CN103641717B - 一种从开花期向日葵花盘中提取分离绿原酸的方法 - Google Patents

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Abstract

本发明提供一种从开花期向日葵花盘中提取分离绿原酸的方法，步骤如下：（1）将开花期向日葵花盘进行预处理，得到向日葵花盘粉末；（2）将向日葵花盘粉末超声处理，过滤，得到滤液；将滤渣进行索氏提取，得粗提液；（3）将滤液和粗提液合并，进行后处理，得到含有绿原酸的提取物。本发明提取的对象是开花期的向日葵，跟其他所有向日葵中的生长时段不同，开花期的向日葵花盘中所含有效成分含量（绿原酸含量）较成熟后高。本发明采用改良的索氏提取法提取绿原酸，相对于索氏提取法能更充分地对绿原酸进行提取。经测定，应用本发明的方法得到的提取物中绿原酸含量为51.8%。

Description

一种从开花期向日葵花盘中提取分离绿原酸的方法
技术领域
本发明涉及一种从开花期向日葵花盘中提取分离绿原酸的方法。
背景技术
绿原酸（Chlorogenicacid）是由咖啡酸（Caffeicacid）与奎尼酸（Quinicacid）组成的缩酚酸，异名咖啡单宁酸，化学名3-O-咖啡酰奎酸（3-O-caffeoylquinicacid）分子式：C16H18O9，分子量：354.30，是植物体在有氧呼吸过程中经莽草酸途径产生的一种苯类化合物。绿原酸广泛存在于高等双子叶植物和蕨类植物中，主要丰在于忍冬科忍冬属（Lonicera）、菊科蒿属（Artemisia）植物中，其中含量较高的植物主要为杜仲、金银花、向日葵、继木、咖啡、可可树等。
近年来研究表明，绿原酸具有抗菌、抗病毒、保肝利胆、降血脂、兴奋中枢神经、增强胃肠蠕动、治疗糖尿病等作用。绿原酸的水解产物咖啡酸对治疗白细胞减少症有显著疗效，它也是抗艾滋病的先导化合物，还具有显著的抗癌作用。研究数据表明绿原酸几乎无毒性，幼大鼠口服的LD50大于1g/kg，腹腔注射大于0.25g/kg。
随着对绿原酸的深入研究，绿原酸的应用价值也越来越被深度开发。卫生部《药品标准》中收录了近170种以绿原酸为主要成分的中成药，其中有很多是以绿原酸为质量控制的重要标志之一。在食品行业中，绿原酸可取代人工合成的抗氧化剂，用于食品及水果的保鲜。在日用化工行业，绿原酸用作化妆品抗氧化添加剂，可保护胶原蛋白不受活性氧等自由基的破坏并能有效防止紫外线对人体皮肤的伤害。
我国有着丰富的绿原酸资源，加深对绿原酸的研究，开发绿原酸相关产品，提高绿原酸的经济价值已成为一种趋势。
目前，国内绿原酸的提取方法有：微波辅助提取、浸提法，超声波辅助提取、酶法提取等方法。提取原料主要以金银花、杜仲叶为对象。
本发明创新性的以开花期向日葵为提取原料，以乙醇为溶剂，采用超微粉碎、超声波助提、索氏提取结合的改良索氏提取法进行绿原酸的提取研究，能够实现开花期向日葵花盘中绿原酸提取的完全性和彻底性。
向日葵别名太阳花，是一种可高达3米的大型一年生菊科向日葵属植物，原产地是北美洲，约在明朝时引入中国。它是世界第二大油料作物，在中国的栽培面积仅次于大豆和油菜，是第三大油料作物，我国向日葵主产区分布在东北、西北和华北地区，如内蒙古、吉林、辽宁、黑龙江、甘肃等省、自治区。
发明内容
本发明提供了从开花期向日葵花盘中提取绿原酸的方法，为绿原酸的来源提供了新的途径。开花期向日葵花盘包括向日葵花托和未成熟的葵花籽。
本发明提供一种从开花期向日葵花盘中提取分离绿原酸的方法，步骤如下：（1）将开花期向日葵花盘进行预处理，得到向日葵花盘粉末；
（2）将向日葵花盘粉末超声处理，过滤，得到滤液；将滤渣进行索氏提取，得粗提液；
（3）将滤液和粗提液合并，进行后处理，得到含有绿原酸的提取物。
优选地，步骤（1）中预处理是将开花期向日葵花盘烘干、粉碎。
优选地，步骤（2）中超声处理后调pH至3.0~3.5；优选地，调pH至3.0。
优选地，步骤（2）中所述超声处理是将向日葵花盘粉末加入乙醇中，放入超声波清洗器中处理。
优选地，步骤（2）中所述超声处理的参数为：超声频率30～45KHz，超声处理时间0.5~1h；优选地，超声处理时间为0.5h。
优选地，步骤（2）中所述索氏提取是在65℃提取的。
优选地，步骤（3）中所述后处理是将滤液和粗提液合并后进行第一次旋转蒸发，除去乙醇；再用乙酸乙酯萃取，进行第二次旋转蒸发除去乙酸乙酯，干燥。
进一步地，所述第一次旋转蒸发的参数为温度50~55℃,80~100转/min，真空度0.07~0.08MPa；优选地，温度50℃,80转/min，真空度0.07MPa。
在此参数范围内都能很好的除去乙醇；当参数为：温度50℃,80转/min，真空度0.07MPa时，除乙醇的效果最好。
进一步地，所述第二次旋转蒸发的参数为温度35~40℃,80~100转/min，真空度0.07~0.08MPa；优选地，温度35℃,80转/min，真空度0.07MPa。
在此参数范围内都能很好的除去乙酸乙酯；当参数为温度35℃,80转/min，真空度0.07MPa时，除乙酸乙酯的效果最好。
本发明的第二个目的是提供应用上述的方法得到的绿原酸提取物，所述提取物中绿原酸的含量为51.8%。
本发明提取的对象是开花期的向日葵，跟其他所有向日葵中的生长时段不同，开花期的向日葵花盘中所含有效成分含量（绿原酸含量）较成熟后高。
本发明创新性的以开花期向日葵为提取原料，以乙醇为溶剂，采用超微粉碎、超声波助提、索氏提取结合的改良索氏提取法进行绿原酸的提取研究，能够实现开花期向日葵花盘中绿原酸提取的完全性和彻底性。
本发明采用改良的索氏提取法提取绿原酸，相对于索氏提取法能更充分地对绿原酸进行提取。经测定，应用本发明的方法得到的提取物中绿原酸含量为51.8%。
附图说明
图1为绿原酸的标准曲线；
图2为绿原酸标准品色谱图；
图3为提取物样品的色谱图。
具体实施方式
以下的实施例便于更好地理解本发明，但并不限定本发明。下述实施例中的实验方法，如无特殊说明，均为常规方法。下述实施例中所用的试验材料，如无特殊说明，均为自常规生化试剂商店购买得到的。以下实施例中的定量试验，均设置三次重复实验，结果取平均值。
本发明中：开花期向日葵花盘采集于甘肃省兰州市红古区某向日葵种植田；
实施例1
本发明的从开花期向日葵花盘中提取分离绿原酸的步骤如下：
（1）预处理：将新鲜无病害开花期向日葵花盘采摘，晒干、清洗后，用烘箱将其烘干，温度为50℃，时间为36h，投入粉碎机进行粉碎，粉碎粒度至80目；
（2）称取80.0g向日葵花盘粉末，加入8倍质量75%乙醇，加入乙醇使绿原酸溶解释放出来，将其放入超声波清洗器中处理0.5h，超声频率30KHz，超声的目的是加快向日葵花盘粉末中绿原酸的溶解释放，调pH至3，以除去溶液中碱性物质；用普通滤纸过滤，过滤孔径1-7微米，保存滤液。再将滤渣装于滤纸筒内放入索氏提取器中，65℃提取,虹吸5次，之后放置提取液至室温，抽滤得粗提液；
（3）将滤液与粗提液合并置旋转蒸发，旋转蒸发的参数是：温度50℃,80转/min，真空度0.07MPa，除去乙醇，60℃干燥得到乙醇浸膏，加入适量的水溶解（所有浸膏溶解即可），再用乙酸乙酯萃取3次，以除去脂溶性物质；然后旋转蒸发，旋转蒸发的参数是：温度35℃,80转/min，真空度0.07MPa，除去乙酸乙酯，60℃干燥，得到1.76g提取物。
（4）绿原酸含量测定：
用高效液相色谱法分析步骤（3）得到的提取物中绿原酸含量以及向日葵花盘中绿原酸含量，实验过程如下：
1.材料与方法
1.1仪器与试剂
绿原酸标准品购于国家标准物质信息中心，纯度为98%；高效液相色谱仪Waters2695；HypersilODS25μm柱(4.6mm×250mm)；
1.2色谱条件
HypersilODS25μm柱(4.6mm250mm);流动相为甲醇与pH=5.80.4%磷酸混合液（体积比为9:91）,0.45μm滤膜抽滤，等梯度洗脱，流速1.0ml/min;柱温28℃；检测波长329nm。
1.3标准曲线的绘制
称取5.0mg的绿原酸标准品溶于50ml甲醇中，配成0.100mg/ml的标准储备液。从标准储备液中各吸取1、3、5、7、9、10、12ml用甲醇稀释至50ml容量瓶中，用0.22μm滤膜过滤，取10μl上样。以绿原酸浓度为纵坐标，峰面积为横坐标进行线性回归分析，绘制标准品的标准曲线：y=6×E-8+0.0019,说明绿原酸的浓度与吸光度在2.00μg/ml︿24.00μg/ml范围内呈现良好的线性关系。如图1，2。
1.4样品溶液
将步骤（3）得到的提取物溶于50ml甲醇中，用移液管吸取0.10ml于50ml的容量瓶中用甲醇定容。将溶液用0.22μm滤膜过滤，取10μl上样。得到提取物的色谱图。如图3。
1.5计算绿原酸含量
按以下公式计算提取物中绿原酸的含量：x=
式中：x代表绿原酸含量，A代表提取物中绿原酸峰面积，c代表标准溶液中绿原酸的浓度（μg/mL），V代表提取物最终定容体积（mL），As代表标准溶液中绿原酸峰面积，m代表提取物质量（g），f代表稀释倍数。
1.6结果及分析
绿原酸提取物的质量为1.76g。
A=100464;c=24μg/mL;V=50mL;f=2500;As=330698;m=1.76g;
则：x=51.8%
即：向日葵花盘中绿原酸的含量=×100%=1.14%。
由上可知，应用本发明的方法能很好地从开花期向日葵花盘中提取绿原酸。
实施例2
本发明的从开花期向日葵花盘中提取分离绿原酸的步骤如下：
（1）预处理：将新鲜无病害开花期向日葵花盘采摘，晒干、清洗后，用烘箱将其烘干，温度为45℃，时间为48h，投入粉碎机进行粉碎，粉碎粒度至40目；
（2）称取80.0g向日葵花盘粉末，加入8倍质量75%乙醇，加入乙醇使绿原酸溶解释放出来，将其放入超声波清洗器中处理1h，超声频率45KHz，超声的目的是加快向日葵花盘粉末中绿原酸的溶解释放，调pH至3.5，以除去溶液中碱性物质；用普通滤纸过滤，过滤孔径1-7微米，保存滤液。再将滤渣装于滤纸筒内放入索氏提取器中，65℃提取,虹吸5次，之后放置提取液至室温，抽滤得粗提液；
（3）将滤液与粗提液合并置旋转蒸发，旋转蒸发的参数是：温度52℃,90转/min，真空度0.08MPa，除去乙醇，60℃干燥得到乙醇浸膏，加入适量的水溶解（所有浸膏溶解即可），再用乙酸乙酯萃取3次，以除去脂溶性物质；然后旋转蒸发，旋转蒸发的参数是：温度38℃,90转/min，真空度0.08MPa，除去乙酸乙酯，60℃干燥，得到1.76g提取物。
实施例3
本发明的从开花期向日葵花盘中提取分离绿原酸的步骤如下：
（1）预处理：将新鲜无病害开花期向日葵花盘采摘，晒干、清洗后，用烘箱将其烘干，温度为60℃，时间为24h，投入粉碎机进行粉碎，粉碎粒度至70目；
（2）称取80.0g向日葵花盘粉末，加入8倍质量75%乙醇，加入乙醇使绿原酸溶解释放出来，将其放入超声波清洗器中处理1h，超声频率45KHz，超声的目的是加快向日葵花盘粉末中绿原酸的溶解释放，调pH至3，以除去溶液中碱性物质；用普通滤纸过滤，过滤孔径1-7微米，保存滤液。再将滤渣装于滤纸筒内放入索氏提取器中，65℃提取,虹吸5次，之后放置提取液至室温，抽滤得粗提液；
（3）将滤液与粗提液合并置旋转蒸发，旋转蒸发的参数是：温度55℃,100转/min，真空度0.08MPa，除去乙醇，60℃干燥得到乙醇浸膏，加入适量的水溶解（所有浸膏溶解即可），再用乙酸乙酯萃取3次，以除去脂溶性物质；然后旋转蒸发，旋转蒸发的参数是：温度40℃,100转/min，真空度0.08MPa，除去乙酸乙酯，60℃干燥，得到1.76g提取物。
最后应说明的是：以上所述仅为本发明的优选实施例而已，并不用于限制本发明，尽管参照前述实施例对本发明进行了详细的说明，对于本领域的技术人员来说，其依然可以对前述各实施例所记载的技术方案进行修改，或者对其中部分技术特征进行等同替换。凡在本发明的精神和原则之内，所作的任何修改、等同替换、改进等，均应包含在本发明的保护范围之内。

Claims (5)

1.一种从开花期向日葵花盘中提取分离绿原酸的方法，其特征在于：步骤如下：（1）将开花期向日葵花盘进行烘干、粉碎，得到向日葵花盘粉末；
（2）将向日葵花盘粉末加入乙醇中，放入超声波清洗器中处理，超声处理的参数为：超声频率30～45KHz，超声处理时间0.5~1h；超声处理后调pH至3.0~3.5，过滤，得到滤液；将滤渣在65℃进行索氏提取，得粗提液；
（3）将滤液和粗提液合并，进行第一次旋转蒸发，除去乙醇；再用乙酸乙酯萃取，进行第二次旋转蒸发除去乙酸乙酯，干燥，得到含有绿原酸的提取物；其中，第一次旋转蒸发的参数为温度50~55℃,80~100转/min，真空度0.07~0.08MPa；所述第二次旋转蒸发的参数为温度35~40℃,80~100转/min，真空度0.07~0.08MPa。
2.根据权利要求1所述的方法，其特征在于：步骤（2）中超声处理后调pH至3.0。
3.根据权利要求1所述的方法，其特征在于：步骤（2）中所述超声处理时间为0.5h。
4.根据权利要求1所述的方法，其特征在于：所述第一次旋转蒸发的参数为温度50℃,80转/min，真空度0.07MPa。
5.根据权利要求1所述的方法，其特征在于：所述第二次旋转蒸发的参数为温度35℃,80转/min，真空度0.07MPa。
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CN105920067A (zh) * 2016-05-06 2016-09-07 洮南市金塔生物科技有限公司 一种含多糖、黄酮和生物碱的葵花盘提取物及其制备方法
CN106018647B (zh) * 2016-07-11 2017-06-16 吉林益民堂制药有限公司 一种建立葵花盘hplc标准指纹图谱的方法
CN107198708B (zh) * 2017-05-18 2020-10-16 上海中医药大学 一种葵花盘提取物及其制备方法和用途
CN107334674A (zh) * 2017-07-10 2017-11-10 玉溪师范学院 一种向日葵花盘白色棉花垫提取物及其应用
CN107467656A (zh) * 2017-07-21 2017-12-15 张世华 一种从向日葵花盘中提取黄酮的方法
CN109288884B (zh) * 2018-12-17 2021-09-07 广州诗美化妆品有限公司 一种具有舒缓修复作用的向日葵提取物的制备方法与应用

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* Cited by examiner, † Cited by third party
Title
向日葵花盘中有效化学成分分析及抗氧化性能测定;索金玲;《中国优秀硕士学位论文全文数据库 农业科技辑》;20110215(第2期);第D047-171页 *
防治奶牛乳房炎中药的筛选及有效成分的药效学研究;王宏军;《中国优秀博硕士学位论文全文数据库（硕士） 农业科技辑》;20041215(第4期);第D050-493页 *

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