CN102633806A - 一种三尖杉酯碱的提取分离方法 - Google Patents

Abstract

本发明涉及一种三尖杉酯碱的提取分离方法，该方法采用将原料进行干燥、粉碎、浸提、浓缩、分离等过程，最后获得三尖酯碱晶体，三尖杉酯碱的纯度为96.4％。采用该三尖杉酯碱提取分离方法获得的三尖杉酯碱产量高且产量稳定，获得率为0.298％。该三尖杉酯碱的提取分离方法为三尖杉产业在医药领域的发展从技术上提供了有效保障并作出了很大的贡献。

Description

一种三尖杉酯碱的提取分离方法

技术领域

本发明涉及一种三尖杉酯碱的提取分离方法。

背景技术

三尖杉属珍贵树种，常绿乔木，皮赭褐色，片状脱落，小枝对生，基部芽鳞宿存，是我国特产的重要药原植物，常自然散生于海拔500米至1100米的山涧潮湿地带，分布于我国陕西南部、甘肃南部、华东、华南、西南地区。生于山坡疏林、溪谷湿润而排水良好的地方。从三尖杉中提取的植物碱对于癌症治疗具有一定疗效。此外由于其木材坚实，有弹性，具有多种用途，种子榨油可供制皂及油漆，果实入药有润肺、止咳，消积之效，所以三尖杉是一种具有多种用途的重要野生经济植物，具有多方面的保护价值。

在医药领域，主要是从三尖杉中提取三尖杉酯碱、高三尖杉酯碱，而酯碱合成体含量为0.25～0.48％主要用于治疗急性白血病和恶性淋巴瘤，同时还用于治疗黑素瘤、肺癌、乳腺癌和脑肿瘤等，与阿霉素药联用治疗乳腺癌有效率达94％。目前，国际市场的三尖杉酯碱价格约为18～32万美元/kg左右。由此可看出，三尖杉酯碱的市场发展潜力巨大，发展前景广阔。但由于目前国内三尖杉的种植和培育都是尚属于起步阶段，从三尖杉的枝、叶中提取三尖杉酯碱就更是少之又少，目前还没有一套成熟的提取方法，三尖杉酯碱的产量极不稳定，因此研究一套能提高三尖杉酯碱产量且产量稳定的三尖杉酯碱的提取分离方法成了一个急待解决的问题。

发明内容

本发明要解决的技术问题是提供一种能提高三尖杉酯碱产量且产量稳定的三尖杉酯碱的提取分离方法。

一种三尖杉酯碱的提取分离方法，其具体步骤为：

a)、先将三尖杉枝、叶切成20cm长，在温度60℃以下烘干或常温下自然干燥；

b)、将干燥的三尖杉枝、叶粉碎成过100目的细粉；

c)、三尖杉细粉置于提取罐中，加入细粉4倍量的酸性乙醇、浸提温度在60-70℃之间、恒温浸提时间24h、浸提次数3次，得浸提液；

d)、将浸提液减压浓缩回收乙醇得三尖杉浸膏；

e)、用细粉2倍量的3％酒石酸溶解浸膏，所得溶液用与三尖杉等体积的乙酸乙酯萃取3次；水层用饱和Na₂CO₃调PH值到9左右，再用等体积的氯仿萃取3次，回收氯仿得三尖杉总碱，总碱获得率为0.298％；

f)、用柠檬酸和膦酸二氢钠配制PH＝4的缓冲溶液为固定相，流动相为氯仿，二者互相饱和；用流动相把获得的生物碱溶解，放在分离器中逆流分布，用薄层跟踪检查各分离器上、下层溶液至获得单一的粗制品时分别收集，待分离；

g)、用Al₂O₃作吸附剂，二氯甲烷溶解三尖杉总碱上柱，用乙醚洗脱，收集洗脱液，并用薄层检查三尖杉酯碱和高三尖杉酯碱的纯度，当薄层色谱中出现一个斑点是所得的三尖杉酯碱即为纯品，三尖杉酯碱纯度为96.4％。

采用该三尖杉酯碱提取分离方法获得的三尖杉酯碱产量高且产量稳定，产量比以前提高38％，该三尖杉酯碱的提取分离方法为三尖杉产业在医药领域的发展从技术上提供了有效保障并作出了很大的贡献。

具体实施方式

三尖杉是一种亚热带药原植物，因被过度利用，资源数量急剧减少，处于渐濒危状态。而且由于三尖杉属野生植物，生长环境复杂，成长十分困难，但是从三尖杉的枝、叶中提取的三尖杉酯碱(又称长梗粗榧碱，分子式C₂₈H₃₇O₉N)是一种治疗急性白血病和恶性淋巴瘤的特效药，而且对黑素瘤、肺癌、乳腺癌和脑肿瘤等也有很好的疗效，因此本发明专门针对三尖杉酯碱的提取分离进行了研究，试验得出了一套完整的三尖杉酯碱的提取分离方法。

本发明一种三尖杉酯碱的提取分离方法，其具体步骤为：

a)、先将三尖杉枝、叶切成20cm长，在温度60℃以下烘干或常温下自然干燥；

b)、将干燥的三尖杉枝、叶粉碎成过100目的细粉；

c)、三尖杉细粉置于提取罐中，加入细粉4倍量的酸性乙醇、浸提温度在60-70℃之间(一般68℃)、恒温浸提时间24h、浸提次数3次，得浸提液；

d)、将浸提液减压浓缩回收乙醇得三尖杉浸膏；

e)、用细粉2倍量的3％酒石酸溶解浸膏，所得溶液用与三尖杉等体积的乙酸乙酯萃取3次；水层用饱和Na₂CO₃调PH值到9左右，再用等体积的氯仿萃取3次，回收氯仿得三尖杉总碱，总碱获得率为0.298％；

f)、用柠檬酸和膦酸二氢钠配制PH＝4的缓冲溶液为固定相，流动相为氯仿，二者互相饱和；用流动相把获得的生物碱溶解，放在分离器中逆流分布，用薄层跟踪检查各分离器上、下层溶液至获得单一的粗制品时分别收集，待分离；

g)、用Al₂O₃作吸附剂，二氯甲烷溶解三尖杉总碱上柱，用乙醚洗脱，收集洗脱液，并用薄层检查三尖杉酯碱和高三尖杉酯碱的纯度，当薄层色谱中出现一个斑点是所得的三尖杉酯碱(或高三尖杉酯碱)即为纯品，三尖杉酯碱纯度为96.4％(高三尖杉酯碱为98.4％)。

经过本提取分离方法得到的三尖杉酯碱是一种透明的白色晶体，味苦，有引湿性，在碱性溶液中易分解。易溶于甲醇、乙醇或三氯甲烷，微溶于水和乙醚。三尖杉酯碱能抑制真核细胞内蛋白质的合成，使多聚核糖体解聚，是干扰蛋白质合成功能的抗癌药物。

采用本发明三尖杉酯碱的获得率为0.298％左右，该方法为保存和发展三尖杉这一珍稀树种，提高三尖杉脂碱产量和利用其特有的抗癌特效，减少癌症患者痛苦，具有积极深远的意义。

Claims (1)

1.一种三尖杉酯碱的提取分离方法，其特征在于：所述三尖杉酯碱提取分离的具体步骤为：

a)、先将三尖杉枝、叶切成20cm长，在温度60℃以下烘干或常温下自然干燥；

b)、将干燥的三尖杉枝、叶粉碎成过100目的细粉；

c)、三尖杉细粉置于提取罐中，加入细粉4倍量的酸性乙醇、浸提温度在60-70℃之间、恒温浸提时间24h、浸提次数3次，得浸提液；

d)、将浸提液减压浓缩回收乙醇得三尖杉浸膏；

e)、用细粉2倍量的3％酒石酸溶解浸膏，所得溶液用与三尖杉等体积的乙酸乙酯萃取3次；水层用饱和Na₂CO₃调PH值到9左右，再用等体积的氯仿萃取3次，回收氯仿得三尖杉总碱，总碱获得率为0.298％；

f)、用柠檬酸和膦酸二氢钠配制PH＝4的缓冲溶液为固定相，流动相为氯仿，二者互相饱和；用流动相把获得的生物碱溶解，放在分离器中逆流分布，用薄层跟踪检查各分离器上、下层溶液至获得单一的粗制品时分别收集，待分离；

g)、用Al₂O₃作吸附剂，二氯甲烷溶解三尖杉总碱上柱，用乙醚洗脱，收集洗脱液，并用薄层检查三尖杉酯碱和高三尖杉酯碱的纯度，当薄层色谱中出现一个斑点是所得的三尖杉酯碱即为纯品，三尖杉酯碱纯度为96.4％。