CN103961427B - 一种治疗2型糖尿病的金露梅提取物及其制备方法 - Google Patents

Abstract

本发明涉及中药技术领域，具体地说是一种从金露梅(藏药名：班那)枝叶中提取的治疗2型糖尿病的潜在药物。本发明中的提取物通过如下步骤制成：以金露梅枝叶为原料，经粉碎后过20目筛，用5倍体积的95%乙醇回流提取3次，每次1 h，抽滤，合并3次滤液，滤液真空浓缩后分散于水中，采用5倍体积的石油醚萃取分层，将所得水层用5倍体积的乙酸乙酯萃取分层，得乙酸乙酯萃取液，经真空干燥即得治疗2型糖尿病的金露梅提取物。本发明为该提取物的制备提供了一套完善的技术方案，采用该方案获得的提取物能高效地抑制α‑葡萄糖苷酶和醛糖还原酶活性，降低2型糖尿病大鼠血糖、调节血脂水平、促进胰岛素mRNA表达、抑制抵抗素mRNA表达。

Description

一种治疗 2 型糖尿病的金露梅提取物及其制备方法

技术领域

本发明涉及中药技术领域，具体地说是一种从金露梅枝叶中提取的治疗2型糖尿病的潜在药物及其制备方法。

背景技术

金露梅 （Potentilla fruticosa）系灌木，高达0.5-1米，多分枝。小枝红褐色，幼时被长柔毛。羽状复叶，有5（3）小叶，长圆形、倒卵状长圆形或卵状披针形，长0.7-2厘米，边缘平或稍反卷，全缘，先端急尖或圆钝，基部楔形。花黄色，宽倒卵形。瘦果近卵圆形，熟时褐棕色，长约1.5毫米。生于海拔3000-4000米山坡草地、砾石坡、灌丛等，产于青海、西藏、四川等地，为藏医常用药材，藏药名班那。《晶珠本草》记载：班那主治消化不良和肺病，其炭能干涸黄水；现代研究发现金露梅主要含有黄酮类、三萜类、有机酸以及酚酸类等化学成分，药理研究证明金露梅具有抗菌、抗病毒、抗氧化、增强免疫力等功效。本发明首次研究发现，金露梅的提取物具有高效的α-葡萄糖苷酶和醛糖还原酶抑制作用，并能有效地降低2型糖尿病大鼠空腹血糖、调节血脂水平、促进胰岛素mRNA表达、抑制抵抗素mRNA表达。

发明内容

本发明提供了一种从金露梅枝叶中提取治疗2型糖尿病的提取物的方案，其通过下述技术予以实现：以金露梅枝叶为原料，经粉碎后过20目筛，用5倍体积的95%乙醇回流提取3次，每次1 h，抽滤，合并3次滤液，滤液真空浓缩后分散于水中，采用5倍体积的石油醚萃取分层，将所得水层用5倍体积的乙酸乙酯萃取分层，得乙酸乙酯萃取液，经真空干燥即得治疗2型糖尿病的金露梅提取物。本发明从金露梅枝叶中提取的治疗2型糖尿病的提取物与现有的药物相比较具有如下有益效果：所述的治疗2型糖尿病的金露梅提取物采用α-葡萄糖苷酶和醛糖还原酶体外活性测定方法，进行酶抑制活性的测定；同时进行体内降糖实验，实验结果显示：在样品浓度为1.25 mg/mL时，该提取物的α-葡萄糖苷酶的抑制率为97.56%，半数抑制浓度IC50为5.67 mg/mL；在样品浓度为0.625mg/ml时，该提取物醛糖还原酶的抑制率为55.56%，半数抑制浓度IC50为0.498mg/mL；采用高脂高糖饲料喂养联合腹腔注射小剂量链脲佐菌素建立2型糖尿病大鼠模型，以本发明所述提取物为实验药物，结果表明在剂量300mg/（kg•d）连续给药30 d后的降糖率为28.58%，并且可以升高血清胰岛素（P＜0.01）和血清高密度脂蛋白（P＜0.05），降低血清总胆固醇（P＜0.01）、血清甘油三酯（P＜0.01）和血清低密度脂蛋白（P＜0.01）；通过分子药理学技术检测发现该提取物能显著促进2型糖尿病大鼠的胰岛素mRNA表达（P＜0.01）和抑制抵抗素mRNA表达（P＜0.01）。本发明中的提取物，是从青藏高原天然植物金露梅中提取得到，提取工艺简便、安全，为制备新型的治疗2型糖尿病的药物提供依据。本发明为治疗2型糖尿病提供一种潜在的药物。其关键技术为提取物的制备方法、α-葡萄糖苷酶和醛糖还原酶抑制活性的测定、体内降糖实验、分子药理实验方法检测提取物对胰岛素mRNA和抵抗素mRNA表达的影响。该方法简单合理，易于操作，并可用于以治疗2型糖尿病为目的的产品的研发，具有产业化意义。

附图说明

图1是本发明一种治疗2型糖尿病的金露梅提取物制备流程图。

具体实施方式

下面结合附图和实施例对本发明一种治疗2型糖尿病的金露梅提取物及其制备方法的技术方案作进一步描述。如图1所示，一种治疗2型糖尿病的金露梅提取物及其制备方法，所述的提取物是从金露梅枝叶中提取制成，通过如下步骤制成：以金露梅枝叶为原料，经粉碎后过20目筛，用5倍体积的95%乙醇回流提取3次，每次1 h，抽滤，合并3次滤液，滤液真空浓缩后分散于水中，采用5倍体积的石油醚萃取分层，将所得水层用5倍体积的乙酸乙酯萃取分层，得乙酸乙酯萃取液，经真空干燥即得治疗2型糖尿病的金露梅提取物。

所述的治疗2型糖尿病的提取物采用α-葡萄糖苷酶和醛糖还原酶体外活性测定方法，进行酶抑制活性的测定，同时进行体内降糖实验，实验结果显示：在样品浓度为1.25 mg/mL时，该提取物的α-葡萄糖苷酶的抑制率为97.56%，半数抑制浓度IC50为5.67 mg/mL；在样品浓度为0.625mg/ml时，该提取物醛糖还原酶的抑制率为55.56%，半数抑制浓度IC50为0.498mg/mL；采用高脂高糖饲料喂养联合腹腔注射小剂量链脲佐菌素建立2型糖尿病大鼠模型，以本发明所述提取物为实验药物，结果表明在剂量300mg/（kg•d）连续给药30 d后的降糖率为28.58%，并且可以升高血清胰岛素（P＜0.01）和血清高密度脂蛋白（P＜0.05），降低血清总胆固醇（P＜0.01）、血清甘油三酯（P＜0.01）和血清低密度脂蛋白（P＜0.01）；通过分子药理学技术检测发现该提取物能显著促进2型糖尿病大鼠的胰岛素mRNA表达（P＜0.01）和抑制抵抗素mRNA表达（P＜0.01）。

实施例1

主要技术方案：原料及辅料：金露梅枝叶、蒸馏水、乙醇、石油醚、乙酸乙酯等。主要设备：粉粹机、真空泵、旋转蒸发器、冷凝循环水泵等。

本发明一种治疗2型糖尿病的金露梅提取物及其制备方法的方案如下：以金露梅枝叶为原料，经粉碎后过20目筛，用5倍体积的95%乙醇回流提取3次，每次1 h，抽滤，合并3次滤液，滤液真空浓缩后分散于水中，采用5倍体积的石油醚萃取分层，将所得水层用5倍体积的乙酸乙酯萃取分层，得乙酸乙酯萃取液，经真空干燥即得治疗2型糖尿病的金露梅提取物。

所述的治疗2型糖尿病的提取物采用α-葡萄糖苷酶和醛糖还原酶体外活性测定方法，进行酶抑制活性的测定，同时进行体内降糖实验，实验结果显示：在样品浓度为1.25 mg/mL时，该提取物的α-葡萄糖苷酶的抑制率为97.56%，半数抑制浓度IC50为5.67 mg/mL；在样品浓度为0.625mg/ml时，该提取物醛糖还原酶的抑制率为55.56%，半数抑制浓度IC50为0.498mg/mL；采用高脂高糖饲料喂养联合腹腔注射小剂量链脲佐菌素建立2型糖尿病大鼠模型，以本发明所述提取物为实验药物，结果表明在剂量300mg/（kg•d）连续给药30 d后的降糖率为28.58%，并且可以升高血清胰岛素（P＜0.01）和血清高密度脂蛋白（P＜0.05），降低血清总胆固醇（P＜0.01）、血清甘油三酯（P＜0.01）和血清低密度脂蛋白（P＜0.01）；通过分子药理学技术检测发现该提取物能显著促进2型糖尿病大鼠的胰岛素mRNA表达（P＜0.01）和抑制抵抗素mRNA表达（P＜0.01）。

本发明中的提取物α-葡萄糖苷酶和醛糖还原酶的抑制率高，并能降低2型糖尿病血糖、调节血脂水平、促进胰岛素mRNA表达、抑制抵抗素mRNA表达。该提取物从青藏高原天然植物金露梅中制备得到，制备工艺简便、安全，为制备新型的治疗2型糖尿病药物提供依据。该发明为治疗2型糖尿病提供一种潜在的药物，其关键技术为提取物的制备、α-葡萄糖苷酶和醛糖还原酶抑制活性的测定、体内降糖实验、分子药理实验方法检测提取物对胰岛素mRNA和抵抗素mRNA表达的影响。该方法简单合理，易于操作，并可用于以治疗2型糖尿病为目的的产品的研发，具有产业化意义。

Claims (1)

1.一种金露梅提取物在制备治疗2 型糖尿病药物中的应用，所述金露梅提取物通过如下步骤制得：以金露梅枝叶为原料，经粉碎后过20 目筛，用5 倍体积的95% 乙醇回流提取3 次，每次1 h，抽滤，合并3 次滤液，滤液真空浓缩后分散于水中，采用5 倍体积的石油醚萃取分层，将所得水层用5 倍体积的乙酸乙酯萃取分层，得乙酸乙酯萃取液，真空干燥即得。