CN102649806A

CN102649806A - 一种长梗冬青苷的制备方法

Info

Publication number: CN102649806A
Application number: CN2011100451500A
Authority: CN
Inventors: 李法庆; 刘东锋
Original assignee: Suzhou Baozetang Medical Technology Co Ltd
Current assignee: Suzhou Baozetang Medical Technology Co Ltd
Priority date: 2011-02-25
Filing date: 2011-02-25
Publication date: 2012-08-29

Abstract

本发明公开了一种长梗冬青苷的制备方法，该方法按顺序包括如下步骤：1)取四季青粉碎，加入萃取釜中，采用超临界CO₂萃取，收集长梗冬青苷萃取物；2)用热水溶解萃取物，过滤，滤液加入大孔树脂柱吸附，用水洗脱除去杂质，再用30-50％乙醇溶液洗脱，减压浓缩洗脱液，低温静置，离心，得沉淀物；3)将沉淀物用乙醇重结晶即得长梗冬青苷。本发明的制备方法简单，适合工业化大生产，且能耗低、污染小，是一种环保型生产工艺。

Description

一种长梗冬青苷的制备方法

技术领域：

本发明属于医药领域，具体而言是涉及一种长梗冬青苷的制备方法。

背景技术：

四季青是我国常用中药材，为冬青属植物冬青Ilex purpurea Hassk.的干燥叶。秋、冬二季采收，晒干。四季青具有清热解毒、消肿祛瘀的功效。临床上用于急慢性支气管炎、肺炎、急性咽喉炎、胆道感染、尿路感染、痢疾、烧伤等。四季青在长江以南各省区均有广泛分布，药用资源十分丰富。民间用四季青水煎液治疗烧烫伤，效果尤佳。现代研究表明，四季青具有广谱抗菌作用，对心血管系统也有显著的药理作用，以其为原料生产的注射剂、片剂及与化学药的合剂，用来治疗病毒性角膜炎、冠心病心绞痛，均有显著效果。四季青含有酚酸类、三萜类、挥发油等成分，其中三萜类及其皂苷含量较高，解军波等采用HPLC-ELSD法测定四季青中3种三萜及其皂苷的含量，包括长梗冬青苷、地榆皂苷I和救必应酸，总量约为5％。1972年长谷纲男等从日本产四季青中分离得到主要的皂苷长梗冬青苷。

长梗冬青苷(Pedunculoside)，又名具栖冬青苷，分子式C₃₆H₅₈O₁₀，分子量：650，mp.212-214℃。结构式为

长梗冬青苷(Pedunculoside)

庞小雄等报道的具栖冬青苷的提取分离方法是以救必应为原料，用95％乙醇回流提取3次，提取液浓缩，加入等量蒸馏水，静置过夜，离心，沉淀物用适量水洗，干燥得粗品，粗品用氯仿回流除去脂溶性成分，残渣用50％乙醇加热处理，滤除不溶物，滤液放置，过滤，所得结晶经过硅胶柱层析，氯仿-甲醇-水(7∶2∶1)下层洗脱，-薄层层析检查，合并相同组分后，用50％乙醇重结晶得具栖冬青苷。该方法采用剧毒的氯仿脱脂，硅胶柱层析分离产量小、生产周期长、成本高，无法适应工业化生产需要。

发明内容：

本发明要解决的技术问题是：提供一种适合大批量工业化生产的长梗冬青苷的制备方法，该方法能耗低、污染小、操作简单、安全、快速。

一种长梗冬青苷的制备方法，其特征在于包括以下步骤：

1)取四季青药材，粉碎成粗粉，加入萃取釜中，采用超临界CO₂萃取，收集长梗冬青苷萃取物；

2)用热水溶解长梗冬青苷萃取物，过滤，滤液加入大孔树脂柱吸附，先用水洗脱除去杂质，再用30-50％乙醇溶液洗脱，减压浓缩洗脱液，低温静置，离心，得沉淀物；

3)将上述沉淀物用乙醇重结晶，干燥即得长梗冬青苷产品。

步骤1)所述CO₂超临界萃取的压力为18-35MPa，温度为22-55℃，CO₂流量为15-28L/h，萃取后分离压力为4-10MPa，温度为30-45℃。

步骤2)所述大孔树脂为非极性或弱极性大孔树脂，可选XAD-1、AB-8、NKA、XSD-3、SP825、LD140中的一种。

步骤2)所述洗脱条件为先用4-6BV水洗脱，再用30-50％乙醇溶液洗脱，收集洗脱液。

本发明的有益效果在于：采用超临界CO₂萃取长梗冬青苷，节能明显、污染小，操作简单、安全、快速，整个工艺均采用无毒试剂，所得产品可用于医药、保健品、化妆品等领域。

下面将结合具体实施例对本发明作进一步说明，但本发明要求保护的范围并不局限于下列实施方式。

具体实施方式：

实施例1：

取四季青药材1kg，粉碎成过20-40目的粗粉，加入萃取釜中，设定萃取温度为40℃，压力为35MPa，CO₂流量为22L/h，分离压力9MPa，分离温度45℃；待系统达到设定温度后，打开CO₂钢瓶阀门，使CO₂进入萃取釜，待系统压力平衡后开始萃取，萃取4小时，萃取完毕后收集萃取物。将萃取物用热水溶解，过滤，滤液加入XDA-1大孔吸附树脂柱，流速为1BV/h，上完药液后先用4BV去离子水洗脱，然后用50％乙醇溶液洗脱，收集洗脱液，减压浓缩至总体积的1/5，置4℃下放置10小时，离心(10000r/min)，沉淀用80％乙醇重结晶，干燥得长梗冬青苷22.72g，含量为89.2％。

实施例2：

取四季青药材1kg，粉碎成过20-40目的粗粉，加入萃取釜中，设定萃取温度为55℃，压力为33MPa，CO₂流量为28L/h，分离压力5MPa，分离温度42℃；待系统达到设定温度后，打开CO₂钢瓶阀门，使CO₂进入萃取釜，待系统压力平衡后开始萃取，萃取3小时，萃取完毕后收集萃取物。将萃取物用热水溶解，过滤，滤液加入AB-8大孔吸附树脂柱，流速为1.5BV/h，上完药液后先用6BV去离子水洗脱，然后用50％乙醇溶液洗脱，收集洗脱液，减压浓缩至总体积的1/4，置5℃下放置8小时，离心(10000r/min)，沉淀用80％乙醇重结晶，干燥得长梗冬青苷17.76g，含量为88.1％。

实施例3：

取四季青药材1kg，粉碎成过20-40目的粗粉，加入萃取釜中，设定萃取温度为47℃，压力为21MPa，CO₂流量为18L/h，分离压力7MPa，分离温度43℃；待系统达到设定温度后，打开CO₂钢瓶阀门，使CO₂进入萃取釜，待系统压力平衡后开始萃取，萃取3小时，萃取完毕后收集萃取物。将萃取物用热水溶解，过滤，滤液加入AB-8大孔吸附树脂柱，流速为1.5BV/h，上完药液后先用5BV去离子水洗脱，然后用50％乙醇溶液洗脱，收集洗脱液，减压浓缩至总体积的1/4，置5℃下放置8小时，离心(10000r/min)，沉淀用80％乙醇重结晶，干燥得长梗冬青苷17.76g，含量为87.5％。

实施例4：

取四季青药材2kg，粉碎成过20-40目的粗粉，加入萃取釜中，设定萃取温度为43℃，压力为18MPa，CO₂流量为23L/h，分离压力4MPa，分离温度39℃；待系统达到设定温度后，打开CO₂钢瓶阀门，使CO₂进入萃取釜，待系统压力平衡后开始萃取，萃取3小时，萃取完毕后收集萃取物。将萃取物用热水溶解，过滤，滤液加入XSD-3大孔吸附树脂柱，流速为1.2BV/h，上完药液后先用4BV去离子水洗脱，然后用50％乙醇溶液洗脱，收集洗脱液，减压浓缩至总体积的1/5，置0℃下放置10小时，离心(12000r/min)，沉淀用90％乙醇重结晶，干燥得长梗冬青苷37.44g，含量为85.4％。

实施例5：

取四季青药材2kg，粉碎成过20-40目的粗粉，加入萃取釜中，设定萃取温度为22℃，压力为24MPa，CO₂流量为15L/h，分离压力6MPa，分离温度35℃；待系统达到设定温度后，打开CO₂钢瓶阀门，使CO₂进入萃取釜，待系统压力平衡后开始萃取，萃取4小时，萃取完毕后收集萃取物。将萃取物用热水溶解，过滤，滤液加入XSD-3大孔吸附树脂柱，流速为1.2BV/h，上完药液后先用5BV去离子水洗脱，然后用50％乙醇溶液洗脱，收集洗脱液，减压浓缩至总体积的1/5，置0℃下放置10小时，离心(12000r/min)，沉淀用90％乙醇重结晶，干燥得长梗冬青苷37.44g，含量为88.0％。

实施例6：

取四季青药材10kg，粉碎成过20-40目的粗粉，加入萃取釜中，设定萃取温度为35℃，压力为29MPa，CO₂流量为20L/h，分离压力7MPa，分离温度30℃；待系统达到设定温度后，打开CO₂钢瓶阀门，使CO₂进入萃取釜，待系统压力平衡后开始萃取，萃取4小时，萃取完毕后收集萃取物。将萃取物用热水溶解，过滤，滤液加入LD140大孔吸附树脂柱，流速为1.5BV/h，上完药液后先用6BV去离子水洗脱，然后用50％乙醇溶液洗脱，收集洗脱液，减压浓缩至总体积的1/4，置-2℃下放置8小时，离心(12000r/min)，沉淀用95％乙醇重结晶，干燥得长梗冬青苷200.6g，含量为88.3％。

Claims

1.一种长梗冬青苷的制备方法，其特征在于包括以下步骤：

3)将上述沉淀物用乙醇重结晶，干燥即得长梗冬青苷产品。

2.如权利要求1所述一种长梗冬青苷的制备方法，其特征在于步骤1)所述CO₂超临界萃取的压力为18-35MPa，温度为22-55℃，CO₂流量为15-28L/h，萃取后分离压力为4-10MPa，温度为30-45℃。

3.如权利要求1所述一种长梗冬青苷的制备方法，其特征在于步骤2)所述大孔树脂为非极性或弱极性大孔树脂，可选XAD-1、AB-8、NKA、XSD-3、SP825、LD140中的一种。

4.如权利要求1所述一种长梗冬青苷的制备方法，其特征在于步骤2)所述洗脱条件为先用4-6BV水洗脱，再用30-50％乙醇溶液洗脱，收集洗脱液。