CN102643729A - 地衣芽孢杆菌应用于芝麻香细菌麸曲的培养方法 - Google Patents
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Abstract
本发明公开了一种地衣芽孢杆菌应用于芝麻香细菌麸曲的培养方法,通过该培养方法得到的细菌麸曲中的地衣芽孢杆菌能够耐受较高的温度,适合芝麻香型白酒高温发酵,衣芽孢杆菌的产中性蛋白酶活力强,辅助河内白曲等霉菌所产的酸性蛋白酶对原料中的复杂蛋白质进行降解,进而生成香味物质,提高芝麻香型白酒的出酒率和品质。
Description
技术领域
本发明涉及芝麻香细菌麸曲的培养方法,具体涉及地衣芽孢杆菌应用于芝麻香细菌麸曲的培养方法。
背景技术
地衣芽孢杆菌是芝麻香型白酒酿造过程中的重要功能菌,该细菌能够耐受较高的温度,适合芝麻香型白酒高温发酵的工艺。同时,地衣芽孢杆菌具有一定的糖化力和较高的蛋白质分解能力。在芝麻香型白酒酿造过程中,蛋白质的降解是典型香气成分形成的关键。细菌麸曲是芝麻香型白酒专用曲的重要组成部分,目前使用的细菌麸曲中并不含有地衣芽孢杆菌。
发明内容
本发明的目的在于:提供一种地衣芽孢杆菌应用于芝麻香细菌麸曲的培养方法,在细菌麸曲的培养过程中加入地衣芽孢杆菌,增强细菌麸曲中的酶系,提高芝麻香型白酒的品质。
本发明的技术解决方案是该细菌麸曲的培养方法包括以下步骤:
(1)地衣芽孢杆菌:购买于中国工业微生物菌种保藏管理中心,编号为CICC 20166(产耐温淀粉酶);
(2)一级培养:将购买的地衣芽孢杆菌CICC 20166挑取两接种环菌体在培养基中40℃-60℃进行一级种子培养,得菌悬液;其中,培养基:蛋白胨5克,牛肉膏3克,氯化钠5克, 琼脂15克,蒸馏水1000毫升,PH7.0;
(3)二级培养:将步骤(2)的一级种子菌悬液按麸皮培养基量的1%加入麸皮培养基中进行二级培养,得地衣芽孢杆菌菌株;其中,麸皮培养基的水份是50%;
(4)细菌麸曲培养:将步骤(3)的地衣芽孢杆菌菌株加入细菌曲中35-45℃培养24-48 h,得细菌麸曲,其中地衣芽孢杆菌菌株的接种量为2-3%。
由本发明的培养方法获得的细菌麸曲中的地衣芽孢杆菌的产中性蛋白酶活力强,其能辅助河内白曲等霉菌所产的酸性蛋白酶对原料中的复杂蛋白质进行降解,进而生成香味物质,提高芝麻香型白酒的出酒率和品质。
具体实施方式
下面结合具体的实施例进一步说明本发明的技术解决方案,这些实施例用于理解本发明的技术解决方案,而不能理解为是对技术解决方案的限制。
实施例1:依以下步骤培养细菌麸曲
(1)地衣芽孢杆菌:购买于中国工业微生物菌种保藏管理中心,编号为CICC 20166(产耐温淀粉酶);
(2)一级培养:将购买的地衣芽孢杆菌CICC 20166挑取两接种环菌体在培养基中40℃进行一级种子培养,得菌悬液;其中,培养基:蛋白胨5克,牛肉膏3克,氯化钠5克, 琼脂15克,蒸馏水1000毫升,PH7.0;
(3)二级培养:将步骤(2)的一级种子菌悬液按麸皮培养基量的1%加入麸皮培养基中进行二级培养,得地衣芽孢杆菌菌株;其中,麸皮培养基的水份是50%;
(4)细菌麸曲培养:将步骤(3)的地衣芽孢杆菌菌株加入细菌曲中35℃培养48 h,得细菌麸曲,其中地衣芽孢杆菌菌株的接种量为2%。
实施例2:依以下步骤培养细菌麸曲
(1)地衣芽孢杆菌:购买于中国工业微生物菌种保藏管理中心,编号为CICC 20166(产耐温淀粉酶);
(2)一级培养:将购买的地衣芽孢杆菌CICC 20166挑取两接种环菌体在培养基中50℃进行一级种子培养,得菌悬液;其中,培养基:蛋白胨5克,牛肉膏3克,氯化钠5克, 琼脂15克,蒸馏水1000毫升,PH7.0;
(3)二级培养:将步骤(2)的一级种子菌悬液按麸皮培养基量的1%加入麸皮培养基中进行二级培养,得地衣芽孢杆菌菌株;其中,麸皮培养基的水份是50%;
(4)细菌麸曲培养:将步骤(3)的地衣芽孢杆菌菌株加入细菌曲中40℃培养36h,得细菌麸曲,其中地衣芽孢杆菌菌株的接种量为2.5%。
实施例3:依以下步骤培养细菌麸曲
(1)地衣芽孢杆菌:购买于中国工业微生物菌种保藏管理中心,编号为CICC 20166(产耐温淀粉酶);
(2)一级培养:将购买的地衣芽孢杆菌CICC 20166挑取两接种环菌体在培养基中60℃进行一级种子培养,得菌悬液;其中,培养基:蛋白胨5克,牛肉膏3克,氯化钠5克, 琼脂15克,蒸馏水1000毫升,PH7.0;
(3)二级培养:将步骤(2)的一级种子菌悬液按麸皮培养基量的1%加入麸皮培养基中进行二级培养,得地衣芽孢杆菌菌株;其中,麸皮培养基的水份是50%;
(4)细菌麸曲培养:将步骤(3)的地衣芽孢杆菌菌株加入细菌曲中45℃培养24h,得细菌麸曲,其中地衣芽孢杆菌菌株的接种量为3%。
实施例1-3中经一级培养后,在40℃至60℃梯度下与实验室保藏菌株相比,测定的中性蛋白酶活力指标如表1所示:
表1 不同温度梯度中性蛋白酶活力
表1表明: CICC20166于45℃中性蛋白酶活力最高,且远远高于实验室保藏菌株。
检测实施例1-3生产出来的细菌麸曲的各项理化指标与原生产用曲指标进行对比,各项指标如下表所示,其中空白对照组为传统生产用细菌曲。
表2 24h 35℃细菌麸曲的各项理化指标
表3 48h 60℃细菌麸曲的各项理化指标
表4 48h 45℃细菌麸曲帘子曲的各项理化指标
按照原有细菌麸曲生产工艺(前期24h培养温度为35℃,后24h温度提升至60℃)添加地衣芽孢杆菌各指标见表2、3。由表2、3可以看出24h细菌麸曲a-游离氨基氮、中性酶活力和酸性酶活力均高于空白对照组;48h细菌麸曲a-游离氨基氮含量相差不大,48h中性酶活力和酸性酶活力均低于24h中性酶活力和酸性酶活力,可能是由于24h后,温度提高到60℃,超过酶的最适温度,中性酶活力和酸性酶活力下降;经过调整后24h培养温度至45℃,由表4可以得出,添加地衣芽孢杆菌的细菌麸曲中性蛋白酶活力远远高于原生产用细菌麸曲,含量是674.46 u/g,是生产用曲的9倍多,同时没有影响其他指标,a-游离氨基氮含量和酸性蛋白酶活力相差不大,说明此菌株可以应用于芝麻香细菌麸曲的生产,培养条件前期24h培养温度为35℃,后24h温度提升至45℃。
Claims (1)
1.地衣芽孢杆菌应用于芝麻香细菌麸曲的培养方法,其特征是该细菌麸曲的培养方法包括以下步骤:
(1)地衣芽孢杆菌:购买于中国工业微生物菌种保藏管理中心,编号为CICC 20166(产耐温淀粉酶);
(2)一级培养:将购买的地衣芽孢杆菌CICC 20166挑取两接种环菌体在培养基中40℃-60℃进行一级种子培养,得菌悬液;其中,培养基:蛋白胨5克,牛肉膏3克,氯化钠5克, 琼脂15克,蒸馏水1000毫升,PH7.0;
(3)二级培养:将步骤(2)的一级种子菌悬液按麸皮培养基量的1%加入麸皮培养基中进行二级培养,得地衣芽孢杆菌菌株;其中,麸皮培养基的水份是50%;
(4)细菌麸曲培养:将步骤(3)的地衣芽孢杆菌菌株加入细菌曲中35-45℃培养24-48 h,得细菌麸曲,其中地衣芽孢杆菌菌株的接种量为2-3%。
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