGAAAATAATTTGTTGGATTCGACTTTAACTGATAATGCAAATCAAGCTATGGAAAAGATGGCACCTCCTGAAAACGGTATAAGTGGTAATCAAGAGTTAGAAAAGATAAATACTGATATCATACAAGAACTGGCTTATAAAAAGATAACGCCAGAGCAGGCTGCTGATGAATTGATAAATACTTATAAACAGAAACTTCCAGAATTAAAAAGCCAGCAATAA
or202
SEQ ID NO:114:
MSYNKKRNLMGYLYISPWIIGFLIFTLYPFAMTFIYSFCNYSITKSPVFIGLGNYITMFTKDMYFWPSLINTIKYVLMTVPLKLCFALFVAMILNIDIKGVNVFRTTYYLPSIFGGSVALSVIWKFLFMDNGIMNKFLSYFHIHGPSWLGNPHISLFTISLLSVWEFGSSMVIFLAALKQVPNELYEASMLDGASKIRRFFSITLPMISPVLLFNLVMQTINAFQEFTGPYVITGGGPMNSTYVYSMLIYDNAFRYFRMGYSSALSWILFLLILIVTVIIFKSSNTWVYYENGGR
SEQ ID NO:115:
ATGAGTTATAATAAAAAGAGAAATTTGATGGGGTATTTATATATTAGTCCATGGATTATAGGCTTTTTAATATTTACTCTGTATCCATTTGCTATGACTTTTATCTATTCATTTTGTAACTACAGTATTACAAAATCACCTGTATTTATTGGATTAGGCAATTATATAACTATGTTTACTAAAGATATGTATTTTTGGCCATCTTTAATTAATACTATAAAATATGTATTAATGACAGTTCCTTTAAAATTATGTTTTGCACTTTTTGTTGCAATGATCTTAAATATTGATATTAAAGGAGTTAATGTGTTTAGAACAACTTATTATCTGCCTTCTATTTTTGGAGGAAGTGTTGCTTTATCTGTTATATGGAAATTTTTATTCATGGATAATGGTATTATGAATAAATTTCTTTCATACTTTCATATACACGGGCCAAGTTGGCTTGGAAACCCACACATATCATTATTTACTATAAGTTTATTGTCAGTGTGGGAATTTGGGTCTTCTATGGTAATATTTTTGGCAGCCCTAAAACAGGTCCCGAATGAGTTGTATGAAGCATCTATGTTAGATGGTGCAAGCAAAATAAGAAGGTTTTTCTCAATAACTTTACCTATGATATCGCCTGTGCTATTATTTAATTTGGTTATGCAGACTATAAATGCTTTTCAGGAATTTACAGGTCCATACGTGATAACTGGTGGAGGACCGATGAACTCTACTTATGTGTACAGTATGTTGATTTATGATAATGCGTTTAGGTATTTTAGGATGGGTTATTCATCTGCCTTGTCTTGGATTTTATTTTTGTTAATATTGATTGTTACAGTTATAATATTTAAATCTTCAAATACATGGGTGTATTACGAAAATGGAGGTAGATGA
or201
SEQ ID NO:116:
MKAKNSQNNDIIRKVFIYVFLVAFGIFMIYPLLWVFASSFKSNDEIFKSISLIPKHIVTNSYFEGWKGTGQYSFGTFILNSITLVVPVVVFTAISSTIVAYGFARFEFPLKTILFTLMISTMMLPGTAVLIPRYILFNWLGWINTYKPFIVPALFGTTPFFIFMMVQFLRGLPKELEESATIDGCNSFQILMKILIPLCKPAIISMCIFQFIWTWNDFFNPLIYINSVEKYTVSLGLNMTIDGTSVVNWNQIMAMTIISMIPSIIIFFSAQKYFVEGIATTGLKN
SEQ ID NO:117:
ATGAAAGCAAAGAATAGTCAAAATAACGATATAATCAGAAAAGTATTTATATATGTTTTCTTGGTGGCTTTTGGTATTTTCATGATATATCCTTTACTTTGGGTTTTTGCATCATCATTTAAATCAAATGATGAAATCTTTAAATCGATAAGCCTTATACCAAAACACATTGTGACAAATTCATATTTTGAAGGATGGAAAGGTACGGGACAATACTCTTTTGGTACATTTATTTTAAACAGCATTACGCTTGTTGTACCTGTTGTTGTATTTACTGCTATATCATCAACAATTGTAGCCTATGGATTTGCAAGATTTGAGTTTCCGCTTAAAACTATTTTGTTTACTTTGATGATATCTACTATGATGTTGCCGGGCACTGCAGTTTTGATACCAAGATATATATTGTTTAATTGGTTAGGCTGGATAAACACTTATAAACCATTTATTGTTCCCGCTTTGTTCGGAACAACGCCTTTTTTCATTTTTATGATGGTTCAATTTTTGAGAGGTCTTCCTAAAGAATTAGAAGAATCGGCTACAATTGATGGTTGCAATTCATTTCAAATACTTATGAAGATTTTAATACCATTGTGTAAACCTGCAATTATTTCTATGTGTATATTTCAGTTCATTTGGACTTGGAATGACTTTTTTAATCCATTGATATATATCAACAGTGTAGAAAAATATACAGTTTCTCTCGGGCTTAATATGACAATTGATGGGACTTCAGTTGTAAATTGGAACCAAATAATGGCAATGACAATTATTTCAATGATACCGAGCATCATAATATTTTTTTCAGCGCAAAAATACTTCGTTGAAGGTATTGCAACAACTGGATTAAAGAACTAA
or200
SEQ ID NO:118:
MRYTDGKVHDITIAYIGGGSRGWAWNLMTDLAKEESISGTVKLYDIDYDAAHDNEIIGNALSMRQDVKGKWLYKACETLEESLKGADFVIISILPGTFDEMESDVHAPEKYGIYQSVGDTVGPGGIVRALRTIPMFVDIANAIKEHCPDAWVINYTNPMTLCVRTLYEIFPQIKAFGCCHEVFGTQKLLSRALQDIEGIENVPREEIKINVLGINHFTWIDNARYKDIDLMYVYKQFVNKYYESGFVSDANNNWMNNSFVSAERVKFDLFLRYGVIAAAGDRHLAEFVPGYWYLKDPETVREWMFGLTTVSWRKEDLKRRLERSKRLKTGEEKFELKETGEEGVRQIKALLGLGDLVTNVNMPNHGQIEGIPYGAVVETNALFSGNKLKPVLSGKLPDNVNSLVLRQVYNQETTLKAALKRDFDLAFSAFVNDPLVTISLKDAKKLFKEMLENTKKYLDGWKIKA
SEQ ID NO:119:
ATGAGATATACAGATGGAAAGGTTCATGACATTACTATTGCTTATATCGGTGGTGGTTCAAGAGGATGGGCGTGGAATTTAATGACTGACTTAGCAAAAGAGGAAAGTATTTCTGGTACAGTAAAGTTATACGACATAGATTACGATGCGGCACATGACAATGAGATAATAGGCAATGCTTTATCAATGAGACAGGATGTTAAAGGCAAATGGCTTTATAAAGCTTGTGAGACGTTAGAAGAGTCACTAAAAGGTGCTGATTTTGTCATAATATCTATTTTGCCAGGTACGTTCGACGAGATGGAATCTGATGTTCATGCACCAGAAAAGTATGGCATTTATCAGTCAGTAGGTGATACAGTAGGACCTGGTGGAATAGTCAGAGCTTTAAGGACGATTCCGATGTTTGTGGACATTGCCAATGCGATTAAAGAGCATTGTCCAGATGCATGGGTCATAAATTATACAAATCCTATGACACTTTGTGTAAGGACATTGTATGAAATTTTCCCTCAAATTAAAGCATTTGGATGCTGCCATGAAGTTTTTGGCACACAGAAGCTATTATCTCGTGCTCTGCAGGATATAGAAGGCATTGAAAATGTTCCGAGGGAAGAGATAAAGATAAATGTTTTAGGTATAAATCATTTTACGTGGATCGACAATGCAAGGTACAAAGACATAGATTTAATGTATGTTTATAAACAATTTGTGAATAAGTACTATGAAAGCGGATTTGTCAGCGATGCTAACAATAATTGGATGAACAATTCATTTGTATCTGCAGAGAGAGTAAAGTTTGATCTGTTTTTGAGGTATGGAGTAATAGCTGCAGCGGGAGATAGACATCTGGCGGAATTTGTGCCGGGATATTGGTATTTAAAAGATCCAGAGACAGTCAGAGAATGGATGTTTGGCTTAACGACTGTAAGTTGGAGAAAAGAAGACTTAAAACGCAGGCTTGAAAGAAGTAAAAGGCTTAAGACAGGTGAGGAAAAATTTGAGTTAAAGGAAACAGGCGAAGAAGGTGTTAGGCAAATTAAAGCACTATTAGGCTTAGGCGATTTAGTGACTAATGTCAACATGCCGAACCATGGACAGATTGAAGGAATACCATACGGTGCGGTAGTTGAAACAAACGCTTTATTTTCAGGTAATAAACTAAAGCCTGTATTATCAGGAAAATTGCCTGACAATGTAAACAGCCTCGTGTTAAGGCAAGTATACAACCAAGAAACGACGTTGAAAGCTGCTTTAAAGAGAGATTTTGATTTGGCTTTTAGTGCTTTTGTAAATGATCCACTTGTTACAATATCTTTAAAAGATGCAAAAAAATTATTTAAGGAAATGCTTGAAAATACGAAGAAATATCTAGATGGATGGAAAATAAAAGCTTGA
非天然蛋白
EC 2.3.1.9
丙酮丁醇梭菌ThlA(SEQ ID NO:120)
MKEVVIASAVRTAIGSYGKSLKDVPAVDLGATAIKEAVKKAGIKPEDVNEVILGNVLQAGLGQNPARQASFKAGLPVEIPAMTINKVCGSGLRTVSLAAQIIKAGDADVIIAGGMENMSRAPYLANNARWGYRMGNAKFVDEMITDGLWDAFNDYHMGITAENIAERWNISREEQDEFALASQKKAEEAIKSGQFKDEIVPVVIKGRKGETVVDTDEHPRFGSTIEGLAKLKPAFKKDGTVTAGNASGLNDCAAVLVIMSAEKAKELGVKPLAKIVSYGSAGVDPAIMGYGPFYATKAAIEKAGWTVDELDLIESNEAFAAQSLAVAKDLKFDMNKVNVNGGAIALGHPIGASGARILVTLVHAMQKRDAKKGLATLCIGGGQGTAILLEKC
EC 2.8.3.8
丙酮丁醇梭菌CtfAB
CtfA(SEQ ID NO:121)
MNSKIIRFENLRSFFKDGMTIMIGGFLNCGTPTKLIDFLVNLNIKNLTIISNDTCYPNTGIGKLISNNQVKKLIASYIGSNPDTGKKLFNNELEVELSPQGTLVERIRAGGSGLGGVLTKTGLGTLIEKGKKKISINGTEYLLELPLTADVALIKGSIVDEAGNTFYKGTTKNFNPYMAMAAKTVIVEAENLVSCEKLEKEKAMTPGVLINYIVKEPA
CtfB(SEQ ID NO:122)
MINDKNLAKEIIAKRVARELKNGQLVNLGVGLPTMVADYIPKNFKITFQSENGIVGMGASPKINEADKDVVNAGGDYTTVLPDGTFFDSSVSFSLIRGGHVDVTVLGALQVDEKGNIANWIVPGKMLSGMGGAMDLVNGAKKVIIAMRHTNKGQPKILKKCTLPLTAKSQANLIVTELGVIEVINDGLLLTEINKNTTIDEIRSLTAADLLISNELRPMAV
EC 4.1.1.4
丙酮丁醇梭菌Adc,Aad
Adc(SEQ ID NO:123)
MLKDEVIKQISTPLTSPAFPRGPYKFHNREYFNIVYRTDMDALRKVVPEPLEIDEPLVRFEIMAMHDTSGLGCYTESGQAIPVSFNGVKGDYLHMMYLDNEPAIAVGRELSAYPKKLGYPKLFVDSDTLVGTLDYGKLRVATATMGYKHKALDANEAKDQICRPNYMLKIIPNYDGSPRICELINAKITDVTVHEAWTGPTRLQLFDHAMAPLNDLPVKEIVSSSHILADIILPRAEVIYDYLK
Aad(SEQ ID NO:124)
MLKDEVIKQISTPLTSPAFPRGPYKFHNREYFNIVYRTDMDALRKVVPEPLEIDEPLVRFEIMAMHDTSGLGCYTESGQAIPVSFNGVKGDYLHMMYLDNEPAIAVGRELSAYPKKLGYPKLFVDSDTLVGTLDYGKLRVATATMGYKHKALDANEAKDQICRPNYMLKIIPNYDGSPRICELINAKITDVTVHEAWTGPTRLQLFDHAMAPLNDLPVKEIVSSSHILADIILPRAEVIYDYLK
EC 1.2.1.43甲酸脱氢酶(热乙酸菌)Moth_2312(SEQ IDNO:125)
MVNLTIDGQRVTAPEGMTILEVARENGIHIPTLCHHPKLRPLGYCRLCLVDIEGAAKPMTACNTPVAEGMVIRTSTPVIEEMRKGIIEMLLSLHPEDCLTCEKAGNCQLQDCAYTYGVKHGELPVKREELPVLKENPFIVRDYNKCIVCGRCVRACQEVQVQRVVDLVGKGSAARVGATKAGAEVSLEEGGCVFCGNCVQVCPVGALTEKAGLGQGREWEFKKVRSICSYCGVGCNLTLYVKDGKVVKVRGYENPEVNNGWLCVKGRFGFDYIHNPDRITRPLIREGDREKGYFREASWEEALALVSQKLTQIKGSYGSEALGFLCSAKCTNEENYLLQKLARGVLGTNNVDHCARLHSSTVAGLATTFGSGAMTNSIADIASADCIFVIGSNTTENHPVIALKVKEAVRRGARLIVADPRRIELVNFSYLWLRQKPGTDLALLNGLLHVIIKEELYDKEFIAQRTEGFEALKLAVEEYTPAKVSEVTGVPAGDIIEAARTYARGPSSTILYAMGITQHITGTANVMALANLAMACGQVGKEGSGVNPLRGQSNVQGACDMGGLPNVLPGYQPVTDPGVRHKFSEAWGVPDLPGEPGLTLMEMMAAAQEGKLKGMYILGENPVLTDPDVSHVKEALKNLEFLVVQDIFLTETARMADVVLPGASFAEKEGTFTSTERRVQLLHKAIEPPGEARPDWLILNDLLLLMGYPRKYSSPGEIMQEIAGLTPSYAGITYERLEDKGLQWPVLSLEHPGTPVLHREKFSRGYGQFQVVHYRPPAEEPDEEYPFLFTTGRNLYHYHTVISRKSRGLEEMCPAPVVEINDNDAARLGIREGEMIEIVSRRGKVRVKALVTDRIPRGQVFMNFHFHEAAANLLTIAALDPVAKIPEYKTCAVAIKVKK
用于酿酒酵母工程化的蛋白序列
EC 4.2.3.3
稻-mgs(SEQ ID NO:126)
MELTTRTIAERKHIALVAHDHRKQALLEWVESHKTILAQHQLYATGTTGNLIQRASGIPVTSMLSGPMGGDQQVGALIAEGKIDMLIFFWDPLNAVPHDPDVKALLRLATVWNIPVATNRSTADFLIDSPLFKSEVAIAIPDYQRYLQDRLK
EC 2.3.1.8
解糖热厌氧杆菌-or1741(SEQ ID NO:127)
MKTSELLAMVVEKGASDLHITVGVPPVLRINGQLIKLNLPQLTPQDTEEITKDLLSSDELKKLEDMGDIDLSYSVKGLGRFRINAYKQRGTYSLAIRSVALRIPTIDELGLPEVIKELALKTRGLIIVTGPTGSGKSTTLASMIDLINEERNCHILTLEDPIEYLHKHKKSIVNQREIGHDAASYASALRAALREDPDVILVGEMRDLETIQIAITAAETGHLVLSTLHTIGSAKTIDRIIDVFPPHQQQQIKVQLSNVLEGIVSQQLLPKIDNSGRVVAVEVMIATPAIRNLIREGKSFQIQSMVQTGNKFGMVTMDMWISQLLKRNLISMDDALTYCVDRENFSRLVV
EC 1.1.1.6
恶臭假单胞菌gldA(SEQ ID NO:128)
MDRAIQSPGKYVQGADALQRLGDYLKPLADSWLVIADKFVLGFAEDTIRQSLSKAGLAMDIVAFNGECSQGEVDRLCQLATQNGRSAIVGIGGGKTLDTAKAVAFFQKVPVAVAPTIASTDAPCSALSVLYTDEGEFDRYLMLPTNPALVVVDTAIVARAPARLLAAGIGDALATWFEARAASRSSAATMAGGPATQTALNLARFCYDTLLEEGEKAMLAVQAQVVTPALERIVEANTYLSGVGFESGGVAAAHAVHNGLTAVAETHHFYHGEKVAFGVLVQLALENASNAEMQEVMSLCHAVGLPITLAQLDITEDIPTKMRAVAELACAPGETIHNMPGGVTVEQVYGALLVADQLGQHFLEF
EC 2.7.2.1
解糖热厌氧杆菌or1742(SEQ ID NO:129)
MIKKKLGDLLVEVGLLDESQLNNAIKIQKKTGEKLGKILVKEGYLTEEQIIEALEFQLGIPHIDMKKVFIDANVAKLIPESMAKRHVAIPIKKENNSIFVAMADPLNIFAIDDIKLVTKLDVKPLIASEDGILKAIDRVFGKEEAERAVQDFKKELSHDSAEDDGNLLRDISEDEINNAPAVRLVNSIIEQAVKNRASDVHIEPTENDLRIRFRIDGELHEAMRVFKSTQGPVITRIKIMANMNIAERRIPQDGKIEMNAGGKNIDIRVSSLPTIYGEKLVLRILDKSGYIITKDKLGLGNDDLKLFDNLLKHPNGIILLTGPTGSGKTTTLYAMLNELNKPDKNIITVEDPVEYTLEGLNQVQVNEKAGLTFASALRSILRQDPDIIMIGEIRDRETAEIAIRSSITGHLVLSTLHTNDSAGAITRLIDMGIEPYLVSSSVVGVIAQRLARKICDNCKIEYDASKREKIILGIDADESLKLYRSKGCAVCNKTGYRGRVPIYEIMMMTPKIKELTNEKAPADVILNEAVSNGMSTLKESAKKLVLSGVTTVDEMLRLTYDDAY
EC 2.8.3.8
丙酮丁醇梭菌CtfAB
CtfA(SEQ ID NO:130)
MNSKIIRFENLRSFFKDGMTIMIGGFLNCGTPTKLIDFLVNLNIKNLTIISNDTCYPNTGIGKLISNNQVKKLIASYIGSNPDTGKKLFNNELEVELSPQGTLVERIRAGGSGLGGVLTKTGLGTLIEKGKKKISINGTEYLLELPLTADVALIKGSIVDEAGNTFYKGTTKNFNPYMAMAAKTVIVEAENLVSCEKLEKEKAMTPGVLINYIVKEPA
CtfB(SEQ ID NO:131)
MINDKNLAKEIIAKRVARELKNGQLVNLGVGLPTMVADYIPKNFKITFQSENGIVGMGASPKINEADKDVVNAGGDYTTVLPDGTFFDSSVSFSLIRGGHVDVTVLGALQVDEKGNIANWIVPGKMLSGMGGAMDLVNGAKKVIIAMRHTNKGQPKILKKCTLPLTAKSQANLIVTELGVIEVINDGLLLTEINKNTTIDEIRSLTAADLLISNELRPMAV
EC 4.1.1.4
丙酮丁醇梭菌-Adc(SEQ ID NO:132)
MLKDEVIKQISTPLTSPAFPRGPYKFHNREYFNIVYRTDMDALRKVVPEPLEIDEPLVRFEIMAMHDTSGLGCYTESGQAIPVSFNGVKGDYLHMMYLDNEPAIAVGRELSAYPKKLGYPKLFVDSDTLVGTLDYGKLRVATATMGYKHKALDANEAKDQICRPNYMLKIIPNYDGSPRICELINAKITDVTVHEAWTGPTRLQLFDHAMAPLNDLPVKEIVSSSHILADIILPRAEVIYDYLK
EC 2.3.1.54
大肠杆菌-pflA(SEQ ID NO:133)
MSVIGRIHSFESCGTVDGPGIRFITFFQGCLMRCLYCHNRDTWDTHGGKEVTVEDLMKEVVTYRHFMNASGGGVTASGGEAILQAEFVRDWFRACKKEGIHTCLDTNGFVRRYDPVIDELLEVTDLVMLDLKQMNDEIHQNLVGVSNHRTLEFAKYLANKNVKVWIRYVVVPGWSDDDDSAHRLGEFTRDMGNVEKIELLPYHELGKHKWVAMGEEYKLDGVKPPKKETMERVKGILEQYGHKVMF
EC 2.3.1.54
大肠杆菌-pflB(SEQ ID NO:134)
MSELNEKLATAWEGFTKGDWQNEVNVRDFIQKNYTPYEGDESFLAGATEATTTLWDKVMEGVKLENRTHAPVDFDTAVASTITSHDAGYINKQLEKIVGLQTEAPLKRALIPFGGIKMIEGSCKAYNRELDPMIKKIFTEYRKTHNQGVFDVYTPDILRCRKSGVLTGLPDAYGRGRIIGDYRRVALYGIDYLMKDKLAQFTSLQADLENGVNLEQTIRLREEIAEQHRALGQMKEMAAKYGYDISGPATNAQEAIQWTYFGYLAAVKSQNGAAMSFGRTSTFLDVYIERDLKAGKITEQEAQEMVDHLVMKLRMVRFLRTPEYDELFSGDPIWATESIGGMGLDGRTLVTKNSFRFLNTLYTMGPSPEPNMTILWSEKLPLNFKKFAAKVSIDTSSLQYENDDLMRPDFNNDDYAIACCVSPMIVGKQMQFFGARANLAKTMLYAINGGVDEKLKMQVGPKSEPIKGDVLNYDEVMERMDHFMDWLAKQYITALNIIHYMHDKYSYEASLMALHDRDVIRTMACGIAGLSVAADSLSAIKYAKVKPIRDEDGLAIDFEIEGEYPQFGNNDPRVDDLAVDLVERFMKKIQKLHTYRDAIPTQSVLTITSNVVYGKKTGNTPDGRRAGAPFGPGANPMHGRDQKGAVASLTSVAKLPFAYAKDGISYTFSIVPNALGKDDEVRKTNLAGLMDGYFHHEASIEGGQHLNVNVMNREMLLDAMENPEKYPQLTIRVSGYAVRFNSLTKEQQQDVITRTFTQSM
EC 2.3.1.9
酿酒酵母ERG10(SEQ ID NO:135)
MSQNVYIVSTARTPIGSFQGSLSSKTAVELGAVALKGALAKVPELDASKDFDEIIFGNVLSANLGQAPARQVALAAGLSNHIVASTVNKVCASAMKAIILGAQSIKCGNADVVVAGGCESMTNAPYYMPAARAGAKFGQTVLVDGVERDGLNDAYDGLAMGVHAEKCARDWDITREQQDNFAIESYQKSQKSQKEGKFDNEIVPVTIKGFRGKPDTQVTKDEEPARLHVEKLRSARTVFQKENGTVTAANASPINDGAAAVILVSEKVLKEKNLKPLAIIKGWGEAAHQPADFTWAPSLAVPKALKHAGIEDINSVDYFEFNEAFSVVGLVNTKILKLDPSKVNVYGGAVALGHPLGCSGARVVVTLLSILQQEGGKIGVAAICNGGGGASSIVIEKI
EC 1.1.1.1
酿酒酵母ADH1(SEQ ID NO:136)
MSIPETQKGVIFYESHGKLEYKDIPVPKPKANELLINVKYSGVCHTDLHAWHGDWPLPVKLPLVGGHE GAGVVVGMGENVKGWKIGDYAGIKWLNGSCMACEYCELGNESNCPHADLSGYTHDGSFQQYATADAVQAAHIPQGTDLAQVAPILCAGITVYKALKSANLMAGHWVAISGAAGGLGSLAVQYAKAMGYRVLGIDGGEGKEELFRSIGGEVFIDFTKEKDIVGAVLKATDGGAHGVINVSVSEAAIEASTRYVRANGTTVLVGMPAGAKCCSDVFNQVVKSISIVGSYVGNRADTREALDFFARGLVKSPIKVVGLSTLPEIYEKMEKGQIVGRYVVDTSK
EC 1.1.1.1
酿酒酵母ADH2(SEQ ID NO:137)
MSIPETQKAIIFYESNGKLEHKDIPVPKPKPNELLINVKYSGVCHTDLHAWHGDWPLPTKLPLVGGHEGAGVVVGMGENVKGWKIGDYAGIKWLNGSCMACEYCELGNESNCPHADLSGYTHDGSFQEYATADAVQAAHIPQGTDLAEVAPILCAGITVYKALKSANLRAGHWAAISGAAGGLGSLAVQYAKAMGYRVLGIDGGPGKEELFTSLGGEVFIDFTKEKDIVSAVVKATNGGAHGIINVSVSEAAIEASTRYCRANGTVVLVGLPAGAKCSSDVFNHVVKSISIVGSYVGNRADTREALDFFARGLVKSPIKVVGLSSLPEIYEKMEKGQIAGRYVVDTSK
EC 1.1.1.1
酿酒酵母ADH3(SEQ ID NO:138)
MLRTSTLFTRRVQPSLFSRNILRLQSTAAIPKTQKGVIFYENKGKLHYKDIPVPEPKPNEILINVKYSGVCHTDLHAWHGDWPLPVKLPLVGGHEGAGVVVKLGSNVKGWKVGDLAGIKWLNGSCMTCEFCESGHESNCPDADLSGYTHDGSFQQFATADAIQAAKIQQGTDLAEVAPILCAGVTVYKALKEADLKAGDWVAISGAAGGLGSLAVQYATAMGYRVLGIDAGEEKEKLFKKLGGEVFIDFTKTKNMVSDIQEATKGGPHGVINVSVSEAAISLSTEYVRPCGTVVLVGLPANAYVKSEVFSHVVKSINIKGSYVGNRADTREALDFFSRGLIKSPIKIVGLSELPKVYDLMEKGKILGRYVVDTSK
EC 1.1.1.1
酿酒酵母ADH4(SEQ ID NO:139)
MSSVTGFYIPPISFFGEGALEETADYIKNKDYKKALIVTDPGIAAIGLSGRVQKMLEERDLNVAIYDKTQPNPNIANVTAGLKVLKEQNSEIVVSIGGGSAHDNAKAIALLATNGGEIGDYEGVNQSKKAALPLFAINTTAGTASEMTRFTIISNEEKKIKMAIIDNNVTPAVAVNDPSTMFGLPPALTAATGLDALTHCIEAYVSTASNPITDACALKGIDLINESLVAAYKDGKDKKARTDMCYAEYLAGMAFNNASLGYVHALAHQLGGFYHLPHGVCNAVLLPHVQEANMQCPKAKKRLGEIALHFGASQEDPEETIKALHVLNRTMNIPRNLKELGVKTEDFEILAEHAMHDACHLTNPVQFTKEQVVAIIKKAYEY
EC 1.1.1.1
酿酒酵母ADH5(SEQ ID NO:140)
MPSQVIPEKQKAIVFYETDGKLEYKDVTVPEPKPNEILVHVKYSGVCHSDLHAWHGDWPFQLKFPLIGGHEGAGVVVKLGSNVKGWKVGDFAGIKWLNGTCMSCEYCEVGNESQCPYLDGTGFTHDGTFQEYATADAVQAAHIPPNVNLAEVAPILCAGITVYKALKRANVIPGQWVTISGACGGLGSLAIQYALAMGYRVIGIDGGNAKRKLFEQLGGEIFIDFTEEKDIVGAIIKATNGGSHGVINVSVSEAAIEASTRYCRPNGTVVLVGMPAHAYCNSDVFNQVVKSISIVGSCVGNRADTREALDFFARGLIKSPIHLAGLSDVPEIFAKMEKGEIVGRYVVETSK
EC 1.1.1.1
酿酒酵母ADH6(SEQ ID NO:141)
MSYPEKFEGIAIQSHEDWKNPKKTKYDPKPFYDHDIDIKIEACGVCGSDIHCAAGHWGNMKMPLVVGHEIVGKVVKLGPKSNSGLKVGQRVGVGAQVFSCLECDRCKNDNEPYCTKFVTTYSQPYEDGYVSQGGYANYVRVHEHFVVPIPENIPSHLAAPLLCGGLTVYSPLVRNGCGPGKKVGIVGLGGIGSMGTLISKAMGAETYVISRSSRKREDAMKMGADHYIATLEEGDWGEKYFDTFDLIVVCASSLTDIDFNIMPKAMKVGGRIVSISIPEQHEMLSLKPYGLKAVSISYSALGSIKELNQLLKLVSEKDIKIWVETLPVGEAGVHEAFERMEKGDVRYRFTLVGYDKEFSD
EC 1.1.1.1
酿酒酵母ADH7(SEQ ID NO:142)
MLYPEKFQGIGISNAKDWKHPKLVSFDPKPFGDHDVDVEIEACGICGSDFHIAVGNWGPVPENQILGHEIIGRVVKVGSKCHTGVKIGDRVGVGAQALACFECERCKSDNEQYCTNDHVLTMWTPYKDGYISQGGFASHVRLHEHFAIQIPENIPSPLAAPLLCGGITVFSPLLRNGCGPGKRVGIVGIGGIGHMGILLAKAMGAEVYAFSRGHSKREDSMKLGADHYIAMLEDKGWTEQYSNALDLLVVCSSSLSKVNFDSIVKIMKIGGSIVSIAAPEVNEKLVLKPLGLMGVSISSSAIGSRKEIEQLLKLVSEKNVKIWVEKLPISEEGVSHAFTRMESGDVKYRFTLVDYDKKFHK
EC 1.1.1.1
酿酒酵母BDH2(SEQ ID NO:143)
MRALAYFGKGNIRFTNHLKEPHIVAPDELVIDIEWCGICGTDLHEYTDGPIFFPEDGHTHEISHNPLPQAMGHEMAGTVLEVGPGVKNLKVGDKVVVEPTGTCRDRYRWPLSPNVDKEWCAACKKGYYNICSYLGLCGAGVQSGGFAERVVMNESHCYKVPDFVPLDVAALIQPLAVCWHAIRVCEFKAGSTALIIGAGPIGLGTILALNAAGCKDIVVSEPAKVRRELAEKMGARVYDPTAHAAKESIDYLRSIADGGDGFDYTFDCSGLEVTLNAAIQCLTFRGTAVNLAMWGHHKIQFSPMDITLHERKYTGSMCYTHHDFEAVIEALEEGRIDIDRARHMITGRVNIEDGLDGAIMKLINEKESTIKIILTPNNHGELNREADNEKKEISELSSRKDQERLRESINEAKLRHT
EC 1.1.1.1
酿酒酵母SFA1(SEQ ID NO:144)
MSAATVGKPIKCIAAVAYDAKKPLSVEEITVDAPKAHEVRIKIEYTAVCHTDAYTLSGSDPEGLFPCVLGHEGAGIVESVGDDVITVKPGDHVIALYTAECGKCKFCTSGKTNLCGAVRATQGKGVMPDGTTRFHNAKGEDIYHFMGCSTFSEYTVVADVSVVAIDPKAPLDAACLLGCGVTTGFGAALKTANVQKGDTVAVFGCGTVGLSVIQGAKLRGASKIIAIDINNKKKQYCSQFGATDFVNPKEDLAKDQTIVEKLIEMTDGGLDFTFDCTGNTKIMRDALEACHKGWGQSIIIGVAAAGEEISTRPFQLVTGRVWKGSAFGGIKGRSEMGGLIKDYQKGALKVEEFITHRRPFKEINQAFEDLHNGDCLRTVLKSDEIK
EC 1.1.1.1
酿酒酵母YPL088W(SEQ ID NO:145)
MVLVKQVRLGNSGLKISPIVIGCMSYGSKKWADWVIEDKTQIFKIMKHCYDKGLRTFDTADFYSNGLSERIIKEFLEYYSIKRETVVIMTKIYFPVDETLDLHHNFTLNEFEELDLSNQRGLSRKHIIAGVENSVKRLGTYIDLLQIHRLDHETPMKEIMKALNDVVEAGHVRYIGASSMLATEFAELQFTADKYGWFQFISSQSYYNLLYREDERELIPFAKRHNIGLLPWSPNARGMLTRPLNQSTDRIKSDPTFKSLHLDNLEEEQKEIINRVEKVSKDKKVSMAMLSIAWVLHKGCHPIVGLNTTARVDEAIAALQVTLTEEEIKYLEEPYKPQRQRC*
EC 4.1.2.13
酿酒酵母FBA1(SEQ ID NO:146)
MGVEQILKRKTGVIVGEDVHNLFTYAKEHKFAIPAINVTSSSTAVAALEAARDSKSPIILQTSNGGAAYFAGKGISNEGQNASIKGAIAAAHYIRSIAPAYGIPVVLHSDHCAKKLLPWFDGMLEADEAYFKEHGEPLFSSHMLDLSEETDEENISTCVKYFKRMAAMDQWLEMEIGITGGEEDGVNNENADKEDLYTKPEQVYNVYKALHPISPNFSIAAAFGNCHGLYAGDIALRPEILAEHQKYTREQVGCKEEKPLFLVFHGGSGSTVQEFHTGIDNGVVKVNLDTDCQYAYLTGIRDYVLNKKDYIMSPVGNPEGPEKPNKKFFDPRVWVREGEKTMGAKITKSLETFRTTNTL
EC 5.3.1.1
酿酒酵母TPI1(SEQ ID NO:147)
MARTFFVGGNFKLNGSKQSIKEIVERLNTASIPENVEVVICPPATYLDYSVSLVKKPQVTVGAQNAYLKASGAFTGENSVDQIKDVGAKWVILGHSERRSYFHEDDKFIADKTKFALGQGVGVILCIGETLEEKKAGKTLDVVERQLNAVLEEVKDWTNVVVAYEPVWAIGTGLAATPEDAQDIHASIRKFLASKLGDKAASELRILYGGSANGSNAVTFKDKADVDGFLVGGASLKPEFVDIINSRN
EC 1.2.1.2
酿酒酵母FDH1(SEQ ID NO:148)
MSKGKVLLVLYEGGKHAEEQEKLLGCIENELGIRNFIEEQGYELVTTIDKDPEPTSTVDRELKDAEIVITTPFFPAYISRNRIAEAPNLKLCVTAGVGSDHVDLEAANERKITVTEVTGSNVVSVAEHVMATILVLIRNYNGGHQQAINGEWDIAGVAKNEYDLEDKIISTVGAGRIGYRVLERLVAFNPKKLLYYDYQELPAEAINRLNEASKLFNGRGDIVQRVEKLEDMVAQSDVVTINCPLHKDSRGLFNKKLISHMKDGAYLVNTARGAICVAEDVAEAVKSGKLAGYGGDVWDKQPAPKDHPWRTMDNKDHVGNAMTVHISGTSLDAQKRYAQGVKNILNSYFSKKFDYRPQDIIVQNGSYATRAYGQKK
EC 1.1.1.21
酿酒酵母GRE3(SEQ ID NO:149)
MSSLVTLNNGLKMPLVGLGCWKIDKKVCANQIYEAIKLGYRLFDGACDYGNEKEVGEGIRKAISEGLVSRKDIFVVSKLWNNFHHPDHVKLALKKTLSDMGLDYLDLYYIHFPIAFKYVPFEEKYPPGFYTGADDEKKGHITEAHVPIIDTYRALEECVDEGLIKSIGVSNFQGSLIQDLLRGCRIKPVALQIEHHPYLTQEHLVEFCKLHDIQVVAYSSFGPQSFIEMDLQLAKTTPTLFENDVIKKVSQNHPGSTTSQVLLRWATQRGIAVIPKSSKKERLLGNLEIEKKFTLTEQELKDISALNANIRFNDPWTWLDGKFPTFA
EC 1.1.1.79
酿酒酵母GOR1(SEQ ID NO:150)
MSKKPIVLKLGKDAFGDQAWGELEKIADVITIPESTTREQFLREVKDPQNKLSQVQVITRTARSVKNTGRFDEELALALPSSVVAVCHTGAGYDQIDVEPFKKRHIQVANVPDLVSNATADTHVFLLLGALRNFGIGNRRLIEGNWPEAGPACGSPFGYDPEGKTVGILGLGRIGRCILERLKPFGFENFIYHNRHQLPSEEEHGCEYVGFEEFLKRSDIVSVNVPLNHNTHHLINAETIEKMKDGVVIVNTARGAVIDEQAMTDALRSGKIRSAGLDVFEYEPKISKELLSMSQVLGLPHMGTHSVETRKKMEELVVENAKNVILTGKVLTIVPELQNEDWPNESKPLV
EC 1.1.1.79
酿酒酵母YPL113C(SEQ ID NO:151)
MITSIDIADVTYSAKPRILVPYKTQWEVASHLPEYRKLAERVEFYKYEMSTKDDFVKFLETHRINGFWLTEEFFTVLGNPSSYIEFFPASLKVILVPWVGCDFIDGKLLRSKGITLCNIGPHAADHVTELAIFLAISCFRMTSFWEYCFKYVENGNVEQCKKYISSDSYEIVTDSYHGQEMKFPSRTDKCKPNKDRKVVHLAEKYTVGGKKMESPMNKKVLILGFGSIGQNIGSNLHKVFNMSIEYYKRTGPVQKSLLDYNAKVHSDLDDPNTWKNADLIILALPSTASTNNIINRKSLAWCKDGVRIVNVGRGTCIDEDVLLDALESGKVASCGLDVFKNEETRVKQELLRRWDVTALPHIGSTVADMVIKQTLITLENVQDIFVEGGDGKYVLN
EC 1.2.1.49
酿酒酵母GCY1(SEQ ID NO:152)
MPATLHDSTKILSLNTGAQIPQIGLGTWQSKENDAYKAVLTALKDGYRHIDTAAIYRNEDQVGQAIKDSGVPREEIFVTTKLWCTQHHEPEVALDQSLKRLGLDYVDLYLMHWPARLDPAYIKNEDILSVPTKKDGSRAVDITNWNFIKTWELMQELPKTGKTKAVGVSNFSINNLKDLLASQGNKLTPAANQVEIHPLLPQDELINFCKSKGIVVEAYSPLGSTDAPLLKEPVILEIAKKNNVQPGHVVISWHVQRGYVVLPKSVNPDRIKTNRKIFTLSTEDFEAINNISKEKGEKRVVHPNWSPFEVFK
EC 1.2.1.49
酿酒酵母ALD2(SEQ ID NO:153)
MPTLYTDIEIPQLKISLKQPLGLFINNEFCPSSDGKTIETVNPATGEPITSFQAANEKDVDKAVKAARAAFDNVWSKTSSEQRGIYLSNLLKLIEEEQDTLAALETLDAGKPYSNAKGDLAQILQLTRYFAGSADKFDKGATIPLTFNKFAYTLKVPFGVVAQIVPWNYPLAMACWKLQGALAAGNTVIIKPAENTSLSLLYFATLIKKAGFPPGVVNIVPGYGSLVGQALASHMDIDKISFTGSTKVGGFVLEASGQSNLKDVTLECGGKSPALVFEDADLDKAIDWIAAGIFYNSGQNCTANSRVYVQSSIYDKFVEKFKETAKKEWDVAGKFDPFDEKCIVGPVISSTQYDRIKSYIERGKREEKLDMFQTSEFPIGGAKGYFIPPTIFTDVPQTSKLLQDEIFGPVVVVSKFTNYDDALKLANDTCYGLASAVFTKDVKKAHMFARDIKAGTVWINSSNDEDVTVPFGGFKMSGIGRELGQSGVDTYLQTKAVHINLSLDN
EC 1.2.1.49
酿酒酵母ALD3(SEQ ID NO:154)
MPTLYTDIEIPQLKISLKQPLGLFINNEFCPSSDGKTIETVNPATGEPITSFQAANEKDVDKAVKAARAAFDNVWSKTSSEQRGIYLSNLLKLIEEEQDTLAALETLDAGKPFHSNAKQDLAQIIELTRYYAGAVDKFNMGETIPLTFNKFAYTLKVPFGVVAQIVPWNYPLAMACRKMQGALAAGNTVIIKPAENTSLSLLYFATLIKKAGFPPGVVNVIPGYGSVVGKALGTHMDIDKISFTGSTKVGGSVLEASGQSNLKDITLECGGKSPALVFEDADLDKAIEWVANGIFFNSGQICTANSRVYVQSSIYDKFVEKFKETAKKEWDVAGKFDPFDEKCIVGPVISSTQYDRIKSYIERGKKEEKLDMFQTSEFPIGGAKGYFIPPTIFTDVPETSKLLRDEIFGPVVVVSKFTNYDDALKLANDTCYGLASAVFTKDVKKAHMFARDIKAGTVWINQTNQEEAKVPFGGFKMSGIGRESGDTGVDNYLQIKSVHVDLSLDK
EC 1.2.1.49
酿酒酵母ALD4(SEQ ID NO:155)
MFSRSTLCLKTSASSIGRLQLRYFSHLPMTVPIKLPNGLEYEQPTGLFINNKFVPSKQNKTFEVINPSTEEEICHIYEGREDDVEEAVQAADRAFSNGSWNGIDPIDRGKALYRLAELIEQDKDVIASIETLDNGKAISSSRGDVDLVINYLKSSAGFADKIDGRMIDTGRTHFSYTKRQPLGVCGQIIPWNFPLLMWAWKIAPALVTGNTVVLKTAESTPLSALYVSKYIPQAGIPPGVINIVSGFGKIVGEAITNHPKIKKVAFTGSTATGRHIYQSAAAGLKKVTLELGGKSPNIVFADAELKKAVQNIILGIYYNSGEVCCAGSRVYVEESIYDKFIEEFKAASESIKVGDPFDESTFQGAQTSQMQLNKILKYVDIGKNEGATLITGGERLGSKGYFIKPTVFGDVKEDMRIVKEEIFGPVVTVTKFKSADEVINMANDSEYGLAAGIHTSNINTALKVADRVNAGTVWINTYNDFHHAVPFGGFNASGLGREMSVDALQNYLQVKAVRAKLDE
EC 1.2.1.49
酿酒酵母ALD5(SEQ ID NO:156)
MLSRTRAAAPNSRIFTRSLLRLYSQAPLRVPITLPNGFTYEQPTGLFINGEFVASKQKKTFDVINPSNEEKITTVYKAMEDDVDEAVAAAKKAFETKWSIVEPEVRAKALFNLADLVEKHQETLAAIESMDNGKSLFCARGDVALVSKYLRSCGGWADKIYGNVIDTGKNHFTYSIKEPLGVCGQIIPWNFPLLMWSWKIGPALATGNTVVLKPAETTPLSALFASQLCQEAGIPAGVVNILPGSGRVVGERLSAHPDVKKIAFTGSTATGRHIMKVAADTVKKVTLELGGKSPNIVFADADLDKAVKNIAFGIFYNSGEVCCAGSRIYIQDTVYEEVLQKLKDYTESLKVGDPFDEEVFQGAQTSDKQLHKILDYVDVAKSEGARLVTGGARHGSKGYFVKPTVFADVKGDMRIVKEEVFGPIVTVSKFSTVDEVIAMANDSQYGLAAGIHTNDINKAVDVSKRVKAGTVWINTYNNFHQNVPFGGFGQSGIGREMGEAALSNYTQTKSVRIAIDKPIR
EC 1.2.1.49
酿酒酵母ALD6(SEQ ID NO:157)
MTKLHFDTAEPVKITLPNGLTYEQPTGLFINNKFMKAQDGKTYPVEDPSTENTVCEVSSATTEDVEYAIECADRAFHDTEWATQDPRERGRLLSKLADELESQIDLVSSIEALDNGKTLALARGDVTIAINCLRDAAAYADKVNGRTINTGDGYMNFTTLEPIGVCGQIIPWNFPIMMLAWKIAPALAMGNVCILKPAAVTPLNALYFASLCKKVGIPAGVVNIVPGPGRTVGAALTNDPRIRKLAFTGSTEVGKSVAVDSSESNLKKITLELGGKSAHLVFDDANIKKTLPNLVNGIFKNAGQICSSGSRIYVQEGIYDELLAAFKAYLETEIKVGNPFDKANFQGAITNRQQFDTIMNYIDIGKKEGAKILTGGEKVGDKGYFIRPTVFYDVNEDMRIVKEEIFGPVVTVAKFKTLEEGVEMANSSEFGLGSGIETESLSTGLKVAKMLKAGTVWINTYNDFDSRVPFGGVKQSGYGREMGEEVYHAYTEVKAVRIKL
EC 1.2.1.49
酿酒酵母HFD1(SEQ ID NO:158)
MSNDGSKILNYTPVSKIDEIVEISRNFFFEKQLKLSHENNPRKKDLEFRQLQLKKLYYAVKDHEEELIDAMYKDFHRNKIESVLNETTKLMNDILHLIEILPKLIKPRRVSDSSPPFMFGKTIVEKISRGSVLIIAPFNFPLLLAFAPLAAALAAGNTIVLKPSELTPHTAVVMENLLTTAGFPDGLIQVVQGAIDETTRLLDCGKFDLIFYTGSPRVGSIVAEKAAKSLTPCVLELGGKSPTFITENFKASNIKIALKRIFFGAFGNSGQICVSPDYLLVHKSIYPKVIKECESVLNEFYPSFDEQTDFTRMIHEPAYKKAVASINSTNGSKIVPSKISINSDTEDLCLVPPTIVYNIGWDDPLMKQENFAPVLPIIEYEDLDETINKIIEEHDTPLVQYIFSDSQTEINRILTRLRSGDCVVGDTVIHVGITDAPFGGIGTSGYGNYGGYYGFNTFSHERTIFKQPYWNDFTLFMRYPPNSAQKEKLVRFAMERKPWFDRNGNNKWGLRQYFSLSAAVILISTIYAHCSS
EC 2.7.1.2
酿酒酵母GLK1(SEQ ID NO:159)
MSFDDLHKATERAVIQAVDQICDDFEVTPEKLDELTAYFIEQMEKGLAPPKEGHTLASDKGLPMIPAFVTGSPNGTERGVLLAADLGGTNFRICSVNLHGDHTFSMEQMKSKIPDDLLDDENVTSDDLFGFLARRTLAFMKKYHPDELAKGKDAKPMKLGFTFSYPVDQTSLNSGTLIRWTKGFRIADTVGKDVVQLYQEQLSAQGMPMIKVVALTNDTVGTYLSHCYTSDNTDSMTSGEISEPVIGCIFGTGTNGCYMEEINKITKLPQELRDKLIKEGKTHMIINVEWGSFDNELKHLPTTKYDVVIDQKLSTNPGFHLFEKRVSGMFLGEVLRNILVDLHSQGLLLQQYRSKEQLPRHLTTPFQLSSEVLSHIEIDDSTGLRETELSLLQSLRLPTTPTERVQIQKLVRAISRRSAYLAAVPLAAILIKTNALNKRYHGEVEIGCDGSVVEYYPGFRSMLRHALALSPLGAEGERKVHLKIAKDGSGVGAALCALVA
EC 5.3.1.9
酿酒酵母PGI1(SEQ ID NO:160)
MSNNSFTNFKLATELPAWSKLQKIYESQGKTLSVKQEFQKDAKRFEKLNKTFTNYDGSKILFDYSKNLVNDEIIAALIELAKEANVTGLRDAMFKGEHINSTEDRAVYHVALRNRANKPMYVDGVNVAPEVDSVLKHMKEFSEQVRSGEWKGYTGKKITDVVNIGIGGSDLGPVMVTEALKHYAGVLDVHFVSNIDGTHIAETLKVVDPETTLFLIASKTFTTAETITNANTAKNWFLSKTGNDPSHIAKHFAALSTNETEVAKFGIDTKNMFGFESWVGGRYSVWSAIGLSVALYIGYDNFEAFLKGAEAVDNHFTQTPLEDNIPLLGGLLSVWYNNFFGAQTHLVAPFDQYLHRFPAYLQQLSMESNGKSVTRGNVFTDYSTGSILFGEPATNAQHSFFQLVHQGTKLIPSDFILAAQSHNPIENKLHQKMLASNFFAQAEALMVGKDEEQVKAEGATGGLVPHKVFSGNRPTTSILAQKITPATLGALIAYYEHVTFTEGAIWNINSFDQWGVELGKVLAKVIGKELDNSSTISTHDASTNGLINQFKEWM
EC 2.7.1.11
酿酒酵母PFK1(SEQ ID NO:161)
MQSQDSCYGVAFRSIITNDEALFKKTIHFYHTLGFATVKDFNKFKHGENSLLSSGTSQDSLREVWLESFKLSEVDASGFRIPQQEATNKAQSQGALLKIRLVMSAPIDETFDTNETATITYFSTDLNKIVEKFPKQAEKLSDTLVFLKDPMGNNITFSGLANATDSAPTSKDAFLEATSEDEIISRASSDASDLLRQTLGSSQKKKKIAVMTSGGDSPGMNAAVRAVVRTGIHFGCDVFAVYEGYEGLLRGGKYLKKMAWEDVRGWLSEGGTLIGTARSMEFRKREGRRQAAGNLISQGIDALVVCGGDGSLTGADLFRHEWPSLVDELVAEGRFTKEEVAPYKNLSIVGLVGSIDNDMSGTDSTIGAYSALERICEMVDYIDATAKSHSRAFVVEVMGRHCGWLALMAGIATGADYIFIPERAVPHGKWQDELKEVCQRHRSKGRRNNTIIVAEGALDDQLNPVTANDVKDALIELGLDTKVTILGHVQRGGTAVAHDRWLATLQGVDAVKAVLEFTPETPSPLIGILENKIIRMPLVESVKLTKSVATAIENKDFDKAISLRDTEFIELYENFLSTTVKDDGSELLPVSDRLNIGIVHVGAPSAALNAATRAATLYCLSHGHKPYAIMNGFSGLIQTGEVKELSWIDVENWHNLGGSEIGTNRSVASEDLGTIAYYFQKNKLDGLIILGGFEGFRSLKQLRDGRTQHPIFNIPMCLIPATVSNNVPGTEYSLGVDTCLNALVNYTDDIKQSASATRRRVFVCEVQGGHSGYIASFTGLITGAVSVYTPEKKIDLASIREDITLLKENFRHDKGENRNGKLLVRNEQASSVYSTQLLADIISEASKGKFGVRTAIPGHVQQGGVPSSKDRVTASRFAVKCIKFIEQWNKKNEASPNTDAKVLRFKFDTHGEKVPTVEHEDDSAAVICVNGSHVSFKPIANLWENETNVELRKGFEVHWAEYNKIGDILSGRLKLRAEVAALAAENK
EC 2.7.1.11
酿酒酵母PFK2(SEQ ID NO:162)
MTVTTPFVNGTSYCTVTAYSVQSYKAAIDFYTKFLSLENRSSPDENSTLLSNDSISLKILLRPDEKINKNVEAHLKELNSITKTQDWRSHATQSLVFNTSDILAVKDTLNAMNAPLQGYPTELFPMQLYTLDPLGNVVGVTSTKNAVSTKPTPPPAPEASAESGLSSKVHSYTDLAYRMKTTDTYPSLPKPLNRPQKAIAVMTSGGDAPGMNSNVRAIVRSAIFKGCRAFVVMEGYEGLVRGGPEYIKEFHWEDVRGWSAEGGTNIGTARCMEFKKREGRLLGAQHLIEAGVDALIVCGGDGSLTGADLFRSEWPSLIEELLKTNRISNEQYERMKHLNICGTVGSIDNDMSTTDATIGAYSALDRICKAIDYVEATANSHSRAFVVEVMGRNCGWLALLAGIATSADYIFIPEKPATSSEWQDQMCDIVSKHRSRGKRTTIVVVAEGAIAADLTPISPSDVHKVLVDRLGLDTRITTLGHVQRGGTAVAYDRILATLQGLEAVNAVLESTPDTPSPLIAVNENKIVRKPLMESVKLTKAVAEAIQAKDFKRAMSLRDTEFIEHLNNFMAINSADHNEPKLPKDKRLKIAIVNVGAPAGGINSAVYSMATYCMSQGHRPYAIYNGWSGLARHESVRSLNWKDMLGWQSRGGSEIGTNRVTPEEADLGMIAYYFQKYEFDGLIIVGGFEAFESLHQLERARESYPAFRIPMVLIPATLSNNVPGTEYSLGSDTALNALMEYCDVVKQSASSTRGRAFVVDCQGGNSGYLATYASLAVGAQVSYVPEEGISLEQLSEDIEYLAQSFEKAEGRGRFGKLILKSTNASKALSATKLAEVITAEADGRFDAKPAYPGHVQQGGLPSPIDRTRATRMAIKAVGFIKDNQAAIAEARAAEENFNADDKTISDTAAVVGVKGSHVVYNSIRQLYDYETEVSMRMPKVIHWQATRLIADHLVGRKRVD
EC 4.1.1.1
酿酒酵母PDC1(SEQ ID NO:163)
MSEITLGKYLFERLKQVNVNTVFGLPGDFNLSLLDKIYEVEGMRWAGNANELNAAYAADGYARIKGMSCIITTFGVGELSALNGIAGSYAEHVGVLHVVGVPSISAQAKQLLLHHTLGNGDFTVFHRMSANISETTAMITDIATAPAEIDRCIRTTYVTQRPVYLGLPANLVDLNVPAKLLQTPIDMSLKPNDAESEKEVIDTILALVKDAKNPVILADACCSRHDVKAETKKLIDLTQFPAFVTPMGKGSIDEQHPRYGGVYVGTLSKPEVKEAVESADLILSVGALLSDFNTGSFSYSYKTKNIVEFHSDHMKIRNATFPGVQMKFVLQKLLTTIADAAKGYKPVAVPARTPANAAVPASTPLKQEWMWNQLGNFLQEGDVVIAETGTSAFGINQTTFPNNTYGISQVLWGSIGFTTGATLGAAFAAEEIDPKKRVILFIGDGSLQLTVQEISTMIRWGLKPYLFVLNNDGYTIEKLIHGPKAQYNEIQGWDHLSLLPTFGAKDYETHRVATTGEWDKLTQDKSFNDNSKIRMIEIMLPVFDAPQNLVEQAKLTAATNAKQ
EC 4.1.1.1
酿酒酵母PDC5(SEQ ID NO:164)
MSEITLGKYLFERLSQVNCNTVFGLPGDFNLSLLDKLYEVKGMRWAGNANELNAAYAADGYARIKGMSCIITTFGVGELSALNGIAGSYAEHVGVLHVVGVPSISSQAKQLLLHHTLGNGDFTVFHRMSANISETTAMITDIANAPAEIDRCIRTTYTTQRPVYLGLPANLVDLNVPAKLLETPIDLSLKPNDAEAEAEVVRTVVELIKDAKNPVILADACASRHDVKAETKKLMDLTQFPVYVTPMGKGAIDEQHPRYGGVYVGTLSRPEVKKAVESADLILSIGALLSDFNTGSFSYSYKTKNIVEFHSDHIKIRNATFPGVQMKFALQKLLDAIPEVVKDYKPVAVPARVPITKSTPANTPMKQEWMWNHLGNFLREGDIVIAETGTSAFGINQTTFPTDVYAIVQVLWGSIGFTVGALLGATMAAEELDPKKRVILFIGDGSLQLTVQEISTMIRWGLKPYIFVLNNNGYTIEKLIHGPHAEYNEIQGWDHLALLPTFGARNYETHRVATTGEWEKLTQDKDFQDNSKIRMIEVMLPVFDAPQNLVKQAQLTAATNAKQ
EC 4.1.1.1
酿酒酵母PDC6(SEQ ID NO:165)
MSEITLGKYLFERLKQVNVNTIFGLPGDFNLSLLDKIYEVDGLRWAGNANELNAAYAADGYARIKGLSVLVTTFGVGELSALNGIAGSYAEHVGVLHVVGVPSISAQAKQLLLHHTLGNGDFTVFHRMSANISETTSMITDIATAPSEIDRLIRTTFITQRPSYLGLPANLVDLKVPGSLLEKPIDLSLKPNDPEAEKEVIDTVLELIQNSKNPVILSDACASRHNVKKETQKLIDLTQFPAFVTPLGKGSIDEQHPRYGGVYVGTLSKQDVKQAVESADLILSVGALLSDFNTGSFSYSYKTKNVVEFHSDYVKVKNATFLGVQMKFALQNLLKVIPDVVKGYKSVPVPTKTPANKGVPASTPLKQEWLWNELSKFLQEGDVIISETGTSAFGINQTIFPKDAYGISQVLWGSIGFTTGATLGAAFAAEEIDPNKRVILFIGDGSLQLTVQEISTMIRWGLKPYLFVLNNDGYTIEKLIHGPHAEYNEIQTWDHLALLPAFGAKKYENHKIATTGEWDALTTDSEFQKNSVIRLIELKLPVFDAPESLIKQAQLTAATNAKQ
EC 1.1.1.8
酿酒酵母GPD2(SEQ ID NO:166)
MLAVRRLTRYTFLKRTHPVLYTRRAYKILPSRSTFLRRSLLQTQLHSKMTAHTNIKQHKHCHEDHPIRRSDSAVSIVHLKRAPFKVTVIGSGNWGTTIAKVIAENTELHSHIFEPEVRMWVFDEKIGDENLTDIINTRHQNVKYLPNIDLPHNLVADPDLLHSIKGADILVFNIPHQFLPNIVKQLQGHVAPHVRAISCLKGFELGSKGVQLLSSYVTDELGIQCGALSGANLAPEVAKEHWSETTVAYQLPKDYQGDGKDVDHKILKLLFHRPYFHVNVIDDVAGISIAGALKNVVALACGFVEGMGWGNNASAAIQRLGLGEIIKFGRMFFPESKVETYYQESAGVADLITTCSGGRNVKVATYMAKTGKSALEAEKELLNGQSAQGIITCREVHEWLQTCELTQEFPLFEAVYQIVYNNVRMEDLPEMIEELDIDDE
EC 3.1.3.21
酿酒酵母GPP1(SEQ ID NO:167)
MPLTTKPLSLKINAALFDVDGTIIISQPAIAAFWRDFGKDKPYFDAEHVIHISHGWRTYDAIAKFAPDFADEEYVNKLEGEIPEKYGEHSIEVPGAVKLCNALNALPKEKWAVATSGTRDMAKKWFDILKIKRPEYFITANDVKQGKPHPEPYLKGRNGLGFPINEQDPSKSKVVVFEDAPAGIAAGKAAGCKIVGIATTFDLDFLKEKGCDIIVKNHESIRVGEYNAETDEVELIFDDYLYAKDDLLKW
在某些实施方案中,本发明的酶包括与上文所述的工程化的代谢通路的任何酶至少约70%,80%,90%,95%,99%同一或享有至少约60%,70%,80%,90%,95%序列同一性的任何酶。享有所要求的序列同一性或相似性的这些酶可以是来自不同生物体的野生型酶,或者可以是人工的(即重组的)酶。
在某些实施方案中,编码与上文所述的工程化的代谢通路的任何酶具有相同活性的酶的任何基因都可用于代替所述酶。这些酶可以是来自不同生物体的野生型酶,或者可以是人工的、重组的或工程化的酶。
此外,由于遗传密码的内在简并性,编码基本上相同或功能等同的氨基酸序列的其它核酸序列也可被用于表达编码此类酶的多核苷酸。如本领域技术人员将理解的,修饰编码序列以提高其在特定宿主中的表达可以是有利的。在物种中最经常使用的密码子被称为“最佳密码子”,而不常使用的那些被归类为“少有或低使用密码子”。密码子可被取代以反映宿主的优选密码子使用,此过程有时被称为“密码子优化”或“控制物种密码子偏倚”。用于优化在例如酿酒酵母中表达的核苷酸序列的方法是本领域普通技术人员所知晓的。
经修饰的株系
本发明还提供了敲除株系,其中施行了本发明的工程化的代谢通路。此类经遗传修饰的微生物将具有增加的能力以产生乳酸或乙酸作为发酵产物。基因的“敲除”是指部分地、实质上或完全缺失、沉默、灭活或下调。
因此,本发明的某些实施方案提供了嗜热或嗜温微生物内的某些基因或特定多核苷酸序列的“灭活”或“缺失”,所述基因或特定多核苷酸序列的“灭活”或“缺失”可被理解为涵盖了“遗传修饰”或“转化”从而所产生的所述嗜热或嗜温微生物的株系可被理解为是“经遗传修饰的”或“经转化的”。在某些实施方案中,株系可以是细菌、真菌或酵母来源的。
为敲除株系的经遗传学修饰的株系可具有下列优势:消除产生某些有机酸或干扰所述株系产生高产率的备选产物(例如异丙醇或丙二醇)的能力的产物。
例如,如果通过LDH的作用将丙酮酸转化为乳酸盐(乳酸的盐形式)在糖酵解通路的早期是不可进行的,则丙酮酸可通过丙酮酸脱氢酶或丙酮酸-铁氧还蛋白氧化还原酶的作用被更有效地转化为乙酰辅酶A。
用于本发明而被靶向以敲除的基因包括乳酸脱氢酶(ldh)、氢化酶(hyd)、乙醛脱氢酶(acdh)、乙酸激酶(ack)、丙酮酸-铁氧还蛋白氧化还原酶(por)或丙酮酸脱羧酶(pdc)。
如本申请中所使用的,术语“乳酸脱氢酶”或“LDH”意在包括能够将丙酮酸转化为乳酸的酶。所理解的是LDH也可催化羟基丁酸的氧化。
如本申请中所使用的,术语“乙酸激酶”或“ACK”意在包括能够将乙酰磷酸转化为乙酸的酶。
如本申请中所使用的,术语“丙酮酸-铁氧还蛋白氧化还原酶”或“POR”意在包括能够将丙酮酸转化为乙酰辅酶A,二氧化碳和经还原的铁氧还蛋白的酶。
术语“丙酮酸脱羧酶活性”意在包括多肽酶促地将丙酮酸转化为乙醛的能力(例如“丙酮酸脱羧酶”或“PDC”)。通常,所选择的多肽的活性涵盖与所产生的多肽相关的总酶促活性,这包括例如酶的优越的底物亲合力、热稳定性、在不同pH下的稳定性,或这些特性的组合。
备选地,本发明的某些实施方案提供了嗜热或嗜温微生物内某些基因或特定多核苷酸序列的“插入”(例如添加、整合、并入或引入),所述基因或特定多核苷酸序列的插入可被理解为涵盖“遗传修饰”或“转化”,从而所产生的所述嗜热或嗜温微生物的株系可被理解为是“经遗传修饰的”或“经转化的”。在某些实施方案中,株系可以是细菌、真菌或酵母来源的。
在本发明的一个方面,基因或特定的多核苷酸序列被插入以活化其所编码的活性,例如酶的表达。在某些实施方案中,编码乙醇的代谢生产中的酶的基因(例如代谢戊糖和/或己糖的酶)可被加入嗜温或嗜热生物体中。在某些本发明的实施方案中,所述酶可赋予代谢戊糖的能力,并且参与例如D-木糖通路和/或L-阿拉伯糖通路。
在本发明的一方面,基因或特定的多核苷酸序列被部分地、实质上或完全缺失、沉默、灭活或下调,从而灭活其所编码的活性(例如酶的表达)。缺失提供了最大的稳定性,因为没有机会进行反向突变以恢复功能。备选地,可通过插入破坏基因的功能和/或表达的核酸序列(例如P1转导或本领域中已知的其它方法)而使基因被部分地、实质上或完全缺失、沉默、灭活或下调。术语“消除(eliminate)”、“消除(elimination)”和“敲除”与术语“缺失”、“部分缺失”、“本质上缺失”或“完全缺失”可互换地使用。在某些实施方案中,目的嗜热或嗜温微生物的株系可通过定点同源重组被工程化以敲除有机酸的产生。在其它实施方案中,可使用RNAi或反义DNA(asDNA)来部分地、实质上、或完全沉默、灭活或下调特定的目的基因。
载体和宿主细胞
本发明还涉及包括编码本发明的酶的基因的载体,如上文所述,以及用本发明的载体遗传工程化的宿主细胞,和通过重组技术生产本发明的多肽。
用本发明的载体将宿主细胞遗传工程化(转导或转化或转染),所述载体可以是例如,克隆载体或表达载体。所述载体可以是,例如质粒、病毒颗粒、噬菌体等形式。可在被修饰而适于活化启动子、选择转化体或扩增本发明的基因的常规营养培养基中培养经工程化的宿主细胞。培养条件(例如温度、pH等)是之前对于选择用于表达的宿主细胞所使用的那些条件,并且对于本领域普通技术人员而言将是显然的。
表达载体中的DNA序列与适当的表达控制序列(启动子)可操作地缔联以指导mRNA合成。可使用任何合适的启动子来引起基因在本发明的宿主细胞中表达。此外,可使用已知在原核或较低等的真核细胞中控制基因表达的启动子。表达载体还含有用于翻译起始的核糖体结合位点,以及转录终止子。载体还可包括用于扩增表达的适当序列,或者可包括其它的调控区域。
可采用含有适当的可选择性标记物序列(如本申请中所使用的)以及适当的启动子或控制序列的载体以转化适当的嗜热宿主,从而允许宿主表达蛋白质。
术语“启动子”或“替代启动子”意在包括可转录调控其在自然中不转录控制的目的基因的多核苷酸区段。在某些实施方案中,替代启动子的转录控制引起目的基因表达的增加。在某些实施方案中,替代启动子被置于目的基因的5’。替代启动子可被用于替代天然启动子,或者可在天然启动子之外被使用。相对于使用其的宿主细胞,替代启动子可以是内源性的,或者其可以是被引入宿主细胞中的异源多核苷酸序列,例如相对于使用其的宿主细胞而言是外源性的。
术语“基因”或“多核苷酸区段”或“多核苷酸序列”意在包括这样的核酸分子,例如包括编码多肽的开放阅读框的多核苷酸、并且还可包括非编码调控序列以及内含子。此外,所述术语意在包括定位在功能性位置的一个或多个基因。另外,所述术语意在包括用于所选目的的特定基因。所述基因可以是宿主细胞内源的或者可以是被重组地引入宿主细胞中的,例如作为被游离保持的质粒或被稳定整合到基因组中的质粒(或其片段)。除了质粒形式之外,基因可以是例如以线性DNA的形式。在某些实施方案中,基因编码多肽,例如本发明的酶。术语基因也意在涵盖特定基因的所有拷贝,例如细胞中编码特定基因产物的所有DNA序列。
术语“转录控制”意在包括在转录水平上调节基因表达的能力。在某些实施方案中,转录(因而基因表达)是通过在接近目的基因编码区的5’端替换或添加替代启动子而被调节的,从而产生改变的基因表达。在某些实施方案中,一个或多个基因的转录控制被工程化以产生此类基因的最佳表达,例如以所需的比率。此术语也包括可诱导的转录控制,如本领域中所认可的。
术语“表达”意在包括至少在mRNA产生水平的基因表达。
术语“表达产物”意在包括所产生的产物,例如,经表达的基因的多肽。
术语“增加的表达”意在包括至少在增加的mRNA产生水平和优选地在多肽表达的水平上基因表达的改变。术语“增加的生产”意在包括所表达的多肽量的增加、多肽的酶促活性水平的增加,或其组合。
在某些方面,本发明涉及含有上述构建体的宿主细胞。所述宿主细胞可以是厌氧的嗜热细菌细胞,这包括厌氧木聚糖降解性和/或纤维素分解性宿主细胞。由本申请中的教导,选择适当的宿主被认为是在本领域技术人员的技能范围内。
本发明还包括重组构建体,其包含如上文所广泛描述的一种或多种可选择性标记物序列。所述构建体包括载体(例如质粒或病毒载体),其中以正向或反向插入了本发明的序列。在这种实施方案的一个方面,构建体还包含调控序列,这包括例如启动子,其可操作地与所述序列相缔连。大量合适的载体和启动子是本领域技术人员已知的,并且是商业上可得的。下文的载体仅以示例的方式提供。
术语“源自”意在包括从所示的来源分离(全部或部分)多核苷酸区段或者从所示的来源纯化多肽。此术语意在包括,例如从与所示多核苷酸来源相关的序列或基于此序列直接克隆、PCR扩增或人工合成。
可使用本领域中已知的方法来在宿主细胞中引入构建体。也可通过电穿孔方法实现引入,如2008年10月30日递交的美国临时申请号61/109,642中所描述的,其内容在此通过引用而并入。
此外,使用如2009年8月10日递交的美国临时申请号61/232,648中所描述的方法(其内容在此通过引用而并入),可使用阳性和/或阴性选择标记物,遗传学工具,和对于在例如嗜热生物体中使用进行了调适的、基于同源重组的基因组整合,来有效地选择经修饰的株系(包括经修饰的热纤维素梭菌和解糖热厌氧杆菌株系)。可实行表达外来基因、敲除和过表达天然基因、以及产生不合有抗生素标记物或其它外源DNA的洁净工业株系的方法,如美国临时申请号61/232,648中所描述的。
生物质
术语“木质纤维素材料”、“木质纤维素底物”和“纤维素生物质”是指包含纤维素、半纤维素、木质素或其组合的任何类型的生物质,例如但不限于木质生物质、牧草、草本能量作物、非木质植物生物质、农业废物和/或农业残余、林业残余和/或林业废物、造纸淤污和/或废纸淤污、废水处理淤污、城市固体废物、来自湿和干磨玉米乙醇工厂的玉米纤维、以及糖加工残余物。
在非限制性的实例中,木质纤维素材料可包括但不限于木质生物质(例如再循环的木浆纤维、锯屑、硬木、软木及其组合;草,例如柳枝稷、大米草、黑麦草、利甘草、芒草或其组合;糖加工残余,例如但不限于甘蔗渣;农业废物,例如但不限于稻草、稻壳、大麦秆、玉米穗轴、谷物秆、小麦秆、双低菜籽秆、燕麦秆、燕麦壳以及玉米纤维;秸秆,例如但不限于大豆秸秆、玉米秸秆;多汁植物,例如但不限于龙舌兰;以及林业废物,例如但不限于再循环的木浆纤维、锯屑、硬木(例如白杨,橡树,枫树,桦树,柳树)、软木或其任意组合。木质纤维素材料可包含一种纤维;备选地,木质纤维素材料可包含源自不同木质纤维素材料的纤维的混合物。特别有利的木质纤维素材料是农业废物,例如谷物秆,这包括小麦秆、大麦秆、双低菜籽秆和燕麦秆;玉米纤维;秸秆,例如玉米秸秆和大豆秸秆;草,例如柳枝稷、利甘草、大米草和芒草;或者其组合。
纸淤污也是用于乳酸或乙酸生产的可行原料。纸淤污是源自制浆和造纸的固体残余,并且通常在初次沉清池中从加工废水中被去除。以$30/湿吨的清理花费,淤污清理的花费等于$5/吨所生产用于出售的纸。清理湿淤污的花费是将材料转化为其它用途(例如转化为乙醇)的重要动机。本发明所提供的方法可广泛应用。此外,糖化和/或发酵产物可被用于生产乙醇或更高附加价值的化学品,例如有机酸、芳香族化合物、酯类、丙酮和聚合物中间产物。在糖酵解的过程中,细胞将简单的糖(例如葡萄糖)转化为丙酮酸,伴随ATP和NADH的净生成。不存在用于氧化磷酸化的有功能的电子转运系统时,至少95%的丙酮酸在短通路中被消耗,所述短通路再生NAD+,这对于持续的糖酵解和ATP生产而言是必需的要求。这些NAD+再生系统的废产物通常被称作发酵产物。
示例